Embed Size (px)
Citation preview
ii
ANALISIS KADAR SENYAWA FLAVONOID DARI EKSTRAK
BUAH DENGEN (Dillenia serrata) MENGGUNAKAN
SPEKTROFOTOMETER UV-VIS
RINI RUSMAN
1603410004
FAKULTAS SAINS
UNIVERSITAS COKROAMINOTO PALOPO
2020
iii
ANALISIS KADAR SENYAWA FLAVONOID DARI EKSTRAK
BUAH DENGEN (Dillenia serrata) MENGGUNAKAN
SPEKTROFOTOMETER UV-VIS
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Sains pada
Program Studi Kimia Fakultas Sains Universitas Cokroaminoto Palopo
RINI RUSMAN
1603410004
PROGRAM STUDI KIMIA
FAKULTAS SAINS
UNIVERSITAS COKROAMINOTO PALOPO
2020
iv
v
vi
iii
ABSTRAK
Rini Rusman.2020.Analisis Kadar Senyawa Flavonoid dari Ekstrak Buah
Dengen (Dillenia serrata) Menggunakan Metode Spektrofotometer UV-Vis
(dibimbing oleh Ilmiati Illing dan Sukarti).
Buah Dengen merupakan salah satu buah endemik dari Sulawesi Selatan
yang banyak ditemukan dihutan atau area pekarangan rumah warga. Buah Dengen
mengandung senyawa flavonoid yang berpotensi sebagai obat. Senyawa flavonoid
diketahui memiliki aktivitas farmakologis seperti antioksidan, antiinflamasi,
antibakteri, antikanker, antidiabetes, antihipertensi, dll. Penelitian ini bertujuan
untuk menentukan kadar senyawa flavonoid dari ekstrak buah Dengen dengan
menggunakan metode spektrofotometer UV-Vis. Metode pada penelitian ini yaitu
dengan menggunakan ekstrak buah segar kemudian uji kadar flavonoid
menggunakan spektrofotometer UV-Vis. Hasil penelitian yang telah dilakukan
diperoleh kadar flavonoid dari ekstrak buah Dengen yaitu sebesar 10,23 mg/mL
atau setara dengan 1,023%.
Kata Kunci : Dillenia serrata, ekstrak, flavonoid, spektrofotometri,
iv
KATA PENGANTAR
Segala puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT. Tiada
daya dan kekuatan dalam menyelesaikan skripsi ini yang berjudul “Analisis Kadar
Senyawa Flavonoid dari Ekstrak Buah Dengen Dillenia serrata) Menggunakan
Metode Spektrofotometer UV-Vis” ini kecuali izin dari yang Maha Kuasa.
Skripsi ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat dalam
menyelesaikan Pendidikan pada Program Studi Kimia Fakultas Sains Universitas
Cokroaminoto Palopo. Segala kesulitan dan hambatan dalam tugas ini dapat
diatasi karena bantuan Ayahanda Rusman dan Ibunda Asra yang telah
memberikan motivasi, mendoakan, dan menyemangati penulis. Penulisan skripsi
ini mempunyai banyak kekurangan, namun segala kekurangan tersebut adalah hal
yang wajar sebagai tahap awal untuk terus menuju kesempurnaan. Maka dari itu,
penulis mengucapkan banyak terima kasih atas bantuan yang diberikan selama
penyusunan proposal ini khususnya kepada :
1. Prof. Drs. Hanafie Mahtika, MS. Selaku Rektor Universitas Cokroaminoto
Palopo.
2. Ibu Pauline Destinugrainy Kasi, S.Si., M.Sc, selaku Dekan Fakultas Sains
Universitas Cokroaminoto Palopo.
3. Ibu Ilmiati Illing S.Si., M.Pd selaku Wakil Dekan Fakultas Sains Universitas
Cokroaminoto Palopo sekaligus Pembimbing I.
4. Bapak Muhammad Nur Alam S.Si., M.Si selaku Ketua Program Studi Kimia
Fakultas Sains Universitas Cokroaminoto Palopo.
5. Ibu Sukarti S.Si., M.Si selaku Sekertaris LPPM Universitas Cokroaminoto
Palopo sekaligus Pembimbing II.
6. Perpustakaan kampus dua Universitas Cokroaminoto Palopo sebagai salah
satu sumber referensi bagi penulis.
7. Rekan-rekan mahasiswa seperjuangan angkatan 2016 Program Studi Kimia
yang telah memberikan bantuan, masukan selama menyelesaikan tugas ini dan
kerjasama yang baik serta memberikan semangat dan motivasi dalam
penyusunan proposal ini.
8. Keluarga penulis (Siti Nur aisa, Marwan, Nurhasanah, dan Miftahul jannah
yang telah membantu dengan doa dan materi.
v
9. Sahabat penulis (Rezki Amalia Syamsuddin, Kadek Yulianti, Risna, Surianti,
dan Gita). Terima kasih atas dukungan, doa, nasihat, hiburan, dan semangat
yang kalian berikan selama ini.
Hanya doa yang penulis panjatkan kepada semua pihak yang telah
memberikan kebaikan, dukungan, dan motivasi. Semoga mendapatkan balasan
dari Allah SWT.Oleh karena itu, penulis senantiasa mengharapkan kritik dan
saran dari semua pihak.Semoga proposal ini dapat memberikan manfaat bagi
pembaca dan perkembangan ilmu pengetahuan.
Palopo, 02 Juli 2020
Rini Rusman
vi
RIWAYAT HIDUP
Rini Rusman, lahir di Jakarta Pada tanggal 25 Mei 1995,
anak kedua dari 7 bersaudara, buah kasih pasangan dari
Ayahanda “Rusman” dan Ibunda “Asra”. Penulis pertama
kali menempuh pendidikan tepat pada umur 5 tahun di
Sekolah Dasar (SD Negeri 62 Lare-lare) pada tahun 2000
dan selesai pada tahun 2006, dan pada tahun yang sama
penulis melanjutkan di SekolahMenengah Pertama di SMP
Negeri 2 Bua Ponrang dan selesai pada tahun 2009, dan pada tahun yang sama
penulis melanjutkan pendidikan di Sekolah Menengah Kejuruan (SMK) di SMK
Negeri 1 Palopo dan mengambiljurusan Administrasi Perkantoran dan selesai
pada tahun 2012. Pada tahun 2016 penulis terdaftar pada salah satu perguruan
tinggi swasta Program Studi Kimia Fakultas Sains Universitas Cokroaminoto
Palopo dan alhamdulillah selesai tahun 2020.
Berkat petunjuk dan pertolongan Allah SWT, usaha dan disertai doa kedua
orang tua dalam menjalani aktivitas akademik di perguruan tinggi Universitas
Cokroaminoto Palopo. Alhamdulillah penulis dapat menyelesaikan tugas akhir
dengan skripsi yang berjudul “Analisis Kadar Senyawa Flavonoid dari Ekstrak
Buah Dengen(Dillenia serrata) dengan menggunakan Metode Spektrofotometer
UV-Vis”.
vii
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ............................................................................................... i
HALAMAN PENGESAHAN ............................................................................... ii
SURAT PERNYATAAN KEASLIAN NASKAH ............................................... iii
HALAMAN KETERANGAN UJI SIMILARITY ............................................... iv
ABSTRAK ............................................................................................................ v
KATA PENGANTAR .......................................................................................... vi
RIWAYAT HIDUP ............................................................................................. viii
DAFTAR ISI ......................................................................................................... ix
DAFTAR TABEL ................................................................................................. xi
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ xii
DAFTAR LAMBANG DAN SINGKATAN ..................................................... xiii
DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................................... xv
BAB I PENDAHULUAN ....................................................................................... 1
1.1 Latar Belakang ...................................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah ................................................................................. 2
1.3 Tujuan Penelitian .................................................................................. 2
1.4 Manfaat Penelitian ................................................................................ 2
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ............................................................................. 3
2.1 Kajian Teori .......................................................................................... 3
2.2 Hasil Penelitian yang Relevan ............................................................ 15
2.3 Kerangka Pikir .................................................................................... 16
BAB III METODE PENELITIAN........................................................................ 17
3.1 Jenis Penelitian .................................................................................... 17
3.2 Lokasi dan Waktu Penelitian ............................................................. 17
3.3 Alat dan Bahan .................................................................................... 17
3.4 Prosedur Kerja ..................................................................................... 17
3.5 Diagram Penelitian .............................................................................. 19
3.7 Analisis Data ....................................................................................... 19
viii
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .............................................................. 21
4.1 Hasil Penelitian ................................................................................... 21
4.2 Pembahasan ......................................................................................... 22
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ................................................................ 26
5.1 Kesimpulan ......................................................................................... 26
5.2 Saran .................................................................................................... 26
DAFTAR PUSTAKA .......................................................................................... 27
LAMPIRAN .......................................................................................................... 33
ix
DAFTAR TABEL
Halaman
1. Jenis Flavonoid Yang Terdapat Pada Tanaman ............................................... 8
2. Hasil pengukuran absorbansi larutan standar kuersetin ................................... 21
x
DAFTAR GAMBAR
Halaman
1. Buah dan Pohon Dengen ..................................................................................... 3
2. Struktur Umum Flavonoid .................................................................................. 5
3. Struktur Jenis-Jenis Flavonoid ............................................................................ 8
4. Bagan Kerangka Pikir ....................................................................................... 16
5. Bagan Diagram Alir Penelitian ......................................................................... 19
6. Hasil Panjang Gelombang Kaksimal Kuersetin ............................................... 21
7. Grafik Perbandingan Konsentrasi Larutan Standar Kuerstin dan Nilai
Serapannya ....................................................................................................... 21
8. Reaksi Pembentukan Kompleks antara AlCl3 dengan Flavonol ....................... 24
9. Reaksi Pembentukan Kompleks antara AlCl3 dengan Flavon .......................... 25
10. Bagan Pembuatan Larutan Kuerstin................................................................ 36
11. Bagan Penentuan Kadar Flavonoid ................................................................. 37
xi
DAFTAR ARTI LAMBANG DAN SINGKATAN
Lambang / Singkatan Arti dan Keterangan
Mg/mL miligram permililiter
Mg/L miligram perliter
g/L gram permililiter
nm nano meter
cm centimeter
cm-1
centimeter pangakt min satu
g gram
A Absorbansi
mg milligram
mL mililiter
µg mikrogram
µM Mikromol
°C Derajat Celsius
β beta
% perseratus
kg Kilogram
DNA Deoxyribonucleid acid
ACE Enzim konversi angiotenzin
COX Siklooksigenase
PGE Enzim prostaglandin
MAPK Mitogen activated protein
kinase
PGE Prostaglandin
GLUT Transporter glukosa
ROS Reaction oxygen species
BLT Brine shrimp lethality
TGF Gen transforman faktor
LPS Lipopolysaccharide
EGCG Epigallocatechin gallate
IC Konsentrasi penghambatan
LC Konsentrasi kematian
KLT Kromatografi lapis tipis
UV-Vis ulta violet visible
FTIR Fourier Transform Infrared
IR Infrared
R2
Koefisien korelasi
Ppm Part permillion
λmaks Panjang Gelombang
maksimal
QE Kesetaraan kuersetin
AlCl3 Aluminium Clorit
NaOH Natrium hidroksida
NaNO2 Natrium nitrit
C-O Karbon mengikat oksigen
xii
C=O Karbonil
C=C Gugus romatik
C-H Karbon mengikat hidrogen
C-O-C Eter
OH Hidroksil
xiii
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
1. Dokumentasi Penelitian .................................................................................... 33
2. Analisis Kadar Flavanoid ................................................................................. 36
3. Perhitungan Pengenceran Larutan Standar dan Kadar Flavonoid .................... 38
1
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Masyarakat dari berbagai negara cenderung membiasakan hidup dengan
cara mengkonsumsi obat-obatan tradisional dari bahan herbal dibandingkan obat
kimia dengan bahan sintesis yang memiliki efek samping untuk penggunaannya.
