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Universidad Nacional Federico Villarreal Facultad de Odontología ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DE LA CLORHEXIDINA AL 0.12% FRENTE AL Streptococcus mutans EN SALIVA, LUEGO DEL USO DE UNA PASTA DENTAL QUE CONTENGA LAURIL SULFATO DE SODIO. TESIS PARA OBTENER EL GRADO DE CIRUJANO DENTISTA PRESENTADA POR EL BACHILLER: PANEZ BERAÚN, ALCIDES LIMA- PERÚ 2009

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Universidad Nacional Federico Villarreal Facultad de Odontología

ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DE LA CLORHEXIDINA AL 0.12% FRENTE

AL Streptococcus mutans EN SALIVA, LUEGO DEL USO DE UNA PASTA

DENTAL QUE CONTENGA LAURIL SULFATO DE SODIO.

TESIS PARA OBTENER EL GRADO DE

CIRUJANO DENTISTA

PRESENTADA POR EL BACHILLER:

PANEZ BERAÚN, ALCIDES

LIMA- PERÚ

2009

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AGRADECIMIENTOS

A todas aquellas personas que gracias

a sus enseñanzas, su plena confianza y

su apoyo constante han hecho posible

la realización del presente trabajo.

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3

DEDICATORIA

Esta tesis esta dedicada con todo el

amor, a mis padres Teófilo Panez y

Estelista Beraùn, y a mis hermanos,

por su constante comprensión, apoyo

y cariño.

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MIEMBROS DEL JURADO

Mg. CD. MARÍA INÉS CASTRO HURTADO (PRESIDENTE)

Mg. CD. VÍCTOR ÁLVAREZ TAPIA (SECRETARIO)

Mg. CD. MARÍA ELENA MOSCOSO SÁNCHEZ (VOCAL)

CD. RENÁN LIÉBANO SEGURA (MIEMBRO DEL JURADO)

CD. MARCIAL ROMÁN QUISPE (SUPLENTE)

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ÍNDICE

• TÍTULO

• RESUMEN

• ABSTRACT № pág.

I. INTRODUCCIÓN 9

II. HIPÓTESIS 28

III. OBJETIVOS 29

IV. MATERIAL Y MÉTODO 30

V. RESULTADOS 40

VI. DISCUSIÓN 47

VII. CONCLUSIÓN 51

VIII. RECOMENDACIONES 52

IX. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 53

X. ANEXOS 57

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ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DE LA

CLORHEXIDINA AL 0.12% FRENTE AL

Streptococcus mutans EN SALIVA, LUEGO DEL

USO DE UNA PASTA DENTAL QUE CONTENGA

LAURIL SULFATO DE SODIO.

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RESUMEN

El objetivo de la presente investigación fue comparar la actividad

antimicrobiana entre la clorhexidina al 0.12% luego del uso de una pasta

dental que contenga lauril Sulfato de sodio, con el uso de la clorhexidina

sola frente al Streptococcus mutans en saliva, expresada en porcentajes

de inhibición de unidades formadoras de colonias por mililitro de saliva,

cultivadas en agar mitis salivarius. Este es un ensayo clínico,

comparativo, longitudinal y prospectivo, de diseño cruzado; en la cual se

tomaron muestras de saliva a 20 estudiantes, antes y 60 minutos después

de aplicada la prueba. Dicha prueba consistió en enjuagarse con una

solución de pasta dental o agua destilada como control, e inmediatamente

después con clorhexidina 0.12%.

Los resultados mostraron que el enjuague con clorhexidina 0.12%

inmediatamente después del uso de una pasta dental inhibió un 71,75%

±15.28, y para el grupo que utilizó la clorhexidina inmediatamente

después al agua destilada inhibió un 88.21% ± 8.04, diferencias

estadísticamente significativas (p<0.05).

Se recomienda no utilizar la clorhexidina 0.12% inmediatamente

después del uso de una pasta dental que contenga lauril sulfato de sodio.

Palabras clave: Clorhexidina, pasta dental, lauril sulfato de sodio,

Streptococcus mutans

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ABSTRACT

The aim of the present investigation was to compare the

antimicrobial activity between the chlorhexidine 0.12% after use of a

toothpaste slurry, containing sodium lauryl sulfate, and chlorhexidine

0.12% alone, reducing Streptococci mutans in saliva, expressed in

percentages of inhibition of colony forming unit per milliliter of saliva

isolated in mitis salivarius agar. This is a clinical trial, comparative,

longitudinal y prospective, 2 way crossover design; twenty students saliva

samples were recollected before and sixty minutes after applied the test.

The test consisted in rinsing with a toothpaste slurry or distilled water, and

immediately after with chlorhexidine 0.12%.

The results showed that chlorhexidine 0.12% rinsed immediately

after the use of a toothpaste reduced 71,75% ±15.28, and the group that

used chlorhexidine immediately after the use of distilled water reduced

88.21% ± 8.04, differences statistically significant (p<0.05).

Chlorhexidine 0.12% must not be recommended to rinse immediately

after the use of toothpaste containing sodium lauryl sulfate.

Key words: Chlorhexidine, toothpaste, sodium lauryl sulfate,

Streptococci mutans

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I. INTRODUCCIÓN

La caries dental y la enfermedad periodontal, las afecciones

prevalecientes de la dentición, hasta hace algunos años fueron tratadas

según medidas sintomáticas, es decir reparadoras. En la actualidad se ha

comprendido la etiología y la patogenia en sus aspectos importantes, y

se cuenta con métodos terapéuticos con los cuales se puede erradicar o

controlar los efectos causales y su recidiva. Las observaciones de

experimentos en animales y estudios longitudinales en seres humanos

demostraron que un tratamiento que incluya la eliminación o control de la

infección de la placa y la introducción de medidas más cuidadosas de

control de la placa genera, en la mayoría de los casos, la salud

periodontal.

El mecanismo clásico para el control de esta placa es un buen

cepillado con una pasta dental que posee diversos componentes, dentro

de ellos un detergente, el lauril sulfato de sodio que facilitará la remoción

de la placa. Sin embargo, en algunos casos donde el cepillado no es

suficiente, haciéndose necesario el empleo de auxiliares químicos que

pudiesen prevenir, retardar o reducir significativamente la formación de la

placa dental. Así, en estos pacientes, se hace necesario el empleo de

colutorios orales luego del cepillado con pasta dental. El colutorio de

mayor efectividad hasta el momento y aprobado por la ADA viene a ser la

clorhexidina al 0.12% que debido a sus excelentes propiedades

antibacterianas y en la inhibición de la formación de placa, se recomienda

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sobre todo en pacientes con enfermedad periodontal y alto riesgo de

caries, además de aquellos discapacitados que les es difícil cepillarse.

Existen algunos estudios que indican la existencia de

incompatibilidad de la clorhexidina, una molécula catiónica, con el lauril

sulfato de sodio, molécula aniónica y que es componente de las pastas

dentales, reduciendo así la propiedad de la clorhexidina de inhibir la

formación de placa. Es por eso que recomiendan el empleo de dicho

colutorio tras una espera de al menos media hora y poder hacer uso de

sus propiedades al máximo. Sin embargo no se ha encontrado estudios

que demuestre si la interacción de la clorhexidina con los componentes de

las pastas dentales también influye en las propiedades antibacterianas de

la clorhexidina. Es por ello que nuestro estudio pretende dar respuesta a

la siguiente pregunta:

¿Existirá disminución de la actividad antimicrobiana de la

clorhexidina 0.12% frente al Streptococcus mutans en saliva, luego

del uso de una pasta dental que contenga Lauril Sulfato de sodio, en

alumnos de la Preclínica de Periodoncia de la Facultad de

Odontología de la Universidad Nacional Federico Villarreal - 2009?

