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ÁREA DE SUSTENTABILIDAD PARA EL DESARROLLO

PROGRAMA ACADÉMICO DE QUÍMICA

ESPECIALIDAD TECNOLOGIA AMBIENTAL

GRUPO

QU-301

MATERIA

MICROBIOLOGIA AMBIENTAL

TITULO

AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS

DE LA MATRIZ AMBIENTAL: _____Agua____

ASESORA

Dr. ROSA RICO MATA

DATOS DE IDENTIFICACIÓN DE LOS ANALISTAS

Fecha de inicio del análisis: 1 de julio de 2015

Fecha de término: 13 de julio de 2015

Nombre Cargo González Sánchez Carla Valeria Responsable

Mireles Villasana Alejandra Administrador

Cruz Romo Diana Laura Laboratorista 1

Pérez Gómez Cynthia Sarai Laboratorista 2

Gaona Aboytes María Alejandra Laboratorista 3

GENERACIÓN: 2014-2016

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DATOS DEL SITIO EN ESTUDIO

1.- Breve descripción del estatus ambiental del sitio de estudio: Zona utilizada por bañistas que acuden a los estanques de aguas termales que se encuentran en la zona baja de la escorrentía. Las personas que habitan en las zonas aledañas a las emanaciones de aguas termales las usan para lavar ropa utilizando detergentes y blanqueadores que alteran la composición natural de dichas aguas. En la zona de estudio deambulan perros, ganado vacuno y algunos caballos. Se encuentra un balneario por donde hay escorrentía de aguas termales naturales. También se encuentra aledaño a la zona, el hotel Misión Comanjilla.

SITIO DE MUESTREO

Nombre Ubicación /coordenadas GPS Imagen de mapa satelital

Aguas termales de comanjilla

Municipio delegación León Gto. Lat. 21.081300 Ing. 101.473073

2. Evidencia fotográfica del sitio

Fecha:Viernes 3 de julio del 2015Hora:8:13:08am Fecha:Viernes 3 de julio del 2015Hora:8:17:03 am

DATOS DE LAS MUESTRAS A ANALIZAR

1. Identificación

Matriz ambiental:Agua Hora de toma de muestra:7:52 am Hora de siembra:2:05 pm

Punto de Muestreo (ubicación /coordenadas GPS): Lat. 21.081300 Ing. 101.473073

Tiempo de exposición (aplica solo para muestra de aire)

Nombre del/ los analistas que tomaron la muestra: Rosa Rico Mata y Miguel Medrano Santillana

Nombre del/ los analistas que sembró la muestra: Cruz Romo Diana Laura Gaona Aboytes María Alejandra

2.Parámetros Fisicoquímicos

Color: Sin color(Transparente) Temperatura (oC) ambiental: 60°C pH: 7.2

Olor: Ligeramente Azufrado. Describir condiciones climatológicas: Nubloso, soleado sin viento.

3. Evidencia fotográfica del sitio de toma de muestra

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AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS

1. Justificación del proceso para la identificación bacteriana

El proceso de la identificación de bacterias comienza con las pruebas bioquímicas, las cuales son un conjunto de reacciones que determinan la actividad metabólica de las bacterias, a partir de un sustrato que se incorpora en un medio de cultivo y que la bacteria al crecer transforma o no, así como también la presencia o ausencia de la fermentación y realizando este proceso se realiza la identificación de bacterias pero para ello, hay que partir de un cultivo puro obtenido en el aislamiento, resembrado de una colonia bien aislada.

2. Dos medios de siembra (Nombre y Composición)

(1) Violeta rojo y bilis agar Receta: Extracto de levadura……3.0 Peptona……………………...7.0 Sales biliares…………….….1.5 Dextrosa…………………..…1.0 Lactosa………………….….10.0 Cloruro de sodio………...5.0 Rojo neutro………………..0.03 Cristal violeta……..……..0.002 Agar………………………….15.0

Morfología Colonial (Medio 1) Morfología Colonial (Medio 2)

Descripción En este medio se observan como colonias de color rojo púrpura, azul intenso de 1 a 2 mm de diámetro, rodeadas, generalmente, de una zona rojiza de bilis precipitada. Con un borde redondo y regulares y pequeñas y grandes colonias puntiformes en donde crecen juntas y separadas como también crecimiento plano de las bacterias.

