UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS(Universidad del Per, Decana de Amrica)

FACULTAD DE MEDICINA

E.A.P. TECNOLOGIA MDICA

Hemograma de Schilling

ASIGNATURA :Hematologa Clnica

DOCENTE :Lic. Eduardo Verastegui Lara

ALUMNO:Oscar Ral Choque Ramos

CODIGO:

San Fernando 2012

HEMOGRAMA DE SHILLINGDefinicin:

En medicina el hemograma o CSC (conteo sanguneo completo) o biometra hemtica es uno de los elementos diagnsticos bsicos. Es un cuadro o frmula sangunea en el que se expresan el nmero, proporcin y variaciones de los elementos sanguneos.

Clsicamente se considera que un hemograma debiera incluir: el recuento de eritrocitos, la hemoglobina, el hematocrito, los ndices corpusculares, el estudio de la morfologa eritrocitaria y, adems, el recuento de leucocitos, la frmula leucocitaria, el recuento plaquetario, la morfologa plaquetaria. Otros ndices que pueden incluirse son: recuento de reticulocitos, el ndice ictrico y la velocidad de eritrosedimentacin.

Sin embargo, el "hemograma completo" difiere en cuanto a informe, en los distintos laboratorios.A travs del tiempo, el hemograma ha sido objeto de mltiples modificaciones en cuanto a los parmetros que lo componen, la forma de obtenerlos, los grados de precisin y de exactitud y la manera de interpretarlo. Para una mejor utilizacin de los parmetros que el hemograma aporta es de vital importancia conocer el desarrollo que ha acompaado a la prueba y el laboratorio clnico debe permanecer atento al desarrollo tecnolgico para incorporar los aspectos de mayor relevancia desde el punto de vista clnico, como una herramienta de rutina que le permita tener pruebas cada vez ms exactas, ms precisas, a un costo razonable y, sobretodo, de mayor utilidad clnica.

El hemograma como prueba de laboratorio permite tener una visin global de la homeostasis del sistema hematopoytico, de ah la importancia de que se evalen el mayor nmero de parmetros y, sobretodo, de que stos tengan la mayor precisin y exactitud posibles, caractersticas que fcilmente se pueden lograr gracias a los grandes avances en el laboratorio de hematologa mediante la incorporacin de autoanalizadores de hematologa de alta eficiencia.

A continuacin se relacionan los parmetros que componen los diferentes tipos de hemogramas, incluyendo entre parntesis los cdigos de la Sociedad Colombiana de Patologa Clnica:

Hemograma tipo I : hemoglobina, hematocrito, recuento de eritrocitos, ndices eritrocitarios (volumen corpuscular medio, hemoglobina corpuscular media, concentracin de la hemoglobina corpuscular media), recuento total de leucocitos, y recuento diferencial de leucocitos y morfologa por mtodos manuales. No incluye sedimentacin.

Hemograma tipo II: hemoglobina, hematocrito, recuento de eritrocitos, ndices eritrocitarios (volumen corpuscular medio, hemoglobina corpuscular media, concentracin de la hemoglobina corpuscular media), recuento total de leucocitos, recuento diferencialsedimentacin.

Hemograma tipo III : hemoglobina, hematocrito, recuento de eritrocitos, ndices eritrocitarios (volumen corpuscular medio, hemoglobina corpuscular media, concentracin de la hemoglobina corpuscular media), recuento total de leucocitos, y recuento diferencial de leucocitos, recuento de plaquetas por mtodos semiautomticos y morfologa por mtodos manuales. No incluye sedimentacin.

Hemograma tipo IV: hemoglobina, hematocrito, recuento de eritrocitos, ndices eritrocitarios (volumen corpuscular medio, hemoglobina corpuscular media, concentracin de la hemoglobina corpuscular media), ancho de distribucin de los eritrocitos, recuento total de leucocitos, recuento diferencial de leucocitos, recuento de plaquetas y morfologa de sangre perifrica por mtodos electrnicos y manuales. No incluye sedimentacin.

Hemograma tipo V : hemoglobina, hematocrito, recuento de eritrocitos, ndices eritrocitarios (volumen corpuscular medio, hemoglobina corpuscular media, concentracin de la hemoglobina corpuscular media), ancho de distribucin de los eritrocitos, recuento total de leucocitos, recuento diferencial de leucocitos, recuento de plaquetas, ndices plaquetarios (volumen medio plaquetario, ancho de distribucin de las plaquetas, plaquetocrito) y morfologa de sangre perifrica por mtodos electrnicos y manuales. No incluye sedimentacin.

Hemograma tipo VI: hemoglobina, hematocrito, recuento de eritrocitos, ndices eritrocitarios (volumen corpuscular medio, hemoglobina corpuscular media, concentracin de la hemoglobina corpuscular media), ancho de distribucin de los eritrocitos, recuento de reticulocitos, ndices reticulocitarios, hemoglobina reticulocitaria, recuento total de leucocitos, recuento diferencial de leucocitos, recuento de plaquetas, ndices plaquetarios (volumen medio plaquetario, ancho de distribucin de las plaquetas, plaquetocrito), plaquetas reticuladas y morfologa de sangre perifrica por mtodos electrnicos y manuales. No incluye sedimentacinLa presente monografa se enfocara a el estudio de las tcnicas del hemograma de Schilling, como tcnica de uso actual, con ella se calibrolos primeros equipos automatizados y en la actualidad es parte del proceso de control de calidad de los equipos autoamtizados, debido a que ningn equipo pude reemplazar las haibilidades y conocimientos del tecnlogo medico en la verificacin de la lamina en busca de alteraciones que los equipos automatizados no pueden hallar.

La presente monografa dividir su contenido de la siguiente forma

Fase pre analtica del Hemograma de Schilling

Toma de muestra del paciente Principales anticoagulantes usados en Hematologa.

Fase analtica del Hemograma de Schilling.

Pruebas Cuantitativas. Hematocrito. Hemoglobina. Recuento de Glbulos Rojos. Recuento de Glbulos Blanco. Recuentos de Plaquetas.

Pruebas Cualitativas Realizacin del Frotis Hematolgico. Coloracin del Frotis Hematolgico. Lectura de lmina perifrica. Alteraciones de la eritrocitos Alteraciones del los leucocito Alteraciones de las plaquetas.

FASE PRE ANALTICA DEL HEMOGRAMA DE SCHILLING

TOMA DE MUESTRA DEL PACIENTE

La toma de muestra es fundamental ya que de ello depende que el resultado del anlisis de la muestra sea el correcto. Se efectuar en ayunas o no, dependiendo de la prueba a usar.Materiales

Algodn.Alcohol al 70%.Ligadura o torniquete de 25 a 30 cm de largo.Jeringas de 5 mLViales con anticoagulante EDTA.

A) EN ADULTOS

1.Durante la toma de muestra deben guardarse las ms estrictas normas de higiene.2.El material descartable a usar se abrir slo al momento de su utilizacin y, una vez manipulado, no podr guardarse nuevamente an cuando se lo considere nuevo.3.Una vez realizada la toma de muestra, descartar inmediatamente los materiales usados en recipientes para ese fin. 4.Los recipientes que contienen algodn y los de desecho deben estar perfectamente cerrados todo el tiempo y se abrirn solamente al momento de usar.5.Al momento de hacer la extraccin colocarse los guantes desechables, los cuales se mantendrn puestos durante todo el procedimiento. 6.Antes de iniciar la toma de muestra, tener todo el material preparado pero sin abrir. 7.Elegir una vena bien visible en el antebrazo, localizndola visualmente y por palpacin. Colocar el lazo y volver a palpar la vena, indicarle al paciente que abra y cierre el puo para facilitar la extraccin. El lazo debe ser colocado de modo de producir una compresin del msculo no mayor a 1 mm.8.Una vez identificada la vena, limpiar el rea circundante con algodn empapado en alcohol. Dejar secar perfectamente.9.En este momento se romper el sello de garanta de la aguja, se la colocar en la jeringa sin tocar con los dedos, controlando el correcto funcionamiento del mbolo. 10.La aguja se insertar en la vena elegida con el bisel hacia arriba, dejando que la sangre fluya en la jeringa aspirando suavemente con el mbolo. La escala de la jeringa debe estar visible (hacia arriba).11.Despus de la toma, se le indica al paciente que abra la mano, se retira el torniquete y luego la aguja, presionando el lugar de la puncin con un trozo de algodn seco. 12.LA AGUJA SE DESCARTAR EN EL CONTENEDOR DESTINADO PARA ESE FIN.13.La sangre que est en la jeringa se descargar en los tubos o frascos que contienen los anticoagulantes correspondientes, evitando hacer espuma.14.Rotular los tubos o frascos con los datos del paciente. 15.En el sitio de la puncin se pondr un apsito despus de controlar que no haya ms sangrado.16.La persona que hace la extraccin deber quitarse los guantes al finalizar la toma de muestra y desecharlos inmediatamente. NO REUTILIZARLOS NUEVAMENTE.

17.Si hay algn dato que haya interferido con el procedimiento, aclararlo en el registro de muestras.

B) EN NIOS

1.En nios mayores de 6 meses, se recomienda hacer la extraccin del brazo como en adultos, pidindole a un adulto que colabore en mantener inmvil al nio, en particular el brazo.

2.En el caso de nios menores de 6 meses, se proceder a extraer la muestra del taln con una lanceta descartable. Antes de la extraccin conviene calentar el taln frotndolo entre las manos para favorecer la irrigacin de la zona.

3.Desinfectar con un trozo de algodn embebido en alcohol, dejar evaporar y punzar con la lanceta, en la zona del taln indicada en el dibujo adjunto.

4.Limpiar la primera gota y dejar gotear la sangre en el tubo con anticoagulante.

