IdentificaciIdentificacióón y Serotipificacin y Serotipificacióón de n de Salmonella Salmonella spp. spp.
San JosSan Joséé de Costa Rica (Costa Rica) de Costa Rica (Costa Rica) –– 27 de abril al 2 de Mayo de 200927 de abril al 2 de Mayo de 2009
IV Curso de CapacitaciIV Curso de Capacitacióón del Programa WHO Global n del Programa WHO Global Salmonella Surveillance Salmonella Surveillance –– AmAméérica Centralrica Central
Dra. María Inés CafferServicio Enterobacterias
Departamento Bacteriología INEI – ANLIS “Dr. Carlos G Malbrán”
CaracterCaracteríística Microbiolstica Microbiolóógicas gicas del Gdel Géénero nero Salmonella Salmonella
El gEl géénero nero SalmonellaSalmonella pertenece a la Tribu pertenece a la Tribu SalmonelleaeSalmonelleae, de la Familia , de la Familia Enterobacteriaceae.Enterobacteriaceae.
Los miembros del gLos miembros del géénero nero SalmonellaSalmonella son bacilos son bacilos gramgram--negativos, de 0,7negativos, de 0,7--1,5 x 2,01,5 x 2,0--55µµm, generalmente m, generalmente mmóóviles por flagelos perviles por flagelos períítricos (excepto tricos (excepto SS. Gallinarum), . Gallinarum), anaerobios facultativos, no esporulados. anaerobios facultativos, no esporulados.
TaxonomTaxonomíía del Ga del Géénero nero SalmonellaSalmonella
Salmonella enterica que se divide en 6 subespecies:
Salmonella enterica subespecie enterica (I)
Salmonella enterica subespecie salamae (II)
Salmonella enterica subespecie arizonae (IIIa)
Salmonella enterica subespecie diarizonae (IIIb)
Salmonella enterica subespecie houtenae (IV)
Salmonella enterica subespecie indica (VI)
Salmonella bongori (V)
El Género Salmonella comprende 2 especies:
Nomenclatura del GNomenclatura del Géénero nero SalmonellaSalmonella
Únicamente las serovariedades de Salmonella enterica subespecie enterica( que costituyen más del 99,5 % de los aislamientos de Salmonella) se designan con un nombre, relacionado con el lugar geográfico donde se aisló la primera cepa de la nueva serovaridad. Este nombre se escribe con letras romanas, no en itálica y la primer letra va con mayúscula.Ej. Salmonella Typhimurium; Salmonella Oran
Las serovariedades pertenecientes a las subespecies restantes deSalmonella enterica y a Salmonella bongori (muy escasas en patología humana y veterinaria) se designan con el nombre de la subespecie, seguido de la fórmula antigénica.Ej. Salmonella IV 50 : b : - y Salmonella IV 44 : a : -.
Los nombres de todas las serovariedades están contenidos en el Esquema de Kauffmann-White, publicado por el “Centro Colaborador de la OMS de Referencia e Investigación de Salmonella”, del Instituto Pasteur de París.
TTéécnicas de aislamiento, cnicas de aislamiento, identificaciidentificacióón y caracterizacin y caracterizacióón de n de
SalmonellaSalmonella spp. spp.
Flujograma de Aislamiento,Flujograma de Aislamiento, IdentificaciIdentificacióón y Caracterizacin y Caracterizacióón de n de Salmonella Salmonella spp.spp. a partir de materia fecala partir de materia fecal
Una vez realizada la identificación bioquímica y la serotipificación, se continúa con:• La determinación de la sensibilidad a los antimicrobianos• Estudios de subtipificación molecular por electroforesis en campo pulsado (PFGE), para el estudio de brotes y para el monitoreo programado de aislamientos circulantes.
MATERIA FECAL (HISOPO)
Suspensión en solución fisiológica
Caldo de enriquecimiento Aislamiento en medios selectivos y
diferenciales
18-24 hs, 37ºC
Aislamiento en medios selectivos y diferenciales
Colonias típicas
TSI LIA Estría
18-24 hs, 37ºC
Lectura Colonias típicas
TSI LIA Estría
P. bioquímicas
Serotipificación O
Caldo Flagelar
Lectura de P. Bioq.
