Diagnostic de l’infection tuberculeuse par ELISPOT chez des

patients sénégalais infectés par le VIH

C. LienhardtIRD & Union Internationale Contre la Tuberculose

Paris, France

3ème Journée Nord-SudUNESCO – 25 Novembre 2008

8.8 million nouveaux cas de TB et 1.6 million de décès dûs à la TB - 2005

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Estimated new TB cases (all forms) per 100 000 population

Prévalence estimée du VIH chez les cas TB, 2005

0 - 4

5 - 19

20 - 49

50 or more

HIV prevalence in TB cases, 15-49 years (%)

No estimateThe designations employed and the presentation of material on this map do not imply the expression of any opinion whatsoever on the part of the World Health Organization concerning the legal status of any country, territory, city or area or of its authorities, or concerning the delimitation of its frontiers or boundaries. White lines on maps represent approximate border lines for which there may not yet be full agreement.

© WHO 2004

Impact du VIH sur la TB en Afrique

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ZimbabweKenyaMalawiUR TanzaniaCôte d'Ivoire

Lucas, AIDS 1993; Rana JAIDS 2000

Etudes autopsies, adultes VIH+ (avant les ARV), Abidjan 1990-1992 et Nairobi 1996-1997

Cause du Décès (%)

Abidjan Nairobi

Tuberculose 32 47

Infections Bactériennes 25 28

Toxoplasmose 10 0

Pneumocystose 2 0

Cryptococcose 2 4

Tuberculose: 1ère cause de décès de l’adulte VIH+

Incidence de TB après la séroconversion, adultes sud-africains, 1991-1997

IncidencePour 100 patient-années

RR

HIV-négatifs 0.80 1HIV-positifsTemps depuis séroconversion

< 1 an 1.62 2.021-2 ans 2.00 2.502-3 ans 3.61 4.50

Sonnenberg, JID 2005

Le risque de tuberculose augmente très vite après la primo-infection VIH

Co-Infection et Maladie

• 14 million personnes co-infectées par VIH et M.tuberculosis à présent

• Chez les personnes co-infectées, le risque annuel de développer une TB est de 5 à 15%, et sur la vie entière, autour de 50%

Prophylaxie de la TB chez les adultes VIH+

• 11 essais randomisés, dont 4 en Afrique• En général, Isoniazide en prise quotidienne ou

2x/semaine• Durée: de 6 à 12 mois• Risque de TB diminué: 0.41 (95%CI, 0.24 - 0.71)

chez les personnes avec PPD + ( 5 mm) - (Méta-analyse: Bucher, AIDS 1999 )

• Si pas de test cutané (PPD): réduction du risque de TB active de 0.58 (95%CI, 0.39 - 0.87)

Prophylaxie de la TB chez les adultes VIH+

• Recommandée par l’OMS depuis 1993– INH 5 mg/Kg/j pendant 6 mois– Après avoir écarté le diagnostic de tuberculose active

• Mais non pratiquée en fait, car : – crainte d’émergence de résistances– implique un changement majeur des pratiques– doute sur l’intérêt à moyen/long terme – incertitude du diagnostic de l’infection tuberculeuse

“Interferon-γ Release Assays” (IGRA)

• Tests mesurant la production d’IFN- par les cellules T activées en réponse à une stimulation par des antigènes spécifiques de M.tuberculosis, ESAT-6 et CFP-10 (EC)

• Réponse plus spécifique et probablement plus sensible que le test à la tuberculine (Pai et al 2004, 2006).

ELISPOT +ELISPOT -

Interferon-γ Release Assays (IGRA) – ELISPOT

Interferon-γ Release Assays (IGRA)

• Données cependant limitées chez les individus immuno-compromis

• Importance de la détection de la TB chez les personnes vivant avec le VIH:– Infection tuberculeuse: traitement

prophylactique– TB avérée: traitement spécifique (6 mois)

→ test hautement sensible et spécifique

OBJECTIFS• Objectif général: investiguer la performance d’un test

ELISPOT pour le diagnostic de l’infection tuberculeuse latente chez des personnes infectées par le VIH dans une zone de forte prévalence tuberculeuse

• Objectifs spécifiques:– Mesurer la réponse à l’ELISPOT utilisant les antigènes

ESAT6/CFP10 (EC) et PPD chez des personnes infectées par le VIH sans TB active,

– Comparer cette réponse avec les résultats du test tuberculinique

– Identifier les déterminants d’une réponse ELISPOT positive chez les personnes infectées par le VIH sans TB active

• Etude approuvée par le Comité d’Ethique du Ministère de la Santé du Sénégal.