Secar la zona con un trozo de algodn seco y una vez que no haya sangrado, colocar una curita o apsito. OBTENCIN DE SANGRE VENOSA EN TUBOS AL VACOMateriales requeridosAlgodn.Alcohol al 70%.Ligadura o torniquete de 25 a 30 cm de largo.Tubos al vaco con anticoagulante EDTA (K3), EDTA (Na2) u otro anticoagulante.3.3.1.5 Agujas con dispositivo para extraccin de sangre al vaco:- N 21 para adultos.- N 22 para nios y neonatos.De preferencia, ambas de bisel corto para evitar la coagulacin.

PROCEDIMIENTO1. Se retira el estuche protector de la aguja y ste se enrosca al dispositivo para extraccin de sangre al vaco.2. Colocar la ligadura cuatro dedos por encima de la flexin del codo o 10 cm por encima de ste y pedir al paciente que abra y cierre la mano varias veces, para favorecer la dilatacin de las venas.3. Una vez escogida la vena, desinfectarla con una pieza de algodn embebido en etanol al 70%.4. Se coloca la aguja en direccin paralela a la vena, se perfora la piel haciendo avanzar la aguja entre 0,5 cm y 1 cm en el tejido subcutneo, se inserta el tubo al vaco por la parte posterior y no preocuparse por la cantidad de sangre extrada ya que el mismo sonido del vaco avisar que la extraccin termin.5. Retirar la ligadura tirando del extremo doblado. 6. Colocar un pedazo de algodn seco sobre la parte donde se encuentra oculta la aguja. Sacar la aguja con un movimiento rpido y depositarla en el recipiente de metal con desinfectante .7. Pedir al paciente que presione firmemente el algodn durante 3 minutos, con el brazo extendido. No se recomienda que se flexione el brazo a causa del riesgo que se forme un hematoma.8. Mezclar por inmersin suave la sangre con el anticoagulante contenido en el tubo. No agitar el contenido.

Ventajas de una extraccin de sangre venosaPueden hacerse repetidos exmenes con la misma muestra.Parte de la muestra (plasma o suero) puede congelarse para referencia futura.

Desventajas de una extraccin de sangre venosaLa puncin venosa, por su largo procedimiento, requiere mayor preparacin que el mtodo capilar.El mtodo es tcnicamente difcil en nios, individuos obesos y pacientes en shock.La hemlisis debe ser evitada, pues se puede obtener una disminucin en el recuento de eritrocitos.Debe evitarse prolongada estasis venosa producida por el torniquete, pues produce hemlisis y otros cambios que ponen la sangre en un estado inadecuado para el anlisis de gases, recuentos celulares, determinacin de pH sanguneo y algunas pruebas de coagulacin.La sangre anticoagulada si no es de obtencin reciente no debe ser utilizada en extensiones de sangre, pues algunos anticoagulantes producen cambios en las plaquetas que pueden causar aglutinaciones, agregacin plaquetaria y dificultan la identificacin de leucocitos.Puesto que algunos de los componentes de la sangre no son estables, los recuentos de leucocitos y plaquetas e ndice de sedimentacin deben realizarse antes de que pasen dos horas desde que se obtuvo la muestra.

PRINCIPALES ANTICOAGULANTES USADOS EN HEMATOLOGA.

Una vez extrada la sangre, sta puede conservarse coagulada o mantenida incoagulable mediante la adicin de un anticoagulante.

CARACTERSTICAS BSICAS DE LOS ANTICOAGULANTES MS USADOS EN HEMATOLOGA No alterar el tamao de los hemates. No producir hemlisis. Evitar al mximo la agregacin plaquetaria. No alterar la morfologa de los leucocitos.

La sangre tratada con anticoagulante debe procesarse lo antes posible, incluso mantenida bajo refrigeracin (4 C) si no pasan de las 2 horas. El tiempo mximo entre la extraccin de la sangre y su procesamiento depende del coagulante de eleccin y no debe ser ms de 4 horas, a excepcin del anticoagulante EDTA (etilendiaminotetractico) que puede ser hasta 24 horas (en refrigeracin a 4 C).

Los anticoagulantes pueden emplearse en forma slida o lquida. Los primeros estn indicados para la determinacin de los parmetros hematolgicos, ya que no producen, como los anticoagulantes lquidos, dilucin de la sangre.

ANTICOAGULANTES SLIDOSEDTAEs la sal disdica o tripotsica del cido etilendiaminotetractico. La sal disdica (Na2EDTA) es menos soluble que la sal tripotsica (K3EDTA). Estos compuestos realizan su accin a travs de un efecto quelante sobre el calcio, al fijarlo impiden su activacin y, por ende, la coagulacin sangunea.

Ventajas Respeta la morfologa eritrocitaria (especialmente la sal tripotsica) y leucocitaria, de manera que permite una demora de dos horas en la realizacin del frotis sanguneo despus de la extraccin sangunea. Asegura la conservacin de los elementos formes sanguneos durante 24 horas si la sangre se mantiene a 4 C. Al inhibir la aglutinacin de las plaquetas, facilita su recuento o su expresin semicuantitativa a partir del frotis. La concentracin recomendada de EDTA es de 1,5 mg/mL. de sangre. Una mayor cantidad de anticoagulante puede producir retraccin celular, con disminucin del hematocrito, y un aumento de la concentracin media de la hemoglobina. Un exceso de sangre con relacin al anticoagulante produce formacin de microagregados que pueden alterar los resultados. El empleo de tubos al vaco con una gota (50mL) de EDTA tripotsica comercial para 5 mL de sangre es de inters prctico dado que es cien veces ms soluble facilitando la mezcla de sangre con anticoagulante.

DesventajasUsado en exceso afecta a los eritrocitos y a los leucocitos, a los cuales les produce encogimiento y cambios en su forma, por ello debe cuidarse de agregar la cantidad correcta de sangre al anticoagulante.

Anticoagulante de WintrobeEs una mezcla de oxalato de amonio y potasio. Acta por precipitacin del calcio, es fcil de preparar. Se emplea en forma de polvo en proporcin de 2 de oxalato de amonio por 1 de oxalato de potasio. La cantidad recomendada es de 2 mg x mL de sangre. Este anticoagulante no afecta el volumen globular medio y puede usarse para determinaciones de hemoglobina, hematocrito y recuento globular, pero para los extendidos queda limitada a los primeros minutos, tampoco es til para el recuento plaquetario porque produce formacin de agregados plaquetarios.

HeparinaEl nombre de heparina proviene del griego hepar, que significa hgado, ya que fue aislado por primera vez de las clulas de este tejido. Es un mucopolisacrido cido. Presenta el inconveniente de que si no se agita rpidamente con la sangre despus de extrada pueden formarse microcogulos, aunque no altera el volumen eritrocitario ni la morfologa de los leucocitos. No es recomendable para el frotis sanguneo porque produce un fondo azul en la lmina. La heparina de sodio o litio puede usarse en forma slida o lquida, en proporcin de 0,1 - 0,2 mg de heparina por 1 mL de sangre.

ANTICOAGULANTES LQUIDOSCitrato trisdicoEs de eleccin para las pruebas de hemostasia y la velocidad de sedimentacin. Acta a travs de la precipitacin del calcio. La concentracin depende de la prueba por realizar. Para pruebas de hemostasia se emplea en proporcin de 1: 9 (0,5 mL de anticoagulante para 4,5 mL de sangre total). Para la determinacin de la VSG (Velocidad de Sedimentacin Globular) es 1:4 (0,5 mL de anticoagulante para 2 mL de sangre).Oxalato sdicoRecomendado tambin para las pruebas de hemostasia. Se emplea en proporcin de un volumen de anticoagulante para 4 vol. de sangre.

FASE ANALTICA DEL HEMOGRAMA DE SCHILLING.PRUEBAS CUANTITATIVAS.

HEMATOCRITO.

Mide la concentracin de glbulos rojos en sangre anticoagulada (l % del volumen total de sangre ocupado por glbulos rojos).Ayuda al diagnostico de anemia y policitema y es necesario para calcular ndices sanguneos. Adems la columna de clulas blancas resultante, proporciona una idea aproximada del recuento de leucocitos, es decir una columna de clulas blancas de 1 mm de altura, corresponde aproximadamente a 10,000 leucocitos x mm3.

PROCEDIMIENTO:

Se aspira sangre capilar venosa, en capilares heparinizados sin heparinizar par sangre con anticoagulantes (EDTA Wintrobe), debe llenarse aproximadamente un 70% del capilar. Ocluir un extremo del capilar en plastilina. Colocar el capilar sobre la plataforma del cabezal de una centrifuga de microhematocrito, con el extremo de ocluido hacia el centro del aparato y el ocluido adherido al reborde externo de la plataforma. Centrifugar por 5 minutos entre 10,000 a 12,000 rev.x1. Leer:

HEMATOCRITO = Altura de la columna de glb. Rojos Altura de la columna de sangre total.

VALORES NORMALES: Hombres:40 - 54 %Mujeres: 37 - 47 % R. Nac.:44- 64 %

Las concentraciones de hemoglobina y de glbulos rojos pueden estimarse por el nivel del hematocrito segn las siguientes frmulas siempre que la sangre sea normal:

A. Punto de hematocrito = 0.34 gr. de Hb.B. Punto de hematocrito = 107,000 de glbulos rojos / mm3

INTERPRETACION:

Aumento: est incrementado en hemoconcentracin como en shock asociados a ciruga, trauma y quemaduras, en policitemia de cualquier causa y en eritrocitosis de deshidratacin.

Disminuye: en anemia de cualquier causa; en fase de recuperacin despus de prdidas sanguneas.

FASE ANALTICA DEL HEMOGRAMA DE SCHILLING.PRUEBAS CUANTITATIVAS.

HEMOGLOBINA. METODO: COLOR FOTOELECTRICO METODO DEL CIANURO DE HEMOGLOBINA ANTES:Cianmetahemoglobina.

