DNA FINGERPRINTING

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GENETICA FORENSE

La genetica forense applica tecniche di biologia molecolare al fine di identificare un individuo a partire da una traccia biologica.

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DNA utilizzato in questo esperimento

Campioni di DNA da esaminare

C DNA del “colpevole” rinvenuto sulla scena del crimine

1 DNA dell’ indiziato n° 1

2 DNA dell’ indiziato n° 2

3 DNA dell’ indiziato n° 3LLC Bologna - 2010

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Tecnica del DNA fingerprinting

Digestione

Elettroforesi

Colorazione

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Digestione

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Enzimi di restrizione

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Digestione

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Digestione

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Digestione

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Preparazione Gel di agarosio

                                

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Elettroforesi

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LOADING DYE

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- Glicerolo- Xilen-cianolo- Blu di bromofenolo

Elettroforesi

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Caricamento

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Corsa elettroforetica

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Ordine di caricamento

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Colorazione

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Colorazione

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Osservazione del gel colorato al transilluminatore

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C 1 2 3

-

+

Colorazione

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C 1 2 3

Chi è il colpevole

?

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Chi è il colpevole

?

C 1 2 3 4

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Chi è il colpevole?

C 1 2 3C 1 2 3 C 1 2 3C 1 2 3

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Fonti di materiale biologicoSangue

Liquido seminaleSalivaUrinaCapelliDentiOssaTessutiSudoreFeci

Test generici per la valutazione della natura della traccia da eseguire prima di estrarre e quantificare il DNA ottenuto.

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Assetto cromosomi umani

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DNA: presente in ogni materiale cellulare che contiene un nucleo

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Cos’è la REAZIONE A CATENA DELLA POLIMERASI (PCR) e come funziona?

Tecnica che permette di

amplificare in modo

selettivo SOLO UNA

REGIONE del DNA

Regione da amplificare

Prodotto dell’amplificazione

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MicrosatellitiShort Tandem Repeat

STR

• Disperse in tutto il genoma• Ripetizione: 2-7 bp• Polimorfiche• Regioni non codificanti

= AATG

4

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4 ripetizioni

Tipizzazione individui

AATG AATG AATGAATG

CROMOSOMAPATERNO

4 ripetizioni

CROMOSOMAMATERNO

AATG AATG AATGAATG

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Tipizzazione individui

Gli amplificati hanno le stesse dimensioni

4

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Tipizzazione individui

4 ripetizioni AATG AATG AATGAATG

3 ripetizioni AATG AATG AATG

CROMOSOMAPATERNO

CROMOSOMAMATERNO

Tipizzazione individui

Gli amplificati hanno dimensioni diverse

3 4

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Marcatori STR utilizzati in ambito forense

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ENFSI CODIS

(7 loci) (13 loci)

TH01 TH01

D21S11 D21S11

D18S51 D18S51

vWA vWA

FGA FGA

D8S1179 D8S1179

  TPOX

  CSF1PO

  D16S539

  D7S820

  D13S317

  D5S818

D3S1358 D3S1358

ENFSI (European Network of Forensic Science Institutes)CODIS (Combinated DNA Index System) della FBI.

MARCATORE Profilo

D8S1179 10-10

D21S11 29-30

D7S820 9-12

CSF1PO 12-13

D3S1358 16-17

TH01 6-9.3

D13S317 8-12

D16S539 9-12

vWA 17-17

TPOX 7-8

D18S51 14-14

D5S818 11-11

FGA 23.2-24

PentaE 7-13

PentaD 10-12

Sex F

Esempio di Profilo Genetico

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MARCATORE Profilo

D8S1179 10-10

D21S11 29-30

D7S820 9-12

CSF1PO 12-13

D3S1358 16-17

TH01 6-9.3

D13S317 8-12

D16S539 9-12

vWA 17-17

TPOX 7-8

D18S51 14-14

D5S818 11-11

FGA 23.2-24

PentaE 7-13

PentaD 10-12

Sex F

PROFILO GENETICO

• Se è completo, serve a IDENTIFICARE in maniera CERTA un individuo.

• NON viola la PRIVACY GENETICA.

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Identificazioni storiche: Il mistero di Anastasia Romanov e di Anna Anderson

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L’esecuzione16 luglio 1918. La famiglia Romanov fu arrestata e condotta presso la casa di un mercante di Ekaterinburg dove tutti i suoi componenti furono brutalmente uccisi (insieme al medico, all’infermiera e a due domestici) dai soldati Bolscevichi e i corpi vennero sepolti in una località segreta.

Febbraio 1920. Una donna tenta il suicidio lanciandosi nel Landwehr Canal a Berlino. Ricoverata presso l’ospedale psichiatrico Dalldorf, la donna non fu in grado di rivelare la propria identità se non dopo diciotto mesi, quando asserì di essere Anastasia, figlia dello Zar di Russia.

In ospedale la donna era nota con il nome di Anna Anderson. Fin dal massacro della famiglia Romanov nel 1918, voci persistenti sostennero che alcuni membri della famiglia imperiale fossero sopravvissuti.

Le proveAnna Anderson aveva lo stesso colore di capelli e occhi, la stessa altezza e caratteristiche particolari come un difetto in un dente, che la principessa Romanov aveva.

Anastasia avrebbe potuto scampare alla brutalità dei soldati Bolscevichi?Il tribunale tedesco stabilì che Anna Anderson non fosse in grado di dimostrare di essere Anastasia Romanov. Iniziò quindi una serie di battaglie legali e giornalistiche tra i sostenitori e i detrattori della tesi Anastasia. Non si giunse mai ad una conferma o smentita definitiva sulla reale identità della donna che fu denunciata dai parenti imperiali come imbrogliona.

Anna Anderson continuò a dichiararsi Anastasia Romanov fino alla sua morte nel 1984.

Nel luglio 1991, furono riesumati, nei pressi di Ekaterinburg, i corpi di nove persone. La recente tecnica basata sull'analisi del DNA mitocondriale provò che si trattava dello zar, della zarina, di tre dei loro cinque figli e di altre quattro persone di servizio che risultavano effettivamente essere state uccise insieme ai membri della famiglia reale.

La mancanza di due corpi, presumibilmente proprio quelli della granduchessa Anastasia o della granduchessa Maria e dello zarevič Alessio, riaprì la discussione sull'identità di Anna Anderson.

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Nell‘agosto 2007, nella regione degli Urali furono ritrovati i corpi di due bambini, accanto ai quali vi erano pallottole e boccette di acido solforico (usato per occultare i cadaveri).

Gli esami del DNA conclusi un anno dopo, hanno confermato che i resti rinvenuti sono quelli di Maria e di Aleksej. Ciò chiuderebbe così per sempre la possibilità che qualche membro della famiglia reale fosse riuscito a sfuggire al massacro di Ekaterinburg.

Solo nel 1994 fu possibile eseguire le analisi del DNA su un reperto bioptico del 1979, che portarono definitivamente a concludere che Anna Anderson non poteva in alcun modo essere imparentata con la famiglia Romanov, ma si trattava presumibilmente di una certa Franziska Schanzkowski, una malata di mente di origine polacca scomparsa da un ospedale psichiatrico di Berlino nel 1919

http://ingredientesegreto.linxedizioni.it/2012/02/23/il-mistero-di-anastasia-romanov/

http://it.wikipedia.org/wiki/Anastasija_Nikolaevna_Romanova

http://www.lollymagic.it/defaultxhtml/qs_Storie-e-racconti/id_9/Il+mistero+di+Anastasia+Romanov.html

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EFFETTO CSI

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