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CONTROLE DE POPULAÇÕES
MICROBIANAS
Prof. Adjunto Ary Fernandes Junior
Departamento de Microbiologia e Imunologia
Instituto de Biociências – UNESP
Tel. 14 3880.0412
ary@ibb.unesp.br
Dessecação e Salga
Egípcios: Embalsamento
Persas: Recipientes de prata e cobre para água
Ignaz Phillip Semmelweis (1818-1865)
Joseph Lister: Técnicas anti-séptica em operações cirúrgicas (uso de fenol para reduzir
incidência de infecção)
Controle de Populações Microbianas: ????
Alguns princípios importantes
Levar em conta o número e natureza dos microrganismos presentes no material.
O efeito normalmente não é instantâneo
(tempo de exposição);
O agente deve afetar diretamente o
microrganismo;
Destruir, inibir ou
remover
microrganismos
Microrganismos em números aceitáveis ou
ausência
dos mesmos
Controle da
população
microbiana
Agentes físicos Agentes químicos
Escolha de um método ??
Material
Objetivos
Algumas Definições
Esterilização: Destruição de toda e qualquer
forma de vida (formas vegetativas, esporos,
fungos, vírus, etc) de um material
Desinfecção: Destruição de microrganismos
patogênicos presentes num material inanimado
(Desinfetantes)
Anti-sepsia: Destruição de microrganismos
patogênicos num tecido vivo (Antissépticos)
(Caracteristicas ??)
Assepsia: Conjunto de medidas para prevenir a
entrada de microrganismos num material (vivo
ou não) ou reduzir o número dos já presentes
(Profilaxia)
AGENTES FÍSICOS
Calor (Seco e Úmido)
-Tempo de Redução Decimal (TRD ou D): Tempo
(minutos) em que 90 % de uma população microbiana
em uma determinada temperatura será morta
-Ponto de Morte Térmica (PMT): Menor temperatura em
que todos os microrganismos em uma suspensão líquida
serão mortos por calor em 10 minutos
-Tempo de Morte Térmica (TMT): Período mínimo de
tempo em que todos os microrganismos serão mortos
Calor Seco: Oxidação do Protoplasma
Flambagem (Bico de Bunsen)
Fornos (Forno Pasteur)
Incineração
Bico de Bunsen
“Vassoura de fogo”
Forno Pasteur
Incineração
Calor Úmido Desnaturação de Proteínas
Dissolve lipídeos
Maior poder de penetração Mais eficiente
Fervura: (100C/15 min.)
(Não destroe Esporos e alguns Vírus
(Hepatite A).
Autoclavação: Vapor
d’água sob pressão
(121C/15’)
(Autoclave) Uso
para esterilização de
materiais
(Meios de cultura,
instrumento
cirúrgicos, vidrarias,
etc).
Pasteurização
Eliminar microrganismos
patogênicos de substâncias
que não suportam
temperaturas elevadas.
Tipos
Lenta (62,8C/30 min) 5C.
Rápida (71,7C/15 seg.) 5C
(Reduz contagem entre 97 e 99%)
UHT – Ultra High Temperature
ESQUEMA DE PASTEURIZAÇÃO DO LEITE(1)-Leite Crú; (2)-Bomba; (3)-Água Fria; (4)-Água Quente; (5)-
Homogeneizador; (6)-Serpentina de Controle; (7)-Água Superaquecida; (8)-Vapor de aquecimento ; (9)-Leite Pasteurizado.
Tindalização = Esterilização fracionada
(Uso para meios nutritivos)
70 a 100C/30 min. Incubação
100oC/30 min – 1º dia
Incubar 37oC/24 h
100oC/30 min – 2º dia
Incubar 37oC/24 h
100oC/30 min – 3º dia
Baixas Temperaturas (-70 a -196oC) ????
Preserva
Nitrogênio líquido
-196o CFreezer
-70o C
Filtração
Apenas separa microrganismos de materiais
fluídos (Remoção mecânica).
Eficiência - Depende da malha do filtro
( 1 m)Ex. : Tampão de algodão até tipos especiais
(Berkefeld , Seitz , Ésteres de celulose, etc.)
Câmara de Fluxo Laminar (Filtração e Ultra Violeta)
RadiaçõesNão Ionizantes (Ultra-Violeta)
Ionizantes (Beta, Gama, Raio X)
Baixo Poder de Penetração Usos ???
UV = 210 a 328 nm (240 a 280 nm)
(Absorvida pelo DNA e proteínas)
Efeitos Indiretos Formação de O3 no ar e
H2O2 na água.
