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LES TESTS DE SEROLOGIE TRANSFUS me_RH_pour_Cefops2008.pdf · PDF fileTest prétransfusionnel ultime au lit du patient (concordance du groupe ABO entre le patient et les unités de

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  • LES TESTS DE SEROLOGIE TRANSFUSIONNELLELES TESTS DE SEROLOGIE TRANSFUSIONNELLE

    Groupage ABO (Groupage ABO (test rythrocytaire test rythrocytaire et et test sriquetest srique))TypisationTypisation Rhsus Rhsus Dtection des anticorps irrguliers Dtection des anticorps irrguliers Spcificit des anticorps irrguliers l'aide d'un panel de plSpcificit des anticorps irrguliers l'aide d'un panel de plus us de 10 solutions rythrocytaires, toujours de groupe Ode 10 solutions rythrocytaires, toujours de groupe OType Type andand ScreenScreenTest de compatibilit Test de compatibilit ((plasma du receveur plasma du receveur avec avec les rythrocytes du les rythrocytes du

    donneurdonneur) ) effectu sur gel en Coombs indirect.effectu sur gel en Coombs indirect.Test Test prtransfusionnelprtransfusionnel ultime au lit du patient ultime au lit du patient (concordance (concordance dudugroupe ABO groupe ABO entre le patient etentre le patient et les units de sang les units de sang transfuser) transfuser)

  • SYSTEME RH Systme complexe, 57 antignes (aot 2008)

    1940: Landsteiner antigne D 1941: Wiener antigne C

    Lvine antigne c 1943: Wiener et Sonn antigne E 1945: Mourant antigne e 1946: Stratton antigne Du

  • SYSTEME RHSYSTEME RH

    antigne Dantigne Dantigne Cantigne Cantigne cantigne cantigne Eantigne Eantigne eantigne e

    antigne antigne CCww

    antigne Cantigne Cxx

  • DD

    CaucasiansCaucasians 82 82 88 %88 %

    AfricansAfricans 95 %95 %

    ChineseChinese, , JapaneseJapanese 99 %99 %

  • Frquence antigniqueFrquence antignique

    antigne eantigne e 99 %99 %

    antigne Dantigne D 85 %85 %

    antigne cantigne c 80 %80 %

    antigne Cantigne C 70 %70 %

    antigne Eantigne E 26 %26 %

  • TypisationTypisation RhsusRhsus

    Dtermination de lantigne DDtermination de lantigne Ddeux deux antianti--DD monoclonaux, monoclonaux, de clones diffrents (de clones diffrents (IgMIgM))

    un un antianti--D D ne doit pas dtecter le ne doit pas dtecter le variant D VIvariant D VI

    Le test de Coombs indirect nest Le test de Coombs indirect nest plus obligatoireplus obligatoire

  • TypisationTypisation RhsusRhsus

    phnotype D faible phnotype D faible jamais antijamais anti--DD

    PhPhnotype D partielnotype D partielpossibilitpossibilit de dde dvelopper un velopper un

    antianti--D (D (pitopespitopes non auto)non auto)

  • INDICATIONSINDICATIONS

    prsence danticorpsprsence danticorps

    transfusions itratives transfusions itratives

    transfusions chez fillette ou unetransfusions chez fillette ou une

    femme en ge de procrerfemme en ge de procrer

    conjoint dune femme enceinteconjoint dune femme enceinte

    immunise pour valuer le risqueimmunise pour valuer le risque

    foetalfoetal

  • PhnotypesPhnotypes::

    Symbole du systme suivi par la liste des Symbole du systme suivi par la liste des agagspars par une virgule. Si lspars par une virgule. Si lagag est test mais est test mais absent, on met un absent, on met un devantdevant

    Ex: Ex: D+C+D+C+EE--cc+e+ +e+ CCww-- donne RH: 1,2,donne RH: 1,2,--3,4,5,3,4,5,--88

    Ex: Ex: DD--CC--EE--cc+e++e+ donne RH:donne RH:--1,1,--22,,--3,4,53,4,5

  • NH2NHNH22 COOHCOOHCOOH

    RHDRHD chromosomes n1chromosomeschromosomes n1n1

    INTS Paris

  • NH2NHNH22 COOHCOOHCOOH

    RHCE RHCE RHCE CcCcCc EeEeEe

    chromosomeschromosomes n1n1

    INTS Paris

  • Structure des gnes RH

    Rh positif

    Gne RHD Gne RHCE

    Rh ngatif 10 exons

    Absence du gne RHD

  • 11 22 33 5544 66 77 99 101088 1235 467910 8

    Rh-positiveRhRh--positivepositive

    1235 467910 8Rh-negativeRhRh--negativenegative

    hybrid Rh box

    INTS Paris

  • N

    chromosomes n6chromosomes n6

    RHAGRHAG RhAGRhAG = = RhRh--AssociatedAssociated GlycoproteinGlycoprotein

    INTS Paris

  • band 3

    Spectrin

    4.1

    p55

    GPC

    Actin

    bande 3 bande 3Band 3 Band 3GPC

    The Rh complex*

    Ankyrin

    4.2

    CD47

    RhAGRh

    Mouro-Chanteloup et al, Blood, 2003Nicolas et al, J Biol Chem, 2003

    *Complex made of a Core [tetramer (Rh)2(RhAG)2] and Accessory chains [CD47, LW, GPB]

    JP Cartron- ASMT 2007

  • SYSTEME RHSYSTEME RH

    chromosome n1

    D, d, Df

    C, c

    E, e

  • e

    SYSTEME RHSYSTEME RH

    Rh positifRh positif

    D

    C

    e

    _c

    e

    chromosome n1

    d

    D

    CC

    ee

    D

    c

    c

  • SYSTEME RHSYSTEME RH

    Rh ngatifRh ngatif

    d

    c

    e

    chromosome n1

    ee

    c

    c

    d

    c

    e

  • Principaux allles du systme Rh

    Paire autosomique No 1

    D, d, Df

    C, c

    E, e

  • Haplotypes frquents

    D d D

    C c c

    e e E

    42% 39% 14%

  • HAPLOTYPES PEU FREQUENTS

    D d d D d

    c C c C C

    e e E E E

    2% 1% 1% 1% excep.