Los cúmulos blandos de bacterias se adhieren fuertemente a la

superficie dental, dando lugar a la llamada placa dental, mejor llamada

Biofilm dental desde fines del siglo XX. La adopción del término Biofilm

dental en odontología, dista mucho de ser una mera sustitución de la

expresión “placa bacteriana” por una nueva. La microbiología

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tradicionalmente ha estudiado las bacterias creciendo en forma

planctónica en cultivos de laboratorio y solo recientemente ha tomado en

cuenta que en el mundo real estas se agregan en comunidades

denominadas Biofilms. Entonces su comportamiento se muestra de un

modo muy diferente, haciendo patente que sus características son más

que la suma de sus propiedades individuales. (14)

La placa dental juega un rol clave en el entendimiento complejo

proceso por el cual ocurren las enfermedades más comunes de la cavidad

bucal. El concepto básico de estas enfermedades es semejante al de

otras patologías infecciosas y está enmarcado en el concepto de balance

existente entre la respuesta inmune por un lado y la patogénesis

microbiana por el otro. En salud, las respuestas inmunes del huésped son

suficientes para detener el potencial patogénico tanto de la microflora

normal residente como de los patógenos exógenos. Las enfermedades

infecciosas tales como la caries dental y la enfermedad periodontal

ocurren cuando este equilibrio se rompe. (31,13)

La importancia etiológica de la placa dental en la iniciación y

progresión tanto de la caries como de la enfermedad periodontal es

evidente; sin embargo, los estudios sugieren que los patógenos son

necesarios pero no suficientes para desarrollarlas. Algunas características

de los microorganismos, el medio ambiente local y la susceptibilidad del

huésped, juegan un papel importante en el equilibrio entre el huésped y

los microorganismos. Por otra parte, también es cierto que algunos

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microorganismos juegan roles claves en la patogénesis de estas

infecciones. La población bacteriana está en constante cambio y es

afectada entre otras cosas por la edad de los individuos, los hábitos de

higiene bucal, la dieta y la localización de los depósitos sobre los dientes.

(31,13)

La cavidad bucal contiene una de las más concentradas y variadas

poblaciones microbianas del organismo. Particularmente un gran número

de microorganismos son encontrados en el dorso de la lengua, alrededor

del surco gingival y en la superficie dentaria. A nivel del diente las

acumulaciones blandas, no calcificadas de bacterias y sus productos son

referidas como placa dental, definida como una masa bacteriana

fuertemente adherida a la superficie dentaria, y que no está formada

exclusivamente por restos alimenticios. Un concepto más dinámico es el

propuesto por Marsh y Martín en 1992 quienes señalan que la placa

dental es un término general para denominar a la comunidad microbiana

compleja encontrada sobre la superficie dentaria, embebida en una matriz

de polímeros de origen bacteriano y salival.(11,31)

La placa dental puede ser clasificada en términos de su localización

como supragingival y subgingival, de su potencial patógeno como

cariogénica o periodontopatogénica y de sus propiedades como

adherente o no adherente. Estas clasificaciones no son mutuamente

excluyentes, sin embargo, en general, la placa supragingival es adherente

y contiene una flora predominante Gram positiva, características de estos

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organismos cariogénicos. Por el contrario, la subgingival, está compuesta

en mayor cantidad de microorganismos Gram negativos, es menos

adherente que la supragingival y es preferentemente periodontopatógena.

(31,13)

La formación del biofilm dental viene a ser el resultado de una serie

de complejos procesos que involucran una variedad de componentes

bacterianos y de la cavidad bucal del huésped. Así inmediatamente

después de cepillar un diente, comienza a depositarse sobre su

superficie, proteínas de origen salival y del fluido crevicular, por un

proceso de absorción altamente selectivo y específico, formándose como

resultado una película acelular, la película adquirida, que varía de grosor

entre 0,1 y 1 micrómetros con un alto contenido de grupos carboxilo y

sulfatos que incrementan la carga negativa neta del esmalte. (32, 11, 31)

Los mecanismos que intervienen en la formación de la película

sobre el esmalte incluyen fuerzas electrostáticas, es una fuerza que se

manifiesta mediante los efectos de atracción o repulsión sobre los demás

cuerpos debido a un exceso o defecto de electrones; las fuerzas tipo Van

der walls, son fuerzas de estabilización molecular, forman un enlace

químico no covalente en el que participan dos tipos de fuerzas: las de

dispersión (atracción) y las de repulsión entre las capas electrónicas de

dos átomos contiguos; y las fuerzas hidrófobas, esta fuerza se origina por

la expulsión de las superficies apolares de la red de moléculas de agua

unidas por enlaces de hidrógeno. Es por ello que en la superficie de la

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hidroxiapatita, que posee grupos fosfato con carga negativa, interactúa

con proteínas y glucoproteínas salivales y del fluido crevicular con carga

positiva. (7, 14, 32, 8)

La película formada opera como barrera de protección,

proporcionando lubricación a las superficies e impidiendo la desecación

del tejido. Además, posee moléculas que funcionan como sitios de unión

para la adherencia de microorganismos y enzimas de origen salival como

Lisozima, Peroxidasa y Amilasa, que pueden influenciar la colonización

bacteriana sobre la película. Igualmente son incorporadas enzimas

extracelulares de origen bacteriano como la glucosiltransferasa (GTF), e

inmunoglobulinas. (13, 31, 14, 7,11)

Luego de formada la película adquirida, esta comienza a ser

colonizada por microorganismos residentes de la cavidad bucal. Este

proceso ha sido dividido en: Deposición, fase reversible en la que se

produce un acercamiento inicial de la superficie de la película. Adhesión,

fase irreversible en la que participan componentes tanto de la bacteria

como del huésped, que determinan que se produzca uniones físicas o

químicas entre los constituyentes bacterianos y los del huésped,

determinándose así una estrecha unión a través de adhesinas, por medio

de puentes de calcio y de magnesio, por medio de polisacáridos

extracelulares tipo glucan y enzimas glucosiltransferasas producidas por

microorganismos sacarolíticos como el S. mutans, y a través de fimbrias.

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Coagregación, unión renuevas bacterias sobre una primera capa

bacteriana (31,13, 7)

El Streptococcus sanguis es el primer microorganismo que se

adhiere a la superficie de la película adquirida y como tal, inicia la

colonización microbiana en la formación de placa dental supragingival e

inmediatamente se adhiere a Actynomices viscosus, algunos sugieren que

estas dos bacterias son prerrequisito para la colonización de otras

bacterias tales como veillonella y fusobacterium. Otras bacterias que

inician el proceso de colonización son Streptococcus del grupo oralis (S

oralis, S mitis), Actinomyces sp, Neisseria y Aemophilus. (7,13)

Después de siete días de formada la placa dental, las especies de

Streptococcus continúan siendo el grupo predominante, pero a las dos

semanas comienza a predominar los bacilos anaerobios y las formas

filamentosas. Estos cambios microbianos que se van produciendo van

ligados a diversas causas, tales como: antagonismo por competencia de

sustratos; producción de peróxido de hidrógeno; y especialmente por el

consumo de oxígeno en el ambiente, por lo que ocurre una sustitución de

especies bacterianas Gram positivas facultativas por especies bacterianas

anaerobias facultativas y estrictas Gram negativas, proceso llamado

sucesión autogénica. (13)

Los estreptococos son cocos Gram positivos agrupados en pares o

cadenas no esporulados e inmóviles que presentan un metabolismo

fermentativo y son anaerobios facultativos que constituyen el grupo más

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numeroso en la cavidad bucal representa del 20 al 80% del total de

bacterias. Los estreptococos orales transportan azucares a través del

sistema fosfoenolpiruvato fosfotransferasa. (20, 17)

El Streptococcus mutans (S. mutans) es considerado el principal

agente etiológico de caries dental en humanos y animales

experimentales. Las células del S. mutans se caracterizan por ser cocos

Gram Positivos, presentar un diámetro de 0.5 a 0.75 milimicras y

disponerse en forma de cadenas, características propias de este género.

