Upload
others
View
27
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
Molecular Genetics
Tanyaratana Dumkua
Biology Department ; Mahidolwittayanusorn School 1
Genetic Material There are many kinds of biomolecule why do we
believe that DNA is genetic material?
What is happening if genetic material were carbohydrate, lipid or protein?
2
Genetic Material
How do scientist know that DNA is genetic material?
3
What dose this experiment tell us?
https://dr282zn36sxxg.cloudfront.net/datastreams/f-d%3Afbca3c56806408f93e2f81eb54144984ee70baf5cde34b9a3d6bcc53%2BIMAGE_THUMB_POSTCARD%2BIMAGE_THUMB_POSTCARD.1
4
If you want to improve Griffith’s experiment, how do you do?
6
http://www.doctortee.com/dsu/tiftickjian/cse-img/genetics/molecular/avery-exp.jpg
Oswald Avery et al., 1944
7
http://darrenrathman.yolasite.com/resources/11-04.gif
What dose this experiment tell us?
10
Between these 2 experiments, which one is the best to confirm that the DNA is genetic material?
Frederick Griffith, 1928 Hershey and Chase, 1952
11
http://www.nobelprize.org/nobel_prizes/medicine/laureates/1969/ 12
What is DNA?
13
Purine
Pyrimidine
14
15
Pentose: Ribose and deoxyribose
16
OH
3H PO 2 3
17
Primary structure
18
http://qnint.sbq.org.br/sbq_uploads/layers/imagem2473.png 19
Chargaff E. ค้นพบว่า A = T และ C = G และสิ่งมีชีวิต species เดียวกัน จะมีอัตราส่วน A+T : C+G เหมือน ๆ กัน 20
http://image.slidesharecdn.com/genomestructure-medics-140816181407-phpapp02/95/genome-structure-28-638.jpg?cb=1408212950 21
Tm = melting temperature ∝ %CG content
22
M.H.F. Wilkins และ
Rosalind Franklin ค้นพบว่าโครงสร้างของสาย DNA
ประกอบขึ้นจากสายโพลีนิวคลิโอไทด์ มากกว่า 1 สายเป็นเกลียวคู่ที่หันเบส เข้าไปจับกันและมีฟอสเฟตกับน้้าตาล
อยู่ด้านนอก จากเทคนิค X-ray diffraction
23
24
Antiparallel
Double helix
Clockwise
27
http://www.si.mahidol.ac.th/department/Biochemistry/home/md/images/Z%20DNA%204.jpg 28
B DNA : เส้นผ่าศูนย์กลาง 2 nm การเวียนขวาแต่ละรอบ - ความยาว 3.4 nm/ รอบ - 10 คู่เบส / รอบ - เกิดร่อง 2 ร่องคือ - minor groove - major groove
DNA structure
29
http://2.bp.blogspot.com/-Deoeq0hEwjU/UXjNW5gxavI/AAAAAAAAAlI/Ladj87E8Uqc/s1600/differences+betweeen+various+forms+of+DNA.jpg 30
http://www.nobelprize.org/nobel_prizes/medicine/laureates/1962/ https://cosresearch.files.wordpress.com/2013/07/rosalind-franklin.jpg
Rosalind Franklin
33
Denaturation & Renaturation - heat (destroy H-bond) - chemical Absorption 260 nm Acid-Base reaction Sedimention - different of nucleotide arrangement
Characteristics of deoxyribonucleic acid
http://www.cadexinc.com/images2/Spectrophotometer-preview.jpg
Spectrophotometer
Centrifugation
34
35
36 https://www3.nd.edu/~aseriann/CHAP5B.html/img036.gif
What are Tm and UV absorption telling us?
DNA EXTRACTION
http://universe-review.ca/I11-50-preparation.jpg 38
Watch : https://www.youtube.com/watch?v=hRiXCKiaE3w
ค้าถามประกอบการท้าการทดลอง
1. การหั่น ตัด บดชิ้นเนื้อเยื่อตัวอย่างท้าเพื่ออะไร 2. การเติม DNA buffer ท้าเพื่ออะไร 2.1 Detergent (น้้ายาล้างจาน) ส่งผลอย่างไรต่อเซลล์ 2.2 NaCl มีผลต่อการสกัดดีเอ็นเอครั้งนี้อย่างไร 3. ผ้าขาวบาง/กระดาษกรองมหีน้าที่ส้าคัญคืออะไร 4. ผงหมักเนื้อมีหน้าที่ส้าคัญในการสกัดดีเอ็นเออย่างไร 5. แอลกอฮอลมีความส้าคัญอย่างไร คุณสมบัติใดของแอลกอฮอลที่ท้าให้ดีเอ็นเอแยกตัวออกจากสารละลายมาอยู่ในแอลกอฮอล์ 6. ท้าไมต้องใช้แอลกอฮอล์เย็น ถ้าไม่เย็นจะให้ผลที่แตกต่างหรือไม่อย่างไร
39