CILIOPHORA

DESARROLLO

1. Observa una preparación de heces de cerdo

A. localice un trofozoitos y ponga nombres a sus estrucutras en el dibujo adjunto

ESTRUCTURAS QUE OBSERVA

1. estadio parasitario Trofozoito de Balantidium coli en fresco. Obsérvese la vacuola y los cilios periféricos. Es un Trofozoito bien grande, oscila entre 50-200 micras .

¿Como es su movimiento?

El trofozoíto vive en la mucosa y submucosa del intestino grueso, principalmente elciego, y en la porción terminal del íleon, donde se alimenta de las células de la paredintestinal o de las bacterias y del moco (Chester, 1992). Se desplaza por movimientorítmico de los cilios. Su gran plasticidad y su movimiento rotatorio le permiten penetrar a la mucosa intestinal (Brown, 1985).

B. localice quiste de B.coli y ponga nombres a sus elementos en el dibujo adjunto

ESTRUCTURAS QUE OBSERVA

Quiste de Balantidium coli en heces frescas. Tamaño de 40-60 micras

2. observe un corte histológico de intestino grueso de humano de B.coli localice al parasito, dibuje y ponga nombres a sus estructuras

ESTRUCTURAS QUE OBSERVA

Sección histological que muestra trofozoítos de Balantidium coli en el tracto intestinal

¿En que capa de la pared intestinal se observan los trofozoitos del parasito?

Está demostrada la producción de varias enzimas por Balantidium coli, entre otras la hialuronidasa, cuya acción lítica combinada a la acción mecánica de su propulsión, permite la penetración de los trofozoítos en la mucosa y submucosa intestinal (Biagi, 1988). Allí se multiplica rápidamente produciendo gran reacción inflamatoria, ulceración de la mucosa y submucosa incluso perforación intestinal (Tay, 1993).

3. Después de leer el texto y escuchar la clase teórica ponga nombre a las diversas fases del ciclo de vida de B.coli

RESPONDA:

¿Que daño ocasiona B.coli en el intestino grueso del hombre y cuales

son sus mecanismos?

El daño tisular producido por los trofozoítos es debido al movimiento mecánico, facilitado por cilios, y a la acción enzimática de la hialuronidasa del Balantidium

Se describe que estas ulceraciones pueden llegar a comprometer las tres capas intestinales y llegar hasta la serosa

¿Que importancia epidemiológica tiene el cerdo en la transmisión de B.coli?

El parásito responsable es parte de una enfermedad que se considera una zoonosis,esto quiere decir una enfermedad de los animales y que es secundaria para el hombre. B. coli se ha aislado del cerdo, rata, cobayo y mono, pero es el cerdo el que más importancia tiene sobre todo por su cercanía con el hombre y la gran posibilidad de infectarlo (Romero, 1993).

¿Que importancia epidemiológica tienen los torfozoitos en la transmicion de la balantidiasis humana?

El trofozoíto, que es la forma patógena, mide de 30 a 150 micras de longitud por 25 a 120 micras de ancho, tiene un cuerpo ovoideo revestido de cilios que le permitendesplazarse (Chandler, 1961).

El trofozoíto vive en la mucosa y submucosa del intestino grueso, principalmente elciego, y en la porción terminal del íleon, donde se alimenta de las células de la paredintestinal o de las bacterias y del moco (Chester, 1992).

¿Como se realiza el diagnostico?

Clínicamente, la balantidiasis puede confundirse con otras disenterías y fiebresentéricas (Brown, 1985). El diagnóstico se realiza demostrando la presencia del parásito en la materia fecal, mediante exámenes coproparasitoscópicos de concentración cuando son heces formadas para buscar e identificar los quistes de Balantidium coli. Ante un cuadro diarreico que nos habla de una forma aguda, es de utilidad el examen directo en fresco, para la búsqueda de trofozoítos. Deben estudiarse varias evacuaciones, pues la expulsión de parásitos es irregular. Las formas vegetativas son fácilmente reconocidas gracias a su tamaño, actividad y movimiento típico de propulsión rotatoria (Piekarsky, 1989). La observación microscópica de los parásitos puede hacerse en fresco o mediante tinciones con hematoxilina férrica o tricrómicas. Si se trata de secciones de tejidos, la tinción más adecuada es la de hematoxilina-eosina (Pumarola, 1991).

¿A que se denomina heces disentéricas?

La disentería es una enfermedad intestinal asociada con dolor estomacal, heces fecales con sangre, y fiebre. Esta condición se puede tratar; contacte a su médico si cree que puede tener disentería amebiana.

