perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id PENGARUH ...eprints.uns.ac.id/8790/1/186531411201112151.pdfperpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id commit to user ABSTRAK Tarida Dorothy,

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

PENGARUH PEMBERIAN JUS MANGGA (Mangifera indica L.)

TERHADAP KERUSAKAN STRUKTUR HISTOLOGIS PARU MENCIT

YANG DIPAPAR ASAP ROKOK

SKRIPSI

Untuk Memenuhi Persyaratan

Memperoleh Gelar Sarjana Kedokteran

TARIDA DOROTHY

G0007021

FAKULTAS KEDOKTERAN

UNIVERSITAS SEBELAS MARET

SURAKARTA

2010


commit to user

PERSETUJUAN

Proposal Penelitian / Skripsi dengan judul:

Pengaruh Pemberian Jus Mangga (Mangifera Indica L) Terhadap Kerusakan

Struktur Histologis Alveolus Paru Mencit yang Dipapar Asap Rokok

Tarida Dorothy, G0007021, Tahun 2010

Telah disetujui untuk dipertahankan di hadapan Tim Validasi Proposal Penelitian /

Tim Uji Skripsi Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta

Pada Hari ............, Tanggal ..................... 2010

Pembimbing Utama Penguji Utama

Mutmainah, dr., M.Kes Isdaryanto, dr.

NIP 196607021998022001 NIP 195009131980031002

Pembimbing Pendamping Anggota Penguji

Riza Novierta Pesik, dr., M.Kes. Cr. Siti Utari, Dra

NIP 196511171997022001 NIP 196005301989031001

Tim Skripsi

Muthmainah, dr., M.Kes

NIP 196607021998022001

PERNYATAAN


commit to user

Dengan ini menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah

diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan Tinggi, dan

sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah

ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam

naskah dan disebutkan dalam daftar pustaka.

Surakarta,.....................

Tarida Dorothy

G0007021


commit to user

ABSTRAK Tarida Dorothy, G0007021, 2010. Pengaruh Pemberian Jus Mangga (Mangifera indica L.) terhadap Kerusakan Struktur Histologis Paru Mencit yang Dipapar Asap Rokok, Fakultas Kedokteran, Universitas Sebelas Maret, Surakarta. Tujuan Penelitian : Untuk mengetahui pengaruh proteksi jus mangga (Mangifera indica L.) terhadap kerusakan histologis paru mencit yang dipapar asap rokok. Metode Penelitian : Penelitian ini bersifat eksperimental laboratorik dengan post test only control group design. Mencit galur Swiss webster jantan sebanyak 30 ekor dibagi dalam 3 kelompok yaitu kelompok kontrol, kelompok perlakuan I, dan kelompok perlakuan II. Pada kelompok kontrol (KK) diberi aquades 0,2 ml/20g BB mencit, kelompok perlakuan I (KPI) diberi paparan asap rokok 1 batang per hari, kelompok perlakuan II (KPII) diberi paparan asap dari 1 batang rokok tiap hari, 2 jam sebelumnya mencit telah diberi 0,2 ml/20g BB mencit jus mangga selama 14 hari. Pada hari ke-15 mencit dikorbankan dengan cara dislokasi leher dan diambil parunya untuk pembuatan preparat. Kerusakan paru mencit diamati dengan melihat adanya destruksi septum alveolar, edema paru, dan infiltrasi sel radang. Data yang diperoleh kemudian dianalisis dengan Kruskall Wallis dan Mann Whitney (α = 0,05). Hasil Penelitian : Hasil uji statistik Kruskall Wallis menunjukkan adanya perbedaan yang bermakna antara ketiga kelompok penelitian p = 0,000 (p<0,050). Hasil uji statistik Mann Whitney menunjukkan perbedaan yang signifikan antara KK-KPI, KPI-KPII, dan ditemukan perbedaan yang tidak signifikan antara KK-KPII. Simpulan Penelitian : Dari hasil penelitian ini, dapat disimpulkan bahwa pemberian jus mangga dapat mencegah kerusakan struktur histologist paru mencit yang disebabkan oleh paparan asap rokok. Kata kunci : jus mangga, asap rokok, kerusakan histologis paru


commit to user

ABSTRACT Tarida Dorothy, G0007021, 2010. The Effect of Mango (Mangifera indica L.) Juice on Mice Histological Lung Damage which Exposed by Cigarette Smoke, Faculty of Medicine, Sebelas Maret University, Surakarta. Objectives : The purpose of this experiment is to know the effect of Mango (Mangifera indica L.) juice to prevent mice histological lung damage which exposed by cigarette smoke. Methods : This was a pure experiment with post test only control group design. Thirty male mice Swiss webster strain divided into 3 groups; control group, group I, and group II. The first group was used as negative control group (KK) which given no treatment beside aquadest dose 0,2 ml/20g BB mice, second group (KPI) was exposed by cigarette smoke and the last group (KPII) was given mango juice 0,2 ml/20g BB mice then exposed by cigarette smoke during 14 days. On the 15th day, all of mice were sacrificed for lung histopathological study. The histological lung damage were observed by destruction of septum, lung oodema, and inflitration of the inflamatory cells. Then the data was analyzed using Kruskall Wallis and Mann Whitney (α = 0,05). Results : The results of Kruskall Wallis statistical test showed a significant difference among the three groups, p = 0,000 (p <0,050). The results of Mann Whitney test also showed a significant differences between KK-KPI, KPI-KPII, and not significant between KK-KPII groups. Conclusion : From this experiments, it can be concluded that the mango juice (Mangifera indica L.) can prevent mice histological lung damage which exposed by cigarette smoke. Key words : mango juice, cigarette smoke, histological damage of lung


commit to user

DAFTAR ISI

PRAKATA ........................................................................................................ vi

DAFTAR ISI .................................................................................................... vii

DAFTAR TABEL ............................................................................................... x

DAFTAR GAMBAR ......................................................................................... xi

DAFTAR LAMPIRAN ..................................................................................... xii

BAB I. PENDAHULUAN

A. Latar Belakang Masalah ..................................................................... 1

B. Perumusan Masalah ............................................................................ 3

C. Tujuan Penelitian ........................................................................ ...... 3

D. Manfaat Penelitian ...................................................................... ..... 3

BAB II. LANDASAN TEORI

A. Tinjauan Pustaka ......................................................................... ..... 4

1. Rokok .......................................................................................... 4

2. Mangga ......................................................................................... 6

3. Struktur histologis paru ............................................................... 9

a. Bronkiolus .............................................................................. 9

b. Bronkiolus terminalis ........................................................... 10

c. Bronkiolus respiratorius .......................................................... 10

d. Duktus alveolaris .................................................................... 11

e. Alveolus .................................................................................. 11

4. Pertahanan saluran napas ............................................................. 11

5. Hubungan asap rokok dengan mekanisme pertahanan paru ........ 13

6. Interaksi antioksidan dalam mangga dan asap rokok .................. 16

B. Kerangka Pemikiran ........................................................................17

C. Hipotesis ..................................................................................... ..... 18

BAB III. METODE PENELITIAN

A. Jenis Penelitian ................................................................................19

B. Lokasi Penelitian .............................................................................19

C. Subjek Penelitian ........................................................................... . 19

D. Teknik Sampling .............................................................................. 20

E. Desain Penelitian ....................................................................... ...... 20

F. Identifikasi dan Definisi Operasional Variabel Penelitian .............. 21


commit to user

G. Instrumentasi dan Bahan Penelitian .................................................25

H. Cara Kerja......................................................................... .............. 26

I. Teknik Analisis Data ........................................................................ 31

BAB IV. HASIL PENELITIAN ....................................................................... 32

A. Hasil Penelitian ................................................................. ............. 32

B. Analisis Data ................................................................................... 34

BAB V. PEMBAHASAN ......................................................................... ..... 36

BAB VI. SIMPULAN DAN SARAN

A. Simpulan ......................................................................................... 41

B. Saran .......................................................................................... ..... 41

DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................... 42

LAMPIRAN.......................................................................................... ............ 45


commit to user

BAB I

PENDAHULUAN

A. Latar Belakang Masalah

Merokok adalah aktivitas menghirup dan menghembuskan asap dari

pembakaran tembakau dengan berbagai cara (Encarta, 2009). Saat ini

diestimasikan ada sekitar 1,3 milyar orang perokok di dunia. Jumlah kematian

akibat konsumsi rokok adalah 5 juta orang/tahun, jika pola konsumsi yang ada

terus berlangsung, jumlah kematian akan berlipat ganda, mendekati 10 juta orang

pada tahun 2020 (World Health Organization, 2006). Seorang ahli statistik

mengukur bahwa pada perokok selama 5-8 tahun, setiap batang rokok

mengurangi harapan hidup 5,5 menit (Robbins dan Kumar, 1995). Gangguan

kesehatan yang ditimbulkan oleh rokok berasal dari asap utama dan asap samping

pembakaran rokok. Asap samping mengandung kandungan racun yang lebih

tinggi dari asap utama, sehingga berbahaya bagi orang di sekitar lingkungan asap

rokok tersebut (Aditama, 2003).

