15
Sinkronisasi estrus Sinkronisasi estrus merupakan teknik pengontrolan siklus estrus dengan menggunakan hormon reproduksi yang diberikan dari luar tubuh, sehingga proses perkawinan ternak betina dapat ditentukan pada waktu tertentu. Teknik ini memungkinkan terjadinya pengontrolan dalam hal manajemen pemeliharaan ternak, anak dan perolehan produk, dan dapat meningkatkan efisiensi reproduksi ternak (Wildeus, 2000; Whitley and Jackson, 2004; Karikari et al., 2009). Secara ekonomis, teknik ini memiliki nilai yang tinggi untuk meningkatkan produksi daging dan susu pada kambing bangsa perah (Dogan et al., 2005). Dijelaskan lebih lanjut bahwa efisiensi reproduksi yang dimaksud adalah terjadinya peningkatan kualitas dan kuantitas ternak dalam waktu singkat. Pelaksanaan perkawinan dengan IB dapat dilakukan pada waktu yang bersamaan, sehingga efisien waktu. Peningkatan penggunaan IB untuk perkawinan akan meningkatkan kualitas genetik anak yang dihasilkan, selain itu dapat memprediksi waktu kelahiran yang kesemuanya pada akhirnya memudahkan manajemen pemeliharaan ternak dan peningkatan produk yang dihasilkan. Ditambahkan oleh Chao, et al(2008) bahwa SE sudah menjadi metode utama untuk mengatur proses reproduksi pada ternak. Secara umum sinkronisasi estrus pada kambing dilakukan dengan cara mengontrol fase luteal pada siklus ovarium dengan pemberian hormon.

Estrus hewan

Embed Size (px)

DESCRIPTION

kedokteran hewan

Citation preview

Page 1: Estrus hewan

Sinkronisasi estrusSinkronisasi estrus merupakan teknik pengontrolan siklus estrus

dengan menggunakan hormon reproduksi yang diberikan dari luar

tubuh, sehingga proses perkawinan ternak betina dapat ditentukan

pada waktu tertentu. Teknik ini memungkinkan terjadinya

pengontrolan dalam hal manajemen pemeliharaan ternak, anak dan

perolehan produk, dan dapat meningkatkan efisiensi reproduksi ternak

(Wildeus, 2000; Whitley and Jackson, 2004; Karikari et al., 2009).

Secara ekonomis, teknik ini memiliki nilai yang tinggi untuk

meningkatkan produksi daging dan susu pada kambing bangsa perah

(Dogan et al., 2005). Dijelaskan lebih lanjut bahwa efisiensi reproduksi

yang dimaksud adalah terjadinya peningkatan kualitas dan kuantitas

ternak dalam waktu singkat. Pelaksanaan perkawinan dengan IB dapat

dilakukan pada waktu yang bersamaan, sehingga efisien waktu.

Peningkatan penggunaan IB untuk perkawinan akan meningkatkan

kualitas genetik anak yang dihasilkan, selain itu dapat memprediksi

waktu kelahiran yang kesemuanya pada akhirnya memudahkan

manajemen pemeliharaan ternak dan peningkatan produk yang

dihasilkan. Ditambahkan oleh Chao, et al(2008) bahwa SE sudah

menjadi metode utama untuk mengatur proses reproduksi pada

ternak. Secara umum sinkronisasi estrus pada kambing dilakukan

dengan cara mengontrol fase luteal pada siklus ovarium dengan

pemberian hormon.

1. Adapun secara prinsip terdapat dua cara dalam program Sinkronisasi

Estrus yaitu dengan menjaga keberadaan atau mempercepat lisisnya

corpus luteum. Penjagaan CL dilakukan dengan memberikan hormon

progesterone, sedangkan percepatan lisis CL dilakukan dengan

memberikan hormon prostaglandin. Prostaglandin F2α pada mamalia

diproduksi oleh uterus setelah adanya stimulasi dari oxytocin, dimana

tidak terjadi proses implantasi selama fase follikuler. Fungsinya adalah

Page 2: Estrus hewan

agar terjadi proses luteolysis, pembentukan corpus albicans dan

menghentikan produksi progesteron. Prostaglandin F2α dapat bekerja

tergantung pada jumlah reseptor yang ada pada membran corpus

luteum (Sharma et al., 2010). Dijelaskan lebih lanjut bahwa program

SE dengan injeksi tunggal PGF2α secara intramuscular akan

mengakibatkan 80% kambing betina memasuki fase estrus, sedangkan

pada injeksi kedua dengan interval 11 hari setelah injeksi pertama

akan menghasilkan 100% kambing betina estrus.