Beberapa penelitian bahkan telah menemukan dan mengembangkan khasiat dari
berbagai jenis tanaman herbal yang sangat bermanfaat dalam menyembuhkan
segala jenis penyakit.
Salah satu dari sekian banyak tanaman yang dapat digunakan sebagai obat
tradisional adalah buah Dengen. Buah Dengen merupakan salah satu family
Dilleniaceae yang banyak ditemukan di hutan maupun area pekarangan rumah
warga. Buah khas dari Sulawesi Selatan ini memiliki bentuk dan warna yang
menarik, selain itu sebagian masyarakat juga mulai mengembangkan Buah
Dengen dalam bentuk olahan makanan seperti dodol, permen, bahkan jus buah.
Beberapa spesies family Dilleniaceae telah dinyatakan memiliki aktivitas
farmakologis seperti antiinflamasi, antioksidan, antimikroba, antitumor, antitukak,
imunoprevensi, dan kanker kemoprevensi (Lima dkk, 2014). Bahkan Sabandar
dkk (2020) telah menemukan senyawa antioksidan alami yang terdapat dalam
kulit akar dan batang Dengen yang mampu menghambat xantin oksidase. Namun,
sedikitnya penelitian tentang kandungan dalam buah Dengen mengakibatkan
masyarakat kurang memanfaatkan tanaman ini.
Penelitian sebelumnya telah dilakukan oleh Illing dkk (2017) dan
menemukan senyawa kimia yang terkandung dalam buah Dengen adalah
flavanoid, polifenol, terpenoid, alkaloid, saponin dan senyawa kimia lainnya
seperti asam sitrat, betakaroten, serta mengandung 68,3% vitamin C (Irnawati
dkk, 2017; dan Illing dkk, 2019).
Flavonoid merupakan salah satu senyawa kimia yang sangat berpotensi
besar dalam pengobatan tradisional. Flavonoid dapat ditemukan dari berbagai
jenis tanaman dan tersedia dalam berbagai jenis konsentrasi (Alwi, 2017).
Sejumlah penelitian telah melaporkan bahwa senyawa flavonoid memiliki
2
aktivitas biologis seperti antioksidan, antiradang, antibakteri, antialergi,
antikanker, dan antivirus (Neldawati dkk, 2013).
Penentuan kadar senyawa flavonoid dalam ekstrak buah Dengen dapat
diukur dengan menggunakan metode Spektrofotometer UV-Vis yaitu dengan
mengukur nilai absorbansi dari sampel (Mukhriani dkk, 2015). Analisa kuantitatif
dari Spektrofotometri ini dilakukan berdasarkan Hukum Lambert-Beer yaitu
jumlah radiasi cahaya yang diserap atau ditransmisikan merupakan konsentrasi zat
dari larutan (Neldawati dkk, 2013). Maka dari itu perlu penelitian lebih lanjut
dalam menentukan kadar flavonoid dari ekstrak buah Dengen (Dillenia serrata)
dengan menggunakan metode Spektrofotometer UV-Vis.
1.2 Rumusan Masalah
Berapakah kadar senyawa flavonoid dari ekstrak Buah Dengen (Dillenia
serrata) dengan menggunakan metode spektrofotometer UV-Vis?
1.3 Tujuan Penelitian
Mengetahui kadar senyawa flavonoid dari ekstrak Buah Dengen (Dillenia
serrata) dengan menggunakan metode spektrofotometer UV-Vis.
1.4 Manfaat Penelitian
1. Sebagai sumber informasi kepada masyarakat sehingga dapat menjadi acuan
untuk pengembangan penelitian senyawa flavonoid pada tanaman lainnya.
2. Sebagai sumber rujukan untuk peneliti selanjutnya dalam mengembangkan
penelitian dari tanaman Dengen.
3
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Kajian Teori
1. Tinjauan Umun Buah Dengen (Dillenia serrata)
Dengen (Dillenia serrata) tergolong suku Dilleniaceae yang merupakan
tumbuhan yang tersebar luas dikawasan Asia termasuk Indonesia. Tumbuhan ini
banyak ditemukan di kawasan Indonesia termasuk Sulawesi Selatan. Tanaman
Dengen ditemukan tumbuh pada daerah dengan ketinggian 80-140 meter di atas
permukaan laut. Kekhasan yang dimiliki oleh Buah Dengen ini terutama adalah
rasa masam yang menyegarkan dan warna buah yang menarik. Tumbuhan dengen
mengandung senyawa asam sitrat, vitamin C, dan betakaroten pada buah. Bagian
tumbuhan lainnya seperti daun dan batang mengandung senyawa polifenol seperti
tanin dan flavanoid. Secara empiris tumbuhan ini dimanfaatkan sebagai obat
sariawan, muntah darah, deman, dan obat luka (Irnawati dkk, 2017).
Klasifikasi Tanaman Dengen (Dillenia serrata) adalah sebagai berikut:
Kingdom : Plantae
Sub Kingdom : Viridiplantae
Infra Kingdom : Streptophyta
Super Divisi : Embryophyta
Divisi : Tracheophyta
Sub Divisi : Spermathophytina
Kelas Super : Magnoliopsida
Ordo : Dillenianae
Family : Dilleniaceae
Genus : Dillenia L. Gambar 1. Buah dan Pohon Dengen
Species : Dillenia indica L.
(Anonim, 2019).
Pohon dengen berukuran sedang, tingginya hingga 30, DBH hingga 70
cm. kulit batang abu-abu kemerah-merahan. Daun berukuran 20-45 cm X 8-19 cm
dengan ujung membulat hingga meruncing, dasar meruncing, pinggir rata, tangkai
daun 2,5-6,5 cm panjangnya bersayap, pertulangan jelas, permukaan daun
berdaging. Bunga racemus 2-6 pembungaan, stamen banyak. Bunga indehicent,
4
kekuningan, 3,5 cm panjang, berdiameter 6 cm termasuk kelopak bunga. Karpel
25 X 16 mm dengan jumlah biji 5 (Pitopang dkk, 2014).
2. Beberapa Penelitian Family Dilleniaceae
Family Dilleniaceae terdiri dari 10-14 genera dan sekitar 500 spesies
didistribusikan ke beberapa subfamili. Beberapa spesies memainkan peranan
penting dalam pengobatan tradisional dan telah digunakan untuk pengobatan
sejumlah penyakit seperti radang sendi, infeksi, diabetes, disentri, hepatitis,
blennorrhagia, dan untuk mengobati gangguan gastrointestinal, peradangan, wasir,
luka, dan borok. Studi farmakologis menegaskan bahwa ekstrak dari beberapa
spesies ini yang telah diisolasi memiliki kegiatan biologis termasuk antiinflamasi,
antioksidan, antimikroba, antitumor, antitukak, imunoprevensi, dan kanker
kemoprevensi (Lima dkk, 2014). Apel gajah (Dillenia indica) merupakan salah
satu family Dilleniaceae yang memiliki aktivitas antibakteri, antimutagenik,
antioksidan, dan dapat mencegah beberapa penyakit seperti kanker, diabetes, dan
penyakit kardiovaskular (Nayak dkk, 2016). Rashid dkk (2009) melaporkan
senyawa yang terdapat dari batang Indica linn yang telah diiolasi yaitu lupeol,
betulinaldehyde, betulinic acid, dan stigmasterol menunjukkan aktivitas mikroba
lemah terhadap berbagai bakteri dan jamur gram positif dan gram negatif. Isolasi
dari daun Indica linn menghasilkan senyawa total yaitu 3,5,7-trihidroksi-3’-4’-
dimethoxy flavone, dillenetin, asam betulinic, dan β-sitosterol (Muhit dkk, 2010).
Aktivitas antiinflamasi dari ekstrak metanol daun Dillenia indica yang telah
diamati memberikan bukti dalam penggunannya. Ekstrak metanol daun Indica
linn menunjukkan aktivitas antiinflamasi yang signifikan dalam uji edema kaki
dan permeabilitas kapiler yang diinduksi asam asetat (Yeshwante dkk, 2009).
Selain itu penelitian lain juga telah menemukan aktivitas dari kulit akar dan
batang Dillenia serrata yang dapat menghambat 64% hingga 73% terhadap
produksi prostaglandin E2 (PGE2) yang diinduksi lipopolysaccharide (LPS)
produksi (Jalil dkk, 2015). Penelitian dari Sabandar dkk (2020) juga menemukan
ekstrak dari batang Dillenia serratayang berpotensi sebagai sumber alami agen
antioksidan dan penghambat xantin oksidase.