En medios de cultivo conteniendo sacarosa, esta bacteria puede producir

polisacáridos extracelulares, adquiriendo una apariencia opaca, rugosa,

de color blanco, no adherente al medio de cultivo (31, 17)

El S. mutans es anaeróbica facultativa (puede usar para su

metabolismo oxígeno si se encuentra presente en el medio ambiente,

pero puede también sobrevivir cuando existe ausencia total de O2), pero

su crecimiento óptimo ocurre bajo condiciones de anaerobiosis (31)

Los S. mutans son los principales productores de acido láctico en

presencia de sacarosa siendo acidogénicos (productores de ácidos),

acidófilos (tolerantes al acido) propiedad necesaria para sobrevivir y

desarrollarse con un pH bajo y acidúricos (capaces de producir acido con

un pH bajo). El S. mutans fue descrito por primera vez por Clarke en

1924. En la actualidad de las 7 especies de Streptococcus mutans se

distinguen 2 humanas: el S. mutans y el S. sobrinus, y 5 animales: S.

cricetus, S. rattus, S. ferus, S. macacae y S. downei; que antes estaban

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agrupadas en una única denominación de S. mutans. Para los estudios

anteriores, S. mutans designa a la vez a todas las especies y, por lo

tanto, se debe tomar como equivalente de «grupo de los estreptococos

mutans» (20)

Puesto que la distinción entre S. mutans y S. sobrinus, es muy

reciente, los conocimientos actuales sobre patogenia, bioquímica,

fisiología y ecología del S. mutans están mucho más adelantados que los

del S. sobrinus. Numerosos estudios previos, en los que no se hacían

diferencias entre S. mutans y S. sobrinus, han atribuido al S. mutans un

papel en la etiología de la caries que, en algunos casos correspondía al S.

sobrinus (12).

El S. mutans está registrado en The National Collection of Type

Culture con el nombre NTCC 10449 y posee tres serotipos: “c”, “e” y “f”,

siendo el serotipo “c”, el que se aísla en el 70 al 100% de los seres

humanos. Los serotipos “c” y “e” son los más ácido-tolerantes, con un

grado óptimo de pH 5.0 para la producción de ácido láctico. Los estudios

epidemiológicos han demostrado una relación directa entre el número de

S. mutans y la presencia de caries dental. En la actualidad esta relación

se utiliza para predecir caries dental a partir de S. mutans recuperados de

la saliva. Los recuentos bacterianos altos, como 1x106 UFC por ml de

saliva, indican un alto riesgo de caries dental. (12)

El odontólogo dispone desde hace aproximadamente 30 años de

análisis de saliva que le permiten controlar la presencia de S. mutans en

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la saliva de sus pacientes. Los índices elevados de S. mutans en la saliva

indican también su presencia en el sarro dental (20)

La remoción mecánica de la placa dental con procedimientos tales

como el cepillado dental y la utilización de elementos accesorios como el

hilo dental, cepillos interproximales, etc., son los métodos más eficaces de

los que se dispone hasta el momento para controlar la formación de placa

y el cálculo dental; no siendo posible descuidarlos sin el riesgo de permitir

nuevas acumulaciones sobre la superficie dentarias y la posible

instalación de la caries y/o la enfermedad periodontal. Sin embargo, un

efectivo control de la placa dental con estos métodos no puede ser

llevado a cabo por pacientes con poca habilidad con alguna dificultad

motora que disminuya su destreza manual. Es por esto que el control

químico de la placa dental se ha venido investigando de manera activa.

(31)

Se ha demostrado la importancia de los colutorios poniendo a

prueba las formas comunes para la higiene dental, el cepillado dental

común con pasta dental y el uso de enjuagatorios (cloruro de cetil

piridinum y clorhexidina), se demuestra que el uso de enjuagatorios en

combinación con el cepillado resulta mejor en la reducción de placa

interproximal comparado al cepillado y uso de hilo dental solo. (37)

Dentro de los colutorios orales utilizados tenemos, la clorhexidina

los enjuagues a base de aceite esencial (timol, eucaliptol, mentol y

salicilato de metilo), los preparados a base de Triclosán, Fluoruro

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estañoso, cloruro de Cetilpiridina (compuestos de amonio cuaternario), y

Sanguinaria. Sin embargo hasta la fecha, la ADA ha aceptado dos

sustancias para tratar la gingivitis: soluciones de Digluconato de

clorhexidina, y los enjuagues bucales a base de aceite esencial (30,1, 9)

La clorhexidina fue desarrollada en la época de los 40 por Chemical

Industries en Inglaterra; los científicos fueron capaces de desarrollar un

grupo de compuestos denominados polibiguanidinas, que demostraron

tener un amplio espectro antibacteriano y salió al mercado en 1954 como

antiséptico para heridas de la piel. En odontología se utilizó inicialmente

para desinfección de la boca y endodoncia, el estudio definitivo que

introdujo la clorhexidina en el mundo de la periodoncia fue el realizado por

Löe y Schiott en 1970, donde se demostró que un enjuague de 60

segundos dos veces al día con una solución de gluconato de clorhexidina

al 0,2% en ausencia de cepillado normal, inhibía la formación de placa y

consecuentemente el desarrollo de gingivitis. (1, 34, 31,7)

La Clorhexidina es una molécula bicatiónica simétrica, es un dímero

proguanil por lo que decimos que es una bisguanidina, la cual está

conectada por una cadena central de hexametileno. En cada extremo se

enlaza un radical paraclorofenil (2 anillos 4 clorofenil) resultando su

nombre completo: Paraclorofenilbiguanidina

Este compuesto es una base fuerte dicatiónica con dos cargas positivas

en cada extremo del puente de hexametileno, es esta naturaleza

dicatiónica la que la hace extremadamente interactiva con los aniones, lo

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que es relevante para su eficacia, seguridad, efectos secundarios locales

y dificultad para formularla en productos. Aunque es una base, la

clorhexidina se mantiene más estable en forma de sal y la preparación

más común es la sal de digluconato por su alta solubilidad en agua y por

la capacidad de liberación a pH fisiológico del componente activo, con

carga iónica positiva. (4, 5, 34, 6)

La clorhexidina es el agente más efectivo para tratamientos

periodontales. Su mecanismo de acción se realiza mediante una

reducción de la película adquirida y la alteración del desarrollo bacteriano

y de la adsorción al diente. Su efecto se debe a la molécula catiónica que

se adhiere a los complejos microbianos, a la hidroxiapatita del esmalte,

pared de las bacterias, se une a los compuestos aniónicos como sulfatos,

grupos Carboxilo y Fosfatos de la película y glicoproteínas salivales que

poseen cargas negativas y de esta manera se reduce la absorción de

proteínas a la superficie dentaria necesaria para la formación de la

película dental. (4, 5, 31, 6)