El ferricianuro transforma el hierro de la hemoglobina del estado ferroso al frrico para formar hemoglobina, que se combina con el cianuro de potasio produciendo el cianuro de hemoglobina(CNH2) de color rojizo de intensidad proporcional a la concentracin de hemoglobina.

PROCEDIMIENTO:

En un tubo colocar 5 ml de solucin Drabkin. Homogeneizar bien la muestra, tomar 20 ul de sangre, y depositarlo en el tubo con Drabkin, mezclar. Dejar en reposo por10 minutos. Leer en absorbancia con filtro verde a 540 mm. Llevando a 0 el fotmetro con agua destilada ( blanco de reactivo).

RESULTADOS:

La lectura en absorbancia del problema debe ser comparada en la curva patrn para encontrar a que concentracin de hemoglobina corresponde expresndose en gr/100 ml

VALORES NORMALES: Hombres: 13.5 - 18 gr / 100 ml Mujeres: 11.5 - 16.4 gr / 100 ml

TIPOS:

Hb A: del adulto. Hb A2: variante del adulto. Hb F: fetal. Hb A2y fetal se puede hallar menos de 4% en sangre perifrica. Hb F+ 4%: hemates en diana (target cells), talasema mayor anemia de Cooley. Hb A2 + 4%: Talasema minor. Hb S: sickle cells: anemia drepanocitica de clulas falciformes.

SIGNIFICACION CLINICA:

El cuadro ms comnmente relacionado con la disminucin de hemoglobina srica es la anemia. Esta patologa, por definicin, implica una reduccin por debajo de lo normal en el nmero de glbulos rojos, en la cantidad de hemoglobina y en el volumen globular. La prdida de hemoglobina y consecuente disminucin de la capacidad de transporte de oxgeno en la sangre, son los rasgos caractersticas del cuadro clnico y constituyen las bases patolgicas para la mayora de los sntomas y signos que se presentan (tales como disnea, taquicardia, debilidad).En la mayora de los casos la anemia ocurre como signo o complicacin de otra enfermedad, a veces no relacionada con trastornos en el sistema sanguneo, como alteraciones hepticas o renales, infecciones, etc. Por lo tanto, el hallazgo de niveles disminuidos de hemoglobina srica debe conducir a una cuidadosa bsqueda de la patologa causal.Existen situaciones en las que, por el contrario, la concentracin de hemoglobina se encuentra anormalmente elevada debido a una superproduccin de glbulos rojos.Este trastorno puede ser primario, como en el caso de la policitemia vera, o secundario a ciertos tumores renales u ovricos, hepatomas, hidronefrosis.La nica condicin natural y fisiolgica que afecta a los niveles de hemoglobina es la altitud, puesto que frente a bajas presiones de oxgeno atmosfrico se produce una compensacin mediante el incremento en el nmero de glbulos rojos y, por ende, en la concentracin de hemoglobina circulante.En general, debe tenerse en cuenta que un aumento excesivo de la concentracin libre en la sangre, produce efectos txicos sobre los tbulos renales que puede conducir dao renal severo.

FASE ANALTICA DEL HEMOGRAMA DE SCHILLING.PRUEBAS CUANTITATIVAS.

RECUENTO DE GLOBULOS ROJOS.

La sangre se diluye en un lquido que nos permite observar claramente los hemates, luego esta dilucin se coloca en una cmara de Neubauer con la ayuda de una pipeta automtica o pipeta Pasteur y se cuentan en el microscopio a un objetivo de 40x para calcular el nmero de glbulos rojos por mm3. Equipos- Microscopio.- Hemocitmetro (cmara de Neubauer).

MATERIALES Y REACTIVOS REQUERIDOS Pipeta de glbulos rojos (De Thoma) o pipeta automtica (de 0-100 mL). Presenta cerca del extremo superior una marca de 101, inmediatamente contina una dilatacin (bulbo) que contiene una perla roja mezcladora, luego sigue el tallo (extremo ms largo), el cual est dividido en 10 partes con 2 marcas: 1 acabando el bulbo y 0,5 a la mitad del tallo. Se requiere igual que el recuento de leucocitos una boquilla para aspirar. Diluyente de glbulos rojos: Cloruro de Sodio al 0,9% . Diluyente de Hayem. Contador manual (slo si fuera necesario). Papel filtro.

PROCEDIMIENTO Mezclar la sangre obtenida con el anticoagulante o tomar sangre capilar. Llenar la pipeta de glbulos rojos con sangre hasta la marca de 0,5 para realizar una dilucin de 1/200, y si se carga hasta 1, la dilucin ser 1/100. Limpiar la punta con gasa o papel absorbente. Introducir la pipeta en el tubo o frasquito conteniendo diluyente (Hayem) y llenar de lquido de dilucin hasta la marca de 101. Se coloca en un rotador automtico o se hace rotar manualmente de 2 a 3 minutos. Agitar bien la pipeta y descartar 3 a 4 gotas del tallo, luego colocar una gota pequea cerca de un extremo de la cmara para que por capilaridad se llene exactamente. Hacer el recuento con objetivo de 40x. Se puede realizar con la pipeta automtica, se toma 20 mL (0,02mL) de sangre total con anticoagulante, o sangre capilar y se deposita en un tubo de 12 x 75 que contenga 4 mL de solucin de Hayem (aqu se tiene una dilucin de 1:200). Se deja reposar aproximadamente 5 minutos y se procede a cargar la cmara con la misma pipeta usando un nuevo tip. El inconveniente aqu es el gasto de reactivo (4 mL) pero las medidas son mas exactas. Dejar en reposo por 3 minutos. Enfocar la cuadrcula a 10x, luego con el objetivo de 40x contar sobre el cuadrado grande central de la cmara slo en 5 cuadrados pequeos: uno central y cuatro angulares (80 cuadraditos en total). En el recuento se incluyen las clulas que cubren o tocan por dentro o por fuera las lneas limitantes superior e izquierda en el cuadrado pequeo de recuento y no se consideran los correspondientes a los lmites inferior y derecho. Se hace el recuento en los puntos ABCD y E y se sigue los mismos parmetros del recuento de leucocitos.

RESULTADOSN de hemates x mm3 = hemates contados en 5 cuadrados pequeos Altura x dilucin X reaReemplazando = hemates contados en 5 cuadrados pequeos1/10 x 1/200 x 1/5= hemates contados en 5 cuadrados pequeos1/10 000= hemates contados x 10 000

VALORES DE REFERENCIA(Unidades tradicionales millones de clulas/mm3).Hombres 4 500 000 - 5 500 000Mujeres 4 000 000 - 5 000 000Nios (4 aos) 4 200 000 - 5 200 000Lactantes (1 - 6 meses) 3 800 000 - 5 200 000Recin nacidos 5 000 000 - 6 000 000Fuente: Manual de tcnicas bsicas para un laboratorio de salud. OPS, N 2.

FASE ANALTICA DEL HEMOGRAMA DE SCHILLING.PRUEBAS CUANTITATIVAS.

RECUENTO DE GLOBULOS BLANCOS- LEUCOCITOS:

La sangre anticoagulada se deposita en un lquido (TURK) que permite evidenciar los leucocitos (los ncleos son coloreados por el azul de metileno presente en el reactivo), mantenindolos visibles, mientras que los eritrocitos son hemolizados por el acido actico. El recuento del nmero de leucocitos o glbulos blancos se expresa por mm3 (milmetro cbico).

Muestra:Sangre venosa anticoagulada con EDTA al 10 %

Materiales:Pipeta de Glbulos BlancosPipeta Automtica de 20 ul.Cmara de NewbauerContmetroTubo de Latex (Pipeteador)Equipos:Microscopio OpticoAgitar de Pipetas de Glbulo Blancos.Reactivos:Anticoagulante EDTA (10%) para la sangre venosaSolucin diluyente de Glbulos Blancos (Reactivo de Turk).

PROCEDIMIENTO I: (Pipeta de Glbulos Blancos - cmara Newbauer)1. Aspirar sangre venosa anticoagulada hasta la marca 0.5 (Pipeta de Glbulo Blancos), luego completas el llenado de la pipeta hasta la marca 11 con el diluyente de Glbulos Blancos (Turk). Se obtiene Dilucin 1/20.2. Colocarlo en el agitador de pipetas por 1 a 3 (tambin se puede agitar con la mano durante 1).3. Preparar la cmara de Newbauer con su lminilla.4. Descartar 3 a 4 gotas, para luego colocar una gota al lado de la cmara entre esta y la lminilla y dejar en reposo por 3.5. Enfocar la cuadricula en el microscopio y con el objeto de 10x 20x contar los cuatro cuadrados grandes angulares. El recuento incluye las clulas que cubren o tocan por dentro o por fuera de las lneas limitantes superior e izquierda en el cuadrado grande de recuento y no se considera las correspondientes a los lmites inferior y derecho.

PROCEDIMIENTO II (Tubo de prueba 12 x 75 - Cmara Newbauer)1. Colocar 0.4 ml de Diluyente de Glbulo Blancos en un tubo 12 x 75.2. Con la pipeta automtica, tomar 20 ul de sangre venosa y mezclarlo con la Sol de Glbulo Blancos.3. Hemogenizar y dejar en reposo por unos minutos.4. Despus del reposo hemogenizar nuevamente el tubo y con la pipeta de 20 ul cargar la cmara de Newbauer y realizar el conteo respectivo descrito en el Procedimiento I.

LECTURA La lectura se realiza en los campos 1, 3, 7 y 9 como est indicado en la figura. Adems de los leucocitos contados dentro de cada uno de los cuadrantes, se deben contar todos los leucocitos que se encuentren adheridos en la lnea horizontal superior y vertical exterior, o de lo contrario, todos los leucocitos, adheridos a la lnea horizontal inferior y vertical interior.