5
3. Flavanoid
Flavonoid adalah senyawa golongan fenol alam yang terdapat hampir
disemua jenis tanaman. Flavonoid merupakan senyawa metabolit sekunder yang
telah dilaporkan memiliki banyak khasiat sebagai obat tradisional. Flavonoid
dalam tanaman ditemukan dalam berbagai jenis campuran dengan senyawa
lainnya, dan jarang sekali ditemukan dalam bentuk tunggal pada jaringan tanaman
(Djamil dkk, 2015).
Flavonoid merupakan turunan dari 2- fenilbenzopiren yang mengandung 3
cincin (A,B,C). Struktur dasar ini merupakan 2 cincin benzena (A dan B) yang
dihubungkan dengan cincin heterosiklik piran di tengah (C) (gambar 2).
(Simanjuntak, 2013). Berbagai jenis flavonoid yang ditemukan pada tanaman
hampir memiliki sejumlah gugus hidroksil (-OH) yang terikat pada strukturnya,
khususnya pada cincin benzena A dan B. Gugus hidroksil (-OH) biasanya
ditemukan pada cincin A pada posisi 5 dan 7, dan cincin B pada posisi 3’ dan 4’
serta gugus keton yang terdapat pada cincin heterosiklik C (gambar 3) (Panche
dkk, 2016). Gugus hidroksil yang menempel pada struktur flavonoid ini
merupakan gula yang dapat meningkatkan kelarutan flavonoid dalam air dan
sebagian besar disimpan dalam vakuola tengah walaupun disintesis diluar vakuola
(Pambudi dkk, 2014).
Gambar 2. Struktur umum flavonoid (Pambudi dkk, 2014)
1. Jenis-jenis flavonoid
Flavonoid dibagi menjadi berbagai macam jenis kelompok seperti flavon,
flavonol, flavanon, antosianin, kalkon, isoflavon dan lainnya (Panche dkk, 2016).
Perbedaanjenis flavonoid ini dapat dilihat dari tingkat oksidasinya pada cincin
piran C, sementara senyawa dari masing-masing kelas tertentu dapat dibedakan
6
dari subtitusi gugus hidroksil yang terikat pada struktur cincin benzena A dan B
(Widiasari 2018).
a. Flavon
Flavon adalah salah satu jenis flavonoid yang memiliki ikatan rangkap
antara posisi 2 dan 3 dan gugus keton pada posisi 4 yang terikat cincin piran C,
selain itu flavon juga memiliki gugus hidroksil yang terikat pada posisi 5 dan 7
pada cincin benzena A, dan 3’ dan 4’ pada cincin benzena B. Flavon biasanya
ditemukan dalam bentuk glukosida pada jaringan tanaman seperti daun, bunga dan
buah-buahan. Beberapa penelitian telah menemukan senyawa flavonoid golongan
flavon ini terdapat pada seledri, peterseli, paprika merah, chamomile, mint, dan
ginkgo biloba (Panche dkk, 2016). Beberapa jenis kelompok flavon yaitu
apigenin, chysin, tangeritin, dan luteolin (Birt dkk, 2001; dan Panche dkk, 2016).
b. Flavonol
Perbedaan dari flavon dan flavonol yaitu terletak pada cincin piran C yang
memiliki gugus hidroksil yang terikat pada strukturnya. Flavonol biasanya
ditemukan pada sayur-sayuran dan buah-buahan seperti bawang, kangkung,
selada, tomat, apel, anggur, dan beri (Panche dkk, 2016). Beberapa jenis
kelompok flavonol adalah kaempferol, mirisetin, fisetin, dan kuersetin (Birt dkk
2001; dan Panche dkk, 2016).
c. Flavanon
Flavanon adalah jenis flavonoid yang memiliki ikatan jenuh pada cincin
piran C. Perbedaan jenis flavonoid ini daripada jenis flavonoid lainnya adalah
tidak adanya ikatan rangkap yang terdapat antara posisi 2 dan 3. Beberapa
penelitian telah melaporkan senyawa flavanon banyak ditemukan pada buah-
buahan seperti jeruk, lemon dan anggur (Panche dkk, 2016). Berbagai jenis
kelompok senyawa ini antara lain hesperitin, naringenin, dan eriodictyol (birt dkk,
2001).
d. Isoflavon
Isoflavon merupakan salah satu jenis flavonoid yang memiliki banyak
khasiat dalam melawan berbagai macam jenis penyakit. Isoflavon hampir jarang
ditemukan dalam bagian tanaman dan biasanya hanya terdapat dalam berbagai
kacang-kacangan seperti kedelai. Isoflavon juga dilaporkan terdapat pada mikroba
7
(Panche dkk, 2016). Beberapa jenis kelompok isoflavon yaitu daidzein, genistein,
glycitein, dan formononetin (Birt dkk, 2001).
e. Antosianin
Antosianin merupakan jenis flavonoid yang berfungsi atas pigmen warna
pada tanaman, bunga, dan buah-buahan. Pigmen warna yang dihasilkan ini
bergantung pada metilasi gugus hidroksil pada cincin A dan B yang terikat pada
strukturnya. Beberapa sumber antosianin biasanya ditemukan dalam buah seperti
anggur merah, anggur merlot, blueberry, blackberry, cranberry, dan raspberry.
Berbagai jenis antiosianin diantaranya adalah cyanidin, delphinidin, malvidin,
pelargonidin, dan peonidin (Panche dkk, 2016).
f. Kalkon
Kalkon merupakan salah satu jenis flavonoid yang mempunyai ciri khas
yang sangat berbeda dari jenis flavonoid lainnya. Kalkon juga disebut sebagai
flavonoid rantai terbuka karena tidak memiliki cincin piran C yang
menghubungkan antara struktur A dan B. Berbagai sumber kalkon biasanya
terdapat pada buah seperti tomat, pir, stroberi, bearberry, dan produk olahan
gandum lainnya. Beberapa jenis kalkon yaitu phloridzin, arbutin, phloretin, dan
kalkonarengin (Panche dkk, 2016).
Gambar 3. Struktur jenis-jenis flavonoid (Panche dkk, 2016).
8
2. Jenis-jenis flavonoid yang ditemukan pada tanaman
Beberapa jenis flavonoid yang telah ditemukan dari berbagai jenis tanaman
dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel.1 Jenis flavonoid yang terdapat pada tanaman
No Nama tanaman Jenis flavonoid Sumber
1. Daun jambu biji
putih
Flavon Maulana dkk, 2016
2. Buah belimbing
manis
Katekin Sukadana, 2010
3. Kacang kedelai Isoflavon Asih, 2009
4. Daun jambu biji Flavon, flavonol 3-OH
tersubtitusi, flavonol 3-
OH bebas, dan kalkon
Aziz dan Djamil,
2013
5. Buah naga Flavanon Nuari dkk, 2017;
6. Daun beluntas Flavonol Koirewoa dkk, 2015
7. Biji mahoni Isoflavon Dalimartha, 2006
8. Daun sembukan Flavanon Ekawati dkk, 2017
9. Daun binahong 3, 5, 3’, 4’-
tetrahidroksiflavonol
Rahmawati dkk,
2012
10. Daun murbei Flavonol Djamil dan
Bakriyyah, 2015
11. Kulit bawang merah Flavonol Rahayu dkk, 2015
12. Daun gedi merah Flavanon dan flavanonol South dkk, 2013
13.
Daun kembang bulan
Flavonol (5,7,8, 3’, 4’-
pentahidroksiflavonol)
Zirconia dkk, 2015
14.
Daun dewandaru Flavonol Sjahid, 2008
15. Daun lamun Kalkon Rompas dkk, 2012
16. Daun nangka Dihidriflavonol, flavon Darmawati dkk,
2015
3. Manfaat Senyawa Flavonoid dalam Aktivitas Farmakologi
1. Antihipertensi
Beberapa penelitian telah menemukan senyawa flavonoid dari kuersetin
yang memiliki efek kardiovaskuler khususnya efek hipertensi. Jenis flavonoid dari
kelompok flavonol ini telah banyak diteliti dan menghasilkan kemampuan dalam
mengurangi stres oksidatif, yaitu dengan menghambat aktivitas angiotensin
9
converting enzim atau ACE. Kuersetin sebagai antihipertensi mampu
meningkatkan relaksasi endotel pembuluh darah, mengatur signaling sel dan
ekspresi gen (Widiasari, 2018). Menurut Nadila (2014) senyawa flavonoid yang
terdapat pada labu siam mampu menghambat pembentukan ACE. Selain itu,
Saputra dan Fitri (2016) juga menemukan bahwa senyawa apigenin yang terdapat
dalam daun seledri berfungsi sebagai beta blocker yang mampu memperlambat
detak jantung dan menurunkan kekuatan kontraksi jantung sehingga aliran darah
yang terpompa lebih sedikit dan tekanan darah yang menjadi normal.
2. Anti inflamasi
Mekanisme terjadinya inflamasi adalah bila membran sel mengalami
kerusakan baik rangsangan kimiawi, fisik, atau mekanis maka enzim fosfolipida
yang terdapat didalamnya menjadi asam arakhidonat kemudian sebagian diubah
oleh enzim siklooksigenase (COX 1) menjadi asam endoperoksida dan seterusnya
prostaglandin. Bagian arakidonat diubah oleh enzim siklooksigenase menjadi
leukotrin yang bertanggung jawab sebagai inflamasi (Dewi, 2018). Anggraini
(2008) dalam penelitiannya menemukan bahwa senyawa flavonoid yang terdapat
dalam ekstrak etanol daun jambu biji mampu menghambat aktivitas enzim
siklooksigenase dan lipooksigenase. Dwintanandi dkk (2016) juga menemukan
senyawa katekin yang merupakan golongan flavonoid yang dapat menghambat
pengeluaran prostaglandin pada jalur asam arakidonat yang merupakan mediator
peradangan penting.
3. Antibakteri
Berbagai jenis senyawa flavonoid yang telah diisolasi dari tanaman
dilaporkan memiliki aktivitas biologis sebagai antibakteri. Beberapa jenis
flavonoid seperti flavon, flavonol, isoflavon, flavanon, dan kalkon yang telah
ditemukan mampu menghambat aktivitas antibakteri. Mekanisme kerja flavonoid
sebagai antibakteri biasanya terjadi karena berhubungan dengan kemampuannya
untuk mengaktivasi adhesin, enzim, transpor protein dari mikroba. Selain itu
flavonoid juga bekerja dengan cara mengganggu membran sel pada mikroba
(Widiasari, 2018).
