PENENTUAN KADAR FENOLIK TOTAL DAN AKTIVITAS …repository.ump.ac.id/8841/1/COVER.pdf · praktikum selama 4 tahun, suka duka, canda tawa, tetap kompak ya. Adik adik tingkat sekaligus

i

PENENTUAN KADAR FENOLIK TOTAL DAN AKTIVITAS

ANTIOKSIDAN FRAKSI ETIL ASETAT DAUN TEMBELEKAN (Lantana

camara L.) DENGAN METODE FRAP (FERRIC REDUCING

ANTIOXIDANT POWER) DAN BCB (Β-CAROTENE BLEACHING)

SKRIPSI

Diajukan sebagai salah satu syarat

untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi

AYU HALIDA ARHAM

1408010086

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO

AGUSTUS 2018

Penentuan Kadar Fenolik... Ayu Halida Arham, Fakultas Farmasi UMP, 2018

ii


iii


iv


v

KATA PENGANTAR

Puji syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa, karena atas berkat dan rahmat-

Nya dapat menyelesaikan skripsi ini dengan judul Penentuan Kadar Fenolik Total

Dan Aktivitas Antioksidan Fraksi Etil Asetat Daun Tembelekan (Lantana Camara

L.) Dengan Metode FRAP (Ferric Reducing Antioxidant Power) Dan BCB (Β-

Carotene Bleaching). Penulisan skripsi ini dilakukan dalam rangka memenuhi

salah satu syarat untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Program Studi S1

Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

Penulis menyadari bahwa tanpa bantuan dan bimbingan dari berbagai

pihak, dari masa perkuliahan sampai pada penyusunan skripsi ini, sangatlah sulit

untuk menyelesaikan skripsi ini. Oleh karena itu, pada kesempatan ini penulis

mengucapkan terima kasih kepada:

1. Dr. H. Syamsuhadi Irsyad, S.H.,M.H., selaku Rektor Universitas

Muhammadiyah Purwokerto.

2. Dr. Agus Siswanto, M.Si., Apt. selaku Dekan Farmasi yang telah memberi

berbagai informasi dan bimbingan tentang tata laksana penyusunan skripsi;

3. Wahyu Utaminingrum, M.Sc.,Apt. selaku Ketua Program Studi S1 Farmasi

yang telah memberi berbagai informasi dan bimbingan tentang tata laksana

penyusunan skripsi.

4. Dr. Nunuk Aries Nurulita, M.Si.,Apt. selaku dosen pembimbing I yang telah

menyediakan waktu, tenaga, dan pikiran untuk mengarahkan dalam

penyusunan skripsi ini.

5. Elza Sundhani, M.Sc., Apt. selaku dosen pembimbing II yang telah

menyediakan waktu, tenaga, dan pikiran untuk mengarahkan dalam

penyusunan skripsi ini.

6. Dr. Pri Iswati Utami, M.Si., Apt. yang telah memberikan berbagai pertanyaan

untuk menguji kelayakan sebagai sarjana Farmasi.

7. Ika Nurzijah, M.Sc., Apt. yang telah memberikan berbagai pertanyaan untuk

menguji kelayakan sebagai sarjana Farmasi.

8. Seluruh dosen dan Karyawan Fakultas Farmasi UMP yang telah memberikan

ilmunya sehingga dapat membantu penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.


vi

9. Kedua orang tua tercinta yang selama ini telah memberikan usaha berupa

do’a dan dukungan dari segala aspek.

10. Kakak dan keluarga saya yang selalu membantu dan mendukung saya.

11. Teman-teman dan semua pihak yang membantu segala hal dalam penelitian

ini.

Akhir kata, semoga Allah SWT memberikan balasan atas segala kebaikan

semua pihak yang telah membantu. Semoga skripsi ini membawa manfaat bagi

pengembangan ilmu. Aamiin.

Purwokerto, Agustus 2018

Penulis

Ayu Halida Arham

1408010086


vii

RIWAYAT HIDUP

Nama : Ayu Halida Arham

Tempat, tanggal lahir : Majalengka, 23 Juli 1996

Nama orangtua : Tatang Murtado Nadjib (Ayah)

: Uu ubaedah (Ibu)