2. Sinkronisasi birahi pada kambing seperti pada sapi, paling umum

menggunakan prostaglandin atau senyawa analognya. Dengan

tersedianya prostaglandin di pasaran memungkinkan pelaksanaan

sinkronisasi birahi di lapangan beberapa senyawa prostaglandin yang

tersedia antara lain : Reprodin (Luprostiol, Bayer, dosis 15 mg),

Prosolvin (Luprostiol, Intervet, dosis 15 mg), Estrumate ( Cloprostenol,

ICI, dosis 500 µg) dan Lutalyse (Dinoprost, Up John, dosis 25 mg) (BET,

2010). Beberapa studi menunjukkan bahwa selama musim kawin

(breeding season), sebanyak 5 hingga 125 mg prostaglandin

dihasilkan dalam waktu 11-14 hari dalam program sinkronisasi estrus.

Jika dosis prostaglandin yang digunakan lebih dari 250 mg maka dapat

menyebabkan penurunan angka konsepsi meskipun semua betina

menunjukkan tanda-tanda estrus. Hormon prostaglandin komersial

yang banyak digunakan saat ini untuk proses luteolisis (lutalyse)

adalah dinoprost romethamine (Pharmacia and Upjohn co., Kalamazoo,

MI).

Terjadinya estrus setelah pemberian hormon PGF2α disebabkan

karena lisisnya CL pada ovarium (Toelihere, 1981), sehingga kadar

progesterone dalam darah menurun. Menurunnya kadar progesterone

selanjutnya memberikan umpan balik positif ke hipofisa untuk

melepaskan hormon FSH dan LH. Sejalan dengan dikeluarkannya

hormon FSH maka terjadi perkembangan folikel yang kemudian

menghasilkan hormon estrogen yang mengakibatkan ternak betina

Page 3: Estrus hewan

mengalami estrus (Senger, 2003). Dijelaskan lebih lanjut bahwa

program SE dengan injeksi tunggal PGF2α secara intramuscular akan

mengakibatkan 80% kambing betina memasuki fase estrus, sedangkan

pada injeksi kedua dengan interval 11 hari setelah injeksi pertama

akan menghasilkan 100% kambing betina estrus. Hal ini dapat

dijelaskan karena pada injeksi pertama, belum tentu semua kambing

betina memiliki CL yang dapat dilisis oleh PGF2α dibanding injeksi ke

dua. Secara normal, estrus pada kambing akan terjadi 24 s/d 48 jam

setelah injeksi PGF2α, dengan demikian IB dapat dilakukan 10 s/d 12

jam setelah tanda-tanda estrus terlihat.

Pengambilan semen

Surabaya – Kawin suntik atau Inseminasi Buatan (IB) merupakan salah satu cara untuk peningkatan jumlah dan kualitas ternak tanpa kawin langsung dengan pejantan. Tujuan dari IB sendiri digunakan untuk peningkatan mutu ternak. IB sudah banyak diaplikasikan pada peternak di Indonesia, selain pada sapi, IB juga telah digunakan pada Kambing dan Domba.

Kelompok Minat Profesi Veteriner Ternak Besar (KMPV-TB)  telah menggelar Pelatihan IB kambing yang bertujuan untuk meningkatkan pengetahuan dan keterampilan sahabat-sahabat KMPV-TB tentang cara IB pada kambing dan domba. Ditanya Alasan kenapa mengangkat tema IB Kambing dan Domba, Sebelum acara berlangsung Ketua panita Aulia Reza Pradipta (Reza).” Kenapa IB kambing, tau gak kalau ternyata Kambing di Indonesia itu sudah diekspor, dan hanya hewan ternak itu yang di ekspor indonesia.” Terangnya.

