Identificaci ón y Serotipificaci ón de .Identificaci ón y Serotipificaci ón de Salmonella spp

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Text of Identificaci ón y Serotipificaci ón de .Identificaci ón y Serotipificaci ón de Salmonella spp

  • IdentificaciIdentificacin y Serotipificacin y Serotipificacin de n de Salmonella Salmonella spp. spp.

    San JosSan Jos de Costa Rica (Costa Rica) de Costa Rica (Costa Rica) 27 de abril al 2 de Mayo de 200927 de abril al 2 de Mayo de 2009

    IV Curso de CapacitaciIV Curso de Capacitacin del Programa WHO Global n del Programa WHO Global Salmonella Surveillance Salmonella Surveillance AmAmrica Centralrica Central

    Dra. Mara Ins CafferServicio Enterobacterias

    Departamento Bacteriologa INEI ANLIS Dr. Carlos G Malbrn

  • CaracterCaracterstica Microbiolstica Microbiolgicas gicas del Gdel Gnero nero Salmonella Salmonella

    El gEl gnero nero SalmonellaSalmonella pertenece a la Tribu pertenece a la Tribu SalmonelleaeSalmonelleae, de la Familia , de la Familia Enterobacteriaceae.Enterobacteriaceae.

    Los miembros del gLos miembros del gnero nero SalmonellaSalmonella son bacilos son bacilos gramgram--negativos, de 0,7negativos, de 0,7--1,5 x 2,01,5 x 2,0--55m, generalmente m, generalmente mmviles por flagelos perviles por flagelos pertricos (excepto tricos (excepto SS. Gallinarum), . Gallinarum), anaerobios facultativos, no esporulados. anaerobios facultativos, no esporulados.

  • TaxonomTaxonoma del Ga del Gnero nero SalmonellaSalmonella

    Salmonella enterica que se divide en 6 subespecies:

    Salmonella enterica subespecie enterica (I)

    Salmonella enterica subespecie salamae (II)

    Salmonella enterica subespecie arizonae (IIIa)

    Salmonella enterica subespecie diarizonae (IIIb)

    Salmonella enterica subespecie houtenae (IV)

    Salmonella enterica subespecie indica (VI)

    Salmonella bongori (V)

    El Gnero Salmonella comprende 2 especies:

  • Nomenclatura del GNomenclatura del Gnero nero SalmonellaSalmonella

    nicamente las serovariedades de Salmonella enterica subespecie enterica( que costituyen ms del 99,5 % de los aislamientos de Salmonella) se designan con un nombre, relacionado con el lugar geogrfico donde se aisl la primera cepa de la nueva serovaridad. Este nombre se escribe con letras romanas, no en itlica y la primer letra va con mayscula.Ej. Salmonella Typhimurium; Salmonella Oran

    Las serovariedades pertenecientes a las subespecies restantes deSalmonella enterica y a Salmonella bongori (muy escasas en patologa humana y veterinaria) se designan con el nombre de la subespecie, seguido de la frmula antignica.Ej. Salmonella IV 50 : b : - y Salmonella IV 44 : a : -.

    Los nombres de todas las serovariedades estn contenidos en el Esquema de Kauffmann-White, publicado por el Centro Colaborador de la OMS de Referencia e Investigacin de Salmonella, del Instituto Pasteur de Pars.

  • TTcnicas de aislamiento, cnicas de aislamiento, identificaciidentificacin y caracterizacin y caracterizacin de n de

    SalmonellaSalmonella spp. spp.

  • Flujograma de Aislamiento,Flujograma de Aislamiento, IdentificaciIdentificacin y Caracterizacin y Caracterizacin de n de Salmonella Salmonella spp.spp. a partir de materia fecala partir de materia fecal

    Una vez realizada la identificacin bioqumica y la serotipificacin, se contina con: La determinacin de la sensibilidad a los antimicrobianos Estudios de subtipificacin molecular por electroforesis en campo pulsado (PFGE), para el estudio de brotes y para el monitoreo programado de aislamientos circulantes.