P. bioquímica
Serotipificación O
18-24 hs, 37ºC
Lectura de P. Bioq. Serotipificación H
1er. día
2do. día
3er. día
4to. día
Propiedades bioquPropiedades bioquíímicas diferenciales de micas diferenciales de las subespecies de las subespecies de SalmonellaSalmonella
Pruebas bioquímicas
S. enterica
subesp. enterica(I)
S. enterica
subesp.salamae (II)
S. enterica
subesp.arizonae
(IIIa)
S. enterica
.diarizonae
(IIIb)
S. enterica
subesp.houtenae
(IV)
S. enterica
subesp.indica
(VI)
S. bongori
(V)
Dulcita + + - - - d +ONPG - - + + - d +Malonato - + + + - - -Gelatina - + + + + + -Sorbita + + + + + - +KCN - - - - + - +L(+) tartrato + - - - - - -Mucato + + + - (70%) - + +Salicina - - - - + - -Lactosa - - - (75%) + (75%) - d -Habitat de la mayoría de las cepas
Animales de sangre caliente
Animales de sangre fría y medio ambiente
+ 90% ó más de los resultados positivos; - 90% ó más de los resultados negativos; d: diferentes
reacciones
Pruebas bioquímicas
S. enterica
subesp. enterica(I)
S. enterica
subesp.salamae (II)
S. enterica
subesp.arizonae
(IIIa)
S. enterica
.diarizonae
(IIIb)
S. enterica
subesp.houtenae
(IV)
S. enterica
subesp.indica
(VI)
S. bongori
(V)
Dulcita + + - - - d +ONPG - - + + - d +Malonato - + + + - - -Gelatina - + + + + + -Sorbita + + + + + - +KCN - - - - + - +L(+) tartrato + - - - - - -Mucato + + + - (70%) - + +Salicina - - - - + - -Lactosa - - - (75%) + (75%) - d -Habitat de la mayoría de las cepas
Animales de sangre caliente
Animales de sangre fría y medio ambiente
+ 90% ó más de los resultados positivos; - 90% ó más de los resultados negativos; d: diferentes
reacciones
Pruebas bioquímicas
S. enterica
subesp. enterica(I)
S. enterica
subesp.salamae (II)
S. enterica
subesp.arizonae
(IIIa)
S. enterica
.diarizonae
(IIIb)
S. enterica
subesp.houtenae
(IV)
S. enterica
subesp.indica
(VI)
S. bongori
(V)
Dulcita + + - - - d +ONPG - - + + - d +Malonato - + + + - - -Gelatina - + + + + + -Sorbita + + + + + - +KCN - - - - + - +L(+) tartrato + - - - - - -Mucato + +
Pruebas bioquímicas
S. enterica
subesp. enterica(I)
S. enterica
subesp.salamae (II)
S. enterica
subesp.arizonae
(IIIa)
S. enterica
.diarizonae
(IIIb)
S. enterica
subesp.houtenae
(IV)
S. enterica
subesp.indica
(VI)
S. bongori
(V)
Dulcita + + - - - d +ONPG - - + + - d +Malonato - + + + - - -Gelatina - + + + + + -Sorbita + + + + + - +KCN - - - - + - +L(+) tartrato + - - - - - -Mucato + + + - (70%) - + +Salicina - - - - + - -Lactosa - - - (75%) + (75%) - d -Habitat de la mayoría de las cepas
Animales de sangre caliente
Animales de sangre fría y medio ambiente
+ 90% ó más de los resultados positivos; - 90% ó más de los resultados negativos; d: diferentes
reacciones
.
ONPG -
Producción de SH2+
Fermentación de glucosa *** +/con gasFermentación de dulcita *** +Fermentación de adonita *** -Decarboxilación de lisina ** +Decarboxilación de ornitina ** +Hidrólisis de arginina ** +Hidrólisis de urea ** -Producción de indol -Hidrólisis de gelatina **** -Reacción de rojo de metilo * +Reacción de Voges Proskauer * -Citrato de Simmons ** +Utilización de malonato * -*Lectura a los 2 días; ** Lectura hasta los 4 días; *** Lectura hasta los 7 días; **** Lectura hasta los 30 días
Pruebas bioquPruebas bioquíímicas de micas de Salmonella Salmonella
entericaenterica subesp. subesp. entericaenterica (I)(I)
Pruebas bioquímicas Salmonella enterica subep. enterica (I)
Fermentación de lactosa *** -
Caracteres bioquCaracteres bioquíímicos diferenciales entre micos diferenciales entre SS. Typhi, . Typhi, SS. Paratyphi A y . Paratyphi A y SalmonellaSalmonella spp.spp.
