… Tuberkulose und ihrer Resistenzen

Rasche Diagnostik von …

Tuberkulose

Unsere molekulargenetischen Testsysteme für ein effizientes TB-Screen-ing und die anschließende Detektion von MDR- oder XDR-TB.

FluoroType® MTB ist das innovative Testsystem für jedes Labor, da es den direkten Nachweis des M. tuber-culosis (MTB)-Komplexes ermöglicht. Eine weiterführende Resistenztestung ist mit GenoType MTBDRplus und GenoType MTBDRsl, den weltweit etablierten Tests zur Bestimmung von MDR- und XDR-TB, möglich.

TBCheck MPT64 ist ein zuverlässiger Test zur Detektion des M. tuberculosis-Komplexes direkt aus Kultur. Nach Bestätigung eines MTB-Komplexes ist eine weitere Differenzierung auf PCR-Basis mit GenoType MTBC möglich.

Ihre Vorteile mit der TB-Produktreihe von Hain Lifescience• Rasche und sichere Ergebnisse

• Stufen-Diagnostik

• Kosteneffizienz

• CE-Kennzeichnung

„Diese Testsysteme dürfen in Ihrem Labor nicht fehlen!“

TB-ScreeningTB-Produktreihe

TB-Produktreihe Tuberkulose (TB) ist weltweit eine der häufigsten Infektionskrankeiten. Ein einzelner Patient mit einer offenen TB kann 10 bis 15 weitere Menschen pro Jahr anstecken. Vier Parameter sind für die Eindämmung der Krankheit wichtig:

• Frühzeitige Diagnose

• Infektionsprävention

• Wirksame Therapie mit Antituberkulotika

• Vorbeugende Maßnahmen zur Verhinderung von Resistenzentwicklungen

Die TB-Produktreihe von Hain Lifescience bietet rasche, einfache und kosteneffiziente Diagnostiksysteme als Grundlage für die effektive Behandlung und Eindämmung der Tuberkulose.

TB-Screening

Eine frühzeitige und verlässliche Diagnostik ist die Basis für eine adäquate und damit erfolgreiche Behandlung der Tuberku-lose. Kulturelle Methoden sind zeitaufwändig und mühsam. Dagegen haben sich Tests auf Basis der Nukleinsäure-Amplfika-tion, welche ein rasches Screening erlauben, in der Praxis bewährt. Das Testsystem FluoroType® MTB nutzt die PCR und eine innovative fluoreszenzbasierte Technologie zur Detektion des M. tuberculosis-Komplexes direkt aus pulmonalen und extrapulmonalen klinischen Proben. Ergebnisse liegen bereits innerhalb von nur drei Stunden vor, deshalb ist FluoroType® MTB der ideale TB-Screening-Test.

Resistenztestung

Die Zunahme von multiresistenter (MDR-)TB ist ein alarmierendes und anhaltendes globales Problem. Eine MDR-TB liegt vor, wenn die TB-Erreger mindestens gegen die beiden wichtigsten First-Line-Antituberkulotika, Rifampicin und Isoniazid, resistent sind. Um die weitere Verbreitung resistenter TB zu verhindern und die wirksamste Therapie einsetzen zu können, ist ein rascher und direkter Nachweis der MDR-TB zwingend erforderlich. GenoType MTBDRplus basiert auf PCR und der DNA•STRIP-Technologie und ermöglicht die Detektion des M. tuberculosis-Komplexes und dessen Resistenz gegen Rifampicin und Isoni-azid aus klinischen Proben. Unter einer extrem-resistenten (XDR-)TB versteht man eine MDR-TB mit zusätzlichen Resistenzen gegen Fluorchinolone und einem Second-Line-Antituberkulotikum (Amikacin, Kanamycin oder Capromycin). Diagnostik und Behandlung einer XDR-TB sind noch schwieriger, da es praktisch keine Therapiemöglichkeit mehr gibt. GenoType MTBDRsl kann direkt im Anschluss an GenoType MTBDRplus mit demselben DNA-Isolat durchgeführt werden – so ist eine effiziente Testung auf XDR-TB möglich.

Kulturidentifizierung

Die Kulturbestätigung spielt immer noch eine wichtige Rolle in-nerhalb der TB-Diagnostik. Der TBCheck MPT64 Assay detektiert und bestätigt den M. tuberculosis-Komplex mit Hilfe des MPT64-Antigens aus Kulturmaterial. Abhängig von diesem Ergebnis kann eine weiterführende Diagnostik veranlasst werden.

