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BACTERIOLOGIETD-1 : 40 min. METABOLISMEDES GLUCIDES.

Application àl’identificationdes bactéries.

Thierry RUMMENS,Lycée Jolimont TOULOUSE

BTS AB1, octobre 2004.

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Culture souche pure, gélose SS, aérobiose, 37°C, 24 h.

Interpréter les résultats.

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Culture souche pure, gélose CLED,

aérobiose à 37°C, en 24 h.

Interpréter les résultats.

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Milieu de KLIGLER

• Comment est-il ensemencé ?

• Quels caractères biochimiques

permet-il d’évaluer ?

• Quel est l’indicateur de pH ?

5

Souche 1 cultivée sur milieu de KLIGLER

Donner la liste des caractères observés.

Justifier les changements de couleurs.

Culture

6

Souche 2 cultivée sur milieux de Hugh Leifson.

• Donner la liste des caractères observés.

• Justifier les changements de couleurs.

Culture

7

Souche 3 cultivée sur : Mannitol Mobilité Nitrate.

Interpréter les résultats.Justifier le changementde coloration du milieu par addition des réactifsNitrites I et II.Conclure / Nitrates.

Culture

8

Mini-Galerie 1 : Entérobactérie.

Kligler indole, urée

Récapituler les caractères biochimiques observés.

Proposer une orientation d’identification.

Kligler indole, urée

Culture

9

Mini-Galerie 2 : Entérobactérie.

Récapituler les caractères biochimiques observés.

Proposer une orientation d’identification.

Urée, Indole, Kligler

Kligler indole, urée

Culture

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Test de l’activité galactosidase

à partir de la souche 2 cultivée sur KLIGLER.

Incubation

30 min.

à 37°C.

ONPG -

ONPG

Comment

la souche 2

utilise-t-elle

le lactose ?

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galactosidase

Lactose

OH

CH2OH

OOH

HO

OH

CH2OH

OOH

OHO

OH

CH2OH

OOH

HO O

NO2

ONPG = Ortho-nitro-phényl-galactoside

Ecrire la réaction catalysée par la galactosidase sur ces deux substrats.

Indiquer les spécificités de réaction et de substrat de l’enzyme.

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Fin du TD1, métabolisme des glucides 1.

Merci.