Pendahuluan Bioassay Sarang Walet

7/22/2019 Pendahuluan Bioassay Sarang Walet

1/34

ANALISIS MIKROBIOLOGI DAN BIOASSAY PADA EKSTRAK

SARANG BURUNG WALET

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Burung Walet (Aerodramus fuciphagus) adalah burung kecil yang

ditemukan di seluruh Asia Tenggara. Ukuran burung walet adalah 11 sampai 1

cm dan berat 1! sampai 1" gram. Burung ini merupakan burung yang hidup di

daerah yang beriklim tropis lembab# dan merupakan burung pemakan serangga

yang suka tinggal di dalam gua$gua dan rumah$rumah yang cukup lembab#

remang$remang dan sampai gelap dan menggunakan langit$langitnya untuk

membangun sarang dan berkembang biak.

Berdasarkan penelitian para pakar gi%i sarang burung walet mengandung

glyco protein yang esen nya sangat baik untuk kesehatan tubuh manusia. &alam

penelitian 'ementerian 'esehatan sarang burung walet mengandung protein#

karbohidrat# dan lemak. *al ini yang mengakibatkan sarang burung walet sangat

diminati dan membuat harga sarang burung walet sangat tinggi di pasaran dunia.

+anfaat kesehatannya cocok bagi segala usia. ,arang walet

diklasifikasikan sebagai makanan dingin atau yang menurut konsep makanan

-ina# sarang walet memiliki efek meningkatkan sistem imunitas tubuh#

meremaakan organ tubuh# tetapi tidak terlalu membuat tubuh /panas0

dibandingkan dengan ginseng.

,arang walet sebagian besar terdiri dari protein yang larut dalam air#

berbentuk glikoprotein yang mudah diserap oleh tubuh manusia. Total kadar

protein sekitar !2. 'andungan lainnya adalah kadar air sekitar 132# sedangkan

eak lemak adalah sekitar 4#42 dan 3#"2 karbohidrat. +ineral lain yang hadir

adalah kalsium dan %at besi. 'andungan asam amino dalam sarang walet adalah

1| A n a l i s i s M i k r o b i o l o g i d a n B i o a s s a y


2/34

sekitar persen. Asam amino yang diisolasi dari sarang walet terdiri dari amida#

humin# arginin# sistin# histidin# dan lisin.

Bahkansalah satu senyawa sarang walet turunannya a%itothymidine telahditeliti bisa melawan A&,. stimewanya lagi# sarang walet merupakan sumber

asam amino yang lengkap. Tercatat sekitar 15 asam amino esensial# semi esensial

dan non$esensial yang dimiliki. ,alah satunya kini dikembangkan oleh peneliti$

peneliti di barat sebagai pelawan stroke dan kanker. +ineral$mineral sarang walet

tak kalah manurnya untuk mendukung akti6itas tubuh.

,arang waletuga membantu fungsi sistem endokrin tubuh. ,arang walet

akan menguatkan tubuh# melembabkan dan mengenyalkan kulit# menaga

kecantikan# meningkatkan stamina dan mendukung metabolisme tubuh.

7ebih auh lagi# para leluhur mengungkapkan bahwa konsumsi sarang

walet secara teratur akan memberikan efek melawan penuaan (anti$aging)# dan

sangat berguna untuk mempertahankan kompleksi dan tekstur kulit yang halus

dan tanpa kerutan. 'arena itu sarang walet diperlukan sebagai esens kesehatan

tidak hanya bagi anak$anak# orang tua# orang sakit# namun sarang walet uga

berguna bagi para wanita tua dan muda.

&engan banyaknya khasiat dari sarang walet ini# maka kelompok kami

tertarik untuk mengui aktifitas farmakologisnya.

1.2 T!an

+elakukan penelitian terhadap aktifitas farmakologis seperti ui anti

bakteri# ui anti amur# ui B,7T dan ui antioksidan pada sampel sarang

walet dengan metode ui bioassay

+emenuhi rangkaian praktikum Analisis +ikrobiologi dan Bioassay

+empelaari metode bioassay

1." Man#aat

http://sarangwalet.org/http://sarangwalet.org/


3/34

&ari penelitian ini diharapkan kelompok praktikum dapat mengetahui

aktifitas farmakologis dari sampel sarang walet dan hasilnya dapat diadikan

sebagai pengetahuan kedepannya.

BAB II



4/34

TIN$AUAN PUSTAKA

2.1 Brng Walet Sarang Pt%& 'Aerodramus fuciphagus(

Burung walet merupakan burung yang hidup di daerah yang beriklim

tropis lembab# dan merupakan burung pemakan serangga yang suka tinggal

didalam goa$goa dan rumah$rumah yang cukup lembab# remang$remang# dan

menggunakan langit$langitnya untuk membangun sarang dan berkembang biak.

Burung walet dikelompokkan dalam genus yaitu Aerodramus (8 spesies) dan

Collocalia ( spesies). &ari 11 enis# hanya terdapat 4 spesies menghasilkan

sarang yang bisa dimakan# yaituAerodramus fuciphagus, A. maximus, A. germani.

Berdasarkan taksonominya# walet digolongkan sebagai berikut9

'ingdom 9Animalia

:illum 9 Chordata

,ubfillum 9 Vertebrata

'elas 9Aves

;rdo 9Apodiformes

:amilia 9Apodidae


5/34

'ata A. fuciphagus berasal dari bahasa latin. Fuci berarti lumut dan

phagusyang berarti makan. Burung ini membuat sarang dengan memanfaatkan

lumut dari dinding goa# lalu direkatkan dengan air liurnya. Walet ini paling sering

diburu untuk diambil sarangnya. Walet enis ini sering disebut uga white$nest

swiftlet karena memiliki sarang yang berwarna putih. Ukuran tubuhnya relatif

kecil# yaitu sekitar 1 cm. Tubuh bagian atas berwarna cokelat kehitaman# dan

bagian bawahnya berwarna cokelat. &aerah penyebarannya meliputi ,umatera#

=awa# Bali# >usa Tenggara# 'alimantan# hingga :ilipina. A. fuciphagus yang

ditemukan di =awa umumnya memiliki tunggir berwarna cokelat keabu$abuan#

sementara A. fuciphagus yang hidup di ,umatera dan 'alimantan memiliki

tunggir berwarna cokelat tua. Aerodramus fuciphagus memiliki kemampuan

terbang yang lebih kuat dibandingkan dengan spesies lainnya.

2.2 Kan)ngan )an Man#aat Sarang Brng Walet

,arang burung walet sudah berabad$abad digunakan dalam lmu

?engobatan Tradisional -hina (traditional -hinese +edicine) sebagai makanan

tambahan yang menyehatkan. ?enelitian tentang sarang burung walet menemukan

beberapa kandungan %at didalamnya# yaitu !3$32 protein# !2 karbohidrat# dan

132air. ?ada tahun 18"5 telah diketahui bahwa sarang burung walet mengandung

/cell division including hormone0 dan / Epidermal growth factor0 yang dapat

mempengaruhi pertumbuhan dan diferensiasi sel# meliputi aringan pertumbuhan#

regenerasi sel# dan kekebalan tubuh.

