Jg'l. Juni'13' Heft196511 H.J . Kuse~r<~ et M. : Wirkungsmechanismus des Phenylpropyl-diphenylpropylamins beim Menschen 617

ob im Schwangerenblut ira Vergleieh zu Nieht- sehwangerenblut vermehr t t Iyper tens in (Valins-Hy- pertensin I I dcr F i r m s Ciba) abgebaut wird.

Wghrend das Schwangerenblut in der Lage war, erhebliehe Mengen yon zugesetztem Vasopressin zu zerstSren (das 500--100fache im Vergleich zu Nich~- schwangerenblut), besaB das Blur yon Graviden am Ende dcr Schwangerschaft (35 F/~lle) keine gr6gere F~higkei~ (Hypertensinaseakt ivi tgt) t typer tens in ab- zubauen Ms Niehtsehwangerenblu~. Aueh bei Sehwan- geren mi t einer ausgepr~gten Toxikosesymptomat ik (7 Fglle) war im Btutplasma keine erh6h~e ~[typer- tensinaseakt ivi tgt nachweisbar.

Die Ergebnisse eines gleieh s tarken I-Iypertensin- abbaus durch Niehtschwangeren-, Schwangerenblu~ und Blur yon Toxikosepat ient innen belegen, dab die Blutdrucksteigerung bei Toxikosen nieht ohne welfares dutch eine verminderte oder erhShte Hypertensinase- aktivit/ t t erklgrt warden kann.

Summary. In systemic blood pressure and dim~sis experi- ments on 160 female albino rats has been examined, wether blood of pregnant women destroys more I-Iypertensin (Valins- tIypertensin II, Ciba) in comparison to that of non-pregnant o n e s .

Blood of pregnant women was capable of destroying im- portan~ amounts of added Vasopressin (the 500 to lOOO fold as to blood of non-pregnant ones), whereas blood of women in the end of pregnancy did not h~ve any augmented capacity of Hypertensin destruction (hypertensinase activity) in com- parison to ~ha~ of non-pregnan~ ones. Also in pregnant patients with marked toxemia there could not be found any augmented hypertensinase activity.

These results, i.e. the same rate of ttypertensin destruction by blood of non-pregnant, pregnan~ and toxemia patients, show that the rise of blood pressure in toxemic women cannot be explained by a reduced or augmented hypertensinase activity.

Literatar. Am)vL-KAg~I, l~., and N. S. ASSALI: Pressor response to angiotonin in pregnant and nonpregnant women. Amer. J. Obstet. Gynec. 82, 246 (1961). - - ASrSELMI~O, K. J., u. ~R. I~IO~1~hu~: Nachweis tier antidiuretischen Kompo- nente des Hypophysenhinterlappenhormons und einer btut- drucksteigernden Substanz im Blute bei Nephropathie und Eklampsie der Sehwangeren. Klin. Wschr. 31, 1438 (1931). - - Bg~vN-~I~r~m~z, E.: Pharmacology of renin and hyper- tensin. Pharmaeol. Ray. 8, 25 (1956). - - I)ODSEN, L. ~.: The pressor response to hypertensin in pregnant rats. Brit. J, exp. Path. 88, 635 (1957). - - K ~ L ~ , l~. J., and J .K . SUTJ~mL~ND : Renin and pregnancy. J. Obstet. Gynaee. Brit. Emp. 48, 487 (1941). - - K~AVs, D., It. K ~ a ~ m K u. H. P~'EI~: Untersuchungen fiber die Serum-Angiotensinase. Klin. Wschr. 41, 376--385 (1963). - - Kusc~SK,Z, G., u. H. VO~HE~: ~dber eine einfache ruBkymographische Methode zur fortlaufenden Blutdruckmessung an Miiusen und tlatten. Experientia (Basel) 13, 298 (1957). - - LA~ngs~Ax, R,, P. Bmo~, R. C,tS~]~5L~NOS, R. L~ Rvss~,, and K. W~so~: Plasma angiotensinase activity in normal and toxemic preg- nancy. 0bstet. and G~ec. 22, 316 (1963). - - M~STI~OOg, J. L.: A hypothesis of the etiology of toxaemia of late preg- nancy. Modern trends in Obstet. Gynec. London: Butter- worth 1954. - - PAGE, E.W.: Plasma angiotensinase in nor- mal and toxemic pregnancies. Amer. J. mad. Sei. 21~, 715 (1947). - - PAm~, E. W., and O. M. IItm~I~: Angiotonin acti- vator, renin- and angiotonin-inhibitor and the mechanism of angiotonin taehyphylaxis in normal, hypertensive and nephreetomized animals. J. exp. ivied. 71, 495 (I940). - - P~Te~al~D, 5. A.: Coaretation of aorta and pregnancy. Obstet. Surv. 8, 775 (1953). - - S~ax~aN, W. R., and S. L. R o ~ r : Coarctation of the aorta and pregnancy. J. Amer. reed. Ass. 167, 275 (1958). - - Sz~NYax: Aortenisthmusstenose und Schwangersehaft. Gynaecologia (Basel) lg2, 375 (1961). Vo~ms~, I-I., u. V. F~ZnDB~Ra: Eine verbesserte Methode zum Adiuretin-Naehweis. Klin. Wschr. 37, 1171 ( I 9 5 9 ) ; - Die quantitative Bestimmung der Adittretin-Inaktivierung durch Schwangerenblut. Klin. Wschr. 88, 447 (1960).

Anschri/t: Dr. H. V o ~ Univ.-Frauenklinik 6 Frankfurt a. M./Siid 10 Ludwig-Rehn-Str. 14

Z u m W i r k u n g s m e e h a n i s m u s des P h e n y l p r o p y l - d i p h e n y l p r o p y l a m i n s ( S e g o n t i n ) b e i m M e n s e h e n *

Von H. J . K v s c H ~ , H. ID~ISS und F. E C K ~ - ~

Aus tier l~Iedizinischen Universitiitsklinik '~'iirzburg (Direktor: Prof. Dr. :E. WOSI~H~I~)