Efeitos Diretos Mutação,
Formação de Dímeros de
Timina e Inibição de Enzimas;
Aparelhagem dispendiosa
(Uso para substâncias e materiais sensíveis
ao calor)
Radiações Ionizantes (X, e Gama)
(Elevado poder de penetração Alimentos
embalados)
Ioniza macromoléculas Altera composição
química da célula
Na fonte de cobalto tipo panorâmica, os materiais, já em
sua embalagem final, são submetidos à radiação gama
Vibrações Sônicas: 200.000 Hz
Mecanismo: Gases em solução na célula
Microbolhas Choques com a parede
Lise da célula bacteriana (Cavitação)
Microondas
Pressão Osmótica
Dessecação
AGENTES QUÍMICOS
Agem sobre estruturas da célula. Dificilmente
as bactérias tornam-se resistentes.
Agem sobre rotas metabólicas e estruturas da
célula bacteriana. São os antibióticos e
quimioterápicos.
Antissépticos, Desinfetantes e Detergentes
Drogas Antimicrobianas
Síntese de
lipídeos
Streptomyces platensis
Platensimicina
Azitromicina
Claritromicina
Estreptograminas
(Quinopristina/
Dalfopristina)
Tigeciclina
Mecanismos de Ação
Álcoois: Etanol (Desinfetante e/ou Antisséptico),
Isopropílico (+ eficiente)
DESNATURAÇÃO DE PROTEÍNAS
Soluções aquosas (50 a 70%) são mais eficientes.
Espectro de Ação: Gram (+) e (-), BAAR (Fungos,
Vírus) (Pouco ativo contra esporos)
Tempo de exposição: 10 a 15 min.
Antisséptico : Uso limitado (Hexaclorofeno)
Fenóis e Derivados
Desinfetante: (5%) (Duplofen)
Espectro de Ação: Gram ( + ) e ( - ), BAAR.
Tempo de exposição: Efeito é imediato.
Coeficiente fenólico
ALTERAÇÃO NA PERMEABILIDADE
DA MEMBRANA CELULAR
Catiônicos: Carga positiva (Quaternários de Amônio)
Aniônicos: Carga negativa ( Elevadas concentrações)
Não iônicos: Sem cargas (Só capacidade limpadora)
Detergentes (Surfactantes)
Espectro de Ação: Gram ( + ) e ( - )
Tempo de exposição: 10 a 30 min.
Produto com atividade
antimicrobiana e de
detergência. É formulado a
partir do princípio ativo
Cloreto de Alquil
Dimetil Benzil Amônio,
que lhe confere a ação
antimicrobiana e o Nonil
Fenol Etoxilado (Tensoativo
não iônico), que lhe confere
a ação de detergência.
INATIVAÇÃO DE ENZIMAS
R-SH -2H
R-S-S-R
R-SH
H2O2 (Ação Antisséptica), Iodo (Antisséptico (PVPI),
Iodoforos, Cloro (Antisséptico - Clorohexidina),
Sanitizador (Hipoclorito), KMnO4 (Antisséptico (1:1000)
Oxidam Grupamentos Sulfidrilas:
Agem sobre grupamentos sulfidrilas livres (R-SH)
Espectro de Ação: Gram ( + ) e ( - ), BAAR
(Pouco ativos sobre esporos)
Tempo de exposição: Efeito imediato
O princípio ativo do PVPI
(polivinilpirrolidona-iodo) é o iodo
que com suas propriedades
germicidas amplamente
conhecidas, reduz a flora
bacteriana em curto espaço de
tempo
Substituem Grupamentos Sulfidrilas:
Metais Pesados: Mertiolate, Mercúrio Cromo, Prata -
Prata coloidal, Nitrato de prata (AgNO3) (oftalmia
gonocócica) (1%), Argirol (Proteinato de prata)
Cl
R-SH R-S
+ Hg Hg + 2 HCl
R-SH R-S
Cl
Espectro de Ação: Gram ( + ) e ( - )
Tempo de exposição: Só agem enquanto em contato
Óxido de Etileno Gás Tóxico e Explosivo.
AGENTES ALQUILANTESSubstituem átomos de hidrogênio em radicais
(R-NH2, OH, R-SH, R-COOH)
Formaldeído Usado na forma gasosa (Fumegação)
Glutaraldeído Solução Aquosa (Glutarex)
Espectro de Ação: Gram (+) e (-), BAAR e esporos.
Tempo de exposição: Curto sobre formas vegetativas
Prolongado sobre esporos
UM BOM DESINFETANTE.
Não provocar danos ao homem e animais durante aplicação,
Econômico.
Fácil aplicação,
Tolerado por materiais,
Estabilidade em sua composição química,
Perda mínima de potência por ação do ambiente,
Ação rápida e irreversível
Espectro de ação amplo,
Lavar as mãos
ainda continua
sendo uma das
soluções para
os problemas
enfrentados
pela
Microbiologia
Clínica
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