Differenzierung

Früher war eine routinemäßige Differenzierung des M. tuberculosis-Komplexes nur über phänotypische und biochemische

Methoden möglich, was sehr mühsam und zeitauf-wändig ist. GenoType MTBC ist ein PCR-Test zur Differenzierung des M. tuberculosis-Komplexes aus

Kulturproben.

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DNA-Isolierung Amplifikation und Detektion Ergebnisse nach ca. 3 Stunden

FluoroCycler® ReportFluoroType® MTB

Interpretation

MTB complex DNA detected

Fluoreszenzbasiertes molekulargenetisches Testsystem für den Direktnachweis des M. tuberculosis-Komplexes

Leistungsmerkmale des FluoroType® MTB

FluoroType® MTB ermöglicht den molekulargenetischen Nachweis des M. tuberculosis-Komplexes direkt aus pulmo-nalen und extrapulmonalen Patientenproben. Die Detektion erfolgt über das IS6110-Element. Der Test ist schnell, ein-fach durchzuführen und sehr sensitiv.

Ihre Vorteile mit dem FluoroType® MTB

• Schnell: Das Testergebnis liegt innerhalb von 3 Stunden vor und verschafft Ihnen so einen entscheidenden Zeitvorteil in der TB-Diagnostik.

• Anwenderfreundlich: Ein gebrauchsfertiger Amplifikationsmix mit Taq-Polymerase ist bereits im Kit enthalten. Die Testdurchführung ist einfach und für einen niedrigen bis hohen Probendurchsatz geeignet. Die Amplifikation und Detektion laufen vollautomatisiert in einem geschlossenen System ab.

• Flexibel: Sie haben die Wahl zwischen einer manuellen Isolierung mittels FluoroLyse und einer automatisierten DNA-Extraktion mit Hilfe des Nukleinsäure-Isolierungsautomaten GenoXtract®.

Testprinzip des FluoroType® MTBFluoroType® MTB basiert auf PCR und der FluoroType®-Technologie. Hierzu wird mykobakterielle DNA aus dem Probenmaterial isoliert und mittels PCR selektiv vervielfältigt. Die Detektion erfolgt über die Hybridisierung fluores-zenzmarkierter Sonden an einzelsträngige Amplifikate. Während der anschließenden Schmelzkurvenana lyse lösen sich die Sonden bei einer spezifischen Temperatur vom Amplifikat. Dies führt zur Abnahme der Fluoreszenz, welche im FluoroCycler® gemessen wird. Die Auswertung und Ergebnisinterpretation übernimmt die testspezifische Fluoro-Software®. Das bedeutet maximale Anwenderfreundlichkeit und eine effiziente Diagnostik mit sicheren Ergeb-nissen auf einen Blick.

FluoroType® MTB

Direktnachweis und Resistenztestung

GenoType MTBDRplus

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Leistungsmerkmale des GenoType MTBDRplus

Der GenoType MTBDRplus Test ermöglicht den gemeinsamen, molekulargenetischen Nachweis

• des M. tuberculosis-Komplexes, sowie

• dessen Resistenz gegen Rifampicin durch die Detektion der wichtigsten Mutationen im rpoB-Gen

• dessen Resistenz gegen Isoniazid. Zur Identifizierung einer „high-level“ Isoniazid-Resistenz wird das katG-Gen und für die „low-level“ Isoniazid-Resistenz die Promotorregion des inhA-Gens untersucht.

Die Analyse erfolgt direkt aus mikroskopisch-positiven oder -negativen, pulmonalen Patientenproben oder Kulturmaterial.

Test

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Ihre Vorteile mit dem GenoType MTBDRplus

• Effizient: Der MTB-Komplex und dessen Resistenz gegenüber Rifampicin und/oder Isoniazid werden gleichzeitig aus einer Patientenprobe nachgewiesen. Der Test ist daher hervorragend für das MDR-TB-Screening, zur Identifizierung des MTB-Komplexes sowie zum Aufdecken von Monoresistenzen geeignet. Als Ausgangsmaterial können pulmonale Direkt- und Kulturproben verwendet werden.

• Schnell: Ergebnisse liegen innerhalb weniger Stunden vor im Vergleich zu mehreren Monaten bei konventioneller Empfindlichkeitsprüfung.

