Diego Piedrahita MVZ MSc - PhD

Poblacin de roedores en zonas aledaas a granjas porccolascomo fuente potencial de enfermedades Zoonticas

Poblacin de roedores en zonas aledaas a granjas porccolascomo fuente potencias de enfermedades Zoonticas

JUSTIFICACIN2

AGENTES DE INTERS 3

MATERIALES Y MTODOS4

RESULTADOS PARCIALES5

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA1

Planteamiento del problema

Estatus de algunas enfermedades en Colombia?

Es necesario determinar la presencia de enfermedades

zoonticas presentes en roedores de granjas porcinas

Justificacin

Backhans et al., 2012

Patgeno

estudiado

Especie de

roedorPas Localizacin Mtodo

Leptospira spp Rattus norvegicus UK Rural Ziehl-Nielsen

Cryptosporidium

parvum

Rattus norvegicus UK Granjas Porcinas IFAT

Listeria spp Rattus norvegicus UK Rural Cultivo

Trichinella spiralis Rattus rattus Croacia Granjas porcinas Digestin enzimtica

Toxoplasma gondii Rattus rattus Holanda Granjas porcinas PCR TaqMan

Toxoplasma gondii Mus musculus, Rattus

norvegicus

EE.UU Granjas porcinas MAT

Hantavirus Rattus norvegicus Ucrania Rural ELISA

Trichinellaspp.

ETA

Reemergente

Toxoplasma gondii

Protozoario

Intracelular

Leptospiraspp

Espiroqueta

Patgena

Reservorio y

transmisor de

enfermedades. Backans et al, 2012

Justificacin

Trichinella spp.

ETA

Salud Pblica

33% en animales silvestres

27% en Humanos y 21% en

cerdos

Presentacin en 26,8% de

los pases

Suramrica: Chile,

Argentina, Uruguay, Islas

Bahamas

(Pozio, 2007)Lpez et al., 2014

Colombia libre deTrichinella?

Toxoplasma gondii

Protozoo Intracelular

obligado.

Animales de sangre

caliente.

Graves prdidas

econmicas.

40% de prevalencia a nivel

mundial (Dubey, 2004)

Colombia 47% (1982)

2008: entre 3,7 y el 89.2 %

2015: 43% por PCR. En

carne.

Leptospira spp

Bacteria que se caracteriza por

su flexibilidad, motilidad y forma.

Especies:

L. interrogans: cepas patgenas

L. biflexa: cepas saprfitas,

aisladas del medio ambiente.

Existen ms de 225 serovares

http://muyensalud.com/2015/11

http://muyensalud.com/2015/11

Justificacin

Programa nacional integral e integrado de

zoonosis.

Incremento consumo de la carne de cerdo

en Colombia y el mundo.

Calidad e inocuidad mercado interno y

externos.

TLC con diferentes pases.

Evaluacin de Factores de riesgo para

entidades zoonticas

PROPUESTA PARA EL MEJORAMIENTO DEL ESTATUS SANITARIO Y ASEGURAMIENTO DE LA INOCUIDAD DE LA PRODUCCIN PORCINA EN COLOMBIA

https://www.google.com.co/search?q

CONPES 3458 de 2007

Pregunta de investigacin

La poblacin de roedores que conviven en zonas

aledaas a sistemas de produccin porcina de

Colombia estn infectadas con Trichinella spp,

Toxoplasma gondii y Leptospira spp ?

Objetivo generalDeterminar la presencia y caracterizacin molecular para

Trichinella spp, Toxoplasma gondii y Leptospira en

roedores capturados en zonas aledaas a granjas de

produccin porcina en Colombia

Presupuesto

MetodologaLaboratorio de parasitologa especial

Materiales y mtodos

Donde:

N = Total de la poblacin.

Z = 1.96 al cuadrado (si la seguridad es del 95%)

p = Proporcin esperada

q = 1 p

d = Precisin

(Thrusfield, 2005)

Materiales y mtodos

Departamento Nmero de granjas Nmero de roedores

Antioquia 38 333

Cundinamarca 13 142

Valle del Cauca 7 34

Eje Cafetero 6 31

Meta 2 15

Total 66 555

Captura de roedores en zonas aledaas a granjas de produccin porcina en

Colombia por departamento junio - diciembre de 2015.

Materiales y mtodos

Materiales y mtodos

Captura de Roedores y Toma de Muestras

file://localhost/Users/diegopiedrahita/Desktop/PRESENTACION PORCIAMERICA 2016/PORCIAMERICA 2016.mp4

555 roedores

Trichinellaspp.

Digestin enzimtica

PCR Mltiplex

Toxoplasma gondii

ELISA

Extendido cerebral

PCR cerebros

Leptospiraspp.

