of 32 /32
Diego Piedrahita MVZ – MSc - PhD Población de roedores en zonas aledañas a granjas porcícolas como fuente potencial de enfermedades Zoonóticas

Presentación de PowerPoint - asociados.porkcolombia.co · Leptospira spp Rattus norvegicus UK Rural Ziehl-Nielsen Cryptosporidium parvum Rattus norvegicus UK Granjas Porcinas IFAT

Embed Size (px)

Text of Presentación de PowerPoint - asociados.porkcolombia.co · Leptospira spp Rattus norvegicus UK...

  • Diego Piedrahita MVZ MSc - PhD

    Poblacin de roedores en zonas aledaas a granjas porccolascomo fuente potencial de enfermedades Zoonticas

  • Poblacin de roedores en zonas aledaas a granjas porccolascomo fuente potencias de enfermedades Zoonticas

    JUSTIFICACIN2

    AGENTES DE INTERS 3

    MATERIALES Y MTODOS4

    RESULTADOS PARCIALES5

    PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA1

  • Planteamiento del problema

    Estatus de algunas enfermedades en Colombia?

    Es necesario determinar la presencia de enfermedades

    zoonticas presentes en roedores de granjas porcinas

  • Justificacin

    Backhans et al., 2012

    Patgeno

    estudiado

    Especie de

    roedorPas Localizacin Mtodo

    Leptospira spp Rattus norvegicus UK Rural Ziehl-Nielsen

    Cryptosporidium

    parvum

    Rattus norvegicus UK Granjas Porcinas IFAT

    Listeria spp Rattus norvegicus UK Rural Cultivo

    Trichinella spiralis Rattus rattus Croacia Granjas porcinas Digestin enzimtica

    Toxoplasma gondii Rattus rattus Holanda Granjas porcinas PCR TaqMan

    Toxoplasma gondii Mus musculus, Rattus

    norvegicus

    EE.UU Granjas porcinas MAT

    Hantavirus Rattus norvegicus Ucrania Rural ELISA

  • Trichinellaspp.

    ETA

    Reemergente

    Toxoplasma gondii

    Protozoario

    Intracelular

    Leptospiraspp

    Espiroqueta

    Patgena

    Reservorio y

    transmisor de

    enfermedades. Backans et al, 2012

    Justificacin

  • Trichinella spp.

    ETA

    Salud Pblica

    33% en animales silvestres

    27% en Humanos y 21% en

    cerdos

    Presentacin en 26,8% de

    los pases

    Suramrica: Chile,

    Argentina, Uruguay, Islas

    Bahamas

    (Pozio, 2007)Lpez et al., 2014

    Colombia libre deTrichinella?

  • Toxoplasma gondii

    Protozoo Intracelular

    obligado.

    Animales de sangre

    caliente.

    Graves prdidas

    econmicas.

    40% de prevalencia a nivel

    mundial (Dubey, 2004)

    Colombia 47% (1982)

    2008: entre 3,7 y el 89.2 %

    2015: 43% por PCR. En

    carne.

  • Leptospira spp

    Bacteria que se caracteriza por

    su flexibilidad, motilidad y forma.

    Especies:

    L. interrogans: cepas patgenas

    L. biflexa: cepas saprfitas,

    aisladas del medio ambiente.

    Existen ms de 225 serovares

    http://muyensalud.com/2015/11

    http://muyensalud.com/2015/11
  • Justificacin

    Programa nacional integral e integrado de

    zoonosis.

    Incremento consumo de la carne de cerdo

    en Colombia y el mundo.

    Calidad e inocuidad mercado interno y

    externos.

    TLC con diferentes pases.

    Evaluacin de Factores de riesgo para

    entidades zoonticas

    PROPUESTA PARA EL MEJORAMIENTO DEL ESTATUS SANITARIO Y ASEGURAMIENTO DE LA INOCUIDAD DE LA PRODUCCIN PORCINA EN COLOMBIA

    https://www.google.com.co/search?q

    CONPES 3458 de 2007

  • Pregunta de investigacin

    La poblacin de roedores que conviven en zonas

    aledaas a sistemas de produccin porcina de

    Colombia estn infectadas con Trichinella spp,

    Toxoplasma gondii y Leptospira spp ?

  • Objetivo generalDeterminar la presencia y caracterizacin molecular para

    Trichinella spp, Toxoplasma gondii y Leptospira en

    roedores capturados en zonas aledaas a granjas de

    produccin porcina en Colombia

  • Presupuesto

  • MetodologaLaboratorio de parasitologa especial

  • Materiales y mtodos

    Donde:

    N = Total de la poblacin.

    Z = 1.96 al cuadrado (si la seguridad es del 95%)

    p = Proporcin esperada

    q = 1 p

    d = Precisin

    (Thrusfield, 2005)

  • Materiales y mtodos

    Departamento Nmero de granjas Nmero de roedores

    Antioquia 38 333

    Cundinamarca 13 142

    Valle del Cauca 7 34

    Eje Cafetero 6 31

    Meta 2 15

    Total 66 555

    Captura de roedores en zonas aledaas a granjas de produccin porcina en

    Colombia por departamento junio - diciembre de 2015.

    Materiales y mtodos

  • Materiales y mtodos

    Captura de Roedores y Toma de Muestras

    file://localhost/Users/diegopiedrahita/Desktop/PRESENTACION PORCIAMERICA 2016/PORCIAMERICA 2016.mp4
  • 555 roedores

    Trichinellaspp.