• Anwenderfreundlich: Ein gebrauchsfertiger Amplifikationsmix inklusive Taq-Polymerase ist bereits im Kit enthalten.

• Flexibel: Sie haben die Wahl zwischen einer manuellen DNA-Isolierung oder einer automatisierten Extraktion mit dem Nukleinsäure-Isolierungsautomaten GenoXtract®. Amplifikation, Detektion und Auswertung können automati-siert werden. Der Test ist daher hervorragend für kleine bis große Serienlängen geeignet.

• Kosteneffizient: Für die Implementierung ist keine teure Geräteausstattung erforderlich, daher ist eine kostengün-stige Etablierung für Labore jeder Größe möglich.

Molekulargenetisches Testsystem zum Nachweis des M. tuberculosis-Komplexes und dessen Resistenz gegen Rifampicin und/oder Isoniazid

Resistenz R = RifampicinI = Isoniazid

- R+I R+I R+I

5421

I

3

KonjugatkontrolleAmplifikationskontrolle

-Komplex

Locuskontrolleildtypsondeildtypsondeildtypsondeildtypsondeildtypsondeildtypsondeildtypsondeildtypsonde

Locuskontrolleildtypsonde

Locuskontrolleildtypsondeildtypsonde

Farbmarkierung

M. tuberculosis

W 1W 2W 3W 4W 5W 6W 7W 8Mutationssonde 1Mutationssonde 2AMutationssonde 2BMutationssonde 3

WMutationssonde 1Mutationssonde 2

W 1W 2Mutationssonde 1Mutationssonde 2Mutationssonde 3AMutationssonde 3B

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KonjugatkontrolleAmplifikationskontrolle

-Komplex

Locuskontrolleildtypsondeildtypsondeildtypsondeildtypsondeildtypsondeildtypsondeildtypsondeildtypsonde

Locuskontrolleildtypsonde

Locuskontrolleildtypsondeildtypsonde

Farbmarkierung

M. tuberculosis

W 1W 2W 3W 4W 5W 6W 7W 8

Mutationssonde 1Mutationssonde 2AMutationssonde 2BMutationssonde 3

WMutationssonde 1Mutationssonde 2

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Testprinzip des GenoType MTBDRplus

GenoType MTBDRplus basiert auf PCR und der DNA•STRIP-Technologie. Die mykobakterielle DNA wird aus dem Pro-benmaterial isoliert, mittels PCR spezifisch vervielfältigt und über eine reverse Hybridisierung und eine enzymatische Farbreaktion auf einem Membranstreifen detektiert.

Direktnachweis und Resistenztestung

GenoType MTBDRsl

Ihre Vorteile mit dem MTBDRsl

• Sensitiver Nachweis: Die erste Version des GenoType MTBDRsl kann mit mikroskopisch-positiven pulmonalen Pro-ben oder Kulturproben abgearbeitet werden. GenoType MTBDRsl VER 2.0 ist sogar noch sensitiver und kann deshalb zusätzlich auch für mikroskopisch-negative pulmonale Proben eingesetzt werden.

• Effiziente Diagnostik: Beide Testsysteme eignen sich hervorragend zur Identifikation von Patienten mit XDR-TB, bei nachgewiesener MDR-TB. Zur stufenweisen Diagnostik ist es möglich, GenoType MTBDRsl im Anschluss an GenoType MTBDRplus abzuarbeiten, wobei dasselbe DNA-Isolat verwendet werden kann.

• Flexible Abarbeitung: Abhängig vom Probendurchsatz haben Sie die Wahl zwischen einer manuellen und einer au-tomatisierten Abarbeitung.

• Rasche Ergebnisse: Ergebnisse liegen innerhalb weniger Stunden vor – im Vergleich zu mehreren Wochen bei Ver-wendung konventioneller Methoden ist dies ein enormer Zeitvorteil.

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Molekulargenetisches Testsystem zum Nachweis des M. tuberculosis-Komplexes und dessen Resistenz gegen Fluorchinolone, Aminoglykoside/zyklische Peptide (und/oder Ethambutol)

Testprinzip des GenoType MTBDRslGenoType MTBDRsl basiert auf PCR und der DNA•STRIP-Technologie: Die mykobakterielle DNA wird aus dem Pro-benmaterial isoliert, mittels PCR spezifisch vervielfältigt und über eine reverse Hybridisierung sowie eine enzyma-tische Farbreaktion auf einem Membranstreifen detektiert.