Dalam Pelatihan yang dibagi 2 gelombang ini dihadiri peserta yang cukup banyak,  mencapai 70 orang. Para peserta antusias bertanya dengan Dr. Abdul Samik, drh., M.Si, terkait beberapa materi yang disampaikan diantaranya  mengenai  Metode Koleksi Semen, Pemeriksaan Semen secara makros dan mikros, serta bagaimana membuat pengencernya.

Metode koleksi semen prinsipnya sama dengan koleksi semen pada sapi.  Ada yang menggunkan vagina buatan dan Elektroejakulator, penggunaannya disesuakan kondisi pejantan. Apabila pejantan yang masih sehat dan bisa menaiki betina lebih di utamakan menggunakan vagina buatan, sedangkan elektroejakulator digunakan pada pejantan yang sakit, namun memiliki breed yang bagus. Penggunaan elektroejakulator umunya didapatkan semen yang tidak baik karena tercampur kotoran pada preputium terang, Dr Samik, drh.

“Pemerikasaan semen digunakan untuk mengetahui kualitas sperma yang akan digunkan. Ada beberapa parameter, dan tentunya akan anda dapatkan ketika mengikuti kuliah Fisiologi Reproduksi”, tuturnya. Menurutnya kulitas sperma dilihat dari volumenya untuk kambing – domba 1-2 ml, konsitensinya kental, dan bau pada semen domba tajam berbeda pada semen sapi yang baunya mirip air susu.

Page 4: Estrus hewan

Setelah didapatkan semen tentunya dibutuhkan pengencer agar semen itu dapat digunakan untuk meng-IB-kan beberapa kambing serta menjaga agar sperma tetap hidup.

“ Prinsip tidak berbeda jauh dengan IB  pada sapi, tapi dalam pelaksanaannya sedikit berbeda karena tidak ada gun IB untuk kambing biasanya para peternak menggunakan gun modifikasi.” Jelas  Samik. drh.

Cara IB pada Kambing – Domba, bisanya menggunakan stall khusus dengan posisi bagian belakan lebih tinggi, kemdian Spekulum di beri vaselin setelah itu dimasukkan ke dalam vagina. Kemudian di senter agar terihat lubang cervik, kemudian gun IB/ plastic sheet di masukan kedalam vagina dan sprema di semprotkan tepat dalam cervix uteri.

Faktor  keberhasilan IB kambing juga dipengaruhi oleh tingakat kesuburan pejantan, diagnose fenomena birahi, tekni IB,  umur betina, serta kandungan nutrisi pakan yang diberikan.

Menurut  Samik., drh  pada IB kambing dapat juga dialakukan sinkronisasi birahi, sehingga didapatkan keseragaman birahi dan diperoleh anak dalam umur yang sama. “ gertak birahi bisa menggunakan  2 metode. Pertama menggunakan jantan pengusik dan Privasis ( Progestron Intravaginal Spon’s  Device)”

“  IB Kambing – Domba itu sudah banyak yang mengaplikasikan , para peternak kambing di daerah daerah, biasanya di sentra-sentra kambing dan domba.” Terangnya.(my)

Preservasi Semen pada Domba Penampungan Semen

Penampungan semen dilakukan dengan vagina buatan yang terdiri atas tabung karet yang berlubang pentil, karet inner liner, karet pengikat, corong karet, dan tabung penampung berskala. Air panas (40-52oC) dimasukkan ke dalam vagina buatan melalui lubang pentil hingga mencapai setengah bagian, kemudian lubang pentil ditutup dan dipompa. Kekenyalan vagina buatan diukur dengan jari jika dirasakan cukup, karet bagian luar vagina buatan diberi vaselin hingga 1/3 bagian panjangnya. Domba betina pemancing (teaser) dimasukkan ke dalam service create, selanjutnya domba pejantan dibiarkan mendekati domba betina pemancing beberapa kali untuk meningkatkan libido dan setelah domba pejantan menaiki pemancing, bagian preputium dipegang, ujung penis diarahkan ke lubang vagina buatan dengan posisi miring. Semen yang tertampung segera dievaluasi secara makroskopis dan mikroskopis.