Resultados:N de Leucocitos x mm3 = G.B Contados en 4 cuadrantes Area contada x Altura de cmara x Dilucin de Muestra = G. B Contados 4 x 1/10 * 1/20

= G. B Contados 4/200

Valores Normales:De 5,000 10,000 / mm3Correccin de Leucocitos(Hemates Nucleados - Leucocitos)Si hay Glbulos Rojos nucleados, el recuento de Glbulo Blancos debe de corregirse. Debido a que el Diluyente de Glbulo Blancos (Turck) no lisa los Hemates Nucleados. Se debe usar la siguiente frmula:

Ejemplo:Glbulos Blancos Observ.=30,000H.N. / 100 G. B.=30%R.G.B.C=30,000 x 100/130R.G.B.C=23,070 Leucocitos / mm3

Interpretacin Clnica:a)Leucocitos Fisiolgico : Suele ser de grado discreto, s caracterstica por persistencia de Eosinfilos, ausente desviacin izquierda y falta de alteraciones txicas en los neutrfilos.Se puede observar en los recin nacidos (25,000 o ms).En los nios (12,000 a 14,000)Al final del embarazo y periodo Post-parto, que se normaliza en la 2da y 3era semana.Leucocitosis en esfuerzo prolongada o violento.Color extremo y altura, etc.b)Leucocitos Infecciosa:Es la ms frecuente y se caracteriza por una disminucin de Eosinofilos, presencia de desviacin izquierda en Neutrfilos, por ejemplo en infecciones Pigenas, Vricas, por Ricketsias en complicaciones spticas, etc.

c)Leucocitosis no Infecciosas:Se observa en el dolor intenso (por irritacin simptica).Post Hemorrgica transitoria, por sntomas motores (convulsiones, Eclampsia).Quemaduras extensas, en sndromes postoperatorios.Necrosis tisulares aspticas (Infarto, Ileo, Neoplasias).Enfermedades del metabolismo ( Gota, Acidosis, diabtica, como urmico y diabtico).Endocrinopatas (Tetania)Txicas (Drogas como Fenilhidrazinas, clorato, Potasio, etc.). Sales de plomo, Mercurio y Arsnico.Intoxicaciones por Oxido de Carbono.Hemopatas (Anemia Perniciosa, Hemoltica, Policitemia, etc.).Reacciones Leucemoides (ms de 30,000).Mononucleosis Infecciosa.Linfocitosis Aguda Benigna.Agranulositosis.Infecciones, etc.

d)Leucopenias :Leucopenia constitucional que es muy rara, digestiva: Post Prandial en.Pacientes vegetales lbiles.Leucopenia infecciosa por virus, Protozoos, Fiebre Tifoidea, Brucella, Sarampin, Varicela, etc.Leucopenias txicas (Benzol, Metales pesados, sulfas, Mostazas Nitrogenadas).Determinadas Hemotatas: Anemia Aplsica, Pernniciosa, Mieloma, etc.Afecciones Esplenohepticas de la mdula sea.Leucopenia pos Schock Anafilctico, por radiaciones.Enfermedades endocrinolgicas (Mixedema, base-dow).En Lupus E.S., Neoplasias, Epilepsia antes y durante las crisis.

El hemograma de SchillingHematologa Clnica.

Alumno: Oscar Ral Choque RamosSan Fernando 2012

PLAQUETAS

Son pequeos cuerpos incoloros de refringencia moderada, y de forma por lo general esfrica, oval o baciliforme.

TAMAO:

El dimetro de las plaquetas suele estar comprendido entre 2 a 4 u. Su volumen medio es de 7 a 8 u3. A veces suele verse plaquetas grandes (plaquetas de forma Bizarra). Estas se deben particularmente cuando existe una Activa Regeneracin Sangunea, llegando en algunos casos a tener 25 a 30 u de longitud.

ORIGEN, FUNCION Y ESTRUCTURA:

Su origen viene a partir de la mdula sea, por intermedio de una clula progenitora comn con el resto de las clulas mieloides. El Pro- megacarioblasto es la clula precursora del Megacarioblasto, quien no tiene identificacin morfolgica precisa, pero se sabe que es el nico estadio evolutivo del Megacariocito. Esta clula puede presentar una mitosis completa y otra incompleta. Empezando en sta clula la formacin de las plaquetas.

Las plaquetas se desprenden del citoplasma de los megacariociotos adultos pasando as a la sangre perifrica. Ejerciendo una importante funcin en los diferentes mecanismo de coagulacin y hemostasia.

En las plaquetas se delimitan claramente 2 zonas: Una Central, donde se disponen las granulaciones azurfilas denominada Cronmero, y otra zona Perifrica, hialina e incolora que se conoce como Hialmero.

Los grnulos especficos de las plaquetas son los grnulos en Ojo de Buey, de identificacin exclusivamente ultraestructural, tambin denominados Grnulos Alfa, conteniendo 3 tipos de protenas:

A) Factor Plaquetario 4: Factor Plaquetario de crecimiento de fibroblastos (PDGF).B) Fibringeno: Factor V y factor VIII / Von Willebrand.C) Protenas como la Trombospondina, Fibronectina, Albmina, Alfa-1-Antitripsina y Alfa-2-Macroglobulina.Un segundo tipo de grnulos de identificacin tambin submicroscpica, son los cuerpos densos que contienen Calcio, Serotonina, ADP y ATP.As mismo contiene tambin gran cantidad de enzimas de localizacin lisosmica (Fosfatasa Acida, Betaglucuronidasa, Arilsulfatasa, N-acetil-betaglucosaminidasa.

TIEMPO DE SOBREVIDA:

Las plaquetas permanecen en la sangre periferica 8 a 12 das, despus de los cuales se destruyen en el Bazo por las clulas del sistema mononuclear fagoctico.

ASPECTOS MORFOLOGIICOS EN SANGRE PERIFERICA:

En el frotis de sangre perifrica se observan con frecuencia en aglomerados, debido a su gran capacidad de agregacin.Al ser observados en el microscopio, se les ve como pequeos cuerpos incoloros de refringencia moderada y de forma por lo general esfrica, oval o baciliforme.Tienen un contorno perifrico neto. Aparentan poseer algunos grnulos inmviles en el centro celular.Otros presentan vacuolas contrctiles, com tambin microgrnulos azurfilos en su citoplasma. Estos grnulos en algunas plaquetas pueden estar aglomerados en su parte central de la clula plaquetaria adquiriendo un aspecto de ncleo.Razn por lo cual al ser observadas microscpicamente pueden presentar una variada morfologa: forma de campana, maza india. En forma de coma, cigarro y en otras variantes no comunes.

RECUENTO DE PLAQUETAS:

Se conocen 3 mtodos comunes de realizar un recuento de plaquetas, ambas requieren en s mucho cuidado en el procedimiento del conteo total. Un adecuado criterio y conocimiento tcnico de trabajo nos permitir obtener un resultado casi exacto y verdadero.

1. METODO DIRECTO (EN CAMARA)BRECHER Y CRONKITE

MUESTRA :Sangre venenosa obtenida con anticoagulante EDTA Tripotsico.REACTIVOS:OXALATO DE AMONIO AL 1 %.

MATERIALES :

MICROPIPETAS DE 20 ul y 400 ul. TUBOS DE PLASTICO. CAMARA HUMEDA. PUNTAS DE MICROPIPETAS. CONTOMETRO. GRADILLA. CAMARA DE NEWBAUER.

EQUIPOS:

MICROSCOPIO OPTICO.

PROCEDIMIENTO:

1) Homogenizar bien la sangre de sangre anticoagulada (la que se usa para hemograma)2) En un tubo de plstico hacer una dilucin 1/20 de sangre con diluyente.3) Homogenizar la mezcla y dejar reposar por espacio de 10 minutos (para permitir la lisis de los glbulos rojos)4) Cargar en ambos lados de la cmara de Newbauer la muestra diluida y dejarla reposar en la cama hmeda por espacio de 10 minutos.5) Efectuar el conteo de las plaquetas en un aumento de 40 x 10 (las plaquetas se observan como estructura discoides, refringentes), debe de contarse en 5 cuadrantes del retculo de THOMA (zona del recuento de los hematis).6) Promediar el recuento de las plaquetas en ambos lados de la cmara.7) Multiplicar por 1000 par obtener el nmero de plaquetas por mm3.

VALORES NORMALES: 150.000 -450.00/mm3

2. METODO DIRECTO (EN CAMARA)

MUESTRA: Sangre venenosa obtenida con Citrato de sodio al 3.8 % como anticoagulante.

REACTIVO:Solucin diluyente para recuento de plaquetas.Citrato de sodio al 3.8 %.

MATERIALES: Pipetas de Glbulos Blancos. Cmara de Newbauer. Gradilla para Tubos. Tubos de Plstico.

EQUIPOS: Microscopio Optico.

PROCEDIMIENTO:

1) Extraer 4.5 cc de sangre en un tubo que contenga 0.5 cc de Citrato de Sodio al 3.8 %.2) Dejar reposar por 30 minutos.3) Del plasma sobrenadante tomar 0.5 ml con la pipeta de glbulos blancos.4) Completar la pipeta con la solucin diluyente.5) Agitar y cargar la cmara Newbauer.6) Dejar reposar unos minutos.7) Leer los 5 cuadros centrales de la cmara para glbulos rojos.

RESULTADOS:

Rcto. Plaquetas / mm3 = N x 555 x Hto./100

N = Nmero de Plaquetas contadas en los 5 cuadros.

VALORES NORMALES:

150.00 - 350.000/ mm3

3. METODO DIRECTO (EN LAMINA PORTAOBJETO)DAMECHECK

MUESTRA:Una gota de sangre venenosa o arterial (anticoagulada con EDTA al 10 %).

REACTIVO:Colorante Wright - Giensa.

MATERIALES: Lmina Porta objeto. Lmina Extensora (Porta objeto).

EQUIPOS:Microscopio Optico.