Riwayat Pendidikan

2002-2008 SD Negeri Cipeundeuy

2008-2011 SMP Negeri 1 Bantarujeg

2011-2014 SMK YPIB Majalengka

2014-2018 Universitas Muhammadiyah Purwokerto

Riwayat Organisasi

2014-2015 Anggota UKM GASEBU UMP

2015-2016 Bendahara Umum GASEBU UMP

2016-2017 Komisi IV DEMA Fakultas Farmasi UMP

Beasiswa

2015 Beasiswa PPA UMP

2016 Beasiswa PPA UMP

2017 Beasiswa PPA DIKTI


viii

MOTTO

*Orang yang paling bahagia di dunia ini adalah orang yang

menghadapkan wajahnya kepada Allah

Orang yang paling bahagia di dunia ini adalah orang yang

mentautkan hatinya kepada Allah

Yakinlah bahwa jalan keluar dari berbagai kesulitan akan datang dari

Allah*


ix

PERSEMBAHAN

Skripsi ini saya persembahkan untuk:

Orang tua, keluarga, dan saudara saudara saya yang selalu memberikan do’a,

kasih sayang, perhatian dan dukungan dalam segala bentuk sampai saat ini.

Dyfa Anggita P.M.S, S.Farm., Apt terimakasih banyak telah membimbing,

mengarahkan kita di kultur sel dengan sabar dan sering di repotkan. Mba

dyfa panutanku.

Teman perjuangan “ANTIOKSIDAN” (Rima, Mey, Vania) yang tetap

semangat mengejar mimpi. Kita hebat dapat melewati semuanya. Akhirnya

kita jadi sarjana.

Arum Setya utami, Amalia Puspita, Ajeng Lekas Faradibah, Ika Ryandita

makasih telah mendengar semua ocehan, curhatan, dan selalu support.

“Micin squad” (Ikoy, Bu en, Epin, Ifti, Tito, Kiwil) teman seperjuangan

praktikum selama 4 tahun, suka duka, canda tawa, tetap kompak ya.

Adik adik tingkat sekaligus member “Cleopatra Kost” (Indah, Mela, Tasya,

Tika, Yola, Irmas) yang selalu menyemangati, sering aku cerewetin.

Muhammad Zaky terimakasih selalu sabar dan support.

Almamaterku “Universitas Muhammadiyah Purwokerto”


x


xi

PENENTUAN KADAR FENOLIK TOTAL DAN AKTIVITAS

ANTIOKSIDAN FRAKSI ETIL ASETAT DAUN TEMBELEKAN

(Lantana camara L.) DENGAN METODE FRAP (FERRIC REDUCING

ANTIOXIDANT POWER) DAN BCB (β-CAROTENE BLEACHING)

Ayu Halida Arham1, Nunuk Aries Nurulita

2, Elza Sundhani

3

ABSTRAK

Stress oksidatif yang melepaskan radikal bebas sebagai penyebab dari

kerusakan endogen utama pada sistem biologi. Tanaman Tembelekan memiliki

kandungan senyawa fenolik yang berfungsi sebagai antioksidan yang tersebar

pada daun dan akar. Metabolit sekunder yang terkandung dalam fraksi etil asetat

daun tembelekan yaitu flavonoid, alkaloid, tanin, steroid, dan terpenoid.

Penelitian ini bertujuan untuk menentukan aktivitas antioksidan dan kadar fenolik

total fraksi etil asetat daun tembelekan. Aktivitas antioksidan dilakukan dengan

menggunakan metode FRAP (Ferric Reducing Antioxidant Power) dan BCB (β-

Carotene Bleaching). Penatapan kadar fenolik total dengan metode Follin

Ciocalceau. Pengukuran kadar dengan menggunakan instrument

Spektrofotometer Uv-Vis. Kadar fenolik total fraksi etil asetat daun tembelekan

diperoleh 85,16 ± 5,18 mg GAE/g sampel. Aktivitas antioksidan dengan metode

FRAP menghasilkan nilai IC50 52,40 μg/mL yang berarti memiliki aktivitas

antioksidan yang kuat, namun lebih lemah jika dibandingkan dengan pembanding

asam askorbat yang mempunyai nilai IC50 52,40 μg/mL sedangkan dengan

menggunakan metode BCB menghasilkan IC50 348,74 μg/mL yang berarti

memiliki aktivitas antioksidan lemah dibanding dengan quercetin yang memiliki

aktivitas antioksidan kuat dengan IC50 70,05 μg/mL. Fraksi etil asetat daun

tembelekan mempunyai aktivitas antioksidan yang lebih kuat dengan metode

FRAP dibandingkan dengan metode BCB.

