Atelier Paludisme 2006Atelier Paludisme 2006

RRéésistance du sistance du PlasmodiumPlasmodiumfalciparumfalciparum

àà la chloroquinela chloroquine

PrPréésentsentéé par Yssouf Aminapar Yssouf AminaUnion des ComoresUnion des Comores

EVALUATION

par les FACILITATEURS

EVALUATION

par les FACILITATEURS

EVALUATION

par les FACILITATEURS

RRéésistance du sistance du P.falciparumP.falciparum ààla chloroquine (Plan)la chloroquine (Plan)

�� IntroductionIntroductionDDééfinition: rfinition: réésistancesistance

�� RRéépartition gpartition gééographiqueographique�� Mode dMode d’’action de la chloroquineaction de la chloroquine�� MMéécanisme de la rcanisme de la réésistancesistance

ConsConsééquencesquences�� MMééthodes dthodes d’é’évaluation de la rvaluation de la réésistancesistance

ExempleExemple�� Conclusion Conclusion

IntroductionIntroduction�� LL’’introduction de la chloroquine comme traitement du introduction de la chloroquine comme traitement du

paludisme paludisme éétait un tait un éévvéénement majeur dans le monde.nement majeur dans le monde.

�� LL’’utilisation accrue a rendu inefficace contre le utilisation accrue a rendu inefficace contre le P.falciparum P.falciparum dans beaucoup de rdans beaucoup de réégions.gions.

�� Apparition rApparition réésistance (1950)sistance (1950)�� Emergence des mutations:Emergence des mutations:

pression mpression méédicamenteuse dicamenteuse traitements traitements àà dose incompldose incomplèète de chloroquinete de chloroquinemigration des populations de parasitesmigration des populations de parasites

RRéésistancesistance

�� CC’’est la capacitest la capacitéé dd’’une souche de parasite une souche de parasite àà se se multiplier ou survivre en prmultiplier ou survivre en préésence dsence d’’une dose de une dose de mméédicament qui ddicament qui déétruit normalement les truit normalement les parasites de la même espparasites de la même espèèce.ce.

�� LiLiéée e àà ll’’incapacitincapacitéé dd’’accumulation de accumulation de mméédicament dans la vacuole digestive du dicament dans la vacuole digestive du parasite suite parasite suite àà des mutationsdes mutations

�� Une mutation au niveau du chromosome 7, Une mutation au niveau du chromosome 7, codon76 du gcodon76 du gèène ne PfcrtPfcrt rréésistant confsistant confèère re àà une une rréésistance sistance àà la chloroquinela chloroquine

�� Accumulation de mutations dAccumulation de mutations déétermine le degrtermine le degrééde rde réésistancesistance

RRéépartition gpartition gééographiqueographique

Mode dMode d’’action de la chloroquineaction de la chloroquinePhase Phase éérythrocytairerythrocytaire

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MMéécanisme de la rcanisme de la réésistance (1)sistance (1)

�� Expulsion de la CQ de la vacuole digestive du Expulsion de la CQ de la vacuole digestive du parasite par la parasite par la PFCRT.PFCRT.

�� Association de multiple mutations dans le Association de multiple mutations dans le PfcrtPfcrtde la membrane vacuolaire:de la membrane vacuolaire:

--modification de lmodification de l’’efflux de CQefflux de CQ--rrééduction de liaison CQduction de liaison CQ--hhéématine parmatine par ��

MMéécanisme de la rcanisme de la réésistance (3)sistance (3)

-���#$��������.�/�°01*��2341���3550

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ConsConsééquences de la rquences de la réésistancesistance

Augmentation:-prévalence parasitaire-gamétocytogénèse-Transmission-Morbidité et mortalité

MMééthode dthode d‘é‘évaluation (1)valuation (1)Test in vivo:Test in vivo:

Test de 14 ou 28jTest de 14 ou 28j�� Observation rObservation rééponse parasitaire/ rponse parasitaire/ réésistance (patient sistance (patient

traittraitéé avec une dose fixe de mavec une dose fixe de méédicamentdicament�� Suivi clinique, parasitologique, TSuivi clinique, parasitologique, T°°C,hC,héématocrite (OMS)matocrite (OMS)

Test in vitroTest in vitro�� Quantification de la sensibilitQuantification de la sensibilitéé et la ret la réésistance du sistance du

parasite aux antipaludiquesparasite aux antipaludiques�� Tester sur le même prTester sur le même prééllèèvement diffvement difféérents rents

antipaludiquesantipaludiques�� DegrDegréé dd’’inhibition de la schizogonie en prinhibition de la schizogonie en préésence de sence de

doses croissantes de mdoses croissantes de méédicamentsdicaments�� Elimine certains facteurs confondant observElimine certains facteurs confondant observéé dans le dans le

test in vivotest in vivo

MMééthode dthode d‘é‘évaluation (2)valuation (2)

Test molTest molééculaireculaire�� Mesure la chimiorMesure la chimioréésistancesistance�� DDéétection de mutations ponctuelles dans tection de mutations ponctuelles dans

le gle géénome du parasite rnome du parasite réésistantsistant

Exemple (Comores)Exemple (Comores)

�� Objectif:Objectif:�� surveiller lsurveiller l’’apparition et la dissapparition et la disséémination des souches mination des souches

plasmodiales mutantes et rplasmodiales mutantes et réésistantes sistantes àà la chloroquinela chloroquine�� Etude du polymorphisme des gEtude du polymorphisme des gèènes nes PfcrtPfcrtMéthode