Salah satu dari sekian banyak tanaman yang ditemukan sebagai antibakteri
adalah daun belimbing wuluh. Senyawa flavonoid yang terdapat dalam ekstrak
10
daun belimbing wuluh ini memiliki kemampuan untuk membentuk kompleks
dengan protein bakteri melalui ikatan hidrogen. Keadaan ini menyebabkan
struktur dinding sel dan membran sitoplasma bakteri mengandung protein menjadi
tidak stabil sehingga sel bakteri menjadi kehilangan aktivitas biologisnya. Selain
itu, fungsi permeabilitas sel bakteri akan terganggu dan sel bakteri akan
mengalami lisis yang berakibat pada kematian sel bakteri (Saputra dan Anggraini,
2016).
4. Antidiabetes
Flavonoid adalah senyawa antioksidan yang memiliki efek hipoglikemi
pada penderita diabetes milletus. Salah satu jenis flavonoid yaitu kuersetin mampu
menghambat GLUT 2 mukosa usus sehingga dapat menurunkan absorbsi glukosa.
Hal ini menyebabkan pengurangan penyerapan glukosa dan fruktosa dari usus
sehingga kadar glukosa darah turun. GLUT 2 merupakan transporter mayor
glukosa diusus pada kondisi normal. Ketika Kuersetin tertelan dengan glukosa,
hiperglikemia secara signifikan menurun. Hal ini menunjukkan bahwa Kuersetin
dapat menghambat penyerapan glukosa melalui GLUT 2 (Kurniawati dan
Sianturi, 2016).
5. Antikanker
Flavonoid merupakan senyawa polifenol yang dikenal memiliki aktivitas
sebagai antikanker. Mekanisme kerja dari flavonoid dalam menginduksi program
kematian sel (apoptosis) sudah banyak diteliti. Sebagai contoh Epigallocatechin
gallate (EGCG) yang merupakan salah satu senyawa flavonoid yang terdapat
dalam teh berikatan dengan reseptor Fas (CD-95 atau APO-1) sehingga dapat
menginduksi apoptosis melalui jalur ekstrinsik. Flavonoid lain misalnya
resveratrol mampu menginduksi p38 mitogen activated protein kinase (MAPK)
dan memediasi aktivasi p53 yang berakibat terhambatnya siklus sel dan
mengawali jalur apoptosis. Penelitian lain menyebutkan bahwa efek stimulasi
apoptosis dari resveratrol juga diperlihatkan melalui sebuah jalur mitokondria
baru yang dikontrol oleh Bcl-2.
Srisadono (2008) telah menemukan ekstrak etanol dari daun sirih yang
mampu menghambat aktivitas antikanker dan telah diuji berdasarkan metode
Brine Shrimp Lethality Test (BLT). Penelitian dari Atun (2009) juga menemukan
11
bahwa salah satu komponen isoflavon yaitu genestein yang terdapat pada kacang
kedelai dan tempe juga berpotensi sebagai antitumor/antikanker. Hal ini juga
diterangkan oleh Peterson, dkk (1997) dalam Atun (2009) melalui mekanismenya
sebagai berikut :
1. Penghambatan pembelahan/proliferasi sel (baik sel normal, sel yang terinduksi
oleh faktor petumbuhan sitokinin, maupun sel kanker payudara yang terinduksi
dengan nonil-fenol atau bi-fenol A) yang diakibatkan oleh penghambatan
pembentukan membran sel, khususnya penghambatan pembentukan protein
yang mengandung tirosin.
2. Penghambatan aktivitas enzim DNA isomerase II
3. Penghambatan regulasi siklus sel.
4. Sifat antioksidan dan anti-angiogenik yang disebabkan oleh sifat reaktif
terhadap senyawa radikal bebas
5. Sifat mutagenik pada gen edoglin (gen transforman faktor pertumbuhan betha
atau TGFβ). Mekanisme ini dapat berlangsung apabila konsentrasi genestein
lebih besar dari 5μM.
6. Antioksidan
Mekanisme kerja flavonoid sebagai antioksidan adalah dengan cara
mensupresi pembentukan ROS baik dengan inhibisi enzim-enzim atau dengan
mengikat trace element yang terkait dengan pembentukan radikal bebas,
mendeteksi ROS, dan meningkatkan regulasi atau proteksi pertahanan
antioksidan(Widiasari, 2018).
Beberapa jenis flavonoid yang bermanfaat sebagai antioksidan adalah
kuersetin, kaempferol, myricetin, apigenin, luteolin, vixetin dan isovixetin yang
biasanya terdapat pada sereal, sayur-sayuran, dan buah-buahan. Kuersetin
memiliki aktivitas kuat sebagai antioksidan karena sifatnya sebagai pendonor
hidrogen terhadap senyawa yang bersifat radikal. Sifat antioksidan dari senyawa
kuersetin dengan menghibisi proses karsinogenesis. Senyawa karsinogen mampu
mengoksidasi DNA sehingga terjadi mutase. Quercetin sebagai antioksidan dapat
mencegah terjadinya oksidasi pada fase inisiasi maupun propagasi (Winarsi,
2007).
12
4. Identifikasi Senyawa Flavonoid
Berdasarkan penelitian Suteja dkk (2016), hasil identifikasi senyawa isolat
ektstrak daun trembesi dengan spekrtofotometer inframerah menunjukkan adanya
serapan yang melebar dan intensitasnya lemah yaitu pada daerah bilangan
gelombang 3286,7 cm-1
yang menunjukkan adanya gugus OH terikat pada gugus
alifatik dan aromatik yang disebabkan adanya vibrasi ikatan hidrogen
intramolekul. Hasil spektrum yang muncul pada bilangan gelombang 2949,16 cm-
1 dengan bentuk pita serapan melebar dan intensitasnya sedang menunjukkan
adanya gugus CH alofatik. Serapan yang lebar juga terdapat pada daerah bilangan
gelombang 1662,64 cm-1
dengan intensitas sedang yang menunjukkan bahwa
terdapat gugus C=O keton. Adanya serapan melebar dan intensitas ssedang pada
bilangan gelombang 1563,67 cm-1
yang menunjukkan serapan dari C=C aromatik.
Pita serapan pada bilangan gelombang 1448,54 cm-1
dengan bentuk pita melebar
dan intensitas sedang menunjukkan serapan C-OH. Serapan dengan bentuk pita
tajam dan intensitas kuat pada bilangan gelombang 1012,63 cm-1
dan 1031,92 cm-
1 menunjukkan adanya gugus C-O-C eter. Bentuk pita yang melebar dan
intensitasnya lemah pada bilangan gelombang 779,24 cm-1
menunjukkan adanya
tekukan ke luar bidang ikatan CH aromatik. Dari hasil analisis spektrum
inframerah diduga bahwa senyawa yang terkandung dalam ekstrak daun trembesi
mengandung senyawa flavonoid karena terdeteksi gugus-gugus fungsi yang
identik dengan senyawa flavonoid yaitu OH, C-OH, CH alifatik, C=O keton, dan
C=C aromatik, C-O-C eter, dan CH aromatik. Selain itu untuk memastikan jenis
flavonoid yang terkandung dalam ekstrak daun trembesi maka perlu diidentifikasi
menggunakan spektrofotometer UV-Vis. Berdasarkan hasil yang diperoleh
menunjukkan bahwa pada isolat dihasilkan serapan pada rentang panjang
gelombang 310-330 nm yaitu pada panjang gelombang 329,70 pada pita I dan
rentang serapan 245-275 nm yaitu pada panjang gelombang 266,20 pada pita II.
Dari bentuk spektrum yang dihasilkan dari isolat daun tersebut diduga
menunjukkan rentang serapan senyawa golongan isoflavon (Markham, 1988
dalam Suteja dkk, 2016).
Penelitian yang dilakukan oleh Maulana dkk (2016) yang menunjukkan
adanya senyawa flavonoid yang terdapat pada ekstrak etanol daun jambu biji putih
13
ditandai dengan adanya panjang gelombang pada daerah 3367,20 cm-1 yang
menunjukkan adanya vibrasi ulur gugus OH terikat dan diperkuat dengan adanya
panjang gelombang pada daerah 1252,78 cm-1 dan 1161,55 cm-1, dan 1115,86
cm-1 yang menunjukkan adanya uluran gugus C-O alkohol. Gugus C-H aromatik
juga terdapat pada panjang gelombang pada daerah 3074,53 cm-1 yang diperkuat
dengan adanya ikatan bending pada panjang gelombang 876,60 cm-1, dan 758,76
cm-1. Adanya vibrasi ulur C-H alifatik dapat dilihat pada panjang gelombang
2900,94 cm-1, dan 2821,29 yang diperkuat dengan adanya nilai serapan pada
panjang gelombang 1347, 39 cm-1. Selain itu juga terdapat ikatan C=C aromatik
yang ditunjukkan dengan adanya panjang gelombang pada daerah 1476, 35 cm-1,
dan 1575, 98 cm-1, dan adanya serapan C=O yang muncul pada panjang
gelombang 1755, 22 cm-1. selain itu identifikasi senyawa flavonoid juga dapat
diidentifikasi menggunakan spektrofotometer UV-Vis yang ditandai dengan
munculnya spektrum pada panjang gelombang 347, 30 nm pada pita I yang
merupakan ikatan C=C terkonjugasi dan panjang gelombang 278,50 nm pada pita
II yang merupakan C=O terkonjugasi (Sastrohamidjojo, 1991).
Penelitian Sukadana (2010) menunjukkan hasil spektrum inframerah isolat
ekstrak kulit awar-awar kemungkinan mengandung beberapa gugus fungsi seperti
–OH yang menunjukkan serapan pada daerah bilangan gelombang 3409 cm-1
yang
dudukung juga oleh munculnya sserapan pada daerah bilangan gelombang 1361
cm-1
untuk ikatan C-O alkohol. Gugus C-H aromatik dengan serapan tajam yang
muncul pada daerah bilangan gelombang 3083,7 cm-1
dan diperkuat dengan
munculnya serapan tajam pada daerah bilangan gelombang 821,6 cm-1
. Adanya
cincin aromatik juga ditunjukkan adanya serapan C=C aromatik pada daerah
bilangan gelombang 1600,8, 1515,9, dan 1423,4 cm-1
. Selain ikatan C-H aromatik
kemungkinan dalam isolat juga mengandung C-H alifatik yang ditandai dengan
munculnya serapan pada daerah bilangan gelombang 2931,6 cm-1
dan 2858,3 cm-
1. Adanya gugus karbonil (C=O) sebagai ciri umum senyawa golongan flavonoid
ditunjukkan dengan serapan tajam pada daerah bilangan gelombang 1712,7 cm-1
.