P. bioquímicas S. Typhi S. Paratyphi A Salmonella spp. SH2 (TSI) Trazas - + Lisina decarboxilasa + - + Ornitina decarboxilasa - + + Arginina dehidrolasa - - + Glucosa (gas) - + + Citrato Simmons - - +
+ 90% ó más de los resultados positivos; - 90% ó más de los resultados negativos
Caracteres bioquCaracteres bioquíímicos diferenciales entre micos diferenciales entre Salmonella Salmonella
entericaenterica subesp. subesp. entericaenterica (I) y (I) y Proteus mirabilisProteus mirabilis
Pruebas bioquímicas Salmonella enterica subesp.enterica (I)
Proteus mirabilis
SH2 (TSI) + +Hidrolisis de urea - +Fenilalanina deaminasa - +Lisina decarboxilasa + -Ornitina decarboxilasa + +Lactosa - -Dulcita + -ONPG - -
+ 90% ó más de los resultados positivos; - 90% ó más de los resultados negativos
Caracteres bioquCaracteres bioquíímicos diferenciales entre micos diferenciales entre Salmonella Salmonella
entericaenterica subesp. subesp. entericaenterica (I) y (I) y Citrobacter freundiiCitrobacter freundii
Pruebas bioquímicas Salmonella enterica subesp. enterica (I)
Citrobacter freundii
SH2 (TSI) + +
Urea (hidrólisis) - d Lisina decarboxilasa + - Ornitina decarboxilasa + d Lactosa (fermentación) - d Sacarosa (fermentación) - d Dulcita (fermentación) + d Malonato (fermentación) - d ONPG - +
+ 90% ó más de los resultados positivos; - 90% ó más de los resultados negativos; d: diferentes reacciones
Caracteres bioquCaracteres bioquíímicos diferenciales entre micos diferenciales entre Salmonella Salmonella
entericaenterica subesp. subesp. entericaenterica (I), (I), Edwarsiella tardaEdwarsiella tarda y y Escherichia coliEscherichia coli SHSH22 ++
P. bioquímicas S. enterica subesp.enterica (I)
E. tarda E. coli SH2 +
Indol - + +Citrato Simmons + - -Lisina decarbox. + + +Arginina dehidrol. + - -/+Manita + - +Dulcita + - +/-Ramnosa + - +Xilosa + - +ONPG - - +
+ 90% ó más de los resultados positivos; - 90% ó más de los resultados negativos
SerotipificaciSerotipificacióón de n de SSalmonella almonella spp.spp.
Esquema de KauffmannEsquema de Kauffmann--WhiteWhite
CCáápsulapsulaAg ViAg Vi
Pared celularPared celularMembrana Membrana plasmplasmááticatica
ADNADNRibosomasRibosomas
Flagelo Flagelo bacterianobacterianoAg flagelar HAg flagelar H
PilusPilus
CitoplasmaCitoplasma
LLíípi
do A
pido
A
Cor
eC
ore
LPS
LPS
Ag somAg somáático Otico O
Estructura antigEstructura antigéénica de nica de SalmonellaSalmonella spp.spp.
ANTIGENOS DEL GENERO ANTIGENOS DEL GENERO SalmonellaSalmonella
El estudio de la estructura antigénica del género Salmonellapermite tipificar las bacterias que lo componen en serovariedades (serotipos).
La serotipificación completa se basa en la determinación de los antígenos somáticos O, los antígenos flagelares H y el antígeno capsular Vi (si está presente).
La serotipificación:
Es un importante complemento de la identificación bioquímica.
Permite determinar la prevalencia de una serovariedad en distintas zonas geográficas.