,arang burung walet sudah diadikan sebagai obat$obatan seak 533 tahun

silam di >egeri -hina. ?ada waktu itu sarang burung walet sudah diual bebas

untuk bahan konsumsi maupun bahan obat$obatan. ,arang burung walet sendiri

dipercaya memiliki banyak sekali khasiat bagi kesehatan# diantaranya adalah

sebagai obat penyakit pernafasan# menambah kebugaran tubuh# dan memperhalus

kulit. 'andungan nutrisi yang terdapat pada sarang burung walet di antaranya

adalah protein yang cukup tinggi# serta kandungan mineral lainnya seperti

kalsium# kalium# fosfor# nitrogen# natrium# dan besi.



6/34

Berdasarkan pengobatan -hina# sarang burung walet uga dapat

menstimulasi pertumbuhan sel sehinggga bisa mempercepat proses penyembuhan

penyakit dan digunakan sebagai suplemen makanan agar tubuh nampak selalu

sehat# segar# dan awet muda.

Adapun khasiat sarang burung walet bagi kesehatan yaitu9

1. +elancarkan saluran pencernaan

,arang burung walet memiliki zat kolagen yang berguna memperlancar

pembuluh darah# meningkatkan nafsu makan# dan uga memperbaiki

saluran pencernaan.

. +enyembuhkan batuk

,arang walet uga berkhasiat menyembuhkan batuk dan mengurangi

dahak. ,arang walet merupakan nutrisi bagi paru$paru yang bermanfaat

menguatkan saluran pernafasan.

4. +engurangi rasa sakit wanita hamil

,arang walet uga bermanfaat dalam mengurangi rasa sakit punggung

wanita hamil serta menguatkan paru$paru bayi yang ada di kandungannya.

@. ,elalu bugar dan awet muda

+engkonsumsi sarang burung walet dapat meningkatkan metabolisme

tubuh# menghambat penuaan dini# menguatkan urat dan tulang# serta

meningkatkan daya tahan tubuh terhadap penyakit.

!. +engurangi efek negatif nikotin

,arang burung walet uga merupakan makanan sehat untuk para perokok.

Bahan ini dapat mengurangi efek negatif yang ditimbulkan dari nikotin

dalam rokok.

,arang burung walet mengandung glcoprotein alami yang fungsinya

mempromosikan regenerasi sel tubuh untuk memperlambat penuaan# untuk

melembabkan kulit tubuh sebagai anti$penuaan# dan mencegah keriput pada kulit

tubuh. -ara pengolahan sarang burung walet adalah dengan merendamnya

terlebih dahulu# kemudian membersihkan kotorannya (seperti rumput dan bulu

yang tertinggal)# dan ika sudah bersih dapat digunakan untuk pembuatan

makanan seperti sup.

Adapun informasi mengenai nutrisi (kandungan gi%i) sarang burung walet

dimana berdasarkan penelitian# dalam 133 gram sarang burung walet terkandung9



7/34

1. @8#8 gram protein (termasuk amida# amina# nitrogen non$amino# arginin#

humin# histidin# lisin# dan sistein)

. 43# gram karbohidrat (glikoprotein dan musin)

4. @#8 gram besi

@. #! gram garam anorganik (termasuk kalium# kalsium# natrium#

magnesium# belerang# fosfor# silica# dan garam mineral lainnya)

!. 1#@ gram serat

2." U!% Akt%*%ta+ Ant%,akter%

Ui akti6itas antibakteri dapat dilakukan dengan metode difusi dan metode

pengenceran (dilusi). !isc diffusion test atau ui difusi cakram dilakukan dengan

mengukur diameter %ona bening (clear zone) yang merupakan petunuk adanya

respon penghambatan pertumbuhan bakteri oleh suatu senyawa antibakteri dalam

ekstrak. ,yarat umlah bakteri untuk ui kepekaan (sensiti6itas) yaitu 13!$13"

-:Um7 (*ermawan et al. 335).

+etode difusi merupakan salah satu metode yang sering digunakan.

+etode difusi dapat dilakukan dengan 4 cara yaitu metode silinder# metode lubang

(sumuran) dan metode cakram kertas. +etode lubang (sumuran) yaitu membuat

lubang pada agar padat yang telah diinokulasi dengan bakteri. =umlah dan letaklubang disesuaikan dengan tuuan penelitian# kemudian lubang diineksikan

dengan ekstrak yang akan diui. ,etelah dilakukan inkubasi# pertumbuhan bakteri

diamati untuk melihat ada tidaknya daerah hambatan di sekeliling lubang

('usmayati Agustini 335). ?rinsip metode pengenceran adalah senyawa

antibakteri diencerkan hingga diperoleh beberapa macam konsentrasi# kemudian

masing$masing konsentrasi ditambahkan suspensi bakteri ui dalam media cair.

?erlakuan tersebut akan diinkubasi pada suhu 45C- selama 1"$@ am dan diamati

ada atau tidaknya pertumbuhan bakteri# yang ditandai dengan teradinya

kekeruhan. 7arutan ui senyawa antibakteri pada kadar terkecil yang terlihat ernih

tanpa adanya pertumbuhan bakteri ui# ditetapkan sebagai 'adar *ambat Tumbuh

+inimum ('*T+) atau "inimal #nhibitor Concentration (+-). ,elanutnya

biakan dari semua tabung yang ernih diinokulasikan pada media agar padat#

diinkubasikan pada suhu 45C- selama 1"$@ am# lalu diamati ada atau tidaknya

koloni bakteri yang tumbuh. +edia cair yang tetap terlihat ernih setelah inkubasi



8/34

ditetapkan sebagai 'adar Bunuh +inimal ('B+) atau "inimal $actericidal

Concentration (+B-) (?ratiwi 33").

