PENENTUAN KADAR FENOLIK TOTAL DAN AKTIVITAS …repository.ump.ac.id/8984/1/COVER.pdf · penentuan kadar fenolik total dan aktivitas antioksidan dari fraksi etil asetat bawang dayak

i

PENENTUAN KADAR FENOLIK TOTAL DAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN

DARI FRAKSI ETIL ASETAT BAWANG DAYAK (Sisyrinchium palmifolium L.)

MENGGUNAKAN METODE BCB (β-CAROTENE BLEACHING)

DAN FRAP (FERRIC REDUCING ANTIOXIDANT POWER)

SKRIPSI

MAYRANI PERMATA SARI

1408010014

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO

2018

Penentuan Kadar Fenolik... Mayrani Permata Sari, Fakultas Farmasi UMP, 2018

i





SKRIPSI

Diajukan sebagai salah satu syarat

untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi

MAYRANI PERMATA SARI

1408010014

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO

2018


ii


iii


iv


v

KATA PENGANTAR

Puji syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa, karena atas rahmat-Nya, dapat

menyelesaikan skripssi dengan judul “Penentuan kadar fenolik total dan aktivitas

antioksidan dari fraksi etil asetat bawang dayak (sisyrinchium palmifolium L.)

menggunakan metode bcb (β-carotene bleaching) dan frap (ferric reducing

antioxidant power”. Penulisan skripsi ini dilakukan dalam rangka memenuhi

salah satu syarat untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi

Universitas Muhammdiyah Purwokerto.

Penulis menyadari bahwa tanpa bantuan dari berbagai pihak, dari masa

perkuliahan sampai pada penyusunan skripsi ini, sangatlah sulit untuk

menyelesaikan skripsi ini. Oleh karena itu, pada kesempatan ini penulis

mengucapkan terimakasih kepada yang terhormat :

1. Drs. H. Syamsuhadi Irsyad, S.H., M.H. selaku Rektor Universitas

Muhammadiyah Purwokerto.

2. Dr. Agus Siswanto, M.Si., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas

Muhammadiyah Purwokerto yang telah memberikan berbagai informasi dan

bimbingan tentang tat laksana penyusunan skripsi.

3. Wahyu Utaminingrum, M.Sc., Apt selaku Ketua Program Studi S1 Farmasi

yang telah memberikan berbagai informasi dan bimbingan tentang tat laksana

penyusunan skripsi.

4. Dr. Nunuk Aries Nurulita, M.Si., Apt selaku dosen pembimbing I yang telah

memberikan waktu, arahan, masukan, dan bimbingan dalam penyusunan

skripsi ini.

5. Elza Sundhani, M.Sc., Apt selaku dosen pembimbing II yang telah

memberikan waktu, arahan, masukan, dan bimbingan dalam penyusunan

skripsi ini.

6. Dr. Asmiyenti Djalilasrin Djalil, S.Si., M.Si yang telah memberikan berbagai

pertanyaan untuk menguji kelayakan sebagai Sarjana Farmasi.

7. Ika Nurzijah, M.Sc., Apt yang telah memberikan berbagai pertanyaan untuk

menguji kelayakan sebagai Sarjana Farmasi.


vi


vii

RIWAYAT HIDUP

Nama : Mayrani Permata Sari

Tempat, Tanggal Lahir : Kutai, 15 Mei 1996

Nama Oranf Tua : Sadi (Ayah), Zahra Kristiana (Ibu)

Riwayat Pendidikan :

a. Sekolah Dasar : SD N 022 Sebulu

b. Sekolah Menengah Pertama : SMP Negeri 5 Sebulu

c. Sekolah Menengah Atas : SMK Farmasi Tenggarong

d. Perguruan Tinggi : Fakultas Farmasi Universitas

Muhammadiyah Purwokerto

Kegiatan Ilmiah Mahasiswa

PKM-P (Program Kreativitas Mahasiswa – Penelitian) : Efek Potensiasi

Daun Tembelekan (Lantana Camara) Terhadap 5-Fluorouracil Pada Sel

Kanker Payudara Melalui Kombinasi Mekanisme S-Phase Arrest Dan

Inhibisi Mitosis. Tahun 2016. (Anggota)

PKM-PE (Program Kreativitas Mahasiswa – Penelitian) : Jagoan Badaman

(Bawang Dayak Kalimantan)(Sisyrinchium Palmifolium L.), Pembunuh

Kanker Payudara Melalui Induksi G0-G1 Cell Cycle Arrest. Tahun 2017.

