Bolile monogenicecontinuare

MUCOVISCIDOZA ( din engl.FIBROZA CHISTICA)

Mucoviscidoza Una din cele mai frecvente boli

genetice Afectate sunt cu precadere: Plamanii Pancreasul exocrin

Gena ABCC7 determina sinteza unei forme anormale de proteina CFTR ( = cystic

fibrosis transmembrane conductance regulator), care actioneaza ca un canal de clor la nivelul polului apical al celulelor epitelialeProteina CFTR a fost identificata in celulele din : - plamani, - ficat, -pancreas. - glandele sudoripare , - si tractul genitourinar

Proteina CFTR (wikipedia)

Mucoviscidoza

Cand proteina CFTR este anormal sintetizata datorita unei mutatii, celulele epiteliale nu mai pot regla modul in care clorul strabate membranele celulare

Heterogenitate alelica: exista peste 800 de mutatii ale genei Gena ABCC7 este mare (250 000 pb) avand 27 exoni ce sunt supusi

unei matisari alternative (3 izoforme); ARNm = 6129 pb, din care 4443 pb codifica 1480 aa ai proteinei transmembranare ce regleaza activitatea canalelor de clor Izoforma 2 se asociaza mai frecvent cu absenta congenitala a

vaselor deferente. (http://www.uniprot.org/uniprot/P13569)

Peste 66% dintre bolnavi au mutatia

F508, adica o

deletie de 3pb, ce are drept urmare disparitia a.a. fenilalanina din pozitia 508 a CFTR

MUCOVISCIDOZA Cauzele sunt: mutatii nonsens si mutatii cu sens gresit (engl. missense), deletii si mutatii ce modifica matisarea (splicingul) ARN-ului

Gena este numita tot CFTR

vs

http://nature.ca/genome/03/d/10/03d_11_e.cfm

Manifestarile clinice sunt rezultatul obstructiei canalelor glandelor exocrine cu secretii vascoase, respectiv -infectii pulmonare, -malnutritie, - dureri abdominale, - sinuzite, - constipatie, -infertilitate Speranta medie de viata este de aprox. 30 de ani

HETEROGENITATE ALELICA (POLIALELISM)

Mucoviscidoza Exista o serie de teorii (wiki) care explica mecanismele

moleculare presupuse a fi implicate in aparitia bolii Toate acestea vin in sprijinul observatiei ca majoritatea

modificarilor ce apar in cadrul bolii sunt datorate ingrosarii / cresterii vascozitatii secretiilor. Obstructiile conduc la remodelari si infectii pulmonare

recurente, Tulburarile digestive apar datorita: acumularii enzimelor digestive in pancreas,

malabsorbtiei, obstructiei tranzitului intestinal ( fecale cu consistenta crescuta), etc

DIAGNOSTICUL TABLOUL CLINIC SUGESTIV copilul

nu creste! TESTUL SUDORII confirma dg.(concentratia de sare este mult peste valorile normale)

Conc. Cl < 40 mmol/L

Rezultat e Normal

40-60 mmol/L > 60 mmol/L

La limita Anormal

Pilocarpina stimuleaza secretia sudorala

ANALIZE MOLECULAREA. Relatia dintre gena si un RFLP-lincat , KM.19, de pe cz. 7. + alela KM.19 prezenta , iar alela absencta la nivelul situsului de restrictie B. B. Diagnosticul bolii utilizand RFLP-ul KM.19 in ADN amplificat prin PCR . Dupa PCR, ADN a fost supus digestiei enzimatice cu Pst I si s-a efectuat electroforeza.http://www.glowm.com/?p=glowm.cml/section_view&articleid=344

Analiza ADN cu sonde oligonucleotidice specifice unei alele (ASO)Sonde monocatenare specifice: -ADN normal , fara Mutatia F508 - ADN cu mutatia F508 9 pacienti cu mucoviscidoza; ADN-ul genomic nefractionat imobilizat pe o membrana de nitroceluloza va hibrida cu sonda; heteroduplexul tinta sonda este evidentiat in cele 9 cazuri prin autoradiografie

-htz: 1,7,9 -hz: 2,3,4,5,8

Ce se intampla? Nu uitati: b. autoz.rec