Die t ierexperimentell-pharmakologische Analyse des Phenylpropyl-d iphenylpropylamins ha t te zwei Wirkungen der Substanz ergeben, die besonderes Interesse verdienten nnd zu ihrer therapeut isehen Verwendung als Segon~in lf ihrten: eine Senkung des Gewebsspiegcls yon Noradrenal in und Adrenalin and eine Blockiemng der Effolgsorgane gegen die erregen- den ~¥irkungen sympathischer Nerven unct ihrer ~ber - tri~gers~offe14, 25. Untersuchungen an isolierten Neben- nierenmark.Granula6, 25 a n d an der isoliert durch- s t r6mten t~indernebenniere 3 zeigten eine Verdrgngung der Brenzkateehinamine aus ihrer Gewebsbindung dutch Segontin. Konzentragionen yon 6 × 10 -5 M 6 his 1 × 10 -5 M 2a im Suspensionsmedinm fiihrten znr v611i- gen Freisetzung der Amine aus den isolierten Granula. Bei zehnfach niedrigerer Konzentra~ion wurde die Aufnahme aus dam umgebenden Medium in die Granula bloekier~. Segontin gilt nach Reserpin als stgrks~er Hemms~off des Aufnal imemeehanismus 6. Die weitere Analyse der Aminfreisetzung durch Segontin ergab, dab es wie Reserpin die Amine zusammen mit A T P und Ca ++, Mg++ ffeisetzt~L Am Ganz~ier

* Nit Unterstfitzung der Deutsehen Forsehungsgemein- schaft.

lieB sich die Scnkung des NoradrenMin-Gewcbsspiegels dutch Segontin, die beim H u n d im Herzen 16 h nach 20 mg/kg ca. 70% betr/~gt, dutch Steigerung der Dosis jedoeh nicht wie dureh Reserpin bis zur v611igen Aminentteerung treiben. So ist die sympa~hieomimeti- sche, fiber eine Freisetzung endogenen Noradrenalins erkl~rte Tyraminwirkung dnreh hoehdosierte Segon- t in-Vorbehandlnng auclf nicht ganz zu bcseitigen 15.

Wenn diese tierexperimentell ermittelte Wirkungs- weise des Segontin seinen kliniseh-therapeutisehen Effekten 2, 4, 10-1% 17, is, 20, 22 t rotz einer etwa fiinfmal niedrigeren Dosierung zugrunde liegt, sollte sie such beim Menschen nachzuweisen sein. Wir haben unter dieser Fragestellung folgende Untersuchungen durch- geffihrt: 1. Bes t immung der Harnaussche idung yon NoradrenMin ~md Adrenalin a n d ihres sauren Meta- boliten 3-methoxy-4-hydroxy-mandels~ure unter tag- lichen Segontingaben yon 2 - - 3 × 60 mg peros. K o m m t es unter solchen ~herapeutischen Dosen beim Menschen zu einer Freisetzung der Brenzkatechinamine aus sym- pathisehen Nerven und Nebennieremnark und zur Sen- kung ihres Gewebsspiegels, so smite, zumindest anf/~ng- lich, einc Steigerung ihrer Ausseheidung nachzuweisen sein. Erh6hte Harnausscheidungen der Brenzkatechin-

Yglin. "Wschr., 43. ;Iahrg. 42

618 14. J. Kusc~K~ e~ al. : Wirkmigsmeehanismus des Phenylpropyl-diphenylprol~ytamins beim Nensehen Kli~ische Wochenschrift

amine unter Segontin bei der Rat te und aueh am Menschen wurden yon uns sehon friiher mitgeteilt ~. 2. Bestimmung des Plasmaspiegels der Brenzkate- ehinamine unter Segontin, da eine Beeinflussung des Speiehermeehanismus der Amine aueh Ver/~nderungen ihres P]asmaspiegels erwarten 1/~gt. 3. Untersuehun- gen fiber die Beeinflussung der blutdrueksteigernden Wirkung yon Tyramin durch Segontin. Tyramin gilt als sog. sekund/~res sympathieomimetisches Amin, das fiber eine Freisetzung endogenen Noradrenalins aus seiner Gewebsbindung wirkt ~, ~s, da naeh Entleerung der Gewebe von Brenzkateehinaminen dureh Reserpin oder sympathische Denervierung ihre adrenerge Reak- tion auf Tyramin vermindert ist oder fehlt. Segontin solIte daher, falls es aueh beim Mensehen zu einer Ab- nahme des Brenzkateehinamin-Gewebsspiegels ffihrt, die pressorisehe Tyraminwirkung abschwgchen. Ent- spreehende Befunde wurden beim Mensehen naeh Reserpin erhoben x, ~. Es sei jedoeh zu dieser Ver- suehsanordnung erwghnt, dab kfirzlich Zweifel an dem kausalen Zusammenhang zwisehen aminentleerender Wirkung des Reserpin und seinem Tyramin-Antago- nismus ge~uBert und ein Antagonismus auf Receptor- ebene angenommen wurde ~s. 4. Untersuehungen fiber den Ablauf sympathieotouer Regulationen in Ortho- stase und bei k6rperlieher Belastung mittels Bestim- mung yon Blutdruck, Pulsfrequenz und Plasma-Brenz- kateehinamin-Spiegel unter Segontinwirkung. Trotz seiner reserpinartigen und adrenergiseh bloekierenden Wirkungen besitzt Segontin keine nennenswert blut- drueksenkende Eigensehaft. Es war daher von Inter- esse naehzuprfifen, ob aueh regulative Aktivierungen des sympathico-adrenalen Systems unf i t einer Segon- t inmedikation unvermindert ablaufen.

Methodik Die Extraktion der Brenzkateehinamine aus dem Ham

erfolgte nach S~urehydrolyse mittels Aluminiumoxid-Adsorp- ~ion s, die fiuorometrische Bes~immung im Extrakt mit der Trihydroxyindol-MeShode unter Oxydation in zwei vet- sehiedenen pH-Bereiehen ~ und Messung am Photofluorometer Eppendorf.

Die Plasma-Kateehinamine wurden naeh folgendem Prin- zip bestimmg: Abziehen yon 18 ml Venenblut in 2 ml eines Antieoagulans aus EDTA und Na-thiosulfat yon pH 7 ~0, tIamatokritentnahme zur Ermittlung der Plasmamenge, Xfihl- zentrifugierung, Abtrennen des ~Tberstandes, Eiweit]fgllung mig Perehlorsaure, Einstellen des Uberstandes auf pH 4 mit Kaliumearbonag, Isolierung der Brenzkateehinamine an einer Amberlite CG 50-Si~ule, Elugion mit tIC1, Fluorescenzentwick- lung naeh der Trihydroxyindol-lHethode, t~Iessung am Spektro- iluorometer Amineo-Bowman gegen Noradrenalin-Standard, Akgivierung 405 am, Fhmreseenz 530 rim.

