Bio logy o f t h e Cell, Volume 63, 1988

ETUDE ULTRASTRUCTURALE DES MODIFICATIONS NUCLEOLAIRES AU COURS DES PROCESSUS D'ENKYSTEMENT ET DE DEKYSTEMENT D'ACANTHAMOEBA CASTELLANII. Pierre DEHAN et Guy GOESSENS. Laboratoire de Biologie cellulaire et t issulaire. Inst i tu t A. Swaen, 20, rue de Pitteurs, B-q020 Liege, Belgique.

Los amibes du genre Acanthamoeba sent des Protozoaires qui, places dans des conditions de milieu d~favorables se diff~rencient en kystes en s'entourant d'une paroi de nature essentiellement cellulo- sique. A ce stade I'activitd transcript ionnelle est compl~tement inhib~e.

Nous avons provoqu~ I'enkystement synchrone de populations d'Acanthamoeba castellanii grace I'utUisation d'un milieu d'enkystement d~pourvu de source de carbone et d'azote. Des kystes matures ont ensuite ~t~ replaces dans du milieu nu t r i t i f normal pour induire le ddkystement et la reprise de la vie trophique. Nous poss~dons donc un materiel biologique propice ~ IV~tude des modifications nu- cl~olaires accompagnant I 'arr~t et la reprise de I 'activit~ transcript ionnel le.

Los modifications nucldolaires constat~es au coun's de I'enkystement sent ~uccessivement: - une ddsorganisation du nucleolonema caractdrist ique du nucldole du trophozoTte - une r~duction du volume nucldolaire total accompagnde d'une compaction des constituants f ibr i l la i res

du nucldole - une s~grEgation nucl~olaire apparaissant en moyenne 14 heures apr~s le t ransfer t en milieu d 'en-

kystement - I 'apparit ion 30 heures apr~s I' induction de I'enkystement d'une masse homog~ne tr~s dense aux

Electrons au contact du nucl~ole qui est r~duit ~ du materiel f ibr i l lo-granula i re di f fus. Au cours du ddkystement, nous observons la rdapparit ion des constituants nucl~olaires classiques

alors qua la masse dense dispara~t progressivement.

2UBFPACTIONS OF HI HISTONE IN THE NUCLEI OF PROLIFERATING AND

INDUCED FRIEND CELLS-I~'~UNOFLUORESCENT LOCALIZATION AND PRTEIN A/GOLD ELECTRON

MICROSCOPY. T.Banchev, L.Srebrevs, J.Zletsnova, P.Petrov and R. Tsanev. Institute of Molecular Biology, Bulg~rlan Academy of Sciences, 1i13 Sofia, Bulgaria.

Hlstone HI ° subfractlon was recently considered to play a possible role in funda-

mental processes ss cell proliferatlon,dlfferen%iatlon and malignant transformation,

The proposed role of HIOaa s replicetlon represser was based excluseve~y on the

inverse correlation between its amount and +he repllcatlve state of differen~ mammalian cells.

We approached +his problPm by studies ~t %he single cell level aimed to localize

H1 ° by means of light Immunocytochemistry and ultrastructural investig~tlon using

p r o t e i n A / lmmunogold method. Immunofluorescent s t a i n i n g shows t h a t in EAT and in

Fr iend c e l l s h i s t o n e s H1 ab a re a s s o c i a t e d with The bu lkch roma t in , where lmmunogold

method I n d i c a t e s i t s enr ichment in h~ te roohroma t in . Both t eohn i~ues show t h a t H1 °

I s absent in the e x t r s n u c l e o l ~ r r eg ion , but ~ low ammount i s observe~ in the nuBia-

o l i by immunofluorescence. I n v e s t i g a t i n g induced Fr iend o e l l e - H1 ° has s p e r i p h e -

r a l l o c a l i z a t i o n in chromat tn r eg ions where a c t i v e genes might be s i t u a t e d . To s gres+ ex ten t t h i s web oonfirme~ a l s o by ~he lmmunogold method.

INCLUSIONS INTRANUCLEAIRES DANS LA MYOPATHIE 0CULOPHARYNGEE F . !'1, 3 1 " c , ~ i :~. ~'~ ~c~c~'* (2), D. Ploton (3), H. Co l l i n (1) et M.L. Shelanski ( , ) . (1) INSERM U.153, Paris, (~) Stat ion Centrale de Microscopic Electronique, Inst i tu t Pasteur, Paris, (3) Laboratoire d'Histologie et INSERM U. 31~, Reims et (~) Department of Pathology, Columbia University, New York.

La myopathie oculopharyng~e est une maladie musculaire de survenue tardive, cliniquement caract#ris~e par un ptosis des paupi~res et une dysphagie. A transmission autosomique dominante, ]a myopathie oculopharyngee a une tres large distr ibut ion geographique mais les cas los plus nombreux sent france-canadians ayant pour anc~tre commun un couple fran~ais immigr~ au Quebec en 1634 'Barbeau, 1966, In: Progressive Muskeldystrophie, Myotonie, Myasthenie E. Kuhn, ed Berlin, Springer, p. I02). " ' ,

Los ~tudes ultrastructurales de biopsies musculaires de malades attaints oar cette affection ont demontr~ la presence constante de filaments tubulaires darts los noyaux des fibres musculaires (Tom~ et Fardeau, 1980, Acts Neuropath., ~9, 7, 85). Cos structures ont un diam~tre externe de 8,5 nm, un diam~tre interne d'environ 3 nm et une periodicit@ longitudinale d'environ 9 rim. Sur une coupe ultra-f ine donnee, 2 & 5% des sections de noyaux presentent cos structures. Des inclusions intranucl@aires identiques non jamais eta decrites dans aucune autre situation normale ou pathologique.

Dana ie but de pr@ciser la nature de cos inclusions, des etudes immunocytochimiques et ultrastructurales ont ~t~ entreprises. Aucun des trOs nombreux anticoros O]rig~s centre des prot~ines filamentaires bien caract@r,sees qui ont @t@ ut i l is#s, n'a gas permis ]a detection des noyaux anormaux. La reaction r~gressive & I'EDTA (Bernhard, 1969, 3. Ultrast. Res. 27, 250) n'a pas diminu~ le contraste des inclusions intranucleaires ce qui sugg~re qu'elles ne sent pas constitutes par de I'ADN. Des @tudes st~r@-ologiques ont permis de montrer qua la disposition des filaments est complexe et tr~s caract@ristique. Cos inclusions filamentaires constituent le marqueur morphologique de la myoDathie oculopharyngee et son identi f icat ion devra permettre de corner l 'or ig ine de cette affection.

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