Pengenceran Semen Setelah diketahui jumlah volume pengencer sampelsemen dibagi dua bagian, satu bagian diencerkan dengan Sitrat-kuning telur dan satu bagian lagi diencerkan Tris-kuning telur melalui metode pengenceran satu tahap (one step method). Pengenceran dengan metode satu tahap, dilakukan dengan cara memasukkan pengencer melalui dinding gelas erlenmeyer yang berisi semen secara perlahan hingga seluruh pengencer tercampur homogen. Pencampuran antara semen segar dan pengencer dilakukan pada suhu kamar atau menggunakan water bath bersuhu 30oC.

Ekuilibrasi

Page 5: Estrus hewan

Proses ekuilibrasi dilakukan setelah sampel semen dicampur dengan masing-masing bahan pengencer pada gelas erlenmeyer yang telah diberi label SKT (sitratkuning telur) dan TKT (tris-kuning telur), berlangsung selama 2 jam di dalam lemari pendingin (refrigerator) bersuhu 5oC. Selama proses ekuilibrasi berlangsung, sampel semen pada setiap perlakuan pengencer sitrat dan tris-kuning telur dilakukan penambahan gliserol sebanyak 7% dari total volume pengencer secara perlahan-lahan melalui dinding gelas Erlenmeyer (proses gliserolisasi) sampai seluruhnya tercampur merata.

Pengisian straw (packing) Pengisian straw dilakukan dengan menggunakan filler (mikropipet) yang dihubungkan dengan slang plastik pada alat penghisap. Bagian ujung ministraw yang terbuka ditutup dengan cryoseal atau alat sealer. Ministraw dibedakan dalam tiga warna yaitu biru untuk tingkat perlakuan laju penurunan suhu 7oC/menit; kuning untuk tingkat perlakuan laju penurunan suhu 13oC/menit, dan merah untuk tingkat perlakuan laju penurunan suhu 20oC/menit. Sedangkan untuk membedakan jenis pengencer straw ditandai kertas label SKT dan TKT, setiap perlakuan diulang 4 kali.

Pembekuan Semen Pembekuan semen dilakukan secara manual menggunakan kotak styrofoam, yang dibagi menjadi tiga ruang pembekuan yang sama. Di dalam setiap ruang pembekuan terdapat wadah aluminium penampung N2 cair, dan rak tempat straw dengan ketinggian berbeda, berturut-turut 10, 11 dan 12 cm dari permukaan N2 cair. Bagian atas kotak Styrofoam diisolasi dengan kaca setebal 5 mm, dan pada setiap ruangan diberi lubang untuk memasukkan sensor thermometer digital saat mengamati suhu pembekuan. Proses pembekuan pada setiap ruangan, diawali dengan menuangkan N2 cair ke dalam wadah aluminium pada setiap ruang pembekuan setinggi 5 cm. Selanjutnya straw diletakkan pada rak-rak yang ada, dengan bagian atas ditutup kaca sebagai isolator. Untuk memperoleh suhu pembekuan yang berbeda, straw dibekukan hingga –80oC pada tiga tingkat suhu uap N2 yaitu -95, -105, dan -135oC, yaitu dengan cara mengatur ketinggian rak tempat straw dari permukaan N2 cair, setinggi 12, 11, dan 10 cm. Straw warna biru dibekukan pada ketinggian rak 12 cm di atas permukaan N2 cair, selama 2 menit 50 detik, straw kuning pada ketinggian rak 11 cm selama 1 menit 55 detik, dan straw merah pada ketinggian 10 cm selama 1 menit 45 detik, hingga mencapai suhu pembekuan –80oC.

Evaluasi Semen Beku Evaluasi semen beku dilakukan setelah straw di thawing di dalam minitub bersuhu 39oC selama 2 menit, sampai semen dalam straw benar-benar mencair, kemudian sampel semen dikeluarkan untuk dievaluasi secara mikroskopis sesuai dengan peubah yang diamati (Herdiawan., 2004).

Preservasi Semen pada Anjing Spermatozoa dapat bertahan hidup pada ejakulat tanpa pengencer dalam waktu yang singkat sampai maksimal 21 jam. Apabila semen akan digunakan dalam waktu yang agak lama misalnya dikirim ke luar kota maka semen perlu diencerkan dan didinginkan.