A bajas concentraciones, produce un aumento de la permeabilidad

con filtración de los de los componentes intracelulares en particular las

substancias de bajo peso molecular, específicamente potasio y fósforo,

que podrían gotear hacia fuera. (Efecto bacteriostático) A altas

concentraciones, la precipitación de contenidos citoplasmáticos ocurriría

resultando en la muerte celular (Efecto bactericida). (4, 5, 6)

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21

La clorhexidina se une fuertemente a la membrana celular

bacteriana provocando una perdida y precipitación de los contenidos

celulares, por el desequilibrio osmótico. De manera específica, se une a

las mucinas salivales que reducen la formación de películas e inhibe la

colonización de la placa. También se une a las bacterias y dificulta su

adsorción a los dientes. Se une a los tejidos orales de una manera

reversible, se libera lentamente hacia la boca después del enjuague,

permitiendo que los efectos antimicrobianos iniciales se mantengan

durante varias horas. (6, 27)

El efecto de la clorhexidina se da a través de cuatro mecanismos:

1. La clorhexidina bloquea los grupos ácidos libres de las

glicoproteínas salivales (salivales), las cuales forman la

película adquirida que permitirá la formación de la placa

bacteriana, siendo esta su primera capa, no permitiendo la

formación de la misma.

2. La carga iónica de la clorhexidina atrae a la superficie

microbiana de la carga negativa, a lo que contribuye el pH del

medio, el cual es neutro o básico, permitiendo que los

microorganismos se unan a las moléculas de clorhexidina y

no se adhieran a la película adquirida.(19)

3. La clorhexidina también destruye la placa formada al competir

con el ion calcio, factor coadyuvante de la formación y

crecimiento de la placa bacteriana que actúa como una

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molécula de enlace que permite a las bacterias fijarse a la

película adquirida sin impedimentos. Cuando la clorhexidina

se une al ion calcio, impide la unión del mismo a las bacterias.

Alteración de la adherencia de las células bacterianas a la

película adquirida por competencia con el ion calcio.

4. A altas concentraciones la clorhexidina produce, tras unirse a

la pared bacteriana, cambios electroforéticos que producen

una precipitación citoplasmática que conlleva a la muerte

celular hasta un 95% de las bacterias.(24)

La clorhexidina incluso en baja concentración, inhibe el sistema

fosfoenol piruvato fosfotransferasa. Esto podría explicar el hecho de que a

bajas concentraciones, la clorhexidina puede reducir la producción de

acido a partir de glucosa por estreptococos orales sin afectar su viabilidad

celular. (20, 21,34)

Las células de los microorganismos asociados a la caries dental se

encuentran cargadas negativamente y las moléculas catiónicas del

gluconato de clorhexidina son rápidamente absorbidas a los grupos

fosfato de dichas células bacterianas; esto altera la integridad de la

membrana celular de las bacterias, lo que determina que la droga sea

atraída al interior de la célula donde aumenta la permeabilidad de esta y

permite que los componentes de bajo peso molecular, como los iones

potasio sean liberados al exterior.(26)

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Una de las propiedades que caracteriza a la clorhexidina es la de

poseer alta sustantividad por lo tanto permanece activa en el sitio de

aplicación y se libera gradualmente en 8-12 horas en su forma activa.

Después de 24 horas aún puede recuperarse concentraciones bajas de

clorhexidina, lo que evita la colonización bacteriana durante este tiempo.

Esto se debe a la fuerte unión aniónica que se establece entre la droga y

la carga positiva de los grupos carboxilo con carga negativa presentes en

la cavidad bucal, el calcio salival desplaza en forma lenta a la clorhexidina

prolongando así su efecto.(4,5)

Actualmente el uso de la clorhexidina en la concentración del 0.12%

se ha convertido en un excelente colutorio, por su amplio espectro, en el

tratamiento coadyuvante en la Gingivitis, Periodontitis, Caries dental, para

el control de placa bacteriana. Es efectivo contra bacterias como el

Streptococcus mutans, Streptococcus salivarius, y Escherichia coli,

Candida albicans por su alta sensibilidad (4,36, 5,31)

En una sola aplicación de clorhexidina se obtuvieron una reducción

de 87,6% de streptococcus mutans en saliva y de 93,3% de la carga

microbiana salival, lo cual nos muestra sus excelentes actividades

antimicrobianas. (29,10)

El efecto colateral masa común de la clorhexidina es la formación de

manchas amarillentas-parduscas que se desarrollan en el tercio gingival e

interproximal de los dientes afectados. Esto ocurre a pocos días

aproximadamente en 50% de los pacientes; igualmente han sido

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24

reportadas pigmentaciones en la lengua. El mecanismo preciso de la

coloración no ha sido determinado, pero se ha postulado que su etiología

es de origen dietética, este efecto colateral se controla de alguna manera

disminuyendo la concentración al 0,05% que puede ser muy bien

tolerado, llamada dosis de mantenimiento. (31, 9, 30)

Se ha afirmado que un dentífrico es una sustancia utilizada sobre un

cepillo con el fin de limpiar las caras accesibles a los dientes. El dentífrico,

a través de sus surfactantes y agentes espumígenos (lauril sulfato de

sodio), ayuda a desalojar los residuos de alimentos y la placa, y

contribuye también debido a sus abrasivos a eliminar manchas, ayudando

así a la limpieza de la boca. El dentífrico ayuda al cepillo en la remoción

de de los restos bucales y promueve también su uso más frecuente

debido a que en su composición posee agentes saporíferos que dan una

sensación de limpieza. También los dentífricos pueden actuar como

vehículos de medicaciones terapéuticas o preventivas. (19)

La composición de las pastas dentales varia de producto a producto,

pero la mayoría parte de una base estándar sobre la cual producen algún

cambio en la concentración y/o adicionan algún componente. La base del

dentífrico está compuesta por los siguientes elementos: abrasivos,

saborizantes, humectantes, edulcorantes artificiales, conservadores,

agentes colorantes, agentes terapéuticos, un agente espumante o

detergente que disminuye la tensión superficial de la pasta dental y ayuda

a eliminar restos de la superficie dental, su acción detergente ayuda a

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25

eliminar la grasas de cualquier superficie, el más usado es el lauril sulfato

de sodio. (3, 16,18)

La pasta dental ampliamente utilizado, posee varios componentes,

dentro de los cuales encontramos el agente surfactante, que en su

mayoría utilizan el lauril sulfato de sodio. El Lauril Sulfato de Sodio (LSS)

es un agente surfactante aniónico empleado en una variedad de

formulaciones farmacéuticas no parenterales. Es un detergente y agente

humectante, efectivo en soluciones ácidas y alcalinas y en aguas duras.

