Embed Size (px)
Citation preview
S.O.P.sساسیة الطرائق األ
لفحص البرازStandard Operating
Procedures
Of Stool Analysis
-:الفحوصات التي جتري علي الرباز يف املعمل
What to LOOK FOR in STOOL ـ -:-:ص الطفیلیات فح-1
الدیدان التي یمكن رؤیتھا بالعین )(aـ : البحت عن الطفیلیات في البراز مثل یرقات ھذه الدیدان التي تظھر تحت المجھر بیوض أو )(bالمجردة ل
)protozoa(c) التي توجد في الطور الحركي أو ) أو وحیدات النواة األولیات.م مثل الحوصلة والغیر حركي والطور المقا
ـ : ـ الفحص البكتیري 2
الذي یبحث عن وجود البكتیریا المسببة للمرض وھذا عن طریق عمل مزرعة stool cultureللبراز
ـ : ـ الفحص الكیمیائي 3
وھذا أساسا یجري لتشخیص وجود الدم الخفي وبعض االختبارات الكیمیائیة . األخرى
COLLETION OF STOOlـ:جتميع الرباز
. ـ تنبیھ المرضي لعدم خلط العینة بالبول أو الماء أو المطھرات
ـ : الیتعاطي بعض األدویة لتأثیرھا علي نتائج الفحص مثل ـ التأكد من أن المریض. الزیت ،، الماغنیسیوم ، الحدید میوین وأدویة اإلسھال ، البارلتتراسیك
ـ تسجیل وقت أخد العینة للتأكد من عدم استقبال عینات تأخرت في الوصول للمعمل ون جافة نتیجة عینات البراز لالطفال التجمع من الحفاظ الن العینة سوف تك-
.تشرب الحفاظ للجزء السائل من العینة
الجھ ، ویستحب وضع ثـ إذا لم تتمكن من فحص العینة مباشرة األفضل حفظھا في . العینات في الظل بعیداً عن الشمس والحرارة العالیة
-:Safety:السالمة
.عند الدخول الى المعمل )المراییل (ارتداء القفازات والمالبس الخاصة بالمعمل -
ویجب التخلص من ،غسل الیدین جیدا قبل وبعد العمل بالمطھرات المناسبة لذلك -.القفازات المستعملة حسب الطرق المخصصة لذلك
.ن والمضغ واستعمال مواد الزینة في المعمل عدم االكل والشرب والتدخی-
.استعمال الكابینة الخاصة بتحضیر المحالیل عند الحاجة لذلك -
. ومعایرتھ جیداً قبل فحص الشرائح بیجب التأكد من صالحیة المیكروسكو
فحص الرباز الظاهري .Macroscopic Examination
بالعینات السائلة والتي تحتوي علي عندما تكون العینات كثیرة من األفضل أن تبدءمخاط أو دم ألنھا قد تحتوي علي أطوار متحركة وھي تموت سریعا ویصعب
.والتعرف علیھااكتشافھا
ـ : اھریاً من اھم المالحظات التي یجب تدوینھا حول عینة البراز ظ
consistency-1:ا ـ القوام
-hard and dry
-firm and formed
-soft and formed
-soft and unformed
-semi liquid
-liquid and watery
-2-:ون اللـ2. color :-
(a) اسودblack نزیف في االثنا ،بعض مسبباتھ نزیف الجزء العلوي من االمعاء.عشر
(b) احمرRed بعض االحیان (،بلھارسیا ،بعض مسبباتھ نزیف من فتحة الشرج)ھضومطماطم او بنجر غیر م
(c) احمر ناصعBright red نزیف في الجزء السفلي من االمعاء الدقیقة او بسبب.تلوث معوي
(d) مخاطي او وحليMucous or Clay colored بسبب الدسنتاریا االمیبیة او.الیرقان او بسبب اعاقة تدفق الصفراء الى االمعاء
(e) ابیضWhite االشعة بعد تناول وجبة الباریوم عند عمل.
(f) باھتPale انسداد في القناة المراریة.