30 enfants impalud30 enfants impaludéés de s de --15ans trait15ans traitéés s àà la chloroquine la chloroquine (14j) avec suivi (OMS) (14j) avec suivi (OMS)

RRéésultatsultat::

-- DDéétection chez 83% dtection chez 83% d’’enfants,des souches enfants,des souches P.falciparum P.falciparum mutant T76 de mutant T76 de PfcrtPfcrt

-- Les mêmes parasites ont Les mêmes parasites ont ééttéé typtypéés pour codon 86 s pour codon 86 PfmdrPfmdr-- PrPréésence des parasites mutant 86Y rsence des parasites mutant 86Y réésistant aux aminasistant aux amina--4 4

quinolquinolééineine

ConclusionConclusion

�� La diversitLa diversitéé ggéénnéétique des populations de tique des populations de plasmodium falciparumplasmodium falciparum est un obstacle est un obstacle pour le contrôle du paludisme (traitement)pour le contrôle du paludisme (traitement)

�� LL’’apparition de la rapparition de la réésistance amsistance amèène ne beaucoup de pays beaucoup de pays àà adopter la bithadopter la bithéérapie rapie

(ACT)(ACT)�� La PECADOM avec ACT La PECADOM avec ACT �� Mutations multiples Mutations multiples

Résistance?

Réversion?

RRééfféérences (1)rences (1)�� Dominique Dominique LabieLabie RRéésistance du sistance du PlasmodiumPlasmodium àà la chloroquinela chloroquine : vers : vers

un ciblage de lun ciblage de l’’attaque M/S nattaque M/S n°°5, vol.21, 2005, 27 avril 2006 5, vol.21, 2005, 27 avril 2006 http://http://www.pathexo.frwww.pathexo.fr//pdfpdf/1999n4//1999n4/Lebras.pdfLebras.pdf

�� Jacques Le Bras Jacques Le Bras MMéécanismecanisme et dynamique des chimioret dynamique des chimioréésistances du sistances du P.falciparumP.falciparum, Institut pasteur Paris G, Institut pasteur Paris Géénnéétique et maladie infectieuses tique et maladie infectieuses dans ldans l’’environnement tropical lenvironnement tropical l’’environnement tropical1999, 27mars environnement tropical1999, 27mars 2006 2006 http://www.pathexo.fr/pdf/1999n4/Lebras.pdfhttp://www.pathexo.fr/pdf/1999n4/Lebras.pdf

�� Roland A. Cooper, Michael Roland A. Cooper, Michael T.FerdigT.Ferdig, et , et alal, Alternative Mutation , Alternative Mutation atatPosition 76 Position 76 ofof thethe VacuolarVacuolar TransmembraneTransmembrane ProteinProtein Pfcrt Are Pfcrt Are AssociatedAssociated withwith Chloroquine Chloroquine ResistanceResistance andand Unique Unique StereospecificStereospecificQuinine Quinine andand QuinidineQuinidine ResponseResponse in in Plasmodium falciparumPlasmodium falciparum, 2001, 2001

�� Anonyme,Anonyme,ResistanceResistance aux antipaludiques in:Biodiversitaux antipaludiques in:Biodiversitéé du paludisme du paludisme dans le monde, Mouchet Jdans le monde, Mouchet J……et et alal,Biodiversit,Biodiversitéé Paris,John Paris,John LibbeyLibbeyEurotestEurotest, 2004;page 358,359, 2004;page 358,359

RRééfféérences 2rences 2�� Cooper RACooper RA, , FerdigFerdig MTMT, , Su XZSu XZ, , UrsosUrsos LMLM, , Mu JMu J, , NomuraNomura TT, , FujiokaFujioka HH, ,

FidockFidock DADA, , RoepeRoepe PDPD, , WellemsWellems TETE ,Alternative mutations ,Alternative mutations atat position position 76 76 ofof thethe vacuolarvacuolar transmembranetransmembrane proteinprotein PfCRTPfCRT are are associatedassociated withwithchloroquine chloroquine resistanceresistance andand unique unique stereospecificstereospecific quinine quinine andand

quinidinequinidine responsesresponses in in Plasmodium falciparumPlasmodium falciparum. . Mol Mol PharmacolPharmacol2002,27 mars 2006 http://2002,27 mars 2006 http://www.ncbi.nlm.nih.govwww.ncbi.nlm.nih.gov

�� O.GayeO.Gaye, M. , M. SoumarSoumaréé,,B.SambouB.Sambou, et , et alal,H,Hééttéérogrogéénnééititéé du paludisme du paludisme chloroquinoresistantchloroquinoresistant au Sau Séénnéégal,Parasitologie,1999, mars 2006gal,Parasitologie,1999, mars 2006

�� L.RaharimalalaL.Raharimalala L.RandrianasoloL.Randrianasolo, , A.RatsimbasoaA.Ratsimbasoa, , F.ArieyF.Ariey, , detectiondetectiondes mutations assocides mutations associéées es àà la rla réésistance aux antipaludiques,sistance aux antipaludiques,ReseauReseaudd’’Etude de la REtude de la Réésistance du Paludisme,2002, 27 mars sistance du Paludisme,2002, 27 mars 2006,http://2006,http://www.pasteur.mgwww.pasteur.mg//dpalub.htmldpalub.html