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Konjugatkontrolle (CC)Amplifikationskontrolle (AC)M. tuberculosis-Komplex (TUB)

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Farbmarkierung

Konjugatkontrolle (CC)Amplifikationskontrolle (AC)M. tuberculosis-Komplex (TUB)

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Farbmarkierung

Konjugatkontrolle (CC)Amplifikationskontrolle (AC)M. tuberculosis-Komplex (TUB)

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Farbmarkierung

Konjugatkontrolle (CC)Amplifikationskontrolle (AC)M. tuberculosis-Komplex (TUB)

gyrA Locuskontrolle (gyrA)gyrA Wildtypsonde 1 (gyrA WT1)gyrA Wildtypsonde 2 (gyrA WT2)gyrA Wildtypsonde 3 (gyrA WT3)gyrA Mutationssonde 1 (gyrA MUT1)gyrA Mutationssonde 2 (gyrA MUT2)gyrA Mutationssonde 3A (gyrA MUT3A)gyrA Mutationssonde 3B (gyrA MUT3B)gyrA Mutationssonde 3C (gyrA MUT3C)gyrA Mutationssonde 3D (gyrA MUT3D)

gyrB Locuskontrolle (gyrB)gyrB Wildtypsonde 1 (gyrB WT1)gyrB Mutationssonde 1 (gyrB MUT1)gyrB Mutationssonde 2 (gyrB MUT2)

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eis Locuskontrolle (eis)eis Wildtypsonde 1 (eis WT1)eis Wildtypsonde 2 (eis WT2)eis Wildtypsonde 3 (eis WT3)eis Mutationssonde 1 (eis MUT1)

FarbmarkierungUnterschiede zwischen beiden Versionen sind rot markiert

GenoType MTBDRsl VER 1.0 GenoType MTBDRsl VER 2.0

M. tuberculosis-Komplex und dessen Re-sistenz gegen Fluorchinolone, Aminoglyko-

side/zyklische Peptide und Ethambutol

mikroskopisch-positive pulmonale Proben, Kulturproben

-

-

M. tuberculosis-Komplex und dessen Re-sistenz gegen Fluorchinolone und Ami-

noglykoside/zyklische Peptide

mikroskopisch-positive und -negative pulmonale Proben, Kulturproben

-

Mutationen im embB-Gen, die eine Ethambutol-Resistenz bedingen

Mutationen im gyrB-Gen, die eine Fluorchinolon-Resistenz bedingen

Mutationen im eis-Gen, die eine Kanamycin-Resistenz bedingenKanamycin

Fluorchinolone

Ethambutol

Nachweis von

Material

Identifizierung aus Kultur

TBCheck MPT64

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Leistungsmerkmale des TBCheck MPT64

Der TBCheck MPT64 Assay erlaubt die Identifizierung des MPT64-Antigens aus Flüssigkulturen. Dieses Antigen ist hoch-spezifisch für den M. tuberculosis-Komplex und daher geeignet für dessen Identifizierung direkt aus Kulturpro-ben. Da das MPT64-Antigen nur im MTB-Komplex vorkommt, ist eine Abgrenzung nichttuberkulöser Mykobakterien möglich.

Ihre Vorteile mit dem TBCheck MPT64

• Rasche Detektion: TBCheck MPT64 erlaubt eine rasche Detektion des M. tuberculosis-Komplexes und somit die Abgrenzung von NTM innerhalb von 10 Minuten. Schnelle Ergebnisse sind garantiert und eine weiterführende Testung ist sofort möglich.

• Hinweis für weiterführende Diagnostik: Das Ergebnis des TBCheck MPT64 ermöglicht die fundierte Wahl weiter-führender Diagnostikschritte. So ist, abhängig vom Ergebnis, eine Differenzierung des M. tuberculosis-Komplexes oder von NTM angezeigt.

• Bestätigung: Der Test kann verwendet werden, um im Vorfeld einer Resistenztestung M. tuberculosis-Komplex zu bestätigen.

Rascher chromatographischer Immunoassay zum Nachweis des M. tuberculosis-Komplexes

Testprinzip des TBCheck MPT64

TBCheck MPT64 basiert auf einem chromatographischen Immunoassay. Ein Tropfen der positiven Kultur wird auf einen Lateral-Flow-Streifen aufgebracht. Auf dem Steifen werden die sekretierten MPT64-Antigene mit Goldpartikel markiert und wandern dann zu einer spezifischen Bindestelle. Diese Reaktion führt zu einer Gold-Akkumulation an der Bindestelle und anschließend zu einer sichtbaren Bande auf dem Streifen. Die Kontrollbande zeigt die Effizienz der Goldbindung an und garantiert so immer valide Ergebnisse.