(g) اخضرGreen بسبب بعض االدویة مثلDiathiazine , Mercurous.
odor 3-.ـ الرائحة 3
-4. ـ المخاط 4 mucus .
5. ـ الدم 5 -Blood
ـ : يالفحص امليكروسكوبMicroscopic examinationـ: المواد :تحظیر الشریحة-
- Microscopic Slidesـ شرائح زجاجیة
Cover Slides–ـ آغطیة شرائح
Waxes pen or Markers for Labelling–. ـ قلم شمع للترقیم أو التعلیم
ـ Saline solutions. ـ محلول ملحي
Iodide solution–ـ محلول یود
-Loop or applicator sticks
ـ : العمل
. ـ نأخد شریحة وبالقلم الشمعي نضع رقم العینة علي طرف الشریحة 1
ـ تم نضع قطرة من المحلول الملحي في منتصف نصف الشریحة تم نضع قطرة 2. صف النصف االخر یود في منت
ـ تم نأخد جزء صغیر من العینة ، إذا كانت العینة جافة نأخد من داخل وخارج 3عالعینة ، وإذا كان بھا مخاط أو دم نأخد من ذلك الجزء تم نخلط العینة جیداً م
بحیت إذا وضعت علي ( سمیكة او رقیقة جداً اللطاخة علي أن التكون ،المحلول
)یمكن قراءتھ عنوان في جریدة . ثم نغطي كل قطرة بغطاء شرائح مع مراعاة عدم دخول الھواء وتكون فقاعات
amoebic trophozoitesـ في حالة وجود
BMB)(Buffered Methylene Blue )علي الشریحة قطرة كبیرة من نضعحصھا دقائق قبل ف10ـ 5ئح وتتركھا من االشرء ونخلط العینة جیداً ونغطیھا بغطا
. دقیقة 30لكي یتم دخول الصبغة علي أن تفحص الشریحة في خالل
- :الفحص
، X40و X10تفحص العینة تحت المكروسكوب لعینة المحلول الملحي تحت قوة ، وتفحص الساحة من الفحص جیدل، وقلل الضوء X40ولعینة الیود تحت قوة
. جانب إلي جانب ومن األمام إلي الوراء
ـ البیوض قد تري بسھولة في عینة المحلول الملحي والتصبغ ألن الصبغ قد ولكن بعض X10والبیوض یمكن رؤیتھا في قوة ,التشخیص الصحیحفي الیساعد
. البیوض الترى إالفي القوة العلیا للعدسة الجافة
. ـ یرقات بعض الدیدان أیضاً قد تري في عینة المحلول الملحي
-:عملیة مالحظة
عند الشك في احتمال وجود بویضة ما التعرفھا اترك العینة لغیرك یفحصھا او فمن االفضل عدم كتابة البویضة استعن بالصور من االطلس واذا لم یتوفر ذلك .في الصباح العادة الفحص المشكوك فیھا واطلب من المریض عینة اخرى
ـ من االفضل فحص البراز قبل مرور ساعة واحدة علي التجمیع ألن بعض قد تموت ومن الممكن رؤیتھا تتحرك ) Protozoa cysts( حوصالت الوحیدات عند وجود الدم او الصدید في العینة من المستحسن فحص ,في العینات الطازجة
.شریحتین لنفس العینة
. وأي مالحظة لھ یجب ان تسجل في النتیجة يضالدم في البراز مر
ـ : حتضري اليود لفحص الرباز 1 – 1gm Iodine
2- 2gm Potasium Iodide
3-100 ml Dise l ed Wa t er
مل من الماء تم نضیف الیود وباقي الماء ثم یخفف 30+ نضع بوتاسیوم ایوداید .ن یحفظ في مكان بارد بعیدأ عن اإلضاءة علي أ) 5L(لخمس لترات
الدم اخلفي يف الرباز .Occult Bloodیجب أن یعد Occult Blood testقبل فحص الدم الخفي في البراز -
المریض قبل أخد العینة فیجب أن الیتعاطى بعض االدویة متل االسبرین االبیوبروفین
,anticoagulants,antimetabolites,colchicines,indomthacine,(NSAIDs) وخالل أخد العینات لمدة سبعة الى سبعة ایام لمدة التقل عن ثالتة أیام
و Radishesوالفجل Turnipایام وان یمتنع عن أكل بعض الخضار متل اللفت . د العینات أیام وخالل اخ3واللحم االحمر والكبد لمدة Melonsالبطیخ
