Práctica n° 5 intoxicación por cetona

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  1. 1. Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis Pgina 1 UNIVERSIDAD TCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGA Alumno: Miguel Angel Quillay Davila. Curso: Quinto Paralelo: B Profesor: Bioq. Farm. Carlos Garca MSc Grupo N2 Fecha de Elaboracin de la Prctica: martes 30 de junio del 2014 Fecha de Presentacin de la Prctica: martes 07 de julio del 2014 PRCTICA N 5 Ttulo de la Prctica: INTOXICACIN POR CETONA. Animal de Experimentacin: Rata Wistar Va de Administracin: Va Parenteral (Intraperitoneal) Tiempos: Inicio de la prctica: 08:08am Hora de administracin del toxico al cobayo: 08:12 Deceso del animal: 08:29am Diseccin: 08:34 am Hora de destilacin: 08:45am Final de la prctica: 10:30am OBJETIVOS DE LA PRCTICA 1. Observar las reacciones que presenta la rata ante una Intoxicacin. 2. Distinguirlasintomatologa de laintoxicacinporcetona con relacin a otras sustancias toxicas. 3. Determinarel tiempoenque acta el toxico en el organismo de la rata desde su administracin hasta la muerte del mismo. 4. Conocer mediante diversas pruebas de identificacin la presencia de cetona en una rata 10 Sntoma: Vomito Nauseas Convulsiones
  2. 2. Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis Pgina 2 MATERIALES Balanza Bistur Bureta Campana Cinta plstica Cocineta Cronmetro Equipo de destilacin. Equipo de diseccin Erlenmeyer Esptula Fosforo Gorro Guantes de ltex Jeringuilla de 10cc Lmpara de alcohol Mandil Mascarilla Panema Perlas de vidrio Pinzas Pipetas Porta tubo Probeta Soporte universal Tabla de diseccin Tubos de ensayo Varilla Vasos de precipitacin 200 y 500 ml. Zapatones en caso de usar sandalias. PROCEDIMIENTO 1. Limpiar y desinfectar la mesa de trabajo. 2. Tener todos los materiales a utilizar listos. 3. Administramos a la rata wistar, 6 ml de cetona por va intraperitoneal y anotamos el tiempo. 4. Observamos los efectos que produce en la rata wistar. 5. Procedimos a la diseccin con la ayuda del bistur. 6. Observamos el estado de las vsceras. 7. En un vaso de precipitacin recolectamos la sangre y colocando las vsceras (picadas lo ms finas posibles). SUSTANCIAS Acetona Yodo-mercrico Yodo-yodurada KOH Nitroprusiato de Sodio Carbonato de sodio cido actico cido clorhdrico concentrado Ramnosa Aldehdo saliclico Etanol 2,4-dinitrofenilhidracina EQUIPOS Balanza analtica
  3. 3. Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis Pgina 3 8. El contenido del vaso anterior lo pasamos al baln para proceder a la destilacin. 9. Armamos correctamente el equipo de destilacin (mtodo de soxhleth), asegurando que no existan fugas que conlleven a prdidas del destilado. 10. Preparar 20 ml de NaOH al 20%, colocarlo en un erlenmeyer adicionar en las vsceras y calentamos con la lmpara de alcohol esto con movimiento circular durante 30 minutos 11. Con el destilado procedimos a realizar las reacciones de identificacin del cloroformo en medios biolgicos. 12. Una vez terminada la prctica se limpia todo el material y el rea utilizada. REACCIONES DE RECONOCIMIENTO: 1. Reaccin de Nessler.- La acetona reacciona con el reactivo yodo-mercrico en medio alcalino un precipitado blanco, formado por un producto de adicin. 2. Reaccin de Yodoformo.- Al calentar una pequea cantidad de la muestra con una solucin yodo-yodurada en medio alcalino con KOH se produce yodoformo reconocible por su olor particular y su color amarillo. I2 + 2KOH INA + IOK + H2O CH3 CI3 CO + 3IOK CO + 3KOH CH3 CH3 CI3 CO + KOH CHI3 + CH3-COOK CH3 3. Con nitroprusiato de Sodio.- Con este reactivo, al que se le aade solucin de carbonato de sodio o NaOH, orina una coloracin amarilla-rojiza que al agregarle cido actico, dar un color violeta. 4. Reaccin de Fritsh.- Se mezcla la solucin problema con un volumen igual de cido clorhdrico concentrado que contiene 5% de ramnosa, se calienta en bao de vapor. Aparece un color rojo, apreciable an en concentracin de 0.01 g de acetona por ml de solucin. 5. Reaccin de Frommer.- La muestra problema, al ser condensada con aldehdo saliclico en medio alcalino, produce un color rojo que permite su determinacin colorimtrica o fotomtrica por su gran sensibilidad y especificidad. 6. Con la 2:4 Dinitrofenilhidracina: Disuelva una dos gotas del compuesto que se va investigar en 2 ml de etanol y aada a 3ml del reactivo de 2,4-dinitrofenilhidracina. Agite vigorosamente y si no se forma inmediatamente Un precipitado de color amarillo, anaranjado o rojo, deje reposar la solucin durante 15 minutos. 7. Reactivo. El reactivo se prepara disolviendo 3 g de 2,4-dinitrofenilhidracina en 15 ml de cido sulfrico concentrado. Entonces se aade esta solucin, a 20 ml de agua destilada y 70 ml de etanol al 95%. Se mezcla perfectamente la solucin y se filtra.