Pengencer ditambahkan ke semen untuk mengubah buffer PH; untuk memberikan sumber energi bagi spermatozoa; untuk mencegah pertumbuhan bakteri; dan untuk mencegah kerusakan spermaozoa selama pendinginan, pembekuan, thawing. Beberapa pengencer dapat digunakan

Page 6: Estrus hewan

untuk pendinginan semen maupun untuk pembekuan semen; dan krioproektan seperti gliserol diperlukan hanya pada pengencer yang digunakan untuk semen beku. Penegencer semen anjing secara komersial telah tersedia, tetapi komposisinya tidak tertulis atau dirahasiakan oleh perusahaan tersebut.

Buffer digunakan untuk menjaga keseimbangan ion dan PH di dalam larutan pengencer. pH optimal dari pengencer semen adalah 6,75 sampai 7,5; osmolalitas optimum adalah 300 sampai 325 mOsm. Penggunaan zwitterionik buffer seperti tris (hydroxymethil) aminomethane (TRIS), dan potassium buffer, seerti potasium hydroxide, telah dilaporkan pada pengencer semen anjing. Sodium sitrat mengikat logam berat pada plasma seminal.

Glukosa, dekstrosa, dan laktosa telah telah dijelaskan sebagai sumber energi pada penegncer semen anjing. Cairan seminal anjing mempunyai konsentrasi fruktosa yang sangat rendah dibandingkan cairan seminal pada spesies lain, kemungkinan disebabkan karena anjing jantan tidak mempunyai vesikula seminalis. Fruktosa dapat digunakan sebagai sumber energi pada spermatozoa anjing.

Kuning telur dan gliserol adalah komponen yang paling sering digunakan dalam pengencer semen anjing untuk melindungi spermatozoa dari cold shock dan kerusakan selama pembekuan dan thawing. Persentase spermatozoa motil ynag progresif sesudah pembekuan adalah tertinggi dengan menggunakan pengencer yang mengandung kuning telur 20 % dari volume, dibandingkan dengan 5 atau 10 %. Gliserol mempunyai berat molekul rendah sehingga dapat memasuki sel spermatozoa dan mengikat air intraseluler, menurunkan pemebentukan es intraselluler dan membantu menghilangkan air dari sel secara perlahan.

Pengawetan semen dengan pendinginan Persentase sperma motil yang progresif pada sampel yang diawetkan dengan pendinginan pada 4° sampai 5°C menurun secara gradual dengan waktu. Penurunan motilitas yang nyata terjadi lebih cepat pada pengencer yang mengandung 20% kuning telur dari pada pengencer susu skim. Jika susu skim digunakan harus dipanaskan 92°-95° C selama 10 menit untuk denaturasi enzim dalam susu. Untuk mengoptimalkan angka kebuntingan, pengawetan semen anjing dengan pendinginan terbaik digunakan dalam 48 jam setelah koleksi. Semen anjing biasanya diawetkan pada rata-rata 1 bagian semen ke 2-3 bagian pengencer.

Tahapan untuk mendinginkan semen : Pertama kali dilakukan evaluasi dari kesehatan reproduksi pejantan dengan pemeriksaan fisik lengkap dan evaluasi semen, termasuk kultur semen dan serologi Brucella canis, dan uji untuk gangguan genetik yang khusus untuk ras tersebut. Koleksi semen dapat dilakukan dengan masturbasi pada anjing.

Kemudian pisahkan fraksi kedua (yang kaya spermatozoa) dengan mengganti tabung selama koleksi. Encerkan fraksi yang kaya sperma dengan pengencer I (lihat tabel) pada temperaur kamar, pada rasio 1 bagian semen dengan 2 bagian pengencer. Simpan semen yang telah di encerkan di dalam tabung sentrifus dan utup yang rapat. Masukkan pada kotak styrofoam yang lebih besar dengan 2 ice pack beku, bungkus dengan koran. Kirin ke tempat betina yang membutuhkan sesegera mungkin, idealnya dalam waktu 24 jam.