Die 3-methoxy4-hydroxy-mandelsaure wurde nach Ex. t, raktion mit Essigsi~ureathylester dfinnschiehtehromagogra- phiseh ~ bestimmg.

Die Infusionsversuehe wurden an 12 gesunden Versuchs- personen mit 2,5 nag Tyramin-HC1/ml/min fiber 10 rain mit einer Iniusionspumpe vorund nach 5ta.giger oraler Gabe yon taglich 180 rag Segontin durehgeffihrt*. Zum VergMeh dienten die maximalen systolischen und diastolischen Drucksteige- rungen der beiden Infusionsperioden. Bei 8 der Versuchs- personen wurde zus/i~zlieh die Beeinflussung tier pressorisehen Noradrenalin-Reaktion dureh die gleiehe Segonginbehandlung geprfif~.

Die orghostagischen Belastungen wurden bei 5 normo- torten und 2 hyper~onen Versuehspersonen am Kipptisch fiber 15 rain in 60°-Position und die Arbeitsbelastungen bei ~ normo- ±onen. und einer hypertonen Versuehstmrson am Fahrrad- ergometer im Liegen mit 100 Wat~/min fiber 5 rain unter

* Den Farbwerken ttoeehst danken Mr fiir die Bereit- stellung yon sterilem Tyramin-ttC1 in Ampullen.

Registrierung yon Blutdruck, Pulsfrequenz und P]asma- Katechinamin-Konzentra$ion vor und nach dreit/~giger Gabe yon 120 mg Segontin t~glich durchgefiihrt.

Ergebnisse 1. Die tIarnausseheidung vort Noradrenalin und/

oder AdrenMin stieg unter Segontinraedikation bei 7 yon 9 Versuehspersonen art (Abb. 1). Die AdrenMin- Ausseheidung, die normalerweise nur ca. 20% der ge- samten Aminausscheidung betr/~gt, stieg dabei ver- haltnismgBig st/~rker an als die des Noradrenalin, so da, l~ der Adrenalinanteil an den Gesamt-Brenzka~eehim aminen teils bis zur Umkehr des normalen Verh£lt- hisses NA/A erhSht war, wie wit es schon frfiher ge- hmden bat ten 3. Zwei Probanden hat ten urtter Segort- tin eine gleiehbleibende bzw. leieht verminderte Aminausscheidung.

Die Ausseheidung des Metaboliten 3-methoxy-4- hydroxy-mandels~ure war bei 7 Versuchspersonen um 50% und mehr gegenfiber der Leerausseheidung er- h6ht. Zwisehen den Segontindosen 120 und 180 rag/die bestartden keine Unterschiede in der Wirkung auf die Ausseheidung der Amine.

Um die Dauer der Steigerung der Brenzkateehin- amin-Ausscheidung festzustellen, wurde bei einer weite- ren Versuehsperson der I I a m an 5 Tagen jewefls in drei 8 h-Portionen untersucht und art 2 Tagen davon zu Beginn eine Einzeldosis yon 120 mg Segontin gegeben. Die Steigerung der Aminausscheidung war in der ersten oder/und zweiten 8 h-Periode, nicht mehr in der dritten nachzuweisen. Wurde bei einer weiteren Ver- suehsperson Segontin in einer Dosis vort 60 mg dreimal in 16stfindigen Zwisehenr/~umen gegeben, so blieb die Aminausseheidung erh6ht (Abb. 2).

2. Der Plasmaspiegel der Brenzkatechinamine wurde bei 18 Versuehspersonen nnter Ruhebedingungen vor und naeh zweit~giger Gabe yon je 180rag (12 Versuehs- personert) bzw. 120 mg (6 Versuehspersonen) Segontin t/~glieh untersueht (Abb. 3). Vor Segon~in lagen die Wel~e zwischen 0,20 und 0,71ttg/1, im Mittel bei 0,45-4-0,15/tg/1. Unter Segontin stiegen die Werte bei 16 Probanden an, einmat blieb die Aminkonzen- tration unver~tnder~, einmal fiel sie a b ; die Einzel- werte ]agen zwischen 0,10 und 1,76rig/i, im Mittei bei 0,87 ~: 0,43/~g/1. Die II6he der Segontindosis hat te keinen Einflul~ auf das Ausma$ des Aminanstiegs; die Probanden, die keinen Ansgieg zeig~en, hat ten die hShere Dosis genommen. Die statistisehe Prfifung (t-Test) ergibt nur bei 10% Irrtumswahrscheinlichkeit einen t-Weft (1,80) auBerhalb der Sieherheigsgrenzen. Eine hShere Signifikanz ist aueh nicht zu erwar~en, naehdem 11% der Probanden nieh~ mig einem Anstieg der Aminkonzentration reagierten.

3. Unter tier intravenSsen Infusion yon 2,5 mg Tyramin/min bei 12 Versuchspersonen stieg tier systo- ]ische Blutdruek im Mittel yon 123 auf 184 m m Hg an, der diastolisehe yon 72 auf 92 mm IIg. Naeh ffinf- t/~giger Gabe yon t/~glich 180 mg Segontin betrug der Ruhebintdruek im Mittel 118 systolisch und 71 rain t tg diastoliseh, unter Tyramin erfolgge ein Anstieg auf maximal ira Mitre1 141 m m Hg systolisch und 76 m m I tg diastoliseh. Die pressorisehe Tyramimvir- kung wurde dutch Segontin somit systoliseh yon 61 auf 23 m m t Ig und diastoliseh yon 20 auf 5 m m I tg verminder~ (Abb. 4). Alle Probanden reagierten quali- ta t iv gleichartig. Die Ruhe-Pulsfrequenz wurde dutch

Jg. 4~, He£t 11 H.J . KVSO~Kn et ~1. : Wirkungsmechanismus des Phenylpropyl-diphenytpropylamins beim ~Iensehen 619 1, J u n i 1965

Segontin in der bekannten Weise deutlieh gesenkt, im Mittel yon 74 auf 63/min. Der bradykarde Tyramin- ~ 1o effekt wurde dutch Segontin jedoeh nieht verst£rkt; ~ ~ die minimale Pulsfrequenz w~hrend der Drucksteige- "~ s rung betrug jedesmal im Mittel 57/min. 7

Die bei 8 unserer Versuehspersonen in gleicher ~ W eise untersuehte pressorisehe Noradrenalinwirkung 5 wurde dutch Segontin insgesamt unregelm~Sig und nur wenig beeinflnSt. Die systolisehe Drueksteigerung s F blieb dutch Segontin viermal unvergndert, zweimal

;t war sie verstgrkt und dreimal abgesehwgeht. Die diastolisehe Drueksteigerung war viermM verst~rkt o und ffinfmal abgesehwgcht.