نزیف الدم من اللثة نتیجة استخدام فرشاة االسنان بقوة یؤدي الى نتائج ایجابیة كاذبة.في اختبار الدم الخفي
من االفضل إعادة تحلیل الدم الخفي عندما یكون موجباً بعینة اخرى من المریض سبب بعض تأیام أظافیة بنفس برنامج االمنتناع عن االدویة والمأكوالت التي3بعد
حسب نوع Kitیجب التقید بكافة التعلیمات المرفقة لكل عدة ،االختالطات في النتائج. الشركة المصنعة لظمان صحة النتائج
:بعض الجداول التوضیحیة.للمقارنة بین االمیبا المعویة في عدد من التحضیرات لفحص البراز 1جدول رقم -Amebaeللمقارنة بین الفروقات الشكلیة للوحیدات الموجودة في البراز 2رقم جدول -
TrophozoitesAmebaeفيللمقارنة بین الفروقات الشكلیة للوحیدات الموجودة البراز3جدول رقم - -cysts
Table 1Characteristics of Intestinal Amebae Visible in Different Types of FecalPreparations
UNSTAINED TEMPORARYSTAINS
PERMANENTSTAINS
CharacteristicSaline Formalin Iodine
(Cysts)
BufferedMethylene
Blue(Trophs)1
Trophozoites
Motility +
Cytoplasm
Appearance + + + +
Inclusions (rbc., bacteria) + + + +
Nucleus +2 + +
Cysts
Nuclei + + +
Chromatoid bodies + + +3 +
Glycogen +(vacuole present)
Table 2
Differential Morphology of Protozoa Found in Stool Specimensof Humans: Amebae-Trophozoites
NUCLEUS CYTOPLASM
Species
Size(Leng
th)
Motility
Number
Peripheral
Chromatin
KaryosomalChromatin
Appearance
Inclusions
Entamoebahistolytica
10-60m. Usualrange,15-20mcommensalform.1
Over20 minvasiveform.2
Progressivewithhyaline,finger-likepseudopods.
1Notvisibleinunstainedpreparations.
Finegranules. Usuallyevenlydistributed anduniformin size.
Small,discrete. Usuallycentrally located,but occasionallyis eccentric.
Finelyqranular.
Red bloodcellsoccasionally. Noninvasiveorganismsmaycontainbacteria.
Entamoebahartmanni
5-12m.Usualrange,8-10m.
Usuallynonprogressive butmay beprogressiveoccasionally.
1Notvisibleinunstainedpreparations.
SimilartoE.histolytica.
Small, discrete,often eccentric.
Finelygranular.
Bacteria.
Entamoeba coli
15-50m.Usualrange,20-25m.
Sluggish,nonprogressive, withbluntpseudopods.
1Oftenvisibleinunstainedpreparations.
Coarsegranules,irregular in sizeanddistribution.
Large, discrete,usually eccentric.
Coarse,oftenvacuolated.
Bacteria,yeasts,othermaterials.
Entamoebapolecki
10-25m.Usualrange,15-20m.
Usuallysluggish,similarto E.coli. Occasionally, indiarrheicspecimens,motilitymay beprogressive.
1May beslightlyvisibleinunstainedpreparations.Occas
ionallymaybeirregularlydistorted bypressurefromvacuoles incytoplasm.
Usuallyfinegranulesevenlydistributed. Occasionallygranules maybeirregularlyarranged. Chromatinsometimes inplaquesorcrescents.
Small, discrete,eccentric. Occasionally large,diffuse orirregular.
Coarsely,granular,mayresembleE.coli. Containsnumerousvacuoles.
Bacteria,yeasts.
Endolimax nana
6-12m. Usualrange,8-10m.
Sluggish,usuallynonprogressive withbluntpseudopods.