Sedangkan analisis menggunakan spektrofotometer UV-Vis isolat memberikan 2
pita serapan yang karakteristik untuk senyawa flavonoid kemungkinan golongan
flavanon yaitu berada pada daerah panjang gelombang 281,5 nm pada pita II dan
14
328,6 nm pada pita I. Menurut Neldawati (2013) senyawa flavonoid golongan
flavanon dan dihidroflavonol mempunyai serapan pada pita II dengan panjang
gelombang 275-295 nm dan serapan pita I pada panjang gelombang 300-330 nm.
Penelitian Sukadana (2009) menunjukkan hasil spektrum inframerah bahwa
isolat buah belimbing manis kemungkinan mengandung beberapa gugus fungsi –
OH pada bilangan gelombang 3434,0 cm-1
yang didukung juga oleh munculnya
serapan pada daerah bilangan gelombang 1102,0 cm-1
untuk ikatan C-O alkohol.
Gugus C-H aromatik muncul pada daerah bilangan gelombang 3060,1 cm-1
.
Ikatan C-H alifatik muncul pada 2924,6 cm-1
dan diperkuat dengan munculnya
serapan bending pada daerah bilangan gelombang 1385,4 cm-1
. Gugus dari ikatan
C=C aromatik ditunjukkan dengan munculnya serapan pada daerah bilangan
gelombang 1636,0 cm-1
. Hasil analisis spektrofotometer UV-Vis dari isolat buah
belimbing manis diperoleh 2 pita yaitu pada panjang gelombang 278,9 nm pada
pita I dan 208,3 pada pita II. Menurut Tempesta dan Michael (2007) dalam
Sukadana (2009) senyawa golongan katekin mempunyai serapan maksimum pada
pita I yaitu pada panjang gelombang 275-280 nm dan pada pita II pada panjang
gelombang 202-204 nm.
2.2 Penelitian yang Relevan
Buah Dengen merupakan salah satu family Dilleniaceae yang banyak
ditemukan dihutan maupun area pekarangan rumah warga. Buah Dengen
mengandung senyawa flavonoid yang bermanfaat bagi kesehatan tubuh. Telah
dilaporkan bahwa buah Dengen mengandung senyawa kimia seperti flavanoid,
polifenol, terpenoid, alkaloid dan saponin (Illing dkk, 2017).
Kadar senyawa flavonoid yang berpotensi sebagai obat dapat dilakukan
dengan melakukan analisis kuantitatif dengan menggunakan metode
spektrofotometer UV-Vis untuk melihat nilai absorbansinya. Berdasarkan
penelitian sebelumnya juga pernah dilakukan oleh Hasanah dkk (2019) yaitu
menetukan kadar flavonoid yang terdapat pada daun bilajang bulu dengan
menggunakan metode Spektofotometer UV-Vis dan menghasilkan kadar
flavonoid sebesar 163,4 mg/L atau setara dengan 0,01634%.
15
2.3 Kerangka Pikir
Masyarakat diberbagai negara mulai membiasakan hidup dengan
mengkonsumsi obat-obatan tradisional dari bahan alami dibandingkan obat kimia
yang berbahan sintesis yang memiliki efek samping bagi penggunaannya.
Penelitian terdahulu bahkan telah menemukan khasiat dari berbagai jenis tanaman
yang dapat menyembuhkan berbagai macam jenis penyakit.
Salah satu dari sekian banyak tanaman yang berkhasiat dalam
menyembuhkan berbagai jenis penyakit adalah buah Dengen. Buah Dengen telah
dilaporkan mengandung senyawa kimia seperti flavonoid, polifenol, terpenoid,
alkaloid, dan saponin. Salah satu dari senyawa tersebut yang berpotensi sebagai
obat adalah senyawa flavonoid.
Penentuan kadar senyawa flavonoid dapat dilakukan dengan analisis
kuantitatif yaitu dengan menggunakan metode Spektrofotometer UV-Vis dengan
cara mengukur nilai absorbansinya. Metode Spektrofotometer UV-Vis merupakan
metode yang cepat dan sederhana dan sering digunakan untuk menentukan kadar
flavonoid.
Gambar 3. Bagan Kerangka Pikir
Penentuan Kadar Flavonoid
Obat tradisional
Senyawa Flavonoid
Spektrofotometer UV-Vis
Buah Dengen
Masyarakat
16
BAB III
METODE PENELITIAN
3.1 Jenis Penelitian
Penelitian ini termasuk jenis penelitian kuantitatif yaitu mengukur kadar
flavonoid ekstrak buah Dengen menggunakan metode Spektrofotometer Uv-Vis.
3.2 Lokasi dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Bahan Alam, Fakultas Sains,
Universitas Cokroaminoto Palopo pada Bulan April 2020.
3.3 Alat dan Bahan
Bahan-bahan yang digunakan adalah air suling, aluminium foil, etanol
96%, aquades, kuersetin, kertas saring, NaNO2 5%, AlCl3 10%, NaOH 4%, dan
buah Dengen.
Alat-alat yang digunakan adalah gelas kimia, gelas ukur, labu ukur, tabung
reaksi, pipet tetes, batang pengaduk, corong kaca, blender, kuvet, Erlenmeyer,
timbangan analitik, dan Spektrofotometer UV-Vis.
3.4 Prosedur Kerja
1. Preparasi Sampel
Buah Dengen diperoleh dari Desa Lare-Lare, Kecamatan Bua, Kabupaten
Luwu. Buah Dengen yang digunakan adalah buah yang masih segar dan sudah
matang. Buah yang telah diambil kemudian dicuci lalu diperas untuk memisahkan
ampas dari sari buahnya.
2. Penetapan Kadar Flavanoid Ekstrak Buah Dengen
a. Pembuatan larutan standar kuersetin
Sebanyak 10 mg kuersetin ditimbang dan dilarutkan dalam 100 mL etanol
96% sampai tanda batas sebagai larutan standar kuersetin 100 ppm (Syamsul dkk,
2019). Larutan induk dibuat larutan standar dengan deret konsentrasi 2 ppm, 4
ppm, 6 ppm, 8 ppm, dan 10 ppm. Masing-masing larutan diencerkan dengan
etanol 96% dalam labu ukur 10 mL sampai tanda batas lalu dihomogenkan.
Mengambil masing-masing konsentrasi larutan standar dan dimasukkan ke dalam
tabung reaksi sebanyak 0,5 mL dan direksikan dengan 0,15 mL NaNO2 5%
17
setelah itu didiamkan selama 6 menit. Kemudian larutan kembali direaksikan
menggunakan AlCl3 10 % sebanyak 0,15 mL setelah itu didiamkan lagi selama 6
menit, dan selanjutnya larutan standar direaksikan dengan 2 mL NaOH 4%
kemudian ditambahkan dengan aquades hingga masing-masing volumenya
mencapai 5 mL. Salah satu konsentrasi larutan standar diambil dan diukur nilai
absorbansinya pada panjang gelombang optimum menggunakan spektrofotometer
UV-Vis.
b. Penentuan panjang gelombang maksimum
Salah satu dari konsentrasi larutan standar yang dibuat kemudian diukur
adsorbansinya pada panjang gelombang antara 250 nm- 317 nm untuk
menentukan nilai serapan maksimum. Nilai serapan tertinggi yang telah
didapatkan merupakan panjang gelombang optimum yang akan digunakan untuk
menetukan nilai adsorbansi masing-masing larutan standar (Haeria, 2016 dalam
Hasanah, 2019).
c. Penetapan kadar flavonoid total ekstrak buah dengen
Sebanyak 0,050 g sari Buah Dengen ditimbang dan dilarutkan dalam 50
mL etanol 96% sampai tanda batas. Larutan sampel diambil sebanyak 0,5 mL dan
direaksikan dengan 2 mL aquades, setelah itu larutan sampel direaksikan dengan
0,15 mL NaNO2 5% dan didiamkan selama 6 menit. Selanjutnya larutan kembali
direaksidan dengan AlCl3 10% dan didiamlan selama 6 menit, dan terakhir larutan
sampel direaksikan dengan 2 mL NaOH 4% dan dicukupkan dengan aquades
hingga volume mencapai 5 mL lalu diukur nilai absorbansi menggunakan
spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang optimum 284-288 nm.
Flavonoid total ekstrak buah dengen dihitung dengan menggunakan persamaan
regresi liniear dari kurva kalibrasi kuersetin yang telah diukur sebelumnya.
18
3.5 Diagram Alir Penelitian
- Dicuci
- Diperas
- Disaring
- Diukur nilai absorbansi ekstrak buah dengen
- Dianalisis untuk menentukan kadar flavanoid
Gambar 4. Diagram Alir Penelitian
3.6 Analisis Data
1. Perhitungan Kadar Flavanoid Total
Data yang diperoleh dari hasil pengukuran absorbansi standar pada
Panjang gelombang maksimum selanjutnya dibuat kurva kalibrasi larutan standar
flavanoid dan dihitung dengan menggunakan persamaan garis linear yaitu:
dimana,
x = Konsentrasi mg/L
y = Absorbansi (A)
a dan b = Koefisien
Kemudian dilakukan perhitungan kadar flavanoid menggunakan rumus
metode Chang, dkk (2002).
Buah dengen sebanyak
100 gram
Filtrat Residu
Kadar flavanoid
y = ax + b
Kandungan Flavanoid (%) =
19
Keterangan:
C= Kesetaraan kuersetin (mg/L)
V= Volume total ekstrak etanol (mL)
Fp= Faktor Pengenceran
m= Berat sampel (mg)
20
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil Penelitian
1. Preparasi Sampel Buah Dengen
Buah dengen sebanyak 100 g diperoleh dari Desa Lare-Lare, Kecamatan
Bua, Kabupaten Luwu. Buah Dengen yang digunakan adalah buah yang masih
segar dan sudah matang. Buah yang telah diambil kemudian dicuci lalu
diekstraksi tanpa menggunakan pelarut yaitu dengan cara memisahkan ampas dari
sari buahnya sehingga diperoleh sari buah Dengen sebanyak 12,58 g.
