KÄLTE-WÄRME- reaktive AUTOANTIKÖRPER · Verlauf meist akut-reversibel Intravasale Hämolyse Hämoglobinurie Therapie: Behandlung der Grunderkrankung und Schutz vor Kälteeinwirkung

www.roteskreuz.at 1

Blutspendezentrale für Wien, Niederösterreich und Burgenland

KÄLTE-WÄRME- reaktive

AUTOANTIKÖRPER

35.Informationsgespräch BSZ 26.11.2011

www.roteskreuz.at

Charakteristika der Auto-Ak

2


Kälte-Auto-Ak

Wärme-Auto-Ak

Biphasische Hämolysine

Optimale Reaktionstemperatur in vivo

0-4°C

37°C

0-4°C Ak-Bindung 37°C Hämolyse

Immunglobulintyp

IgM

IgG

IgG

Produktion

Monoklonal, polyclonal

Meist polyclonal, manchmal monoclonal

Polyclonal

Verursachte Erkrankung

CHD (cold haemolytic disease)

WAIHA (warm autoimmune haemolytic anaemia)

PCH (paroxysmal cold haemoglobinuria)

www.roteskreuz.at

Positiver Direkter Coombstest bei allen Formen

3


Ak-oder C-Komponente an den Erythrozyten

Zellabbau Rate

Zellabbau durch Makrophagen in der

IgG+C3 maximal Leber IgG3 Meist hoch

ca.100 Ak-Moleküle/Ery

Milz

IgG1 Hoch ca.1000 Ak Moleküle/Ery, sonst kein Zellabbau

Milz

IgG2 und IgG4 Meist kein Zellabbau

C3c gering Leber C3d Kein Zellabbau

www.roteskreuz.at

Kälte-Auto-Antikörper

AIHA vom Kälteantikörpertyp

- idiopathisch

- sekundär,

z.B. Inf.mit Mycoplasmen, Virusinf., infektiöse

Mononucleose, Zytomegalie (Anti-i), Röteln (Anti-Pr), CLL,

Lymphome, etc.

4


www.roteskreuz.at 5



IgM-Ak, in der Regel bei 4°C und RT wirksam

BG-Bestimmung oft nur bei 37°C möglich, körperwarme Testreagenzien verwenden!

Bedside-Test: oft BG AB!

Spezifitäten: meistens (Auto)-Anti-I, Anti-HI, Anti-H (bei BG A1, A1B),

Anti-Pr (Protease sensitive)

www.roteskreuz.at 6



Menge H-Substanz: 0>A2>B>A2B>A1>A1B>0h (Bombay)

Zur Abklärung von Anti-I,HI werden Nabelschnurzellen benötigt

DCT meist isoliert Komplement positiv

Kälteagglutinine kommen in den meisten menschlichen Seren vor, Titer jedoch nicht > 1:32! Kälteagglutinintiter von 1:64 und höher pathologisch (für den Kliniker)

Klinische Relevanz: Bestimmt durch Wärmeamplitude!

www.roteskreuz.at 7


TABELLE Anti-HI Testresultate mit “typischen” Kälteagglutininen

Anti-I Anti-i Anti-H Anti-HI

A1 4+ 0-1+ 0-1+ 0-2+

A2 4+ 0-1+ 2-3+ 4+

B 4+ 0-1+ 2-3+ 2-3+

O 4+ 0-1+ 4+ 4+

O Cord 0-2+ 4+ 3-4+ 0-2+

Auto 0-4+ 0-1+ 0-2+ 0-2+

www.roteskreuz.at 8


Biphasische Hämolysine Paroxysmale Kältehämoglobinurie Donath-Landsteiner-AIHA)

Ursachen: Bei Erwachsenen Begleiterkrankung bei Syphilis

Bei Kindern im Anschluß an Virusinfektionen, wie Influenza,

Masern, Mumps, Varizellen

Verlauf meist akut-reversibel

Intravasale HämolyseHämoglobinurie

Therapie: Behandlung der Grunderkrankung und Schutz vor Kälteeinwirkung

Spezifität Auto-Ak : Anti-P, „biphasisches Hämolysin“

Bluttransfusionen meist nicht notwendig!

www.roteskreuz.at

Wärmeautoantikörper

AIHA vom Wärmeantikörpertyp

- idiopathisch

- sekundär

CLL, Morbus Hodgkin, Myelom, Immundefekte (z.B. AIDS),

Autoimmunerkrankungen (z.B. Syst.Lupus erythematodes,

Sjögren-Syndrom, Rheumatoide Arthritis), solide Tumore,

etc…

9


www.roteskreuz.at 10


Serologisches Bild-Wärmeautoantikörper Transfusionsempfehlungen

1) Ak negativ, E-Ko isoliert positiv

2) Alle Panel-Zellen reagieren in Karte positiv, E-Ko positiv

Röhrchen negativ

3) Alle Panel-Zellen reagieren in Karte und Röhrchen positiv, E-Ko

positiv

4) Spezifische Auto-Antikörper, z.B. Auto-Anti-e, Auto-Anti-D

5) Kälte- und Wärmeauto-Ak kombiniert

Röhrchenansatz bei Auto-Ak: Albuminmilieu!