METHODEMETHODE• Lieu de l’étude: Dakar, Sénégal

– CTA - Maladies Infectieuses, Fann– Détection TB: 132/100,000/an– HIV séro-prevalence: 1.4%

• Inclusion: – Individus âgés > 18 ans– Diagnostic infection VIH < 3 mois– Résidant à Dakar– Pas de signe de TB active

• Exclusion: – TB confirmée dans la dernière année– Chimioprophylaxie de la TB dans les 6 derniers mois

METHODEMETHODE

• Tests de l’infection TB: – Test tuberculinique (TST): Mantoux– Interferon- ELISPOT assay:

• ESAT-6 and CFP-10 antigens (combined pool of 35 peptides)

• PPD• PHA contrôle positif• “Cut off” positivité: > 20 SFC/10 millions cells• anergie si PHA < 100 SFC/10 millions cells

RESULTATSRESULTATS

• 285 sujets recrutés dans l’étude• 38/285 sujets (13.3%): pas de réponse à PHA

(<10 SFC/million cells) → exclus de l’analyse (anergie)

• N=247 sujets dans l’étude• Caractéristiques démographiques et cliniques

similaires • Sexe: fem: 115 (40.4); masc: 170 (59.6)• Age median: 37 (IQR: 30-44)• TST +: 53 (21.5)

<50 50-199 200-349 >350

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200

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600

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CD4 count (per mm3)

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Distribution des réponses à l’ELISPOT EC, par CD4 countDistribution des réponses à l’ELISPOT EC, par CD4 count

Proportions de réponses positives au test Proportions de réponses positives au test ELISPOT EC et TST, par CD4 countELISPOT EC et TST, par CD4 count

9 individuals had undetermined CD4 counts

P for trend: 0.001

Determinants de la positivité du test ELISPOT EC (n=247)Determinants de la positivité du test ELISPOT EC (n=247)

Variables EC Elispot positive response

Univariate OR [95% CI] p Adjusted OR [95% CI] p

CD4 class - < 50 - 50 – 199 - 200 – 349 - ≥ 350 - undetermined

11.7 [0.8-3.5]2.9 [1.2-7.2]3.1 [1.5-6.5]0.9 [0.2-4.2] 0.018

11.5 [0.7-3.2]2.7 [1.1-7.1]3.2 [1.5-7.0]0.7 [0.1-3.8] 0.016

HIV type - HIV 1/dually infected - HIV 2

10.4 [0.2-0.9] 0.03

10.3 [0.1-0.8] 0.02

CDC class - A - B or C

11.2 [0.7-2.0] 0.59

- -

Age (years) - < 30 - 30-39 - 40-49 - ≥ 50

10.9 [0.5-1.8]0.7 [0.3-1.5]5.0 [1.5-16.9] 0.016

10.9 [0.4-1.9]0.8 [0.4-1.8]4.3 [1.3-13.6] 0.024

Gender - Male - Female

10.8 [0.5-1.3] 0.45

10.7 [0.4-1.3] 0.26

CONCLUSIONCONCLUSION

• Dans cette cohorte, le test ELISPOT EC est plus sensible que le test tuberculinique pour le diagnostic de l’infection tuberculeuse latente chez les PvVIH

• Cette sensibilité apparaît cependant dépendante du degré d’immuno-suppression, mesuré par le compte de CD4

CONCLUSIONCONCLUSION

• Il apparaît nécessaire de clarifier les critères de validité de l’ELISPOT pour le diagnostic de l’infection tuberculeuse latente chez les PvVIH, en particulier le niveau du “cut-off” entre test positif et négatif

• ELISPOT apparaît utile dans le diagnostic de l’infection tuberculeuse latente chez les PvVIH mais plus amples études nécessaires pour clarifier son rôle dans la prescription et le suivi de la chimioprophylaxie anti-tuberculeuse.

ACKNOWLEDGEMENTSACKNOWLEDGEMENTS

Hopital Fann Hopital Fann Maladies Infectieuses - CTAMaladies Infectieuses - CTAProf PS SowDr N.F.Ngom Dr K. Diack CoulibalyDr C.S. Senghor Dr A Niang

IRDIRD Dr F MbowDr CT Ndao Mr JF GomisMs C DioufMs NM DiopMr JP NguessanMr AD KaMr M Ackey

CHU LE DantecCHU LE Dantec Microbio-Microbio-Virology UnitVirology UnitProf S MboupProg A. G DialloProf T DieyeDr F KaramDr M Toupane

Funding : European Comission-Contrat ICA4-2001-10126

Oxford UniversityOxford UniversityProf A. HillDr H. Fletcher

LSHTMLSHTMDr A. LeFevre

McGill University - McGill University - FINDFINDM. PaiR. O’Brien