4. Die Beeinflussnng der sympathieo-adrenalen Aktivierung unter Or~hostase dureh Segontin wurde

500 % ~0

35O 300 25O 200 750 I00 5O

5O

FO0

• soooF M . .

~700 b

700 60O 500

~ ! 400 3O0 200 100 d-

5O

loo

2; ~I f " 22 ~ i

1

$9"00 .

A . ~8

¢n

~a

Abb. 1. Proze;~tuale Ztnderung der Hari~usscheidung yon 3-me~hoxy-4- hydroxy-mandelsgure (NEI-IM) in rag/24 h und yon Noradrenalin (NA) und Adrenalin (A) in I~g/24 h u n t e r oraler Gabe yon 120--180 rag/die Segontin. 10O%-Ausgangswer~ aus 2--3 :Einzelwerten der Vorperiode, Were unter Segontin a~s 2--4 Einzelwerte~ wghren4 einer einwSchigen Behandlung

gemi~telt

bei 7 Probanden, darunter dreien mit essentieller Hypertonie, untersueht (Tabelle 1). Dabei zeigte sieh, dag die sympa.~hieotone Gegenregulation in Ortho- stase unter Segontin mit einer Ausnahme nieht ein- gesehrgnkt war. Der diastolisehe Druekanstieg er- folgte unter Segontin in gleieher Weise wie in den Kontrollversuehen. Nur bei dem Probanden 6, einem essentiellen Hypergoniker mit labiler Blutdruekregu- lation, der sehon im Kontrollversuch mit einem nut kurzfristigen initialen Pulsfrequenzanstieg und an- sehlieBender Bradykardie in 60°-Position reagiert hat4,e, kam es unter Segoatin naeh 5 min Orthosta,se zu einem bradyk~rden Kollaps. Der Anstieg seines Brenzkateehinamin-Plasmaspiegels war zu diesem Zeit- punkt mit @0,16 #g/1 gering. Bei diesem Probanden hat Segontin den bradykarden Kotlaps bei vorhan- dener Neigung hierzu vermutlieh beg/instigt. Die be- kannte frequenzsenkende Wirkung des Segontin kam bei den Ruhewerten zur Geltung, wenn die Puls- frequenz nieht sehon im Kontrollversueh niedrig lag.

Eine Hemmung der kardioaeeeleratorischen Ge- genregulation, des Frequenzanstiegs nnter Belastung, land sieh jedoeh nut bei zwei Probanden (4 und 5). Die Plasma-Brenzkateehinamin-Werte waren wie sehon be- sehrieben nnter Segontin im Liegen erh6ht. Die Zu- nahme in 0rthostase war unter Segontin nur insigni- fikant abgeschwgeht; die Werte betrugen nach 5 rain im Mittet -[-0,42 bzw. ~-0,33 #g/1 und nach 15 min + 0,31 bzw. 4-0,25 ¢tg/1.

60r~g Y0rag

//i/,

)'-14 -2~ - 6

2

Gomc7 ,$'egom<in

16,_ ~

'! -2 2

1 6 - 1 q ' T 2 2 ~ - 8 1 - - - k

,/ ~- Tage Abb. 2. Brenzkatechinandn-Ausscheidung in #g18 h vor wiiln'end und

naeh Segont ingabe yon 3 × 60 m g in 16stSndigen i b s t g n d e n bei e iner Versuchsperson. ~ AdrenaI inante i I

0,6

o~

hi-" O,~-+ q~ /vI: o, o7-+ o, ~2

Abb. 3. P l a sma-Brenzka tech inaminkonzen t r a t ion in yg/1 in Ruhe bci 18 Versuchspersonen vo r und naeh zwei tggiger Gabe yon 120 bzw. 180 m g

Segont in

:c ~ 2o~ 78o 18o q4xo 120 I05

eo

~ramin 2,Y rag/rnin ]~ramin 2fl m!T/mf n

2egon//n 8Tg. S,~Om g

.0[ ~ 5 o

Abb. 4. t~eak~ion des systol ischen und diastol ischen Blu tdrucks und der Pulsfrequenz auf in t ravenSse In fus ion yon T y r a m i n (2,5 rag/rain) ¥or und nach f i i n f ~ g i g e r Segon~ingabe y o n t~glich 1 8 0 m g . ~ i%elwerf~ yon

12 Versnchsgersonen

Auch unter k6rperlicher Belastung mi~ 100 Watt/ rain wghrend 5 rain bei 5 Versuchspersonen war die sympa~hicotone Re~ktion nach dreitggiger Sego)ttin- medfl~tion nicht regelhuft vergndert (Tabelle 2). Der Anstieg der Blutdrnckamplitude unter Belastung wurde nieht nennenswert beeinflu8~. Der Frequenz- anstieg, der nach Segontin viermal yon niedrigeren

42*

620 H . J . KUSCKKE et al. : Wirkungsmechanismus des Phenylpropyl-diphenylpropylamins beim Mensehen Klinische Wochenschrift

Tabelle 1. Ver~inde~ung des systotischen unddiastolischen Blutdruc#s, der Puls[requen.z und der Ptasma-Brenzkatechinaminkonzentration (#g/l) im Liegen und wiihrend 15 rain Orthostase in 60°-Position au./ dem Kipptisch bei 7 Versuchspersonen vor und nach dreitggiger

Gabe yon 120 mg Segontin Letzte Einzeldosis yon 60 rag 2--3 Std vor dem Versueh

m

I

2

3

4

5

6

7

S. t~[.

E.F .

A.S.

K.W.

R.W.

St.A.

