Upload
others
View
6
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
39
Lampiran 1. Panjang Gelombang Maksimum pada Deksametason
40
Lampiran 2. Kromatogram Hasil Uji Linieritas
a. Kadar deksametason 10 µg/mL
b. Kadar deksametason 20 µg/mL
41
c. Kadar deksametason 30 µg/mL
d. Kadar deksametason 40 µg/mL
42
e. Kadar deksametason 50 µg/mL
f. Kadar deksametason 60 µg/mL
43
Lampiran 3. Perhitungan Pembuatan Kurva Baku
Pembuatan kurva baku diperoleh dari hubungan antara luas area (y) dengan
konsentrasi (x) yang menghasilkan persamaan garis regresi dan faktor korelasi (r). Berikut
ini merupakan persamaan garis regresi dari deksametason:
Y = 10289,15x+277808,13
Intersep (a) = 277808,13
Slope (b) = 10289,15
Koefisien korelasi (r) = 0,9990
y = 10289,15x + 277808,13r = 0,9990
0
200000
400000
600000
800000
1000000
1200000
1400000
1600000
10 20 30 40 50 60
Lu
as
Are
a
Konsentrasi µg/mL
Konsentrasi Luas Puncak Persamaan Regresi
10 385684 a = 277808,13
20 470289 b = 10289,15
30 588158 r = 0,9990
40 698955
50 796364
60 888120
44
Lampiran 4. Contoh Perhitungan Perolehan Kembali Deksaemtason dengan Metode
Standard Addition Method
1. Perolehan kembali pada sampel yang ditambahkan sejumlah 80% dari target kadar
analit dalam sampel:
a. Konsentrasi sampel sebelum penambahan baku (B)
1) Luas puncak = 698955
2) Kadar deksametason berdasarkan persamaan garis Y = 10289,15x +
277808,13 adalah 40,931 µg/mL
b. Konsentrasi bahan baku yang ditambahkan (C)
1) Luas puncak = 588158
2) Kadar deksametason berdasarkan persamaan garis Y = 10289,15x +
277808,13 adalah 30,163 µg/mL
c. Konsentrasi sampel yang diperoleh setelah penambahan bahan baku (A)
1) Luas puncak total analit 1 = 1010422
2) Luas puncak total analit 2 = 1010814
3) Luas puncak total analit 3 = 1118908
d. Berdasarkan persamaan garis Y = 10289,15x + 277808,13 maka :
1) Kadar total analit 1 = 71,205 µg/mL
2) Kadar total analit 2 = 71,241µg/mL
3) Kadar total analit 3 = 71,245 µg/mL
2. Perhitungan perolehan kembali
% perolehan kembali = A − B
Cx 100%
45
a. Analit 1
% perolehan kembali = 71,205 − 40,931
30,163 x 100%
= 100,37%
b. Analit 2
% perolehankembali = 71,241 − 40,931
30,163x 100%
= 100,49%
c. Analit 3
% perolehan kembali = 71,245 − 40,931
30,163x 100%
= 100,50%
46
Lampiran 5. Perhitungan LOD dan LOQ Deksametason Secara KCKT
No X Xi² Xi-X̅ (Xi-X̅)² Yi Yc (Yi-Yc) (Yi-Yc)²
1 10 100 -25 625 385684 380700 4984,37 24843944,3
2 20 400 -15 225 470289 483591 -13302,1 176946663
3 30 900 -5 25 588158 586483 1675,37 2806864,64
4 40 1600 5 25 698955 689374 9580,87 91793070
5 50 2500 15 225 796364 792266 4098,37 16796636,7
6 60 3600 25 625 888120 895157 -7037,13 49521198,6
X̅ 35 ∑9100 ∑1750
∑362708377
Dari persamaan regresi linier Y = 10289,15x+277808,13 maka Yc dapat dihitung :
Yc = 10289x kadar masing-masing larutan + 277808,13
1. Y = 10289,15x+277808,13
Y = 10289,15(10)+277808,13
Y = 380700
2. Y = 10289,15x+277808,13
Y = 10289,15(20)+277808,13
Y = 483591
3. Y = 10289,15x+277808,13
Y = 10289,15(30)+277808,13
Y = 586483
4. Y = 10289,15x+277808,13
Y = 10289,15(40)+277808,13
Y = 689374
5. Y = 10289,15x+277808,13
Y = 10289,15(50)+277808,13
Y = 792266
47
6. Y = 10289,15x+277808,13
Y = 10289,15(60)+277808,13
Y = 895157
7. Persamaan kurva baku Y = 10289,15x+277808,13 (r = 0,999)
Sy/x = { (Y i−Yc )2
n−2}1/2
= (362708376,7/4)1/2
= 9522,45
Sa = Sy x Xi
2
n (Xi − Xrata −rata )2
= 9522,45x 9100
6 x 1750
= 9522,45 x 0,93
= 8855,88
Perhitungan nilai LOD :
Nilai Y pada batas deteksi ditentukan dengan persamaan Y = YB+ 3 SB
Y = nilai intersept (a) pada persamaan kurva kalibrasi
SB = simpangan baku intersept (a) (Sa)
Y = 277808,13 + 3 (8855,88)
= 304375,77
Y = 10289,15x + 277808,13
304375,77 = 10289,15x + 277808,13
LOD = X = 2,58 µg/mL
48
Perhitungan nilai LOQ :
Nilai Y pada batas kuantifikasi ditentukan dengan persamaan Y = YB + 10 SB
Y = nilai intersep (a) pada persamaan kurva kalibrasi
SB = simpangan baku intersept (a) (Sa)
Y = 277808,13 + 10 (8855,88)
= 366366,93
Y = 10289,15x + 277808,13
366366,93 = 10289,15x + 277808,13
LOQ = X = 8,61 µg/mL
49
Lampiran 6. Contoh Perhitungan Kadar Deksametason
Persamaan regresi linier kurva baku adalah :
Y = bx+a
Y = 10289.15x + 277808.13
Replikasi 1
Y = 10289.15x + 277808.13
792858 = 10289.15x + 277808.13
X = 50,508 µg/mL
Faktor pengenceran 2x sehingga kadar deksametason adalah
X = 50,508 x 2
= 100,115 µg/mL
Kadar deksametason dalam 1 ml sampel (mg) = 100,115 µg/mLx 10 mL
1000
= 1,00115 mg
% kadar deksametason = 1,00115
1 x 100%
= 100,115%
50
Lampiran 7. Surat Permohonan Bahan Baku
51
Lampiran 8. Certificate of Analysis Deksametason
52
Lampiran 9. Surat Keterangan Telah Melakukan Penelitian di Laboratorium Kimia,
Fakultas Farmasi, Universitas Wahid Hasyim
53
Lampiran 10. Gambar Alat-Alat yang Digunakan pada Saat Penelitian
Komponen/alat KCKT (Jasco) Spektro UV-Vis (Shimadzu)
54
Vortex mixer (Health) Vakum pump (Rocket)
55
Lampiran 11. Sampel Penelitian Tetes Mata Deksametason 5 ml