Asap rokok mengandung 4000 zat kimia berbahaya bagi kesehatan dan

terdapat lebih dari 43 macam racun. Asap rokok itu mengandung antara lain

karbon monoksida (CO), nikotin, dan polycyclic aromatic hidrocarbon yang

mengandung zat pemicu terjadinya kanker, selain itu asap rokok yang dihirup

juga mengandung radikal bebas yang berbahaya (Afriansyah, 2001). Radikal

bebas dapat menimbulkan kerusakan pada protein, lipid, karbohidrat dan asam

nukleat. Paru merupakan organ yang paling sering terpapar dengan radikal bebas

(Koentjahja, 2000). Efek radikal bebas dalam tubuh akan dinetralisir oleh

antioksidan. Tubuh manusia, sebenarnya dapat menghasilkan antioksidan tetapi


commit to user

jumlahnya sering sekali tidak cukup untuk menetralkan radikal bebas yang masuk

ke dalam tubuh (Hariyatmi 2004). Kekurangan antioksidan membutuhkan asupan

dari luar. Beberapa antioksidan dapat dihasilkan dari produk alam seperti rempah,

herbal, sayuran, dan buah (InfoPOM, 2005).

Mangga merupakan buah yang banyak digemari oleh anak-anak maupun

dewasa. Mangga memiliki kandungan beta-karoten dan vitamin C yang berfungsi

sebagai antioksidan di samping kandungan lain yang terdapat di dalamnya

(Afriansyah, 2001). Namun, sejauh ini pengaruh pemberian jus mangga terhadap

kerusakan histologis paru yang dipapar asap rokok belum diketahui.

Beta-karoten dan vitamin C mencegah kerusakan tubuh dengan melindungi

protein, sel, jaringan, dan organ sasaran radikal bebas (Afriansyah, 2001). Beta-

karoten dan vitamin C bekerja sebagai antioksidan yang menstabilkan radikal

bebas dengan melengkapi kekurangan elektron yang dimiliki radikal bebas, dan

menghambat terjadinya reaksi berantai dari pembentukan radikal bebas yang

dapat menimbulkan stres oksidatif (Hariyatmi, 2004).

Berdasarkan uraian di atas peneliti bermaksud ingin mengetahui apakah

mangga yang biasa dikonsumsi masyarakat sehari-hari dapat memberikan efek

proteksi terhadap kerusakan histologis paru akibat paparan asap rokok.

B. Perumusan Masalah

Apakah pemberian jus mangga (Mangifera indica L.) dapat memberikan

efek proteksi terhadap kerusakan histologis paru mencit yang dipapar asap rokok?

C. Tujuan Penelitian


commit to user

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh efek proteksi jus

mangga (Mangifera indica L.) terhadap kerusakan histologis paru mencit yang

dipapar asap rokok.

D. Manfaat Penelitian

1. Manfaat Teoritis :

a. Memberikan informasi ilmiah mengenai efek proteksi mangga terhadap

kerusakan histologis paru mencit yang dipapar asap rokok.

b. Sebagai bahan pertimbangan untuk melakukan penelitian lebih lanjut,

misalnya penelitian dengan subjek manusia.

2. Manfaat Aplikatif

Memberikan informasi ilmiah kepada masyarakat mengenai manfaat buah

mangga sebagai pelindung paru dari efek asap rokok.


commit to user

BAB II

LANDASAN TEORI

A. Tinjauan Pustaka

1. Rokok

Rokok adalah produk yang secara keseluruhan atau bagiannya terbuat

dari daun tembakau sebagai bahan mentah yang kemudian dibentuk untuk

digunakan sebagai rokok, dihisap, dikunyah atau dibaui (World Health

Organization, 2006). Asap rokok adalah salah satu sumber pencemaran

udara. Berdasarkan klasifikasi yang dikeluarkan oleh Enviromental

Protection Agency (EPA), asap rokok merupakan karsinogen penyebab

kanker paru-paru (Schrier, 1994). Asap rokok dibentuk oleh side stream

smoke yaitu asap dari ujung rokok yang terbakar dan main stream smoke

yaitu asap dari ujung filter yang dihisap ke dalam mulut dan paru-paru.

Polusi udara yang ditimbulkan oleh asap rokok utama dan asap rokok

sampingan yang dihembuskan lagi oleh perokok disebut asap rokok

lingkungan (Environmental Tobacco Smoke/ETS) (Tjandra, 2001).

Kandungan bahan kimia pada asap rokok sampingan (side stream smoke)

ternyata lebih tinggi dibanding asap rokok utama, antara lain karena

tembakau terbakar pada temperatur rendah ketika rokok sedang tidak

dihisap, pembakaran menjadi kurang lengkap sehingga mengeluarkan lebih

banyak bahan kimia (Sudoyo, 2006).

Menurut Organisasi Kesehatan Dunia (WHO), lingkungan asap rokok

adalah penyebab berbagai penyakit bagi perokok aktif maupun perokok pasif

yang terpaksa harus turut menghisap asap rokok. Paparan asap rokok yang


commit to user

terus menerus pada manusia sehat akan menambah risiko terkena penyakit

paru-paru dan jantung sebesar 20-30% (Fauzan dkk, 2003).

Setiap batang rokok yang dinyalakan akan mengeluarkan 4000 bahan

kimia beracun yang membahayakan dan bisa menyebabkan kematian yang

50 di antaranya diketahui sebagai zat karsinogenik (Triswanto, 2007). Asap

rokok mengandung komponen berupa gas kimia 92% dan bahan padat 8%

atau partikel aerosol yang terbentuk dari pembakaran tembakau (Yani, 2006).

Setiap satu hirupan asap rokok akan mengandung 1017 molekul Reactive

Oxygen Species (ROS). Reactive Oxygen Species (ROS) diproduksi secara

endogen melalui pengaktifan sel-sel inflamasi seperti neutrofil dan

makrofag. Stress oksidatif yang disebabkan oleh asap rokok akan

menginduksi terjadinya respons inflamasi yang dapat mendestruksi septum

alveolar paru (Sianturi, 2003).

Untuk mendapatkan gambaran mengenai unsur-unsur dalam asap

rokok, dapat diamati pada tabel 1 berikut :

Tabel 1. Unsur Asap Rokok

Senyawa Efek I. Fase Partikel a. Tar Karsinogen b. Hidrokarbon aromatik polinuklear Karsinogen c. Nikotin Stimulator, depresor ganglion,

kokarsinogen d. Fenol Kokarsinogen dan iritan e. Kresol Kokarsinogen dan iritan


commit to user

f. b-Naftilamin Karsinogen g. N-Nitrosonomikotin Karsinogen h. Benzo(a)piren Karsinogen i. logam renik Karsinogen j. Indol Akselerator tumor k. Karbazol Akselerator tumor l. Katekol Kokarsinogen II. Fase gas a. Karbonmonoksida Pengurangan transfer dan

Pemakaian O2 b. Asam Hidrosianat Sitotoksin dan iritan c. Asetaldehid Sitotoksin dan iritan d. Akrolein Sitotoksin dan iritan e. Amonia Sitotoksin dan iritan f. Formaldehid Sitotoksin dan iritan g. Oksida dari Nitrogen Sitotoksin dan iritan h. Nitrosamin Karsinogen i. Hidrozin Karsinogen j. Vinil Klorida Karsinogen

(Purnamasari, 2006).

