MEN 2 (AD)

MEN 2A: 95% carcinoma midollare della tiroide 50% feocromocitoma 15-30% iperparatiroidismo (iperplasia, adenoma) raramente lichen amiloidosico interscapolare

malatia di Hirschsprungnervi corneali prominenti

MEN 2

MEN 2A - 1 : MTC + pheo + HPT

MEN 2A - 2 : MTC + pheo

MEN 2A - 3 : MTC + HPT

FMTC : almeno 4-8 casi di MTC in famigliaparenti affetti viventi con sorveglianza clinica

negativa per pheo e HPT

MEN 2B : insorgenza precoce di MTC con o senza pheo

dismorfismi facciali, neuromi delle mucose (labbra) habitus marfanoide, cifoscoliosi

ganglioneuromatosi intestinale

pectus excavatum, pes cavus

Iperplasiaparatiroidi

feocromocitoma

CarcinomaMidollare della Tiroide

MEN2

Tumori endocrinipancreatici

Adenoma ipofisigastrinomi duodenalicarcinoidi ecc.

MEN1

Angiomatosi retinicaEmangioblastoma SNCCarcinoma renale (CC)

VHLSDHB-C-D

PGLs

gene MEN2 recettore RET

mappatura nel 1986 sul cromosoma 10, quindi in 10q11.2

identificazione delle mutazioni germinali RET nel 1993

21 esoni distribuiti in una regione di circa 60 kb

RET: recettore tirosino-chinasico di membranaespresso dai derivati delle creste neurali,paratiroidi, rene embrionale, SNC

1 2 3 4 6 7 12 14 17 195 8 9 10 13 15 16 18 2011 21

proto-oncogene RET (10q11.2)

RTK (receptor tyrosine kinase)

cys-rich region

trans-membrane

tyrosine kinasedomain

cadherine-like

3 isoforms:- 1072 (ex 19)- 1114 (ex 20)- 1106 (ex 21)

Ligandi : fattori neurotrofici della famiglia del transforming growth factor :

GDNF, Neurturina, Persefina, Artemina

Co-recettori : Proteine legate al glicosil-fosfatidil-inositolo

GFR1, GFR2, GFR3, GFR4

Mutazioni “germinali” in proto-oncogeni

• RET : neoplasie endocrine multiple tipo 2

• MET : carcinoma renale ereditario papillare

• KIT- PDGFR : GIST (gastro-intestinal stromal tumors)

famigliari

“Key features” :- predisposizioni al cancro AD- pattern limitato di espressione dei geni- origine dei tumori dalle cellule che li esprimono- possible presenza di difetti di sviluppo

Protein chinasi (~520) :2% del genoma codificante385 serina-treonina chinasi90 tirosina-chinasi -> 58 RTKs 43 tirosina-chinasi like

ex 10

ex 11

ex 15

ex 13

ex 14

ex 16

Gly533 1597 GGC Cys TGC

Lys603 1807 AAA Gln CAA Cys609 1825 TGCCys611 1831 TGCCys618 1852 TGCCys620 1858 TGC

Cys630 1888 TGCAsp631 1891 GAC Tyr TACCys634 1900 TGC all detectable by

digestion

Glu768 2302 GAG Asp GAT, GAC dig. AluIAsn777 2331 AAC Ser AGC Leu790 2368 TTG Phe TTT, TTCTyr791 2371 TAT Phe TTT

Val804 2410 GTG Leu CTG Met ATGArg844 2530 CGG Leu CTG

Ala883 2647 GCT Phe TTT dig. DdeISer891 2671 TCG Ala GCG dig. BstuI

Met918 2752 ATG Thr ACG dig. NaeI

Ile647 (ATC>ATT)Gly691Ser (GGT>AGT)BanI

Leu769 (CTT>CTG)TaqI

Ser904 (TCC>TCG)RsaI

Polymophisms Mutations

Ser836 (AGC/AGT)AluI

ex 8

ex 10

ex 11

Cys609 #Cys611Cys618 #Cys620 #

12 bp dup(634-635)

Cys630Cys634

cys-rich region

trans-membrane

tyrosine kinasedomain

Mutazioni RET extra-cellulari (livello di rischio 2, 3)