Es de utilidad en el estudio de brotes y en la vigilancia basada en el laboratorio
I.I.-- AntAntíígeno somgeno somáático Otico OESTRUCTURA DEL LPS ESTRUCTURA DEL LPS
S. S. Typhimurium Typhimurium
Abe: Abecuosa
Man: D-Manosa
Rha: L-Rhamnosa
Gal: D-Galactosa
GlcNAc: N-Acetil-D-Glucosamina
Glc: D-Glucosa
Hep: L-Glicero-D-Manoheptosa
KDO: 3 Deoxi-D-Acido Manooctulosilonico
EtN: Etanolamina
P: Fosfato
Rick,P. E. coli and S. Typhimurim
Celular and Molecular Biology. Vol 1, 1987
Antigeno O CORE
Exterior Interior
Abe
Man Rha Gal
Glc Hep Hep KDO
Hep PP – EIN
P KDO P
KDO Ein
Glc Gal
Gal
GlcNAc LIPIDO A
n
Antigeno O CORE
Exterior Interior
Abe
Man Rha Gal
Glc Hep Hep KDO
Hep PP – EIN
P KDO P
KDO Ein
Glc Gal
Gal
GlcNAc LIPIDO A
n
I.I.-- AntAntíígeno somgeno somáático Otico OEXPRESIEXPRESIÓÓN DEL ANTIGENO ON DEL ANTIGENO O
ExpresiExpresióón del Antn del Antíígeno somgeno somáático Otico OLa estructura somLa estructura somáática se denomina con la letra O tica se denomina con la letra O seguida de seguida de : : ““dos puntosdos puntos”” y luego de ny luego de núúmeros armeros aráábigos bigos separados por comasseparados por comasPor ejemplo:Por ejemplo:
S. S. TyphimuriumTyphimurium O:O:11,4,[5],12,4,[5],12S. S. EnteritidisEnteritidis O:O:11,9,12,9,12
Los sLos síímbolos para los factores sommbolos para los factores somááticos determinados por conversiticos determinados por conversióón fn fáágica gica estestáán subrayados (por ej. n subrayados (por ej. 11,9,12),9,12)[ ] = los factores O entre corchetes, no subrayados, pueden est[ ] = los factores O entre corchetes, no subrayados, pueden estar presentes ar presentes o ausentes sin relacio ausentes sin relacióón con la conversin con la conversióón fn fáágica. Por ej. factor [5] del grupo gica. Por ej. factor [5] del grupo O:4 (B).O:4 (B).
Estructura antigEstructura antigéénica O + Estructura Flagelar Hnica O + Estructura Flagelar H
FFóórmula antigrmula antigéénica nica (Esquema de Kauffmann(Esquema de Kauffmann--White) White)
II.II.-- ANTANTÍÍGENO FLAGELAR HGENO FLAGELAR HEstructura del antEstructura del antíígeno flagelar de geno flagelar de S. S. TyphimuriumTyphimurium
Rick,P. E. coli and S. TyphimurimCelular and Molecular Biology. Vol 1, 1987
Rick,P. E. coli and S. Typhimurim
Celular and Molecular Biology. Vol 1, 1987
Unas pocas serovariedades de Salmonella spp. poseen una sola fase flagelar, esos aislamientos se denominan monofásicos
Ejemplo:
Salmonella Enteritidis (9,12:g,m:-)Salmonella Typhi (9,12 [Vi]:d:-)
II.II.-- ANTANTÍÍGENO FLAGELAR HGENO FLAGELAR HEXPRESIEXPRESIÓÓN DEL ANTN DEL ANTÍÍGENO H GENO H
Estructura antigénica O + Estructura Flagelar H
Fórmula antigénica (Esquema de Kauffmann-White)
La gran mayoría de las serovariedades tienen dos especificidades o dos fases en su antígeno flagelar o sea son aislamientos difásicos. En el Esquema de Kauffmann-White, ambas fases están separadas por : “dos puntos”
Ejemplo: Salmonella Typhimurium (4,5,12:i:1,2) Salmonella Panama (9,12:l,v:1,5)
1.- La fase 1 (identificada en los ej. por las fases: i o l,v, se denominan con letras separadas por comas) 2.- La fase 2 (identificada en los ej. por las fases: 1,2 o 1,5 se denominan con números arábigos o letras separados por comas ).[ ] = Cuando los factores H están entre corchetes significa que ellos se encuentran excepcionalmente en cepas salvajes.
