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La ciencia es el gran antídoto contra el veneno de la superstición.

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LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA

Alumno: Elington Antonio Vélez Párraga.

Curso: Quinto bioq.farm Paralelo: B

Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc

Grupo N°4

Fecha de Elaboración de la Práctica: martes 01 de julio del 2014

Fecha de Presentación de la Práctica: martes 08 de julio del 2014

PRÁCTICA N° 6

TÍTULO DE LA PRÁCTICA

INTOXICACIÓN POR CETONA

Animal de Experimentación: Cobayo.

Vía de Administración: Vía Intraperitoneal.

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA

1. Determinar la presencia del toxico, en este caso la acetona en el animal de

experimentación, con exámenes químicos colorimétricos.

2. Monitorear al animal de experimentación para estudiar los principales efectos que este

sufre luego de la intoxicación.

La ciencia es el gran antídoto contra el veneno de la superstición. 2

MATERIALES

1. Jeringuilla de 10cc

2. Campana

3. Cronómetro

4. Equipo de disección

5. Bisturí

6. Vasos de precipitación

7. Erlenmeyer

8. Lámpara de alcohol

9. Equipo de destilación.

10. Tubos de ensayo

11. Guantes, gorros, mascarilla

12. Pipetas volumétricas

13. Bata de laboratorio

14. Pinzas para tubo.

SUSTANCIAS

1. cloroformo

2. Alcohol 95° con nitato de plata.

3. B-naftol

4. Potasa alcohólica

5. Percloruro de hierro

6. Sosa

7. Cristal de yodo

8. R. de benedict

9. Piridina

10. Cloruro de piperazina

11. Agua destilada

12. Ácido tartárico

PROCEDIMIENTO

1. Preparar el mesón de trabajo y con ello materiales y sustancias, además de

implementos de bioseguridad.

2. Administrar 10 ml de cetona por vía intraperitoneal

3. Monitorear síntomas que se presentan y en qué tiempo hasta la muerte del cobayo.

4. Atamos el cobayo a una tabla de disección.

5. Procedemos rasurarle toda la parte abdominal donde se hará el corte.

6. Con la ayuda del bisturí procedemos la disección del cobayo, y observamos los

cambios (coloración, dureza, etc.) que presentan sus órganos.

7. Procedemos a colocar los fluidos y las vísceras afectadas por el toxico (picadas lo

más finas posibles) en el recipiente adecuado (Vaso de precipitación).

8. A las vísceras ya picadas le añadimos 25ml de solución de ácido tartárico.

9. Esto lo llevamos a un balón.

10. Procedemos a destilar.

11. El residuo de la destilación (muestra) que obtuvimos por arrastre de vapor lo

recibimos en solución de Hidróxido de Sodio 0.1N.

12. Una vez realizado el paso anterior, se practican las diferentes reacciones

colorimétricas cualitativas.


Reacciones:

1. A la llama.- En el fondo de un tubo de ensayo se mezclan unas cuantas gotas de cloroformo

con otras tantas de alcohol de 95ª que contiene un poco de nitrato de plata, se inflama la

mezcla y se observa que esta arde con un llama bordeada de verde y que el ácido clorhídrico

formado reacciona con el nitrato de plata disuelto originando un precipitado de cloruro de

plata.

2. Reacción de Dumas.- al adicionar unas gotas de destilado que contiene cloroformo a unos

mililitros de potasa alcohólica (proporción 1:10), se originan formiatos y cloruro de potasio.

CHCl3 + 4 KOH KCl + HCO2K + H 2 O

Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos porciones a una porción se le agrega percloruro

de hierro produciendo un color rojo en frío o un precipitado en caliente.

A la otra porción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose un precipitado de

cloruro de plata que se disuelve en amoníaco diluido.

3.- Reacción de Lustgarten.- al calentar la muestra con unos miligramos de beta naftol y

solución alcohólica concentrada de potasa (preferentemente un trozo de potasa y algunas

gotas de alcohol), se obtiene un franco color azul.

Si se sustituye el B-naftol por timol el color es Amarillo más o menos oscuro; con resorcinol

la coloración e roja – violáceo y con la piridina rojo.

4.- Reacción de fujiwara.-En un tubo de ensayo, se vierte 2 ml de lejía de sosa 1:2 con una

capa de 2mm de piridina y luego la muestra que contiene el cloroformo; se agitan, podemos

por unos instantes en baño de María y se deja en reposo; se convierte en una materia

coloreada que varía del rosa al rojo vivo, soluble en piridina .Esta reacción sensible para unos

pocos microgramos de cloroformo y es aplicable en la orina de algún sujeto que haya

absorbido de 15-20 g de agua clorofórmica.

5.-Reacción de roseboom.- se disuelve un pequeño cristal de yodo en la solución muestra y

se agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de piperacina ; si el cloroformo está

presente en la muestra, la coloración violeta inicial cambia a amarilla rojiza al disolverse el

alcaloide.