Page 7: Estrus hewan

Pengiriman dapat dilakukan dengan thermos es yang diisi dengan pecahan es. Tabung sentrifus plastik yang telah diisi semen tersebut ditutup rapat kemudian dilindungi dengan menempatkanya didalam kantung yang tertutup, seperti kantung plastik dengan tabung yang berisi semen kemudian ditempatkan dalam thermos diatas pecahan es dan kemudian ditutup yang rapat. Semen harus dengan hati-hati dihangatkan lagi ke suhu 30-35 ° C sebelum digunakan untuk inseminasi.

Pengawetan semen dengan pembekuan Penggunaan semen beku untuk IB pada anjing tidak seluas seperti pada sapi atau kuda. Anjing jantan harus mempunyai kualias semen ynag sangat bagus dan betina yang akan diinseminasi dengan semen tersebut harus sudah dewasa dan tidak ada gangguan infertilitas atau penyakit pada saluran reproduksinya.

Semen dapat dibekukan di dalam ampul, dalam straw atau dalam pelet. Pelet dibuat dengan mendinginkan semen yang diencerkan dimasukkan kebagian 50-100µl ke dalam solid dry ice, da kemudian disimpan dalam vial nylon yang berlubang pada nitrogen cair. Straw polyvinylchloride (PVC) bervolume 0,25 atau 0, 50 ml dapat diisi dengan semen yang telah diencerkan dan didinginkan, tutup pada ujung akhir dan tutup pada bagian lain, diuapkan diatas uap nitrogen cair dan kemudian straw dimasukkan ke dalam nitrogen cair.

Rata-rata pemebekuan semen anjing yang optimal tergantung pada pengencer dan krioprotektan yang digunakan dan volume dari sampel. Nilai rata-rata pemebkuan dilaporkan bervariasi dari 1, 89 ˚C ke 5 ˚C permenit sampai sampel mencapai - 5˚C, kemudian 10˚C ke 20 ˚C per menit sampai sampel mencapai - 100˚C, sesudahnya sampel dimasukkan ke dalam nirogen cair.

Menjelang penyimpanan jangka panjang semen beku, sempel dari pelet aau straw yang mengandung semen beku yang telah di masukkan ke nitrogen cair paling tidak 5 menit kemudian harus di thawing dan dievaluasi untuk mendapatkan kualitas semen posthawing. Motilitas progresif adalah parameter yang paling sering dinilai untuk evaluasi kualitas spermatozoa anjing yang dithawing setelah pembekuan. Persentase spermatozoa motil yang progresif menurun setelah thawing, dengan nilai yang dilaporkan adalah kurang lebih 50-60%.

Total konsentrasi 100x 106 spermatozoa/ ml digunakan secra rutin untuk pembekuan. Tetapi sewaktu semen dengan kuaitas yang tinggi separuh dari konnsentrasi tersebut, misalnya 50x106spermatozoa dapat digunakan. Dosis IB dari 100-150 juta spermatozoa hidup telah dihubungkan dengan angka konsepsi 75% atau lebih tinggi, tergantung pada kesehatan reproduksi anjing betina waktu inseminasi , dan penempatan semen dalam saluran reproduksi betina.

Metode pembekuan semen anjing telah banyak dilaporkan termasuk teknik menggunakan pengencer dan material. Salah satunya adalah semen yang sudah diencerkan dimasukkan langsung kedalam nirogen cair dan teknik menggunakan methanol sebagai media pembekuan.

Tahapan untuk memproduksi semen beku :

Page 8: Estrus hewan

Setelah anjing jantan dievaluasi kesehatan reproduksinya lengkap seperti pada proses untuk pendinginan semen. Pisahkan fraksi yang kaya spermatozoa dengan mengganti tabung selama koleksi. Tambahkan pengencer I, pada suhu kamar, pada perbandingan 1:1. Tempatkan pada suhu refrigerator selama 1 jam. Label 0, 5 ml straw dengan memberikan nomor identitas, nomor hewan, ras, dan tanggal. Tambahkan 2 bagian pengencer II, pada suhu refrigerator , pada empet bagian 0,5 ml selama periode 45 menit untuk konsentrasi final gliserol 4%. Isi straw 0,5 ml, masukkan gelembung udara untuk mencegah ledakan sumbat selama pembekuan, tutup straw , dan tempatkan di suhu refrigerator selama paling tidak 1, 5 jam. Isi dasar dari kotak styrofoam dengan nitrogen cair. Tempatkan straw pada rak 5 cm di atas permukaan nitrogen cair selama 6 menit, kemudian jatuhkan straw ke dalam nitrogen cair. Sesudah paling tidak 5 menit, pindahkan ke kontainer dan thawing satu straw (60 detik pada waterbath 37 oC) untuk menilai kualitas semen post-thawing. Pengiriman sampel semen dalam kanister yang mengandung nitogen cair atau uap nitrogen cair dalam dry shipper. Yang terakhir akan bertahan selama 1-3 minggu ; recharge kanister pada saat kedatangan ditempat tujuan atau timbang setiap hari untuk mengetahui berkurangnya nitrogen cair dan mungkin hawing satu straw. Informasi yang harus dikirim dengan semen termasuk petunjuk thawing, jumlah spermatozoa dalam setiap straw, dan persentase progresif motilitas setelah thawing.

