4

Click here to load reader

EVALUAREA IMUNOSENESCENºEI ªI INFLAMAºIEI …rjid.com.ro/articles/2007.3/Infectio_Nr-3_2007_Art-03.pdf · råspunsului la imunizåri ¿i cre¿terea inciden¡ei bolilor autoimune

  • Upload
    vandung

  • View
    213

  • Download
    0

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: EVALUAREA IMUNOSENESCENºEI ªI INFLAMAºIEI …rjid.com.ro/articles/2007.3/Infectio_Nr-3_2007_Art-03.pdf · råspunsului la imunizåri ¿i cre¿terea inciden¡ei bolilor autoimune

REVISTA ROMÂNÅ DE BOLI INFECºIOASE – VOL. X, NR. 3, AN 2007 79

INTRODUCERE

În cadrul popula¡iei vârstnice existå o inciden¡åcrescutå de infec¡ii bacteriene (pneumonii, infec¡iiurinare, infec¡ii cutanate ¿i de ¡esuturi moi) ¿i deinfec¡ii virale (reactivarea infec¡iei de herpes zoster,cre¿terea morbiditå¡ii ¿i a mortalitå¡ii datorate viru-sului gripal ¿i virusului respirator sinci¡ial). Cre¿-terea inciden¡ei ¿i severitå¡ii bolilor infec¡ioase laaceste vârste poate fi explicatå prin diminuarearåspunsului imun asociat vârstei.

Existå numeroase dovezi cå a¿a numitele „bolide båtrâne¡e“ sunt cauzate de dereglarea func¡ieiimune ¿i de inflama¡ia excesivå. Imunosenescen¡aeste rezultatul expunerii continue la o varietate deantigeni poten¡iali; expunerea este acceleratå deatrofia timusului, cre¿terea nivelelor serice de cor-tizol ¿i scåderea celor de DHEA, cu înaintarea învârstå. În adi¡ie, stilul de via¡å sedentar ¿i mal-nutri¡ia contribuie la accentuarea imunosenescen¡ei.

Modificårile în sistemul imun au fost observate latoate nivelurile: molecular, biochimic, celular ¿ide organ, iar definirea modificårilor de imuno-senescen¡å poate conduce la noi strategii deimunomodulare. Inflama¡ia cronicå este implicatåîn boli ca ateroscleroza, cancer, disfunc¡ia valvelorcardiace, insuficien¡å cardiacå congestivå, diabet¿i boala Alzheimer (2,3,4). Îmbåtrânirea rezultåîntr-o cre¿tere a citokinelor inflamatorii, care con-tribuie la progresia multor boli degenerative(5,6,7).

Imunitatea celularå este mai afectatå decâtimunitatea umoralå, modificårile fiind atribuiteinvolu¡iei timusului ¿i efectelor cumulative aleîmbåtrânirii asupra celulelor stem hematopoietice¿i a precursorilor limfoizi din måduva osoaså.Stresul fizic ¿i psihic, malnutri¡ia protein-caloricå,anumite deficien¡e minerale, medicamente sausubstan¡e toxice ingerate sau inhalate, expunereala radia¡ii ionizante pot afecta råspunsul imun.

3STUDII ORIGINALE

EVALUAREA IMUNOSENESCENºEI ªIINFLAMAºIEI CRONICE ASOCIATE VÂRSTEI

Iuliana Apostol*, Alma Tudor*, Gheorghe Voiculescu*, Cristina Voinea*,Conf. Dr. Petre Calistru**, Prof. Dr. Emanoil Ceau¿u**

*Funda¡ia „Dr. Victor Babe¿“, Bucure¿ti**Spitalul Clinic de Boli Infec¡ioase ¿i Tropicale „Dr. Victor Babe¿“, Bucure¿ti

