Isolasi Senyawa Metabolit Sekunder Dari Tumbuhan Tembelekan

Embed Size (px)

Citation preview

  • 7/26/2019 Isolasi Senyawa Metabolit Sekunder Dari Tumbuhan Tembelekan

    1/26

    LAPORAN PRAKTIKUM KIMIA ORGANIK II

    PERCOBAAN VII

    ISOLASI SENYAWA METABOLIT SEKUNDER TUMBUHAN

    TEMBELEKAN (Lantana camara L.)

    Oleh:

    Nama : Ben Sa!"#$a

    S#am%"& : 'IC ) **+

    Kel,m!,& : V (Lma-

    A#en : Rna/a#

    LABORATURIUM KIMIA

    'AKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

    UNIVERSITAS HALU OLEO

    KENDARI0*1

    I. PENDAHULUAN

    A. La#a$ Bela&an2Tumbuhan merupakan salah satu kekayaan hayati yang menarik untuk

    dipelajari kandungan kimianya secara kimia. Tumbuhan menghasilkan metabolit

    primer yang berupa polisakarida, protein dan lemak yang biasanya digunakan

    untuk memenuhi kebutuhan sandang, pangan dan merupakan sesuata kebutuhan

    pokok bagi kelangsungan hidup manusia. Disamping itu tumbuhan juga

    mengandung senyawa metabolit sekunder yang memiliki struktur yang beragam.

  • 7/26/2019 Isolasi Senyawa Metabolit Sekunder Dari Tumbuhan Tembelekan

    2/26

    Umumnya, metabolit sekunder dihasilkan melalui tahap-tahap reaksi

    dalam jaringan tumbuhan yang disebut biosintes. Alkolod, terponoid, steroid dan

    flaonoid merupakan beberapa contoh kelompok senyawa yang dihasilkan dari

    biosintesis. !enyawa metabolit sekunder adalah salah satu senyawa organik bahan

    alam yang banyak jumlahnya dengan ariasi strutur yang banyak pula.

    Alkoloid merupakan salah satu diantaranya, dimana berdsarkan

    klasifikasinya merupakan bahan alam yang memiliki jenis cincin heterosiklik

    nitrogen yaitu pirolidin, piperidin, isokuinolin, kuinolin dan indol. !elain itu dapat

    ditemukan dalam berbagai tumbuhan misalnya alkoloid tembelekan. Dan juga

    berasal dari asam-asam amino alifatik dan asam-asam amino aromatik. "egunaan

    dari senyawa sekunder pada dasarnya adalah sebagai pelindung dari serangan

    hama, penguat tumbuhan dan pengatur kerja hormon.

    #enis senyawa yang terdapat pada daun tembelekan begitu banyak, dalam

    artian terdapat senyawa-senyawa yang polar juga terdapat senyawa nonpolar.

    Tergantung dari senyawa apa yang diinginkan sehingga dilakukan suatu kerja

    dimana merupakan sistem isolasi. $solasi senyawa ini dilakukan tidak lain untuk

    mengisolasi senyawa yang banyak terdapat pada tumbuhan tersebut dalam bentuk

    sampel. %erdasrkana uraian diatas, maka dilakukanlah percobaan $solasi !enyawa

    &etabolit !ekunder dari Tumbuhan Tembelekan 'L. camara linn).B. R"m"an Maalah

    (umusan masalah dalam percobaan isolasi senyawa metabolit sekunder

    dari tumbuhan tembelekan 'L. camara linn) yaitu

    *. %agaimana mengetahui tehnik isolasi senyawa metabolit sekunder tumbuhan

    isolasi tembelekan 'L. camara linn) +

  • 7/26/2019 Isolasi Senyawa Metabolit Sekunder Dari Tumbuhan Tembelekan

    3/26

    . %agaimana mengetahui proses pemurnian senyawa metabolit sekunder

    tumbuhan tembelekan 'L. camara linn) +

    C. T"3"an

    Tujuan dilakukannya percobaan isolasi senyawa metabolit sekunder dari

    tumbuhan tembelekan 'L. camara linn) yaitu

    *. Untuk mengetahui tehnik isolasi tumbuhan senyawa metabolit sekunder

    tumbuhan tembelekan 'L. camara linn).. Untuk %agaimana mengetahui proses pemurnian senyawa metabolit sekunder

    tumbuhan tembelekan 'L. camara linn).