    MATERIA FECAL (HISOPO)

    Suspensin en solucin fisiolgica

    Caldo de enriquecimiento Aislamiento en medios selectivos y

    diferenciales

    18-24 hs, 37C

    Aislamiento en medios selectivos y diferenciales

    Colonias tpicas

    TSI LIA Estra

    18-24 hs, 37C

    Lectura Colonias tpicas

    TSI LIA Estra

    P. bioqumicas

    Serotipificacin O

    Caldo Flagelar

    Lectura de P. Bioq.

    P. bioqumica

    Serotipificacin O

    18-24 hs, 37C

    Lectura de P. Bioq. Serotipificacin H

    1er. da

    2do. da

    3er. da

    4to. da

  • Propiedades bioquPropiedades bioqumicas diferenciales de micas diferenciales de las subespecies de las subespecies de SalmonellaSalmonella

    Pruebas bioqumicas

    S. enterica

    subesp. enterica(I)

    S. enterica

    subesp.salamae (II)

    S. enterica

    subesp.arizonae

    (IIIa)

    S. enterica

    .diarizonae

    (IIIb)

    S. enterica

    subesp.houtenae

    (IV)

    S. enterica

    subesp.indica

    (VI)

    S. bongori

    (V)

    Dulcita + + - - - d +ONPG - - + + - d +Malonato - + + + - - -Gelatina - + + + + + -Sorbita + + + + + - +KCN - - - - + - +L(+) tartrato + - - - - - -Mucato + + + - (70%) - + +Salicina - - - - + - -Lactosa - - - (75%) + (75%) - d -Habitat de la mayora de las cepas

    Animales de sangre caliente

    Animales de sangre fra y medio ambiente

    + 90% ms de los resultados positivos; - 90% ms de los resultados negativos; d: diferentes

    reacciones

    Pruebas bioqumicas

    S. enterica

    subesp. enterica(I)

    S. enterica

    subesp.salamae (II)

    S. enterica

    subesp.arizonae

    (IIIa)

    S. enterica

    .diarizonae

    (IIIb)

    S. enterica

    subesp.houtenae

    (IV)

    S. enterica

    subesp.indica

    (VI)

    S. bongori

    (V)

    Dulcita + + - - - d +ONPG - - + + - d +Malonato - + + + - - -Gelatina - + + + + + -Sorbita + + + + + - +KCN - - - - + - +L(+) tartrato + - - - - - -Mucato + + + - (70%) - + +Salicina - - - - + - -Lactosa - - - (75%) + (75%) - d -Habitat de la mayora de las cepas

    Animales de sangre caliente

    Animales de sangre fra y medio ambiente

    + 90% ms de los resultados positivos; - 90% ms de los resultados negativos; d: diferentes

    reacciones

    Pruebas bioqumicas

    S. enterica

    subesp. enterica(I)

    S. enterica

    subesp.salamae (II)

    S. enterica

    subesp.arizonae

    (IIIa)

    S. enterica

    .diarizonae

    (IIIb)

    S. enterica

    subesp.houtenae

    (IV)

    S. enterica

    subesp.indica

    (VI)

    S. bongori

    (V)

    Dulcita + + - - - d +ONPG - - + + - d +Malonato - + + + - - -Gelatina - + + + + + -Sorbita + + + + + - +KCN - - - - + - +L(+) tartrato + - - - - - -Mucato + +

    Pruebas bioqumicas

    S. enterica

    subesp. enterica(I)

    S. enterica

    subesp.salamae (II)

    S. enterica

    subesp.arizonae

    (IIIa)

    S. enterica

    .diarizonae

    (IIIb)

    S. enterica

    subesp.houtenae

    (IV)

    S. enterica

    subesp.indica

    (VI)

    S. bongori

    (V)

    Dulcita + + - - - d +ONPG - - + + - d +Malonato - + + + - - -Gelatina - + + + + + -Sorbita + + + + + - +KCN - - - - + - +L(+) tartrato + - - - - - -Mucato + + + - (70%) - + +Salicina - - - - + - -Lactosa - - - (75%) + (75%) - d -Habitat de la mayora de las cepas

    Animales de sangre caliente

    Animales de sangre fra y medio ambiente

    + 90% ms de los resultados positivos; - 90% ms de los resultados negativos; d: diferentes

    reacciones

  • .