Descripción

Es un medio se observan las colonias son puntiformes de forma circular de diferentes tamaños: grande, mediano y pequeñas en el que presentan un color blanco a crema hasta incoloras crecimiento de pequeñas colonias planas y punteadas.

Imagen

Imagen

(2) Agar para métodos estándar

Receta:

Peptona de caseína…..............5.0

Extracto de levadura...............2.5

Agar Bacteriológico………..……15.0

pH 7.0 ± 0.2

pH 7.0 ± 0.2

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3. Dos Medios selectivos de resiembra (Nombre y composición)

(1) Agar bilisyrojo violeta

Composición: Extracto de levadura…..3.0 Peptona………………………7.0 Sales biliares……………….1.5 Lactosa……………………….10.0 Cloruro de sodio………..…5.0 Rojo neutro………………..0.03 Cristal violeta……….…..0.002 Agar………………………….15.0

(2) BD Macconkey II Agar composición: Peptona gelatina…………………17.0g Peptona caseína………………..….1.5g Peptona de tejido animal……...1.5g Lactosa ……………………………...10.0g Sales biliares………………………….1.5g Cloruro de sodio……………….…..5.0g Rojo neutro……………………..….0.03g Cristal violeta………………….…0.001g Agar……………………………..........13.5g

Morfología Colonial (Medio 1) Morfología Colonial (Medio 2)

Descripción

En este medio se observan de color rojo púrpura o hasta llegar a un color rosa de 1 a 2 mm de diámetro, rodeadas, generalmente, de una zona rojiza de bilis precipitada con un borde redondo y puntiformes como mucosas crecimiento plano y redondo su color puede ser también un azul intensó y bordes regulares.

Descripción Este medio se observan colonias de color rojo turbio rodado pero un poco mucoso y a veces se presentan incoloros o trasparentes con su forma de crecimiento puntiforme y planoconvexa crecimiento de colonias pequeñas regulares o bacterias separadas mostrando un color rosa o color purpura con un tamaño mediano de forma redondas y puntiformes y un poco mucosas.

Imagen

Imagen

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4. Procedimiento de Aislamiento (describir detalladamente la cantidad de materiales y los pasos a seguir)

Materiales/Reactivos/Medios de cultivo/ Equipo a utilizar Material 2 cajas Petri. 1 matraz Erlenmeyer de 250 ml. 1 charola de pesado. 1 espátula. 1 pizeta. 1 mechero de bunsen. Equipo de rotulación. Agua de ionizada. 1 probeta de 100ml. 1Membrana s-pak 0.45 µm 47 mm blanca cuadriculada. Pinzas de acero. Soporte magnético para Filtros. Equipo para esterilizar (algodón, papel destreza gasas y papel aluminio). Preparación de medios de cultivo:

1. Pesar exactamente 2.49g de agar de bilis y rojo violeta en la balanza analítica con ayuda de una charola de pesado y espátula.

2. Diluir a 60 ml con agua des ionizada y vértela a un matraz Erlenmeyer de 250ml

3. Agitar el matraz Erlenmeyer y colocarle su tapón previamente hecho por nosotras y encima del tapón poner una capa de aluminio.

4. Envolver las cajas Petri con papel destroza.

5. Llevar el agar previamente preparado y las cajas Petri envueltas, al autoclave a 121ºC por 15 minutos para ser esterilizadas

6. Saliendo de la esterilización dejar enfriar un poco y verter aproximadamente 30mL a cada una de las cajas Petri dentro de la campana de flujo laminar ya que permiten obtener una zona de trabajo con ambiente ultra limpio y estéril.

7. Dejar gelificar el agar etiquetar las cajas y llevarlas al refrigerador. Pasos para el aislamiento del microorganismos (siembra, selección de la colonia y resiembra): Siembra por membrana

1. Utilizar un equipo de filtración en campana de flujo laminar previamente preparada para condiciones

de esterilidad.

2. Limpiar con agua des ionizada la superficie del porta filtros.

3. Colocar un filtro de membrana estéril sobre el soporte con la ayuda de unas pinzas de acero.

Medio de cultivo

Agar de bilis y rojo violeta

Equipo

Autoclave.

Incubadora.

Balanza analítica.

Campana de flujo laminar.

Bomba de vacío.

Colector de Aluminio para

embudos de filtrado.

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4. Situar un embudo sobre el soporte hasta que esté fijo.