    D. Man4aa#

    &anfaat yang ingin dicapai pada percobaan isolasi senyawa metabolit

    sekunder dari tumbuhan tembelekan yaitu

    *. Dapat mengetahui tehnik isolasi senyawa metabolit sekunder tumbuhan isolasi

    tembelekan 'L. camara linn).

    . Dapat mengetahui proses pemurnian senyawa metabolit sekunder tumbuhan

    tembelekan 'L. camara linn).

  • 7/26/2019 Isolasi Senyawa Metabolit Sekunder Dari Tumbuhan Tembelekan

    4/26

    II. TIN5AUAN PUSTAKA

    A. M,$4,l,2 T"m%"han Tem%ele&an

    Tanaman tantana tembelekan (L. camara linn) berbunga warna merah.

    Lantana di $ndonesia disebut juga tembelekan atau bunga tembelek, bunga

    tembelekan mempunyai aroma yang khas yang baunya tidak sedap dan kurang

    mengenakkan karena baunya kurang sedap pada saat diremas, tanaman ini

    dikenal juga sebagai big sage dimalaysia, di $ndonesia tanaman tembelekan

    banyak ditanam sebagai tanaman pekarangan. %erikut ini adalah klasifikasi dan

    marfologi tumbuhan tembelekan

    "ingdom lantea

    !uper Diisi !permatophyta

    $nfra "ingdom !treptophyta

    "elas &agnaliopsida

    rdo /amiales

    0amili 1erbenaceae

    2enus /antana /

    !pesies /antana 3emara'ach, 4*).

    &anfaat bunga tembelekan yaitu salah satu bahan alami yang aman dan

    dapat digunakan sebagai insektisida nabati untuk larasida adalah ekstrak daun

    tembelekan. Daun tembelekan mengandung minyak atsiri, alkaloid, saponin,

    flaonoid, dan tanin yang dapat membunuh lara yang dapat membantu dalam

    menangani ancaman penyakit yang sering terjadi dalam masyarakat, selain itu

    kandungan minyak atsiri dapat digunakan sebagai bahan makan

    %egitu banyak senyawa metabolit sekunder yang terdapat pada tumbuhan

    tembelakan 'Lantana camara L.). senyawa-senyawa tersebut dapat disajikan pada

    tabel berikut

    5ama !truktur (eferensi Bagian

    Tanama

  • 7/26/2019 Isolasi Senyawa Metabolit Sekunder Dari Tumbuhan Tembelekan

    5/26

    n

    Asam6,7dio8o-

    urs-*-en-9-oic

    O

    CO0H

    OHC

    ':ada;Tripat

    hi, 446) Daun

    Asamurso8i

    MeO

    CO0H

    O

    Begum et

    al., 2003%unga

    &etilurso8ylat

    MeO

    CO0Me

    O

    Begum et

    al., 2003%unga

    Asamursangilik

    HO

    CO0H

    O

    Begum et

    al., 2003%unga

    !tigmastrol

    HO

    O

    Laiet al.,

    1998%unga

  • 7/26/2019 Isolasi Senyawa Metabolit Sekunder Dari Tumbuhan Tembelekan

    6/26

    Asambetulonik

    O

    CO0H Lai etal.,

    1998%atang

    AsamUrsetho8iHO

    CO0H

    O

    Begum et

    al., 2002 %atang

    Asam/antanolik

    -hidroksi-

    oleanonikHO

    CO0H

    O

    OH

    H

    H

    Singh et al.,

    (1996)Akar

    Asam/antaiursoli

    k

    (H3C)H2CH2COC

    CO0H

    O

    H

    H

    H+C

    HO

    Singh et al.,

    (1996)Akar

    ApigeninHO O

    OOH

    OH

    (Nagao et

    al., 2002)Daun

  • 7/26/2019 Isolasi Senyawa Metabolit Sekunder Dari Tumbuhan Tembelekan

    7/26

    "irsiliolO

    OOH

    OMe

    MeO

    MeO

    OH

    (Nagao et

    al., 2002)Daun

    uinin, saponin,

    steroid, triterpin, ses>uiterpenoid dan tanin 'arwanto, 4*6).