PROTOZOA

SARCOMASTIGOPHORA, MASTIGOPHORA, KINETOPLASTIDA

DESARROLLO

A. tripanosoma (schizotrypanum) cruzi

1. observe un frotis de sangre de ratón infectado con T: cruzi (coloración giemsa). Use el lente de inversión

a) ubique en parasito y haga un esquema del mismo ponga nombre a sus estructuras

ESTRUCTURAS OBSERVADAS

Microfotografía de corte de músculo esquelético de un ratón infectado con formas tripomastigotas sanguíneas de la población de T cruzi sp COMB 2: Amplificación x

160. Obsérvese un nido parasitario en músculo esquelético, sin inflamación adyacente.

b) ¿que estructura del parasito no se observa? ¿Por qué?

c) ¿Qué es el cinetoplasto?

Un cinetoplasto es una masa de ADN circular dentro de una gran mitocondria

que contiene numerosas copias del genoma mitocondrial. Sólo se encuentran en

los organismos de la clase Kinetoplastea. Los cinetoplastos son usualmente

adyacentes al cuerpo basal flageolar dando la sensación de que están firmemente

vinculados al citoesqueleto.

d) ¿se observa el cinetosoma? Si ( ) No ( ) porque?

e) ¿que es el reservorio flagelar?

Los Kinetoplastida son flagelados con 1 o 2 flagelos que se originan de unaabertura conocida como bolsa flagelar, normalmente contienen una estructuraprominente y paraflagelar conocida como cinetoplasto que corresponde a unacondensación de DNA localizado en el interior de una única mitocondria que estaramificada por todo el cuerpo del parásito.

f) si se hace el corte de un flagelo libre de parasito ¿Qué estructuras debe observarse? Haga un esquema y ponga nombres a las estrucutras observadas.

2. Observe el corte histológico de corazón y/o musculo esquelético de ratón infectado con T. cruzi use los lentes de 2.5x, 10x y 40x.

a) localice el parasito haga un esquema y ponga nombre a las estructuras parasitarias

ESTRUCTURAS QUE OBSERVA

 Microfotografía de corte de músculo esquelético de un ratón infectado con

formas tripomastigotas sanguíneas de la población de T cruzi V-121: Amplificación x 50. Obsérvese extensa inflamación productiva intersticial en

músculo esquelético (A), con algunas lesiones de necrosis de las fibras (B y D), y tentativas de reparación representadas por proliferación nuclear de las miocélulas

(C). No se observa presencia de parásitos.

b) ¿en que parte del tejido se encuentran localizados los parásitos?

Con frecuencia se observó áreas de necrosis segmentaria de las fibras musculares esqueléticas, las que aparecen como zonas con pérdida de la estriación y con coloración eosinofílica uniforme. En los casos de larga evolución, se presentaron segmentos de fibras musculares fibrosadas.

c) consulte con un instructor para localizar los daños.

Como ya se ha hecho notar, las lesiones miocárdicas fueron menos intensas y frecuentes que las de músculo esquelético. Su predominio fue auricular y se

caracterizaron por la presencia de escasos y pequeños nidos de formas amastigotas, generalmente sin inflamación adyacente y focos

3. observe un frotis de heces de triatoma infestans positivo a T.cruzi use objetivos de inmersión.

a) localice el estadio mas frecuente y haga un esquena y ponga nombre a las estructuras

El ciclo biológico de T. cruzi con el hospedador invertebrado se inicia cuando la sangre de animales infectados es ingerida por el insecto. Al llegar al estómago, las formas tripomastigotes se transforman a esferomastigotes y epimastigotes, algunas veces las formas esferomastigotes se agregan dando la impresión de masas multinucleadas. Enseguida, los parásitos migran hacia el intestino, donde se multiplican como formas epimastigote (25 horas después de la infección).

b) localice el estadio infectante del hospedero vertebrado dibújelo y ponga nombre a sus estructuras.

El ciclo evolutivo del T. cruzi, en el hospedero vertebrado, comienza cuando lasformas tripomastigotes y epimastigotes son eliminadas en las heces y orina delinsecto vector y son inoculadas en la piel o mucosas del vertebrado. Las formastripomastigotes pueden penetrar en cualquier tipo celular que encuentre en el sitiode la inoculación, menos en eosinófilos y neutrofilos

K: kinetoplasto; CB: cuerpo basal; MO: membrana ondulanteF: flagelo; N: Núcleo

4. observe una preparación de heces frescas de triatoma infestans positivo a T.cruzi

a) describa el movimiento:

Presentan un movimiento vibratorio rotativo sin una dirección determinada

b) ¿de que se alimenta el parasito en el hospedero vertebrado? ¿Cómo es su metabolismo?

Sus productos finales son piruvato, acetato y succinato, estos organismos tienen enzimas del ciclo de Krebs pero en dirección reversa.