MAT

8 serotipos

PCR

Patgenas

Saprfitas

Identificacin

Polop et al, 2011

Secuenciacin

Materiales y mtodos

Deteccin de Trichinella spp

Diagnstico de Trichinella

Digestin enzimtica demsculo

Istituto superiore di sanit

Universidad de Antioquia

PCR

(Controles: T. murrelli, T. 6, T. pseudospiralis, T. spiralis, T. nativa,

T. patagoniensis, )

Gen ITSI, ITSII, ESV

Chaparro, 2013

ISS Roma, Italia & Unidad de Diagnstico UdeA, 2014

Tcnicas - Toxoplasma gondii

Serologa

ELISARat ELISA Kit - LS-F10245, Bioscience, empleando entre

50 -100 L de suero de roedor dilucin 1:10

Extendido cerebrales

Tcnica de tincin con

Giemsa

Prueba molecular

PCR Amplificacin del gen B1

Tcnicas para Leptospira

World organization for animal health, 2014

L. in

terr

oga

ns

MAT suero de roedor

Icterohaemorrhagiae

Pomona

Tarasovi

Autumnalis

Ballum

Cancola

Grippotyphosa

Bratislava

PCR Tejido Renal

Amplificacin del gen 16S rRNA

Amplificacin del gen Lipl32

Las muestras positivas para Trichinella spp,

Toxoplasma gondii y Leptospira spp se enviarn

a secuenciar a MACROGEN - korea.

Mtodo de Sanger modificado

Anlisis filogentico: DNA star, Mega 6.0

Secuenciacin

RESULTADOS

Resultados

Trichinella spp.

100% Negativo

Toxoplasma gondii

Positivo:

69.4% (385/555)

Leptospira spp

Positivo: 29,4% (163/555)

4.5% (25/163) Patgenas

24.9% (138/163) Saprfitas

555 roedores

Edad

Adulto 434 (78.2%)

Juvenil 121 (21.8%)

Especie

R. norvegicus410 (73.9%)

R. Rattus

145 (26.1%)

Gnero

Hembra 324 (58,4%)

Macho 231 (41.6%)

DEPARTAMENTO NMERO DE MUESTRAS RESULTADO DIGESTIN

ENZIMTICA

Antioqua 559 Negativo

Cundinamarca 181 Negativo

Valle del Cauca 176 Negativo

Atlntico 32 Negativo

Risaralda 16 Negativo

Caldas 16 Negativo

Eje Cafetero 16 Negativo

Santander 8 Negativo

Meta 30 Negativo

Nario 16 Negativo

Choc 16 Negativo

Huila 8 Negativo

Tolima 10 Negativo

TOTAL MUESTRAS 1084 100% NEGATIVAS

Resultados - Trichinella

21%

79%

RESULTADO DE SEROPOSITIVIDAD A LEPTOSPIRA PATGENAS POR LA TCNICA DE MAT

Positivo

Negativo

Resultados - Leptospira

Serologa

Resultados - Leptospira

15314 28

122 21

681 5

13 1

Meta Antioquia Valle del Cauca Cundinamarca Eje Cafetero

MUESTRAS POSITIVAS A SEROVARES PATGENOS DE LEPTOSPIRA POR LA TCNICA DE MAT

Total Muestras Muestras Positivas

Serologa

27%

16%

12%

11%

10%

9%

8%

7%

PORCENTAJE DE ANIMALES POSITIVOS A SEROVARES DE LEPTOSPIRA PATGENAS POR LA TCNICA DE MAT

L. Icterohaemorrhagiae

L. Cancola

L. Trassovi

L. Pomona

L. Grippotyphosa

L. Bratislava

L. Ballum

L. Autumnalis

Resultados - Leptospira

Serologa

Resultados - Leptospira

PCR

4%

27%

69%

RESULTADO DE LEPTOSPIRA POR PCR

Positivo L. Patgena

Positivo L. Saprfita

Negativo

Resultados - Leptospira

7,16,7

4,8

3,3

0,00,0

1,0

2,0

3,0

4,0

5,0

6,0

7,0

8,0

Valle del Cauca Meta Antioquia Cundinamarca Eje Cafetero

PORCENTAJE DE POSITIVIDAD POR PCR A LEPTOSPIRA PATGENA POR ZONA MUESTREADA

PCR

Anlisis de secuencias de Leptospira.

PCR Toxoplasma gondii.

Secuenciacin T. gondii

Agradecimientos

Ministerio de Agricultura y desarrollo Rural

Asociacin Colombiana de Porcicultores-FNP

Dra. Jenny Chaparro

Dra. Diana Corina Zambrano

Estudiante de Maestra Anderson Lpez

Universidad de Antioquia: Unidad de diagnstico; Laboratorio de Parasitologa

Especial

Laboratorio de Referencia de Parsitos de Europa

Granjas Porccolas

Rotantes, auxiliares y contratistas del laboratorio de parasitologa y

microbiologa de la Escuela de veterinaria Universidad de Antioquia