1Visibleoccasionally inunstainedpreparations.
None. Large, irregularlyshaped, blot-like.
Granular,vacuolated.
Bacteria.
Iodamoebabuetschlii
8-20m. Usualrange,12-15m.
Sluggish,usuallynonprogressive.
1Notusuallyvisibleinunstainedpreparations.
None. Large, usuallycentral. Surrounded by refractile,achromaticgranules. Thesegranules areoften not distincteven in stainedslides.
Coarselygranular,vacuolated.
Bacteria,yeasts, orothermaterial.
Dientamoebafragilis3
5-15m. Usualrange,9-12m.
Pseudopodsareangular,serrated, orbroadlobed,andhyaline,almosttransparent.
2(Inapproximately 20%oforganismsonly 1nucleus ispresent.) Nucleiinvisible inunstainedpreparations.
None. Large cluster of4-8 granules.
Finely,qranular.
Bacteria:occasionally redblood cells.
Table3
Differential Morphology of Protozoa Found in Stool Specimens of Humans:
Amebae-cyst
CYTOPLASMNUCLEUS
GlycogenChromatoid
Bodies
Karyosomal
Chromatin
Peripheral
Chromatin
NumberShapeSize(Diamet
er orlength)
Species
Usuallydiffuse. Concentratedmass oftenpresent in
youngcysts. Stains reddish
brown withiodine.
Present.Elongatedbars with
bluntlyrounded
ends.
Small,discrete,
usuallycentrally
located
Peripheral
chromatin
present.Fine,
uniformgranules, evenlydistribut
ed
4 inmature
cyst.Immatur
e cystswith 1 or
2occasionally seen
Usuallyspherical
.
10-20m
Usualrange,12-15
m
Entamoeb
ahistolytica
Similar toE.
histolytica.
Present.Elongatedbars with
bluntlyrounded
ends.
Similar toE.
histolytica.
Similarto E.
histolytica.
4 inmature
cyst.Immatur
e cystswith 1 or
2 oftenseen
Usuallyspherical
.
5-10m
Usualrange,
6-8 m.
Entamoeb
ahart
manni
Usuallydiffuse,
but,occasionall
y welldefinedmass in
immaturecysts. Stai
n reddishbrown with
iodine.
Present,but less
frequentlyseen than
in E.histolytica. Usuallysplinter-like withpointed
ends.
Large,discrete,
usuallyeccentric
butoccasionally centrally
located.
ripheralchromat
inpresent.Coarse
granulesirregular
in sizeand
distribution, but
oftenappear
moreuniformthan introphoz
oites.
8 inmature
cyst. Occasionally super-nucleate
d cystswith 16or more
are seen.Immatur
e cystswith 2 or
moreoccasion
ally seen.
Usuallyspherical. Occasi
onallyoval,
triangular, or
othershapes.
10-35m
Usualrange,15-25
m
Entamoeba coli
Usuallysmall,diffuse
massesstain
reddishbrown with
iodine. Adark areacalled an"inclusion
mass"(possibly
Present.Manysmall
bodieswith
angularor
pointedends, or
few largeones. May be oval,
rod-like,
Usuallysmall andeccentric.
Usuallyfine
granulesevenly
distributed
1. Rarely2.
Occasionally
visible inunstaine
dpreparati
ons
Spherical or oval.
-18 mUsual
range,11-15m.
Entamoeb
apolec
ki
concentrated
cytoplasm)is often
alsopresent. M
ass doesnot stain
withiodine.
orirregular.
Usuallydiffuse. Concentratedmass seenoccasionally in youngcysts. Stains reddish
brown withiodine
Occasionally
granulesor small
ovalmasses
seen, butbodies as
seen inEntamoeba spp. are
notpresent.
Large(blot-like),
usuallycentral.
None4 inimmature cysts.
Immature cysts
with lessthan 4rarelyseen.
Spherical,
ovoidal,or
ellipsoidal.
5-10m.
Usualrange,
6-8 m.
Endolimaxnana
Compact,well-
definedmass. Stai
ns darkbrown with
iodine.