U.M.F. „Carol Davila“, Bucure¿ti

REZUMATÎmbåtrânirea este asociatå cu alterarea råspunsului imun, ceea ce determinå cre¿terea susceptibilitå¡ii la infec¡ii, scåderearåspunsului la imunizåri ¿i cre¿terea inciden¡ei bolilor autoimune (1). În prezentul studiu am evaluat råspunsul imun al vârstnicilor¿i statusul inflamator asociat vârstei ¿i am analizat existen¡a unei corela¡ii posibile cu al¡i parametri hematologici, cu statusul clinicactual ¿i cu bolile cronice prezente.Am studiat prospectiv 49 de vârstnici fårå semne de infec¡ii sau inflama¡ii acute în momentul prezentårii ini¡iale, care au fostmonitoriza¡i la 1 lunå, 3 luni ¿i 6 luni.

Cuvinte cheie: imunosenescen¡å, inflama¡ie, infec¡ii, boli autoimune, vârstnici

ABSTRACTAging is accompanied by immune responsiveness alterations, which lead to an increase in susceptibility to infectious diseases, adecrease in response to immunizations, and an increase in autoimmune diseases incidence (1). In this study we have evaluatedthe immune response of the elderly and the aging associated-inflammation status and we correlate the results with other hematologicalparameters, clinical status and the existing chronic diseases. We have lead a prospective study on 49 elderly patients withoutclinical signs of acute infections or inflammation at the beginning of the study, which have been monitored at 1 month, 3 months and6 months.

Key words: immunesenescence, inflamation, infection, autoimmune diseases, elderly people

Page 2: EVALUAREA IMUNOSENESCENºEI ªI INFLAMAºIEI …rjid.com.ro/articles/2007.3/Infectio_Nr-3_2007_Art-03.pdf · råspunsului la imunizåri ¿i cre¿terea inciden¡ei bolilor autoimune

80 REVISTA ROMÂNÅ DE BOLI INFECºIOASE – VOL. X, NR. 3, AN 2007

MATERIAL ªI METODÅ

Studiul prospectiv a fost efectuat pe un lot de49 de vârstnici (persoane peste 60 de ani), fåråinfec¡ii acute respiratorii ¿i fårå semne clinice deinflama¡ie acutå în momentul înrolårii. Vârstniciiau fost examina¡i geriatric, monitoriza¡i pentruapari¡ia de infec¡ii acute respiratorii ¿i din punctde vedere imunologic. Au fost executate urmå-toarele determinåri: hemoleucograma cu formulaleucocitarå; fenotiparea limfocitelor T: nr. absolutde CD3, CD4, CD8 ¿i raportul CD4/CD8; imuno-grama (imunoglobuline ¿i complement C3); pro-teina C reactivå; determinåri de interleukine (IL1,IL2, IL6, IL10) ¿i TNF alfa.

Metodelele utilizate au constat în:– hemoleucograme – efectuate din probe de

sânge recoltat pe K3-EDTA, cu ajutorulanalizorului CELL DYN 3700 (ABBOTT);

– fenotiparea limfocitelor T – din probe desânge recoltat pe K3-EDTA, cu ajutorul cito-metrului FACSCalibur, cu reactivi TriTESTCD4 FITC/CD8 PE/CD3 PerCP, cuTruCOUNT (Becton Dickinson);

– determinarea cantitativå a proteinelor sericespeciale (imunoglobuline, complement, CRP) –prin nefelometrie, cu ajutorul analizoruluiBN ProSpec (Dade Behring);

– determinarea cantitativå a interleukinelor ¿iTNFα din ser – prin chemiluminiscen¡å, cuajutorul analizorului IMMULITE (DPC).

REZULTATE ªI DISCUºII

La momentul selec¡iei în lot au existat 52 depacien¡i. Au fost exclu¿i din analiza datelor 3 pa-cien¡i: 1 – prin nerespectarea prezentårilor cerutede studiu, 1 – decedat la 2 såptåmâni ¿i 1 – de-cedat la 2,5 luni.