PROCEDIMIENTO:

1) Realizar un adecuado extendido de lmina y colorearlo con Wright - Giensa y proceder a la lectura.2) Se lee el nmero total de plaquetas en campos de 100 hemates con un total de 10 campos.

RESULTADOS:N de Plaquetas x Hto. + Factor C x 10

N = Nmero de Plaquetas contadas en 10 campos.C = Dependiendo del valor del Hematocrito: Menor a 35 % agregar al Hto. + 5. De 36 % a 39 % agregar al Hto. + 3. De 40 % a 42 % agregar al Hto. + 1. Mayor de 42 % no se agrega nada.

OBSERVACIONES:

Debemos tener en cuenta que al mantener a las plaquetas por un tiempo prolongado y preparados hmedos o en componentes sanguneos con EDTA y Oxalatos; las plaquetas se modificarn morfolgicamente formando entre s prolongaciones espinosas y filamentosas; en forma flagelada y en forma de Tripanosomas, muy ajenas a su aspecto morfolgico normal.Existen a veces, una seudotrombopenia en las cifras registradas con los modernos aparatos automatizados. Esto se debe a una aglutinacin artificial en grumos de las plaquetas, o su adherencia en rosetas a los neutrfilos, por sangre recogida con EDTA; en la duda conviene proceder a un recuento final utilizando las tcnicas de sangre capilar.

INTERPRETACION CLINICA

TROMBOCITOSIS:Se observa en anemia pos. Hemorrgica, algunas infecciones agudas (Escarlata, Mononucleosis Infeccciosa, Neumona, Septicemia, Clera, etc.)En Leucemia Mieloide Crnica, Policitemia Vera, Enfermedad de Hodgking.

Despus de la Esplenoctoma (pasajera), por Adrenalina, en la Agona, Cardiopatas Valvulares con gran disnea, etc.

TROMBOCITOPENIA:Se observa Trombocitopenia primaria en la enfermedad de Werlof (PTI).En la Trombocitopenia secundaria se observa en una serie de enfermedades como: Infecciosas en casos graves, Sepsis, Fiebre Tifoidea, Viruela, Sarampin.

En complicaciones txicas con Benzol, Alrgicas en casos de Hipersensibilidad Congnita o adquirida (Belladona, Acido Salicilico, Picadura de Insectos, etc.

En mielopatas (complicaciones medulares, Leucemias, Carcinomatosis, Difusa en M.O., Mieloma Mltiple y otras Neoplasas con desplazamiento de Mdula Osea. Se observa tambin trombocitopenia en radiaciones, etc.

INTRODUCCION

El estudio citolgico de los elementos celulares de la sangre perifrica: seria roja y serie roja y serie blanca, serie plaquetaria. Constituye una gran importancia en el diagnstico patolgico que pueda tener un paciente al manifestar su malestar o dolencia orgnica.

Por tanto, el trabajo que realizamos en el laboratorio Stat, nos comprende en contribuir al xito satisfactorio de un buen tratamiento que se pueda lograr a favor del paciente.Nuestra responsabilidad es muy grande y delicada, debido al tipo de pacientes que concurren al Instituto de Enfermedades Neoplsticas con la esperanza de encontrar una solucin a su comprometida salud, ante el mal neoplstico que puedan tener cada uno de ellos.

Siendo el laboratorio Stat, un servicio estratgico, donde los exmenes Hematolgico, nos exigen a cada uno de nosotros: Conocimiento, cuidado, criterio, responsabilidad, etc. Es importante considerar que nuestra lnea de trabajo diario debe de coincidir bsicamente: EN UN MISMO CRITERIO DE TRABAJO, en lo acadmico y en el procedimiento tcnico diario de trabajo, que de lograrlo, habremos alcanzado algo nuevo y bueno, para nuestra propia satisfaccin profesional.

Por ultimo, procuremos hacer un nfasis en lo que no se debe hacer y lo que debe recordarse de modo especial desde el punto de vista prctico, en nuestra ya dilatada experiencia; debemos de aprender mucho de nuestros errores propios, as como de las equivocaciones ms frecuentes que tengamos.

Recordemos por tanto lo bueno que podamos hacer en la prctica diaria, de nuestro trabajo, para bien, de nuestro prjimo.

I. FORMULA LEUCOCITARIA.(Examen de la Sangre Perifricas)El examen morfolgico de la sangre perifrica comprende un estudio completo de la sangre perifrica que comprende a la serie Blanca, Roja y Plaquetaria. Y todo esto en su conjunto, es la prueba de laboratorio ms til en el diagnstico hemetolgico. En manos expertas, esta exploracin proporciona informacin valiossima sobre a dolencia que se investiga, y a menudo es diagnstico por s misma.Aqu se consideran a la serie Roja, Blanca y Plaquetaria.

1. Serie Blanca:Se denomina tambin Glbulos Blancos, o Leucocitos.Se encuentra normalmente en sangre perifrica y forman 3 tipos de grupo: (Neutrfilos, Basfilos y Eosinfilos), Linfocitos y Monocitos. El recuento porcentual de los distintos tipos de Leucocitos constituye la denominada Forma Leucocitaria.En la frmula leucocitaria los Glbulos Blancos presentan sus propias caractersticas de acuerdo a su lnea de maduracin y a su respectiva funcin de defensa en nuestro organismo.La serie Blanca comprende 4 lneas de maduracin perifrica standar. Los cuales son:

1) Polimorfonucleares:

Tienen de 10 a 12 mm. De dimetro. Su ncleo es Polilobulado y est formado por una cromatina densa. El citoplasma es ligeramente acidfilo y contiene granulacin neutrofila: (Neutrfilos), basofilia (Basfilos) eosinfilia (Eosinfilos). Los precursores de los polimorfonucleares son los siguientes:

Mieloblastos, Promielocitos, Mielocitos y Metamielocitos. Estos se hallan normalmente tan slo en la mdula Osea. Se llaman cayados bandas o neutrfilos, no segmentados a las clulas que proceden a los Polimorfonucleares en este desarrollo madurativo.En los granulocitos, en casos patolgicos, es muy notorio y fundamental conocer las 2 nicas alteraciones de estas clulas en dos grandes grupos:Alteraciones nucleares y Alteraciones del citoplasma.

Anomala

DescripcinMorfologa

I. Alteraciones nucleares: Anomala Constitucional del Pelger HuertLeucocitos con relativa ausencia de segmentacin. Queda configurado en forma de banda o en 2 segmentos.

Ncleos en anilladoHiposegmentacin nuclear con un gran agujero central (forma de donut)

Hiprsegmentacin nuclear Polinucleares con 4 o ms segmentos

PeocanocitoHipersegmentacin nuclear ms gigantismo celular

II. Alteraciones del citoplasma: Granulacin toxicaGranulacin primaria que se tie de forma pronunciada

DesgranulacinNeutrfilo sin granulacin aparece azulado y agranular

Anomala deAlder - ReillyGranulaciones groseras color violeta

Anomala deSteinbrinckChediak - HigashiGrnulos en forma de inclusiones azules oscuras de 9 a 3 um.

Cuerpos de DohleInclusiones basfilas y ovaladas o rectangulares

Bastones de AuerEstructuras azurofilas en forma de bastoncillo, de puntas afiladas (en neutrofilos y en blastos)

2) Linfocitos:Son clulas mononucleadas, de tamao comprendido entre los 7 y 18 um. El citoplasma suele ser escaso en algunos, basfilos de color azul claro y forma una fina banda perinuclear. Pueden tener granulaciones azurfilas en su citoplasma.Estas clulas en muchas patologas hemticas tienden a variar su morfologa y aspecto celular: observando muchas variantes como: Linfocitos de Ncleo hendido Linfocitos de Ncleo cerebroide Linfocitos de Aspecto Trevolado Linfocitos de Aspecto Comvulotado Linfocitos de Aspecto indentado, etc.

En la mayora de los procesos vrales agudos y crnicos, los linfocitos mantendrn una caracterstica celular propia; que inclusos pueden ser de aspectos atpicos, (en donde se pueden observar Linfocitos grandes de aspecto monocitoide, de tamao grande, hiperbasfilos; otros de citoplasma extendido. (Mononucleosis) bien atpicos.

3. Monocitos:

Tienen de 144 a 20 um. De dimetro, su ncleo puede adoptar diversas formas: Reniforme, Oval, Lobulado, etc.) su cromatina es laxa e irregular. El citoplasma es abundante, de color gris plido, y contienen granulaciones azurfilas muy finas, etc.

4. Plaquetas (ver captulo IV).

2. Serie Roja:

Se denomina tambin Glbulos Rojos, Eritrocitos o Hemates.Son los elementos ms maduros de la Hematopoyesis. Su principal funcin es la captacin de oxgeno y su transporte a los tejidos. La caracterstica de estos elementos es que son anucleados (sin ncleo), de color rosado y de forma redondeada u oval, con una depresin o zona ms clara en el centro.Su tamao normal es de 7 um. De dimetro y 2 um. De espesor. Las caractersticas de su coloracin son debidas a la riqueza y distribucin hemoglobnica de su interior, tambin su tamao y forma.

Las alteraciones de su forma y su contenido hemoglobnico de los elementos eritrocticos de la sangre perifrica, tras su tincin panptica (coloracin Wrirght - Giensa) en zonas correctamente extendidas en una lmina portaobjeto y si posterior observacin en el microscopio, es de gran utilidad en el diagnstico de diversas hemopatas.

Actualmente se conocen cuatro grupos de alteraciones de la serie Roja bien definidas, y estos grupos forman parte de una slida base de fundamentos y criterios standares en un buen diagnstico hematolgico perifrico.