5. señale los métodos de laboratorio que se utiliza para diagnosticar T.cruzi en el hombre

Debido a que la mayor parte de los pacientes en la fase crónica son asintomáticos, la mayoría llegan a consulta, por referencia de la serología, que posiblemente se realizó en un banco de sangre

En el examen físico, durante la fase aguda, son importantes los hallazgos referentesa edema, fiebre, hepatoesplenomegalia, adenopatías, taquicardia, arritmias y signos de insuficiencia cardiaca. En la fase crónica: alteraciones del ritmo y trastornos de conducción del músculo cardíaco (cardiopatía chagásica crónica) con o sin signos de insuficiencia cardiaca congestiva.

MÉTODOS DIRECTOS:

Examen de sangre al fresco Extendido coloreado Gota gruesa Métodos de concentración:

Análisis del extendido de la “capa blanca Triple centrifugación

Centrifugación con silicón líquido: Técnica de Stout

METODOS PARASITOLÓGICOS INDIRECTOS:

Xenodiagnóstico Hemocultivo Inoculación en animales sensibles

MÉTODOS SEROLÓGICOS:

Reacción de fijación del complemento Hemoaglutinación indirecta Reacción de anticuerpos líticos Acoplamientos a los anticuerpos Reacción de inmunofluorescencia Indirecta (IFI)

6. epidemiologia

6.1 cual es la formula de boyd que se aplica para la parasitosis transmitidas por artrópodos

AV: artropodo vector favorableAP: agente patógeno susceptible-hombrePG: portador de gérmenes o reservorioAF: ambienteHS: hospedero

AVXAPXAFXPGXHS=ENFERMEDAD

6.2 señale cuales son los factores favorables par que ocurra la transmicion del T.cruzi en el valle de vítor Arequipa-peru

Comprende una zona eminentemente rural; es un típico valle de la cuenca del Pacífico, entre los 960 y 1210 m.s.n.m. Posee factores favorables para la presencia del T. infestans: clima templado árido, viviendas predominantemente a base de carrizo y barro; y habitantes de estrato económico bajo. La población se dedica principalmente a la agricultura y se agrupa en poblados, caseríos y fundos dispersos a lo largo del valle. Carece de servicios de agua potable, desagüe y la electricidad está limitada para los poblados más grandes: Barrio Nuevo, Pueblo Viejo y Sotillo, que se encuentran junto a la carretera Panamericana Sur.

6.3 defina que es

a) índice de infección trypano-triatomico.

El ciclo silvestre o ciclo primitivo de T. cruzi, de naturaleza eminentementeZoonótica, donde el protozoario circula entre vectores y reservorios silvestres

b) índice de infección humana.

En el ciclo doméstico el hombre sobresale como principal reservorio de laInfección, llevando al parásito hacia las zonas urbanas y hacia nuevas regiones y Países no endémicos.

c) índice de infección animal (p.e.cuy).

En este ciclo intervienen mamíferos (roedores domésticos, marsupiales, gatos, perros) que libremente entran y salen de las residencias y los triatomas silvestres que son atraídos por la luz de las casas y por el alimento. Este ciclo sirve de unión a los ciclos silvestre y doméstico. Algunos autores lo incluyen en el ciclo doméstico.

d) índice de infestación domiciliaria por triatoma infestans. Proporcionando la existencia de ranchos y de viviendas de mala calidadComo excelente abrigo de los vectores. Puede ser determinado.

Totalmente al azar Por conglomerados Estratificado Sistemática y al azar

6.4 señale las formas de transmisión en las que no intervenga en insecto vector

Transmisión transfusiones:

En cuanto no se descarte la sangre de donadores contaminados, existirá la probabilidad de transmitir la enfermedad por esta vía, siendo los mas expuestos los individuos poli transfundidos,

Transmisión congénita:

Constituye la tercera vía mas importante de transmisión dela enfermedad de Chagas. Este tipo de transmisión parece depender de factores ligados al parásito y al hospedador. Ocurre cuando el T. cruzi,

7. Enumere tres medidas de control de tripanosomiasis americana.

Eliminar a las poblaciones de vectores, principalmente empleando insecticidas y mejorando las viviendas

Se planteó por vez primera la búsqueda de anticuerpos contra la tripanosomiasis americana

Observaciones directas y con modelos matemáticos, indican que el desarrollo social de las regiones endémicas podría ser suficiente para controlar la enfermedad.

8. Después de leer el texto y escuchar la clase teórica, complete el esquema adjunto coloque nombres a cada uno de los eventos de la evolución de T.cruzi.

Leishmania brasiliensis.

1. observe un frotis de lesión cutánea de un hospedero vertebrado infectado con Leishmania brasiliensis.

a) Localice el parasito, dibuje y ponga nombres a sus estructuras.

ESTRUCTURAS OBSERVADAS

b) el parasito se encuentra dentro de las células o fuera de ellas.