Structura lotului de studiu – 49 de pacien¡i,dintre care 36 femei (73,46%) ¿i 13 bårba¡i(26,53%), cu vârsta medie de 70,68 ani.

al markerilor inflamatori. Din punct de vedereclinic au existat 3 cazuri de infec¡ii virale respi-ratorii, 1 caz de plasmocitozå cronicå ¿i 1 caz deinfec¡ie urinarå acutå.

A. Hemoleucograma ¿i formula leucocitarå

În cadrul lotului am urmårit existen¡a sindro-mului anemic, leucocitoza sau leucopenia ¿i alte-rårile cantitative ale trombocitelor. Din totalul de49 de pacien¡i, 35 au avut formula normalå ¿i 14au prezentat modificåri. Dintre cele 14 cazuri cuanormalitå¡i ale hemoleucogramei s-au înregistrat:6 pacien¡i cu sindrom anemic u¿or, 1 pacient cueritrocitozå, 5 pacien¡i cu leucocitopenie, 3 pacien¡icu leucocitozå, 2 pacien¡i cu trombopenie ¿i 1 pa-cient cu trombocitozå.

Cazul cu eritrocitozå ¿i leucocitozå cu eozino-filie marcatå a fost diagnosticat ca infec¡ie para-zitarå cronicå – toxoplasmozå ¿i tratat specific.Cazul cu leucocitozå cu neutrofilie ¿i trombofiliea fost identificat la un pacient cu AVC recent, dars-a normalizat în cursul monitorizårii noastre. Uncaz cu leucocitozå a fost identificat în cadrul uneiinfec¡ii urinare acute ¿i tratat corespunzåtor. Cazu-rile de leucocitopenie cu limfocite scåzute au fostprobabil asociate unor infec¡ii virale intercurenterespiratorii. Dintre cazurile cu leucocite normaleau prezentat formula leucocitarå alteratå un numårde 5 pacien¡i: 3 cazuri cu eozinofile crescute ¿i 2cazuri cu monocite crescute; investigarea pentruboli parazitare sau afec¡iuni cronice nu a eviden¡iatun diagnostic specific. Un caz cu trombocitopenie¿i leucopenie a fost identificat la o pacientå cuinfec¡ie cronicå cu HCV ¿i discretå splenomegalie.

B. Fenotiparea limfocitelor T

Panelul de determinåri din studiul nostru in-clude markerii celulei T tip CD3, CD4 ¿i CD8 ¿iraportul CD4/CD8. Rezultatele sunt raportate com-puterizat ¿i includ atât numårul absolut, cât ¿i pro-centajul din aceste celule.

Limfocitele T-CD3 au înregistrat valori mediide 1351 (VN – 720-2330) la 41 de cazuri (83,68%),valori crescute (medie – 2481) la 5 cazuri (10,2%)¿i valori scåzute (medie – 535) la 3 cazuri (6,12%).

Limfocitele T-CD4 au prezentat o medie avalorilor de 851 (VN – 500-1500) la 43 de cazuri(87,76%), valori crescute (1718 celule/mmc) într-uncaz (2,04%) ¿i valori scåzute – în medie 404 celule/mmc la 6 cazuri (12,24%).

Limfocitele T-CD8 au prezentat valori mediide 433 celule/mmc (VN – 200-1100) la 48 de cazuri(89,79%), cu valori scåzute (115 celule/mmc)într-un singur caz (2,04%).

Fiecare subiect a fost evaluat geriatric la mo-mentele ini¡ial, 1 lunå, 3 luni, 6 luni pentru apari¡iasemnelor de infec¡ii acute sau inflama¡ii acute; lamomentele ini¡ial, 1 lunå ¿i 3 luni fiecare subiecta fost evaluat din punct de vedere imunologic ¿i

Page 3: EVALUAREA IMUNOSENESCENºEI ªI INFLAMAºIEI …rjid.com.ro/articles/2007.3/Infectio_Nr-3_2007_Art-03.pdf · råspunsului la imunizåri ¿i cre¿terea inciden¡ei bolilor autoimune

81REVISTA ROMÂNÅ DE BOLI INFECºIOASE – VOL. X, NR. 3, AN 2007

Raportul CD4/CD8 a fost în medie de 2,16[VN – 0,8-3,4 la 44 cazuri (89,8%) ¿i crescut în 5cazuri (10,2%)].