    Digestin enzimtica

    PCR Mltiplex

    Toxoplasma gondii

    ELISA

    Extendido cerebral

    PCR cerebros

    Leptospiraspp.

    MAT

    8 serotipos

    PCR

    Patgenas

    Saprfitas

    Identificacin

    Polop et al, 2011

    Secuenciacin

    Materiales y mtodos

  • Deteccin de Trichinella spp

    Diagnstico de Trichinella

    Digestin enzimtica demsculo

    Istituto superiore di sanit

    Universidad de Antioquia

    PCR

    (Controles: T. murrelli, T. 6, T. pseudospiralis, T. spiralis, T. nativa,

    T. patagoniensis, )

    Gen ITSI, ITSII, ESV

    Chaparro, 2013

    ISS Roma, Italia & Unidad de Diagnstico UdeA, 2014

  • Tcnicas - Toxoplasma gondii

    Serologa

    ELISARat ELISA Kit - LS-F10245, Bioscience, empleando entre

    50 -100 L de suero de roedor dilucin 1:10

    Extendido cerebrales

    Tcnica de tincin con

    Giemsa

    Prueba molecular

    PCR Amplificacin del gen B1

  • Tcnicas para Leptospira

    World organization for animal health, 2014

    L. in

    terr

    oga

    ns

    MAT suero de roedor

    Icterohaemorrhagiae

    Pomona

    Tarasovi

    Autumnalis

    Ballum

    Cancola

    Grippotyphosa

    Bratislava

    PCR Tejido Renal

    Amplificacin del gen 16S rRNA

    Amplificacin del gen Lipl32

  • Las muestras positivas para Trichinella spp,

    Toxoplasma gondii y Leptospira spp se enviarn

    a secuenciar a MACROGEN - korea.

    Mtodo de Sanger modificado

    Anlisis filogentico: DNA star, Mega 6.0

    Secuenciacin

  • RESULTADOS

  • Resultados

    Trichinella spp.

    100% Negativo

    Toxoplasma gondii

    Positivo:

    69.4% (385/555)

    Leptospira spp

    Positivo: 29,4% (163/555)

    4.5% (25/163) Patgenas

    24.9% (138/163) Saprfitas

    555 roedores

    Edad

    Adulto 434 (78.2%)

    Juvenil 121 (21.8%)

    Especie

    R. norvegicus410 (73.9%)

    R. Rattus

    145 (26.1%)

    Gnero

    Hembra 324 (58,4%)

    Macho 231 (41.6%)

  • DEPARTAMENTO NMERO DE MUESTRAS RESULTADO DIGESTIN

    ENZIMTICA

    Antioqua 559 Negativo

    Cundinamarca 181 Negativo

    Valle del Cauca 176 Negativo

    Atlntico 32 Negativo

    Risaralda 16 Negativo

    Caldas 16 Negativo

    Eje Cafetero 16 Negativo

    Santander 8 Negativo

    Meta 30 Negativo

    Nario 16 Negativo

    Choc 16 Negativo

    Huila 8 Negativo

    Tolima 10 Negativo

    TOTAL MUESTRAS 1084 100% NEGATIVAS

    Resultados - Trichinella

  • 21%

    79%

    RESULTADO DE SEROPOSITIVIDAD A LEPTOSPIRA PATGENAS POR LA TCNICA DE MAT

    Positivo

    Negativo

    Resultados - Leptospira

    Serologa

  • Resultados - Leptospira

    15314 28

    122 21

    681 5

    13 1

    Meta Antioquia Valle del Cauca Cundinamarca Eje Cafetero

    MUESTRAS POSITIVAS A SEROVARES PATGENOS DE LEPTOSPIRA POR LA TCNICA DE MAT

    Total Muestras Muestras Positivas

    Serologa

  • 27%

    16%

    12%

    11%

    10%

    9%

    8%

    7%

    PORCENTAJE DE ANIMALES POSITIVOS A SEROVARES DE LEPTOSPIRA PATGENAS POR LA TCNICA DE MAT

    L. Icterohaemorrhagiae

    L. Cancola

    L. Trassovi

    L. Pomona

    L. Grippotyphosa

    L. Bratislava

    L. Ballum

    L. Autumnalis

    Resultados - Leptospira

    Serologa

  • Resultados - Leptospira

    PCR

    4%

    27%

    69%

    RESULTADO DE LEPTOSPIRA POR PCR

    Positivo L. Patgena

    Positivo L. Saprfita

    Negativo

  • Resultados - Leptospira

    7,16,7

    4,8

    3,3

    0,00,0

    1,0

    2,0

    3,0

    4,0

    5,0

    6,0

    7,0

    8,0

    Valle del Cauca Meta Antioquia Cundinamarca Eje Cafetero

    PORCENTAJE DE POSITIVIDAD POR PCR A LEPTOSPIRA PATGENA POR ZONA MUESTREADA

    PCR

  • Anlisis de secuencias de Leptospira.

    PCR Toxoplasma gondii.

    Secuenciacin T. gondii

  • Agradecimientos

    Ministerio de Agricultura y desarrollo Rural

    Asociacin Colombiana de Porcicultores-FNP

    Dra. Jenny Chaparro

    Dra. Diana Corina Zambrano

    Estudiante de Maestra Anderson Lpez

    Universidad de Antioquia: Unidad de diagnstico; Laboratorio de Parasitologa

    Especial

    Laboratorio de Referencia de Parsitos de Europa

    Granjas Porccolas

    Rotantes, auxiliares y contratistas del laboratorio de parasitologa y

    microbiologa de la Escuela de veterinaria Universidad de Antioquia