Pengencer untuk pendinginan semen : komponen diencerkan dalam 1000 ml air Pengencer 1:14, 5 gr Na sitrate ; 12,5 g dekstrose; 250 ml kuning telur; 1000 U/ml K penicillin; 1000µg/ ml streptomisin.800 gr cream (12 % lemak); 200 gr kuning telur ; 1000 U ml benzyl penicillin, 1 mg/ml dihydrostreptomycin.Pengencer untuk semen beku : komponen diencerkan dalam 1000 ml air Pengencer II:14, 5 gr Na sitrate ; 12,5 gr dekstrose; 250 ml kuning telur; 1000 U/ml K penicillin; 1000µg/ ml streptomisin; 80 ml gliserol 29 gr TRIS; 13,2 gr sodium sitrate; 12,5 gr fruktosa; 200 ml kuning telur; 80 ml gliserol

Thawing Straw di thawing dalam water bath (thermos) pada 70˚C selama 8 detik. Sesudah thawing, straw harus dipegang secara vertikal, ujung filter dibawah dan penutup (segel ) di atas, kemudian diketok dengan jari agar gelembung udara ditengah straw berpindah keatas. Straw dipotong pada segelnya dan satu tetes semen ditempatkan pada mikroskop slide pada temperatur 37 ˚C dan periksa dengan mikroskop untuk mengetahui kualitas sesudah thawing. Sering spermatozoa perlu beberapa waktu untuk mulai bergerak sesudah thawing, tetapi 2 menit pada plat penghangat sudah cukup untuk mengembalikan motilitasnya.

Pengenceran semen terdiri dari buffer, lemak, nutrisi, antibiotic dan gliserol:

Buffer berguna mengontrol pH (yang berupa buffer ialah sodium sitrat, kuning telur, dll) Lemak : melindungi membran sitoplasma dari suhu (susu skim dan kuning telur) Nutrisi : mempertahankan metabolisme sel spermatozoa (glukosa dan fruktosa) Antibiotic : menekan pertumbuhan bakteri (penisilin dan gentamisin sulfat) Gliserol : melindungi spermatozoa ari efek merusak dari proses pendinginan Sitrat : memperbaiki daya hidup spermatozoa, sebagai pengganti penyanggah fosfat

dalam pengenceran kuning telur yang berguna untk preservasi daya hidup dan fertilitas spermatozoa (Anonim., 2008).

Page 9: Estrus hewan

Kandungan Komposisi Semen Komposisi semen murni :

Fructosa : berguna bagi spermatozoa sebagai sumber energi dalam bergerak. Asam nitrat : menggumpalkan semen setelah ejakulasi Spermin : memberikan bau khas pada sperma. Seminim : merombak lisis sehingga semen mengencer Prostaglandin : untuk melancarkan pengangkutan spermatozoa dalam saluran kelamin

jantan dan betina Elektrolit terutama Na, K, Zn, Mg untuk memelihara ph plasma seman Enzim pembuahan, inhibitor, hormon dan asam amino serta protein (Anonim., 2008).

Analisis sperma :

Bau saat normalnya khas, tajam dan tidak berbau Warna normal yakni seperti lem, kanji atau putih kelabu Volume ; semen pada sapi dan domba mempunyai volume rendah tetapi konsistensinya

tinggi, sedangkan semen kuda dan babi merupakan cairan yang lebih voluminous tetapi dengan konsentrasi sperma rendah.