(Ketua)

Pengalaman Organisasi :

Unit Kegiatan Mahasiswa Broadcasting Gradiosta (Anggota, Tahun 2014)

Unit Kegiatan Mahasiswa Broadcasting Gradiosta (Manager Keuangan,

Tahun 2015)


viii

PERSEMBAHAN

Dengan nama Allah Yang Maha Pengasih lagi Maha Penyayang. Skripsi ini

akan penulis persembahkan untuk:

1. Ayah dan Ibu tercinta yang selama ini telah memberikan kasih sayang yang

begitu besar dan senantiasa memberikan dukungan dari segala aspek serta doa

yang selalu dipanjatkan untuk mengiringi perjalanan hidup anak-anaknya.

Terimakasih untuk semuanya.

2. Adikku tersayang Rizky Agustiana Sari dan Hafidh Abdul Rozaq yang selalu

mendukung dan setia mendengarkan keluh kesah kakaknya. Terimakasih

telah mendukung dan menyayangi kakak selama ini.

3. Keluarga besar Alm. Bani Khuneini dan Alm. Rasini untuk dukungan dan

doa yang selalu dipanjatkan untukku.

4. Dosen pembimbingku (Ibu Nunuk dan Ibu Elza) yang selama ini dengan

sabar membimbingku, dari awal penyusunan proposal hingga skripsi selesai.

Terima kasih banyak.

5. Dosen dan Staf Karyawan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah

Purwokerto.

6. Dyfa Anggita P.M.S terimakasih banyak telah membimbingku dengan sabar

dan seringkali aku repotkan dari awal penyusunan proposal, pelaksanaan

penelitian hingga skripsi selesai.

7. Teman-teman “Tim Antioksidan” (Rima, Ayu, Vania) dimana suka duka

selama penelitian kita lewati bersama, saling membantu satu sama lain, yang

sudah aku anggap seperti keluarga kedua aku, Alhamdulillah kita berhasil

dalam penelitian ini.

8. Sahabat-sahabat tersayang Fifi Rahmawati, Amalia Puspita Rahmawati,

Syiria Sholikhah, Khiqmah Yuliani, Veby Tri Yulianti yang telah

memberikan pelajaran semangat serta semua sahabatku yang tak dapat

disebutkan satu per satu disini.

9. Semua teman-teman angkatan 2014 yang berjuang bersama selama 4 tahun

ini.

10. Almamaterku Universitas Muhammadiyah Purwokerto.


ix

MOTTO

“Man Jadda WaJada”

“Where there is a will there is a way!!”

“Sesungguhnya Allah tidak akan mengubah nasib suatu kaum hingga

mereka mengubah diri mereka sendiri”

(Q.S. Ar-Ra’d:11)

“Bermimpilah setinggi langit, jika engkau jatuh maka engkau akan jatuh

diantara bintang-bintang”

(Soekarno)

“Milikilah mimpi yang nyata, buatlah rencana yang nyata, ambil tindakan

yang nyata, maka keberhasilanmu akan menjadi nyata”

(Merry Riana)


x


xi





Mayrani Permata Sari1, Nunuk Aries Nurulita

2, Elza Sundhani

3

ABSTRAK

Antioksidan adalah molekul yang mampu menstabilkan radikal bebas sebelum

menyerang sel, selain itu dapat menghambat atau menunda oksidasi. Bawang

dayak (Sisyrinchium palmifolium L.) merupakan salah satu bahan alam yang

dapat digunakan sebagai antioksidan alami karena mengandung senyawa alkaloid,

flavonoid, tanin dan steroid yang menunjukkan aktivitas antioksidan. Penelitian

ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antioksidan dari fraksi etil asetat bawang