Amastigotes de Leishmania dentro de los macrófagos de la piel.

c) ¿Qué tipo de células parsita?

La patología de la leishmaniasis está determinada principalmente por el establecimiento de la infección en los macrófagos y otras células del sistema mononuclear fagocítico. Puesto que son células del sistema inmune, la enfermedad va a causar alteraciones inmunitarias (Carvalho y col., 1987).

d) ¿Qué daño produce en el paciente?

La lesión comienza en el sitio de la picadura, como una roncha que se agranda yenrojece gradualmente, pero sin causar dolor. A continuación, la afluencia de leucocitos a la zona infectada produce la necrosis de los tejidos y la formación de un granuloma

e) ¿Qué mecanismos de defensa se produce en el hombre parasitado con Leishmania brasiliensis.

las proteínas ,los genes que codifican para pLb70, pLb87 y pLb99, se procedió a obtener anticuerpos policlonales para ser utilizadosen el screening de una genoteca de cDNA de promastigote de L. braziliensis,

2. observe estadios parasitarios de Leishmania brasiliensis. En medio de cultivo 3n localice al parasito haga un esquema y ponga nombres a sus estructuras

Estructuras que observa

Las leishmanias se presentan bajo dos formas diferentes. Una, promastigota, que es móvil y flagelada, comúnmente encontrada en el vector invertebrado, libre, alargada, de 10 a 14 por 1,5 a 3,5 mm, se multiplica en el vector y migra a la parte anterior del mosquito y está allí hasta ser inoculada Y la otra, amastigota, es inmóvil, intracelular, dentro de los macrófagos y otras células del sistema reticuloendotelial del huésped vertebrado, redondeada u ovoide, de 2,5 a 5,0 por 1,5 a 2,0 mm

¿Qué estadios parasitarios se encuentra en el hospedero invertebrado?

Promastigota, que es móvil y flagelada, comúnmente encontrada en el vector invertebrado

3. epidemiologia

a) Señale los factores que favorecen la transmisión de Leishmania peruviana. En el Perú

AF= valle de Cañete V= Lutzomyia sp. AP= Leishmania R= perro HS=hombre

Describa el nicho ecológico de leishmaniasis tegumentaria (UTA)

Comprende focos endémicos situados en las quebradas de la vertiente occidental de los Andes, desde la frontera con Ecuador hasta el valle de Cañete, en niveles altitudinales que van de los 1200 a los 3000 m.s.n.m. y en la vertiente oriental de los Andes desde los 900 m.s.n.m., bajando a toda la selva amazónica

b) señale en que departamento del Perú se encuentra esta parasitosis.

El estudio se llevó a cabo en pobladores de la localidad de Colasay (dpto. Cajamarca), área de transmisión andina, donde L. (V.) peruviana ha sido identificada, así como en residentes de Putina Punco, áreaselvática del dpto. de Puno

c) señale que factores favorecen la presencia de leishmaniasis tegumentaria en la selva del Perú

La actividad principal de los pobladores de la zona es la agricultura (árboles frutales, hortalizas) y la crianza de animales domésticos (cabras, cobayos, aves de corral y perros).

d) sobre leishmaniasis tegumentaria en el Perú complete el siguiente cuadro

Eventos Serrana(UTA)

Selvática

Localización de lesiones Cara,vulcaniforme y de bordes definidos

Miembros inferiores grandes de bordes ondulados

Pronostico 4 a 5 meses Orofaringea indefinidadEdad-sexo Niños Jóvenes de 20 a 40 añosOcupación Madereros en selvaUrbana o bosoca Cajamarca SamorasEspecie de Leishmania que la produce

peruviana brasiliensis

4. ponga nombre a los diversos eventos del ciclo de vida del esquema adjunto

PROTOZOOS

SARCOMASTIGOPHORA, MASTIGOPHORA, AMOEBIDA

En la primera parte de esta practica los alumnos revisaran flagelados del orden diplomonadida, trichomonadida y amebas del subphylum sarcodina

DESARROLLO:

A. giardia lamblia

1. observe preparaciones coloreadas de contenido intestina humano con G. lamblia. Localice el parasito y ponga nombres a las estructuras.