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Inkubation der Probe Ergebnisse in 10 MinutenPositive Kultur

10 min.10 min.

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UniversalkontrolleMTBC

Konjugatkontrolle

ssp.ssp.

M. tuberculosis/

M. canetti

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Identifizierung und Differenzierung aus Kultur

GenoType MTBCMolekulargenetisches Testsystem zur Differenzierung des M. tuberculosis-Komplexes

Leistungsmerkmale des GenoType MTBC

GenoType MTBC erlaubt den gleichzeitigen Nachweis und die Differenzierung der zum M. tuberculosis-Komplex ge-hörenden Spezies: M. tuberculosis, M. bovis ssp. bovis, M. bovis ssp. caprae, M. africanum, M. microti, M. canetti und des Impfstamms M. bovis ssp. BCG (Bacille Calmette-Guérin) direkt aus Kulturproben.

Ihre Vorteile mit dem GenoType MTBC

• Effizient: Gemeinsame Detektion und Differenzierung der Spezies des M. tuberculosis-Komplexes in einem Arbeits-gang. Als Ausgangsmaterial können sowohl Fest- als auch Flüssigkulturen verwendet werden.

• Schnell: Das Ergebnis liegt bereits nach ca. fünf Stunden vor im Vergleich zu mehreren Wochen mit konventionellen Methoden.

• Zuverlässig: Hohe diagnostische Sicherheit durch interne Kontrollen.

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pTestprinzip des GenoType MTBC

GenoType MTBC basiert auf PCR und der DNA•STRIP-Technologie. Die mykobakterielle DNA wird aus dem Kultur-material isoliert, mittels PCR spezifisch vervielfältigt und über reverse Hybridisierung und eine enzymatische Farb-reaktion auf einem Membranstreifen detektiert. Valide Ergebnisse werden durch die Konjugatkontrolle dokumen-tiert. Die Universalkontrolle zeigt das Vorhandensein von Mykobakterien und grampositiven Bakterien mit hohem G+C-Gehalt an. Die MTBC-Kontrolle zeigt, dass Vertreter des MTB-Komplexes vorhanden sind.

Spezifische Gensonden zur Differenzierung des MTB-Komplexes

M. bovis

ssp. BCG

Hain Lifescience GmbHHardwiesenstraße 1 | 72147 NehrenTel.: 0 74 73- 94 51- 0 | Fax: 0 74 73- 94 51- 31E-Mail: info@hain-lifescience.de | www.hain-lifescience.de

Mykobakterien-Produktreihe

TB-Screening

FluoroType® MTB Nachweis des MTB-Komplexes aus Patientenproben

Resistenztestung

GenoType MTBDRplus Nachweis des MTB-Komplexes und dessen Resistenz gegen Rifampicin und/oder Iso-

niazid aus Patientenproben oder Kultur

GenoType MTBDRsl VER 1.0 Nachweis des MTB-Komplexes und dessen Resistenz gegen Fluorchinolone, Amino-glykoside/zyklische Peptide und/oder Ethambutol aus Patientenproben oder Kultur

GenoType MTBDRsl VER 2.0 Nachweis des MTB-Komplexes und dessen Resistenz gegen Fluorchinolone, Amino-glykoside/zyklische Peptide aus Patientenproben oder Kultur

Differenzierung

GenoType MTBC Differenzierung des MTB-Komplexes aus Kultur

GenoType Mycobacterium CM Nachweis des MTB-Komplexes und 24 klinisch relevanter NTM aus Kultur

GenoType Mycobacterium AS Nachweis von 19 weiteren NTM aus Kultur

Kulturidentifizierung

TBCheck MPT64 Nachweis des MTB-Komplexes aus Kultur

Lepra

GenoType LepraeDR Nachweis von M. leprae und dessen Resistenz gegen Rifampicin, Ofloxacin und/oder

Dapson aus Patientenproben

Für weitere Fragen sind wir gerne unter info@hain-lifescience.de oder Tel. 0 74 73- 94 51- 0 für Sie da.

Mykobakterien-Produktreihe

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