Koagulasi ; semen normal setelah ejakualsi segera menggumpal. Bila langsung encer ketika ditambpung berarti ada gangguan pada vesikula seminalis

Viskositas ; kekentalan semen diperiksa dengan alat yang disebut viscometer. Secara sederhana dapat dilakukan dengan jalan mencelupkan batang kaca ke objek yang sudah ditetei semen, diangkat pelan diukur tinggi benang yang terjadi antra batang kaca dan objek sampai batas putus, dan normalnya 3 – 5 cm.

PH ; semen diteteskan dengan batang kaca pada kertas PH berukuran warna petunjuk, dan setiap spesies warna tersebut berbeda – beda.

Motilitas ; Jumlah yang bergerak maju ialah jumlah spermatozoa semua dikurangi jumlah mati. Dianggap normal jiak motil laju > 40 %. Menurut Rehan et al. yang normal % motilnya ialah 63 ± 16 SD dengan range 10 – 95, namun penelitian melaporkan spermatozoa yang tidak bergerak belum tentu mati, mungkin ada sesuatu zat cytotoxin atau antibody yang membuat nya tidak bergerak.

§ Morfologi ; Semen diwarnai dengan giemsa untuk melihat morfologinya, faktor yang membuat abnormal : penyakit alergi, terlalu sering ejakulasi, gangguan pada epididimis, stress dan gangguan hormonal dan saraf (Wildan., 1992).

Pada kancil warna semennya kekuningan, densitas kental, volume 30µl, konsentrasi 102.75±17.8x106 spermatozoa/ml, motilitas 40±1.1%, abnormalitas 21.03±1.05%, viabilitas 63±9.3%. Seminal plasma kancil mengandung protein 65 mg/100ml, 10,2-11.5 mg/100ml fruktosa, 22.07-24.5 mg/100ml sorbitol, 35.03-40.12 mg/100mlasam sitrat, 91.1-94.7 mg/ 100ml sodium, 0.1 mg/100ml potasium, 12.8-124.4 mg/100ml kalsium, 0.8-126.6 mg/100ml magnesium dan 10.17-11.2 mg/100ml khlorida. Pada SDS PAGE ditemukan sebanyak masing-masing 11 protein pada kisaran 15-218 kDa, dan pada kisaran 38-296 kDa.

Page 10: Estrus hewan

Morfologi spermatozoa kancil mirip dengan spermatozoa ruminasia atau hewan domestik umumnya. Kepala pada spermatozoa berbentuk pipih dengan ujung membulat berukuran panjang 5.6µm dan lebar 4.8µm. Panjang keseluruhan spermatozoa (kepala-ekor) pada kancil yaitu 36.52µm. Berdasarkan ukuran, spermatozoa kancil adalah yang terkecil diantara hewan ruminansia. Akrosom dan membran spermatozoa kancil masing-masing mengandung senyawa yang berperan pada proses fisiologis spermatozoa, yaitu senyawa karbohidrat dengan residu gula galaktosa 1-3 dan D-N-Asetilgalaktosamin dan karbohidrat dengan residu gula D-N-Acetilglukosamin dan sialic acid.

Pada uji daya tahan/daya hidup, pada spermatozoa dengan medium tris-kuning telur yang disimpan pada 4oC selama 5 hari, motilitas spermatozoa hilang pada hari pertama penyimpanan, sedangkan viabilitas masih ditemukan sampai dengan hari kelima penyimpanan. Pada percobaan fertilisasi in vitro antara spermatozoa kancil dengan oosit mencit, terlihat spermatozoa kancil dapat memasuki oosit (tanpa zona pelusidal) dan membentuk pronukleus (http://web.ipb.ac.id/).

DAFTAR PUSTAKA

Anonim., 2008. Reproduksi dan Konservasi Hewan. Bag.Reproduksi dan Kebidanan. FKH.UGM. Yogyakarta.

Herdiawan., 2004. Pengaruh Laju Penurunan Suhu dan Jenis Pengencer Terhadap Kualitas Semen Beku Domba Priangan.

Wildan, Yatim. Reproduksi dan Embriologi.1994. Tarsito. Bandung.