2. Mangga (Mangifera indica L.)

Mangga atau mango (Mangifera indica L.) merupakan tanaman buah

tahunan yang berasal dari Negara India. Tanaman ini kemudian menyebar

lebih dari 4000 tahun yang lalu ke wilayah Asia Tenggara termasuk

Malaysia dan Indonesia. Jenis yang banyak ditanam di Indonesia Mangifera

indica L. yaitu mangga arumanis, golek, gedong, dan cengkir dan Mangifera

foetida yaitu kweni dan kemang. Saat ini terdapat lebih dari 1000 varietas

mangga di seluruh dunia.

Berdasarkan taksonomi tumbuhan, mangga diklasifikasikan sebagai

berikut (Warintek, 2000) :

Kingdom : Plantae (tumbuh-tumbuhan)

Divisi : Spermatophyta (tumbuhan berbiji)


commit to user

Sub-Divisi : Angiospermae

Klas : Dicotyledonae

Subklas : Rosidae

Ordo : Sapindales

Famili : Anarcadiaceae

Genus : Mangifera

Spesies : Mangifera indica L.

Gambar 1. Mangifera indica L.

Mangga merupakan tanaman yang cocok hidup di daerah tropis dan

sub-tropis dengan musim kering selama tiga bulan. Masa kering diperlukan

sebelum dan sewaktu berbuah. Mangga ditanam di daerah dataran rendah

dan menengah dengan ketinggian 0-500 meter (Warintek, 2005). Pohon

mangga dapat tumbuh hingga 60 kaki dan berbuah setelah 4-6 tahun tanam

(Stewart & Strauss, 2002).

Mangga matang dalam setiap 100 gram terkandung air sekitar 84

persen, vitamin C 65 mg, beta-karoten sebesar 553 µg,dan energi 66 Kal.

Selain itu juga terdapat vitamin A sebesar 3890 SI dan kalium sebesar 189


commit to user

mg. Sebagian besar energi mangga berasal dari karbohidrat berupa gula,

yang membuatnya terasa manis. Kandungan gula ini didominasi oleh gula

golongan sukrosa. Kandungan gula dalam mangga berkisar 7-12 persen

(Afriansyah, 2001).

Mangga pun merupakan sumber beta-karoten, kalium, dan vitamin C.

Beta-karoten adalah zat yang di dalam tubuh akan diubah menjadi vitamin A

(zat gizi yang penting untuk fungsi retina). Beta-karoten dan vitamin C

merupakan antioksidan yang menjaga kesehatan dan menghambat proses

penuaan. Selain itu beta-karoten dapat mencegah dan menekan pertumbuhan

sel kanker serta melindungi asam lemak tidak jenuh ganda dari proses

oksidasi (Avianto, 2006).

3. Struktur Histologis Paru

Sistem pernafasan terdiri atas paru dan saluran-saluran napas, dibagi

atas bagian konduksi dan bagian respirasi. Bagian konduksi terdiri dari

rongga hidung, nasofaring, laring, trakea, bronki, bronkioli, dan bronkioli

terminalis. Sedangkan bagian respirasi terdiri dari bronkiolus respiratorius,

duktus alveolaris, sakus alveolaris, dan alveoli (Eroschenko, 2001).

Paru-paru merupakan organ yang elastis, berbentuk kerucut, dan

letaknya di dalam rongga dada atau toraks (Price & Wilson, 1995). Paru-paru

merupakan kelenjar tubulo alveolar kompleks dengan permukaannya yang

ditutup oleh jaringan ikat longgar yang dilapisi mesotel (Craigmile, 1987).

Paru dibungkus membran serosa yang disebut pleura. Pleura terdiri atas


commit to user

lapisan jaringan ikat tipis, fibroblas, dan serat elastin (Bloom dan Fawcett,

1994). Pleura yang melapisi rongga dada disebut pleura parietalis. Pleura

yang menyelubungi paru-paru disebut pleura visceralis. Di antara pleura

parietalis dan pleura visceralis terdapat suatu lapisan tipis yang berfungsi

untuk memudahkan permukaan bergerak selama pernafasan dan untuk

mencegah pemisahan toraks dan paru (Price & Wilson, 1995).

a. Bronkiolus

Bronkiolus merupakan jalan napas intralobular bergaris tengah 5

mm atau kurang, tidak memiliki tulang rawan maupun kelenjar dalam

mukosanya (Junqueira, 1995). Pada tingkat bronkiolus sudah tidak ada

sel goblet dan epitelnya terdiri atas sel-sel bersilia dan sel-sel bronkial

tanpa silia, disebut sel Clara. Sel-sel ini kolumner dengan apeks bulat

yang menonjol di atas sel epitel lain (Bloom dan Fawcett, 1994). Fungsi

sel Clara diduga ikut berperan terhadap pembentukan cairan bronkiolar.

Sel clara mengandung protein, glikoprotein, dan kolesterol. Sel-sel ini

juga mengeluarkan sejumlah surfaktan yang terdapat di dalam sekret

bronkiolar (Leeson dkk, 1996).

b. Bronkiolus terminalis

Bronkiolus terminalis merupakan saluran udara terkecil yang

tidak mengandung alveoli. Bronkiolus terminalis memiliki garis tengah

kurang lebih 1 mm tanpa diperkuat cincin tulang rawan (Price & Wilson,

1995). Bronkiolus terminalis menampakkan mukosa yang berombak

dengan epitel silindris bersilia dan pada daerah ini tidak terdapat sel

goblet. Lamina propria tipis, selapis otot polos yang berkembang baik,

dan masih ada adventitia pada bronkiolus terminalis (Eroschenko, 2001).


commit to user

c. Bronkiolus Respiratorius

Setiap bronkiolus terminalis bercabang menjadi dua atau lebih

bronkiolus respiratorius yang berfungsi sebagai daerah peralihan antara

bagian konduksi dan bagian respirasi dari sistem pernapasan.

Dindingnya diselingi oleh banyak alveolus sakular tempat terjadi

pertukaran gas (Junqueira, 1995).

d. Duktus Alveolaris

Bagian terminal dari setiap bronkiolus respiratorius bercabang

menjadi beberapa duktus alveolaris. Dinding duktus alveolaris biasanya

dibentuk oleh sederetan alveoli yang saling bersebelahan (Eroschenko,

2001).

e. Alveolus

Alveoli dilapisi sel alveolus tipe I (sel alveolus pipih) yang

berfungsi mengadakan sawar dengan ketebalan minimal yang dengan

mudah dilalui gas. Sel tipe II (sel alveolus kuboid) ditemukan di antara

sel alveolar tipe I. Sel-sel ini mengandung badan berlamel yang

menghasilkan materi yang menyebar di atas permukaan alveolus,

memberi lapisan alveolar ekstraselular yang berfungsi menurunkan

ketegangan pulmoner yaitu surfaktan pulmoner (Junqueira, 1995). Sel

alveolar tipe I merupakan lapisan tipis yang menyebar menutupi lebih

dari 90 persen daerah di permukaan paru (Price & Wilson, 1995).