6.-Reacción de Benedict.- si la solución muestra contiene cloroformo, reduce el reactivo de

Benedict, y de acuerdo a la concentración del tóxico puede producirse una gama de colores

que van desde el verde, amarillo, naranja o rojo ladrillo.


GRAFICOS

1. Preparamos los

10ml que vamos

a inyectar

2. Inyectamos al

cobayo vía

intraperitoneal

4. se separa las vísceras afectadas y

fluidos

8. Se monta el equipo de destilación

y se destila.

3. se realiza la

disección al

cobayo

5. se añaden 25ml de

solución de ácido

tartarico

6. se transvasa a un

balón para posterior

destilación.

7. Se añaden las 50

perlas de vidrio


REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN EL DESTILADO

REACCIONES DE RECONOCIMIENTO.

9. Realizando las

reacciones de

reconocimiento en el

destilado.

Patrón: destilado incoloro


Reconocimiento en Medios Biológicos

REACCION DE DUMAS

REACCION DE LUSTGARTES

- (FeCl3)

Resultado:

Reacción positiva

característica.

Coloración roja

REACCIÓN CON AgNO3

Resultado: Positivo no

característico

Formación de precipitado,

pero no de llama con borde

verde

- (AgNO3)

Resultado: Reacción

positiva característica.

Precipitado se

disuelve

se forma precipitado de cloruro de plata, al

agregar AgNO3

con amoniaco se disuelve el precipitado.

- B-naftol

Resultado:

Reacción positiva

no característica.

Coloración roja

- resorcinol

Resultado:

Reacción positiva

característica.

Coloración roja

violaceo

- timol

Resultado:

Reacción positiva

característica.

Coloración

amarilla


OBSERVACIONES

Según mi punto de vista de la práctica, el cloroformo resulto ser uno de los tóxicos que

demoran más en causar la muerte del animal de experimentación, pero debemos señalar que

inmediatamente luego de administrar dicho toxico al cobayo este reacciono sedándose, es

decir se paralizo totalmente, sabiendo que el cloroformo es una sustancia que se usaba mucho

como sedante, pero que ahora por el conocimiento de su toxicidad, se restringe su uso.

CONCLUSIONES

Se concluye manifestando que se logró cumplir los objetivos de esta práctica, es decir, se

determinó que el cloroformo que estaba presente en las vísceras del animal, y que había

causado su muerte, además de diferentes efector letales como la cianosis de sus órganos,

hipoxia, micción abundante lagrimeo, etc. Todo esto mediante ensayos químicos

colorimétricos y monitoreo de respuestas del animal de estudio ante la intoxicación con el

alcohol en cuestión.

REACCIÓN ROSEBOOM.

resultado: Positivo no

característico

Coloración rojiza

REACCIÓN DE BENEDICT

Resultado: negativa

Coloración roja nula.


RECOMENDACIONES

- El cloroformo es uno de los tóxicos de tipo volátil por lo que para esta práctica se

debe usar implementación que cubra las vías aéreas, y si es posibles los ojos, además

de siempre mantener la piel aislada de este toxico ya que se puede absorber vía tópica.

- Tener cuidado con las sustancias de uso restringido o peligroso, para evitar

accidentes.

- Desechar el material usado, y los restos del cobayo en un lugar seguro que no valla a

ocasionar problemas a la comunidad.

CUESTIONARIO

WEBGRAFÍA

- PROPIEDADES QUIMICAS DEL CLOROFORMO (en línea)

Disponible en: http://www.quimica.unam.mx/IMG/pdf/7cloroformo.pdf

- USOS DEL CLOROFORMO (en línea)

Disponible en: http://cloroformo.org/usos/

- ACCIONES DE EMERGENCIA (en línea)

Disponible en: http://www.quimica.unam.mx/IMG/pdf/7cloroformo.pdf


ANEXO:

Fig.1. DATOS OBTENIDOS CON EL MONITOREO DEL COBAYO Y LOS ANALISIS

COLORIMETRICOS.


GLOSARIO:

INTOXICACION POR CETONA

CETONA

Introducción.

Son líquidos volátiles, incoloros y no inflamables de olor y sabor dulzón y liposoluble.

La inhalación de vapores es la principal vía de exposición industrial.

Usos:

a) Como disolventes para: lacas, barnices, plásticos, caucho, seda artificial, colodión,

etc.

Toxicocinética.

Ocasiona intoxicación por vía respiratoria, digestiva o dérmica. Produce la muerte por

ingestión oral de solo 10 ml. Se ha descrito degeneración grasa del hígado, riñón y

corazón. Al exponerlo a una llama se forma fosgeno (oxicloruro de carbono), que

con el agua en el alveolo forma ácido hidroclorhídrico y CO2 originando edema

pulmonar.

Clínica.

Al inhalarse sus vapores produce todos los niveles de anestesia. Es fácilmente detectable

por su olor característico, cuando su concentración excede de 400 ppm. A 1000 ppm

ocasiona náuseas, vómitos, vértigo y cefaleas. Entre 1000 y 4000 ppm ocasiona

desorientación. Entre 10000 y 20000 ppm, da lugar a pérdida de conciencia e incluso

la muerte. También ocasiona dermatitis local e irritación corneal.