C. Determinarea cantitativå a IgG, IgA ¿iIgM ¿i C3

Prin determinårile cantitative ale imunoglobu-linelor pacien¡ilor din lotul studiat s-au constat:valori crescute pentru IgG (1915 mg/dl) la 2 pa-cien¡i (4,08%) ¿i pentru IgA (537 mg/dl) la 4 cazuri(8,16%); valori scåzute pentru IgM la 2 cazuri(4,08 %) –31 mg/dl). Varia¡iile determinårilor nuau fost foarte semnificative, medianele situându-seîn limite normale: IgG – 1186 mg/dl (VN – 700-1600); IgA – 248 mg/dl (VN – 70-400); IgM –106 mg/dl (VN – 40-230).

În cadrul lotului nostru, determinårile de C3au eviden¡iat medianele situate în limite normale –122 mg/dl (VN – 90-180) la 45 de pacien¡i (91,84%),iar valori scåzute au fost înregistrate la 4 cazuri(8,16%) – 78 mg/dl.

596 pg/ml la un numår de 36 (73,47%); 13 cazuri(26,53%) au prezentat valori crescute, mediaacestora fiind de 1038 pg/ml.

Determinårile de IL 6 au înregistrat o medianåde 5,57 pg/ml, încadrându-se în limitele biologicenormale (<8,1) la 46 de cazuri (93,88%); 3 cazuri(6,12%) au prezentat valori crescute (medie – 20pg/ml).

Determinårile de IL 8 au înregistrat valori nor-male (media – 11,65 pg/ml), valorile de referin¡åsituându-se sub 62 pg/ml, în 49 de cazuri (100%).

Determinårile de TNFα au înregistrat valori nor-male la 37 de cazuri (75,52%) ¿i valori crescute la12 cazuri (24,48%) variind de la 8,5 la 41,3 pg/ml,cu o medie a acestor valori în afara limitelor de21,6 pg/ml. În cadrul lotului s-a înregistrat mediade 10,69 pg/ml, peste limita superioarå a norma-lului (8,1 pg/ml).

D. Proteina C reactivå

Modificårile înregistrate pentru proteina Creactivå-PCR au înregistrat o valoare medie de0,48 mg/dl peste limita superioarå a normalului(0-0,3 mg/dl).

Din totalul de 49 de pacien¡i, un numår de 25(51,02%) au prezentat valori crescute pentru CRP,variind de la 0,31 pânå la 4,05 mg/dl, cu o mediea valorilor crescute de 0,8 mg/dl.

E. Balan¡a fiziologicå între citokinele anti-inflamatoare ¿i citokinele pro-inflamatoare

Determinårile de IL 1β au aråtat valori normale(<5 pg/ml) pentru 49 de pacien¡i (100%).

Determinårile de IL 2R au înregistrat valorinormale (223-710 pg/ml) cu o valoare medie de

CONCLUZII

Odatå cu înaintarea în vârstå câteva boli he-matologice devin probleme serioase de sånåtate:anemia vârstnicului, malignitå¡ile hematologice,tromboza ¿i riscul de sângerare prin utilizarea anti-coagulantelor. În cadrul lotului au fost identifica¡i6 pacien¡i cu sindrom anemic u¿or care au fostevalua¡i în vederea depistårii etiologiei; dintreace¿tia a fost identificat un caz de neoplasm rectal,care a fost tratat chirurgical, radiotratat ¿i poli-chimiotratat.

Nu au fost identificate malignitå¡i hematologice,iar un caz special de leucocitozå cu eozinofiliemarcatå a fost diagnosticat ca toxoplasmozå cro-nicå. Un numår redus de cazuri au prezentat scå-deri u¿oare ale trombocitelor (2 cazuri) ¿i trom-bocitozå (1 caz).