Kontrolle Segontin

Kontrolle Segontin

Kontrolle Segontin

Kontrolle Segontin

Kontrolle Segontin

Kontrolle Segontin

Kontrolle Segontin

Liegen

120 110

125 120

115 110

120 115

145 145

175 160

Blutdruck ( m m H g )

systolisch diastolisch

in 600 )[nderung in 600

nach na~ch 5 rain 15 min

- - 5 0 1 0 ...... + 5

- - 1 0 - - 10 + 10 0

- - 5 --15 - - 5 --10

- - 5 - - 5 + 5 + 5

- - 5 - - 5 - - 5 - - 5

- - 2 5 - - 25 - - 6 0

Liegen

80 70

80 70

75 80

80 80

100 100

115 105

Xnderung

nach 5 min

-- 5

0

+ 5 +15

+ 1 5 + 5

+ 5 + 10

+ 2O + 10

+ 5 - - 25

nach 15 rain

- - 5

0

+ 15 +20

+ 1 0 0

+ 5 + 10

+20 + 5

0

Liegen

60 56

70 66

62 80

54 56

70 64

96 68

Plasma-Brenzk~techinamine Pulsfrequenz (/~g/1)

£~nderung in 60 o

nach nach 5 min 15 rain

+ 4 + 8 + 6 + 8

+ 30 q 34 + 34 + 26

+ 1 6 + 6

~- 16 + 14

+ 22 + 26 q 12 + 14

+ 18 + 18 +10 + 8

-- 4 --12 8

++12 8 -7

Xnderung in 600

Liegen nach nach 5 min 15 rain

0,47 + 0,32 + 0,04 0,91 + 0,14 + 0,06

0,62 +0,32 +0,19 0,84 + 0,54 + 0,28

0,45 + 0,24 + 0,45 0,65 + 0,20 + 0,30

0,43 +0,31 +0,18 0,87 + 0,21 + 0,09

0,51 + 0,34 -- 0,27 0,67 + 0,38 _u 0,20

0,57 + 0,26 + 0,21. 0,86 +0,16

+ 0,72 + 0,59

Tabelle 2. Veriinderung des systolischen und diastolischen Blutdrucks, der Puls/requenz und der Plasma. Brenzkatechinaminkonzentration (it~l) in Ruhe und nach 5 rain Belastung mit 100 Watt~rain am Fahrradergometer im IAegen bei 5 Versuchspersonen vor und nach

300 mg Segontin (180 mg am Vortag, 120 mg am Versuchstag)

I K. }I. Kontrolle Segontin

2 E .F . Kontrolle Segontin

Kontrolle 3 N.P. Segontin

Kontrotle 4 G. 26. Segontin

Kontrolle 5 Segontin

Plasma-Brenzkat eehinamine Blutdruck (mm I[g) Pulsfrequenz (pg/1)

systolisch diastolisoh

hnderung in Ruhe nach 5 min

Belastung

130 + 20 110 +30

135 +50 130 +55

130 +50 140 +45

115 +45 110 + 4 0

150 + 5 0 160 +40

~nderung in l~uhe nach 5 rain

Belastung

I 90 0 75 -- 5

75 + 10 65 - - 5

90 + 10 9O -- 10

75 0 75 + 5

95 + 5 100 + 10

Xnderung in l~,uhe nach 5 rain

Belastung

J 80 + 28 60 + 42

88 + 52 64 @44

76 + 52 88 + 40

80 + 52 60 + 36

i00 @ 28 88 + 44

~nderung in Ruhe nach 5 rain

Belastung

0,20 + 0,I0 0,50 + 0,12

0,18 + 0,20 0,38 + 0,12

0,20 +0,19 0,87 + 0,43

0,58 + 1,25 0,96 + 0,22

0,27 + 0,27 0,10 + 0,34

Ruhewer ten aus erfolgte, war jedoeh zweimM ver- minder t (Versuehsperson 2 und 4); bei diesen P roban- den war aneh der Anst ieg des Brenzka teeh inamin- Plasmaspiegels un t e r Belas tung naeh Segont in gegen- fiber dem Kont ro l lve r sueh verminder t .

Didcussion

Unsere Befunde zeigen, dab Segont in aueh be im Mensehen in the rapeu t i sehen Dosen hgufig Ver/~nde- rungen des Brenzkateehiua~min-Stoffweehsels vet- ursaeht , die zu einem erh6hten Plasmaspiegel der zu- s ammen bes t immten Amine und zu einer e rh5hten Harnaussehe idung beider Amine, besonders yon Adre- nMin, und ihres Metabol i t en 3 -me thoxy-4 -hydroxy- mandels~ure ffihren. Die A n n a h m e liegt nahe, dab es sieh hierbei u m die Folgen der t i e rexper imente l l fes tgeste l l ten Fre i se tzung der Amine aus ihrer Gewebs- b indung mi t Ern iedr igung ihrer Konzen t r a t i on im Nebenn ie r enmark und den sympa th i sehen Nerven handel t . DaB Segont in a m Nebenn ie r enmark angreif t , e rgibt sieh aus der besonders s t a rk ausgepr/~gten Stei-

gerung der AdrenMin-Ausseheidung. Adrena l in s t a m m t haupts/~ehlieh aus dem Nebenn ie renmark und m a e h t beim Mensehen ca. 80% des Gesamt -Brenzka teeh in - amhl -Gehal tes dieses Organs aus. Aueh wi rk t Segont in anf Nebenn ie renmarksg rana la des Meerschweinehens 10faeh st i i rker Amin-f re ise tzend als anf sympath i sehe Nervengranula .

W i t versuehten, die A nna hme einer Senkung des Brenzkateehinamin-Gewebsspiege ls dureh Segont in auf ind i rek tem %reg zu pr/ifen. Die Befunde einer deut l iehen Absehw£ehung der pressorisehen Tyraminwi rkung naeh Segont ingabe bei allen Versuehspersonen s ind e indeut ig und s tehen in P~rallele zu gle iehar t igen Ergebnissen mi t Reserp in 1, 16 Wie sehon erw~hnt, wurde die Deutung der Absehw/iehung der pressori- sehen Tyraminwi rkung du tch Reserp in Ms eine Aus- wirkung der aminen t lee renden W i r k u n g desselben kfirzlieh in F rage gestel l t , da sie dureh Nia lamid , vor g e s e r p i n gegeben, t ro tz Senkung des Aminspiegels au fhebbar sei, und da le tz tere naeh einer Einzeldosis Reserp in die Absehw/~ehung der pressorisehen Tyr-

Jg. 43, tteft 11 I~. J. KuseH:K~ et al. : Wirkungsmechanismus des Phenylpropyl-diphenylpropylamins beim Menschen 621 1. Jun i 1965

aminwi rkung zeitlieh iiberdauGre ~. Die pressorische Tyraminwi rkung ist aber auch abgesehw~eht, wenn d er NoradrenMin-Gewebsspieget n ieht dureh l~eserpin sondern dutch sympathisehe Denervierung gesenkt wurde. Wir mSehten vorerst unsere Beflmde ent- spreehend der al lgemeinen Ansehaunng fiber die in- direkte Tyramimvi rkung so deuten, daft die tierexperi- mentel l naehgewiesene Senkung des Brenzkateehin- amin-GewebsspiegeLs dureh Segontin such beim Mensehen eintr i t t .

