1 CROMATOGRAFÍA Cátedra de Química Orgánica. 2 CROMATOGRAFIA Sistema Cromatográfico: Fase...

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CROMATOGRAFÍA

Cátedra de Química Orgánica

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CROMATOGRAFIA

Sistema Cromatográfico:

Fase Móvil

Fase Estacionaria

solutosUno o más

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Clasificación de las técnicas cromatográficas:

1) Clasificación de acuerdo al mecanismo de separación

2) Clasificación de acuerdo al estado físico de las fases

3) Clasificación de acuerdo al lecho cromatográfico

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Proceso físico - químico que rige la separación:

Adsorción:

El soluto se adsorbe en la superficie de las partículassólidas de la fase estacionaria. Es un fenómeno superficial, aumentado con la formación de puentesde hidrógeno.

Partición o Reparto:

El soluto se equilibra entre el líquido de la fase estacionaria y la fase móvil, por diferencia de solubilidad. Hasta llegar a un equilibrio

1)Clasificación de acuerdo al mecanismo de separación

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- Intercambio Iónico:

Los aniones o cationes se unen a la fase estacionaria sólida por fuerzas iónicas

- Exclusión Molecular, Filtración o Permeación en Gel:

No existen interacciones entre la fase estacionaria y el soluto. Se separa por tamaño de partícula.

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2) Clasificación de acuerdo al estado físico de las fases:

Tipo de fase estacionaria

• Sólido: finamente dividido en un tubo de vidrio o metal

• líquido inmiscible con la fase móvil. Se emplean distintos procedimientos para fijar la fase estacionaria líquida.

Tipo de fase móvil

• Gas• líquido

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Tanto el soluto como el solvente son atraídos por los sitios polares de la fase estacionaria, pero la separación es posible por las distintas fuerzas de atracción.

Adsorción

Fase estacionaria: sólido (sílica o alúmina)

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ParticiónLa separación se basa en la solubilidad relativa del soluto entre dos fases líquidas. Se utiliza gel de sílice que absorbe agua fuertemente. La fase estacionaria es el agua.

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Coeficiente de Partición

K = Cs fase estacionaria / Cs fase móvil Cs: concentración de soluto

A > K, el soluto tarda más tiempo en pasar por la columna

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Fase Estacionaria :

Partición: La fase estacionaria es líquida, sobre un soporte sólido inerte.

1 - Común (Agua)

2 - Reversa o Inversa (parafina)

El papel contiene un 20 % de agua retenido aunquenosotros lo notemos seco, esa es la fase estacionaria.

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Exclusión molecular: Tierras de DiatomeaSephedex (geles)

Adsorción:

Silica Gel (Oxido de Silicio).Alumina (Oxido de Aluminio).Celulosa.Fluorisil (Silicato de Magnesio).Sulfato de Calcio.

Fase Estacionaria :

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3)Clasificación de acuerdo al lecho cromatográfico:

-Cromatografía plana: en papel capa fina

-Cromatografia en columna

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Fase

estacionaria

Fase

móvil

Proceso

cromatográfico

Capa fina

Columna

Adsorción

I. Iónico

Esc. Molecular AdsorciónColumna

Papel

Capa fina

Columna

Partición

ParticiónColumna

Líquida

LíquidaLíquida

Sólida

Gas

Gas

Técnica

cromatográfica

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Cromatografía en Papel y Capa Fina (TLC)

Sembrado:

Puntiforme Banda

Forma de sembrado: Manual (capilares jeringas)

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Cualitativa

xx

Identificación

x x

Pureza

x x

Ausencia

Cuantitativa

x x x x

Preparativa

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Desarrollo

Simple

Múltiple

DescendenteAscendente

Circular

Horizontal

ComúnBidimensional

Continuo

x

ba Rf

a - distancia recorrida por el analito.

b - distancia recorrida por el frente

ab

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Cromatografía en capa delgada

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Cromatografía de capa fina

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Revelado Difiere de acuerdo al objetivo planteado

Clasificación de reveladores

H2SO4

I2

Lámpara ultravioleta

No Destructivo

Destructivo

Técnica de bañadoAplicación

Técnica de pulverización

Revelado

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H2SO4

Lámpara ultravioleta

I2

Ftalato de anilina (azúcares)

Ninhidrina (Amino-ácidos) Resorcina (Cetosas)Difenilamina + U.V. 254 (Clorados)

Generales

Selectivo

Específico

Revelado

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Estimación del área de la mancha (por medida, pesada)

Determinación indirecta (raspado y valoración)

Determinación directa (Densitómetro)

Detector Fuente de luz

Placa cromatográfica

Cromatografía Cuantitativa

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Cromatografía en Columnas

Son de acero inoxidable o vidrio, tienen un diámetro de 0,5 a 6 cm y una longitud de cm a más de 1 m. Se rellenan con la fase estacionaria sólida o un soporte inerte recubierto con la fase estacionaria

Una columna más larga aumenta el grado de separación

Se usan con fines analíticos y preparativos

column.mov

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Elución: el soluto es lavado de la columna por agregado de solvente

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Parte experimental

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Parte experimental

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Parte experimental