2. Kadar Flavonoid Menggunakan Spektrofotometer Uv-Vis
a. Panjang gelombang maksimal (λmaks) kuersetin
Panjang gelombang maksimum ditemukan dengan mengukur nilai
absorbansi pada konsentrasi 2 ppm dengan panjang gelombang antara 250 – 317
nm. Panjang gelombang yang diperoleh dari hubungan panjang gelombang dan
absorbansi dapat dilihat pada gambar 5.
Gambar 5. Hasil panjang gelombang maksimal (λmaks) kuersetin 264 nm
264
0
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
0.35
0.4
0.45
245 250 255 260 265 270 275
Axi
s Ti
tle
Axis Title
absorbansi
absorbansi
21
b. Kurva kalibrasi perbandingan konsentrasi standar kuersetin dengan nilai
serapannya
Nilai absorbansi yang telah diperoleh dari konsentrasi 2 ppm, 4 ppm, 6 ppm,
8 ppm, dan 10 ppm pada panjang gelombang 264 nm dibuat kurva kalibrasi
larutan standar kuersetin yang dapat dilihat pada table 1 dan pada gambar 6.
Table 1. Hasil pengukuran absorbansi larutan standar kuersetin panjang
gelombang 264 nm
Konsentrasi (ppm) Nilai Absorbansi (A)
2
4
6
8
10
0.194
0.291
0.362
0.417
0.480
Gambar 6. Grafik Kurva Baku Standar Kuersetin
4.2 Pembahasan
Pada penelitian ini menggunakan Buah Dengen yang terdapat di Desa
Lare-Lare, Kecamatan Bua, Kabupaten Luwu. Sampel yang digunakan merupakan
Buah Dengen yang masih segar dan sudah matang. Buah Dengen yang telah
dibersihkan kemudian diekstraksi tanpa menggunakan pelarut dengan cara
memisahkan ampas dari sari buahnya. Sari buah Dengen sebanyak 0.050 gram
y = 0,089x - 0,023 R² = 0,934
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0 2 4 6 8
Axi
s Ti
tle
Axis Title
absorbansi
absorbansi
Linear (absorbansi)
22
ditimbang dan dilarutkan ke dalam 50 ml etanol 96% lalu diukur nilai
absorbansinya pada panjang gelombang 284-288 nm.
Penentuan kadar flavonoid dilakukan dengan menggunakan metode Chang
dkk (2002) dan sebagai pembanding digunakan baku kuersetin dengan deret
konsentrasi 2, 4, 6, 8, dan 10 ppm. Senyawa yang digunakan sebagai standar
untuk menentukan kadar flavonoid adalah kuersetin karena kuersetin adalah
flavonoid dari kelompok flavonol yang memiliki gugus keto pada atom C-4 dan
juga gugus hidroksil pada atom C3 dan bertetangga dengan atom C5 (Martono
dkk, 2014).
Pengukuran nilai absorbansi untuk penetapan panjang gelombang
maksimum diukur pada panjang gelombang antara 250-317 nm (Haeria, 2013
dalam Hasanah, 2019). Hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa panjang
gelombang maksimum larutan standar kuersetin berada pada panjang gelombang
264 nm.
Hasil penentuan absorbansi larutan standar dapat dilihat sesuai dengan
hukum Lambert-Beer yaitu konsentrasi berbanding lurus dengan absorbansi
dimana semakin tinggi nilai absorbansi akan berbanding lurus dengan konsentrasi
zat yang terkandung di dalam suatu sampel (Neldawati, 2013). Berdasarkan hasil
pengukuran nilai absorbansi larutan standar kuersetin pada deret konsentrasi 2, 4,
6, 8, dan 10 diperoleh persamaan regresi linear yaitu y= 0,089x + 0,023 dengan
nilai koefisien kolerasi r2 = 0,934, dimana nilai r yang mendekati 1 menunjukkan
bahwa semakin tinggi konsentrasi larutan standar kuersetin maka akan semakin
tinggi nilai serapan yang dihasilkan (Azizah dkk, 2014).
Analisis kandungan senyawa flavonoid dilakukan dengan penambahan
pereaksi AlCl3. Sebagai asam lewis, AlCl3 akan membentuk ikatan kompleks
dengan gugus hidroksil dari senyawa flavonoid (Ustadi dkk, 2017). Prinsip
penetapan kadar flavonoid metode aluminium clorida adalah terjadinya
pembentukan kompleks antara aluminium klorida dengan gugus keto pada atom
C-4 dan gugus hidroksi pada atom C-3 atau C-5 yang bertetangga dari golongan
flavon dan flavonol (Azizah dkk, 2014). Pembentukan kompleks ini akan
menggeser panjang gelombang ke arah yang terlihat sehingga akan terjadi
perubahan warna menjadi warna kuning. Penambahan pereaksi NaNO2 dan NaOH
23
ditandai dengan perubahan warna yang khusus yaitu berdasarkan reaksi antara ion
aluminium dengan senyawa flavonoid yang berada dilingkungan alkali dalam
membentuk reaksi senyawa kompleks (Martono dkk, 2014).
Gambar 7. Reaksi pembentukan kompleks antara AlCl3 dengan flavonol
Gambar 8. Reaksi pembentukan kompleks antara AlCl3 dengan flavon (Manarim
dan De Agular, 2016).
Absorban sampel sesungguhnya yang digunakan dalam pehitungan
merupakan hasil pengurangan dari absorban sampel terhadap adsorban kontrol.
Pengukuran adsorban kontrol sampel dimaksudkan untuk menghilangkan
pengaruh absorban dari warna larutan sampel yang dibuat (Kusuma dkk, 2014).
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan diperoleh kadar flavonoid dari
ekstrak buah Dengen sebesar 10,23 mg/mL dan kemungkinan memiliki aktivitas
antioksidan. Penelitian yang sebelumnya juga pernah dilakukan oleh Selawa dkk
24
(2013) yang menemukan kadar flavonoid dari ekstrak etanol daun binahong
sebesar 11,23 mg/mL dan memiliki aktivitas antioksidan sebesar 4,25 mmol/g.
Kelebihan dalam metode penelitian ini karena proses pengerjaannya lebih
mudah, cepat dan tidak membutuhkan banyak biaya. Akan tetapi proses ini juga
memiliki banyak kelemahan. Salah satunya karena buah Dengen tanpa melalui
proses pengeringan akan mudah rusak dan busuk karena mengandung kadar air
tinggi sehingga akan memicu pertumbuhan mikroba pada buah (Istiqamah, 2013).
Selain itu untuk menghilangkan kadar air berlebih yang terkandung dalam sampel
tidak dapat dilakukan dengan proses pengeringan sedang (dikering anginkan)
melainkan harus dijemur dengan menggunakan sinar matahari, hal tersebut dapat
mengakibatkan kadar flavonoid menurun karena sifat dari senyawa flavonoid
yaitu tidak tahan terhadap panas (Syafridah dkk, 2018).
Flavonoid dan senyawa antioksidan akan mengalami penurunan akibat
pengaruh variasi suhu pada saat proses pengeringan karena senyawa tersebut
berifat sensitive terhadap cahaya dan panas. Degradasi flavonoid terjadi karena
adanya pemutusan rantai molekul dan terjadinya reaksi oksidasi yang
menyebabkan oksidasi gugus hidroksil dan akan membentuk senyawa lain yang
mudah menguap dengan cepat (Zainol dkk, 2009).
25
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
1. Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan, diperoleh kadar senyawa
flavonoid dari ekstrak Buah Dengen (Dillenia serrata) menggunakan metode
spektrofotometer UV-Vis yaitu sebesar 10,23 mg/mL atau 1,023%.
2. Saran
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, disarankan penelitian
selanjutnya untuk meneliti uji aktivitas antioksidan dari ekstrak buah Dengen
dengan menggunakan metode DPPH, serta analisis kadar senyawa lain yang
terkandung dari ekstrak buah Dengen
26
DAFTAR PUSTAKA
Alwi H. 2017. Validasi Metode Analisis Flavanoid dari Ekstrak Etanol Kasumba
Turate (Chartamus tinctorius L.) Secara Spetrofotometri UV-Vis. (Doctoral
Dissertation, Universitas Islam Negeri Alauddin Makassar)
Anggraini, W. 2008. Efek Antiinflamasi Ekstrak Etanol Daun Jambu Biji
(Psidium Guajava Linn.) Pada Tikus Putih Jantan Galur Wistar (Doctoral
Dissertation, Univeristas Muhammadiyah Surakarta).
Asih, I.A.R.A. 2009. Isolasi dan Identifikasi Senyawa Isoflavon dari Kacang
Kedelai (Glycine Max). Jurnal kimia, 3(1), 33-40.
Atun, S. 2009. Potensi Senyawa Isoflavon dan Derivatnya dari Kedelai 9Glycine
Max. L) serta Manfaatnya untuk Kesehatan. Prosiding Seminar Nasional
Pendidikan Dan Penerapan MIPA Universitas Negeri Yogyakarta, 16, 33-
41.
Azizah, D.N., Kumolowati, E., dan Faramayuda, F. 2014. Penetapan Kadar
Flavonoid Metode Alcl3 Pada Ekstrak Methanol Kulit Buah
Kakao(Theobrma cacao. L). kartika:Jurnal ilmiah Farmasi. 2(2), 33-37.
Aziz, Z., dan Djamil, R. 2013. Isolasi dan Identifikasi Senyawa Flavonoid dalam
Fraksi N-Butanol dari Ekstrak Etanol Daun Jambu Biji (Psidium Guajava
L). In Prosiding Seminar Nasional LUSTRUM X Fakultas Farmasi
Universitas Pancasila.
Birt, D.F., Hendrich, S., dan Wang, W. 2001. Dietary Agents In Cancer
Prevention; Flavonoids and Isoflavonoids. Pharmacology and
theurapeutics, 90(2-3), 157-177.
Chang, C., Ming, H., Hwei, M., dan Chern J. 2002. Estimation of Total Flavanoid
Content in Propolis by Two Complementary Colorimetric Methods.
Journal of Food and Drug Analysis,10 (3), 1181.