4. Pertahanan Saluran Pernapasan


commit to user

Permukaan paru-paru yang luas, yang hanya dipisahkan oleh

membran tipis dari sistem sirkulasi, secara teoritis mengakibatkan seseorang

mudah terserang oleh masuknya benda asing (debu) dan bakteri yang masuk

bersama udara inspirasi, tetapi saluran repirasi bagian bawah dalam keadaan

normal adalah steril. Terdapat beberapa mekanisme pertahanan yang

mempertahankan sterilitas ini. Lapisan mukus mengandung faktor-faktor

yang mungkin efektif sebagai pertahanan, yaitu imunoglobulin (terutama

IgA), sel PMN (Polimorfonuklear), interferon dan antibodi spesifik. Refleks

batuk merupakan suatu mekanisme lain yang lebih kuat untuk mendorong

sekresi ke atas sehingga dapat ditelan atau dikeluarkan. Makrofag alveolar

merupakan pertahanan yang paling akhir dan paling penting terhadap invasi

bakteri ke dalam paru-paru. Makrofag alveolar merupakan sel fagositik

dengan sifat dapat bermigrasi dan aktivitas enzimatik yang unik. Sel ini

bergerak bebas pada permukaan alveolus dan meliputi serta menelan benda

atau bakteri. Sesudah meliputi partikel mikroba maka enzim litik yang

terdapat dalam makrofag akan membunuh dan mencerna mikroorganisme

tersebut tanpa menimbulkan reaksi peradangan yang nyata. Partikel debu

atau mikroorganisme ini kemudian diangkut oleh makrofag ke pembuluh

limfe atau ke bronkiolus di mana mereka akan dibuang oleh eskalator

mukosiliaris. Merokok, tertelannya etil alkohol dan pemakaian kortikosteroid

akan mengganggu mekanisme pertahanan ini (Price dan Wilson, 1995).

Paru-paru juga dilindungi oleh proteinase inhibitor. Proteinase

inhibitor ini memberi efek protektif terhadap paru dari proteinase yang

dihasilkan oleh fagositosis dan respons inflamasi dalam melawan agen atau

benda asing yang masuk ke paru. Proteinase inhibitor ini antara lain terdiri


commit to user

dari a1-antitrypsin (a1-AT), a2-macroglobulin, a1-antichymotrypsin, inter-a-

trypsin inhibitor, dan secretory leukocyte protease inhibitor (Simmons,

1991).

5. Hubungan Asap Rokok dengan Mekanisme Pertahanan Paru

Asap rokok adalah penyebab utama kerusakan paru. Salah satu

kerusakan nyata yang disebabkan oleh asap rokok adalah stres oksidatif.

Kondisi stres oksidatif yang diakibatkan oleh asap rokok berkaitan dengan

inaktivasi enzim-enzim proteinase inhibitor, kerusakan epitel saluran napas,

peningkatan sekuestrasi netrofil di mikrovaskuler pulmonal serta ekspresi

gen-gen proinflamasi (Marwan, 2005).

Oksidan dalam asap rokok menimbulkan respons inflamasi dalam

saluran pernapasan. Jejas sel epitel dan aktivasi makrofag menyebabkan

lepasnya faktor kemotaktik yang mengikat neutrofil, lepasnya TNFa, IL-8,

LTB4, dan ROS dalam sirkulasi. IL-8 dan LTB4 dikenal sebagai faktor

kemotaktik neutrofil yang akan mengaktifkan dan merekrut neutrofil ke

saluran napas. Makrofag dan neutrofil yang telah teraktivasi lalu melepaskan

protease dan juga superoxide anion (O2-) yang bersama dengan matrix

metalloproteinase (MMPs) dan neutrophil elastase mengakibatkan

hipersekresi mukus, fibrosis, dan proteolisis pada jaringan paru. Sel T CD8+

sitotoksik juga terlibat dalam proses inflamasi ini (Hansel dan Barnes, 2004).

Makrofag alveolar yang terstimulasi oleh asap rokok dapat

menginaktivasi a1-AT sebagai proteinase inhibitor dalam paru melalui dua

cara yaitu dengan memproduksi elastase sebagai metalloenzim yang dapat

menghambat dan menghidrolisa a1-AT serta dengan memproduksi Reactive

Oxygen Species (ROS) yang akan secara langsung menghambat a1-AT.


commit to user

Elastase dapat merusak struktur protein paru, salah satunya adalah destruksi

septum alveolar (Simmons, 1991).

Merokok menyebabkan meningkatnya jumlah sirkulasi fagosit dan

fagosit yang muncul dapat menstimulasi timbulnya sistem Reactive Oxygen

Species (ROS). Peningkatan jumlah fagosit yang teraktivasi dapat menambah

stres oksidatif lebih besar daripada stres oksidatif akibat merokok itu sendiri.

Kejadian yang penting adalah jejas pada jaringan merupakan peningkatan

adhesi perlekatan fagosit pada dinding kapiler, yang sebelumnya didahului

oleh perlekatan fagosit ke dalam jaringan dan merupakan pusat proses imun

dan inflamasi terutama jejas pada jaringan yang berhubungan dengan ROS.

Asap rokok menyebabkan peningkatan radikal bebas ROS dan RNS

(Reactive Nitrogen Species) yang mengandung komponen kimia yang toksik,

mengaktivasi fagosit yang akhirnya menyebabkan berbagai penyakit. Masih

sedikit bukti bahwa stres oksidatif merupakan penyebab utama penyakit

akibat asap rokok, dan terjadinya peningkatan kebutuhan nutrisi antioksidan

pada perokok dapat disebabkan karena perokok biasanya mempunyai tingkat

sirkulasi nutrisi antioksidan yang menurun (Purnamasari, 2006).

Kebiasaan merokok akan merusak mekanisme pertahanan paru yang

disebut muccociliary clearance. Bulu-bulu getar dan bahan lain di paru tidak

mudah “membuang” infeksi yang sudah masuk karena bulu getar dan alat

lain di paru rusak akibat asap rokok. Selain itu, asap rokok meningkatkan

tahanan jalan napas (airway resistance) dan menyebabkan “mudah

bocornya” pembuluh darah di paru, terjadi kenaikan permeabilitas endotel

kapiler, sehingga menyebabkan protein plasma keluar bersama cairan dan

tertimbun di jaringan serta menyebabkan edema. Asap rokok juga diketahui


commit to user

dapat menurunkan respons terhadap antigen sehingga kalau ada benda asing

masuk ke paru tidak lekas dikenali dan dilawan (Aditama, 2003).

Pada perokok aktif kronis, terjadi obstruksi kronik berat saluran

napas, diketahui terjadi inflamasi, atrofi, metaplasia sel goblet, metaplasia sel

squamosa, dan sumbatan lendir pada bronkiolus terminalis dan bronkiolus

respiratorius yang mengakibatkan penyempitan saluran napas (Sudoyo,

2006).

Asap rokok meningkatkan tahanan jalan napas (airway resistance).

Akibatnya, pembuluh darah di paru mudah bocor. Juga merusak sel pemakan

bakteri pengganggu dan menurunkan respons terhadap antigen, sehingga bila

benda asing masuk ke dalam paru-paru, tidak ada pendeteksinya. Asap rokok

juga memberikan pengaruhnya terhadap fungsi imunologis yaitu peningkatan

jumlah leukosit polimorfonuklear terutama neutrofil yang memberikan

gambaran mikroskopis berupa sequestrasi leukosit polimorfonuklear

terutama neutrofil pada mikrovaskuler paru-paru, limfosit T, dan beberapa

kasus ditemukan penigkatan IgE (Rosmawati, 2008).

6. Interaksi Antioksidan dalam Mangga dan Asap Rokok

Biomarker mengenai hubungan antioksidan dan asap rokok terdiri

dari tiga kategori yaitu stres oksidatif, kerusakan DNA, dan fungsi endotel.

Biomarker dari stres oksidatif terdiri dari antibodi LDL teroksidasi, kuantitas

Malondialdehid (MDA), dan Thiobarbituric Reactive Substances (TBARS).

Asap rokok menyebabkan peningkatan antibodi LDL teroksidasi, MDA, dan

TBARS sehingga terjadi peningkatan stres oksidatif dan ketidakseimbangan


commit to user

proses imun. Asap rokok juga menyebabkan fungsi endotel menjadi

abnormal dan terjadi peningkatan adhesi leukosit ke endotel (Kelly, 2002).