2.".1 Ant%,akter%

Bahan antibakteri diartikan sebagai bahan yang mengganggu

pertumbuhan dan metabolisme bakteri# sehingga bahan tersebut dapat

menghambat pertumbuhan atau bahkan membunuh bakteri. -ara kera

bahan antibakteri antara lain dengan merusak dinding sel# merubah

permeabilitas sel# merubah molekul protein dan asam nukleat#

menghambat kera en%im# serta menghambat sintesis asam nukleat dan

protein (?elc%ar dan -han# 188"). ?emakaian antibakteri yang berlebihan

menyebabkan mikroba yang semula sensitif terhadap antibiotik menadi

resisten. ;leh karena itu# senyawa antibakteri diperlukan untuk mengatasi

bakteri resisten tersebut (7enny# 33a). esistensi sel mikroba ialah suatu

sifat tidak terganggunya kehidupan sel mikroba oleh antimikroba. ,ifat ini

dapat merupakan sutu mekanisme alamiah untuk bertahan hidup.

esistensi dibagi dalam kelompok resistensi genetik# resistensi nongenetik

dan resistensi silang. +ekanisme resistensi terhadap antimikroba antara

lain9 perubahan tempat kera (target site) obat pada mikrobaD mikroba

menurunkan permeabilitasnya hingga obat sulit masuk ke dalam selD

inakti6asi obat oleh mikrobaD mikroba membentuk alan pintas untuk

menghindari tahap yang dihambat oleh antimikrobaD dan meningkatkan

produksi en%im yang dihambat oleh antimikroba (


9/34

Akti6itas antibakteri dibagi menadi macam yaitu akti6itas

bakteriostatik (menghambat pertumbuhan tetapi tidak membunuh patogen)

dan akti6itas bakterisidal (dapat membunuh patogen dalam kisaran luas).

?engendalian mikroorganisme khususnya bakteri# dapat dilakukan secara

kimia seperti pemberian antibiotik dan %at$%at kimia lainnya# ataupun

pengendalian secara fisik seperti pemberian panas# pendinginan# radiasi#

dan pengeringan (Brooks et al. 331).

2.".2 Bakter% U!%

Bacillus sp.

$acillus sp. adalah kelompok bakteri yang umum ditemukan di

berbagai lingkungan ekologi# baik di tanah# air# maupun udara. Bakteri ini

merupakan bakteri gram positif yang dapat membentuk endospora yang

berbentuk o6al di bagian sentral sel. ,pora berfungsi untuk bertahan hidup

antara lain pada suhu dan kondisi lingkungan yang ekstrim. ,el$acillus

sp. berbentuk batang# berukuran 3#4$# E 1#$5#3 Fm dan mempunyai

flagel peritrikus. Bakteri ini dapat tumbuh pada suhu @!G-# p* !$5# >a-l

52# menghidrolisis pati# serta membentuk asam sitrat dari karbohidrat

glukosa# arabinosa# manitol# dan silosa (,onenshein et al. 33). ,ebagian

besar anggota$acillus sp.tidak dianggap sebagai bakteri patogen terhadap

manusia# walaupun dapat mengkontaminasi makanan# namun arang

menimbulkan keracunan (,onenshein#et al. 33). ,chaad et al. (333)

menyatakan bahwa hanya terdapat tiga kelompok$acillus yang diketahui

sebagai patogen tanaman# yaitu$. circulans# $. megaterium pv. cerealis,dan$. polmxa.

Escherichia coli

Escherichia coli adalah bakteri gram negatif yang berbentuk

batang pendek lurus (kokobasil)# dengan ukuran 1#1$1#! Fm E #3$#3 Fm.

E. coli tidak memiliki kapsul dan spora. Bersifat anaerob fakultatif#

tumbuh dengan mudah pada medium nutrien sederhana (?elc%ar dan -han#

188"). ?ada umumnya# bakteri gram positif mudah dimatikan oleh



10/34

penisilin# gramisidin# atau lebayung gentian berkadar rendah# sedangkan

bakteri gram negatif lebih tahan terhadap senyawa$senyawa tersebut di

atas# namun cukup peka terhadap streptomisin (Holk dan Wheeler# 1884).

Escherichia coli merupakan bakteri gram negatif yang termasuk dalam

family Interobacteriaceae# bakteri ini merupakan flora normal yang

terdapat dalam usus dan merupakan kelompok besar yang berbentuk

batang pendek# bersifat anaerob fakultatif dan habitat alaminya adalah

saluran usus manusia dan hewan. +orfologinya berupa koloni yang

bundar# cembung# tipis dengan tepi yang nyata (=awet% et al. 331).

'lasifikasi E. coli menurut Brooks et al. (331) adalah sebagai

berikut 9

'ingdom 9 ?rocaryota

&i6isi 9


11/34

antiamur adalah metode difusi agar. +etode ini dibagi menadi tiga yaitu metode

lubang# metode gores silang# dan metode cakram kertas.

a. +etode 7ubang?erforasi

=amur ui yang umurnya 1"$@ am disuspensikan ke dalam media agar pada suhu

sekitar @!G-. ,uspensi amur dituangkan ke dalam cawan petri steril. ,etelah agar

memadat# dibuat lubang lubang dengan diameter mm kemudian dimasukkan

larutan %at yang akan diui akti6itasnya sebanyak 3F7 dan diinkubasi pada suhu

45G- selama 1"$@ am. Akti6itas antiamur dapat dilihat dari daerah bening yang

mengelilingi lubang perforasi (Anonim# 1884).

b. +etode


12/34

penghambatan kera en%im# atau penghambatan sintesis asam nukleat dan

protein. 'erusakan pada salah satu situs ini dapat mengawali teradinya

perubahan$perubahan yang menuu pada matinya sel tersebut (?ele%ar dan

-han# 18"").

a. 'erusakan pada dinding sel

&inding sel merupakan penutup dan pelindung bagi sel.

,trukturnya dapat dirusak dengan cara menghambat pembentukannya atau

mengubah komponennya setelah selesai terbentuk (?ele%ar dan -han#

18"").

b. ?erubahan permeabilitas sel

+embran sitoplasma mempertahankan bahan$bahan tertentu di

dalam sel serta secara selektif mengatur aliran keluar$masuknya %at antara

sel dengan lingkungan luarnya. +embran memelihara integritas

komponen$komponen seluler. +embran ini uga merupakan situs beberapa

reaksi en%im. 'erusakan pada membran ini akan mengakibatkan

terhambatnya pertumbuhan sel atau matinya sel (?ele%ar dan -han# 18"").

c. ?erubahan molekul protein dan asam nukleat

*idupnya suatu sel bergantung pada terpeliharanya molekul$

molekul protein dan asam nukleat pada membran alamiahnya. ,uatu

kondisi atau substansi yang mengubah keadaan ini# yaitu

mendenaturasikan protein dan asam$asam nukleat dapat merusak sel tanpa

dapat diperbaiki kembali. ,uhu tinggi dan konsentrasi pekat beberapa %at

kimia dapat mengakibatkan koagulasi (denaturasi) irre6ersibel (tak dapat

balik) komponen$komponen seluler yang 6ital ini (?ele%ar dan -han#

18"").d. ?enghambatan kera en%im

,etiap en%im dari beratus$ratus en%im berbeda$beda yang ada di

dalam sel merupakan sasaran potensial bagi bekeranya suatu penghambat.

Banyaknya %at kimia telah diketahui dapat mengganggu reaksi

biokimiawi. ?enghambatan ini dapat mengakibatkan terganggunya

metabolisme atau matinya sel (?ele%ar dan -han# 18"").

e. ?enghambatan sintesis asam nukleat dan protein



13/34

&>A# >A# dan protein memegang peranan sangat penting di

dalam proses kehidupan normal sel. *al ini berarti bahwa gangguan

apapun yang teradi pada pembentukan atau pada fungsi %at$%at tersebut

dapat mengakibatkan kerusakan total pada sel (?ele%ar dan -han# 18"").