Dalimartha, S. 2006. Biji Mahoni (Swietenia mahagoni Jacq) Atlas Tumbuhan
Obat Indonesia, 2, 131-134.
Darmawati, A.A.S.K., Bawa, I. G. A. G., dan Suirta, I. W. 2015. Isolasi dan
Identifikasi Senyawa Golongan Flavonoid pada Daun Nangka
(Artocarpus Heterophyllus Lmk) dan Aktivitas Antibakteri Terhadap
Bakteri Stapphylococcus aureus. Jurnal Kimia, 9(2), 203, 210.
Dewi, S. R. 2018. Uji Efek Antiinflamasi Rebusan Daun Jamblang (Syzygium Cumini) pada Mencit (Mus Musculus). Media Farmasi, 14(1), 8-13.
Djamil, R., dan Bakriyyah, F. 2015. Isolasi dan Identifikasi Jenis Senyawa
Flavonoid dalam Fase N-Butanol Daun Murbei (Morus Alba L) Secara
Spektrofotometri. Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia, 13(2), 194-200.
27
Dwintanandi, C., Nahzi, M. Y., dan Raharja, S. D. 2016. Pengaruh Ekstrak Kulit
Manggis (Garcinia Mangostana Linn) Terhadap Jumlah Makrofag Pada
Inflamasi Pulpa Studi In Vivo Pada Gigi Molar Rahang Atas Tikus (Rattus
Norvegicus) Wistar Jantan. Dentino, 1(2), 44-50.
Ekawati, M.A., Suirta, I.W., dan Santi, S.R. 2017. Isolasi dan Identifikasi
Senyawa Flavonoid dari Daun Sembukan (Paederia Foetida. L) serta Uji
Aktivitasnya sebagai Antioksidan. Jurnal Kimia, 11(1), 43-48.
Hasanah, E., Ayu, N.K., Puspita, D, dan Sukarti, S. 2019. Analysis of Flavanoid
Content from Extract Ethanol Bilajang Bulu Leaf (Merremia vitifolia).
Jurnal Akta Kimia Indonesia (Indonesia Chimica Acta), 12(1), 73-78.
Hasanah, E. 2019. Analisis Kadar Senyawa Flavonoid dari Ekstrak Etanol Daun
Bilajang Bulu (Merremia Vitifolia) dan Uji Aktivitas terhadap Bakteri.
Skripsi. Universitas Cokroaminoto Palopo.
Kardinan, I. A., Kusuma F., R. 2004. Meniran Penambah Daya Tahan Tubuh
Alami. Agromedia.
Koeriwoa, Y.A., Fatimawali, F., dan Wiyono, W. 2012. Isolasi dan Identifikasi
Senyawa Flavonoid dalam Daun Beluntas (Pluchea indica L). Pharmacon,
1(1).
Kurniawati, E., dan Sianturi, C.Y. 2016. Manfaat Sarang Semut (Myrmecodia
Pendans) sebagai Terapi Antidiabetes. Jurnal Majority, 5(3), 38-42.
Kusuma, P. 2014. Penetapan Kadar Flavanoid Total dan Daya Antioksidan dari
Ekstrak Etanol Buah Pare (Momordica charantina L). (Doctoral
dissertation, UIN Alauddin Makassar)
Illing, I., Safitri, W., Erfiana. 2017. Uji Fitokimia Ekstrak Buah Dengen. Jurnal
Dinamika, 8(1), 66-84.
Illing, I., Erfiana., dan Kasi, P.D. 2019. Analysis of Vitamin C Concentration on
Dengen Fruit Extract (Dillenia serrata). In International Conference on
Natural and Social Sciences (ICONSS) Proceeding Series. (pp. 13-15).
Irnawati., Purba, M., Mujadillah., Sarmayani. 2017. Penetapan Kadar Vitamin C
dan Uji Aktifitas Antioksidan Sari Buah Songi (Dillenia serrata Thunb.)
terhadap Radikal DPPH (Diphenylpicrylhydrazyl). Pharmacon, 6(2).
Istiqamah, F. 2013. Efek Ekstrak Petai (Parkia speciosa) Terhadap Pertumbuhan
Koloni Bakteri Eschericia Coli Secara in Vitro. (Doctoral Dissertation,
University of Muhammadiyah Malang).
28
Jalil, J., Sabandar, C.W., Ahmat, N., Jamal, J.A., Jantan, I., Aladdin, N.A.,
Muhammad, K., Buang, F., Mohamad, H.F., dan Sahidin,I. 2015.
Molecules Inhibitory effect of triterpenoids from dillenia serrata
(Dilleniaceae) on prostaglandin E2 Production and Quantitative HPLC
Analysis of Its Koetjapic Acid and Betulinic Acid Contens. Molecules,
20(2), 3206-3220.
Lima, C.C., Lemos, R.P., dan Consserva, L.M. 2014. Dilleniaceae Family : an
Overview Of Its Ethnomedicinal Uses, Biological And Phytochemical
Profile. Journal of Pharmacognosy and Phytochemistry,3(2).
Manarim, GR., dan De Agular. 2016. Removal of Pigments From Sugarcane Cells
by Adsorbent Chromatographic Column. Ann. Chromatogr. Sep. Tech, 2,
1-5.
Martono, Y., Yanuarsih, F.F., Aminu, M.R., dan Muninggar, J. Fractionation and
Determination of Phenolic and Flavonoid Compound From Moringa
Oleifera Leaves. In Journal Of Physic: Conference series (Vol. 1307, No.
1, p.012014). IOP Publishing.
Maulana, E.A., Asih, I.A.R.A., dan Arsa, M. Isolasi dan Identifikasi Senyawa
Flavonoid dari Ekstrak Daun Biji Putih (Psidium Guajava Linn). Jurnal
Kimia, 10(1), 161-168.
Muhit, M.A., Tareq, S.Y., Apu, A.S., Basak, D., dan Islam, M.S. 2010. Isolation
and Identification of Compounds From The Leaf Extract of Dillenia Indica
Linn. Bangladesh Pharm J, 13(1),49-53.
Nadila, F. 2014. Antihypertensive Potential of Chayote Fruit Extract for
Hypertension Treatment. Jurnal Majority, 3(7).
Nayak, P.K., Rayaguru, K., dan Mishra, B.K. 2016. Study of Physical Parameters
of Elephant Apple Fruit (Dillenia Indica): an Underutilized Fruit Of
North-Eastern India. Int J Eng Res Technol, 5, 532-535.
Neldawati., Wulan, R., dan Gusnedi. 2013. Analisis Nilai Adsorbansi dalam
Penentuan Kadar Flavanoid untuk Berbagai Jenis Daun Tanaman Obat.
Pillar Of Physics, 2(1).
Nuari, S., Anam, S., dan Khumaidi, A. 2017. Isolasi dan Identifikasi Senyawa
Flavonoid Ekstrak Etanol Buah Naga Merah (Hylocereus Polyrhizuz
(F.A.C.Weber) Briton& Rose). Jurnal Farmasi Galenika (Galenika Journal
of Pharmacy)(e-journal), 3(2), 118-125
Pambudi, A., Syaefuddin., Nuriko, N., Swandari, S., Dan Azura, P.R. Identifikasi
Bioaktif Golongan Flavonoid Tanaman Anting-Anting (Acalypha Indica
L.).Jurnal Al Azhar Indonesia Seri Sains dan Teknologi, 2(3), 178-187.
29
Panche, A.N., Diwan, A.D., dan Chandra, S.R. 2016. Flavonoids; an Overview.
Journal of Nutritional Science, 5.
Pitopang, R., Ihsan, M., dan Burhanuddin, I.F. 2014. Panduan Pengenalan Flora
dan Fauna Endemic Kabupaten Sigi Sulawesi Tengah. Badan Lingkungan
Hidup. Bintang Prima.
Rahayu, S., Kurniasih, N., dan Amalia, V. 2015. Ekstraksi dan Identifikasi
Senyawa Flavonoid dari Limbah Kulit Bawang Merah sebagai
Antioksidan Alami. Jurnal Ilmu Kimia Dan Terapan, 2(1), 1-8.
Rahmawati, L. 2013. Isolasi, Identifikasi dan Uji Aktivitas Antioksidan Senyawa
Flavonoid Daun Binahong (Anredera Cordifolia (Ten.) Steenis). Chem
Info Journal, 1(1), 165-173.
Rashid, M.A., Parvin, M.N., Rahman, M.S., dan Islam, M.S. 2009. Chemical and
Biological Investigations of Dillenia Indica Linn. IIIbangladesh Journal Of
PharmacologyIII, 4(2), 122-125.
Redha, A. 2013. Flavonoid:Struktur, Sifat Antioksidatif dan Peranannya dalam
Sistem Biologi.
Rita, R.W., Raka, I.K.P.S.I., Asih, A., dan Dira, I.M. 2016. Identifikasi dan Uji
Aktivitas Senyawa Flavonoid dari Ekstrak Daun Trembesi (Albizia Saman
(Jacq) Merr) Sebagai Antibakteri Eschericia Coli.
Rompas, R.A., Edy, H.J., dan Yudistira, A. 2012. Isolasi dan Identifikasi
Flavonoid Daun Lamun (Syringodium isoetifolium). Pharmacon, 1(2)
.
Sabandar, C.W., Jalil, J., Ahmat, N., Aladdin, N.A., Kamaruddin, H.S., dan
Wahyuningrum, R. 2020. Aktivitas Antioksidan dan Penghambatan Xantin
Oksidase Kulit Batang Songi (Dillenia serrata Thunb.). Jurnal Farmasi
Galenika (Galenika journal of pharmacy)(e-journal), 6 (1),151-159.
Saputra, O., dan Anggraini, N. 2016. Khasiat Belimbing Wuluh (Avverrhoa
bilimbi L.) terhadap Penyembuhan Acne Vulgaris. Jurnal Majority, 5(1),
76-80.
Saputra, O., dan Fitri, E. 2016. Khasiat Daun Seledri (Apium Graveolens)
Terhadap Tekanan Darah Tinggi Pada Pasien Hiperkolestrolemia. Jurnal
Majority, 5(2), 120-125.
Sari, S.N. 2016. Isolasi Flavonoid dari Biji Mahoni (Sswietenia Macrophylla
King) dan Uji Aktivitasnya Sebagai Antibakteri. (Doctoral dissertation,
Universitas Negeri Semarang).