Estos grupos son los siguientes:

AnomalaDescripcinMorfologa

I. Alteraciones de tamaoAnisocitosisDesigualdad en el tamao de los hemates

MicrocitosisPredominio de hemates de dimetro < 6 um y volumen 12 m y volumen > 100 fl

II. Alteraciones de la forma (poiquilocitosis):

EsquistocitosHemates fragmentados de 2-3 um

DacriocitosHemates con una proyeccin elongada en un polo (forma de pera, lgrima)

EsferocitosHemates de forma esfrica sin aclaramiento central

OvalocitosHemates en forma de valo

EliptocitosHemates en forma elptica

DrepanocitosHemates falciformes

Codocitos ohermates en dianaHemates con un rea con mayor contenido de hemoglobina que se sita en la zona central clara

EstomatocitosHemates que en su regin central clara poseen una hendidura en forma de boca

Hemates espiculados:

a) Equinocitos o hemates crenadosHemates con espculas cortas distribuidas regularmente por toda la superficie

b) Keratocitos o hemates en casco

Presentan dos proyecciones en forma de espculas con forma de casco o de sombrero de polichinela

c) Acantocitos o spur cellsHemates con perfil dentellado y espinnoso con espculas (3-12 y de distinta longitud)

d) ExcentrocitosHemates con distribucin anormal de la hemoglobina. Se dispone como despegada de la parte interna de la membrana y concentrada en uno de sus extremos

III. Alteraciones de la colaboracin de la hemoglobina

Policromasia Hemates jvenes que conservan parte de material basfilo del eritroblasto y se tien de color gris

IV. Inclusiones eritrocitarias

Corpsculo de Howell-JollyCorpsculos redondos nicos o mltiples de 1 um de dimetro de color rojo violceo

Anillos de CabotLnea muy fina en forma de anillo de color rosado

Punteado basfiloAgrupados de color azul grisceo

Cuerpos dePappenheimerGrnulos azul negruzco

Reticulocitos

Cuerpos de heinzEsfrulas azules (tincin vital)

SiderocitosGrnulos verdes (tincin Perts)

Parsitos

I. Reactivos

Anticoagulante EDTA 10 %:

Es la sal Dipotasica o Disodica del AcidoEtilendiamino Tretractico.

Mecanismo de accin:Por Quelacin impide que se ionice el calcio ejerciendo accin anticoagulante muy intensa. Ofrece buen ndice de conservacin de los elementos de la sangre, en especial de las plaquetas.Se una 0.1 ml de solucin al 10 % para 5 ml de sangre.

Colorante (Wright - Giensa)

2 grs. de colorante de Wright. 2 grs. de colorante de Giensa. Alcohol Metanol 2 Ltrs. 30.0 ml de Glicerina.

Soluciones:

Solucin Diluyente de Glbulos Blancos.

Acido Actico - - - - - - - - - - - -2ml. Agua Destilada - - - - - - - - - -100 cc. Azul de Metileno o - - - - - - - - -1 - 10 gotas. Violeta de Genciana.

Solucin de Hayens para Glbulos Rojos

Sulfato de sodio - - - - - - - - - - -133 gr Cloruro de sodio - - - - - - - - - - 10 grs. Menthiolate - - - - - - - - - - - - -25 grs. Agua Destilada - - - - - - - - - - -1,000 cc. Ajustar a pH 7.0 con Na OH 0.1 N.

Solucin para Recuento de Plaquetas.

Citrato de sodio - - - - - - - - - - 3.0 gr. Formol 40 % - - - - - - - - - - - -1.0 ml. Agua Destilada - - - - - - - - - - - 100 cc.

Disolver, filtrar y refrigerar, hasta por dos semanas.

FIBRINOGENO

DEFINICIN:

El fibringeno es una de las protenas ms importantes y constituye cerca del 5% de dichas protenas. La prueba de fibringeno es de utilidad en la diferenciacin de hemorragias por patologa heptica y la causada por el CID.

FUNDAMENTO:El fibringeno es una protena soluble que se convierte por accin de la trombina en un polmero insoluble resultando en la formacin de un coagulo de fibrina.

El tiempo de coagulacin de trombina del plasma diluido es inversamente proporcional a la concentracin de fibringeno en el plasma. Usando este principio, Clauss desarroll una prueba simple y cuantitativa para terminar el fibringeno a travs del tiempo de coagulacin obtenido con un plasma diluido despus de aadir trombina en exceso. El tiempo de coagulacin obtenido se compara despus de una curva de calibracin de febringeno.

METODO:En la actualidad usamos DADE BEHRING.

REATIVOS:

Reactivo de trombina Dade: Una proporcin de trombina bovina liofilizada y tamponada. Referencia para calibracin de fibringeno Dade: plasma humana citratada con albmina srica Tampn veronal de Owren, Dade

OBTENCION DE MUESTRA

Mezclar 9 partes de sangre recin extrada con una parte de citrato sdico al 3.8%. Centrifugar la muestra durante un mnimo de 10 minutos a 1000 r.p.m. tan pronto como sea posible despus de la extraccin. Se recomienda realizar la prueba inmediatamente, o sino separar el plasma del sedimento de hemates y mantenerlo refrigerado hasta el momento de su uso.

Preparar la curva de referencia para la calibracin de fibringeno realizando las Diluciones de 1:5 a 1:40 con la referencia para calibracin de fibringeno en tampn veronal Owren de Dade. El nivel equivalente de fibringeno de cada dilucin estndar de determina multiplicando el valor de la referencia para calibracin de fibringeno por el factor de correccin.

Representar grficamente los resultados de fibringeno de referencia en papel de log-log con la concentracin de fibringeno en la abscisa y el tiempo en segundo en al ordenada. La unin de los puntos debe producir una curva. Determinar las concentraciones de fibringeno en mg/dl de la curva de calibracin interpolando el tiempo de coagulacin obtenido de las diluciones 1:10 del plasma.

Para valores de fibringeno superiores a 800 mg/dl: Si el tiempo de coagulacin para algn paciente es extremadamente corto, diluir el plasma 1:20 en lugar de la dilucin de 1:10. Leer el nuevo valor en la grfica y multiplicar por 2.

MUESTRA DE PACIENTE

REALIZACION DE LA PRUEBA

Diluir la muestra del paciente 1:10 con tampn veronal

Pipetear en un tubo de ensayo incubado a 37C

Muestra diluida 1:10200 ul

Incubar a 37C. En bao Mara

Rvo. De Trombina Dade100 ul

Cronometrar el tiempo de coagulacin

El clculo de los resultados de los anlisis se puede efectuar, sobre la curva de referencia propia.

Nota: La curva de calibracin sola es vlida mientras se utilice el mismo lote de reactivo que se usa para realizar la curva. Nuevas curvas deben realizarse con cada cambio de lote de reactivo o cualquier cambio de instrumento.

CONTROL DE CALIDAD:

En cada serie de pruebas se deber realizar un control normal como Ci-Trol, control de coagulacin, Dade, nivel 1 y un control anormal como el control anormal para fibringeno, Dade.

LIMITACIONES DEL METODO:

Los resultados contenidos pueden ser afectados por la presencia de heparina o de productos de fibringeno en el plasma del paciente. Niveles significativos de una de estas sustancias pueden causar que la prueba indique valores bajos falsos.

VALORES NORMALES:

Adultos 160 a 300 mg/dlAncianos470 a 485 mg/dlNios:Recin nacido 150 a 300 mg/dlMayor 200 a 400 mg/dl

El intervalo normal para adulto aparentemente ser establecido por Dade Behring usando el mtodo descrito es de 200 400 mg/dl. Cada laboratorio deber determinar su intervalo normal tomando una muestra representativa de la poblacin, ya que los valores normales pueden variar de un laboratorio a otro.

FISIOLOGIA

El fibringeno es una de las protenas plasmticas ms importantes y constituye cerca del 5% de dichas protenas. Una vez que ha ocurrido la coagulacin, virtualmente todo el fibringeno se ha retirado del plasma. El fibringeno se produce en el hgado mediante lo que debe ser un proceso extremadamente eficiente debido a que es poco comn observa disminuciones que se presentan rara vez son inferiores a 100 mg/dl. Estas protenas plasmticas solubles se convierten por la accin de la trombina, en la presencia de calcio y del factor VII (factor estabilizador de la fibrina), a la fibrina que es una molcula proteica insoluble.Los pptidos (A Y B) que se separan de la molcula de fibringeno en este proceso son reactivos de fase aguda que responde a la inflamacin, lo cual establece una funcin doble del fibringeno en el cuerpo, es decir en la coagulacin y en la separacin inflamatoria.

Despus, la molcula de fibrina forma largos filamentos que se entretejen y dan lugar al coagulo, el cal atrapa a las clulas sanguneas.

FISIOPATOLOGIA

Las deficiencias de fibringeno pueden ser congnitas o adquiridas; su resultado puede ser:

1. Afibrinogenemia, fibringeno no mensurable2. Hipofibrinogenemia, fibringeno presente, pero en cantidades menores de 100 mg/dl. 3. Disfibrinogenemia, disminucin de la funcin del fibringeno (que se mide en su reaccin a la trombina, aunque est presente en cantidades normales medicin inmunolgica).

Las deficiencias adquiridas son resultados de trastornos deficientes slo en fibringeno pero, por otro lado, con procoagulantes normales, son menos graves que los sntomas de pacientes con deficiencias de uno de los dems procoagulantes. En consecuencia, la hemorragia que tiene lugar con muchas deficiencias congnitas de fibringeno no suele poner en peligro la vida, debido a que stas suelen ser unas deficiencias aisladas de fibringeno, los cuales sin embargo, son poco frecuentes en los trastornos hemorrgicos adquiridos (Henry, 1991).

