STERILISASI
Metode sterilisasiOLEH :NUR KHAIRI, S.Si, M.Si, Apt
PENGERTIANSteril : Keadaan/status dari bahan baku, alat,sediaan
yang bebas dari semua bentuk mikroba baik yang patogen maupun
nonpatogen termasuk sporanyaSterilisasi : Proses untuk menghasilkan
status steril (Lachman)Cara Sterilisasi : Cara membunuh dan atau
meniadakan mikroba patogen maupun nonpatogen termasuk
sporanyaMETODE STERILISASIDibedakan dalam 3 kelas :Cara fisikaCara
KimiaCara mekanikCARA FISIKAPemanasan keringPemanasan basah atau
dengan uap airRadiasiCARA FISIKAPemanasan keringPrinsip : Mikroba
mengalami dehidrasi (pengeringan) selanjutnya teroksidasi oleh
udaraTerdiri dari :(1) Pemijaran (2) Udara panasPEMIJARANDigunakan
untuk alat yang tahan terhadap pemijaranSuhu 500-600oCJarang
digunakan karena sering terjadi perbedaan suhu pada bagian-bagian
alat (pemanasan yang tidak merata)
UDARA PANASMenggunakan ovenPrinsip : Mikroba mula-mula mengalami
dehidrasi hingga kering, kemudian dalam waktu berikutnya
teroksidasi oleh oksigen dari udaraSuhu dan waktu sterilisasi
SuhuWaktu260oC200oC180oC160oC140oCSelama 45 menitSelama 60
menitSelama 2 jamSelama 1 - 2 jamSelama 3 jam
UDARA PANASLama sterilisasi tergantung 3 hal :Penambahan waktu
pemanasan dari ruang sterilisator dan banyaknya bahan yang
disterilkan, diasumsikan sebagai awal pada suhu kamarLamanya
periode pada suhu maksimalWaktu pendinginan
PEMANASAN BASAHPrinsip : Membunuh mikroba dengan cara
mengkoagulasi atau denaturasi protein penyusun tubuh mikrobaTerdiri
dari :1. Air mendidih2. Uap air dengan tekanan3. Cara lain
AIR MENDIDIHMampu membunuh mikroba dengan cepat terutama bentuk
vegetatifnya , bentuk sporanya tahan terhadap air mendidih Waktu
sterilisasi kurang lebih 95 menitUAP AIR DENGAN TEKANANDikenal
sebagai cara autoklavasi/autoclaving menggunakan alat
autoklavPrinsip : Apabila air dipanaskan hingga mendidih pada
tekanan atmosfer biasa, kemudian ditutup dan pemanasan dilanjutkan
maka uap air akan meningkat panasnya dan airpun akan mendidih
diatas suhu normalnyaUAP AIR DENGAN TEKANANvolume dan waktu
sterilisasi (The Art of Componding )
WadahWaktu100-200 ml5 menit500 ml10 15 menit1000 ml15 20
menitUAP AIR DENGAN TEKANANWandi (1972)
Bentuk/Volume wadahKeadaan dindingWkt PenyesuaianErlenmeyer 1000
mlAmpul 10 mlBotol 100 mlBotol 250 mlBotol 500 mlBotol 1000
mlTipisTipisTipisTipisTipisTipis10 menit2-3 menit10 menit15 menit20
menit22 menitUap air dengan tekananHal-hal yang perlu
diperhatikanWaktu pemanasan permulaan, yaitu waktu untuk memanaskan
autoklaf dari 100oC menjadi 120oC atau 100oC menjadi 121 oCWaktu
sterilisasi sebenarnya, misalnya 120 selama 20 menitWaktu pelepasan
panas, terlalu cepat temperatur turun kadang-kadang menyebabkan
suatu sterilisasi kurang sempurna UAP AIR DENGAN TEKANANWaktu
penyesuaian panas tergantung pada berbagai faktor :Pengisian ruang
sterilisatorPembentukan intensitas uap panasKetebalan dan macam
dinding wadah yang hendak disterilkan, waktu dapat berbeda jauh
tergantung dari perbedaan daya penerusan panas dinding tersebutDaya
penerusan panas dan isi benda-benda yang hendak disterilkanBanyak
sedikitnya benda/bahan yang akan disterilkanKonstruksi sterilisator
dan benda-benda yang akan disterilkanCARA LAINTindalisasiMemasak
dengan bakterisidaPasteurisasiTINDALISASITidak dapat dikategorikan
sterilisasi, karena tidak diperoleh derajat steril yang
ditetapkanSuhu 80-100oCDilakukan beberapa hari/berulangDasarnya :
pada saat dibiarkan semalam, spora sempat berubah menjadi bentuk
vegetatif yang apabila disterilkan berikutnya dapat
dibunuhKenyataannya ada spora yang lama baru berubah menjadi bentuk
vegetatifnya, sehingga memungkinkan bentuk inilah yang belum sempat
dibunuhMEMASAK DENGAN BAKTERISIDADasar : memasak selama 30 menit
dengan penambahan bakterisida. Misalnya diberikan klorkresol atau
fenil merkuri nitrat PASTEURISASIBukan merupakan cara sterilisasi.