Diagnóstico.

Por la historia clínica, las Transaminasas se alteran en las intoxicaciones agudas,

apareciendo ictericia a los 2-3 días.

Tratamiento de soporte.

Retirar la víctima de la zona contaminada llevándolas a una zona bien ventilada,

administrar O2 suplementario, y si se necesita, intubarlo.

Características de la intoxicación aguda

La exposición a elevadas concentraciones de vapores produce:

a) Trastornos digestivos: náuseas y vómitos.

b) Acción narcótica: Cefalalgias, vértigos y coma.

c) Irritación de ojos y vías respiratorias.

d) El contacto de las formas líquidas sobre la piel predispone a la aparición de dermatitis.

1) La penetración en el organismo se realiza de forma fundamental a través de la VÍA

RESPIRATORIA Y CUTÁNEA.

2) Manifestaciones clínicas generales de las cetonas:

· IRRITANTE DE LA MUCOSA OCULAR Y VÍAS RESPIRATORIAS.


· DERMATITIS IRRITATIVA, EFECTO DEPRESOR DEL S.N.C.

· TRASTORNOS DIGESTIVOS, NEUROPATÍA PERIFÉRICA.

3) Efectos agudos de las cetonas.

· IRRITACIÓN DE LAS VÍAS RESPIRATORIAS

b) Síntomas anestésicos (desorientación, depresión, pérdida de conocimiento,

cefaleas, mareos, vómitos).

4) Efectos crónicos de las cetonas: dermatitis (piel seca agrietada y eritematosa).

5) Las cetonas se utilizan en la industria como disolventes.

6) Las cetonas más frecuentes: la acetona y la metilacetilcetona.

7) La metil-n-butilcetona está dotada de una potente acción neurotóxica periférica;

el responsable de esta neurotoxicidad en su principal metabolito; 2,5 hexadiona.

REACCIONES DE RECONOCIMIENTO

Después de destilar el material de investigación, en el destilado se realizan las

reacciones de reconocimiento.

1. Reacción de Nessler.- La acetona reacciona con el reactivo yodo-mercúrico en

medio alcalino un precipitado blanco, formado por un producto de adición.

2. Reacción de Yodoformo.- Al calentar una pequeña cantidad de la muestra con

una solución yodo-yodurada en medio alcalino con KOH se produce yodoformo

reconocible por su olor particular y su color amarillo.

I2 + 2KOH à INA + IOK + H2O

CH3 CI3

CO + 3IOK à CO + 3KOH

CH3 CH3

CI3

CO + KOH à CHI3 + CH3-COOK

CH3

3. Con nitroprusiato de Sodio.- Con este reactivo, al que se le añade solución de

carbonato de sodio o NaOH, orina una coloración amarilla-rojiza que al agregarle

ácido acético, dará un color violeta.

4. Reacción de Fritsh.- Se mezcla la solución problema con un volumen igual de

ácido clorhídrico concentrado que contiene 5% de ramnosa, se calienta en baño de


vapor. Aparece un color rojo, apreciable aún en concentración de 0.01 g de acetona

por ml de solución.

5. Reacción de Frommer.- La muestra problema, al ser condensada con aldehído

salicílico en medio alcalino, produce un color rojo que permite su

determinación colorimétrica o fotométrica por su gran sensibilidad y

especificidad. REACCIONES DE RECONOCIMIENTO

Después de destilar el material de investigación, en el destilado se realizan las

reacciones de reconocimiento.

1. Reacción de Nessler.- La acetona reacciona con el reactivo yodo-mercúrico en

medio alcalino un precipitado blanco, formado por un producto de adición.

2. Reacción de Yodoformo.- Al calentar una pequeña cantidad de la muestra con

una solución yodo-yodurada en medio alcalino con KOH se produce yodoformo

reconocible por su olor particular y su color amarillo.

I2 + 2KOH à INA + IOK + H2O

CH3 CI3

CO + 3IOK à CO + 3KOH

CH3 CH3

CI3

CO + KOH à CHI3 + CH3-COOK

CH3

3. Con nitroprusiato de Sodio.- Con este reactivo, al que se le añade solución de

carbonato de sodio o NaOH, orina una coloración amarilla-rojiza que al agregarle

ácido acético, dará un color violeta.

4. Reacción de Fritsh.- Se mezcla la solución problema con un volumen igual de

ácido clorhídrico concentrado que contiene 5% de ramnosa, se calienta en baño de

vapor. Aparece un color rojo, apreciable aún en concentración de 0.01 g de acetona

por ml de solución.

5. Reacción de Frommer.- La muestra problema, al ser condensada con aldehído

salicílico en medio alcalino, produce un color rojo que permite su determinación

colorimétrica o fotométrica por su gran sensibilidad y especificidad.