Es war bei der Minisehen Pri i fung etwas tiber- rasehend, dal3 Segontin trotz seiner reserpinart igen Wi rknng keinen nennenswer t b lu td rucksenkenden Effekt bei Hyper ton ike rn hat. Unsere Befunde zeigen dar/ iber hinans, dab sympa.thieotone Regulat ions- vorggnge bei orthostat iseher und Arbei tsbelas tung un te r Segont.in im wesentl iehen unbeeintr/~chtigt ab- laufen. Ledig!ieh die kardioaeeeleratorisehe sympathi- sche ~r i rkung wa.r zweimal un te r Orthostase u n d zwei- real un te r Arbei tsbel~stung verminder t und eine Ver- suehsperson ohne Frequenzste igerung ir~ Or~hostase erli t t bei Wiederholung des Versnehs un te r Segontin einen b radykarden Kollaps, der m6glieherweise du tch die Medikat ion mitausgel6st wurde. Der frequenz- senkende Effekt des Segontin ~, ~9, ~1, der weniger dureh die Brenzka teeh inamin-Ent leerung , sondern mi t seiner bloekierenden -Wirknng a,uf die sog./3-adrenergi- schen Reeeptoren ~a zu erkl/tren ist, wirkt sich sonst meist m~r bei erh6hter Ausgangslage aus. So wurde die Pulsver langsamung un te r Ty ramin dutch Segontin n ieht verst,~,rkt.

Allerdings war die Segontindosis mi t insgesamt 360 mg in diesen Versuchen niedriger als in den In- fusionsversuehen mi t Tyramin , bei denen 900 mg ge- geben warden. Eine st/~rkere Beeinflussung der reak- r iven sympathisehen Akt iv ierungen un te r soleh hoher Dosierung erseheint durchaus m6glieh.

Zusammen/assung. Phenylpropyl -d iphenylpropyl - amin (Segontin) ffihrte beim Mensehen in Desert yon 120--180 mg t/~glieh zu Ver/~nderungen des Brenz- katechinamin-Stoffweehsels. Die Harnaussehe idung yon NoradrenMin und/oder Adrenal in u n d ihres Meta- bol i ten 3-methoxy-4-hydroxy-mandels~ure wurde bei 7 yon 9 Versuehspersonen gesteigert, ebenso der Plasmaspiegel der Brenzkateehinamine bei 16 yon 18 Versuehspersonen. Dies wird auf die aus Tierver- suehen bekann te Wirkung des Segontin zurtiekgefiihrt, die Brenzka teeh inamine aus ihren Gewebsbindungen in sympathisehen Nerven mtd im Nebenn ie renmark zu verdr/ tngen bzw. ihre Aufnahme zu verhindern. Die Annahme einer Verminderung der Gewebskonzen- t ra t ion der Amine auch beim MGnsehen unter Segontin wird du tch die AbsehwS~chung der blutdrucksteigern- den Wi rkung yon T y r a m i n bei 12 Versuehspersonen gesttitzt.

Die sympath ieo tonen Regulationsvorg/tnge in Or- thostase n n d un te r k6rperlieher Belas tung wurden dutch Segontin bei den meisten Versuehspersonen night deutl ieh beeintri~ehtigt.

Summary. Oral doses of 120--180 mg Prenylamine in- fluenced the neuroadrenergic system in man. The urinary excretion of Norepinephrine and/or Epinephrine and 3-meth- oxy-4-hydroxy-mandelic acid was increased in 7 out of 9 subjects, the Catecholamine plasma level in 16 out of 18 eases. The presser action of Tyramine given intravenously (2.5 rag/

mill) to 12 healthy suhjects was greatly diminished by pretreat- ment with 180 mg Prenylamine daily over a 5 day period.

However the increase of blood pressure, puls rate and catecholamine plasma level during tilting and physical exercise was not markedly diminished by pretreatment with 120 mg Prenylamine daily over a period of 3 days.