Kata Kunci: Lantana camara, Fraksi etil asetat, FRAP, BCB


xii

DETERMINATION OF TOTAL PHENOLIC CONTENT AND

ANTIOXIDANT ACTIVITIES OF ETHYL ACETATE FRACTION OF

TEMBELEKAN LEAVES (Lantana camara L.) USING FRAP (FERRIC

REDUCING ANTIOXIDANT POWER) AND BCB (β-CAROTENE

BLEACHING) ASSAY

Ayu Halida Arham1, Nunuk Aries Nurulita

2, Elza Sundhani

3

ABSTRACT

Oxidative stress is released freely as a result of major endogenous damage

to biological systems. Tembelekan plants (Lantana camara L.) contain phenolic

compounds that act as antioxidants that spread on leaves and roots. Secondary

metabolites contained in ethyl acetate fraction of tembelekan leaf are flavonoids,

alkaloids, tannins, steroids and terpenoids. This study aims to determine the

antioxidant activity and total phenolic content of ethyl acetate fraction of

tembelekan leaves. Antioxidant activity was carried out using the FRAP (Ferric

Reducing Antioxidant Power) and BCB (β-Carotene Bleaching) methods.

Determination of total phenolic levels by the Follin Ciocalceau method. Level

measurement using Uv-Vis Spectrophotometer instrument. Total phenolic content

of tembelekan leaf ethyl acetate fraction obtained was 85.16 ± 5.18 mg GAE / g

sample. The antioxidant activity with FRAP method resulted in IC50 value of

52.40 μg / mL which means that it has strong antioxidants, but worse when

compared ascorbic acid, which has an of IC50 value of 52.40 μg / mL. Whereas

using the BCB method produced IC50 348.74 μg / mL which means it has

antioxidant activity with quercetin which has strong antioxidant activity with

IC50 70.05 μg / mL. Tembelekan leaf ethyl acetate fraction has stronger

antioxidant activity according to FRAP method but not in BCB method.

Keyword: Lantana camara, Ethyl acetate fraction, FRAP, BCB


xiii

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL........................................................................................... i

HALAMAN PERNYATAAN ORISINALITAS ............................................... ii

HALAMAN PERSETUJUAN ........................................................................... iii

HALAMAN PENGESAHAN ............................................................................ iv

KATA PENGANTAR ....................................................................................... v

RIWAYAT HIDUP ............................................................................................ vii

MOTTO ............................................................................................................. viii

PERSEMBAHAN .............................................................................................. ix

LEMBAR PERSETUJUAN PUBLIKASI ......................................................... x

ABSTRAK ......................................................................................................... xi

ABSTRACK ........................................................................................................ xii

DAFTAR ISI ....................................................................................................... xiii

DAFTAR GAMBAR ......................................................................................... xv

DAFTAR TABEL .............................................................................................. xvi

DAFTAR LAMPIRAN ...................................................................................... xvii

BAB 1 PENDAHULUAN

A. Latar Belakang .................................................................................. 1

B. Rumusan Masalah ............................................................................. 2

C. Tujuan Penelitian .............................................................................. 3

D. Manfaat Penelitian ............................................................................ 3

BAB II TINJAUAN PUSTAKA

A. Hasil Penelitian Terdahulu ................................................................ 4

B. Landasan Teori .................................................................................. 5

1. Radikal Bebas ............................................................................. 5

2. Antioksidan ................................................................................. 6

3. FRAP (Ferric Reducing Antioxidant Power) .............................. 7

4. BCB (β-Carotene Bleaching) ...................................................... 7

5. Tembelekan ................................................................................. 7

C. Kerangka Konsep .............................................................................. 10

D. Hipotesis............................................................................................ 10


xiv

BAB III METODE PENELITIAN

A. Jenis dan Rancangan Penelitian ........................................................ 11

B. Variabel Penelitian ............................................................................ 11

C. Definisi Variabel Operasional ........................................................... 11

D. Waktu Penelitian ............................................................................... 12

E. Alat dan Bahan .................................................................................. 12

F. Tahapan Penelitian ............................................................................ 12

G. Analisis Data ..................................................................................... 17

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Identifikasi Tanaman .............................................................................. 18

B. Pembuatan Simplisia Daun Tembelekan ............................................... 18

C. Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Tembelekan ....................................... 19

D. Fraksinasi Ekstrak Etanol Daun Tembelekan dengan Etil Asetat .......... 20

E. Skrining Metabolit Sekunder ................................................................. 22

F. Penentuan Fenolik Total ........................................................................ 24

G. Penentuan Aktivitas Antioksidan Dengan Metode FRAP ..................... 27

H. Penentuan Aktivitas Antioksidan Dengan Metode BCB ....................... 31

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan ............................................................................................ 39