dayak. Analisis penghambatan fraksi etil asetat bawang dayak (Sisyrinchium

palmifolium L.) terhadap oksidasi dari radikal bebas dilakukan dengan pengujian

aktivitas antioksidan dengan metode BCB dan FRAP. Penentuan kadar fenolik

total diukur dengan spektrofotometer UV-Vis menggunakan reagen Follin

Ciocalteu. Aktivitas antioksidan diukur berdasarkan metode BCB (Beta Carotene

Bleaching) dan FRAP (Reducing Antioxidant Ferric Power) dengan quercetin dan

asam askorbat sebagai pembanding dan selanjutnya dihitung nilai IC50. Hasil

penelitian menunjukkan bahwa fraksi etil asetat bawang dayak (Sisyrinchium

palmifolium L.) memiliki kadar fenolik total 88.303 µg GAE/ g sampel. Aktivitas

antioksidan pada metode BCB diperoleh nilai IC50 986,305 μg/ml yang berarti

memiliki aktivitas antioksidan yang lemah dibandingkan dengan nilai IC50 21,274

μg/ml quercetin sebagai pembanding aktivitas sangat kuat dan aktivitas

antioksidan pada metode FRAP diperoleh nilai IC50 49,002 μg/ml yang berarti

memiliki aktivitas antioksidan kuat namun nilai IC50 lebih lemah dibandingkan

aktivitas antioksidan asam askorbat sebagai pembanding yaitu 15,619 μg/ml.

Hasil penelitian ini dapat disimpulkan bahwa fraksi etil asetat bawang dayak

efektif sebagai antioksidan dengan metode FRAP namun tidak efektif sebagai

antioksidan dengan metode BCB.

Kata kunci : Bawang dayak, Antioksidan, fenolik total, BCB, FRAP


xii

DETERMINATION OF TOTAL PHENOLIC CONTENT AND

ANTIOXIDANT ACTIVITIES FROM ETHYL ACETATE FRACTION OF

BAWANG DAYAK (Sisyrinchium palmifolium L.)

USING BCB (BETA CAROTENE BLEACHING) AND FRAP (FERRIC

REDUCING ANTIOXIDANT POWER) ASSAY

Mayrani Permata Sari1, Nunuk Aries Nurulita

2, Elza Sundhani

3

ABSTRACT

Antioxidants are molecules that are able to stabilize free radicals before attacking

cells, futner more they can inhibit or delay oxidation process. Bawang dayak

(Sisyrinchium palmifolium L.) is one of the natural ingredients that can be used as

a natural antioxidant because it contains alkaloids, flavonoids, tannins and steroids

which show antioxidant activity. This study aims to determine the antioxidant

activity of the bawang dayak ethyl acetate fraction. Analysis of inhibition of

bawang dayak ethyl acetate fraction (Sisyrinchium palmifolium L.) on oxidation

of free radicals was carried out by testing antioxidant activity with BCB (β-

Carotene Bleaching) and FRAP (Ferric Reducing Antioxidant Power) methods.

Determination of total phenolic content was measured by UV-Vis

spectrophotometer using Follin Ciocalteu reagent. Antioxidant activity was

measured based on BCB and FRAP methods with quercetin and ascorbic acid as a

comparison and then calculated IC50 values. The results showed that ethyl acetate

fraction had a total phenolic content of 88.303 µg GAE/ g sample. Antioxidant

activity in BCB method obtained IC50 986,305 μg / ml which means it has weak

antioxidant activity compared to IC50 value 21,274 μg / ml of quercetin as a

comparison and antioxidant activity in FRAP method obtained IC50 value 49,002

μg / ml which means it has strong antioxidant activity but IC50 value is weaker

than the antioxidant activity of ascorbic acid as a comparison that is 15,619 μg /

ml. The results of this study concluded that the bawang dayak ethyl acetate

fraction is effective as an antioxidant with the FRAP method but not effective as

an antioxidant with the BCB method.

Keywords : Bawang dayak, Antioxidants, total phenolic, BCB, FRAP


xiii

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL ............................................................................................. i

HALAMAN PERNYATAAN ORISINALITAS ................................................. ii

HALAMAN PERSETUJUAN ............................................................................. iii

HALAMAN PENGESAHAN .............................................................................. iv

KATA PENGANTAR ......................................................................................... v

RIWAYAT HIDUP .............................................................................................. vii

PERSEMBAHAN ................................................................................................ viii

MOTTO ................................................................................................................ ix

LEMBAR PERSETUJUAN PUBLIKASI ........................................................... x

ABSTRAK ........................................................................................................... xi

ABSTRACT ........................................................................................................... xii

DAFTAR ISI ......................................................................................................... xiii

DAFTAR GAMBAR ........................................................................................... xv

DAFTAR TABEL ................................................................................................ xvi

DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................ xvii

BAB I PENDAHULUAN ............................................................................... 1

A. Latar Belakang ............................................................................... 1

B. Rumusan Masalah ......................................................................... 2

C. Tujuan Penelitian ........................................................................... 3

D. Manfaat Penelitian ......................................................................... 3

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ..................................................................... 4