LAS CONCENTRACIONES DE FIBRINOGENO AUMENTAN EN:

1. El anciano: Es una respuesta fisiolgica, cuyo propsito es incierto.2. Respuesta a estmulos inespecficos (por ejemplo, traumatismo, neoplasias, hemorragia)

LAS CONCENTRACIONES DE FIBRINOGENO DISNINUYEN EN:

1. Trastornos de coagulacin intravascular son consumo excesivo de la produccin, la ms comn es la coagulacin intravascular diseminada (CID), que se produce secundariamente a las complicaciones del embarazo como:

a. Aborto diferido (muerte fetal intrauterina tiempo atrs).b. Separacin prematura de la placenta.c. Embolia del lquido amnitico despus de la administracin de oxitocina (se cree que todas las anteriores se deben a la liberacin de sustancias parecidas a la tromboplastina, proveniente de la placenta y del liquido amnitico hacia la circulacin).2. CID secundario a otros trastornos (stos se presentan con mayor frecuencia para el CID relacionado con el embarazo) como en:

a. Cncer prosttico con metstasis, de la cual se cree que produce un activador de fibrolisina (plasmingeno).b. Septicemia.c. Choque quirrgico y postoperatorio.d. Ciruga de derivacin postcardiaca.e. Trombosis masiva

3. Enfermedad heptica (cirrosis, hepatitis), debido a una menor produccin la cual por lo general no es evidente en clnica, a menos que se acompae de deficiencias de otros factores que pueden causar signos y sntomas clnicos.

4. Trastornos que provocan mayores concentraciones de fibrinolisinas (enzima que destruyen fibringenos) y fibrinlisis activa como:

a. Cncer a la prstata con metstasisb. Despus de ciruga torcica

5. Deficiencias congnitas, en tanto que los otros factores de coagulacin son normales.

DIMERO D

INTRODUCCION

La formacin del coagulo sirve para interrumpir la prdida de sangre por un vaso lesionado, pero en definitiva, dicho coagulo debe ser eliminado para que se restablezca el flujo sanguneo. Su disolucin se produce merced a la accin del sistema fibrinoltico. La enzima plasmina va rompiendo secuencialmente una serie de puentes en las molculas de fibrina. Liberando productos de degradacin de la fibrina ( PDF) de naturaleza peptdica y produciendo la lisis del coagulo. Estos fragmentos terminales caractersticos es el compuesto de dos fracciones D y una fraccin E (fragmento D2E), que se denomina DIMERO D.

Los PDF producidos en la fibrinolisis poseen por si mismo efectos anticoagulantes, inhibiendo la polimerizacin de la fibrina y la actividad enzimtica de algunas enzimas Anticoagulantes sobre todo la trombina.

La molcula de fibringeno est compuesta originalmente por dos zonas en los extremos de la misma conocidas como D-dominio, una central llamada E-dominio, y dos pares de fibrinopeptidos A y B, tambin de ubicacin central, la trombina cliva los fibrinopeptidos, produciendo la polimerizacin, el factor XIIIa acta a continuacin realizando enlaces cruzados entre dos dominios prximos para as tener una malla de fibrina estable. Posteriormente la plasmina cliva la fibrina, pero no puede cortar la unin cruzada entre los D dominios, por lo que el Dmero D es la ms pequea unidad molecular resistente a la plasmina que contiene un enlace cruzado PDF (XL-PDF).

PRUEBAS DEL LABORATORIO

Los PDF producidos durante la fibrinolisis in vivo pueden unirse al fibringeno o permanecer libres en la circulacin. Cuando se analizan los PDF en los sueros del paciente, solo de cuantifica esta ltima fraccin, por lo que este tipo de pruebas presenta el problema potencial de la obtencin de los resultados negativos. En el inmunoanalisis de inhibicin de la de la hemaglutinacin de hemates teidos, los PDF presentes en el suero del paciente neutralizan el antisuero antifibringeno, impidiendo as que aglutine los eritrocitos cubiertos por fibringeno. Existe otro mtodo ms rpido que consiste en que los PDF presentes en el plasma del paciente aglutinen directamente bolitas de ltex cubiertos con anticuerpos monoclonales (AM)se mejor enormemente la especificidad y sensibilidad de las pruebas, que incluyen ELISA, aglutinacin de ltex (manual y automatizada) y hasta la determinacin de Dimero D en sangre total (simpliRED D-Dimer).

En1983 AGEN Biomedical ltd. (Australia) invent y patent internacionalmente el primer plasma D-Dimer Test para medir XL-PDF, el anticuerpo que fue usado es l A. Monoclonal DD-3B6/22, de gran especificidad(por lo misma poca tambin surgi l DIMERTEST EIA, (AGEN) kit de Elisa en base al mismo AM.). El Dimer Test Ltex tiene una sensibilidad de 200ng/ml. Pasan los aos y en 1990 es lanzado internacionalmente el SIMPLIRED-D-DIMER, ensayo de ultima generacin que utiliza un anticuerpo bioespecfico, el DD-3B6/22-RAT-1C3/86, de afinidad tanto al Dmero D Como a los glbulos rojos humanos, el anticuerpo se une a los glbulos rojos humanos sin producir aglutinacin, siendo necesaria la presencia de concentraciones elevadas (mayores de 120 ng/ml) de dmero D para que esta ocurra. Al igual que el ensayo en ltex tiene un gran valor predictivo negativo, y se usa mas en casos de exclusin de trombosis venosa profunda y su mayor complicacin, el embolismo pulmonar.

TECNICA Y PROCEDIMIENTO DEL TEST

Coleccin de la muestra Se recomienda que el plasma anticoagulado sea con citrato. Extraer la sangre venosa en plstico o jeringa siliconizada. Realizar una buena venopuncin, evitar la contaminacin con fluido tisular. A razn de 9 partes sangre con una parte de citrato de sodio es critico. La solucin de citrato trisdico debe ser al 0.109 M Citrato de sodio al 3.8%. Mezclar por inversin y centrifugar a 3,000 rpm por minutos. Si no se trabaja de inmediato pasar el plasma a un tubo de plstico, este es estable por 4 horas a temperatura de 18 a 25 C, 8 horas de 2 a 8 C y 1 mes a 20C.

PROCEDIMIENTO

Test sigma diagnostic

METODO CUALITATIVO

Sacar los reactivos del kit y atemperarlos por un mnimo de 10 minutos. Agitar el reactivo de Ltex por inversin de 5 segundos antes de usar. Colocar 20 ul de muestra, control positivo y control negativo dentro del circulo de la tarjeta test. Agregar 20 ul de Ltex dentro del circulo. Mezclar rpidamente las muestras y Ltex con un palito que llega en el kit y encender el cronmetro. Rotar la tarjeta por espacio de 180 a 200 segundos.

Resultado:

POSITIVO es aglutinacin, debe compararse el resultado obtenido con los controles.

Mtodo semicuantitativo

Solo para muestras que salieron positivos en el test.

1. - Seriadamente diluir 50 ul 1:2, 1: 4, 1:8, con 50 ul de solucin Buffer.

Tubo NDilucin delPlasmaPlasmaBuffer

11:250 ul50 ul

21:450 ul de dil.al 1:250 ul

31:850 ul de dil. al 1:450 ul

2. - Colocar las diluciones y marcar la posicin en la tarjeta test agregar el ltex y mezclar segn lo descrito anteriormente.

RESULTADOS

Cuando la aglutinacin ocurre a los 200 segundos entonces la muestra contiene ms de 250 ng/ml de D-Dmero. Examinando las diluciones de la muestra seriadas los resultados pueden ser obtenido. Vea cuadro adjunto

D-Dmero(ng/ml)SinDilucin1:2Dilucines1:41: 8

250----

250 500+---

500 1000++--

1000 2000+++-

2000++++

Los factores que afectan los niveles de D-Dimero son:

El tamao inicial del coagulo. El tiempo transcurrido desde el inicio del episodio trombtico. Potencial fibrinoltivo. Depsitos de fibrina alternativos. Influencia de la terapia anticoagulante. Limitaciones del ensayo.

APLICACIN CLINICA

El incremento del nivel de dimero D se reporta en los casos de:

Coagulacin intravascular diseminada. Trombosis venosa profunda (TVP). Embolia pulmonar (EP). Monitoreo de disoluciones del coagulo en al terapia tromboltica

Complicaciones en embarazo Infarto agudo del miocardio Sickle cell crisis. Pronsticos y respuestas a la terapia del cncer Cirrosis

TIEMPO DE PROTROMBINA

INTRODUCCION

Hemostasia es el cese de sangrado que sigue a la interrupcin traumtica de la integridad vascular. Para la hemostasia existen cuatro fases. La primera fase es la contraccin del vaso daado con el objeto de disminuir el flujo distal de la sangre a nivel de la herida. La segunda fase, consiste en la formacin de un tapn lavo de plaquetas, o trombo blanco, en el lugar del dao. El colgeno expuesta en este sitio acta como base para la fijacin de las plaquetas, las cuales en respuesta e la unin con el colgeno experimenta una desorganizacin de su estructura interna y liberan troboxano y ADP. Estos compuestos inducen a otras plaquetas a unirse a las que estn adheridas al colgeno, formando el tapn laxo y temporal de plaquetas. La tercera fase, es la formacin del trombo rojo (coagulacin sangunea). La cuarta fase es la disolucin parcial o completa del cogulo.

Hay tres tipos de trombos o de cogulos. El rombo blanco est compuesto de plaquetas y fibrina y es relativamente pobre en eritrocitos. Se forma en el sitio de una herida o de una pared vascular anormal, particularmente en las reas de circulacin sangunea rpida (arterias). Un segundo tipo de trombo en un depsito diseminado de fibrina que se forma en los vasos pequeos (capilares). El trombo rojo es el tercer tipo de cogulo y est constituido por erictrocitos y fibrina. Se pueden formar in vivo en reas de circulacin retardada sin que haya anormalidad alguna de la pared vascular o se puede formar en el sitio de un dao o pared vascular de manera concurrente con el tampn plaquetario inicial.

