PARTICULARITؤ‚بڑILE MOLECULAR-GENETICE ALE 5 ADNOTARE Victoria Sacarؤƒ. â€‍Particularitؤƒب›ile molecular-genetice

  • View
    0

  • Download
    0

Embed Size (px)

Text of PARTICULARITؤ‚بڑILE MOLECULAR-GENETICE ALE 5 ADNOTARE Victoria Sacarؤƒ....

  • ACADEMIA DE ȘTIINȚE A MOLDOVEI

    INSTITUTULUI DE GENETICĂ, FIZIOLOGIE ȘI

    PROTECȚIE A PLANTELOR

    Cu titlu de manuscris

    CZU: 577.2:611.73 (478)

    SACARĂ VICTORIA

    PARTICULARITĂȚILE MOLECULAR-GENETICE ALE

    PATOLOGIILOR NEUROMUSCULARE FRECVENT

    ÎNTÂLNITE ÎN REPUBLICA MOLDOVA

    162.02 – GENETICA OMULUI ȘI ANIMALELOR

    Teză de doctor habilitat în științe biologice

    Consultanți științifici: DUCA Maria, doctor habilitat în științe biologice,

    academician al AȘM, profesor universitar

    GROPPA Stanislav, doctor habilitat în științe medicale,

    academician al AȘM, profesor universitar

    Autor: SACARĂ Victoria,

    doctor în științe medicale,

    conferențiar cercetător

    CHIȘINĂU, 2019

  • 2

    © Sacară Victoria, 2019

  • CUPRINS

    ADNOTARE........................................................................................................................................ 5

    LISTA ABREVIERILOR .................................................................................................................... 8

    INTRODUCERE ............................................................................................................................... 10

    1. GENETICA MALADIILOR NEUROMUSCULARE. GENE-CANDITATE CU ROLUL

    MODIFICATOR AL PROCESULUI MIOPATIC ........................................................................... 21

    1.1. Actualități în domeniul patologiilor ereditare neuromusculare în lume și în Republica

    Moldova ............................................................................................................................................. 22

    1.2. Caracteristicile genetice ale bolilor ereditare neuromusculare abordate în studiu ..................... 33

    1.3. Caracterizarea genelor presupuse ca factori genetici modificatori în procesele miopatice ........ 55

    1.4. Concluzii la capitolul 1 ............................................................................................................... 66

    2. MATERIALE ȘI METODE DE CERCETARE ........................................................................ 67

    2.1. Materialele cercetării .................................................................................................................. 67

    2.2. Metode de cercetare .................................................................................................................... 70

    2.3. Metodele de analiză a rezultatelor obținute ................................................................................ 82

    2.4. Concluzii la capitolul 2 ............................................................................................................... 86

    3. ASPECTE CLINICO-EPIDEMIOLOGICE ȘI MOLECULAR-GENETICE ALE

    CERCETĂRII MALADIILOR EREDITARE NEUROMUSCULARE ........................................... 88

    3.1. Spectrul nozologic al bolilor ereditare ale sistemului nervos ..................................................... 88

    3.2. Prevalența bolilor neuromusculare ereditare frecvent întâlnite în Republica Moldova. ............ 92

    3.3. Caracteristicile molecular-genetice ale bolilor neuromusculare frecvente ................................. 97

    3.4. Diagnosticul prenatal al maladiilor neuromusculare (DMD/B și SMA) în Republica Moldova.

    Studiul retrospectiv și prospectiv al metodelor utilizate în diagnosticul prenatal ........................... 112

    3.5. Concluzii la capitolul 3 ............................................................................................................. 121

    4. ANALIZA FRECVENȚEI DE RĂSPÂNDIRE A VARIANTELOR POLIMORFE ALE

    GENELOR-CANDIDATE ȘI ASOCIEREA LOR CU REALIZAREA PROCESULUI

    MIOPATIC ...................................................................................................................................... 123