Dimaksudkan hanya untuk membunuh mikroba patogen pada waktu memasak
susu tanpa merusak rasa enak dari susuPemanasan 62,6oC selama 30
menitPemanasan 71,6oC selama 15 menitRADIASIDibagi atas 2 kelompok
:Gelombang elektromagnetik Arus partikel kecil
Prinsip : Radiasi menembus dinding sel dan langsung mengenai DNA
dari inti sel, sehingga mikroba mengalami mutasi dan akhirnya
matiSTERILISASI GASSterilisasi gas didefenisikan sebagai destruksi
semua mikroorganisme dengan suatu bahan kimia dalam bentuk gas atau
uapPrinsip : bahan kimia berupa gas (formaldehid dan etilen
oksida), gugus NH2, CCOH yang ada dalam proten-protein mengadisi
gugus tersebut sehingga protein mengalami kerusakan sehingga
mikroba tidak dapat berkembang biak dan akhirnya mati STERILISASI
GASContoh : makanan, kapas, wol, plastik, alat-alat laboratorium
dan obat-obat seperti antibiotikGas yang biasa digunakan : etilen
oksida, formaldehida, propilen oksida, beta propiolakton, ozon,
kloprokrin dan metil bromidaSTERILISASI MEKANISSterilisasi ini
mikroba tidak terbunuh akan tetapi disingkirkan atau ditahan oleh
filter bakteri Sehingga sterilisasi ini sangat cocok untuk bahan
yang tidak tahan sterilisasi dengan pemanasan.Sterilisasi ini hanya
digunakan untuk sterilisasi larutan sediaanSTERILISASI
MEKANISSebelum digunakan filter bakteri disterilkan dengan
pemanasan kering 170oC atau dengan autoclavBeberapa filter yang
sering digunakan :1. filter sertz2. filter porselen3. filter gelas
sinterSterilisasi Filtrasi
Sterilisasi bahanSenyawa turunan sulfa : disterilkan secara
kering pada suhu 155oC selama 1 jam. Talk, kaolin, bismut subnitrat
disterilkan dengan cara kering pada suhu 170oC selama 1
jamSterilisasi alatBotol, labu, labu takar dan alat gelas terlebih
dahulu dicuci dengan air bebas pirogen, biarkan sedikit air tersisa
dalam wadah. Mulut wadah harus ditutup dengan bahan yang tembus uap
air misalnya, selofan atau kapas yang dibungkus dengan kain kasa.
Kemudian dimasukkan dalam autoclav dengan posisi terbalik dan
disterilkan pada suhu 121oC selama 15 menitSterilisasi karetTutup
karet atau alat lainnya terbuat dari karet dapat disterilkan dengan
autoclav pada suhu 121oC selama 20 menit. Tutup karet dapat pula
disterilkan dengan mendidihkan selama 30 menit dengan penambahan 2
persen fenol, bila tanpa fenol waktunya selama 60 menitTERIMA
KASIH