II.II.-- ANTANTÍÍGENO FLAGELAR HGENO FLAGELAR HEXPRESIEXPRESIÓÓN DEL ANTN DEL ANTÍÍGENO HGENO H
Estructura antigénica O + Estructura Flagelar H
Fórmula antigénica (Esquema de Kauffmann-White)
Estructura antigEstructura antigéénica O + Estructura Flagelar Hnica O + Estructura Flagelar H
FFóórmula antigrmula antigéénica: 4,5,12:nica: 4,5,12:i:1,2i:1,2 (O: 4,5,12 / H: (O: 4,5,12 / H: i:1,2i:1,2))
Esquema de Kauffmann Esquema de Kauffmann –– WhiteWhite
S. S. TyphimuriumTyphimurium
FenFenóómenos de variacimenos de variacióón que n que afectan la serotipificaciafectan la serotipificacióónn
Variaciones somáticas
Variaciones flagelares
Variación de S R (Lisa Rugosa)Variación M N (Mucoide No mucoide)Variación V W (Capsular No capsular)Variación S T R Variación de FormaVariación No fimbriada Fimbriada
Variación OH OVariación de Fase
VARIACION S VARIACION S –– RRNo se puede determinar el Ag OPara obtener colonias lisas:
Realizar subcultivos en agar sangre o agar Mueller HintonReaislar la cepa
Si no es posible revertir la rugosidad:Confirmar la identificación por pruebas bioquímicasDeterminar el Ag H
Variaciones SomVariaciones Somááticasticas
VARIACION V VARIACION V -- WW
SUSPENSION BACTERIANA ANTISUERO “Vi” ANTISUERO “O”
Capsulada V + -
Calentada 1 h a 60 º C ó 30 min. a 100º C - +
Variación V - W + +
El antígeno Vi es un antígeno capsular que se encuentra en Salmonella Typhi, Salmonella Paratyphi C y algunas cepas de Salmonella Dublin
VARIACION DE FASEVARIACION DE FASE
Es la variación reversible de los antígenos H.
Ocurre en el género Salmonella (Fase 1 y Fase 2)
La gran mayoría de las serovariedades son difásicas:
pueden expresar alternativamente antígenos flagelares de
dos especificidades.
VARIACIONES FLAGELARESVARIACIONES FLAGELARES
1 Antisueros polivalentes somáticos: OS-A y OS-B
2.-Para revertir una cepa de la forma rugosa a lisa, se realizan subcultivos en agar sangre o Mueller Hinton. Si no es posible revertir la rugosidad, se debe confirmar la identificación por pruebas bioquímicas y realizar la serotipificación flagelar H.
3.- Ver Consideraciones a tener en cuenta en "Serotipificación somática"
4.-Antisueros polivalentes flagelares: HS-1; HS-A; HS-B; HS-C
5.-Ver Consideraciones a tener en cuenta en "Serotipificación flagelar”.
6. Si la serovariedad de Salmonellaes difásica y sólo expresa una fase, realizar "Método de inversión de fases"
Flujograma de Serotipifacacion de SSalmonella spp.Aislamiento con identificación bioquímicas de Salmonella spp.
Serotipificación somática Estría en TSA Serotipificación flagelar(aglutinación en lámina) (aglutinación en tubo)
Aglutinación con solución salina al 2% Caldo flagelar
Negativa Positiva Aglutinación c/ antisuerospoliv. flagelares H (4)
Aglutinación c/ Cepa Rugosa (2)antisueros poliv. Negativa (5) Positiva
somáticos (1)
Aglutinación c/ antisueros Negativa (3) Positiva de fases H / factores H (6)
Aglutinación c/ antisueros Formula antigénica Hde grupo O
Positiva
Aglutinación c/ antisuerosde factores O
Formula antigénica O
Inversión o Inducción de Fase (Si es necesario)
Formula Antigénica
Esquema de Kauffmann-WhiteRESULTADO FINAL
InversiInversióón o Induccin o Induccióón de Fasen de Fase
EjemploEjemplo: Salmonella: Salmonella Typhimurium (4,5,12.i:1,2)Typhimurium (4,5,12.i:1,2)
POBLACIÓN BACTERIANA BALANCEADASE EXPRESAN IGUALMENTE LAS DOS FASES
Cultivos de S. Typhimurium
POBLACIÓN BACTERIANMAYORITARIA EXPRESA FLAGELOS DE ESPECIFICIDAD H:1,2
Flagelos de especificidad H:1,2
Flagelos de especificidad H:i
1 2
NO realizar inversión de fase
Realizar inversión de fase
Flujograma de InversiFlujograma de Inversióón o Induccin o Induccióón n de Fasede Fase
SerotipificaciSerotipificacióón somn somáática O (O: 4,5,12)tica O (O: 4,5,12)
Fórmula antigénica: O:4,5,12 H:i:1,2 (Esquema de Kauffmann-White )
Salmonella Typhimurium
Si la población expresa flagelos de fase 1 (H:i)
Si la población está balanceada da
Fase 1 (H:i) y Fase 2 (H:1,2)