A. Hasil Penelitian Terdahulu ............................................................ 4

B. Landasan Teori .............................................................................. 5

1. Radikal Bebas ........................................................................ 5

2. Antioksidan ............................................................................ 7

3. Senyawa Fenolik dan Flavonoid ............................................ 7

4. Bawang Dayak (Sisyrinchium palmifolium L.) ...................... 8

5. Karatenoid .............................................................................. 10

6. FRAP (Ferric Reducing Antioxidant Power) ......................... 11

C. Kerangka Konsep .......................................................................... 11

D. Hipotesis ........................................................................................ 12


xiv

BAB III METODE PENELITIAN................................................................... 13

A. Jenis dan Rancangan Penelitian ..................................................... 13

B. Variabel Penelitian ........................................................................ 13

C. Waktu dan Tempat Penelitian ....................................................... 13

D. Definisi Variabel Operasional ....................................................... 14

E. Alat dan Bahan .............................................................................. 14

1. Alat ......................................................................................... 14

2. Bahan ...................................................................................... 14

F. Tahap Penelitian ............................................................................ 14

1. Identifikasi Tanaman ............................................................. 14

2. Pembuatan Simplisia ............................................................. 14

3. Pembuatan Ekstrak Kental .................................................... 15

4. Pembuatan Fraksi Etil Asetat ................................................. 15

5. Skrining Metabolit Sekunder ................................................. 15

6. Penentuan Kadar Fenolik Total .............................................. 16

7. Penentuan Aktivitas Antioksidan .......................................... 17

8. Analisis Data .......................................................................... 19

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ........................................................... 21

A. Identifikasi Tanaman .................................................................... 21

B. Pembuatan Simplisia ..................................................................... 21

C. Pembuatan Ekstrak Etanol Bawang Dayak ................................... 22

D. Pembuatan Fraksi Etil Asetat Bawang Dayak ............................... 24

E. Skrining Metabolit Sekunder ......................................................... 25

F. Penetapan Fenolik Total ................................................................ 30

G. Uji Antioksidan dengan Metode BCB ........................................... 34

H. Uji Aktivitas Antioksidan dengan Metode FRAP ......................... 40

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................... 48

A. Kesimpulan .................................................................................... 48

B. Saran .............................................................................................. 48

DAFTAR PUSTAKA .......................................................................................... 49

LAMPIRAN ......................................................................................................... 57


xv

DAFTAR TABEL

Tabel 4.1 Hasil Randemen Ekstrak Etanol Bawang Dayak .............................. 23

Tabel 4.2 Hasil Randemen Fraksi Etil Asetat Bawang Dayak .......................... 24

Tabel 4.3 Hasil Deteksi Kandungan Senyawa pada Ekstrak Etanol Bawang

Dayak dan Fraksi Etil Asetat Bawang Dayak dengan KLT .............. 26

Tabel 4.4 Hasil Penetapan Kadar Fenol Total Fraksi Etil Asetat Bawang

Dayak ................................................................................................ 33

Tabel 4.5 Persen Aktivitas Antioksidan dari Quercetin .................................... 37

Tabel 4.6 Persen Aktivitas Antioksidan dari Fraksi Etil Asetat Bawang

Dayak (Sisyrinchium palmifolium L.) ............................................... 37

Tabel 4.7 Hasil Absorbansi Kurva Baku Asam Askorbat ................................. 42


xvi

DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1. Tumbuhan bawang dayak ............................................................. 9

Gambar 2.2. Kerangka Konsep ......................................................................... 11

Gambar 4.1. Proses Ekstraksi Tanaman bawang dayak (Sisyrinchium

palmifoliumI L.) ............................................................................ 24

Gambar 4.2. Proses fraksinasi etil asetat bawang dayang dengan

menggunakan corong pisah terjadi 2 lapisan yaitu lapisan atas

(etil asetat) dan lapisan bawah (air) .............................................. 25

Gambar 4.3. Hasil KLT ekstrak bawang dayak dengan fase gerak

kloroform: metanol (8:2) dengan fase diam Silika gel .................. 26

Gambar 4.4. Hasil deteksi dengan reagen Dragendorff pada sinar tampak

(a), deteksi dengan reagen FeCl3 pada UV366nm (b), deteksi

dengan reagen semprot LB pada UV366nm (c), dan deteksi

dengan reagen semprot sitroborat pada UV366nm (d) ................. 27

Gambar 4.5. Peredaman radikal bebas oleh alkaloid ........................................ 28