Serologisches Bild-Wärmeautoantikörper Transfusionsempfehlungen

1) Ak negativ, E-Ko positiv, D.C. pos.

wenn Vortransfusion innerhalb der letzten beiden Wochen Elution empfohlen (z.B. Anti-Jka in Bildung bzw.Boosterung!)

Transfusionsempfehlung: Keine Ak im I.C. bei 37°C,

2) Alle Panelzellen reagieren in Karte positiv, E-Ko und D.C. pos., Röhrchen negativ Allo-Ak mit hoher Wahrscheinlichkeit auszuschliessen!

Transfusionsempfehlung: AK im I.C., nicht spezifizierbar, SKP nach der Standardmethode im Röhrchen

CAVE: Befund Auto-Panagglutinine, wenn keine Röhrchenmethode

gemacht wird!



Verzögerte hämolytische Transfusionsreaktion Anti-Jka ,Anti-c

www.roteskreuz.at

Verzögerte hämolytische Transfusionsreaktion Anti-Jka, Anti-c

13




Serologisches Bild-Wärmeautoantikörper Auto-Panagglutination-Transfusionsemfehlungen 3) Alle Panel-Zellen reagieren mit dem Patientenserum im I.C. positiv,

sowohl in der Karte als auch im Röhrchen! E-Ko und D.C. positiv

Ursache: frei im Serum vorhandene Wärme-Autoantikörper (im Überschuss)

Gefahr: Übersehen von Allo-Ak (hämolytische Transfusionsreaktion stärker als bei Auto-Ak!)

Transfusionsempfehlung: Auto und Panagglutinine, SKP nicht möglich, biolog.Vorprobe nach Oehlecker

IgG1+IgG3 pos. Transfusion nur bei vitaler Indikation

Wenn ausreichend Zeit Adsorption





Wärmeautoantikörper-Auto-Panagglutination

Spezifität bei Auto+Pan: oft gegen ein hochfrequente Ag, z.B. Auto-Anti-Wrb, -LW, MNSs-System (Anti-U, Anti-Ena) etc…

Spezifität häufig auch aus dem Rhesussystem

Multispezifitäten bzw. Kombination mit „unspezif. Auto-Ak“

„vorgetäuschte“ Spezifitäten



Serologisches Bild-Wärmeautoantikörper-Transfusionsempfehlungen

4) Spezifische Auto-Antikörper

Auto-Anti-D Elution meist gute Ergebnisse

Auto-Anti-e Elution meist unspezifische Ergebnisse

Meist kombiniert mit anderen Spezifitäten

Auto+Pan oft gegen ein hochfrequentes Ag

www.roteskreuz.at

Auto-Anti-D-Fallbeispiel 1

1947 geb.Pat., Cirrhosis hep., Caecumperforation, Peritonitis, HB 5,5

4 EK`s angefordert

BG B RhD positiv-Anti-D (Karte und Röhrchen)

D.C. IgG3+, Eluat: isoliertes Anti-D

Patientenserum mit RhD negativer Nabelschnurzelle: negativ,

Mit LWa neg., RhD positiven Zelle: positiv

RH-SSP: RHD D/d, RHCE Ccee

Auto-Anti-D

Transfusionsempfehlung: B RhD negativ

18




Auto-Anti-D- Fallbeispiel 1

ELUAT

www.roteskreuz.at

Auto-Anti-D-Transfusionsempfehlungen

Pseudo-Auto-Anti-D (im Eluat keine Spezifität erkennbar), Reaktionen im Röhrchen negativ: RhD positiv

Echtes Auto-Anti-D (Eluat Anti-D): Reaktionen im Röhrchen negativ: RhD positiv

Echtes Auto-Anti-D (Eluat Anti-D): Reaktionen im Röhrchen positiv: RhD negativ

bei Knappheit von RhD negativen EK`s: bei allen Konstellationen: RhD positiv

20




Zusammenfassung Ursachen für Anti-D bei RH-D positiv bzw. weak-partial D

Allo-Anti-D bei partial D

(gewisse „weak D-Typen“, z.B. weak D type 15, etc..)