B. Saran ....................................................................................................... 39

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................ 40


xv

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 2.1. TanamanTembelekan diambil dari Baturaden-Banyumas

pada tanggal 28 September 2017 (dokumen pribadi) .................. 8

Gambar 2.2. Kerangka Konsep .......................................................................... 10

Gambar 4.1. Daun Tembelekan (Lantana camara L.) segar (a),

daun tembelekan yang telah kering (b) ........................................ 19

Gambar 4.2. Pembuatan Ekstrak Kental Daun Tembelekan ............................ 20

Gambar 4.3. Pembuatan Fraksi etil asetat daun tembelekan ........................... 21

Gambar 4.4. Hasil KLT ektrak etanol dan fraksi etil asetat daun tembelekan 23

Gambar 4.5. Reaksi asam galat dan natrium karbonat ..................................... 25

Gambar 4.6. reaksi asam galat dan reagen folin .............................................. 25

Gambar 4.7. Kurva konsentrasi (μg/mL)vs absorbansi asam galat ................. 26

Gambar 4.8. Reaksi reduksi ion besi (Fe3+

) dengan metode FRP .................... 28

Gambar 4.9. Kurva hubungan antara konsentrasi (μg/mL) vs %FRAP asam

askorbat (A) dan fraksi etil asetat daun tembelekan (B) .............. 29

Gambar 4.10. Grafik perubahan absorbansi selama waktu inkubasi pada

kontrol negatif, kontrol positif (quercetin) dan sampel ............... 33

Gambar 4.11. Kurva hubungan antara konsentrasi (μg/mL) vs Aktivitas

Antioksidan (%) Quercetin (A) dan sampel (B) ......................... 34

Gambar 4.12. Pembentukan Kompleks Logam pada Flavonoid (A),

Struktur dasar Flavonoid dan Proses peredaman radikal

bebas oleh flavonoid (B) ............................................................. 37

Gambar 4.13. Peredaman Radikal bebas oleh Alkaloid .................................... 38


xvi

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 4.1. Tabel randemen fraksi etil asetat daun tembelekan ........................... 22

Tabel 4.2. Hasil skrining metabolit sekunder ekstrak dan fraksi daun

tembelekan dengan menggunakan KLT dan pereaksi warna ............. 23

Tabel 4.3. Hasil penetapan kadar fenolik total .................................................... 27

Tabel 4.4. Hasil kadar AAE fraksi etil asetat daun tembelekan ........................ 30


xvii

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1. Tahapan Penelitian ....................................................................... 47

Lampiran 2. Hasil Determinasi Tanaman ......................................................... 48

Lampiran 3. Proses Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Tembelekan ................. 50

Lampiran 4. Perhitungan Randemen Ekstrak ................................................... 51

Lampiran 5. Pembuatan Fraksi etil asetat daun tembelekan ............................ 52

Lampiran 6. Perhitungan Randemen Fraksi ..................................................... 53

Lampiran 7. Optimasi Kromatografi Lapis Tipis (KLT) untuk Skrining

metabolit sekunder ....................................................................... 54

Lampiran 8. Perhitungan Seri Konsentrasi pada Penetapan Fenolik Total ....... 59

Lampiran 9. Dokumentasi Penetapan Fenolik Total ......................................... 62

Lampiran 10. Hasil Analisis Data Fenolik Total menggunakan

Spektrofotometer Uv-vis ............................................................... 63

Lampiran 11. Perhitungan Penetapan Kadar Fenolik Total ................................ 67

Lampiran 12. Perhitungan Seri Konsentrasi pada Uji FRAP ............................. 69

Lampiran 13. Dokumentasi Uji Antioksidan dengan Metode FRAP .................. 73

Lampiran 14. Hasil Analisis Data FRAP menggunakan Spektrofotometer

Uv-vis ............................................................................................ 74

Lampiran 15. Perhitungan Aktivitas Antioksidan dengan Metode FRAP ......... 77

Lampiran 16. Perhitungan Seri Konsentrasi pada Uji BCB ................................ 83

Lampiran 17. Dokumentasi Uji Antioksidan dengan Metode BCB .................... 87

Lampiran 18. Hasil Analisis Data BCB menggunakan Spektrofotometer

Uv-vis ............................................................................................ 88

Lampiran 19. Perhitungan Aktivitas Antioksidan dengan Metode BCB ............ 94


Documents

PENENTUAN KADAR FENOLIK TOTAL DAN AKTIVITAS …repository.ump.ac.id/8841/1/COVER.pdf · praktikum selama 4 tahun, suka duka, canda tawa, tetap kompak ya. Adik adik tingkat sekaligus