  4. 4. Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis Pgina 4 GRFICOS: REACCIONES DE RECONOCIMIENTO. 1. REACCIN DE NESSLER. (precipitado blanco) Reaccin Positivo no caracterstico color anaranjado 1.- Animal de experimentacin 2.-Administramos el txico en la rata inmediatamente Lo colocamos dentro de la panera para observar su reaccin 4.-Con el bistur empezamos abrir nuestra rata 5.-Sacamos todas las vsceras y las picamos para colocarlas en un vaso de precipitacin 6.-Colocamos todo esto en el baln para destilacin 7.- Empieza el proceso de destilacin por 30 min 8.- Se realizan los ensayos respectivos Antes (transparente) Despus (anaranjado)
  5. 5. Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis Pgina 5 2. REACCIN DE YODOFORMO (color amarillo) Reaccin positivo caracterstico color amarillo plido 3. CON NITROPRUSIATO DE SODIO (color violeta) Reaccin Positivo caracterstico color violeta 4. REACCIN DE FRITSH (color rojo) Reaccin positivo no caracterstico color amarillo Antes (transparente) Despus (amarillo) Antes (transparente) Despus (violeta) Antes (transparente) Despus (amarillo)
  6. 6. Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis Pgina 6 CON LA 2:4 DINITROFENILHIDRACINA (Precipitado color amarillo, anaranjado o rojo) 5.1. Reaccin positivo caracterstico color amarillo 5.2. (Color verde, amarillo, naranja o rojo ladrillo) Reaccin Positivo caracterstico color amarillo OBSERVACIONES: En la realizacin de sta prctica al haber administrado la cetona por va peritoneal al animal en experimentacin, hemos observado la sintomatologa que presentperdida de actividad motora, convulsiones, falta de equilibrio. CONCLUSIONES. Aprend a determinar la toxicidad de la cetona en el cobayo y mediante las reacciones de reconocimiento determinar la presencia de este txico en el animal, la cual dio positivo para la mayora de las reacciones de reconocimiento. Antes (transparente) Despus (amarillo) Despus (amarillo)Antes (transparente)
  7. 7. Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis Pgina 7 RECOMENDACIONES: Se debe tener en cuenta en aplicar las normas de bioseguridad en el laboratorio para evitar algn accidente. Conocer bien sobre el toxico para tomar medidas preventivas. Trabajar en la campana extractora de gases debido al toxico que es voltil. Administrar en la va de administracin correcta para evitar embolias y que el efecto no demore ms del tiempo analizado. Pipetear los reactivos con la ayuda de una pera para as facilitar el trabajo y evitar pipetear con la boca. Desinfectar el rea de trabajo utilizada y limpiar y secar los materiales utilizados para evitar contaminacin alguna. CUESTONARIO 1. Cules son las Propiedades fsicas de las cetonas? Los compuestos carbonlicos presentan puntos de ebullicin ms bajos que los alcoholes de su mismo peso molecular. No hay grandes diferencias entre los puntos de ebullicin de aldehdos y cetonas de igual peso molecular. Los compuestos carbonlicos de cadena corta son solubles en agua y a medida que aumenta la longitud de la cadena disminuye la solubilidad. 2. Cmo es la obtencin de la acetona? Se obtiene como subproducto en la fermentacin por medio de la cual se obtiene alcohol butlico; por oxidacin de isopropanol; por ruptura de hidroperxido de cumeno en la cual se obtiene, adems, fenol; por destilacin de acetato de calcio; por destilacin destructiva de madera y a partir de oxidacin por cracking de propano. 3. En que se utiliza la cetona? Es utilizada como disolvente de grasas, aceites, ceras, hules, plsticos, lacas y barnices. Se usa en la manufactura de algunos explosivos, rayn, pelculas fotogrficas, elaboracin de removedores de pinturas y barnices, purificacin de parafinas, en la deshidratacin y endurecimiento de tejidos, en la extraccin de algunos productos vegetales y animales y como materia prima en una gran variedad de sntesis en qumica orgnica. 4. Cules son los principales sntomas de una intoxicacin por acetona? Sistema cardiovascular Presin arterial baja Sistema gastrointestinal Nuseas
  8. 8. Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis Pgina 8 Dolor en el rea ventral (abdomen) La persona puede presentar un aliento a frutas Sabor dulce en la boca Vmitos Sistema nervioso Actuar como si estuviera ebrio Coma Somnolencia Estupor Aparato respiratorio Dificultad respiratoria Frecuencia respiratoria lenta Dificultad respiratoria 5. Cules son los niveles de toxicidad de la cetona? LD50 (en ratas en forma oral): 5800 mg/Kg LD50 (en piel de conejos): 20 mg/Kg Niveles de irritacin a ojos en humanos: 500 ppm Niveles de irritacin a piel en conejos: 395 mg, leve. 500 mg / 24 h, leve. Niveles de irritacin a ojos en conejos: 3.950 mg, severo. 100 mg/24h, moderado. BIBLIOGRAFA Toxicologa Mdica Dr. Phil, Dr. Med. H. Funher. Editorial Cientfico-Mdico. Madrid. Espaa. 2010. WEBGRAFA Medline plus. Disponible en: http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article /002480.htm Hoja De Seguridad IV. Acetona. Disponible en: http://www.quimica.unam.mx/IMG /pdf/4acetona.pdf Revisado por: BQF. Carlos Garca. Mg. Sc. Catedrtico FI