Es usado en shampoos medicados, como limpiador de la piel y en

dentífricos. (33, 35)

El LSS, es un alcohol sulfatado superior, emulsificante o surfactante

aniónico, potente agente tensioactivo y humectante, utilizado para bases

emulsivas porque absorben agua, aunque son insolubles en ella,

formando emulsiones. Tiene la propiedad de disminuir la tensión

superficial del agua _acción tensioactiva o surfactante_ de manera que el

agua se extiende y moje más fácilmente las superficies. (24)

La molécula del LSS consta de dos partes; una de ellas se une o

disuelve en agua, grupo hidrofílico polar, mientras que la otra lo hace con

el aceite, grupo lipofílico, hidrofóbico o no polar; en esta forma, el agente

superficialmente activo o humectante junta las dos moléculas de agua y

aceite. (24, 35)

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26

El lauril sulfato de sodio es el detergente mayormente utilizado en

pastas dentales en concentraciones de 0.5% a 2%. Es un anfipolo

aniónico, el cual tiene gran afinidad por proteínas y es un fuerte agente

desnaturalizante. Sin embargo se ha reportado que el LSS es causante

de diferentes efectos colaterales adversos en tejidos orales cuando son

aplicados en la boca como pasta dental o colutorio. Existe una relación

entre descamación oral y el uso de pastas de diferentes marcas

comerciales dado que se observa ensanchamiento del estrato córneo por

separación y perdida de la superficie de la capas epiteliales. (15)

A través de los años se han realizado diversos estudios que han

tratado de demostrar la interacción antagónica que existe entre la pasta

dental y la clorhexidina tales como:

Sheen (2001), quien realizó un estudio in vitro, en el cual utilizó la

propiedad de la clorhexidina (CHX) y el cloruro de cetil piridinum (CCP) de

intervenir con cromógenos de la dieta en producir manchas dentales,

como indicador para tratar de explicar la interacción de pasta dental (TP) y

clorhexidina y agua (W). Se realizó el estudio en 11 grupos en donde el

acrílico claro se sumergió en TP/CHX; CHX/TP; TP/CPC; CPC/TP:

W/CHX; CHX/W; W/CCP; CPC/W; TP/W; W/TP; W/W. Los resultados

indicaron que las combinaciones de TP/CHX y CHX/TP fueron los que

menos tinción presentaban.

Owens (1997) realizó un estudio de diseño cruzado, basado en

variación de crecimiento de placa en cuatro días utilizando clorhexidina

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27

(CHX), agua (W), pasta dental (TP). Se utilizó regímenes de W/CHX;

CHX/W; CHX/TP; TP/CHX; W/CHX, TP/W; W/W. Como resultados obtuvo

que la combinación de TP/CHX produjo significativamente un aumento en

el crecimiento de placa comparado con CHX/W.

Barkvoll (1989) realizó un estudio con el propósito de examinar la

posible interacción entre la clorhexidina y el anión laurel sulfato de sodio

en pacientes a los cuales se les hizo enjuagar con una solución de lauril

sulfato de sodio para el grupo prueba y agua destilada para el grupo

control, seguido de un enjuague con clorhexidina a diferentes intervalos

desde 3 minutos hasta 30 minutos, al cabo del sétimo día se evaluó el

índice de placa. Los resultados obtenidos mostraron que aun al intervalo

de 30 minutos entre el laurel sulfato de sodio y la clorhexidina dio una

significativa reducción del efecto antiplaca de la clorhexidina, dicha

neutralización desaparecía luego de dos horas.

Lindhe (1992), cita a Schiott y Col quienes en el año1976, realizaron

un estudio en 150 estudiantes de medicina que se enjuagaron la boca con

una solución de digluconato de clorhexidina al 0.2% por dos años.

Pudieron observar que aparentemente existía alguna interacción con el

agente saporífero utilizado, dado que disminuyó la concentración efectiva

de Clorhexidina, sin embargo se observó significativa reducción en placas,

gingivitis y número total de bacterias facultativas y anaerobios y de

Streptococcus mutans en la saliva.

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28

II. HIPÓTESIS

Debido a la interacción antagónica del Lauril Sulfato de Sodio, un

agente aniónico presente en la pasta dental, con la clorhexidina, un

agente catiónico, es probable que la inhibición de S. mutans en saliva de

pacientes que utilizaron pasta dental previa al uso de clorhexidina 0.12%

sea menor que en aquellos que utilizaron clorhexidina 0.12% sola.

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29

III. OBJETIVOS

3.1. OBJETIVO GENERAL

Comparar la actividad antimicrobiana entre la clorhexidina al 0.12%

luego del uso de una pasta dental que contenga Lauril Sulfato de sodio

con el uso de la clorhexidina sola, frente al Streptococcus mutans en

saliva.

3.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS

- Determinar el número de colonias de S. mutans antes del uso de la

pasta dental y la CHX al 0.12%

- Hallar el número de colonias de S. mutans antes del uso de la CHX

al 0.12% sin pasta dental.

- Determinar el número de colonias de S. mutans luego de 60

minutos de haber aplicado la solución de pasta dental y la CHX al

0.12%

- Determinar el número de colonias de S. mutans luego de 60

minutos de haber aplicado la CHX al 0.12% sin el uso de la

solución de pasta dental.

- Comparar el porcentaje de inhibición de UFC de s. mutans con el

uso de CHX 0.12% sola y CHX al 0.12% con pasta dental

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30

IV. MATERIAL Y MÉTODO

TIPO DE ESTUDIO:

El presente trabajo de investigación es un ensayo clínico,

comparativo, longitudinal y prospectivo, de diseño cruzado.

Universo: Alumnos de la preclínica de periodoncia de la facultad

de Odontología de la UNFV.

Muestra: 20 alumnos. El tamaño de la muestra se determinó

mediante la fórmula estadística de cálculo muestral para estudios

comparativos a partir de un estudio piloto de 5 casos, evaluados como

control y como prueba.

N = (Zα + Zβ)2 .2 (DE)2 (X1-X2)2

Donde:

Zα: Coeficiente de confiabilidad al 95% (1.96)

Zβ : Potencia de prueba al 80% (0.84)

DE: Desviación estándar mayor (referencial 22)

X1 : Promedio UFC de la clorhexidina 0.12% luego del enjuague

con agua destilada (referencial 89)

X2 : Promedio de UFC de la clorhexidina 0.12% luego del uso de la

pasta dental (referencial 69)

Obteniéndose N=18,97

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31

CRITERIOS DE INCLUSIÓN

Pacientes de 20- 25 años

Alumnos dispuestos a colaborar.

Alumnos que sean del turno mañana.

Firmen el consentimiento informado.

Presenten CPO-D entre 7 a 12.

Tener una higiene bucal regular.

CRITERIOS DE EXCLUSIÓN

Con enfermedad sistémica

Bajo medicación antibiótica, antiséptica o antiinflamatoria

Hábito de consumo de alcohol o drogas

Portadores de aparatos ortodónticos o prótesis

Presenten remanentes radiculares

Tengan higiene oral mala o buena.

Alumnos que utilicen antisépticos orales regularmente.

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32

VARIABLES

-Variable Dependiente:

• Colonias bacterianas: Streptococcus mutans

-Variable Independiente

• Enjuague bucal compuesto por clorhexidina al 0.12% sin uso previo

de pasta dental

• Enjuague bucal compuesto por clorhexidina al 0.12% previo uso

de pasta dental.

OPERACIONALIZACIÓN DE VARIABLES

VARIABLES INDICADOR ESCALA VALOR

Efecto

antibacteriano

Nro. de Unidades

Formadoras de

Colonias de S.

mutans en agar

mitis salivarius

De RAZÓN 0-n x 105 UFC

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33

PROCEDIMIENTO

Para la ejecución del presente estudio se evaluaron, a los alumnos

del turno mañana de la pre clínica de periodoncia de la Facultad de

Odontología de la Universidad Nacional Federico Villarreal con

odontogramas y cuestionarios con autorización previa de la facultad, jefe

de curso, y del docente responsable del turno, de ellos se seleccionaron

20 alumnos que cumplieron con los criterios de inclusión. Se les informo

detalladamente acerca de los materiales que se iban a emplear en el

estudio, pero no cual era el objetivo del estudio.