Auto-Anti-D (pos. E-Ko!!)

Allo-Anti-LWa

Auto-Anti-Lwa mit Supression der LWa-Antigene (DCT meist schwach pos. bzw.negativ)

Pseudo-Auto-Anti-D (im Eluat keine Spezifität erkennbar)



Spezifische Wärmeautoantikörper-Transfusionsempfehlungen

Auto-Anti-e

Auto-Anti-e nur in Karte, Röhrchen negativ, E-Ko und D.C. positiv

Eluat: keine Spezifität erkennbar

Transfusionsempfehlung: AK im I.C., nicht spezifizierbar,

Bei Phänotyp ..D.ee bzw…ddee: Transfusionsempfehlung: E negativ! (um Bildung eines Allo-Anti-E zu verhindern) KP im Rö

Bei Phänotyp ..D.Ee: Transfusionsempfehlung: e negativ, wenn ausreichend Konserven mit Phänotyp ccD.EE vorhanden KP in Karte

Bei Phänotyp ccddEe: keine ccddEE-Konserven verfügbar!



Spezifische Wärmeautoantikörper-Transfusionsempfehlungen Auto-Anti-e

Auto-Anti-e in Karte und Röhrchen, E-KO und D.C. positiv

Elution: keine Spezifität erkennbar

Transfusionsempfehlung: AK im I.C., nicht spezifizierbar, V.a. Auto-

Anti-e. Wegen des Autoantikörpers SKP nicht möglich, Transf.

nach biologischer Vorprobe (bei ee), E negativ.

Bei Ee, Standardmethode im Rö, e negativ

Wenn im Eluat isoliert ein Anti-e nachweisbar ist

Transfusionsempfehlung: Wärmeautoantikörper der Spezifität

Auto-Anti-e

Überlebenszeit EE-Erys nicht signifikant höher!



B+, CcD.ee D.C. IgG 4+

Auto-Anti-e ELUAT



Auto-Anti-e im I.C.



Auto-Anti-e im I.C.-ELUAT



Auto-Anti-e im I.C. Papain-ELUAT



Negativkontrolle vor Elution aus Überstand



Spezielle Testmethoden zur weiteren Abklärung

„Serumverdünnung“-Ak-Titration

Differentialabsorption

Elution

Wärme-Autoabsorption

Kälte-Autoabsorption



„Serumverdünnung“-Titration-Wärme-Auto-AK

Serum-Verdünnung 1:2,1:4,1:8,1:16,1:32,1:64 (Karte 6 Pos.)

3-DM-I.C.-Karten jeweils mit Panel-Zelle-Screening I,II,III tropfen

Die Verdünnungsstufe, wo noch eine Reaktion sichtbar ist, mit 11-Panel tropfen

Bei Wärmeautoantikörpern: Mit allen 3 Zellen bei einer Titerstufe gleiche Reaktionsstärke

Bei spezifischem Allo-AK: bei höherer Verdünnung noch immer Reaktion

CAVE: niedrigtitrige Allo-AK können durch Verdünnung auch nicht identifiziert werden!



Beispiel-Serumverdünnung: Anti-E, Titer 1:3



Röhrchen-Panel: alle Zellen gleichmäßig 1+ positiv, Papain: alle Zellen 4+



Röhrchen: alle Zellen 1+

DM-Karte

Differentialabsorption Fallbeispiel 3,MDS,polytransfundierter Patient

D.C. IgG 3+

Papain alle Zellen 4+

A+,ccD.ee



Im Absorbat Anti-C, Anti-E Verwendete Testzelle ccD.ee

Genetisches Ag-Profil: Jk,Fy,MNS Ag heterozygot positiv



Anti-C, Anti-E, Gel-Karte ABSORBAT



Wärme-Autoabsorption

Autologe Absorption mit ZZAP-vorbehandelten Erythrozyten (Papain+DTT+PBS)

Autologe Absorption nach Vorbehandlung der Erythrozyten mit Bromelin

Hitze-Elution

Bromelinbehandlung

Absorption



www.blut.at

www.roteskreuz.at

www.blut.at www.roteskreuz.at

Österreichisches Rotes Kreuz Blutspendezentrale für Wien, Niederösterreich und Burgenland

DANKE FÜR DIE AUFMERKSAMKEIT

Documents

KÄLTE-WÄRME- reaktive AUTOANTIKÖRPER · Verlauf meist akut-reversibel Intravasale Hämolyse Hämoglobinurie Therapie: Behandlung der Grunderkrankung und Schutz vor Kälteeinwirkung