    Lantana camara L. 'family 1erbenaceae) berasal dari daerah tropis dan

    daerah sub-tropis dan di negara Amerika merupakan tumbuhan yang sangat

    penting sebagai pengobatan. !ebagaimana telah dijelaskan pada latar belakang

    bahwa tumbuhan ini merupakan tumbuhan darat yang liar juga beracun. Dan juga

    tanaman kebun ini populer sebagai hiasan. Tumbuhan ini telah dibudidayakan

  • 7/26/2019 Isolasi Senyawa Metabolit Sekunder Dari Tumbuhan Tembelekan

    8/26

    oleh produksi industri kertas dan metabolit sekundernya banyak digunakan. Dari

    segi ekonomi metabolit sekunder sangat penting sebagai obat, bumbu masakan,

    wewangian, sebagai ?at pewarna, bahan racun pembunuh serangga dan penambah

    nafsu makan.di dunia kesehatan digunakan sebagai obat kanker, cacar air, campak,

    asma, bisul dan malaria tentunya '!ingh, 4*@).

    B. Sen6a/a Me#a%,l# Se&"n7e$ (SMS-

    Akunder &etabolit sekunder adalah senyawa metabolit yang tidak

    esensial bagi pertumbuhan organisme dan ditemukan dalam bentuk yang unik

    atau berbeda-beda antara spesies yang satu dan lainnya. 0ungsi metabolit

    sekunder adalah untuk mempertahankan diri dari kondisi lingkungan yang

    kurang menguntungkan, misalnya untuk mengatasi hama dan penyakit,

    menarik polinator, dan sebagai molekul sinyal. $dentifikasi kandungan

    metabolit sekunder merupakan langkah awal ang penting dalam penelitian

    pencarian senyawa bioaktif baru dari bahan alam yang dapat menjadi prekursor

    bagi sintesis obat baru atau prototipe obat beraktiitas tertentu '(asyid, 4*).

    2olongan senyawa metabolit sekunder adalah alkaloid, flaonoid,

    saponin, tanin, steroid dan triterpenoid. !enyawa metabolit sekunder yang

    dihasilkan oleh tanaman dapat dianalisis kemampuan sitotoksiknya melalui

    metode %rine !hrimp /ethality Test '%!/T). &etode %!/T adalah salah satu

    cara yang digunakan untuk mengetahui kemampuan toksik terhadap sel

    'sitotoksik) dari suatu senyawa, yang dihasilkan oleh ekstrak tanaman

    dengan menggunakan ara udang Artemia salina /each sebagai bioindikator.

    %!/T la?im digunakan karena lebih murah, mudah, cepat dan hasilnya akurat.

    !elain itu, metode ini telah terbukti memiliki hasil yang berkorelasi dengan

    kemampuan sitotoksik senyawa anti kanker '%aud, 4*7).

  • 7/26/2019 Isolasi Senyawa Metabolit Sekunder Dari Tumbuhan Tembelekan

    9/26

    C. E$a&

  • 7/26/2019 Isolasi Senyawa Metabolit Sekunder Dari Tumbuhan Tembelekan

    10/26

    pelarut tertentu. %eberapa hal yang harus diperhatikan untuk tercapainya

    kondisi optimum ekstraksi antara lain senyawa dapat terlarut dalam pelarut

    dengan waktu yang singkat, pelarut harus selektif melarutkan senyawa yang

    dikehendaki, senyawa analit memiliki konsentrasi yang tinggi untuk

    memudahkan ekstraksi, serta tersedia metode memisahkan kembali senyawa

    analit dari pelarut pengekstraksi '0ajriati, 4**).

    D. K$,ma#,2$a4 K,l,m G$a8#a (KKG-"romatografi didefinisikan sebagai prosedur pemisahan ?at terlarut oleh

    suatu proses migrasi diferensial dinamis dalam sistem yang terdiri dari fase,

    salah satu diantaranya bergerak secara berkesinambungan dengan arah tertentu

    dan di dalamnya ?at-?at itu menunjukan perbedaan mobilitas disebabkan adanya

    perbedaan dalam absorbsi, partisi, kelarutan, tekanan uap,ukuran molekul atau

    kerapatanmuatan ion. Dengan demikian masing-masing ?at dapat diidentifikasi

    atau ditetpakan dengan metode analitik '$sti>omah, 4*6).