Estrcuturas que observa

A: Trofozoito vista ventral

B: Trofozoito vista de perfil

Describa la forma de los cuerpos medianos

Los cuerpos medianos de giardia lambia son en forma de barras

2. observe una preparación de heces humanas con quiste de G.lamblia. localice el parasito y dibuje y rotule sus estrucutras

Quiste de giardia lambia

C y D: quistes inmaduros

E: quiste maduro

Cuales son los daños que produce G.lamblia en el hombre

Giardiasis aguda: un síndrome diarreico explosivo con eses liquidas pastosas pálidas y fétidas

Giardiasis crónica: se presenta cuando la vellosidad intestinal ha sido dañada y hay una gran inflamación presentándose el síndrome de mala absorcion

Que métodos se utilizan en le diagnostico de giardiasis humana

Examen seriado de heces

Examen diracto al fresco con suero fisiológico

Método de baerman

Metodo de teleman

Examen de contenido duodenal

Examen de bilis

Serología: mediante ELISA

3. En el esquema adjunto del ciclo de vida de G.lamblia ponga nombres a los diferentes eventos

B. Giardia muris:

1. Observar un fortis de contenido duodenal de R. rattus con G.muris localice al parasito y haga un esquema y ponga nombres a sus diferentes estructuras.

Estructuras observadas

Describa la forma de los cuerpos medianos

Los cuerpos medianos de giardia muris son de forma redonda

Detrás de los discos, cerca del centro del Trofozoito, se puede notar un par de estructuras grandes en forma de bastón, curvas, transversas y que tiñen oscuras; éstas se conocen como cuerpos medianos, que son únicos del género Giardia

2. Observe una preparación al fresco de contenido duodenal de R.rattus con G.muris describa su movimiento.

Debido a la presencia de varios pares de flagelos el parasito giardia muris presenta una capacidad de movimiento vibratorio rotatorio

3. Responda:

Que es el canal ventral

En una concavidad que se origina en al ventosa ventral y corre posteriormente terminando en la región caudal

Que es el surco marginal o ventrolateral

De la ventosa ventral salen unos micro filamentos en forma esperial compuesto principalmente de giardia y tubulina para terminar en el borde externo dando lugar a la fibra peristomal o lamela marginal.

Que es el área desnuda

La ventosa ventral es una concavidad en cuyo centro se distingue el área desnudad que el lugar donde se originan los micro filamentos

Como esta formado el disco suctorio

El disco suctorio o ventral es una estructura cóncava de 0,4 mm rígida que contacta con las microvellosidades intestinales. Contiene proteínas contráctiles, actina, miosina y tropomiosina, que constituyen la base bioquímica para la contracción del disco, implicada en la adherencia del trofozoíto al epitelio intestinal

Haga un esquema del ciclo de vida de giardia muris

C.trichomonas vaginalis:

1. observe un fortis de flujo vaginal coloreado con giemsa o leishman. Localice el parasito haga un esquema y coloque nombre a sus estructuras

Estrucutras que observa

Trofozoito: presenta un tamaño 10-20 μm de longitud y una morfología piriforme. Posee 5 flagelos: cuatro son anteriores y libres, y el quinto se dirige hacia la parte posterior del cuerpo celular asociado a la superficie celular formando una membrana ondulante que no tiene porción libre del flagelo. Paralelo a dicha membrana se dispone, en el interior de la célula, un haz de microtúbulos denominado costa.

2. señale los daños y sus mecanismos

La principal causa de la afección producida por T. vaginalis se encuentra en la acción mecánica del parásito sobre las mucosas genitales, que deriva en procesos inflamatorios, y en la acción tóxico-alérgica producida por las alteraciones citoplásmicas y nucleares de las células de las mucosas.

3. discuta con su isntructor sobre los factores que favorecen la trichomoniasis urogenital por T.vaginalis haga un resumen

Los principales factores que van a determinar el curso de la infección son el pH y la flora bacteriana de la vagina.

En este caso, el parásito no encuentra unas condiciones óptimas para su desarrollo por lo que la infección cursa en el hombre casi siempre de forma asintomática, por lo que es considerado un mero portador. En los excepcionales casos que presentan síntomas, éstos son producidos por una uretritis, una prostatitis o una epididimitis, que cursan con ardor al miccionar, secreciones

uretrales y edema prepucial. En estos casos, el parásito se ve favorecido cuando existe estrechez uretral.

D) tritrichomonas muris

1. haga un esquema y ponga nombres a los diferentes eventos del ciclo de vida de este parasito:

2. observe la preparación del contenido intestinal de R.rattus con T.muris ubique el parasito y ponga nombre a sus estructuras

Que es la membrana ondulante

Es un flagelo recurrente entero incorporado a lo largo del filamento accesorio dentro de la membrana ondulante

Que es y como esta formado el complejo kinetosomal

Cada flagelo está compuesto de un tronco central que contiene los

microtubulos llamado el AXONEME. El axoneme tiene una

envoltura que es una continuación de la membrana.

Cada axoneme sale del centriolo llamado KINETOSOME

(cinetosoma).

3. observe una preparación al fresco de contenido intestinal de R.rattus y ubique un trofozoitos de T.muris y describa su movimiento

Se observa que estos organismos al fresco tienen movimientos ameboideos y tienen como órgano de locomoción los flagelos

4. en la misma preparación observe quistes de T.muris dibújelo y ponga nobres a sus estructuras.