    ONPG -

    Produccin de SH2+

    Fermentacin de glucosa *** +/con gasFermentacin de dulcita *** +Fermentacin de adonita *** -Decarboxilacin de lisina ** +Decarboxilacin de ornitina ** +Hidrlisis de arginina ** +Hidrlisis de urea ** -Produccin de indol -Hidrlisis de gelatina **** -Reaccin de rojo de metilo * +Reaccin de Voges Proskauer * -Citrato de Simmons ** +Utilizacin de malonato * -*Lectura a los 2 das; ** Lectura hasta los 4 das; *** Lectura hasta los 7 das; **** Lectura hasta los 30 das

    Pruebas bioquPruebas bioqumicas de micas de Salmonella Salmonella entericaenterica subesp. subesp. entericaenterica (I)(I)

    Pruebas bioqumicas Salmonella enterica subep. enterica (I)

    Fermentacin de lactosa *** -

  • Caracteres bioquCaracteres bioqumicos diferenciales entre micos diferenciales entre SS. Typhi, . Typhi, SS. Paratyphi A y . Paratyphi A y SalmonellaSalmonella spp.spp.

    P. bioqumicas S. Typhi S. Paratyphi A Salmonella spp. SH2 (TSI) Trazas - + Lisina decarboxilasa + - + Ornitina decarboxilasa - + + Arginina dehidrolasa - - + Glucosa (gas) - + + Citrato Simmons - - +

    + 90% ms de los resultados positivos; - 90% ms de los resultados negativos

  • Caracteres bioquCaracteres bioqumicos diferenciales entre micos diferenciales entre Salmonella Salmonella entericaenterica subesp. subesp. entericaenterica (I) y (I) y Proteus mirabilisProteus mirabilis

    Pruebas bioqumicas Salmonella enterica subesp.enterica (I)

    Proteus mirabilis

    SH2 (TSI) + +Hidrolisis de urea - +Fenilalanina deaminasa - +Lisina decarboxilasa + -Ornitina decarboxilasa + +Lactosa - -Dulcita + -ONPG - -

    + 90% ms de los resultados positivos; - 90% ms de los resultados negativos

  • Caracteres bioquCaracteres bioqumicos diferenciales entre micos diferenciales entre Salmonella Salmonella entericaenterica subesp. subesp. entericaenterica (I) y (I) y Citrobacter freundiiCitrobacter freundii

    Pruebas bioqumicas Salmonella enterica subesp. enterica (I)

    Citrobacter freundii

    SH2 (TSI) + +

    Urea (hidrlisis) - d Lisina decarboxilasa + - Ornitina decarboxilasa + d Lactosa (fermentacin) - d Sacarosa (fermentacin) - d Dulcita (fermentacin) + d Malonato (fermentacin) - d ONPG - +

    + 90% ms de los resultados positivos; - 90% ms de los resultados negativos; d: diferentes reacciones

  • Caracteres bioquCaracteres bioqumicos diferenciales entre micos diferenciales entre Salmonella Salmonella entericaenterica subesp. subesp. entericaenterica (I), (I), Edwarsiella tardaEdwarsiella tarda y y

    Escherichia coliEscherichia coli SHSH22 ++

    P. bioqumicas S. enterica subesp.enterica (I)

    E. tarda E. coli SH2 +

    Indol - + +Citrato Simmons + - -Lisina decarbox. + + +Arginina dehidrol. + - -/+Manita + -