Mangga mengandung elemen-elemen antioksidan yang dapat

menangkal radikal bebas. Elemen tersebut berupa karotenoid yang

merupakan prekursor vitamin A dan vitamin C. Karotenoid yang terkandung

dalam mangga adalah beta-karoten (Afriansyah, 2001).

Beta-karoten selain sebagai antioksidan juga memiliki kemampuan

dalam memperbaiki komunikasi intrasel, imunomodulator, dan aktivitas

antikarsinogenik. Sebagai antioksidan, beta-karoten berperan sebagai

penghancur singlet oxygen (O2-), radical peroxyl scavenger, dan

menghambat peroksidasi lipid. Asupan beta-karoten dapat mengurangi

antibodi LDL teroksidasi, kerusakan DNA, kadar serum peroksidasi lipid

dan serum Malondialdehid (MDA). Beta-karoten lebih efektif dalam

pencegahan kerusakan terhadap oksidan yang masuk ke dalam tubuh, yakni

sebelum terjadinya fase inisiasi (pdrhealth, 2000).

B. Kerangka Pemikiran

Antioksidan : 1. Hambat peroksidasi lipid

2. Radical Peroxyl Scavenger

3. Penghancur O2-

Asap Rokok

Oksidan

Makrofag Alveolar

terstimulasi

Stres Oksidatif (Biomarker: MDA, TBARS, Antibodi LDL teroksidasi )

Karotenoid (beta-karoten), Vitamin C

Imunomodulator Antikarsinogenik

Jus Mangga


commit to user

C. Hipotesis

Pemberian jus mangga (Mangifera indica L.) mempunyai efek proteksi

terhadap kerusakan histologis paru mencit yang dipapar asap rokok.

Elastase ROS

Permeabilitas Endotel Kapiler

Sekuestrasi Netrofil

Inaktivasi a1-AT (Proteinase Inhibitor)

Kebocoran Plasma Infiltrasi Neutrofil

(SelRadang)

Proteolisis

Kerusakan Protein Elastin dan Kolagen

MembranEpitel

Destruksi Septum Alveolar

Protein Plasma Keluar Bersama

Cairan

Tertimbun di Jaringan

Edema Paru

Keterangan : = memacu = menghambat


commit to user

BAB III

METODE PENELITIAN

A. Jenis Penelitian

Penelitian ini bersifat eksperimental laboratorium murni karena

memungkinkan untuk mengendalikan hampir semua variabel luar sehingga

perubahan yang terjadi pada efek (variabel yang dipelajari) hampir sepenuhnya

karena perlakuan (variabel eksperimental)

B. Lokasi Penelitian

Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Histologi Fakultas Kedokteran

Universitas Sebelas Maret Surakarta.

C. Subjek Penelitian

Subjek yang digunakan dalam penelitian ini adalah mencit jantan Swiss

webster yang berumur 2-3 bulan dengan berat badan ± 20-30 g. Besar sampel

tiap kelompok dihitung dengan rumus Federer, dimana (n) adalah jumlah subjek

untuk tiap perlakuan dan (t) adalah jumlah perlakuan.

(n-1)(t-1) > 15

(n-1)(3-1) > 15

2n > 17

n > 8.5

Berdasarkan perhitungan di atas, penulis memutuskan bahwa jumlah subjek

yang akan dipakai dalam penelitian adalah 10 ekor mencit jantan untuk tiap

kelompoknya.

D. Teknik Sampling


commit to user

Pengambilan sampel secara incidental sampling. Sampel dipilih

berdasarkan pertimbangan dan pembatasan untuk melakukan perbandingan

kelompok-kelompok studi (Murti, 2010).

E. Desain Penelitian

Menggunakan The Post Test Only Control Group Design

(Taufiqqurohman, 2003).

X : Subjek Penelitian

K : Kelompok Kontrol

PI : Kelompok Perlakuan I

PII : Kelompok Perlakuan II

O : Pemberian aquades 0,2 ml/20g BB mencit per oral tiap hari selama

14 hari berturut-turut.

X1 : Kandang diberi paparan asap dari 1 batang rokok tiap hari selama

14 hari berturut-turut.

X2 : Kandang diberi paparan asap dari 1 batang rokok tiap hari selama

14 hari berturut-turut, 2 jam sebelumnya mencit telah diberi 0,2

ml/20g BB mencit/hari per oral jus mangga.

O1 : Observasi kelompok kontrol pada hari ke – 15 setelah perlakuan.

O2: Observasi kelompok perlakuan I pada hari ke – 15 setelah

perlakuan.

X

PII

K

PI

O

X1

X2

O1

O2

O3

Dibandingkan


commit to user

O3 : Observasi kelompok perlakuan II pada hari ke – 15 setelah

perlakuan.

F. Identifikasi dan Definisi Operasional Variabel

1. Variabel Bebas

Yang menjadi variabel bebas adalah status pemberian jus mangga. Yang

dimaksud dengan status pemberian jus mangga adalah pemberian jus mangga

dengan dosis 0,2ml/20g BB mencit yang diberikan satu kali sehari dengan

menggunakan sonde lambung 2 jam sebelum pengasapan rokok selama 14

hari berturut-turut. Jus mangga dibuat dari mangga matang jenis golek. Skala

pengukuran untuk variabel bebas adalah skala nominal.

2. Variabel Terikat

Variabel terikat pada penelitian ini adalah kerusakan struktur histologis

paru mencit. Yang dimaksud dengan kerusakan struktur histologis paru

mencit adalah derajat kerusakan gambaran histologis paru mencit yang

terpapar asap rokok, setelah mendapatkan perlakuan berupa pemberian jus

mangga.

Derajat kerusakan struktur histologis paru pada penelitian ini

diklasifikasikan sebagai berikut :

a. Normal, jika pada pengamatan dengan mikroskop cahaya perbesaran

400x dari 5 lapang pandang semuanya menunjukkan gambaran

mikroskopis normal.

b. Derajat ringan, jika pada pengamatan dengan mikroskop cahaya

dengan perbesaran 400x dari 5 lapang pandang menunjukkan

gambaran mikroskopis kerusakan ringan dengan jumlah lapang

pandang terbanyak.


commit to user

c. Derajat sedang, jika pada pengamatan dengan miskroskop cahaya


gambaran mikroskopis kerusakan sedang dengan jumlah lapang

pandang terbanyak.

d. Derajat berat, jika pada pengamatan dengan miskroskop cahaya


gambaran mikroskopis kerusakan berat dengan jumlah lapang

pandang terbanyak.

Jadi penentuan beratnya derajat kerusakan preparat didasarkan pada

gambaran kerusakan mikroskopis terbanyak yang ditemukan dari 5 lapang

pandang pada mikroskop cahaya dengan perbesaran 400x.

a. Adapun yang dimaksud dengan gambaran mikroskopis normal adalah

bila pada satu lapang pandang dengan perbesaran 400x tidak

ditemukan adanya tanda-tanda kerusakan seperti infiltrasi sel radang,

edema interstisial, maupun destruksi septum alveolar.

b. Adapun yang dimaksud dengan gambaran mikroskopis kerusakan

ringan bila pada satu lapang pandang dengan perbesaran 400x

dijumpai adanya gambaran berupa salah satu dari : infiltrasi sel

radang atau edema interstisial atau destruksi septum alveolar, atau

ketiga-tiganya pada < 1/3 lapang pandang.

c. Yang dimaksud dengan gambaran mikroskopis kerusakan sedang bila

pada satu lapang pandang dengan perbesaran 400x dijumpai adanya

gambaran berupa salah satu dari : infiltrasi sel radang atau edema

interstisial atau destruksi septum alveolar, atau ketiga-tiganya pada

1/3 - 1/2 lapang pandang.


commit to user

d. Yang dimaksud dengan gambaran mikroskopis kerusakan berat bila

pada satu lapang pandang dengan perbesaran 400x dijumpai adanya

gambaran berupa salah satu dari : infiltrasi sel radang atau edema

interstisial atau destruksi septum alveolar, atau ketiga-tiganya pada >

1/2 lapang pandang.