Sastrohamidjojo, H. 1991. Kromatografi. FMIPA UGM. Yogyakarta.
30
Selawa, D., Runtuwene, M.R., dan Citraningtyas, G. 2013. Kandungan Flavonoid
dan Kapasitas Antioksidan Total Ekstrak Etanol Daun Binahong
[Anredera cordifolia (Ten) Steenis.]. Pharmacon, 2(1),
Silalahi, J. 2006. Makanan Fungsional. Kanisius.
Silverstein, R.M., Basler, G.C., dan Morril, T.C. 1991. Spectrometric
Identification of Organic. John willey dan sons Inc. Singapore.
Simanjuntak, K. 2012. Peran Antioksidan dan Flavanoid dalam Meningkatkan
Kesehatan. Bina Widya, 23(3), 135-140.
Sjahid, L.R. 2008. Isolasi dan Identifikasi Flavonoid dari Daun Dewandaru
(Eugina Uniflora L.) (Doctoral Dissertation, Universitas Muhammadiyah
Surakarta).
South, E., kaempe, H., dan Tampi, A. 2013. Evaluasi Kandungan Total Polifenol
dan Isolasi Senyawa Flavonoid pada Daun Gedi Merah (Abelmoschus
manihot L.). Chemistry Progress, 6 (2).
Srisadono, A. 2008. Skrining Awal Ekstrak Etanol Daun Sirih (Piper Betle Linn)
sebagai Antikanker dengan Metode Brine Shrimp Lethality Test (BLT).
(Doctoral Dissertation, Faculty of Medicine).
Sukadana, I.M. 2009. Senyawa Antibakteri Golongan Flavonoid dari Buah
Belimbing Manis (Averrhoa carambola Linn.L). Jurnal Kimia, 3(2)109-
116.
Sukadana, I.M. 2010. Aktivitas Antibakteri Senyawa Flavonoid Dari Kulit Akar
Awar-Awar (Ficus Septica Burm F). Studi Bahan Alam Jurusan Kimia
FMIPA Universitas Udayana, Bukit Jimbran.
Syafridah, M., Darmanti, S., dan Izzati, M. 2018. Pengaruh Suhu Pengeringan
Terhadap Kadar Air, Kadar Flavonoid, dan Aktivitas Antioksidan Daun
Dan Umbi Rumput Teki (Cyperus Rotundus. L). Bioma: Berkala Ilmiah
Biologi, 20(1), 44-50.
Syamsul, E.S., Hakim, Y.Y., dan Nurhasnawati, H. 2019. Penetapan Kadar
Flavonoid Ekstrak Daun Kelakai (Stenochlaena Palustris (Burm. F)
Bedd).
Tetti, M. 2014. Ekstraksi, Pemisahan Senyawa, dan Identifikasi Senyawa Aktif.
Jurnal kesehatan, 7(2).
Ustadi, U., Radiati, L.E., dan Thohari, I. 2017. Komponen Bioaktif dan Aktifitas
Antioksidan Madu Kaliandra (Calliandre Callothyrsus), Madu Karet
(Hevea Brassilliiesnsis) dan Madu Randu (Ceiba Pentandra). Jurnal Ilmu
dan Teknologi Hasil Ternak (JITEK), 12(2), 97-102.
31
Widiasari, S. 2018. Mekanisme Inhibisi Angiotensin Converting Enzym oleh
Flavonoid pada Hipertensi. Collaborative Medical Journal (CMJ), 1(2),
30-44.
Widyawati, P.S., Wijaya, H., Harjosworo, P.S., dan Harjosworo, S. 2010.
Pengaruh Ekstraksi dan Fraksinasi terhadap Kemampuan Menangkap
Radikal Bebas DPPH (1,1 Difenil-2-Pikrihidrazil) Ekstrak Dan Fraksi
Daun Beluntas (Pluchea Indica. L). in Seminar Rekayasa Kimia dan
Proses. ISSN (pp.1411-4216).
Winarsi, H.2007. Antioksidan Alami dan Radikal. Kanisius.
Yeshwante, S.B., Juvekar, A.R., Nagmoti, D.M., Wankhede., Shah, A.S.,
Pimprikar, R.B., dan Saindane, D.S. 2009. Anti-Inflammatory Activity Of
Methanolic Extracts of Dillenia indica L. Leaves. Journal of Young
Pharmacists, 1(1), 63.
Zainol, M.K., Abdul-Hamid, A., Abu Bakar, F.B., dan Pak Dek.S. 2009. Effect of
Different Drying Methods on the Degradation of Selected Flavonoids In
Centella Asiatica. International Food Research Journal, 16(4), 531-537.
Zirconia, A., Kurniasih, N., dan Amalia, V. 2015. Identifikasi Senyawa Flavonoid
dari Daun Kembang Bulan (Tithonia Diversifolia) dengan Metode
Pereaksi Geser. Al-Kimiys: Jurnal Ilmu Kimia dan Terapan, 2(1), 9-17
32
Lampiran 1. Dokumentasi Penelitian
Menimbang kuersetin sebanyak Menimbang NaNO2 sebanyak
0,01 gram 0,5 gram
Menimbang AlCl3 sebanyak Menimbang NaOH sebanyak
1 gram 0,4 gram
Melarutkan kuersetin Melarutkan NaNO2, AlCl3,
Dalam labu ukur 100 mL dan NaOH dalam 10 ml aquades
33
Membuat masing-masing Mereaksikan kuesetin dengan
deret konsentrasi kuersetin NaNO2 5%, AlCl3 10 %, dan
NaOH 4%
Mengukur absorbansi Mengupas kulit buah dengen
Kuersetin pada panjang
Gelombang 250-317 nm
Mencuci buah dengen Menimbang buah dengen
sebanyak 100 gram
34
Memotong buah dengen Menimbang ekstrak buah dengen
Sebanyak 0,05 g
Melarutkan ekstrak dengen mereaksikan dengan NaNO2,
dalam 50 ml etanol 96% AlCl3, NaOH, dan Aqudes
Mengukur absorbansi
Pada panjang gelombang 284-288 nm
35
Lampiran 2. Analisis Kadar Flavanoid
a. Pembuatan larutan kuersetin
- Dilarutkan dalam 100 mL etanol 96%
- Masing-masing dipipet ke dalam labu
ukur 10 mL dan diencerkan dengan
etanol 96% sampai tanda batas
- 0.2 mL - 0.4 mL - 0.6 mL - 0.8 mL - 1 ml
- Masing-masing larutan diambil 0,5 mL
dan dimasukkan ke dalam tabung
reaksi
- Masing-masing ditambahkan 0,15 mL
NaNO2 5% dan didiamkan selama 6
menit
- Masing-masing ditambahkan 0,15 mL
AlCl3 10% dan didiamkan selama 6
menit
- Masing-masing ditambahkan 2 mL
NaOH 4 %
- Masing-masing larutan ditambahkan
aquads hingga volume mencapai 5 mL
- Salah satu konsentrasi diukur pada
Panjang gelombang 250-317 nm untuk
penentuan λ maks
- Diukur absorbansi masing-masing
deret standar sesuai λ maks
- Dianalisis menggunakan hukum
Lambert beer
Gambar 10. Bagan Pembuatan larutan kuersetin
10 mg kuersetin
2 ppm 4 ppm 6 ppm 8 ppm 10 ppm
Nilai absorbansi
Konsentrasi 100 ppm
Persamaan garis linear
36
b. Penentuan kadar flavonoid ekstrak buah dengen
- Dilarutkan dengan 50 mL aquades sampai
tanda batas
- Diambil sebanyak 0,5 ml dan dimasukkan
ke dalam tabung reaksi
- Ditambahkan 2 mL aquades
- Ditambahkan 0,15 mL NaNO2 5% dan
didiamkan selama 6 menit
- Ditambahkan 0,15 mL AlCl3 10% dan
didiamkan selama 6 menit
- Ditambahkan 2 mL NaOH 4% kemudian
dicukupkan dengan aquades hingga
volume mencapai 5 mL
- Diukur konsentrasi pada panjang
gelombang 284-288 nm
- Dihitung kadar flavonoid total dengan
menggunakan persamaan garis linear
kurva kalibrasi kuersetin
Gambar 11. Bagan Penentuan Kadar Flavanoid
0,050 g ekstrak buah
dengen
Nilai absobansi
Kadar flavonoid
ekstrak buah dengen
Konsentrasi 1000 ppm
37
Lampiran 3. Perhitungan pengenceran larutan standar kuersetin dan kadar
flavonoid ekstrak buah dengen
1. Perhitungan pengenceran larutan standar kuersetin
a. Membuat larutan dengan konsentrasi 2 ppm
M1 x V1 = M2 x V2
100 ppm x V1 = 2 ppm x 10 mL
V1= 0,2 mL
b. Membuat larutan dengan konsentrasi 4 ppm
M1 x V1 = M2 x V2
100 ppm x V1 = 4 ppm x 10 mL
V1= 0,4 mL
c. Membuat larutan dengan konsentrasi 6 ppm
M1 x V1 = M2 x V2
100 ppm x V1 = 6 ppm x 10 mL
V1= 0,6 mL
d. Membuat larutan dengan konsentrasi 8 ppm
M1 x V1 = M2 x V2
100 ppm x V1 = 8 ppm x 10 mL
V1= 0,8 mL
ppm 100
mL 10 x ppm 2V1
ppm 100
mL 10 x ppm 4V1
ppm 100
mL 10 x ppm 6V1
ppm 100
mL 10 x ppm 8V1
38
b. Membuat larutan dengan konsentrasi 10 ppm
M1 x V1 = M2 x V2
100 ppm x V1 = 10 ppm x 10 mL
V1= 1 mL
2. Perhitungan kadar flavonoid ekstrak buah dengen
a. Konsentrasi ekstrak buah dengen
0,934 = 0,089x + 0,023
0,089 x = 0,934 – 0,023
x= 10,23 mg/mL
b. Kadar flavonoid
F =
F =
F = 1,023%
ppm 100
mL 10 x ppm 10V1
0,089
0,911x
100%x mg 50
10 x mL 50 x mg/mL 10,23-3
10
10,23
y = ax + b
Flavonoid % =
39
Lampiran 4. Surat Penelitian
40
41
42