Los 20 alumnos fueron divididos aleatoriamente en dos grupos para

formar parte del grupo prueba o del grupo control. La toma de muestras

se realizó en dos fechas, en sus respectivos turnos de Preclínica. En

cada fecha se analizaron dos muestras por cada alumno: la basal o inicial,

antes del experimento, y la final, luego de 60 minutos de aplicado el

experimento.

En la primera fecha, 10 alumnos fueron del grupo prueba y 10 fueron

del grupo control, y luego de 15 días, la segunda fecha, los que formaban

parte del grupo control esta vez pertenecieron al grupo prueba y

viceversa, siguiendo un diseño experimental de cambio simple.

Los niveles basales de S. mutans se determinaron en muestras de

saliva (0,5-1 ml) obtenidas dos horas después del desayuno sin cepillado

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34

dental previo (23). Para ello se le entregó a cada alumno un frasco estéril

codificado.

El régimen de enjuagatorios de los grupos fue de la siguiente

manera:

GRUPO PRUEBA (PASTA-CHX)

Se procedió a realizar un enjuague con la solución de la pasta dental

(3 gramos de pasta dental “Colgate” en 10 ml de agua destilada) por 1

minuto.

Inmediatamente después se realizó un enjuagatorio con 15 ml de

clorhexidina por 1 minuto

Luego 60 minutos después se procedió a recoger una segunda

muestra de saliva no estimulada.

GRUPO CONTROL (H2O –CHX)

Se procedió a realizar un enjuague con agua destilada por 1 minuto

para simular el efecto físico de barrido y dilución de las bacterias causada

por el enjuague con la solución de pasta dental.

Inmediatamente después se realizó un enjuagatorio con 15 ml de

clorhexidina 0.12% por 1 minuto

Luego 60 minutos después se procedió a recoger una segunda

muestra de saliva no estimulada.

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35

Los pacientes fueron instruidos a realizar los enjuagues con

movimientos secuenciales para la zona anterior, lateral derecha, lateral

izquierda, involucrando todas las zonas dentarias y la lengua. Controlando

con un cronometro la duración del enjuague.

DISEÑO MICROBIOLÓGICO

En el laboratorio previo al recojo de las muestras se diluyó Agar Mitis

Salivarius, de la marca DIFCO, al estado líquido a una temperatura

aproximada de 50º, inmediatamente se agregó 0.1 ml de telurito de

potasio por cada 10 ml de agar, esta mezcla se colocó en vibrador por 10

segundos, para luego ser vertido 20ml de agar en cada una de las placas

petri.

Se realizó un piloto para identificar la dilución de saliva en la placa

sembrando 3 diluciones diferentes de saliva (1:1000, 1:10000 y 1:100000)

encontrando que la dilución 1:100000 contenía la cantidad de UFC

necesarias para realizar el conteo.

Luego de tomadas las muestras se colocaron en vibradora los

frascos conteniendo la saliva durante un minuto, se diluyó 0.1 ul en

99999.9 ul de agua estéril obteniendo una muestra diluida 1:100000, se

tomo 20 ul de cada dilución (bien agitada) y se sembró con una asa de col

sobre una placa con 20 ml de agar mitis salivarius anotando en la base de

la placa la numeración y letra correspondiente dado que el laboratorio no

sabía a qué grupo pertenecían las distintas muestras de saliva.

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36

Posteriormente se incubaron las placas petri en posición invertida y

con una atmosfera microaerófila (jarra con vela de extinción) a 37 grados

por un periodo de 48 horas, transcurrido este tiempo se procedió al

conteo de colonias con la ayuda de una lupa y se registró en la ficha de

resultados. El Nro de colonias se multiplicó por la dilución respectiva.

RECURSOS

RECURSOS MATERIALES

• 20 Placas petri

• 40 fichas de recolección de datos.

• 10 Tubos de ensayo

• 80 Frascos estériles

• 600 ml de clorhexidina al 0.12%

• 30 gr de pasta dental “Colgate”

• 2 litros de agua destilada

• 1 Micropipetas

• 2 Asa de col

• 1 Lupa de aumento

• 1 Incubadora

• 8ml de telurito de potasio

• 1 Vibradora eléctrica

• 1 Balanza analítica

• 1 frasco agar mitis salivarius “Difco”

• 10 bandejas de examen.

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37

• 10 Mascarillas

• 80 Vasos descartables

• Una caja de Guantes

• 1 Cooler

RECURSOS HUMANOS

• 1 Bachiller en odontología

• 1 Microbiólogo

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38

PROCESAMIENTO Y PRESENTACIÓN DE RESULTADOS

Los datos obtenidos del número de Unidades Formadoras de

Colonias (UFC) por ml de saliva fueron almacenados y procesados con la

ayuda de una computadora Pentium V mediante los programas SAS 8.2,

Excel 2007

La presentación de resultados se realizó mediante tablas y figuras

que muestran estadísticos de tendencia central (media) y dispersión

(desviación estándar).

PLAN DE ANÁLISIS

Para los parámetros de inhibición de colonias de Streptococcus

mutans, se utilizó el diseño de cambio simple.

El modelo estadístico que se utilizó es el siguiente:

Yijk = µ+ Di + Tj + Pk + eijk

Donde:

Yijk : Inhibición de Streptococcus mutans en el l-ésimo paciente,

en el j-ésimo periodo, con el k-ésimo tratamiento.

µ : Media general.

Di : Efecto del i-ésimo paciente.

Tj : Efecto de la j-ésimo periodo.

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39

Pj : Efecto del k-ésimo tratamiento.

eij : Error experimental.

Y a fin de obtener normalidad y homogeneidad, los valores de

inhibición de colonias de S. mutans fueron transformados angularmente

mediante la fórmula de Steel & Torrie, 1988:

Y=arc sen %

Donde:

X = representa el porcentaje de reducción de bacterias obtenida.

Se determinó la normalidad de los datos, para lo cual se utilizó las

pruebas de Kolgomorov- Smirnow.

Se aplicó la prueba T de Student para muestras independientes con un

nivel de significancia del 95 %, para comparar las medias de los recuentos

iniciales y finales de UFC en ambos grupos. Y la prueba T student para

muestras correlacionadas, para comparar la media del recuento inicial con

respecto a la media final de UFC en cada grupo, y también para

comparar el promedio de inhibición porcentual de UFC de los grupos en

estudio.

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40

V. RESULTADOS

• Se analizaron las 40 muestras iniciales de saliva, hallando para el

grupo Pasta+Clorhexidina una media del recuento de S. mutans de 28.7

x105 UFC/mL de saliva con una desviación estándar de 25.8 x105 UFC/mL

y para el grupo H2O+ Clorhexidina una media de recuento de S. mutans

de 30.6 x105 UFC/mL con una desviación estándar de 14.7 x105 UFC/mL.