Skala pengukuran variabel terikat adalah skala ordinal.

3. Variabel Luar yang Terkendali

a. Galur mencit

Penelitian ini menggunakan mencit dengan galur yang sama yaitu

Swiss webster.

b. Umur dan berat badan mencit

Variabel ini dikendalikan dengan menyamakan umur mencit

berumur 2-3 bulan dengan berat badan ± 20 gram.

c. Jenis Kelamin

Semua subjek berjenis kelamin jantan.

d. Makanan dan Minuman

Makanan yang diberikan pada mencit berupa pelet dan minuman

dari air PAM ad libitum.

e. Tempat Hidup

Tempat hidup dikendalikan dengan menyamakan kandang mencit

dengan ukuran 35 x 25 x 12 cm.

f. Suhu dan Kelembaban Ruangan

Suhu ruangan dijaga dengan suhu berkisar 23o C – 27o C dengan

kelembaban 50% hingga 60%.


commit to user

4. Variabel Luar yang tidak Terkendali.

a. Patogenesis suatu zat yang dapat merusak paru selain radikal bebas yaitu

reaksi hipersensitivitas terhadap asap rokok dan efek toksiknya.

b. Kondisi psikologis mencit

Kondisi ini dipengaruhi oleh lingkungan sekitar. Karena

lingkungan yang terlalu gaduh atau ramai, pemberian perlakuan berulang

kali, dan perkelahian antar mencit dapat mempengaruhi kondisi psikologis

ini.

c. Imunitas (sistem kekebalan) dari masing-masing binatang percobaan.

G. Instrumentasi dan Bahan Penelitian

1. Alat :

a. Kandang hewan percobaan dengan ukuran 35 x 25 x 12 cm.

b. Tempat pengasapan mencit dengan asap rokok

c. Timbangan duduk dan timbangan neraca

d. Sonde lambung

e. Alat bedah hewan percobaan (scalpel, pinset, gunting, jarum, dan

meja lilin)

f. Alat untuk pembuatan preparat histologi

g. Mikroskop cahaya medan terang

h. Kamera nikon

i. Gelas ukur dan pengaduk

j. Blender

k. Saringan Jus

2. Bahan :


commit to user

a. Makanan hewan percobaan (pelet)

b. Rokok kretek (merk dagang ada pada penulis)

c. Aquadest

d. Bahan untuk membuat preparat histologis dengan pengecatan

e. Hematoxilin Eosin

f. Mangga (Mangifera indica L.) jenis golek

H. Cara Kerja

1. Langkah pertama

a. Membuat Jus Mangga

Jus mangga dibuat dari buah mangga yang matang dari jenis golek.

Dengan perhitungan dosis sebagai berikut :

1) Jumlah kandungan beta-karoten yang terdapat dalam 100 gram

mangga matang : 553 µg (Afriansyah, 2001).

2) Kebutuhan antioksidan beta-karoten untuk manusia adalah 60 µg/hari

3) Nilai konversi dari manusia ke mencit adalah 0,0026 (Ngatidjan,

1991).

4) Dosis mangga matang yang dibutuhkan untuk manusia perhari :

Kebutuhan beta-karoten perhari x 100 g

kandungan beta-karoten

60 g x 100 g = 10,84 g mangga 11 gram mangga

553 g

5) Dosis mangga matang yang dibutuhkan untuk mencit :

dosis untuk manusia x nilai konversi :

11 g x 0,0026 = 0,0286 g 0,03 g


commit to user

= 30 mg mangga

6) Pengenceran jus mangga :

Jus mangga dibuat secara kolektif untuk 10 ekor tikus dalam satu

kelompok perlakuan. Mangga yang di jus setiap kalinya sebanyak 30

g daging buah. Setelah di jus, mangga kemudian diencerkan dengan

aquadest hingga volumenya mencapai 200 ml aquadest, sehingga

dalam 200 ml mengandung 30 gram mangga atau dalam tiap 0,2 ml

jus mengandung 0,03 gram (30 mg) mangga. Setelah itu, diambil

sebanyak 0,2 ml untuk diberikan secara per oral pada tiap mencit.

b. Membuat kandang perlakuan

Pengasapan rokok dilakukan dalam kandang tertutup berukuran 50 x 35 x

20 cm dengan ventilasi berukuran 20 x 10 cm.

2. Langkah kedua

Mencit diadaptasikan selama tujuh hari di Laboratorium Histologi Fakultas

Kedokteran UNS, Surakarta. Suhu dan kelembaban ruangan tetap dijaga.

Pada hari ke–8 dilakukan penimbangan untuk menentukan dosis dan

dilakukan perlakuan.

3. Langkah ketiga

Pada minggu kedua mulai dilakukan percobaan. Sampel mencit sebanyak 30

ekor dibagi menjadi 3 kelompok secara random, masing – masing kelompok

10 ekor. Kelompok pertama sebagai kelompok kontrol (K) hanya diberi

aquadest 0,2ml/20g BB per oral tiap hari selama 14 hari berturut-turut.

Kelompok kedua sebagai kelompok perlakuan I (PI) diberi perlakuan berupa

pengasapan dengan 1 batang rokok dalam kandang setiap hari selama 14 hari

berturut-turut. Kelompok ketiga sebagai kelompok perlakuan II (PII) diberi

perlakuan berupa pengasapan dengan 1 batang rokok dalam kandang setiap


commit to user

hari selama 14 hari berturut-turut, namun 2 jam sebelumnya diberi 0,2ml/20g

BB jus mangga per oral sekali sehari. Di luar jadwal perlakuan tersebut

mencit diberi makan berupa pellet dan minum air PAM ad libitum.

4. Langkah keempat

Setelah diberi perlakuan selama 14 hari, satu hari kemudian semua mencit

dikorbankan secara dislokasi leher, diambil organ paru bagian kanan lobus

tengah untuk selanjutnya dibuat preparat histologis dengan metode blok

parafin dan pengecatan HE. Hal ini dilakukan pada satu hari setelah hari ke-

14 agar efek perlakuan masih tampak nyata. Pengambilan paru bagian kanan

lobus tengah ini hanya untuk homogenitas sampel. Dari bagian paru yang

diambil dari setiap mencit dibuat 3 irisan dengan ketebalan 3-4 µm. Jarak

antara irisan satu dengan yang lain ± 25 irisan. Dengan demikian dari setiap

kelompok mencit terdapat 30 irisan/preparat. Pengamatan preparat jaringan

paru dengan pembesaran 400x untuk mengamati seluruh lapangan pandang,

kemudian ditentukan daerah yang akan diamati (ada kerusakan).

5. Langkah Kelima

Setiap preparat jaringan paru diamati gambaran mikroskopisnya dengan

mikroskop cahaya perbesaran 400x. Dengan perbesaran 400x ini, setiap

preparat diamati pada 5 lapang pandang secara acak. Dari setiap lapang

pandang, dilihat apakah gambaran yang terlihat normal (tidak ada kerusakan

histologis) atau memberikan gambaran mikroskopis kerusakan derajat

ringan, sedang, atau berat. Gambaran mikroskopis pada satu lapang pandang

dikatakan normal bila dari satu lapang pandang tersebut tidak ditemukan

adanya tanda-tanda kerusakan mikroskopis seperti : infiltrasi sel radang,

edema interstisial, maupun destruksi septum alveolar. Gambaran


commit to user

mikroskopis pada satu lapang pandang dikatakan memberikan gambaran

kerusakan ringan bila dari satu lapang pandang dijumpai adanya salah satu

gambaran dari : infiltrasi sel radang, edema interstisial, maupun destruksi

septum alveolar atau ketiga-tiganya pada < 1/3 lapang pandang. Gambaran

mikroskopis pada satu lapang pandang dikatakan memberikan gambaran

kerusakan sedang bila dari satu lapang pandang dijumpai adanya salah satu

gambaran dari : infiltrasi sel radang, edema interstisial, maupun destruksi

septum alveolar atau ketiga-tiganya pada 1/3 - 1/2 lapang pandang.