Gambar 4.6. Peredaman radikal bebas oleh flavonoid ...................................... 29

Gambar 4.7. Pembentukan kompleks logam pada flavonoid ............................ 29

Gambar 4.8. Reaksi asam galat dan natrium karbonat ...................................... 32

Gambar 4.9. Reaksi asam galat dan reagen folin .............................................. 33

Gambar 4.10. Grafik kurva baku standar asam galat .......................................... 33

Gambar 4.11. Struktur molekul senyawa β-karoten dengan ikatan rangkap

terkonjugasi .................................................................................. 35

Gambar 4.12. Grafik perubahan absorbansi selama waktu inkubasi pada

kontrol negatif, kontrol positif (quercetin), dan sampel. .............. 36

Gambar 4.13. Grafik % inhibisi radikal bebas vs konsentrasi (A) sampel

fraksi etil asetat bawang dayak dan (B) kontrol positif

(quercetin) ...................................................................................... 39

Gambar 4.14 Reaksi Reduksi Ion Besi (Fe3+

) dengan metode Ferric

Reducing Power (FRP) ................................................................. 42

Gambar 4.15 Grafik %FRAP radikal bebas vs konsentrasi (A) kontrol positif

(asam askorbat) dan (B) sampel fraksi etil asetat bawang

dayak .............................................................................................. 43

Gambar 4.16 Mekanisme reaksi asam askorbat dan ion superoksida (atas)

dan hidrogen peroksida (bawah) .................................................. 45


xvii

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Hasil Determinasi Tanaman Bawang Dayak (Sisyrinchium

palmifolium L.) ........................................................................... 58

Lampiran 2. Proses Pembuatan Ekstrak Etanol Bawang Dayak

(Sisyrinchium palmifolium L.) dan Perhitungan Randemen

EEBD .......................................................................................... 60

Lampiran 3. Proses Pembuatan Fraksinasi Etil Asetat Bawang Dayak

(Sisyrinchium palmifolium. L) dan Perhitungan Randemen

FEABD ....................................................................................... 62

Lampiran 4. Hasil Skrining Metabolit Sekunder dengan Kromatografi Lapis

Tipis (KLT) ................................................................................. 64

Lampiran 5. Hasil Uji Fenolik Total ............................................................... 71

Lampiran 6. Hasil Absorbansi Sampel Fraksi Etil Asetat Bawang Dayak

Fenolik Total menggunakan Spektrofotometri Uv-vis ............... 72

Lampiran 7. Perhitungan Seri Konsentrasi Pada Penetapan Fenolik Total

Fraksi Etil Asetat Bawang Dayak (Sisyrinchium palmifolium.

L) untuk Uji Fenolik Total .......................................................... 76

Lampiran 8. Perhitungan Penetapan Kadar Fenolik Total Fraksi Etil Asetat

Bawang Dayak (Sisyrinchium palmifolium. L) ........................... 79

Lampiran 9. Hasil Uji Antioksidan dengan metode BCB ............................... 81

Lampiran 10. Hasil Absorbansi Sampel Fraksi Etil Asetat Bawang Dayak Uji

BCB menggunakan Spektrofotometri Uv-vis ............................. 82

Lampiran 11. Perhitungan Seri Konsentrasi Pada Uji BCB Fraksi Etil Asetat

Bawang Dayak (Sisyrinchium palmifolium. L) ........................... 88

Lampiran 12. Hasil perhitungan kadar Fraksi Etil Asetat Bawang Dayak

(Sisyrinchium palmifolium L.) dengan metode BCB ................. 93

Lampiran 13. Hasil Uji Antioksidan dengan metode FRAP ............................. 108

Lampiran 14. Hasil Absorbansi Sampel Fraksi Etil Asetat Bawang Dayak Uji

FRAP menggunakan Spektrofotometri Uv-vis ........................... 109

Lampiran 15. Perhitungan Seri Konsentrasi Pada Uji FRAP Fraksi Etil

Asetat Bawang Dayak (Sisyrinchium palmifolium. L) ............... 112

Lampiran 16. Hasil perhitungan kadar Fraksi Etil Asetat Bawang Dayak

(Sisyrinchium palmifolium L.) dengan metode FRAP ............... 116


Documents

PENENTUAN KADAR FENOLIK TOTAL DAN AKTIVITAS …repository.ump.ac.id/8984/1/COVER.pdf · penentuan kadar fenolik total dan aktivitas antioksidan dari fraksi etil asetat bawang dayak