Estructuras que observa

5. responda

Que es pelta:

El núcleo, que posee un endosoma, está dispuesto en la zona anterior, cerca del punto de inserción de los flagelos. En las tinciones, el conjunto núcleo-cuerpo parabasal-axostilo (parte anterior)-pelta se suele teñir como una masa única.

Que función tiene el axostilo:

Estructura rígida de posición axial que constituye el sostén de algunos protozoos flagelados

6. haga un esquema sobre la ultra estructura de un trichomonadido y ponga nombres a sus elementos.

En esta segunda parte de la practica los alumnos revisaran el material de sarcodinos parasitos de hombre y de otros vertebrados.

Desarrollo

1. observe trofozoitos coloreados de amebas de heces humanas dibuje y rotule

Estructuras observadas

2. observe trofozoitos de E.histilytica en cortes histológicos de intestino grueso humano y anote

Estrucutras que observa

3. observe quiste de amebas

En heces humanas y señale

Especies E.HISTOLITICA

Numero de nucleos 4 NUCLEOS

Características del núcleo con un cariosoma de posición central Y gránulos de cromatina periféricos

Vacuola de glicógeno Si

Cuerpos cromatoidales Si los cuales tienden a desaparecer con al maduración del quiste

Otros Carecen de mitocondria

4. Que daño ocasiona la E.histolytica en el intestino grueso del hombre

• Asintomático (portadores sanos?)

• Sintomático

– Intestinal ( colon y recto)

• síndrome diarreíco,s. disentérico ( diarrea con sangre)

• diarrea crónica no disentérica

– Extraintestinal (metástasis vía sanguínea o linfática)

• Hepático:” Absceso hepático amebiano”

• otros: pulmón, cerebro, corazón, piel , etc.

5. Que mecanismos utiliza la ameba para dañar el intestino grueso del hombre

Colonización del epitelio colónico: lectina Adherencia:

Adesina inhibida por la N-acetil-galactosamina Adesina inhibida polímeros de N-acetil-glucosamina

Citólisis: con destrucción de la membrana celular (contacto). Formación de úlcera

Aumento intracelular de Ca++

Aumento de la Ulcera: citólisis por hemolisinas, proteasas (cisteínas-proteínasas) y proteínas formadoras de poros.

6. Que diferencias se encuentra entre los trofozoitos de E.histolytica y E.dispar

Patrones de isoenzimas, particularmente la hexocinasa.

Epitopos específicos, reconocidos por la reacción con varios anticuerpos monoclonales.

Diferentes secuencias en el rDNA del episoma.

Diferencias significativas en las secuencias entre genes homólogos (2-18%).

Un número pequeño de genes, por ejemplo ariel (Willhoeft et al 1999 citado por Ackers, 2002) y cp5 (Bruchhaus et al 1996; Willhoeft et al 1999 citados por Ackers, 2002) aparecen mas lejos en E. histolytica.

Ha sido mas fácil adaptar E. histolytica al crecimiento axénico. Los cultivos axénicos de E. dispar son extremadamente difíciles y solo se ha logrado una cepa (Clark 1995, citado por Ackers, 2002).

Al realizar una examinación con el microscopio electrónico de los cultivos axénicos de ambas especies se aprecian diferencias significativas en la superficie (Clark et al 2000, citado por Ackers, 2002). Esto puede relacionarse a la evidente carencia superficial de lipofosfoglicano (LPG) de E. dispar.(Bhattacharya et al 2000, citado por Ackers, 2002).

7. En que consiste el medio axenico para el cultivo de E.histolytica y cuales son sus ventajas.

Medio axenico: procedimiento de fermentacion con un cultivo de masa continuo de organismos ciliados (protozoos) para la produccion de sustancias de valor biogenicas.

Mantenimiento del parásito en medio axénico: Los parásitos se mantuvieron en el laboratorio mediante pases sucesivos cada diez días, en tubos con medio de cultivo bifásico Tobie y RE1, suplementado con suero fetal bovino al 4%. Se utilizó incubadora con temperatura de 24[grados] C y humedad relativa del 60%. También se hizo seguimiento de supervivencia del cultivo a temperatura de 30 C y 36.5 C.

8. Ponga nombres a las diversas fases del ciclo de vida de E.histolytica.

Los quistes, con 15 µm, son formas esféricas, resistentes excretadas con las heces por personas infectadas. Tras ingerir agua o alimentos contaminados, pasa sin modificación por el ambiente ácido del estómago, hasta la porción inicial del colon, el ciego, donde se induce a su transformación en metaquistes, los cuales rápidamente se divide en ocho trofozoitos (de 50 µm), también amébicos. Los trofozoitos se adhieren fuertemente a la mucosa del colon, multiplicándose y pudiendo causar muchas dolencias. Algunos metaquistes se transforman en formas quísticas, que no se adhieren a la mucosa y son expelidas en las heces.