5. Verter la muestra de agua en el embudo (7ml) y aplicar el vacío hasta que el líquido se haya filtrado.

6. Romper el vacío y extraer el embudo. Con las pinzas se extrae la membrana del soporte.

7. Se coloca la membrana dentro de una caja Petri sobre el medio de cultivo Agar de bilis y rojo violeta,

con la cuadricula hacia arriba, procurando que no se formen burbujas entre la membrana y el medio de

cultivo.

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8. Las placas con la membrana cuadriculada se llevan a incubar sin invertir en la estufa.

NOTA: no se puede invertir la caja Petri con la membrana ya que esta se caería.

Resiembra estriada por cuadrantes.

1. Dividir la par te inferior de la placa Petri en 4 secciones con un marcador permanente

2. Flamear el asa hasta que quede de color rojo intenso

3. Tomar con el asa bacteriológica al microrganismo o bacteria que obtuvo en la siembra que se realizó

anteriormente por membrana para después hacer una serie de estrías en un lado de la caja con

movimientos rápidos de la mano.

Nota:( tener cuidado de no rasgar el agar al momento de hacer el estriado.)

4. Trabajar en sentido a las manecillas del reloj llevando los microorganismos de un cuadrante a otro.

5. Flamear el asa bacteriológica y del último punto del estriado, estriar el siguiente cuadrante con

movimientos rápidos de la mano

6. Seguir con los demás cuadrantes calentando el asa bacteriológico y barrer en forma de “S” desde el

primero hasta el cuadrante adyacente

7. Rotular la caja Petri e incubar a 37ºC durante 24 horas.

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5. Esquema del Perfil bioquímico (metabólico ) para la identificación del microorganismo seleccionado

Pruebas bioquímicas

Producción de índol+ produccion de indol -

Producción de ácidos mixtos+ Producción de ácidos mixtos -

Prueba de metabolitos neutros+ Prueba de metabolitos neutros-

Prueba de citrato+ Prueba de citrato -

Fermentación de azucares (Glucosa, Lactosa y Sacarosa)

Pico alcalino (rojo) / fondo alcalino (rojo). No hay fermentación de

azúcares. Pico alcalino (rojo) / fondo ácido (amarillo). Glucosa fermentada. Lactosa

y sacarosa no fermentadas.

Pico ácido (amarillo) / fondo ácido (amarillo). Glucosa fermentada.

Lactosa y/o sacarosa fermentadas.

Producción de gas: Se evidencia por la aparición de burbujas o

fragmentación del medio.

Sulfuro de hidrógeno: Se evidencia por el ennegrecimiento del medio.

Gramm -

Gramm +

Catalasa +

Movilidad +

Movilidad -

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RESULTADOS DEL AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN

1. EVIDENCIA FOTOGRAFICA DEL CULTIVO DE LA MUESTRA (SIEMBRA)

Agar bilisyrojo violeta

Agar bilisyrojo violeta

2. MORFOLOGÍA COLONIAL OBSERVADA

Tipo de colonia 1: Descripción

La morfología de colonias presentes en el medio de cultivo se observaron de color un poco rosa transparente y mucosas, con su forma circular, los bordes enteros y con una elevación convexa en la colonia.

FOTO 1

Tipo de colonia 2: Descripción Hubo crecimiento de colonias color blanco y mucosas las colonias eran de forma circular, los bordes se podían observar enteros y la elevación de la colonia era convexa.

FOTO 2

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3. EVIDENCIA FOTOGRAFICA DEL CULTIVO PURO ( RESIEMBRA)

FOTO 1 Agar bilisyrojo violeta

FOTO2 Agar bilisyrojo violeta

4. MORFOLOGIA COLONIAL OBSERVADA

Descripción

Foto 1 surgió una pequeña colonia de color rosa debido al agar que se utilizó pero a simple vista se ven de un color más oscuro, de forma circular, con una forma puntiforme y tiene un borde redondeado su aspecto es casi seco, superficie lisa.