În cadrul lotului nu au putut fi definite aspecteclare de imunosenescen¡å, legate de scåderea

Page 4: EVALUAREA IMUNOSENESCENºEI ªI INFLAMAºIEI …rjid.com.ro/articles/2007.3/Infectio_Nr-3_2007_Art-03.pdf · råspunsului la imunizåri ¿i cre¿terea inciden¡ei bolilor autoimune

82 REVISTA ROMÂNÅ DE BOLI INFECºIOASE – VOL. X, NR. 3, AN 2007

limfocitelor T ¿i a celulelor CD4. Ar fi necesarå atâtextinderea lotului, cât ¿i o perfectare în interpretarearezultatelor flow-citometriei în practica curentå.

Pentru evaluarea statusului inflamator asociatvârstei am ob¡inut valori importante concordantecu literatura. Markerul de inflama¡ie nespecificå-CRP a fost modificat semnificativ în cadrul lotului,valoarea medie de 0,48 mg/dl situându-se pestelimita superioarå a normalului (0,3 mg/dl).

Cre¿terile CRP-ului, marker de inflama¡ie sis-temicå par så se coreleze cu cre¿terile de IL 2R,

BIBLIOGRAFIE

1. Bunout Daniel – Effects of a Nutritional Supplement on ImmuneResponse and Cytokine Production in Free-Living Chilean Elderly.Journal of Parenteral and Enteral Nutrition, Sep/Oct 2004.

2. http://www.lef.org/protocols/prtcl-146.shtml (Life Extension Aug2004: Chronic inflamation)

3. Brouqui P, Dumler JS, Raoult D – Immunohistologicdemonstration of Coxiella burnetii in the valves of patients with Qfever endocarditis. Am J Med. 1994 Nov;97(5):451-8.

4. De Keyser F, Elewaut D, De Vos M et al – Bowel inflammationand the spondyloarthropathies. Rheum Dis Clin North Am. 1998Nov;24(4):785-x.

5. Quan Mhlanga JD, Whiteside MB, McCoy AN et al – Chronicoverexpression of proinflammatory cytokines and hitopathology in thebrains of rats. J Comp Neurol, 1999 Wiley-Interscience

6. Safieh-Garabedian, Haddad JJ, Saade NE – Cytokines in thecentral nervous system: targets for therapeutic intervention - CurrDrug Targets CNS Neurol Disord, 2004 - ingentaconnect.com

IL 6, TNFα, dar studiile trebuie continuate pentrua putea trage o concluzie.

În ceea ce prive¿te balan¡a citokinelor, pentruIL 6 au ob¡inut valori crescute (medie – 20 pg/ml)în 3 cazuri (6,12%), iar TNFα a prezentat o mediede 10,69 pg/ml peste limita superioarå a norma-lului (8,1 pg/ml), de¿i numai 12 cazuri (24,48%)au prezentat valori crescute. Cre¿terile de CRP ¿iTNFα denotå un status inflamator asociat vârstei,care poate fi asociat cu rezisten¡a la insulinå ¿i dis-func¡ii endoteliale, cu afec¡iuni cardiovasculare saucu maladia Alzheimer.

7. Emsley HCA , Tyrrell PJ – Inflammation and infection in clinicalstroke, Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism, 2002 -nature.com 5 Invitti C. [Obesity and low-grade systemicinflammation]. Minerva Endocrinol. 2002 Sep;27(3):209-14.

8. Lee H, Liao JJ, Graeler M et al – Lysophospholipid regulation ofmononuclear phagocytes. Biochim Biophys Acta. 2002 May23;1582(1-3):175-7.

9. Lee H, Liao JJ, Graeler M et al – Lysophospholipid regulation ofmononuclear phagocytes. Biochim Biophys Acta. 2002 May23;1582(1-3):175-7.

10. Sitzer M, Markus HS, Mendall MA et al – C-reactive protein andcarotid intimal medial thickness in a community population. JCardiovasc Risk. 2002 Apr; 9(2):97-103.