Gambaran mikroskopis pada satu lapang pandang dikatakan memberikan

gambaran kerusakan berat bila dari satu lapang pandang dijumpai adanya

salah satu gambaran dari : infiltrasi sel radang, edema interstisial, maupun

destruksi septum alveolar atau ketiga-tiganya pada > 1/2 lapang pandang.

Penentuan beratnya derajat kerusakan preparat didasarkan pada gambaran

kerusakan mikroskopis terbanyak yang ditemukan dari 5 lapang pandang

dengan mikroskop cahaya perbesaran 400x. Namun jika dari 5 lapang

pandang tidak terdapat gambaran kerusakan mikroskopis sama sekali maka

preparat dikatakan normal. Jika dari 5 lapang pandang terdapat 4 lapang

pandang dengan gambaran mikroskopis normal dan 1 lapang pandang

menunjukkan gambaran kerusakan mikroskopis, maka derajat kerusakan

preparat tersebut sesuai dengan gambaran kerusakan mikroskopis yang

ditemukan (misal : kerusakan ringan, sedang, atau berat). Bila dari 5 lapang

pandang terdapat gambaran kerusakan mikroskopis lebih dari satu lapang

pandang maka derajat kerusakan preparat sesuai dengan jumlah kerusakan

yang terbanyak (misal yang terbanyak adalah lapang pandang dengan

kerusakan ringan maka derajat kerusakan preparat tersebut adalah ringan).


commit to user

Namun apabila ditemukan jumlah kerusakan lapang pandang yang sama

dengan gambaran yang berbeda (misal dari 5 lapang pandang terdapat 3

lapang pandang normal, 1 lapang pandang dengan kerusakan ringan, dan 1

lapang pandang kerusakan sedang) maka pengamatan pada preparat

ditambah satu lapang pandang lagi. Dan bila masih ada gambaran kerusakan

yang berbeda dengan jumlah lapang pandang yang sama maka pengamatan

ditambah satu lapang pandang lagi, demikian seterusnya sampai diperoleh

jumlah yang tidak sama. Untuk keperluan penghitungan statistik, preparat

normal diberi skor 0, preparat dengan derajat kerusakan ringan diberi skor 1,

preparat dengan derajat kerusakan sedang diberi skor 2, dan preparat dengan

derajat kerusakan berat diberi skor 3.

I. Teknik Analisis Data Statistik

Data yang diperoleh dianalisis secara statistik dengan uji Kruskal Wallis

untuk mengetahui perbedaan yang bermakna di antara semua kelompok

perlakuan, kemudian untuk mengetahui perbedaan di antara dua kelompok

perlakuan digunakan uji statistik Mann Whitney (Murti, 2010). Derajat

kemaknaan yang digunakan a = 0,05. Data diolah menggunakan program

komputer SPSS versi 15.


commit to user

BAB IV HASIL PENELITIAN

A. Data Hasil Penelitian

Dari penelitian mengenai pengaruh pemberian jus mangga terhadap

kerusakan histologis paru mencit yang dipapar asap rokok, diperoleh data

hasil pengamatan pada setiap kelompok perlakuan seperti tercantum pada

tabel 2. Data yang diperoleh dari hasil penelitian merupakan data ordinal

yaitu gambaran kerusakan histologis paru yang dibagi dalam 4 kategori.

Keempat kategori itu adalah kategori normal, kerusakan derajat ringan,

sedang, dan berat. Derajat kerusakan paru didasarkan pada beberapa

parameter yaitu : destruksi septum alveolar, edema paru, dan infiltrasi sel

radang.

Pada pengamatan sediaan preparat, gambaran mikroskopis destruksi

septum alveolar berupa adanya septum alveolar yang mengalami penipisan,

atrofi, dan pada beberapa tempat terdapat kerusakan total septum alveolar.

Gambaran mikroskopis edema paru pada pengamatan sediaan

preparat ditandai dengan bertambah longgarnya jaringan pada septum

alveolar, dan dapat pula ditemukan adanya alveolus yang berisi cairan.

Gambaran mikroskopis infiltrasi sel radang pada pengamatan sediaan

preparat berupa sebukan sel radang pada jaringan interstisial paru.

Tabel 2. Data Gambaran Kerusakan Preparat pada Masing-Masing Kelompok Kelompok Preparat

Normal Preparat Derajat

Kerusakan Ringan

Preparat Derajat

Kerusakan Sedang

Preparat Derajat

Kerusakan Berat

∑

K 6 15 9 0 30


commit to user

PI 0 0 6 24 30

PII 0 18 9 3 30

Gambar 4.1 Histogram Jumlah Kerusakan Preparat pada Masing-Masing

Kelompok

Keterangan :

K : Kelompok Kontrol, mencit mendapat aquadest sebanyak 0,2

ml/20g BB mencit per oral selama 14 hari berturut-turut

PI : Kelompok Perlakuan I, mencit diberi paparan asap dari 1

batang rokok setiap hari selama 14 hari berturut-turut.

PII : Kelompok Perlakuan II, mencit diberi paparan asap dari 1

batang rokok setiap hari selama 14 hari berturut-turut, dan 2

jam sebelumnya telah diberi jus mangga 0,2 ml/20g BB

mencit per oral setiap hari

Berdasarkan tabel 2 diketahui bahwa pada kelompok kontrol didapati

adanya gambaran yang bervariasi yaitu gambaran normal, kerusakan ringan,

dan kerusakan sedang. Pada kelompok kontrol tidak ditemukan adanya


commit to user

gambaran kerusakan berat. Gambaran yang ditemukan pada kelompok ini

sebagian besar berupa gambaran mikroskopis kerusakan ringan. Sedangkan

pada kelompok perlakuan I ditemukan gambaran mikroskopis kerusakan

berat dengan jumlah terbanyak dibandingkan dengan kelompok lainnya, dan

tidak ditemukan adanya gambaran normal. Pada kelompok perlakuan II juga

tidak ditemukan gambaran yang normal namun ditemukan gambaran

mikroskopis kerusakan ringan dengan jumlah terbanyak dibandingkan

dengan kelompok perlakuan lainnya.

B. Analisis Data

Analisis data dilakukan dengan uji statistik Kruskal Wallis dan Mann

Whitney. Uji statistik Kruskal Wallis dilakukan untuk mengetahui bahwa

paling sedikit satu kelompok menunjukkan nilai yang lebih besar daripada

kelompok lainnya, kemudian untuk mengetahui adanya perbedaan yang

bermakna diantara dua kelompok perlakuan dilakukan uji statistik Mann

Whitney.

Dari perhitungan statistik menggunakan uji Kruskal Wallis

didapatkan nilai p = 0,000. Karena nilai p < 0,05, maka dapat disimpulkan

bahwa paling tidak terdapat satu kelompok menunjukkan nilai-nilai yang

lebih besar dari kelompok lainnya.

Untuk mengetahui kelompok mana yang mempunyai nilai-nilai yang

lebih besar, maka dilakukan analisis dengan uji Mann Whitney. Berikut ini

adalah hasil uji statistik Mann Whitney.

Tabel 3. Hasil Analisis Uji Statistik Mann Whitney

Kelompok yang

dibandingkan n1 n2 p Perbedaan


commit to user

K-PI 30 30 0,000 Bermakna

K-PII 30 30 0,064 Tidak Bermakna

PI-PII 30 30 0,000 Bermakna

Keterangan :

n1 : Jumlah sampel pada kelompok pertama

n2 : Jumlah sampel pada kelompok kedua

p : Nilai signifikansi

Dari hasil perhitungan uji statistik Mann Whitney yang tertera pada

tabel 3, didapatkan adanya perbedaan yang bermakna antara K-PI dan PI-PII.