    4.1. Analiza variantelor polimorfe C677T și A1298C a genei MTHFR în grupul de control și la

    bolnavii cu DMD/B.......................................................................................................................... 124

    4.2. Analiza variantelor polimorfe a genelor MTR A2756G și MTRR A66G în grupul de control și

    la bolnavii cu DMD/B ...................................................................................................................... 129

    4.3. Analiza variantei polimorfe 4a/4b a genei eNOS la pacienții cu DMD/B și în grupul de

    control. ............................................................................................................................................ 132

    4.4. Concluzii la capitol 4............................................................................................................. 136

    5. MODELAREA INTERACȚIUNII GENOTIP–FENOTIP ȘI PROGNOSTICUL SEVERITĂȚII

    PROCESULUI PATOLOGIC LA PACIENȚII CU DMD/B .......................................................... 137

    5.1. Evaluarea impactului polimorfismelor genelor MTHFR, MTR, MTRR și eNOS asupra

    evoluției proceselor miopatice ......................................................................................................... 137

    5.2 Evaluarea interacțiunii intergenice ale genelor MTHFR, MTR, MTRR și eNOS la bolnavii cu

    DMD/B ............................................................................................................................................ 145

    5.3. Rolul genelor modificatoare investigate în patogenia miodistrofiei Duchenne........................ 159

    5.4.Strategia de diagnostic molecular prin personalizarea monitorizării pacienților cu DMD/B. 169

    5.5. Concluzii la capitolul 5 ............................................................................................................. 172

    SINTEZA REZULTATELOR OBȚINUTE ............................................................................... 174

    CONCLUZII GENERALE ȘI RECOMANDĂRI........................................................................... 186

    BIBLIOGRAFIE .............................................................................................................................. 189

    Anexa1. Structura patologiilor BESN în Republica Moldova ......................................................... 214

  • 4

    Anexa 2. Distribuția incidenței DMD/B în diferite raioane din Republica Moldova. ..................... 215

    Anexa 3. Distribuția incidenței SMA în diferite raioane din Moldova ............................................ 216

    Anexa 4. Distribuția incidenței CMT în diferite raioane din RM .................................................... 217

    Anexa 5. Frecvența fiecărui exon din gena disrofinei implicat în procesul de deleție la pacienții cu

    DMD/B investigați ........................................................................................................................... 218

    Anexa 6. Schema complexului de proteine asociate distrofinei (DPC) în mușchii scheletici și ciclul

    folat .................................................................................................................................................. 219

    Anexa 7. Analiza de durată a delețiilor din gena DMD. .................................................................. 220

    Anexa 8. Distribuția frecvenței genotipurilor și alelelor genelor-candidate (în baza pacienților din

    studiu) .............................................................................................................................................. 221

    Anexa 9. Schema diagnosticului clinic ............................................................................................ 222

    Anexa 10. Schema diagnosticului molecular-genetic………………………………...... ………223

    Anexa 11. Schema tipurilor de deleție a exonilor în gena DMD..................................................224

    Anexa 12. Date predictive pentru calcularea riscului de invalidizare în funcție de factorul genetic

    prezent la pacient............................................................................................................................225

    Anexa 13. Schema procesului distrofic (E. Hoffman)...................................................................230

    Anexa 14. Schema procesului distrofic (L.P. Grinio)....................................................................231

    Anexa 15. Schema patogenezei a DMD/B cu implicarea genelor modificatoare ..........232

    Anexa 16. Strategia de diagnostic molecular pentru personalizare...............................................233

    Declarația privind asumarea răspunderii........................................................................................234

    CV AL AUTORULUI......................................................................................................... ..........235

  • 5

    ADNOTARE

    Victoria Sacară. „Particularitățile molecular-genetice ale patologiilor neuromusculare frecvent întâlnite

    în Republica Moldova”

    Teză de doctor habilitat în științe biologice. Chișinău, 2019

    Structura tezei: Teza include introducere,