  • Anticorps du systme RHAnticorps du systme RHPresque toujours immuns (grossesse, Presque toujours immuns (grossesse, transfusion)transfusion)Gnralement Gnralement IgGIgG (1 et 3)(1 et 3)Ne fixent pas le CNe fixent pas le CDtects Dtects

    par test enzymatiquepar test enzymatiquepar test de Coombspar test de Coombsen albumineen albumineen LISSen LISS

    Traversent la barrire placentaireTraversent la barrire placentaire

  • Anticorps du systme RHAnticorps du systme RHantianti--DD le plus frquent (le plus frquent (agag D trs D trs

    immunogne) et associ immunogne) et associ (anti(anti--DC, antiDC, anti--DE)DE)

    AntiAnti--EE immun, mais galement immun, mais galement naturel (naturel (IgMIgM))

    AntiAnti--CC rare, souvent associ rare, souvent associ antianti--D D

    antianti--c c rarissime (rarissime (alloallo--acac et autoet auto--anticorps)anticorps)

    AntiAnti--ee ditodito

  • Phnotype D faiblePhnotype D faible

    Lors de la dtermination des Lors de la dtermination des phnotype phnotype DfDf, utiliser en parallle , utiliser en parallle des hmaties des hmaties DfDf (contrle positif).(contrle positif).

    Lors de la technique Lors de la technique en tube,en tube, avec avec CbsCbs ind. pour chaque rsultat ind. pour chaque rsultat ngatif, valider avec un Coombs ngatif, valider avec un Coombs contrle contrle

    Un rsultat Un rsultat DfDf positif ne sera positif ne sera valid que si valid que si RhRh--contrlecontrle ou le ou le Coombs direct est Coombs direct est ngatifngatif

  • TypisationTypisation RhsusRhsus

    D faible D faible Rh D positif si patientRh D positif si patientRh D positif si donneurRh D positif si donneur

    D partielD partielRh D nRh D ngatif si patientgatif si patientRh D positif si donneurRh D positif si donneur

  • Dr Willy Flegel, Uni dUlm, 2003

  • Dr W. FLEGEL 2004

    10 pitopes

    D faible ou weak D

    Quantitatif

    Mutations molculaires

    Antigne D (ISBT 004.001, RH1)Antigne D (ISBT 004.001, RH1)

  • Avant Avant diminution du diminution du nombre de sites Dnombre de sites D

    dd

    DDRhsus positifRhsus positif

    100100 9000 9000

    OO35000 35000 Sites D / GRSites D / GR

    DDff

    WeakWeak DD

  • Transfusion, vol 45, 10, October 2005W. Flegel and coll

  • In-frame triplet deletions in RHD alter the D antigenphenotype

    by W. Flegel, B. Mansouri and coll.

    La diversit de lantigne D est due un nombre dallles RHDimpressionnant plus de 135 connus

    expression diminue Dweak (surtout partie intracellulaire)

    changement qualitatif Dpartiel (partie extracellulaire)

    les 2 !

    Dans cet article, on montre un autre mcanisme, la dltion da.a.

  • In-frame triplet deletions in RHD alter the D antigenphenotype

    by W. Flegel, B. Mansouri and coll.

  • nn la srologie ne suffit plus, seule la la srologie ne suffit plus, seule la technique en biologie molculaire est technique en biologie molculaire est adquateadquate

    nn en Europe, surtout en Europe, surtout DweakDweak type 1 5type 1 5nn seul seul DweakDweak type 1 type 1 (800 sites D) sort en gel(800 sites D) sort en gelnn dans le Nord de lAllemagne et DK: dans le Nord de lAllemagne et DK:

    DweakDweak type 1.1. type 1.1. [[600 sites D600 sites D]] par GR (voir par GR (voir photo)photo)

    Article du Dr Willy FLEGEL et coll. Article du Dr Willy FLEGEL et coll. Transfusion 45, octobre 2005Transfusion 45, octobre 2005

  • Transfusion, vol 45, 10, October 2005W. Flegel and coll

  • 22 dterminations de groupedterminations de groupesanguin du patient sanguin du patient

    avec avec 22 prlvements enprlvements endiffr, en respectant ladiffr, en respectant ladate de la transfusiondate de la transfusion

  • Appropris et rguliers pour Appropris et rguliers pour chaque prestationchaque prestation

    Au minimum 4x / anAu minimum 4x / an

  • CQI: typisation RhCQI: typisation RhAntiAnti--D :D : hmatieshmaties--teststests CcDeeCcDee et et ccddeeccddee: :

    1x par jour o1x par jour oAntiAnti--D :D : hmatieshmaties--teststests D faible D faible lors du testlors du testAntiAnti--C, C, --c, c, --E, E, --ee : hmaties htrozygotes : hmaties htrozygotes

    pour les pour les agag en question: en question: 1x par jour o (ou lors du test)1x par jour o (ou lors du test)

  • Contrles de Qualit ExternesLes laboratoires pratiquant limmuno-hmatologie doivent se soumettre, 4 fois par an, aux contrles de

    la qualit organiss par la qualit organiss par le STS CRS BERNEle STS CRS BERNE

  • Les rsultats des CQI

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