    ""2 termasuk jenis teknik "romatografi yang paling awal

    dikembangkan dan termasuk kromatografi serapan yang sering disebut

    kromatografi elusi. "olom kromatografi dapat berupa pipa gelas yang dilengkapi

    dengan kran dan gelas penyaring di dalamnya. Ukuran kolom tergantung pada

    banyaknya ?at yang akan dipisahkan. Untuk menahan penyerap yang

    diletakkan di dalam kolom dapat digunakan glass woll atau kapas. Aplikasi

    teknik ini banyak digunakan untuk pemurnian senyawa setelah melewati teknik

    "/T, misalnya untuk pemurnian karotenoid, klorofil, serta senyawa bioaktif

    tumbuhan lainnya. Teknik ini tidak dilengkapi dengan spektrometer yang

    secara otomatis dapat mengukur spektrum serapannya. %iasanya, pengambilan

  • 7/26/2019 Isolasi Senyawa Metabolit Sekunder Dari Tumbuhan Tembelekan

    11/26

    fraksi cairan dilakukan secara manual dan kemudian diukur dengan

    spektrometer '&aslebu, 4*6).

    E. K$,ma#,2$a4 La! T! (KLT-

    "romatografi /apis Tipis '"/T) dan kromatograsi kolom pada

    prinsipnya sama. Apabila suatu cuplikan yang merupakan campuran dari

    beberapa komponen yang diserap lemah oleh adsorben akan keluar lebih

    cepat bersama eluen, sedangkan komponen yang diserap kuat akan keluar lebih

    lama). "/T merupakan suatu teknik pemisahan dengan menggunakan adsorben

    'fase stasioner) berupa lapisan tipis seragam yang disalutkan pada permukaan

    bidang datar berupa lempeng kaca, pelat aluminium, atau pelat plastik.

    engembangan kromatografi terjadi ketika fase gerak tertapis melewati adsorben

    '&ukhriani, 4*7).

    Analisis "/T dilakukan untuk mengetahui jumlah fraksi komponen

    senyawa kimia yang terdapat dalam ekstrak serta untuk optimasi eluen yang

    sesuai untuk kromatografi kolom. Tahap awal yang dilakukan dalam analisis

    "/T adalah optimasi pelarut. 'Ayuni, 4*6).

  • 7/26/2019 Isolasi Senyawa Metabolit Sekunder Dari Tumbuhan Tembelekan

    12/26

    !ilika gel merupakan suatu bentuk dari silika yang dihasilkan melalui

    penggumpalan sol natrium silikat '5a!i). !ol mirip agarCagar ini dapat

    didehidrasi sehingga berubah menjadi padatan atau butiran mirip kaca yang

    bersifat tidak elastis. !ifat ini menjadikan silika gel dimanfaatkan sebagai

    ?at penyerap, pengering, dan penopang katalis. !ilika gel merupakan produk

    yang aman digunakan untuk menjaga kelembaban makanan, obat-obatan, bahan

    sensitif, elektronik, dan film sekalipun. roduk anti lembab ini menyerap lembab

    tanpa mengubah kondisi ?atnya. =alaupun dipegang, butiran-butiran silika gel ini

    tetap kering 'andayani, 4*7).

    ertimbangan untuk pemilihan pelarut pengembang 'aluen) umumnya

    sama dengan pemilihan eluen untuk kromatografi kolom. Dalam kromatografi

    adsorpsi, pengelusi eluen naik sejalan dengan pelarut 'misalnya dari heksana ke

    aseton, ke alkohol, ke air).

  • 7/26/2019 Isolasi Senyawa Metabolit Sekunder Dari Tumbuhan Tembelekan

    13/26

    pada tingkat kepolarannya yang memyebabkan terjadinya pemisahan komponen

    '0askalia, 4*7).%agaimana kelarutan senyawa dalam pelarut, hal ini bergantung pada

    bagaimana besar atraksi antara molekul-molekul senyawa dengan pelarut.

    %agaimana senyawa melekat pada fase diam, misalnya gel silika. al ini

    tergantung pada bagaimana besar atraksi antara senyawa dengan gel silika.