Effetto biologico : dimerizzazione ligando-indipendente del recettore RET

MEN2A-1: 8%MEN2A-2: 31%MEN2A-3: 20%FMTC : 60 %HSCR: 65 cases

MEN2A-1: 92%MEN2A-2: 69%MEN2A-3: 80%FMTC : 30 %

RET: Cys634Tyr

mut

wt

RET exon 11

Cys

634A

rg

Cys

634T

yr

Neg

Cys

634A

rg

05/15/2003

Uterus MTC

Pheo Bil HPT

3 9

MTC 33

Pheo Bil 40

MTC 17

Pheo Bil 35

3 4

05/15/2003

Uterus MTC

Pheo Bil HPT

3 9

MTC 33

Pheo Bil 40

MTC 17

Pheo Bil 35

3 4

+

wt

wt wt wt+

+ +

wt + +

+ + + +wt wt

RET: Cys634Tyr

05/15/2003

Uterus MTC

Pheo Bil HPT

3 9

MTC 33

Pheo Bil 40

MTC 35

MTC 30Pheo 31

MTC 17

Pheo Bil 35

3 4

MTC 18

MTC 13

CCH 14

CCH 11

MTC 11

MTC 10

RET: Cys634Tyr

05/15/2003

MTC 65

2

MTC

Pheo Bil

MTC 27Pheo 28

MTC

05/15/2003

Uterus MTC

Pheo Bil HPT

3 9

MTC 33

Pheo Bil 40

MTC 35

MTC 30Pheo 31

MTC 17

Pheo Bil 35

3 4

MTC 18

MTC 13

CCH 14

CCH 11

MTC 11

MTC 10

RET: Cys634Tyrstesso luogo di origine

mut

mut

mut

05/15/2003

Uterus MTC

Pheo Bi l HPT

3 9

MTC 33

Pheo Bi l 40

MTC 35

MTC 30

Pheo 31

MTC 17

Pheo Bi l 35

3 4

MTC 18

MTC 13

CCH 14

CCH 11

MTC 11

MTC 10

MTC 65

2

MTC

Pheo Bi l

MTC 58

MTC 27

Pheo 28

MTC

MTC 31

Pheo

Pheo

Pheo

2 3

3 3 3 2 2

62

MTC 61

CCH

3

CCH

MTC 57

RET: Cys634Tyr

40 individui analizzati:5 affetti al momento del test14 portatori asintomatici21 non portatori9 tiroidectomie dopo test

05/14/2003

MTC

MTC

MTC

MTC

MTC

MTC

MTC

MTC

MTC

MTC

MTC

MTC

micro MTC

CCH

RET: Cys618Ser

wt

wt wt wt wt wt

wt

wt wt

wt

RET: Cys618Arg 27/05/2004

MTC 41HPT

7

MTC 45

6

MTC 37

84 5

MTC 34

9

Pheo 74MTC 75

2 3

1 2

1 4 5 7 8

CNS 44

1 2 3

1

2

2

3

3

3

4 5

2

6

CCH 12

7

CCH 9

8 9

3

10

MTC 8

11 12 13

CCH 7

14

NO CCH 9HSCR

15

3

10

6

2

11

2

12

2

13 14

16

wt wt wt

wt wt wt

wt wt

wt wt

27/05/2004

MTC 41HPT

7

MTC 45

6

MTC 37

8

MTC 34

9

Pheo 74MTC 75

2 3

CCH 12

7

CCH 9

8 9

3

10

MTC 8

11 12 13

CCH 7

14

NO CCH 9HSCR

15 16

wt wt wt

23 famiglie 65cases

Mutazioni RET in Cys esone 10 : MEN2A-FMTC e malattia di Hirschsprung

ex 15

ex 13

ex 14

ex 16

Glu768 Asp Leu790 PheTyr791 Phe

Val804 Leu, MetArg844 Leu

Ala883 PheSer891 Ala

Met918 Thr

trans-membrane

Livello di rischio 1 (MEN2B)Effetto biologico: cambiamento della

specificità di substrato

ATPbindingdomain

Catalyticcorepocket

inter-TK

Mutazioni RET intra-cellulari

Livello di rischio 3 (FMTC) (raramente MEN2A)

RET: Val804Met

CT al test geneticobasale : 10.36 pg/mlpicco : 215.36 pg/ml

05/14/2003

64 MTC 52

80 70

36 34 micro MTC 30

8 57 51

2

30 27 18

wt

wt wt mutmut mut

mutmut CT al test geneticobasale : 2.60 pg/mlpicco : 18.20 pg/ml

RET: Glu798Asp

05/14/2003

59 MTC 54Pheo 59

Paraganglioma 59

31 27

6967 Leukemia

24

2

89 83

93 92

2

40 46

35 85

Breast Cancer 58

mut

wtwt

RET exon 13

Leu

769

CT

T/C

TG

Glu

768A

sp

WT

HUMARA TEST

Blood Pheo Celiac mass

+ - + - + -Hpa II

RET: Leu790Phe

Calcitoninemia9.7 pg/ml

05/14/2003

62 Pheo 31MTC 62

40 38

51 46 83

2

50 40

23

80

94 40

mut

mut

14/01/2005

66 Feocromocitoma 31

CMT 62

+

45

-

42 CMT 39

+

15178

+

51 46

41

RET: Leu790Phe