Literatur. 1 ABBOVD, F. M., and J. W. ECKSTEZN: Effect of small doses of reserpine on vascular responses to tyramin and norepinephNne in man. Circulation 29, 219 (1964). - - 2 ANDERSON, D. E.: Med. ;I. Aust. 50, 149 (1963). I{ef. in Hoeehst-Mitt. - - ~ BI~eK, P.: Untersuchnngen zur medika- mentSseu Beeinflussung des Brenzkateehinamin-Haushaltes. Diss. Wfirzburg 1963. - - 4 B S ~ , C., M. Sem~PP~ u. E. WITZLE~: Eine neue koronargefggerweiternde Substanz. Dtseh. med. Wsehr. 85, 1405 (1960). - - ~ BurN, J. H., and M. J. RAND: Effect of reserpine on vasoconstriction caused by sympathomimetic amines. Lancet 1998I, 673. 6 Ca~Ls- son, A., N. A. HmLA~P, and B. W_~DEC~: Analysis of the Mg++-ATP dependent storage mechanism in the amine granules of the adrenal medulla. Acta physiol, stand. 59, Suppl. 215 (1963). m 7 EVLE~, U. S. v., and I. FLom~'¢: A fhmrometric micromethod for differential estimation of adrenaline and noradrenMine. Acta physiol, scowled. 33, Suppl. 118, 45 (1955). - - s EULER, U. S. v., and I. 0RWESr: Preparation of extracts of urine and organs for estimation of free and conjugated noradrenMine and adrenaline. Aeta physiol, stand. 33, Suppl. 118, 1 (1955). - - 9 GADDVM, J. H., W. A. I{mvo~ ~, and G. LAV~T¥: The action of reserpine on the exeretion of adrenaline and noradrenaline. J. Neuro- chem. 2, 249 (1958). - - 10 G.~o~, S.:.Neurovegetatives Ver- halten und Segontin-Applikation. Arzfl. Forsch. 15, 38 (1961). - - 11 HELm(~, J.: Elektrokardiographische Unter- suehungen und kliifische Beobachtungen fiber die Wirkung yon Segontin beim Angina pectoris-Syndrom. Miineh. med. Wschr. 103, 100 (1961). - - r, KOOJZsI~eK, K., H. J. B~ET- SeJ~N~IDE~ U. E. SC~Er, E~: Vergleichende experimentelle Untersuehungen fiber die coronargefgl3erweiternde Wirkung von Phenyl-propyl-diphenylpropyl-amin. Arzneimittel-Forseh. 1O, 576 (1960). - - aa KVSCJ~KE, H. J., u. H. v. DZ~V~TH: Die Ausseheidung yon Noradrenalin und Adrenalin unter hoch- dosierter t~eserpinbehandlung. Klin. Wsehr. 36, 773 (I958). - - ~LIsr~)xE~, E.: Phenyl-propyl-diphenyl-propyl-amin, eine neue Substanz re.it coronargeNi~erweiternder Wirkung. Arznei- mittel-Forsch. 10, 569 (I960), - - ~ LISrD~E~, E. : Wirkung yon Phenyl-propyl-diphenyl-propyl-amin-Glukonat auf den tIerz- muskelstoffwechsel. Verh. dtsch. Ges. Kreisl.-Forseh. 1961. - - 1~ Ma~o~, W. A., and M. L. M~sn~o~n: The presser effect of tyramin in man and its modification by reserpine pre- treabment. J. olin. Invest. 42, 338 (1963). --1~ M~C~ES~, S., e A. T~DOLDZ: gilievi clinici e strumentali su un nuovo preparato ad azione antianginosa. Minerva reed. 54, 1177 (1963). - -~s Ma~axo, IF., e V. P~OMAXO: Osservazioni a pro- posito della sperimentazione elinica di un nuovo eomposto antianginoso di sintesi: la 3-fenil-propil-difenil-propil amina. Minerva med. 54, 1193 (1963). - - ~ Mm~L, D. : H~modynami- sche Effecte nach Segontin-Injektion. Med. Klin. ~5, 1428 (1960). - - e00V:Em~a~, H.: Doppelblindversuehe mit dem Coronartherapeutieum Segontin. Ned. Klin. gS, 1423 (1960).-- mPIPPI~, L., K. W. SO~rN~]ID~g u. H. Hoem~EzN: Unter- suehungen fiber das Verh~lten des Herzminutenvolumens nnd weiterer hgmodynamischer Gr6Ben unter der Wirkung yon Phenyl-propyl-diphenyl-propylamin. Med. Klin. 57, 1475 (1962). - - ~ RaTSOHOW, M., u. W. Se~ooP: Ktinisehe Erfah- rungen mit Segontin. Med. Klin. ~5, 1421 (1960). - - ea RXVEN, H. NL, u. I. AnBE~¢: Die Ansseheidung yon 3-methoxy-4- hydroxy-mandelsgure beim Menschen naeh Verabreichung yon Segontin. Klin. Wschr. 42, 443 (1964). - - ea Sc~ID, E,, u. N. I-IE~zNa: ~ber den Nachweis der 3-methoxy-4-hydroxy- mandelsgure im Harn. Klin. Wschr. 41, 566 (1963). - - ~ Sc~6~, H. H., u. E. L~ND~E~: Die ~¥irkungen des N-[3'- Phenylpropyl- (2') ]- 1,1-diphenyl-propyl-(3)-amins auf den Stoff- weehsel yon Serotonin und Noradrenalin. Arzneimittel-Forseh. 10, 583 (1960); - - t)ber die Wirkung yon N-[3'-Phenyl- propyl-(2')]-l,l-diphenyl-propyl-(3)-amin auf den Katechol- amin-Stoffwechseh Klin. Wsehr. 40, 1196 (1962). --- e~ SChU- MaNN, H. J., u. A. PtnLIPPU: Untersuehungen zum Mechanis- mus der Freisetzung yon Brenzkatechinaminen durch Tyr- amin. Naunyn-Schmiedebergs Arch. exp. Path. Pharmak. 241, 273 (1961). - - ~ Scmiga~N, H. J., n. A. P~nxPerr: Die Bedeutung divaJenter Ka.tionen ffir die Speicherung der Neben- nierenmark-I-Iormone in den ehromaffinen Granula. 5. Frfih- jahrstagg Dtseh. Pharmakol. Ges. 1964. - - es Se~/2N~NN, H. J.,

622 H. OEPE~- et al. : Untersuchung der Stabilitgt freier und gebundener Aminosguren Klinische Wocheaschrif~

H. SC~ELn u. A. P~rmlr~V: Subeellulgre Verteilung yon NoradrenMin und Adrenalin im Meersehweinchenherzen. Naunyn-Sehmiedebergs Arch. exp. Path. Pharmak. 249, 251---266 (1964). - - ~ Van~a, D.R. , 1~. A. GILLIS, and B. G. B n x ~ : Reserpine as an antagonist of tyramin. J.

Pharmaeo]. exp. Ther. 144, 181 (1964). - - ao WEIL-~AL- ~tEEBE, H.; In: Meth. med. Res. 9, 130 (1961).

Anschri/t: Priv.-Doz. Dr. H. J. Kvse~:n Med. Univ.-Klinik 87 Wiirzburg

Ehltionschromatographische Untersuchung der Stabilit~t freier und gebundener Aminos~iuren in menschlichem Vollblut und Serum*

Von H. 0~1"~ , I. 0 ~ t ' ~ u n d L. LA~B:EI1,T

Aus dem ins t i l / I t ffir t t u m a n g e n e t i k (Direktor : ~rof. Dr . G. G. WI~I~D~I,) der Phil ipps-lJrdversi tg~ Marburg a . d . L a h n

Die Eiweifl/raktionen und Fermente eines Misch- serums, das 5---6 Jahre ohne Konservierungsmit~el bei Z immer tempera tur gelagert wurde, bo ten bei Unter- suchungen yon LA~x~, FEz~E~ und CRE~E~ ~ elektro- phoretisch gleiehe Verhgltnisse wie die EiweiBfrak-

%

140

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A sparc(g~hsaure O!utominsdbre Ol~Jn