PHYLUM APICOMPLEXA

En esta practica los alumnos revisaran material de esporozoarios los cuales en su totalidad son parasitos tanto en invertebrados como en vertebrados el ciclo de vida puede ser monoxeno o heteroxeno

A: Monocystis lumbrici

1. señale los eventos por los cuales pasa esta gregarina en su desarrollo.

Los trofozoitos se localizan en las vesículas seminales de lombricus terrestres luego se su maduración se convierten en gametocitos los cuales son de igual forma fusionándose y secretando una cubierta quística tomando el nombré de gametocisto internamente se observa una división interna del núcleo dando lugar ha esporos inmaduros hasta contener esporozoitos

Diseque una lombriz de tierra; localice las vesículas seminales y haga un preparado de ellas sobre una lámina portaobjeto. Observe al microscopio identifique los estadios de la gregarina dibuje y ponga nombres a sus estructuras

A. otras gregarinas

1. diseque un insecto (coleóptero, capi. Ect) localice el tubo digestivo y haga un esquema del mismo sobre un alamina portaobjeto observe al microscopio y ponga nombres a las gregarinas dibuje y ponga nombres a sus partes

ESTRUCTURAS QUE OBSERVA

2. conserve con su instructor sobre el grupo al cual pertenecen las gregarinas observadas

Clase Gregarina

– extracelulares

– en invertebrados

– Gregarina

C. coccidias

1. haga el ciclo de vida de una coccidia:

2. observe al microscopio ooquistes de coccidias esquematice y ponga nombres a sus estructuras:

ESTRUCTURAS QUE OBSERVA

o Analice la taxonomía de la

coccidias que esta usted observando

3. Observe al microscopio un extendido de deposiciones humanas con ooquistes

de criptosporidium sp dibuje y ponga nombres a sus estructuras.

Aumento:100x Coloración: Ziehl-Neelsen Estadio: ooquiste Tamaño: 10um Contenido: esporozoitos

4. analice los daños que ocasionan estos parásitos luego los mecanismos de defensa del hospedero.

En personas inmunocompetentes, el tiempo que transcurre entre la aparición de los síntomas y la eliminación del ooquiste por las heces es de 18 días.

La duración de los síntomas es de una a tres semanas. Los síntomas incluyen: diarrea acuosa, náusea, vómitos, cefalea, fatiga,

anorexia y/o calambres intestinales.

5. Observe al microscopio un extendido de heces con ooquistes de isospora sp y ponga nombre a sus estructuras.

Aumento : 100 x

Tamaño: 20um

Estadio: sin esporular

Contenido: esorozoitos

D. SARCOCYSTIDAE: sarcocystis sp

(a) observe cortes histológicos de musculo de auquénido infectado con sarcocystis dibuje y ponga nombre a sus estructuras.

ESTRUCTURAS QUE OBSERVA

(b) haga un esquema del ciclo de vida de este parasito

Ciclo Evolutivo de Sarcocystis sp. Desarrollo en Huéspedes Definitivos.

Toxoplasma gondii

1. observe al microscopio un frotis de exudado peritoneal de ratón inoculado con T. gondii esquematice y ponga nombres a sus estructuras.

Estructuras observadas

Los taquizoitos son formas mótiles que forman quistes en tejidos infestados por

toxoplasma, y otros parásitos. Los taquizoitos se encuentran en vacuolas dentro de las

células infestadas

2. observe al microscopio cortes histopatologicos de cerebro de rata infectado con T.gondii localice el parasito haga un esquema.

Corte histológicos de cerebro de rata infectado con T.gondii

3. Que daños ocasiona este parasito en el hombre y cuales son sus mecanismos

Las infecciones por T. gondii tienen la facultad de cambiar el comportamiento de ratas y ratones, haciendo que se acerquen, en vez de huir del olor de los gatos. Este efecto es de beneficio para el parásito, el cual puede reproducirse sexualmente si es ingerido por el gato.

4. Indique los mecanismos de defensa del hospedero:

5. cuales son los métodos de diagnostico directo e indirectos, en el hombre en el gato y en los animales:

Métodos directos: biopsia, PCR, inoculación en animales

Métodos indirectos: serología, curva serológica, seroconversión

Ciclo biológico de toxoplasma gondii

E. haemosporina:

En esta segunda parte de la practica los alumnos revisaran protozoarios de las familias plasmodidae y haemoproteidae que son los organismos del paludismo y relacionados.

1. plasmodium sp.

