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BIO1540 – Introduction à la Biologie Cellulaire Laboratoire 1: Introduction à la microscopie, aux cellules procaryotes et eucaryotes

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BIO1540 – Introduction à la Biologie Cellulaire

Laboratoire 1: Introduction à la microscopie, aux cellules procaryotes et eucaryotes

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BIO1540 Labs- Introduction

• Choisissez un partenaire de laboratoire et mettez votre nom sur la fiche d’assignation des bancs.

• Lisez le manuel de laboratoire avant la séance• Arrivez préparés pour les interrogations pré-

lab (quiz) qui auront lieu au début de chaque laboratoire à partir du lab2.

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Objectifs du lab1

• Apprendre à travailler dans le laboratoire.• Comprendre et maîtriser l’utilisation du

microscope.• Apprendre à prendre de bonnes photos

numériques avec le logiciel Infinity Capture• Reconnaître les différences entre les cellules

eucaryotes et procaryotes.• Suivez les instructions étape-par-étape du

manuel de laboratoire

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Installation des microscopes

• Lisez les instructions dans le Guide Biolabo pour savoir comment manipuler les microscopes

• Sortez les deux microscopes du placard.• Utilisez les poignées pour porter le microscope

composé. Attention, il est très pesant.• Déposez les microscopes à l’extrémité de votre

banc (pas entre l’ordinateur l’évier)

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Installation des microscopes

• Connectez le cordon d’alimentation• Connectez les caméras aux prises USB en

suivant les instructions des démonstrateurs. Ne forcez pas la prise. Demandez de l’aide si vous avez un problème

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Partie 1 –Microscope composé

• Avant de toucher au microscope assurez-vous:• d’avoir lu sérieusement le manuel de labo• Suivez ensuite les instructions décrites dans la

section « Réglages et alignement » de Biolabo.• Lisez toutes les étapes avant d’utiliser le

microscope.

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Partie 1 –Microscope composé

Suivez les instructions du manuel “Utilisation du microscope” et répondez aux questions.

Trois séries d’observation:1-Orientation et distance de travail2-Profondeur de champ3-Taille du spécimen, facteur de

grossissement et utilisation de Infinity Capture

Durée max.

60 min.

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Taille du spécimen et facteur de grossissement

• Utilisez n’importe quelle lame préparée• Utilisez Infinity Capture pour prendre des

photos: visitez le site web des labs et cliquez le liens « prises de photos numériques… »

• Sauvegardez toutes vos images dans le format JPEG dans le dossier:

K:/My documents/BIO1540/BIO1540[ma section]• N’oubliez pas de supprimer toutes vos images

avant de quitter le lab.Note technique!

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Taille du spécimen et facteur de grossissement

• Utilisez les instructions et formules du manuel de laboratoire.

• Méthode 1: Utilisez la taille du champ de vision de la caméra pour calculer la taille réelle d’un spécimen

Microscope composé – champ de vision à la caméra

Objectif Champ de vision4x 1.80 mm10x 0.72 mm40x 0.180 mm 100x 0.072 mm ne pas utiliser cet objectif

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Photo prise a 40x (pollen de Lis)

0.175mm : largeur connue de la photo à 40x.40cm: taille de la photo à l’écran.

9 cm : taille du spécimen sur l’écran

La proportion entre 2 objets est la même à l’écran et dans le monde réel:A1 = B1 A: photoA2 B2 B: cellule

40 cm = 9 cm0.180mm x

x = 0.180*9/40 = 0.0405mm 40.5µm

Utiliser le champ de vision

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Partie 2 – Microscope Stéréoscopique

• Lisez dans le guide Biolabo la section stéréomicroscope puis suivez les instructions du manuel

• Observez une pièce de monnaie: (quelle source lumineuse: réfléchie ou transmise?)

• Artémies (Artemia): quelle source lumineuse: réfléchie ou transmise?

Durée max.

20 min.

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Partie 3 – Cellules Procaryotes & Eucaryotes

I- Cellules eucaryotes: -Faites un montage aqueux d’une feuille d’élodée-Provoquez la plasmolyse avec une solution de NaCl à 5% -Prenez des photos numériques (avant et après la plasmolyse)-Voir la démonstration sur le Guide Biolabo pour préparer un montage aqueux.

Durée max.

40 min.

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Partie 3 – Cellules Procaryotes & Eucaryotes

II- Cellules procaryotes:Caractéristiques: pas de membrane nucléaire ni d’organelles liées à la membrane.

Durée m

ax.

20 min.

Cyanobactéries – Préparer un montage aqueux d’Oscillatoria.

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Une fois vos observations terminées..

• Nettoyez les microscopes et votre banc• Suivez les dernières étapes du guide biolabo pour débrancher

le microscope et le ranger dans le placard sous le banc. • Enroulez le cordon d’alimentation autour des oculaires sans

serrer.• Enlevez tout échantillon de la platine porte objet• Remettez les lames sur les plateaux ou vous les avez trouvées• Mettez le microscope composé sur l’objectif 4x.• Effacez tous les fichiez que vous avez créés• Appelez vos TAs avant de partir ou vous perdrez des points

techniques

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Evaluation du Lab1• Questionnaire au début du lab2. • Durée: 10 minutes. Arrivez à l’heure ou vous ne pourrez pas

rentrer dans le lab avant la fin du quiz (=0 pour ce lab = 9% des labs BIO1540)

• Contenu du quiz: 8 questions portant sur les microscopes, leurs éléments & fonctions, les spécimens, ainsi que les mesures d’objets et les unités du système métrique

• Note technique: 15% du lab1

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N’hésitez pas à poser des questions, à tout moment

S’il survient un problème avec le microscope, n’essayez pas de le résoudre vous-même, prévenez un démonstrateur immédiatement.

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Lab2: Perméabilité des globules rouges, dans 2 semaines, même jour même heure.

Lisez le manuel.

Arrivez à l’heure pour le questionnaire portant sur le Lab1….