2.-.2 $ar U!%

:ardia% (188) mendefinisikan amur merupakan suatu

mikroorganisme eukariotik yang mempunyai ciri$ciri spesifik yaitu

mempunyai inti sel# memproduksi spora# tidak mempunyai klorofil# dapat

berkembang biak secara seksual dan aseksual dan beberapa amur

mempunyai bagian$bagian tubuh berbentuk filamen$filamen dan sebagian

lagi bersifat uniseluler. Beberapa amur mempunyai inang yang hidup lalu

tumbuh dengan subur sebagai parasit dan menimbulkan penyakit pada

tumbuhan# hewan termasuk manusia# tidak kurang dari 133 spesies yang

patogen terhadap manusia (?ele%ar dan -han# 18"). +enurut

(&widoseputro# 185")# amur adalah tumbuhan yang berinti# berspora#

tidak berklorofil# berupa sel atau benang bercabang$cabang dengan

dinding dari selulosa atau dari kitin atau dari keduanya. ?ada umumnya

berkembang biak secara seksual dan aseksual. =amur merupakan

organisme heterotrof yang memerlukan %at$%at organic dari organisme

autrotrof. =amur tumbuh pada kondisi aerob dan memperoleh energi

dengan mengoksidasi bahan organik. Unsur$unsur yang diperlukan amur

untuk pertumbuhannya antara lain nitrogen# hidrogen# oksigen# kalium#

fosfor# sulfur# karbon# dan magnesium. =amur pada umumnya tumbuh pada

suhu 3$3

3

- dengan suhu optimal 3$43

3

- dan p* $8 dengan p*optimal (Webster# 18"3).

=amur dibedakan menadi empat kelas# yaitu 9

1) Jygomycetes

) Ascomycetes

4) Basidiomycetes

@) &ueteromycetes



14/34

=amur terdiri dari struktur somatik atau 6egetatif yaitu thallus yang

merupakan filamen atau benang hifa# miselium berupa alinan hifa dan

yang merupakan koloni disebut spora (Basri dkk# 333). ,edangkan

menurut (&widoseputro# 185") amur terdiri dari kapang dan khamir.

'apang berbentuk filamentus sedangkan khamir bersifat uniseluler.

'apang atau cendawan secara mikroskopis terdiri dari miselium berupa

filamen atau kumpulan hifa yang kompleks. *ifa ada yang menegak dan

ada yang mendatar. Biasanya hifa yang menegak menghasilkan alat$alat

pembiak yang sering disebut spora. :ungi dibedakan menadi golongan#

yakni kapang dan khamir. 'apang merupakan fungi yang berfilamen atau

mempunyai miselium# pertumbuhannya dalam bahan makanan mudah

sekali dilihat# yakni seperti kapas (Waluyo# 33!). ,edangkan tubuh atau

talus suatu kapang pada dasarnya terdiri dari dua bagian miselium dan

spora. +iselium merupakan kumpulan beberapa filamen yang dinamakan

hifa. &i sepanang setiap hifa terdapat sitoplasma bersama (?ele%ar dan

-han# 18"). ?ertumbuhan fungi mula$mula berwarna putih# tetapi bila

telah memproduksi spora akan membentuk berbagai warna tergantung dari

enis kapang. 'ebanyakan kapang bersifat mesofilik# yaitu mampu tumbuh

baik pada suhu kamar. ,uhu optimium pertumbuhan untuk kebanyakan

kapang adalah ! sampai 43 3-# tetapi beberapa dapat tumbuh pada suhu

4! sampai 45 3- atau lebih# misalAspergillus. Beberapa kapang bersifat

psikotrofik# yakni dapat tumbuh baik pada suhu almari es# dan beberapa

bahkan masih dapat tumbuh lambat pada suhu di bawah suhu pembekuan#

misal $! sampai $13 3-. ,elain itu# beberapa kapang bersifat termofilik#

yakni mampu tumbuh pada suhu tinggi. ,emua kapang bersifat aerobik#yakni membutuhkan oksigen dalam pertumbuhannya. 'ebanyakan kapang

dapat tumbuh baik pada p* luas# yakni #3 sampai "#! tetapi biasanya

pertumbuhannya akan baik bila pada kondisi asam atau p* rendah

(Waluyo# 33!). 'hamir merupakan fungi bersel tunggal dan tidak

berfilamen. ,ebagai sel tunggal khamir tumbuh dan berkembang biak

lebih cepat dibanding kapang yang tumbuh dengan pembentukan filamen.

eproduksi 6egetatif teradi dengan cara pertunasan. 'hamir uga lebih



15/34

efektif dalam memecah komponen kimia dibanding kapang# karena

mempunyai perbandingan luas permukaan dengan 6olume yang lebih

besar. ,el khamir mempunyai ukuran yang ber6ariasi# yaitu dengan

panang 1$! mm sampai 3$!3 mm# dan lebar 1$13 mm. Bentuk khamir

bermacam$macam# yaitu bulat# o6al# silinder# ogi6al yaitu bulat panang

dengan salah satu uung runcing# segitiga melengkung (trianguler)#

berbentuk botol# bentuk apulkat atau lemon# membentuk pseudomiselium#

dan sebagainya. &inding selnya sangat tipis untuk sel$sel yang masih

muda# dan semakin lama semakin tebal ika sel semakin tua. 'omponen

dinding selnya berupa glukan (selulosa khamir)# mannan# protein# kitin#

dan lipid (Waluyo# 33!).

=amur ui yang digunakan dalam penelitian ini adalah sebagai

berikut9

A.Aspergillus niger

'lasifikasi amurA.niger adalah sebagai berikut9

&i6isio 9 Iumycophyta

'elas 9 Ascomycetes

;rdo 9 Aspergillales

:amilia 9 Aspergillaceae


16/34

B.Penicillium sp.

%enicillium sp. adalah genus fungi dari ordo hpomcetes, filum

askomcota. +emiliki ciri hifa bersepta dan membentuk badan spora yang

disebut konidium. Beberapa enis penicillium sp yang terkenal adalah %.

notatum yang digunakan sebagai produsen antibiotic dan %.camembertii

yang digunakan untuk membuat keu.

/. Fusarium sp.

Fusarium sp. adalah salah satu genus fungi berfilamen yang

banyak ditemukan pada tanaman dan tanah. Berasal dari ordo hpocreales#

filum ascomcota. Berbagai spesies Fusarium dapat menyebabkan

penyakit pada manusia dan tanaman karena infeksi dan mikotoksin yang

dihasilkan.

D.Scopulariopsis sp.