(a) observe al microscopio frotis y gota gruesa de sangre de personas infectadas con P. vivax, P. falciparum y P. malariae:

Las ilustraciones muestran las características de las cuatro especies.

Puntos a considerar en el diagnóstico

1. Las células rojas no se agrandan. 2. Los anillos lucen finos y delicados.

3. Puede haber varios en una célula.

4. Algunos anillos pueden tener dos puntos de cromatina.

5. Presencia de formas marginales.

6. Es infrecuente ver formas en desarrollo en frotis de sangre periférica.

7. Los gametocitos tienen un aspecto de salchicha característico.  Sin embargo, generalmente no aparecen en la sangre antes de las primeras cuatro semanas de la infección.

8. Los puntos de Maurer pueden estar presentes.

Puntos a conciderar en el diagnóstico

1. Las células rojas que contienen parásitos usualmente se agrandan. 2. Los puntos de Schuffner están con frecuencia presentes en las

células rojas tal como se muestra arriba.

3. Las formas de anillo maduras tienden a ser grandes y gruesas.

4. Las formas en desarrollo están presentes con frecuencia.

Puntos a conciderar en el diagnóstico

1. Las formas de anillo pueden tener un aspecto algo cuadrado. 2. Las formas en banda son características de esta especie.

3. Los esquizontes maduros pueden tener un aspecto típico de margarita con hasta diez merozoites.

4. Las células rojas no se agrandan.

5. El punto de cromatina puede estar en la superficie interna del anillo.

Puntos a conciderar en el diagnóstico

1. Encontrado solamente en África. 2. Células rojas agrandadas.

3. Formas de cometa son comunes (ver arriba y a la derecha).

4. Anillos grandes y gruesos.

5. Los puntos de Schuffner, cuando aparecen, pueden ser prominentes.

6. Los esquizontes maduros son similares a los de P. malariae pero más grandes y más gruesos.

Observe un corte histológico de hígado de vertebrado infectado con plasmodium sp

Dibuje y ponga nombres a sus estructuras

Sección del hígado mostrando una célula parenquimatosa aumentada de tamano repleta de merozoites (véase la flecha).

(c) señale los pasos para confeccionar una gota gruesa de sangre para el diagnostico de malria humana

El examen de una película gruesa de sangre debe ser el primer paso. Si se ven parásitos, entonces se examina el frotis fino para confirmar la especie.  La muestra de sangre se recoge preferiblemente cuando la temperatura del paciente este subiendo.

Preparación de la gota gruesa y frotis fino de sangre:

Gota gruesa:- Coloque una gota de sangre en el centro de una lamina limpia de microscopio.  Con la esquina de una segunda lamina riegue la gota hasta que adquiera el tamano de una una moneda de cinco centavos.  El espesor debe ser tal que permita ver apenas la impresión del periodico a traves de la lamina.  Los frotis finos se hacen de manera estándar.  Permita que los preparados se sequen, pero no se vaya del laborarorio si hay mozcas.  De lo contrario éstas se pueden comer el preparado.

(d) Analice el daño que producen estos parásitos sus mecanismos luego el mecanismo o mecanismos de defensa del hospedero vertebrado.

Las consecuencias patológicas de la infección malárica están asociadas con la destrucción del eritrocito, que guía a la anemia y el colapso vascular; en malaria por P. falciparum es común el bloqueo de capilares del cerebro dando origen a un complejo patológico denominado malaria uuuuuucerebral. Otras manifestaciones secundarias incluyen nefrosis por daño mediado por complejos inmunes (Wakelin, 1984).

En las enfermedades autoinmunes en las que los autoanticuerpos juegan un papel principal, las células B patogénicas son guiadas por las células T. Sin embargo, el mecanismo subyacente de estas enfermedades se aclararía si los inmunógenos que disparan las células T autoinmunes fueran identificadas. (Sercarz y Datta, 1994). Izui (1994) realiza una distinción importante entre autoanticuerpos anti-eritrocitos que se unen a la superficie de células rojas y autoanticuerpos naturales, no

patogénicos, que se unen a determinantes enterrados en los eritrocitos y que son expuestos por enzimas

(e) Señale los principales eventos en el ciclo de malaria en el esquema adjunto

2. haemoproteus columbae

(a) señale las fases de desarrollo de este parasito

El ciclo se caracteriza porque la esquizogonia se desarrolla en las células endoteliales de los vasos sanguíneos y los gametocitos parasitan a los eritrocitos. En palomas adultas no les afecta pero en pichones puede causar mortalidad

(b) observe al microscopio un fortis de sangre de paloma infectada con H.columbae ubique el parasito y ponga nombre a sus estructuras

Photomicrographs of gametocytes of Haemoproteus columbae in erythrocytes of Zenaida auriculata. A: microgametocyte; B: macrogametocyte. Bar = 10 µm