Occasionally
granulespresent,
butchromatoi
d bodiesas seen inEntamoeba spp. are
notpresent.
Large,usually
eccentric.Refractile,
achromaticgranules
on one sideof
karyosome.Indistinctin iodine
preparations
None1 inmature
cyst.
Ovoidal,ellipsoid
al,triangula
r, orother
shapes
5-20m.
Usualrange,10-12
m
Iodamoeb
abuets
chlii
Normal Values inا لقیم الطبیعیة لتحلیل البراز Stool Analysis
Normal ValuesMacroscopic Examination100-200g/24hAmount
BrownColorOffensive- varies with PH of stool anddepends on bacterial fermentation and
putrefaction
Odor
Plastihc ,not unusual to seefiber,vegetableskins,and seeds,soft andbulky in high – vegetable diet ,small and
dry in high – meat diet
Consistency
FormedSize and shape
NoneGross blood
NoneMucusNonePusNoneParasites
Normal ValuesMicroscopic ExaminationColorless ,neutral fat(18%)and fay aci dcrystals and soaps
Fat
None to small amountUndigested food ,meat fibers ,trypsin,starch
NoneEggs and segments of parasitesNoneBacteria and viruses
NoneYaestsNoneLeukocytes
Normal ValuesClinical ExaminationUp to 75%Water
Neutral to weakly alkaline (PH 7.0 – 7.5)PHNegativeOccult blood
50 – 300gm/24hUorobilinogenCorpoporphyrins 400-1200ug/24hUroporphyrins10-40ug/24h
Porphyrins
2.5g/24h˂Nitrogen20 -95U/gTrypsin
5.8- 9.8mmol/dSodium2.5 – 3.9 mmol/dChloride15.7 – 20.7 mmol/dPotassium0 - -6gm /24hLipids (fatty acids )
2.5 g/L˂Carbohydrates (as reducing substances)
-:ولیات الموجودة في البرازألعض انواع اب
Protozoa Found in Stool Specimens of Humans: AmebaeAmebaeEntamoeba
histolytica/disparEntamoebahartmanni
Entamoebacoli
Entamoebapolecki
Endolimaxnana
Iodamoebabeutschlii
Protozoa Found in Stool Specimens of Humans:Ciliate and Flagellates
Ciliate Flagellates
Balantidiumcoli
Chilomastixmesnili
Giardiaintestinalis
Dientamoebafragilis
nocyst stage
_______40 µm
______10 µm
Protozoa Found in Stool Specimens of Humans:Coccidia and Blastocystis
Coccidia Blastocystis
Cystoisosporabelli
Sarcocystisspp.
Cryptosporidiumspp.
Cyclosporacayetanensis
Blastocystishominis
wet mount oocyst wet mount wet mount wet mount
safranin sporocyst acid-fast acid-fast trichrome
_____10 µm
Eggs Found in Stool Specimens of Humans Trematode E
بعض انواع البیوض
الموجودة في البراز
Clonorchissinensis
Opisthorchisviverrini
Paragonimuswestermani1
Nanophyetussalmincola
Schistosoma japonicum Schistosoma mekongiSchistosoma
mansoniSchistosomaintercalatum
Schistosomahaematobium2
Fasciolahepatica
Fasciolopsisbuski
Echinostomaspp.
Adult Visceral Trematodes of Humans
Heterophyes heterophyes Metagonimus yokogawai
Opisthorchis felineus Opisthorchis viverrini
Clonorchis sinensis Dicrocoelium dendriticum
Fasciola hepatica Paragonimus westermani
Echinostoma revolutum
Key
AC=acetabulum (ventral sucker) IN=intestine
CE=cecum OS=oral sucker
CL=collar OV=ovary
CS=cirrus sac PH=pharynx
EB=excretory bladder SR=seminal receptacle
EG=eggs (within uterus) TE=testes
ES=esophagus UT=uterus
GA=genitoacetabulum VT=vitellaria
Hookworm and Strongyloides Larvae
Rhabditiform (L1) Stage Filariform (L3) Stage
Scale______100 µm