&copulariopsis sp. adalah genus fungi yang bersifat saprofit dan

patogenik terhadap hewan# termasuk di6isi ascomcota# kelas

sordariomcetes# ordo microascales,dan family microascaceae.

2.0 U!% Akt%*%ta+ Tk+%+%ta+

Terdapat empat metode penguian sitotoksisitas yang dikembangkan untuk

pencarian produk alam yang potensial sebagai bahan antikanker# yaitu /Brine

,hrimp 7ethality Test0# /7emmna +inor Bioassay0# /-rown$


17/34

ui. ,uatu ekstrak dikatakan toksik berdasarkan metode B,T ika harga 7-!3 K

1333 Fg ml.

Ui pendahuluan senyawa aktif pada sampel ui biasanya dilakukan dengan

hewan ui. ,alah satu hewan ui yang sesuai adalah brine shrimp (udang laut)A.

salina 7each# seenis udang$udangan primitif dan pertama kali ditemukan di

7ymington# nggris pada tahun 15!! dan termasuk family crustaceae tingkat

rendah dari phlum arthropoda (?urwakusuma# 335). $rine &hrimp 'ethalit

(est (B,7T) pertama kali diperkenalkan oleh +ichael# dkk pada tahun 18!.

+etode penguian ini didasarkan pada bahan senyawa aktif dari sampel ui yang

bersifat toksik dan mampu membunuh lar6aA. salina 7each. dan dapat digunakan

sebagai ui praskrining akti6itas antikanker (+eyer et al# 18").

?enguian akti6itas sitotoksik berdasarkan metode B,7T dilakukan sesuai

dengan cara berikut. Telur udangArtemia salina 7each ditetaskan dalam air laut

dengan menggunakan wadah kaca berukuran ! cm E 1! cm E 11 cm. ?ada bagian

tengah wadah diberi sekat bercelah di bagian bawahnya sehingga wadah terbagi

menadi dua bagian# yaitu bagian terang (disinari dengan lampu piar 3 Watt) dan

bagian gelap. Telur diletakkan di bagian gelap selama @" am agar menetas. ?ada

bagian terang diberi aerasi sebagai penyedia oksigen. 7ar6a dari telur udang yang

baru menetas akan bergerak menuu bagian terang dan siap digunakan untuk ui

akti6itas sitotoksik. ,ebanyak 3 mg sampel dilarutkan dengan m7 metanol

sehingga menghasilkan larutan induk 13.333 Fgm7. 7arutan induk dipipet

menggunakan pipet mikro sebanyak !# !3 dan !33 Fgm7 (triplo) dan dimasukkan

ke masing$masing 6ial# sehingga secara berturut$turut menghasilkan larutan ui

dengan konsentrasi 13# 133 dan 1.333 Fgm7. ?elarut dibiarkan menguap. ,ampel

dilarutkan kembali dengan !3 Fgm7 larutan dimetilsulfoksida# kemudianditambahkan dengan m7 air laut. 7ar6a udang dimasukkan sebanyak 13 ekor ke

tiap$tiap 6ial dan ditambahkan lagi dengan air laut hingga 6olum ! m7. ?enguian

dilakukan selama @ am# kemudian dihitung umlah rata$rata lar6a udang yang

mati. Berdasarkan data yang diperoleh# nilai 7-!3 dapat dianalisis dengan

menggunakan metode analisis ?robit (+eyer# et al.# 18"). Akti6itas sitotoksik

dilakukan untuk mengetahui berapa besar akti6itas toksisitas dari sampel ui



18/34

terhadap sel normal yaitu sel 6ero sehingga dapat menentukan tingkat keamanan

penggunaaan ekstrak sampel sebagai obat dari bahan alam.

2.0.1 Let&al /nentrat%n 03 'L/03(

7-!3 digunakan untuk perlakuan secara inhalasi atau percobaan

toksisitas dalam media air ('laassen# 18"). ?enguian efek toksik dengan

lar6aArtemia salina# dihitung dengan metode 7-!3 yang mana kematian

setelah am pemaparan dimasukkan kedalam kategori 7-!3 akut dan

pemaparan setelah @ am digolongkan 7-!3 kronis# akan tetapi dalam

pengeraannya biasanya digunakan perhitungan 7-!3 setelah @ am

mengingat kelarutan ekstrak yang sukar larut membutuhkan waktu yang

lebih panang. ?enunukan efek toksik yang dihasilkan memberikan

indikasi terganggunya proses pembentukan sel. &alam hal ini diasumsikan

sebagai sel kanker (Anderson et.al.# 1881). ?enentuan 7-!3 dapat

dilakukan dengan beberapa cara# antara lain dengan grafik probit log

konsentrasi# metode grafik# perhitungan secara matematik. ?enentuan

metode grafik probit konsentrasi dilakukan dengan menempatkan

persentase respons dari tiap kelompok hewan pada ordinat dan logaritma

dosis obat yang diberikan secara absis (7oomis# 185").

Tingkat >ilai Toksisitas 7-!3 (Anderson# 1881)

>ilai 7-!3 (Fgml) Tingkat Toksisitas

3$!3 ,angat Toksik

!3$!33 Toksik

!33$5!3 ,edang

5!3$1333 Tidak Toksik

2.0.2 He4an U!%Artemia salina

a. 'lasifikasi



19/34

+uiman (18"")#Artemia salina adalah salah satu enis crustacea

tingkat rendah yang termasuk kedalam

'ingdom 9 Animalia

?hylum 9 Arthropoda

;rdo 9 Anostraca

:amily 9 Artemidae


20/34

dari telur yang dibuahi. *asil perkembangbiakan dapat teradi secara

o6o6i6ipar# telur berkembang menadi nauplius (Anonim# 1883). Ui

akti6itas dengan$rine &hrimp 'ethalit (es menggunakan lar6aArtemia

salinapada fase nauplius yang aktif# yang telah berumur @" am digunakan

sebagai hewan ui dalam penelitian pemantauan akti6itas sitotoksik ekstrak

sarang burung walet.

2.5 U!% Akt%*%ta+ Ant%k+%)an

Antioksidan adalah senyawa$senyawa yang mampu menghilangkan#

membersihkan menahan pembentukan ataupun memadukan efek spesies oksigenreaktif (lautan#1885). :ungsi utama antioksidan digunakan sebagai upaya untuk

memperkecil teradinya proses oksidasi dari lemak dan minyak# memperkecil

teradinya proses kerusakan dalam makanan# memperpanang masa pemakaian

dalam industri makanan# meningkatkan stabilitas lemak yang terkandung dalam

makanan serta mencegah hilangnya kualitas sensori dan nutrisi. 7ipid peroksidasi

merupakan salah satu factor yang cukup berperan dalam kerusakan selama dalam

penyimpanan dan pengolahan makanan (*ernani dan aharo#33!).