No se encontró diferencias estadísticamente significativas (P=0.72>0.05)

entre las medias de los recuentos iniciales de UFC/mL de saliva de S.

mutans ambos grupos (Tabla y figura Nº 1)

• Se analizaron las 40 muestras finales de saliva, hallando para el

grupo Pasta+ Clorhexidina una media del recuento de S. mutans de 7.35

x105 UFC/mL de saliva con una desviación estándar de 7.8 x105 UFC/mL

y para el grupo H2O+ Clorhexidina una media de recuento de S. mutans

de 3.34 x105 UFC/mL con una desviación estándar de 2.5 x105 UFC/mL.

Se encontró diferencias estadísticamente significativas (P=0.02 <0.05)

entre las medias de los recuentos finales de UFC/mL de saliva de S.

mutans en los ambos grupos (Tabla y figura Nº 2)

• Se encontró una reducción de las medias de los recuentos iniciales

y finales de UFC altamente significativa (P=0.0 <0.05) para el grupo

Pasta+ Clorhexidina. (Tabla y figura Nº 3).

• Se obtuvo una reducción de las medias de los recuentos iniciales y

finales de UFC altamente significativa (P=0.0 <0.05) para el grupo H2O+

Clorhexidina (Tabla y figura Nº 4)

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41

• Se halló el promedio de los porcentajes de reducción de UFC de S.

mutans para el grupo Pasta+ Clorhexidina de 71,75% con una desviación

estándar de 15.28% y para el grupo H2O+ Clorhexidina de 88.21% con

una deviación estándar de 8.04%. Se aprecia que el porcentaje de

reducción de UFC de S. mutans para el grupo Pasta+Chx es menor y

estadísticamente significativa en relación al grupo H2O+ Clorhexidina

(P<0.05) (Tabla y figura Nº 5)

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42

TABLA Nº1

RECUENTOS INICIALES DE UNIDADES FORMADORAS DE

COLONIAS (UFC) DE Streptococcus mutans SEGÚN GRUPO.

UNFV-2009

COLUTORIOS NRO X Desviación standard

PASTA-CHX 20 28.7 x105 25.8x105

H2O-CHX 20 30.6 x105 14.7 x105

P=0.72>0.05 no existe diferencia estadísticamente significativa.

FIGURA Nº1

RECUENTOS INICIALES DE UNIDADES FORMADORAS DE

COLONIAS (UFC) DE Streptococcus mutans SEGÚN GRUPO.

UNFV-2009

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43

TABLA Nº2

RECUENTOS FINALES DE UNIDADES FORMADORAS DE

COLONIAS (UFC) DE Streptococcus mutans SEGÚN GRUPO.

UNFV-2009

COLUTORIOS NRO X Desviación standard

(PASTA-CHX) 20 7.35 x105 7.8 x105

(H2O-CHX) 20 3.34 x105 2.5 x105

P=0.02 <0.05 existe diferencia estadísticamente significativa

FIGURA Nº2

RECUENTOS FINALES DE UNIDADES FORMADORAS DE

COLONIAS (UFC) DE Streptococcus mutans SEGÚN GRUPO.

UNFV - 2009

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44

TABLA Nº3

RECUENTOS INICIALES Y FINALES DE UNIDADES

FORMADORAS DE COLONIAS (UFC) DE Streptococcus mutans

PARA EL GRUPO PASTA-CHX

UNFV-2009

RECUENTO NRO X Desviación standard

INICIAL 20 28.7 x105 25.8x105

FINAL 20 7.35 x105 7.8 x105

P=0.0<0.05 existe diferencia estadísticamente significativa

FIGURA Nº3

RECUENTOS INICIALES Y FINALES DE UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS DE Streptococcus mutans SEGÚN

GRUPO PRUEBA.

UNFV-2009

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45

TABLA Nº4

RECUENTOS INICIALES Y FINALES DE UNIDADES

FORMADORAS DE COLONIAS (UFC) DE Streptococcus mutans

PARA EL GRUPO H20+CHX.

UNFV-2009

RECUENTO NRO X Desviación standard

INICIAL 20 30.6 x105 14.7 x105

FINAL 20 3.34 x105 2.5 x105

P=0.0 <0.05 existe diferencia estadísticamente significativa

FIGURA Nº4

RECUENTOS INICIALES Y FINALES DE UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS (UFC) DE Streptococcus mutans

SEGÚN GRUPO CONTROL. UNFV-2009

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46

TABLA Nº 5

PORCENTAJES DE REDUCCION DE UNIDADES FORMADORAS

DE COLONIAS (UFC) DE Streptococcus mutans SEGÚN GRUPO.

UNFV-2009

GRUPO NRO X Desviación standard

PASTA-CHX 20 71,75% 15.28%

H2O-CHX 20 88.21% 8.04%.

P=0.00<0.05 existe diferencia estadísticamente significativa

FIGURA Nº5

PORCENTAJES DE REDUCCIÓN DE UNIDADES FORMADORAS

DE COLONIAS (UFC) DE Streptococcus mutans SEGÚN GRUPO.

UNFV-2009

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47

VI. DISCUSIÓN

En el campo de la odontología muchas veces se hace necesario el

uso de algún enjuagatorio bucal como coadyuvante en el control de la

higiene bucal, una de ellas viene a ser la clorhexidina al 0.12%,

considerada hasta el momento el “gold standard” por sus excelentes

propiedades antibacterianas y antiplaca, recomendando su uso tras el

cepillado con una pasta dental en pacientes con caries dental o

enfermedad periodontal.

La presente investigación consciente de la importancia en que todo

antimicrobiano debe ser utilizado aprovechando sus propiedades al

máximo, evitando interacciones que puedan disminuir su efecto; por lo

tanto, es importante tener en cuenta la interacción antagónica, entre el

digluconato de clorhexidina con el lauril sulfato de sodio (componente de

diversas pastas dentales) por ser agente catiónico y aniónico,

respectivamente, y que en el medio bucal reaccionan entre sí, formando

una sal de baja solubilidad y bajo poder antimicrobiano, disminuyendo las

propiedades de la clorhexidina. Los resultados obtenidos en la presente

investigación muestran que el poder antimicrobiano de la clorhexidina

frente al Streptococcus mutans se ve disminuido en un 16.46% cuando es

utilizada inmediatamente después del uso de una pasta dental, que

contiene lauril sulfato de sodio

Existen estudios, aunque siguen una metodología diferente, que

tratan de demostrar la interacción antagónica ya mencionada.

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48

Barkvol (1989), utilizó una solución de lauril sulfato de sodio 0.2%

previo al enjuague con clorhexidina 0.2% a diferentes intervalos de tiempo

para evaluar la disminución de los efectos antiplaca de la clorhexidina

causada por el lauril sulfato de sodio, medida con el índice de higiene

oral; recomienda el uso de la clorhexidina con un intervalo mínimo de 30

minutos con respecto al cepillado con una pasta dental.

Owens y col (1997) concluyeron que la acción antiplaca de la

clorhexidina 0.12%, evaluada durante cuatro días con el índice de higiene

oral, disminuía cuando es utilizado en un medio químico de una solución

de pasta dental, utilizado previo e inmediato al uso del antimicrobiano

mencionado, utilizando al agua destilada como control.

Esta investigación, a diferencia de Barkvol y col, evaluó la

disminución de la propiedad antibacteriana de la clorhexidina 0.12% tras

un enjuague inmediato con una solución de pasta dental (que contenía

lauril sulfato de sodio), expresada en la reducción de colonias de S.

mutans, siguiendo los patrones comunes de higiene, donde el cepillado se

realiza con la pasta dental y no con el lauril sulfato se sodio únicamente.