FOTO 1

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5. EVIDENCIA FOTOGRÁFICA DEL RESULTADO DEL PERFIL BIOQUÍMICO

Nombre de la prueba

Medio de cultivo utilizado

Resultado obtenido

(positivo/negativo)

Evidencia fotográfica

1.-Tincion de gram

N/A

Negativo

Fundamento de la prueba

Se utiliza para poder diferenciarse la morfología celular bacteriana que radica en la diferente estructura de la pared celular de ambos grupos: las bacterias Gram+ tienen una gruesa capa de peptidoglicano en su pared, mientras que las bacterias Gram- tienen una capa de peptidoglicano más fina y una capa lipopolisacarídica externa. Tras la tinción con el primer colorante (Cristal violeta) se efectúa un lavado conetanol que arrastrará al colorante sólo en las Gram (-), mientras que en las Gram (+) el colorante queda retenido. Las células Gram (-) se teñirán después con un colorante de contraste (safranina) para que puedan observarse. Considerándose gram positiva a las que se visualizan de color moradas y gram negativas a las que se visualizan de color rosa o rojo.

2.-Movilidad

Agar SIM

Negativo

Fundamento de la prueba

La movilidad se demuestra por un enturbiamiento del medio o por crecimiento que difunde más allá de la línea de inoculación. Se realiza una siembra en picadura, y tras incubar 24 h. observamos si se ha producido crecimiento en torno a la zona inoculada. Las bacterias tienen movilidad por medio de sus flagelos, que se encuentran principalmente entre los bacilos; sin embargo algunas formas de cocos son inmóviles. Las bacterias móviles pueden contener un solo flagelo o muchos; además su localización varía con su especie bacteriana y las condiciones de cultivo. A veces, las bacterias con movilidad producen variantes no móviles que parecen ser estables y raramente se revierten en formas móviles. Los organismos no móviles carecen de flagelos, en el caso del medio SIM (medio semisólido) los microorganismos móviles pueden apreciarse por la turbidez que producen alrededor de la punción de siembra. -Resultado positivo: presencia de turbidez o crecimiento más allá de la línea de siembra. -Resultado negativo: crecimiento solamente en la línea de siembra.

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3.-Citrato

Caldo citrato de coser

Negativo

Fundamento de la prueba

Citrato de sodio es una sal del ácido cítrico, un compuesto orgánico simple que constituye uno de los metabolitos del ciclo de los ácidos tricarboxilicos. Generalmente los microorganismos que emplean el citrato como única fuente de carbono, utilizan sales de amonio como única fuente de nitrógeno. El metabolismo del citrato realizado, por algunas bacterias se realiza por el ciclo de krebs y requiere el desdoblamiento del citrato por la enzima citritasa (citrato-oxalacetato-liasa o citrato desmolasa) en presencia de magnesio o manganeso y de transportadores como citrato permeasa. La citritasa actúa sobre el citrato produciendo ácido oxalacetico y acetato; productos que son convertidos enzimaticamente a piruvato y dióxido de carbono. Durante esta reacción el medio comienza a alcalinizarse por el CO2 que se genera, el cual se combina con el agua y el sodio para formar Carbonato un producto alcalino.

4.-Catalasa

No aplica

Positivo

Fundamento de la prueba

La catalasa es una enzima que poseen la mayoría de las bacterias aerobias. Descompone el peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno. El desprendimiento de burbujas procedentes del oxígeno indica que la prueba es positiva. El peróxido de hidrogeno es un compuesto producido en pequeñas cantidades durante la respiración aeróbica. Su producción esta medida por flavo proteínas.

H202 + e- + H+ H2O + OH-

Citrato de sodio

Productos metabólicos alcalinos (carbonatos y bicarbonatos)- TpH

Azul de bromotimol

(verde)

pH 6.9

Azul de bromotimol

(Azul)

pH 7.6

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5.-Fermentación de Lactosa

Agar trile azúcar de hierro

No crecimiento

Fundamento de la prueba

Es una prueba usada para la fermentación de lactosa por parte de la bacteria sumándole producción de gas. Superficie acida/profundidad acida (pico amarillo/ fondo amarillo) fermenta la lactosa, si la superficie es alcalina/ profundidad alcalina (pico rojo/fondo rojo) no fermenta lactosa. La presencia de burbujas o ruptura del medio de cultivo produce gas.

Importante en la identificación de bacterias entéricas.Fermentadoras de lactosa: Escherichia,

Klebsiella,Enterobacter. Nofermentadoras: Salmonella,Proteusy Shigella

Glucosa + ADP +Pi Ac. Láctico + etanol + CO2 + ATP

6.-Fermentacion de Glucosa

Agar trile azúcar de hierro

Negativo

Fundamento de la prueba

La oxidación de la glucosa produce ácido pirúvico por una vía de derivación (Shunt), ocurre en condiciones aerobias y no requiere de fosforilación inicial. Superficie la superficie es alcalina/ profundidad alcalina (pico rojo/fondo rojo) no fermenta glucosa. La presencia de burbujas o ruptura del medio de cultivo produce gas.