El comienzo de la formacin del cogulo en respuesta al dao tisular s realizado por la va extrincica. La iniciacin del trombo rojo puro en un rea de circulacin sangunea restringida o en respuesta a una pared vascular anormal se realiza por va intrnseca. Las cas intrnsecas y extrnsecas convergen en una ruta final comn la activacin de protrombina a trombina y la formacin catalizada por la trombina de fibringeno a fibrina.

SIGNIFICACION CLINICA:

La coagulacin sangunea puede iniciarse por exposicin de la sangre al factor tisular (sistema extrnseco) o por activacin de factores de contacto del plasma (sistema intrnseco).Es til el concepto de las dos vas de inicio para comprender dos pruebas principales de la coagulacin, el tiempo parcial de tromboplastina activada (aPTT) en la que el plasma se activa por la va intrnseca y el tiempo de protrombina (PT), en la que se aade factor tisular al plasma, de manera que la activacin prosigue por la va extrnseca. Es muy importante la activacin del factor IX, un factor intrnseco, por el factor VII, un factor extrnseco, porque las deficiencias de estos dos factores, y tambin de los factores que siguen al factor IX en las vas intrnsecas y comn, es decir, los factores VIII, X, V, II, y I, se acompaan de tendencias a hemorragias. En contraste, la deficiencia del factorXII, precalicrena o ciningeno de alto peso molecular no causa un problema hemorrgico y la deficiencia del factor XI se acompaa de una tendencia a hemorragias solas en una minora de casos.Entre las distintas pruebas de exploracin de los factores que interviene en la coagulacin, la determinacin del tiempo de protrombina es considerar entre las de primer orden de utilidad.Originalmente se pens que el TP meda nicamente la actividad protrombnica (factor II) del plasma, de all su nombre. Sin embargo, el descubrimiento de nuevos factores permiti concluir que dicho mtodo es una prueba global para evaluar la coagulacin extrnseca siendo sensible a:

Factor II o protrombina. Factor V o proacelerina Factor VII o proconvertina Factor X o Stuart Power.

Por lo tanto la determinacin se aplica a:

Estudios de problemas hemorrgicos, como los realizados de rutina en los anlisis prequirrgicos. Deteccin de alteraciones en los niveles de uno o ms factores involucrados en la va extrnseca, originadas por enfermedades hereditarias, patolgicas hepticas, administracin de frmacos, enfermedad hemoltica del recin nacido, ictericia obstructiva. Control de la teraputica con anticoagulantes orales.

FUNDAMENTO DEL METODO

La prueba del PT se basa en la medida del tiempo que tarda en coagular en plasma descalcificado a 37 y en presencia de un exceso de tromboplastina tisular y calcio (tromboplastina de cerebro).Este tiempo de protrombina es usado predominantemente como prueba pre- operatoria para detectar probablemente potenciales de hemorragia. Un test de PT anormal generalmente prolongado es indicativo de una concentracin reducida de uno o ms Factores de la va extrnseca de coagulacin de la sangre. Esta alteracin puede ser causada por trastornos hereditarios en la coagulacin, deficiencia de vitamina K, dolencias hepticas o administracin de drogas.El tiempo de protrombina tambin es para monitorear tratamiento con anticoagulantes orales.El tiempo de protrombina no es sensible a deficiencias del sistema intrnseco de coagulacin, o deficiencias plaquetarias, ni puede ser usado para monitorear un tratamiento con heparina.

REACTIVO PT:

La protrombina de cerebro, es un extracto de cerebro de conejo puro al cual se le ha aadido calcio. S suminitra en forma liofilizada y debe reconstituirse con agua destilada. Una vez reconstituido, est listo para emplearse en el test de tiempo de protrombina.

PREPARACION DEL REACTIVO:

1. Se deja que los viales de tromboplastina de cerebro se equilibren a temperatura ambiente (20 25C) antes de proceder a la reconstitucin con agua destilada.2. Se pipetea exactamente 5 ml de agua destilada en el vial de 5 ml de tromboplastina de cerebro. Algunas veces vienen viales de mayor cantidad, por lo que se recomienda verificar y agregar la cantidad necesaria de agua destilada.3. Despus de la adicin de agua, se espera ms o menos entre 15 y 20 minutos para que se lleve a cabo la reconstitucin completa. Se debe agitar el vial antes de utilizarlo, debido a que el reactivo se presente en forma de suspencin y no una solucin homognea

INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO:

Si se almacena entre 2 y 8C, los viales precintados de tromboplastina de cerebro son estable hasta la fecha de caducidad impresa en la caja y en las etiquetas. Una vez reconstituido, el reactivo de tromplastina de cerebro es estable durante cinco das a temperatura de refrigerador (2 y 8C), durante un da completo a temperatura ambiente (20 - 25C) o durante un da de trabajo a la temperatura e incubacin (37C).

EXTRACCION Y PREPARACION DE LA MUESTRA

No se requiere ningn tipo de preparacin especial del paciente antes de la extraccin de la muestra.Mediante una aguja estril con jeringa o con tubo la vaco se extrae la muestra, evitando la estasis y la contaminacin con fluido tisular. La sangre empleada para los estudios de coagulacin debe tratarse con citrato de sodio al 3.2 3.8% a una proporcin de 9/1 de sangre entera a anticoagulante. La proporcin de sangre a anticoagulante es critica ya que podran obtenerse tiempos de coagulacin errneos si se usa proporcin diferente.El test de coagulacin debe ejecutarse dentro de las dos horas siguientes a la extraccin si la muestra ha sido almacenada entre 2 y 8C. En caso de no procesarse dentro de las 4 horas contadas desde la obtencin, la muestra debe congelarse rpidamente (a 20C), de tal forma, puede conservarse durante un mes. Al momento de usarlo se debe descongelar tambin rpidamente.

PROCEDIMIENTO DEL TEST:

1. Colocar el plasma (desconocido o control) en bao Mara a 37C durante 2 3 minutos (no ms de 10 minutos).2. En un tubo colocar 0.2 ml de reactivo de TP reconstituido, pre-incubar a 37C durante 2 3 minutos (no ms de 10 minutos).3. Pipetar 100 ul de plasma preincubado agregar rpidamente al tubo conteniendo 0.2 ml de reactivo TP, disparando simultneamente el cronmetro.4. Mantener el tubo dentro del bao Mara y cerca de una fuente de luz. Previo el tiempo estimado de coagulacin sacar el tubo del bao, inclinar suavemente una o dos veces por segundo y detener el cronmetro en el momento de aparicin del cogulo.5. Normalmente se calcula el tiempo promedio de coagulacin por duplicado (para cada plasma o control). Si la diferencia entre los replicados de una misma muestra es mayor del 5% se aconseja repetir el procedimiento desechando los valores anteriores.En casos de emplear un instrumento de medicin deben seguirse las instrucciones del fabricante del mismo.

RESULTADO

Los resultados pueden expresarse de distintas formas:1. Tiempo de protrombina en segundos.2. Porcentaje de actividad protrombnica, respecto de un plasma normal (100% de actividad); para ello se debe trazar una curva de actividad protrobinica de un pool de plasma frescos normales o comparar con una tabla que viene con el kit.3. Razn Internacional Normalizado (INR):Recientemente la OMS ha recomendado el uso del INR, para el monitoreo de la terapia con medicamentos anticoagulantes a base de cumarina, a fin de que resulten comparables los datos obtenidos en distintos laboratorios y con tromboplastina de distinto origen.La conversin de tiempo de protrombina (TP) a INR se efecta fcilmente de la siguiente manera:

( ISI) TP del pacienteINR = TP plasma normal

TP del paciente y TP del plasma normal debe ser determinados con la misma tromplastina.

ISI. : Indice de Sensibilidad Internacional, es la constante que permite determinar la sensibilidad de cada lote de tromboplastina con relacin a la primera preparacin internacional de referencia primaria. Los ISI se calcula para cada lote.

VALORES NORMALES:

El intervalo de valores observados en pacientes normales oscila entre:

Tiempo de protrombina en segundos:12 + 2 Porcentaje de actividad protrombnica: 70 100%

Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios intervalos a valores de referencia. Para pacientes bajo tratamiento con antivitaminas K se ha establecido un rango teraputico que se puede expresar como:

Porcentaje de actividad protrombnica:25 35 %

EL TP SE PROLONGA EN:

1. Ingestin inadecuada de vitamina K como en:

a. Enfermedad hemorrgica del recin nacido, debido al suministro inadecuado de leche. La leche es la nica fuente de vitamina K para el recin nacido ya que ste carece de bacterias intestinales necesarias para su sntesis.b. El estado de ayuna total antes de la ciruga en personas que tuvieran esterilizacin intestinal mediante antibitico.

2. Alteracin de la absorcin intestinal de la vitamina K como en:

a. Esprue.b. Colitis ulcerativa o enfermedad de Crohn.c. Ictericia obstructiva.3. Enfermedad heptica parenquimatosa como en:

a. Cirrosis.b. Hepatitis

4. Personas que estn utilizando ciertos medicamentos como:

a. Colestiramina (Questran) debido a que se une a sales biliares.b. Aspirina en grandes dosis.c. Tratamiento con antibiticos a largo plazo, debido a que disminuya la sntesis de vitamina K.d. Grandes cantidades de laxantes, debido a que disminuye la absorcin de vitamina K.e. La warfarina o el dicumarol, debido a la disminucin de la sntesis de vitamina K. El valor teraputico de protrombina con estos frmacos suele ser de 1 a 2 veces el lmite normal.

5. Estados mrbidos que producen inhibidores de la coagulacin, como el Lupus eritematosos, el alcoholismo, la insuficiencia renal, la desnutricin y el escorbuto.

EL TP DISMINUYE EN:

1. Respuesta al tratamiento con ciertos frmacos (por ejemplo, vitamina K, esteroides anablicos).2. Personas que consumen una dieta excesivamente rica en grasa o una con ingestin excesiva de alimentos ricos en vitamina K.3. Hiperfuncin ovrico.