Serotipificación flagelar H
Inversión de fase con antisuero H:i
Se inmoviliza la Fase 1 y se expresa fase 2
Si la población expresa flagelos de fase 2 (H:1,2)
Inversión de fase con antisuero H:1,2
Se inmoviliza la Fase 2 y se expresa fase 1
Una serovariedad difUna serovariedad difáásica en algunas ocasiones puedesica en algunas ocasiones puedeexpresar sexpresar sóólo una fase flagelarlo una fase flagelar
Ej. Ej. Salmonella Salmonella subespecie I 4,5,12:i:subespecie I 4,5,12:i:--En este caso sEn este caso sóólo se expresa la fase flagelar H:i (Fase 1)lo se expresa la fase flagelar H:i (Fase 1)
Siembra del cultivo sin formolar
Tubo de Craigie
Agar movilidad Craigie + 2 gotas del Antisuero de Inversión de fase “i”
El cultivo queda inmóvil (en el lugar de siembra) ya que no se expresa la Fase 2
DeterminaciDeterminacióón de la estructura antign de la estructura antigéénica nica flagelar de una serovariedad difflagelar de una serovariedad difáásica que sica que
expresa sexpresa sóólo una fase flagelarlo una fase flagelar
Esquema de KauffmannEsquema de Kauffmann--WhiteWhite
Grimont. P.A.D. & Weill, F -X. 2007. Antigenic formulas of the Salmonella serovars, 9 th revision. WHO Collaborating Centre for Reference and Research on
Salmonella . Institut Pasteur, Paris, France
InterpretaciInterpretacióón del Esquema de n del Esquema de Kauffmann Kauffmann -- WhiteWhite
Primera columnaPrimera columna: Indica el nombre de la serovariedad, si la misma : Indica el nombre de la serovariedad, si la misma pertenece a pertenece a S. enterica S. enterica subesp. subesp. enterica enterica (I) o las siglas (I) o las siglas S. S. II, II, S. S. IIIa, IIIa, S. S. IIIb, IIIb, S. S. IV, IV, S. S. V o V o S. S. VI, indicando que la serovariedad estudiada pertenece a las otraVI, indicando que la serovariedad estudiada pertenece a las otras s subespecies, o a subespecies, o a S. bongori S. bongori que no se denominan con un nombre. que no se denominan con un nombre.
Segunda columnaSegunda columna: Ant: Antíígenos somgenos somááticos O. Los nticos O. Los núúmeros armeros aráábigos bigos indican el o los factores somindican el o los factores somááticos y se escriben separados por una ticos y se escriben separados por una comacoma
Tercera y cuarta columnaTercera y cuarta columna: Ant: Antíígenos flagelares H. Se indican los genos flagelares H. Se indican los factores de las fases 1 y 2, del antfactores de las fases 1 y 2, del antíígeno H, respectivamente . Para la geno H, respectivamente . Para la fase 1 los factores se denominan con letras minfase 1 los factores se denominan con letras minúúsculas, seguida sculas, seguida algunas veces por un nalgunas veces por un núúmero que figura como submero que figura como subííndice, para la fase 2 ndice, para la fase 2 en general se emplean nen general se emplean núúmeros armeros aráábigos, aunque tambibigos, aunque tambiéén se utilizan n se utilizan letras minletras minúúsculas.sculas.Un signo Un signo ““negativonegativo”” indica que la fase considerada estindica que la fase considerada estáá ausente y por lo ausente y por lo tanto la serovariedad es monoftanto la serovariedad es monofáásica. sica.
Recomendaciones y Recomendaciones y ConclusionesConclusiones
Realizar una correcta identificación bioquímicaRealizar una correcta identificación de los determinantes antigénicos somáticos y flagelaresSi el aislamiento no reacciona con ninguno de los antisueros flagelares polivalentes, es necesario realizar sucesivos pasajes por tubos de Craigie, con el fin de exaltar la movilidad, hasta lograr el recorrido completo en 18 – 24 hs, de incubación a 37ºC En los casos de serovariedades de Salmonella spp. difásicas, que expresen una sola de las fases flagelares se debe realizar la técnica de Inversión de FaseRealizar una correcta interpretación del Esquema de Kauffmann - White
MUCHAS GRACIAS !!!MUCHAS GRACIAS !!!
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