Glucosa + 2ADPA + 2Pi 2 lactato + 2ATP + 2 H2O

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7.-Fermentación de Sacarosa

Agar trile azúcar de

hierro

Negativo

Fundamento de la prueba

Es una prueba usada para la fermentación de sacarosa y la producción de H2S por parte de la bacteria sumándole producción de gas. Superficie acida/profundidad acida (pico amarillo/ fondo amarillo) fermenta sacarosa, si la superficie es alcalina/ profundidad alcalina (pico rojo/fondo rojo) no fermenta sacarosa. La presencia de burbujas o ruptura del medio de cultivo produce gas. La producción de H2S se manifiesta por la aparición de un precipitado color negro debido a la reducción de la sal de hierro presente en el medio.

8.-Indol

Agar SIM

No crecimiento

Fundamento de la prueba

Permite detectar la producción de indol, producto de la degradación metabólica del aminoácido triptofano. Las bacterias que poseen la enzima triptofanasa son capaces de hidrolizar y desaminar el triptofano con producción de indol, ácido pirúvico y amoníaco. El indol desdoblado de la molécula de triptofano puede ser detectado cuando reacciona con el grupo aldehído del para-dimetilamino benzaldehído del reactivo revelador (reactivo de Kovacs), formándose un complejo de color rojo.

Trp Indol + Ac. Pirúvico + NH3

Picadura

Triptofanasa

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9.Rojo de Metilo, Fermentación Acido-mixta

Caldo RM-VP

Negativo

Fundamento de la prueba

Este ensayo pone en evidencia la capacidad del microorganismo de realizar fermentación Acido-mixta. Parte del piruvato se metaboliza produciendo cantidades menores de ácido láctico, fórmico y acético, la mayor parte del piruvato se condensa formando acetilmetilcarbinol, que es reducido a 2,3-butilenglicol, productos que son neutros. (Prueba positiva color rosado -violáceo en la parte superior del tubo; Prueba negativa no tiene coloración). Microorganismos por cada 4 moléculas de piruvato formadas, reducen dos a ácido láctico y dos las metabolizan para formar ácido acético y fórmico; parte del acetato pasa a etanol y parte del fórmico a CO2y H2en cantidades iguales. Reacción (–)Amarillo, Reacción (+) Rojo

10.-Producción de metabolitos neutros, fermentación butilenglicólica de glucosa

Caldo RM-VP

No crecimiento

Fundamento de la prueba

Este ensayo pone la capacidad del microorganismo de producir acetilmetilcarbinol (Acetoína) a partir de la fermentación butilenglicólica de la glucosa. La glucosa puede ser metabolizada por los microorganismos, a través de distintas vías metabólicas. Según la vía utilizada, se originarán productos finales ácidos (ácido láctico, ácido acético, ácido fórmico), o productos finales neutros. En el medio de cultivo, la pluripeptona aporta los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano y la glucosa es el hidrato de carbono fermentable.

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IDENTIFICACIÓN DEL MICROORGANISMO AMBIENTAL

EN LA MATRIZ DE ESTUDIO: _____Agua__________________________________

1.- Nombre científico del o los microorganismo identificado de acuerdo a los resultados del perfil bioquímico planteado ( género y especie)

Debido a que en algunas pruebas no se obtuvo crecimiento de la bacteria no logramos llegar a un resultado definitivo, esto debido a que las condiciones para el crecimiento de la bacteria no fueron las óptimas, como pudimos observar solo fue posible el crecimiento de una colonia bacteriana, la cual considerando la temperatura con la que se obtuvo fue de 35° C y comparando esta temperatura con la que se tiene en las aguas termales de Comanjilla que es aproximadamente de 80° C, es probable que las bacterias que se tienen presentes en las aguas termales necesiten una mayor temperatura de incubación para desarrollarse en un medio de cultivo y así lograr el crecimiento, por lo tanto lograr la obtención de resultados en una marcha de pruebas bioquímicas y así poder identificar una bacteria.