Berdasarkan sumber perolehannya ada macam antioksidan# yaitu

antioksidan alami dan antioksidan buatan (sintetik) (&alimartha dan ,oedibyo#

1888). Adanya antioksidan alami maupun antioksidan buatan (sintetik) dapat

menghambat oksidasi lipid# mencegah kerusakan# perubahan dan degradasi

komponen organic dalam bahan makanan sehingga dapat memperpanang umur

simpan (ohdiana# 331).

Antioksidan terbagi menadi antioksidan en%im dan 6itamin. Antioksidan

en%im meliputi superoksida dismutase (,;&)# katalase dan glutation peroksidase

(


21/34

tubuh terhadap serangan radikal bebas melemah# sehingga menadi suatu piranti

diaknostik yang penting. ?emeriksaan ini dapat dilakukan melalui pengukuran

yaitu status antioksidan total# superoksida dismutase dan glutation peroksidase

sekaligus untuk memeriksa status selenium (Wiaya#1885).

2.5.1 Mekan%+e Ker!a Ant%k+%)an

Antioksidan baik sintetik maupun alami dapat mencegah teradinya

oksidasi melalui beberapa mekanisme yaitu 9 pelepasan hidrogen dari

antioksidan# pelepasan elektron dari antioksidan# adisi lemak kedalam

cincin aromatik antioksidan dan pembentukan senyawa kompleks antara

lemak dengan cincin aromatik dari antioksidan.

+ekanisme kera antioksidan memiliki dua fungsi. :ungsi pertama

merupakan fungsi utama dari antioksidan yaitu sebagai pemberi atom

hidrogen. Antioksidan (A*) yang mempunyai fungsi utama tersebut sering

disebut sebagai antioksidan primer. ,enyawa ini dapat memberikan atom

hidrogen secara cepat ke radikal lipida (M# ;;M) atau mengubahnya ke

bentuk lebih stabil# sementara turunan radikal antioksidan (AM) tersebut

memiliki keadaan lebih stabil dibanding radikal lipida. :ungsi kedua

merupakan fungsi sekunder antioksidan# yaitu memperlambat lau

autooksidasi dengan berbagai mekanisme diluar mekanisme pemutusan

rantai autooksidasi dengan pengubahan radikal lipida ke bentuk lebih

stabil (


22/34

2.5." Ra)%kal Be,a+

adikal bebas adalah sekelompok bahan kimia baik berupa atom

maupun molekul yang memiliki elektron tidak berpasangan pada lapisan

luarnya# uga merupakan suatu kelompok bahan kimia dengan reaksi

angka pendek yang memiliki satu atau lebih elektron bebas. (,amsul

Arief.33").

2.5.- Mekan%+e Reak+% Ra)%kal Be,a+

+ekanisme reaksi radikal bebas paling tepat dibayangkan sebagai

sesuatu deret reaksi$reaksi bertahap# tiap tahap termasuk pada salah satu

kategori yaitu 9

1. ?ermulaan (inisiasi# inisiation) suatu reaksi radikal bebas#

. ?erambatan (propagasi# propagation) reaksi radikal bebas#

4. ?engakhiran (terminasi# termination) reaksi radikal bebas.

( a ) -l N -lO

( b ) -*@ P -lO N O-*4 P *-l

O-*4 P -l N -*4-l P -lO

( c ) -lO P O-*4N -*4-l

O-*4$P O-*4

$ N -*4-*4

'eterangan9 (a) inisiasi# (b) propagasi# dan (c) terminasi

2.5.0 U!% Akt%*%ta+ Ant%k+%)an

"etode !%%)



23/34

?otensi antioksidan penangkap radikal ditentukan menggunakan

&??* (1#1$difenil$$pikryhidra%il)# suatu radikal stabil dalam larutan air

atau metanol dan mampu menerima sebuah elektron atau radikal hidrogen

untuk menadi molekul diamagnetik yang stabil (;ke et al# 33). Ifek

antioksidan pada penangkapan radikal &??* (-1"*1>!;) disebabkan

oleh kemampuan suatu senyawa mendonorkan hidrogennya. Akti6itas

penghambatan radikal babas oleh suatu senyawa kimia menyebabkan

reduksi &??* menadi hidra%in$&?? yang berwarna ungu. Warna tersebut

berubah elektron tidak berpasangan radikal dari &??* berpasangan

dengan hidrogen dari antioksidan penangkap radikal bebas sehingga

terbentuk &??*$* tereduksi yang berwarna kuning dan diikuti penurunan

serapan pada panang gelombang !15 nm. Adanya penurunan serapan

tersebut maka akti6itas antioksidan penangkap radikal dapat diketahui.

Akti6itas antioksidan dari berbagai enis sampel dapat ditentukan

dengan melihat konsentrasi sampel yang memberikan penghambatan !32

atau -!3dari sampel. ,ampel yang berupa ekstrak dikatakan memberikan

efek antioksidan ika nilai -!3kurang dari 33 mgml# sedangkan untuk

senyawa murni harus memiliki nilai -!3K133. ,elain itu uga dapat

dilakukan dengan membandingkan antara nilai -!3 dari sampel dengan

pembanding seperti asm askorbat. +etode &??* yang dilakukan dalam

penelitian ini mengikuti metode &??* yang disampaikan Blois (18!").

BAB III

PER/OBAAN



24/34

".1 Ba&an )an Alat

Ba&an

Ikstrak ,arang Walet >utrient Agar

,tandar antibiotic (Amoksisilin)

Bakteri ui 9E.Colidan$acillus sp.

7ar6a udangArtemia &alina '.

AQuades

eraca Analitik &igital

,pektrofotometri u6$6isible

".2 Met)e Per,aan

?reparasi

1) ,arang wallet diblender untuk memperkecil ukurannya

) ,erbuk sarang wallet dimaserasi dengan pelarut polar yaitu methanol

dengan perbandingan R.. selama R.

4) *asil maserasi disaring lalu pelarutnya diuapkan dengan rotary e6aporator

hingga didapatkan ekstrak sarang wallet

@) Ikstrak sarang wallet yang didapatkan siap dilakukan ui bioassay



25/34

?enguian

Ui Antibakteri dengan +etode &ifusi Agar -akram

1) &isiapkan lima buah cawan petri

) Impat cawan petri diberi label# dua cawan diberi label /E.Coli0

sedangkan yang lainnya /$acillus sp.0

4) &ipipet 3#1 m7 bakteri ui (E.Coli dan$acillus sp.) lalu dimasukkan ke

tiap cawan petri sesuai dengan label yang tertera secara aseptic

@) +edia nutrient agar dituang kedalam cawan petri yang berisi bakteri ui

secara aseptic lalu dihomogenkan dan biarkan membeku

!) ,ampel (ekstrak sarang wallet) dipipet sebanyak 1 m7 lalu dimasukkan ke

cawan petri lain secara aseptic

) &engan menggunakan pinset steril# diambil empat buah cakram kertas

yang telah disterilkan lalu dimasukkan ke dalam cawan petri berisi sampel

secara aseptic

5) 'ertas cakram dibiarkan terendam didalam larutan sampel selama S

1menit

") ,etelah 1 menit# kertas cakram diambil lalu diletakkan ditengah cawan

petri yang berisi media yang telah beku secara aseptic (satu kertas cakram

untuk satu cawan petri)

8) -awan petri yang berisi media# bakteri# dan sampel diinkubasi pada

incubator bersuhu 45- selama E@am

13) ?erlakuan standar sama seperti diatas# hanya mengganti sampel dengan

standar amoksisilin

11) &ilihat hasil inkubasi dengan mengukurnya menggunakan penggaris

Ui Antiamur dengan +etode &ifusi Agar -akram

Ui Toksisitas dengan +etode B,7T

*+ &itimbang 3# g ekstrak sarang wallet

+ Ikstrak sarang walet dimasukkan ke dalam labu takar 133 m7 danditambahkan 13 tetes &+,; kemudian di kocok hingga larut.