Coincidimos con Owens y col en que la pasta dental debió ser aplicada

con un cepillo dental para ser representativa de la forma de uso habitual;

sin embargo, el efecto de la limpieza mecánica que ejerce el cepillo es

una variable indeterminada y podría alterar los objetivos del modelo.

Sheen y col (2001) realizó un estudio in vitro utilizando la propiedad

de la clorhexidina de intervenir con cromógenos de la dieta en producir

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manchas dentales, ambos investigadores concluyeron que no importa si la

clorhexidina es empleada antes o después de la pasta dental, son

incompatibles y no recomienda su uso inmediato.

Aunque es difícil realizar una comparación con la metodología

utilizada por Sheen y col, el objetivo de demostrar la incompatibilidad de la

clorhexidina cuando se utiliza inmediatamente después del uso de una

pasta dental (que contenga lauril sulfato de sodio) es el mismo.

El presente estudio mostró que el uso de la solución de pasta dental,

previo e inmediato al uso de la clorhexidina, disminuyó significativamente

el efecto antibacteriano de la clorhexidina en la reducción de UFC de

Streptococcus mutans en saliva, comparada con el uso de la clorhexidina

luego de un enjuague con agua destilada. Debemos resaltar que a pesar

de esta disminución del efecto antibacteriano, hubo una reducción

significativa de UFC de S. mutans en saliva (71,75%). Datos similares

fueron obtenidos por Schiott y col (1976), quienes pudieron observar

cierta interacción antagonista entre pasta dental y clorhexidina, a pesar de

ello obtuvieron reducción en placas, gingivitis, número total de bacterias

facultativas y anaerobios y de Streptococcus mutans en saliva aunque no

fue el propósito de su estudio evaluar dicha interacción.

El promedio de inhibición de unidades formadoras de colonias del

Streptococcus mutans por la clorhexidina 0.12%, sin el uso previo de la

pasta dental, fue de 88.21%, resultados similares a los obtenidos por

Dalia K y col (2008) quienes obtuvieron una reducción de 87,6%. También

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50

los datos obtenidos por Pineda (2000) quien obtuvo una reducción del

93,3%, aunque no fue frente al Streptococcus mutans sino en toda la

carga microbiana salival aerobia, dando mayor confiabilidad a los datos

obtenidos en la presente investigación.

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VII. CONCLUSIÓN

1. El uso previo e inmediato de una solución de pasta dental, que

contiene lauril sulfato de sodio, disminuyó significativamente

(16.46%) el efecto antimicrobiano de la clorhexidina frente al S.

mutans en saliva comparado con el grupo control, que utilizó agua

destilada y clorhexidina 0.12%.

2. El enjuague con clorhexidina 0.12% inmediatamente después de

usar la solución de pasta dental disminuyó significativamente

(71,75%) el número de colonias de S. mutans comparado con los

niveles iniciales.

3. El enjuague con clorhexidina 0.12% inmediatamente después de

usar agua destilada mostró una reducción significativa (88.21%) del

número de colonias de S. mutans comparado con los niveles

iniciales.

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52

VIII. RECOMENDACIONES

1. El uso de un enjuagatorio a base de clorhexidina no debe ser

utilizado inmediatamente después del cepillado con una pasta

dental que contenga lauril sulfato de sodio sino después de un

intervalo de tiempo, caso contrario se debe utilizar una pasta

dental que no posea dicho componente.

2. Realizar estudios comparativos a diferentes intervalos de tiempo,

entre el uso de la clorhexidina y la pasta dental, para evaluar el

lapso ideal de espera antes del uso de la clorhexidina, aumentando

la población a fin de obtener datos muchos más precisos.

3. Elaborar un estudio comparado, analizando el efecto

antimicrobiano de la clorhexidina cuando es empleada

inmediatamente después del uso de una pasta dental que contenga

lauril sulfato de sodio y cuando es usada con una pasta que no lo

contenga.

4. Realizar el recuento de colonias de Streptococcus mutans en saliva

para ayudar a determinar el riesgo de caries y controlar el

mantenimiento de niveles bajos de dicha bacteria mediante el uso

de antisépticos como la clorhexidina.

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IX. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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X. ANEXOS

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ANEXO 1

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ANEXO 2

FICHA DE DATOS

APELLIDOS Y NOMBRES…………………………………………

………………………………………………………………………

TELEFONO…………………………………………………………

TURNO…………………………..

E-MAIL:………………………………………………………………

EDAD:…………………………………………………………………

ENFERMEDAD SISTEMICA………………………………………

RECIBE ALGUNA MEDICACION DE TIPO:

ANTIBIOTICA, ANTISEPTICA, ANTIINFLAMATORIA

CONSUME ALCOHOL O DROGAS………………………………

CUANTAS VECES AL DIA SE CEPILLA:…………………

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ANEXO 3

ODONTOGRAMA

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ANEXO 4

Resultados obtenidos

Diseño de Cambio Simple SAS 8.3

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20

I C C P P C C C P P C C P C P P P C P C P

II P P C C P P P C C P P C P C C C P C P C

I-PRIMERA FECHA II-SEGUNDA FECHA C-CONTROL P-PRUEBA

GRUPO PRUEBA A GRUPO CONTROL B

PACIENTE INICIAL FINAL DIFERENC% INHIB INICIAL FINAL DIFEREN

% INHIB

1 1100000 500000 600000 54,55 1600000 100000 1500000 93,752 800000 200000 600000 75,00 2900000 300000 2600000 89,663 4900000 600000 4300000 87,76 4500000 600000 3900000 86,674 600000 100000 500000 83,33 2700000 300000 2400000 88,895 1500000 200000 1300000 86,67 2500000 200000 2300000 92,006 7300000 600000 6700000 91,78 2100000 190000 1910000 90,957 1600000 300000 1300000 81,25 3000000 100000 2900000 96,678 1300000 600000 700000 53,85 2900000 800000 2100000 72,419 2800000 1500000 1300000 46,43 3100000 1100000 2000000 64,5210 5800000 2600000 3200000 55,17 1200000 200000 1000000 83,3311 400000 100000 300000 75,00 3800000 100000 3700000 97,3712 600000 100000 500000 83,33 3400000 500000 2900000 85,2913 200000 100000 100000 50,00 2100000 200000 1900000 90,4814 1600000 800000 800000 50,00 4800000 100000 4700000 97,9215 700000 200000 500000 71,43 2000000 300000 1700000 85,0016 3300000 1000000 2300000 69,70 1500000 200000 1300000 86,6717 3100000 300000 2800000 90,32 1800000 200000 1600000 88,8918 5800000 1900000 3900000 67,24 3800000 500000 3300000 86,8419 9000000 2500000 6500000 72,22 7700000 400000 7300000 94,8120 5000000 500000 4500000 90,00 3800000 300000 3500000 92,11PROMEDIO 2870000 735000 2135000 71,75 3060000 334500 2725500 88,21

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ANEXO 5

Alumnos en la preclínica de Periodoncia realizando los enjuagues en

presencia del Dr. Angeles (Docente del turno)

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Materiales

Pesando 3gr de pasta dental

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Clorhexidina y solución de pasta dental.

Muestras salivales en el cooler para transporte al laboratorio

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Sembrado por estrias en agar mitis salivaris.

Jarra de anaerobiosis

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Cultivo luego de 48 horas

Placa identificando la colonia de Streptococcus mutans

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ANEXO 6