Sedangkan untuk K-PII didapatkan hasil yang tidak bermakna


commit to user

BAB V

PEMBAHASAN

Berdasarkan data yang diperoleh dari hasil penelitian yang telah dihitung

dengan uji Kruskal Wallis dan Mann Whitney membuktikan adanya pengaruh

pemberian jus mangga terhadap struktur histologis paru mencit yang diberi paparan

asap rokok. Pada penelitian ini, kerusakam histologis paru mencit dinilai

berdasarkan adanya destruksi septum alveolar, edema paru, dan adanya infiltrasi sel

radang.

Hasil uji statistik menunjukkan perbedaan yang bermakna antara kelompok

kontrol dan kelompok perlakuan I, kelompok perlakuan I dan kelompok perlakuan

II, dan menunjukkan perbedaan yang tidak bermakna antara kelompok kontrol dan

kelompok perlakuan II.

Perbedaan yang bermakna pada kelompok kontrol dan kelompok perlakuan I

disebabkan karena pada kelompok perlakuan I mendapat paparan asap rokok yang

mengandung radikal bebas yang memicu terjadinya stress oksidatif sehingga

menimbulkan kerusakan pada muccociliary clearance. Bulu-bulu getar, refleks

batuk, dan makrofag alveolar tidak dapat berfungsi dengan baik membuang partikel

atau bakteri yang masuk ke dalam paru-paru sehingga meningkatkan risiko

terjadinya infeksi dan inflamasi dalam paru-paru (Aditama, 2003).

Asap rokok juga dapat menyebabkan destruksi septum alveolar paru. Hal ini

disebabkan oleh teraktivasinya makrofag alveolar yang dapat menginaktivasi a1-AT

sebagai proteinase inhibitor dalam paru melalui dua cara yaitu dengan memproduksi

elastase serta dengan memproduksi Reactive Oxygen Species (ROS). Elastase dapat

merusak struktur protein paru, sehingga dapat menyebabkan destruksi septum

alveolar. Selain itu, asap rokok meningkatkan tahanan jalan napas (airway


commit to user

resistance) dan menyebabkan “mudah bocornya” pembuluh darah di paru, terjadi

kenaikan permeabilitas endotel kapiler, sehingga menyebabkan protein plasma

keluar bersama cairan dan tertimbun di jaringan serta menyebabkan edema. Asap

rokok juga memberikan pengaruhnya terhadap fungsi imunologis yaitu peningkatan

jumlah leukosit polimorfonuklear terutama neutrofil yang memberikan gambaran

mikroskopis berupa sequestrasi leukosit polimorfonuklear terutama neutrofil pada

mikrovaskuler paru-paru (Rosmawati, 2008).

Menurut penelitian yang dilakukan oleh Koentjahja (2009), asap rokok

menyebabkan terjadinya stres oksidatif yang merusak alveolus paru. Oksidan yang

terdapat dalam asap rokok dapat menyebabkan kerusakan oksidatif yang signifikan

pada protein mikrosom dan meningkatkan terjadinya proteolisis yang disebabkan

oleh ketidakseimbangan antara protease dan antiprotease. Proteolisis dapat

menyebabkan kerusakan dinding alveolus paru dan lama-kelamaan akan merusak

seluruh paru-paru. Selain itu oksidan yang terdapat dalam asap rokok juga dapat

menimbulkan peroksidasi lipid di membran sel epitel paru yang menyebabkan

membran menjadi kaku dan mengalami kerusakan. Hal ini dapat dicegah dengan

pemberian antioksidan.

Pada kelompok kontrol di penelitian ini ditemukan adanya gambaran

mikroskopis kerusakan ringan dan sedang. Gambaran ini disebabkan oleh adanya

variabel luar yang tidak bisa dikendalikan seperti kondisi psikologik mencit,

imunitas mencit, dan patogenesis suatu zat yang dapat merusak struktur histologis

paru-paru mencit selain radikal bebas yaitu reaksi hipersensitivitas.

Pada penelitian ini didapatkan perbedaan yang bermakna antara kelompok

perlakuan I dan kelompok perlakuan II. Hal ini disebabkan karena radikal bebas

yang terdapat pada kelompok perlakuan II direduksi dan dicegah pembentukannya


commit to user

oleh antioksidan yang terdapat pada jus mangga. Antioksidan terbanyak yang

terdapat dalam jus mangga adalah beta-karoten dan vitamin C. Kedua antioksidan

ini tergolong sebagai radical scavenging antioxidants yang berfungsi mencegah

terbentuknya radikal bebas dan menghancurkan radikal bebas yang sudah terbentuk

(Arief, 2005).

Menurut penelitian yang dilakukan oleh Darmono dan Mulyono (2006), asap

rokok menyebabkan kerusakan oksidatif dan beta-karoten serta vitamin C yang

terdapat dalam jus mangga memiliki kandungan antioksidan yang efektif. Asap

rokok menyebabkan oksidasi dalam plasma protein dan kerusakan pada organ

seperti pada hati, ginjal, dan paru. Kandungan beta-karoten dan vitamin C yang

terdapat dalam jus mangga berfungsi sebagai antioksidan sehingga dapat mencegah

asap rokok menginduksi terjadinya kerusakan akibat stres oksidatif. Beta-karoten

dan vitamin C yang terdapat dalam jus mangga berfungsi sebagai antioksidan

dengan mencegah terbentuknya Reactive Oxygen Sprecies seperti hidroxyl radical

(OH-), superoxide anion (O2), dan hydrogen peroxide (H2O2). Selain itu, beta-

karoten juga memiliki manfaat meningkatkan aktivitas enzim Glutation S-

transferase. Glutation S-transferase melindungi sel tubuh terhadap serangan senyawa

elektrofil yang sering bersifat sitostatik, mutagenik, dan karsinogenik.

Meningkatnya aktivitas enzim Glutation S-transferase ini dapat mencegah kerusakan

paru terutama yang disebabkan oleh radikal bebas yang berupa benzo(a)piren yang

memiliki sifat karsinogenik.

Penelitian yang dilakukan oleh Koentjahja (2009), mengungkapkan bahwa

vitamin C sebagai antioksidan berperan menghambat terjadinya proses peroksidasi

lipid pada membran sel epitel paru sehingga tidak mengalami kerusakan, menangkal


commit to user

radikal hidroksil, dan bertindak sebagai donor hidrogen kepada oksidan yang

terdapat dalam asap rokok.

Kelompok kontrol dan kelompok perlakuan II pada penelitian ini

menunjukkan adanya perbedaan yang tidak bermakna dari hasil uji Mann Whitney.

Hal ini menunjukkan bahwa antioksidan yang terdapat dalam jus mangga telah

mampu mengikat radikal bebas yang terdapat dalam asap rokok sedemikian rupa

sehingga menyerupai keadaan kelompok kontrol. Potensi antioksidan yang dimiliki

oleh jus mangga dapat mengurangi terjadinya stress oksidatif yang dihasilkan oleh

asap rokok sehingga menekan terjadinya reaksi inflamasi pada saluran pernafasan.

Dari hasil penelitian ini dapat disimpulkan bahwa kandungan antioksidan

yang terdapat dalam jus mangga dapat mengurangi terjadinya stres oksidatif yang

disebabkan oleh radikal bebas asap rokok.


commit to user

BAB VI

SIMPULAN DAN SARAN

A. Simpulan

Pemberian jus mangga dengan dosis 0,02 ml/20g BB selama 14 hari

berturut-turut dapat mencegah kerusakan struktur histologis alveolus paru

mencit yang disebabkan oleh paparan asap rokok.

B. Saran

1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai manfaat jus mangga

dalam mencegah kerusakan paru menggunakan parameter lain seperti

kemampuan fagositosis makrofag alveolar dan parameter biokimiawi

misal dengan mengukur kadar enzim yang berperan.

2. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai manfaat jus mangga

dengan menggunakan manusia sebagai subyek penelitian.

Documents

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id PENGARUH ...eprints.uns.ac.id/8790/1/186531411201112151.pdfperpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id commit to user ABSTRAK Tarida Dorothy,