-+ &itambahkan air laut ( larutan garam 1! g7) dan dihomogenkan#

sehingga didapatkan larutan induk 333 mg7

+ ,elanutnya larutan tersebut diencerkan untuk membuat larutan 33 mg7

dan 3 g7 dengan pelarut air garam 1! g7.

/+ &ibuat larutan ui 1333# 133# dan 13 mg7 dengan cara memipet masing$

masing larutan 333# 33# dan 3 mg7 sebanyak ! m7 ke dalam tabung

reaksi yang sudah ditandai batas ukuran 13 m7.



26/34

0+ &itambahkan masing$masing konsentrasi ui dengan 13 ekor lar6a udang

Artemia &alina '.

1+ &itambahkan masing$masing konsentrasi ui dengan air laut hingga

6olume 13 m7 dan dihomogenkan.2+ Untuk masing$masing konsentrasi ui dilakukan pengulangan 4 kali.

3+ ,ebagai kontrol digunakan air laut 13 m7 berisi 13 ekor lar6a udang tanpa

ditambahkan contoh.

*4+ Tabung reaksi tersebut disimpan selama @ am dibawah pencahayaan

neon. &iamati dan dihitung umlah lar6a yang mati setelah @ am

penguian dan dicatat hasilnya.

Ui Antioksidan dengan +etode5adical &cavenger

1) 7arutan induk contoh gm7 dibuat dengan cara menimbang ekstraksarang walet sebanyak !3 mg kemudian dilarutkan dengan metanol (p.a)

dalam labu takar !3 m7 kemudian dihomogenkan.

) &ipipet masing$masing 3#3! m7 D 3#13 m7 D 3#! m7 D 3#!3 m7D dan 1#33

m7 menggunakan buret ke dalam tabung reaksi berskala.

4) &itambahkan masing$masing 1#33 m7 larutan &??*.

@) &itambahkan larutan metanol (p.a) sampai mencapai skala ! m7 ( larutan

ekstrak sarang walet yang dibuat adalah !3# 133# !3# !33# dan 1333

gm7 )

!) &ihomogenkan dengan alat 6orteE.

) &ibuat larutan blanko dengan cara memipet 1#33 m7 larutan &??* ke

dalam tabung reaksi berskala kemudian ditambahkan metanol (p.a) hingga

6olume ! m7.

5) &isimpan semua larutan contoh dan blanko dalam inkubator bersuhu 453-

selama 43 menit.

") ,etelah 43 menit diukur absorbansinya menggunakan spektrofotometer

pada panang gelombang !15 nm.

8) &ihitung 2 inhibisi tiap konsentrasi.13) &itentukan persamaan linier antara konsentrasi contoh (sumbu E) dan 2

inhibisi ( sumbu y).



27/34

BAB I7

HASIL DAN PEMBAHASAN

U!% Ant%,akter% )engan Met)e D%#+% Agar /akra

Ulangan

ke$

E.Coli (cm) $acillus sp. (cm)

&' &- &* &' &- &*

1 3#!4 3#!4 $ 3#!! 3#!! $

3#3 3#3 $ 3#3 3#3 $

'et9 &' V &iameter 'eseluruhan

&- V &iameter -akram

&* V &iameter *ambat

Ui akti6itas antibakteri pada ekstrak sarang wallet dilakukan dengan

menggunakan metode difusi cakram. &ari metode ini# suatu %at yang memiliki

kemampuan antibakteri dapat dilihat dari %ona hambat disekitar kertas cakram

tersebut# yaitu berupa daerah transparan yang menandakan bahwa sampel yang

diuikan dapat menghambat pertumbuhan bakteri sehingga didaerah sekitar

cakram tidak terdapat bakteri yang tumbuh. ?ada praktikum yang dilakukan

didapatkan hasil yaitu tidak terdapatnya %ona hambat disekitar kertas cakram yang

mengandung sampel ekstrak sarang wallet. *al tersebut berarti sampel ekstrak

sarang wallet tidak memiliki akti6itas antibakteri.

U!% Ant%!ar )engan Met)e D%#+% Agar /akra

U!% Tk+%+%ta+ )engan Met)e BSLT

Ui B,7T ($rine &hrimp 'ethalit (est) merupakan ui toksisitas dengan

menggunakan lar6a udang Artemia &alina '. sebagai salah satu tahapan dalam



28/34

penguian farrnakologik eksperimental. +etode ini dipilih dengan beberapa

alasan. ?ertama# metode ini merupakan metode penapisan farmakologi awal yang

mudah dan relatif tidak mahal serta tidak membutuhkan suatu spesialisasi tertentu

dalam pelaksanaannya. 'edua# metode ini merupakan metode yang telah terui

hasilnya dengan tingkat kepercayaan 8!2 untuk mengamati toksisitas suatu

senyawa di dalam eltstralt kasar tanaman. 'etiga# metode B,7T sering digunakan

dalam tahap awal isolasi senyawa toksik yang terkandung dalam suatu ekstrak

kasar.

B,7T dengan metode +eyer menggunakan 13 ekor lar6a udang pada

setiap botol ui yang kemudian ditambahkan ekstrak sarang walet. ?ercobaan

dilakukan dengan menggunakan konsentrasi ekstrak sarang walet yang berbeda$

beda yaitu mulai dari 1333# 133# dan 13 ppm. *al ini bertuuan untuk mengetahui

7-!3dari masing $ masing ekstrak tersebut dengan berbagai konsentrasi.

7arutan ekstrak sarang walet sebanyak ! m7 dimasukkan dalam tabung

reaksi yang berisi 13 buah lar6a udang# kemudian ditambahkan air laut sampai

6olumenya mencapai 13 m7. &alam percobaan ini air laut yang digunakan adalah

larutan garam 1! g7. ,etelah @ am# dihitung umlah lar6a udang uang mati.

,emakin tinggi konsentrasi ekstrak# maka semakin banyak lar6a udang yang mati.