I . x ffl~ /

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i~ 20 ° 4 ° 20 °

~mperatur

Abb. Individuel le Ingensi tg tsunterschiede der Zun~,hme einzelner Amino- s~iurekonzentrationen i m Serum der Probanden 2b ( = - - ) und 3a ( . . . . )

naeh 24stfindiger Aufbewahrung bei 4" a n d bei 20o0

t ionen u n d Fermente von frisehen Seren gesunder Probanden. St~D~OF u n d WOTZEL ~ stell ten dagegen an Seren, die bei Z immer tempera tur , __40 u n d - - 2 0 ° C aufbewahr t worden waren, eine auf wenige S tunden eingesehrgnkte Verwertbarkei t f/Jr die Aktivi tgts- bes t immungen yon E n z y m e n lest. I n Blutptasma, das ohne voranfgehende EnteiweiBung 7Mona t e bei - - 2 0 ° C eingefroren war, zeigten sieh bei quan t i t a t ive r Analyse du tch STEI~ u n d Moo~E a aueh Vergndertmgen des Aminos~iurespektrums, n~mlieh h6here Glutamin- sgure- und Asparaginsgurewerte a n d niedrigere Cystin- werte als im frisehen Blutplasma. Dami t erhebt sieh die Frage, wie lange u n d un te r welehen Bedingungen ein Blur, dessen Aminosgurespekt rum bes t immt wet- den sell, yon der E n t n a h m e bis zur Aufberei tung auf- bewahrt - - u n d t ranspor t ie r t - - werden darf. I m folgenden beriehten wit fiber Versuehsergebnisse, die den EinfluS yon

A u/bewahrungsdauer, A u/bewahrungstemperatur n n d g u h e oder Bewegung

auf die Konzen t r a t i on einzelner Amines&uteri im mensehlichen Vollblut u n d Serum erkennen lassen.

Material und Methode Das untersuehte Blur stammt yon 5 Patienten der Medi-

zinJsehen Universitgtsklinik Ma:rburg a. d. Lahn(3Q, 2 ~) im Alter von 41--72 Jahren.

* Die Untersuehung wurde dureh eine Saehbeihilfe der Deutsehen Forsehungsgemeinsehaft ermSglieht.

Bei den therapeutiseh indizierten neun Aderlgssen waren die betreffenden Kranken dreimM niiehtern, sechsmM nieht niiehtern. Die krankheitsbedingte Besehaffenheit der Blare erfordm-te start der bei Gesunden benStigten Menge Blur yon 50 ml pro Analyse (der freien und gebundenen, sauren, neutra- len und basisehen Aminosguren) 70 ml Vollblu%

Von jedem AderlaB wurde eine Probe innerhalb yon 2 Std naeh Entnahme verarbeiteL d.h. naeh Spontangerinnung 10 rain bei 3000 U/rain zentrifugiert, der abgesaugte ~ber- stand im Verhgltnis 1:1 mit 20%iger Triehloressigsgure ver- setzt und der dureh noehmMiges Zentrifugieren (I0 rain bei 4000--5000 U/rain) gewonnene Fgllungsfiberstand filtrierg and dreimM mit 20 ml ~ther ausgesehiittelt. Bis zur Analyse blieb das Serum darm in einem Plastikflgsehehen bei einer Tempera- fur von --15°C in der Tiefk~hltruhe aufbewahrt.

Andere Proben des gleiehen Aderlasses wurden bis zur Aufbereitung

als Vollblug oder Serum 24, 48 oder 72 Std bei + 40 oder + 20°C aufbew~hrt oder 4 Std bei ca. 10°C als Vollblut gesehfittelt.

Vollblut mit Heparinznsatz und Plasmaproben wurden den gleiehen Bedingungen ausgesetzt. Diese Proben zeig- ten sehon naeh dem Zentrifugieren eine feine bis grobflok- kige Triibung oder Hgmolyse. Hepa.rinisierte Proben sind also na, eh Aufbewahrung unter den genannten Bedingungen nieht mehr einwandfrei. Aus diesem Grunde nnd im Hinbliek auf die Befunde yon STm~ and Moo~E wurden sie nicht anMysiert.

Die Elutionschromatographie der Seren erfolgte mit der yon Ha~rmG 1 entwiekelt~n Apparatur in der yon uns bereits besehriebenen WeiseL Sie ergab auf Grand der gewghlten En~iweit3nng, Temperaturen and Puffer eine einwandfreie Trennung yon Cystin und Valin und weiteren bei anderer Vorbehandlung sehwer t.rennbaren Aminosguren '~. Uberlage- rung yon Cystin und ~-Amino-Buttersgure konnte dureh Puffervariation behoben werden (pH 3,31 und 4,25 oder pI-I 3,26 and 4,09). Die ~ehlerbreite der iVfethode wurde an [-Ia.nd einer Seehsfaehbestimmung des Ntiehternserums einer gesunden m~nnliehen Versuehsperson erreehnet. Die aus die- sere Serum gewonnenen sechs Proben warden einzeln auf- bereitet. Im Untersehied zur YeMerbestimmung an Test- gemisehen enthglt der so ermittette methodisehe Fehler a.uBer der Yehlerbreite der Apparatur aueh diejenige der Vorbehand- lung. Die Standardabweiehung ist in Tabelle 2 und 3 f/it jede Aminosgure in Prozent des Mittelwertes der Seehsfaehbestim- mung angegeben. Obwohl das Verha,lten der basisehen Amino- sguren nach Hydrolyse prinzipiell interessierte, wurden sie aus 6konomisehen Grfinden nieht bestimmt.

Ergebnisse I. Freie Aminosiiuren a) Generell zeigt Tabelle 2, dab 72stfindige Auf-

bewahrung yon enteiweifltem Serum bei einer Tempera- tu r yon 20°C das Aminosgurespekt rum relat iv wen ig vergndert . Immert f in lgBt sich aueh hier eine dureh- gehende leiehte Zunahme der Aminosgurewerte nicht fibersehen. Sie ist am stgrksten fiir Alanin, Valin, Leuein und II is t idin, geringer ftir Isoleuein u n d Orni- thin. E i n erniedrigter Wer t f inder sieh nu r ftir Cystin.

Bei Aufbewahrung von niehtenteiweifitem Serum zeigen sieh sehon naeh 24 Std deugiehe Konzent ra - t ionsgnderungen. Sie sind f/ir einige Aminosguren am geringsten, wenn die Seren bei einer Tempera tu r yon