2. La función que juegan en la transformación de la materia orgánica a través de los ciclos biogeoquímicos

Las aguas termales surgen de la Tierra de modo espontáneo y que poseen un alto nivel de mineralización así como también temperaturas superiores a los 5° C, lo cual hace que sean por lo general aguas cálidas o calientes a diferencia de las aguas marítimas u oceánicas Las aguas termales presentan una gran diversidad de microorganismos autóctonos característicos de cada tipo de agua y que dependen de sus propiedades fisicoquímicas (temperatura, pH, composición). Predominan las bacterias heterótrofas oligotróficas de los géneros: Pseudomonas, Bacillus, Micrococcus,Staphylococcus, Enterobacter, Acinetobacter y Arthrobacter. En menor número se encuentran microorganismos autótrofos (quimilitotrofos y fototrofos). También puede haber en ellas microorganismos alóctonos, procedentes de otros hábitats, considerados contaminantes, que coexisten con los anteriores, pero es rara la presencia de indicadores fecales y bacterias patógenas. La diversidad de las especies que existen en un determinado hábitat es una consecuencia de la relación entre los organismos y el ambiente, y desde un punto de vista ecológico. Actualmente existe un gran interés por el estudio de la biodiversidad de los ambientes extremos con el fin de determinar cuáles son las características peculiares que permiten a estos microorganismos sobrevivir y qué papel tienen en los ciclos de la naturaleza. Las aguas termales son uno de estos hábitats extremos ya que tienen altas temperaturas y elevadas concentraciones de sales, condiciones desfavorables para la vida de muchos seres vivos. Estos aspectos generales se han incrementado con estudios sobre la aplicación de estos microorganismos en la biotecnología, debido a la alta resistencia al calor de sus enzimas. Debido a la temperatura presente en las aguas termales de Comanjilla los microorganismos presentes en este ambiente son termófilos, estos son amantes de altas temperaturas, o en esencia que necesitan de estas condiciones, han sido tal vez los más estudiados. Estos se desarrollan en temperaturas superiores a los 45ºC, llegando incluso a ser encontrados en ambientes alrededor de los 113ºC.

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3. Conclusión parcial sobre las interacciones bacterianas en la matriz estudiada y la importancia de la microbiología en el área ambiental

Al realizar estas pruebas bioquímicas estamos aprendiendo a rastrear las bacterias que se encuentran en el medio ambiente, mediante el conjunto de reacciones que nos ayudan a determinar la actividad metabólica de la bacteria a partir de un sustrato que lo tenemos presente en nuestro medio de cultivo y que la bacteria realmente al crecer lo transforma o no, es por ello que podemos determinar cuándo una prueba es positiva o negativa, para llevar a cabo la identificación de nuestra bacteria partimos de un cultivo puro previamente obtenido del aislamiento. Al estudiar la microbiología de la matriz de agua en Comanjilla nos pudimos dar cuenta que las condiciones para lograr un crecimiento de bacterias son demasiado específicas. También aprendimos que es de suma importancia conocer que hay diferentes tipos de bacterias que morfológicamente pueden ser muy parecidas, pero en si la única forma de identificarlas es realizar una marcha de pruebas bioquímicas, tinciones y utilizando pruebas microscópicas para así lograr obtener mejores referencias de que posible bacteria puede ser. Nos dimos cuenta que para el medio ambiente es de suma importancia saber identificar las bacterias, ya que son un indicador del grado de contaminación que tenemos en él, por ejemplo de la matriz de agua para saber si el uso del agua que le es asignado es el correcto, por ejemplo para uso agrícola no debe de tener coliformes, cabe mencionar que las bacterias coliformes se encuentran en grandes cantidades en la heces fecales tanto de humanos como de animales de sangre caliente y estas bacterias tienen una gran relación con la bacterias patógenas o dañinas para el ser humano, por lo tanto son capaces de generar enfermedades diarreicas que, dependiendo de la cantidad de bacterias coliformes que se tenga, pueden causar hasta la muerte, por lo tanto debido a que los coliformes pueden ser cuantificados con técnicas de análisis simples (una de ellas número más probable), son considerados indicadores de la higiene del agua. Por lo tanto concluimos que la el estudio de la microbiología ambiental es de suma importancia, ya que nos ayuda a identificar la responsabilidad que tienen los microorganismos en diferentes aspectos, tales como la interacción de bacterias en los ciclos biogeoquímicos, e incluso con la microbiología ambiental podemos identificar los microorganismos en su habitad natural, como lo es aire, agua y suelo, también podemos estudiar la microbiología ambiental para la reducción de contaminación del ambiente generando procesos de biorremediación mediante el estudio de los microorganismos.