&alam penentuan nilai 7-!3dapat dilakukan dengan 4 metode# yaitu 9

1. ?erhitungan probit

. analisis eed$+unch

4. analisis :armakope

?ada percobaan ini# metode perhitungan yang digunakan adalah

perhitungan probit. &alam perhitungan dengan metode analisis probit diperlukan

tabel probit dan rumus regresi liniear untuk menentukan nilai a# b dan r# sehingga

dapat ditentukan nilai 7-!3$nya. Adapun hasil perhitungan dengan menggunakanmetode ini menunukkan hasil bahwa 7-!3pada ulangan 1 adalah 51!#@"8 ppmD

ulangan adalah 33#5!" ppmD dan ulangan 4 adalah 1#8 ppm.

Naa

nt&

Ulgn Kn+entra+

% ek+trak

'g8L(

$la&

lar*a

&%)9

$la&

lar*a

at%

:

lar*a

at%

Per+aaan

regre+%

L/;03

Ek+trak 13 13 3 3#33 V $1#5" P 51!#@"

133 " 3#33



29/34

+arang

4alet

1 #45! E 81333 @ @3#33

13 13 3 3#33 V $1#8@5

P #! E

33#5!"

133 " 3#33

1333 ! ! !3#33

4

13 8 1 13#33 V 4#"5 P

3#!1! E

1#

8133 5 4 43#33

1333 @ @3#33

+enurut e6aluasi +eyer et al (18")# hasil ui dinyatakan sebagai 7-!3#

bersifat toksik terhadap Artemia salina '.bila ekstrak sampel memiliki 7-!3 K

1333 gm7 dan berpotensi sitotoksik serta dapat dikembangkan sebagai

antikanker. ,emakin rendah nilai 7-!3semakin tinggi toksisitas terhadap kematian

hewan percobaan# maka senyawa tersebut aktif terhadap sel tumor atau sel kanker.

*al ini menunukkan ekstrak sarang walet dapat bekera secara sinergis untuk

memberikan sifat toksik (sitotoksik) terhadap sel lar6aArtemia salina 'each.

U!% Ant%k+%)an )engan Met)eRadical Scavenger

>ama

-ontoh

'onsentra

si (gm7)

Abs

Blanko

Abs

-ontoh

2

inhibisi

?ersamaan

egresi

-!3

Ikstrak

sarang

walet

!3 3#58 3#5! !#3! V

#@33" P

3#3311 E

4#

8381133 3#55@ #5

!3 3#5"4 1#15

!33 3#5" 3#5

1333 3#5!4 @#8

Antioksidan adalah senyawa$senyawa yang mampu menghilangkan#

membersihkan menahan pembentukan ataupun memadukan efek spesies oksigen

reaktif. :ungsi utama antioksidan digunakan sebagai upaya untuk memperkecilteradinya proses oksidasi dari lemak dan minyak# memperkecil teradinya proses

kerusakan dalam makanan# memperpanang masa pemakaian dalam industri

makanan# meningkatkan stabilitas lemak yang terkandung dalam makanan serta

mencegah hilangnya kualitas sensori dan nutrisi.

?enguian aktifitas antioksidan dalam ekstrak sarang burung walet

dilakukan secara metode &??*. +etode &??* merupakan metode yang mudah#

cepat# dan sensitif untuk penguian akti6itas antioksidan senyawa tertentu. &??*



30/34

merupakan radikal bebas yang dapat bereaksi dengan senyawa yang dapat

mendonorkan atom hidrogen# dapat berguna untuk penguian akti6itas antioksidan

komponen tertentu dalam suatu ekstrak. 'arena adanya elektron yang tidak

berpasangan# &??* memberikan serapan kuat pada !15 nm. 'etika elektronnya

menadi berpasangan oleh keberadaan penangkap radikal bebas# maka

absorbansinya menurun secara stokiometri sesuai umlah elektron yang diambil.

'eberadaan senyawa antioksidan dapat mengubah warna larutan &??* dari ungu

menadi kuning. Adanya penurunan serapan tersebut maka akti6itas antioksidan

penangkap radikal dapat diketahui. ?ada penguian yang dilakukan terlihat warna

larutan ekstrak setelah ditambahkan &??* adalah berwarna kecoklatan. *al ini

mungkin disebabkan daya antioksidasi yang lemah (ekstrak tidak murni mungkin

disebabkan masih terdapatnya metanol dalam ekstrak).

Ui akti6itas antioksidan dengan menggunakan metode &??* berdasarkan

dari hilangnya warna ungu akibat tereduksinya &??* oleh antioksidan. ntensitas

warna dari larutan ui diukur melalui spektrofotometri UH$His pada panang

gelombang sekitar !15 nm. *asil dari ui ini diinterpretasikan sebagai -!3# yaitu

umlah antioksidan yang diperlukan untuk menurunkan konsentrasi awal &??*

sebesar !32. ?ada metode ini tidak diperlukan substrat sehingga memiliki

keuntungan# yaitu lebih sederhana dan waktu analisis yang lebih cepat.

Tabel . Tingkat kekuatan antioksidan dengan metode &??*

Inten+%ta+ N%la% IC03

,angat kuat K !3 gm7

'uat !3$133 gm7

,edang 131$1!3 gm7

7emah X 1!3 gm7

Akti6itas antioksidan dari berbagai enis sampel dapat ditentukan dengan

melihat konsentrasi sampel yang memberikan penghambatan !32 atau - !3 dari

sampel.

&ilihat dari hasil penguian# larutan ekstrak sarang walet !3# 133# !3#

!33# dan 1333 gm7 memberikan 2 inhibisi dibawah !32. *al ini menandakan



31/34

ekstrak sarang walet yang diui hanya memiliki sedikit kemampuan dalam

mencegahmenghambat oksidasi. &ari larutan ekstrak sarang walet !3# 133# !3#

!33# dan 1333 gm7# ekstrak !3 gm7 memberikan 2 inhibisi terbesar yaitu

!#3! 2. &ilihat dari nilai -!3 yang diperoleh yaitu 4#8381 gm7#

menandakan bahwa ekstrak sarang burung walet yang diui memiliki daya

antioksidan yang sangat lemah (X 1!3 gm7). *al ini mungkin disebabkan

beberapa hal seperti kualitas sarang burung walet yang diui# kandungan ekstrak

sarang walet yang diperoleh dalam tahap isolasi dan e6aporasi yang sangat sedikit

sehingga kandungan antioksidannya uga sangat sedikit. ,ehingga perlu optimasi

dalam pembuatan ekstrak sarang burung walet agar diperoleh hasil yang lebih

akurat.

BAB 7

SIMPULAN

,ampel ekstrak sarang wallet yang



32/34

BAB 7I

DA


33/34

BAB 7II

LAMPIRAN

PERHITUNGAN



34/34

2 7ar6a +ati V

2 nhibisi V

Documents

Pendahuluan Bioassay Sarang Walet