    "romatografi lapis tipis menggunakan plat tipis yang dilapisi dengan adsorben

    seperti silika gel, aluminium oksida 'alumina) maupun selulosa. Adsorben

    tersebut berperan sebagai fasa diam 0asa gerak yang digunakan dalam "/T sering

    disebut dengan eluen. emilihan eluen didasarkan pada polaritas senyawa dan

    biasanya merupakan campuran beberapa cairan yang berbeda polaritas, sehingga

    didapatkan perbandingan tertentu.

  • 7/26/2019 Isolasi Senyawa Metabolit Sekunder Dari Tumbuhan Tembelekan

    14/26

    III. METODE PRAKTIKUM

    A. Wa" Dan Tem!a#

    raktikum "imia rganik pada percobaan $solasi !enyawa &etabolit

    !ekunder dari Tumbuhan Tembelakan 'lantana camara, L.) dilaksanakan pada

    hari !abtu &aret 4*@, ukul *47- selesai, bertempat di /aboratorium (iset

    Terpadu, 0akultas &atematika dan $lmu engetahuan Alam, Uniersitas aluoleo,

    "endari.

    B. Ala# Dan Bahan

    . Ala#

    Alat-alat yang digunakan pada praktikum percobaan isolasi senyawa

    metabolit sekunder tumbuhan tembelekan yaitu eaporator * (angkaian alat

    refluks, lampu U1, gelas kimia, pipet tetes, corong chamber, kolom, batang

    pengaduk, spatula, pingset, plat "/T, kayu, lidi, tali,statifdan klem.

    0. Bahan

    %ahan-bahan yang digunakan pada praktikum percobaan isolasi senyawa

    metabolit sekunder tumbuhan tembelekan ini antara lain adalah tembelekan

    'Lantanacamara/inn), silika gel, n- heksana 'CH3(CH2)4CH3), klorofom '33l6),

    kertas saring, aluminium foil, serium sulfat '3e'!7), etil asetat '33),

    dan kapas.

  • 7/26/2019 Isolasi Senyawa Metabolit Sekunder Dari Tumbuhan Tembelekan

    15/26

    C. P$,e7"$ &e$3a

    . P$,e7"$ &e$3a !e$#ama

  • 7/26/2019 Isolasi Senyawa Metabolit Sekunder Dari Tumbuhan Tembelekan

    16/26

    - dipotong menggunakan catter denganukuran cm 8* cm

    - ditotolkan sampel pada plat

    menggunakan pipet kapiler

    - dimasukkan kedalam chamber yang

    berisi larutan eluen yaitu n-heksana dan

    etil asetat dengan system bergradien

    - disinari dengan warna yang dihasilkan

    plat menggunakan lampu U1

    !ampel

    0. P$,e7"$ &e$3a &e7"a

    embuatan kolom kromatografi

    - ditimbang beberapa gram

    - dilarutkan kedalam beberapa m/ n-heksan

    - dimasukkan kedalam kolom kromatografi

    - ditambahkan larutan n-heksan secara terusmenerus sehingga gel silica memadat

    - dimasukkan potongan kecil kertas saring

    - dimasukkan ekstrak daun tembelekan

    yang sebelumnya telah diperoleh

    oaporasi

    - ditimbang fraksi yabg keluar dari kolom

    !ampel

    embuatan kromatografi lapis tipis

    !ilika gel

    2el silica yang telah

    memadat dalam kolom

    kromatografi

    !ilika gel

  • 7/26/2019 Isolasi Senyawa Metabolit Sekunder Dari Tumbuhan Tembelekan

    17/26

    - dipotong menggunakan catter dengan

    ukuran cm 8* cm

    - ditotolkan sampel pada platmenggunakan pipet kapiler

    - dimasukkan kedalam chamber yang

    berisi larutan eluen yaitu n-heksana dan

    etil asetat dengan system bergradien

    - disinari dengan warna yang dihasilkan

    plat menggunakan lampu U1

    !ampel

  • 7/26/2019 Isolasi Senyawa Metabolit Sekunder Dari Tumbuhan Tembelekan

    18/26

    IV. HASIL DAN PEMBAHASAN

    A. Hal Pen2ama#an

    . Da#a !en2ama#an

    N

    ,

    '$a& S!,

    #

    Gam%a$

    '$a& S!,#

    Pem%an7n

    2

    9:+

    R4

    *;