View
301
Download
6
Category
Preview:
Citation preview
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 1/78
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 2/78
Oleh : Kelompok IIINama anggota Kelompok :
Nurul hikmatil hasanah
Nurulhidayati Rahmah fitriatun
Rahmat fahmi arief
Rival anugrah ramdani
Robiatul rosidah
Rostiana safarani
S. Nur M. Ismail NU
Siti rif`ah sabariah Suriyani
Wahyu kurnia
Wardatul jannah
Winda permata sari
Yuni suhanti
Yuriska safitri
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 3/78
Pemeriksaan Hemostasis
1. Pemeriksaan penyaring (Screening)
2. Pemeriksaan Khusus
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 4/78
Pemeriksaan Penyaring
1. Bleeding time /masa perdarahan2. Clotting time /masa pembekuan3. Rumple Leed4. Retraksi bekuan5. Volume Cairan Bekuan6. Clott Lysis
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 5/78
Pemeriksaan Khusus
1. Masa Rekalsifikasi plasma2. Jumlah trombosit3. Plasma Protrombin time (PPT)4. Kaolin partial tromboplastine time (APTT)5. Serum Protrombin time (SPT)6. Trombin time (TT)
7. Titer fibrinogen8. Fibrinogen Degradation Product (FDP)9. Euglobulin Lisis time.10. Agregasi Trombosit11. D-Timer
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 6/78
MASA PERDARAHAN BLEEDING TIME / BT )
Tujuan
Menilai trombosit dan reaksi pembuluh darah terhadap luka ; kem
membentuk sumbat trombosit yang efektif. Prinsip
1) Metode Ivy
Manset tekanan darah dipasang di lengan pasien di atas siku, dinaikkan dan dipertahankan konstan sesuai prosedur. Satu (a
insisi standard dibuat dipermukaan volar lengan bawah. Lama yang dibutuhkan untuk berhentinya perdarahan dicatat sebagPerdarahan (Bleeding time).
2) Metode Duke
Dibuat luka standar pada daun telinga dan dicatat lama waktupendarahan.
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 7/78
Alat dan Reagent :
1) Lancet steril
2) Kapas kering
3) Stopwacth
4) Kertas saring5) Alkohol 70%
Cara Kerja
A. Metode Duke
1) Pijatlah terlebih dahulu bagian anak daun telinga yang akan ditusu
2) Bersihkan daerah anak daun telinga dengan kapas alcohol
3) Pencetlah bagian yang akan ditusuk, baru kemudian ditusuk dengamenggunakan lanset.
4) Tiap 30 detik darah dihisap dengan kertas saring.
5) Catatlah waktu yang diperlukan saat darah mulai keluar hingga darkeluar.
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 8/78
B. Metode Ivy
1) Pasang manset tekanan darah di lengan atasdan dinaikkan sampai 40 mmHg
2) Bersihkan area penusukan di lengan bawah
dengan alkohol dan biarkan kering3) Buat insisi di area untuk masa perdarahan
dengan lanset standard. Segera jalankanstopwatch
4) Secara spontan darah akan keluar mengalirsecara alamiah setiap 30 detik, serap darah
tersebut dengan kertas saring5) Bila bercak darah yang muncul ≤ 1 mm,
hentikan stopwatch
6) Catat wajtu sebagai Bleeding Time
7) Lepaskan manset spyghmomanometer
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 9/78
Harga / Nilai Normal
Metode Duke : 1-3 menit
Metode Ivy : 1-6 menit
Catatan A. BT memanjang:
1) Tusukan sp ke permukaan vena
2) Efek aspirin atau obat anti-inflamasi
3) Trombositopenia
4) Defek kualitas trombositB. BT memendek
1) Kertas saring menyentuh luka, mengakibatkan induksi agtrombosit
2) Insisi terlalu kecil (Ivy method), tekanan kurang (templat
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 10/78
Tujuan :
Untuk mengetahui lamanya waktu yang diperlukan daramembeku
Prinsip
Metode Lee & white
Diambil darah vena dan dimasukkan kedalam tabung reaksi, kdibiarkan membeku. Selang waktu dari saat pengambilasampai saat darah membeku dicatat sebagai masa pembekuan
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 11/78
Alat dan Reagen :
Spuit Tabung serologi ( 10 x 75 mm) sebanyak 4 buah
Stopwatch
Kapas
Alkohol 70%
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 12/78
Prosedur kerja
1. Ambil darah 4 ml. Pada saat darah mulai nampak dalam sempritstopwatch.
2. Lepaskan jarum dari semprit dan masukkan darah ke dalam 4 taterbagi rata.
3. Angkat tabung pertama dari rak dan miringkan sedikit untuk mapakah darah sudah membeku. Ulang tindakan ini tiap 30 detik
4. Setelah darah pada tabung pertama membeku, tunggu 30 detik umelihat tabung ke dua dengan cara yang sama.
5. Lanjutkan hingga pada semua tabung terdapat pembekuan darah
6. Laporkan hasil rata-rata tabung nomer 2,3 dan 4. Hasil dibulatka30 detik.
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 13/78
Nilai Normal
Normal : 6-12 menit Meragukan : 12-15 menit
Patologis : diatas 15 menit
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 14/78
TES PEMBENDUNGAN (RUMLPE LEED)
Tujuan : Untuk menguji ketahanan kapiler darah
mengukur kekuatan dinding kapiler darah dalam mencegah perdarahan.
Prinsip :Darah dibendung dengan pemasanganspignomanometer pada tekanan antara sistolik dan diasto
pada lengan bagian atas kemudian dilihat timbul atau tidpathecia paa kulit lengan selama 10 menit
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 15/78
Prosedur Kerja1. Pasanglah ikatan spignomanometer pada lengan atas dan po
sampai tekanan 100 mmHg (jika tekanan sistolik kurang dari
mmHg. Pompalah sampai tekanan ditengah-tengah nilai sistdiastolic)
2. Pertahankan tekanan itu selama 10 menit
3. Lepaskan ikatan dan tunggulah sampai tanda-tanda stasis dalenyap lagi. Stasis darah telah berhenti jika warna kulit pada
yang dibendung tadi mendapat lagi warna kulit lengan yang dibendung
4. Carilah adanya dan hitunglah banyaknya petechie yang timblingkaran bergaris tengah 5 cm, kira-kira 4 cm distal dari foss
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 16/78
Nilai Normal
Normal : Maksimal 10 petechie
Abnormal : Lebih dari 10 petechie
Interpretasi hasilNegatif ( - ) Tidak didapatkan petechie
Positif 1 ( + ) Timbul beberapa petechie dipermupangkal lengan
Positif 2 ( ++ ) Timbul banyak petechie
Positif 3 ( +++ ) Timbul banyak petechie diseluruhpermukaan lengan, telapak tangamuka dan belakang
Positif 4 ( ++++ ) Banyak sekali petechie diseluruhpermukaan lengan, telapak tanganmuka dan belakang
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 17/78
RETRAKSI BEKUAN Tujuan
Untuk mengetahui fungsi trombosit
Prinsip
Setelah darah membeku, bekuan darah mengkpada proses pengerutan itu sejumlah serum diper
dari bekuan sehingga ia menjadi kenyal dan pditentukan oleh jumlah trombosit pervolume darah fungsi trombosit.
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 18/78
Alat dan Bahan
Alat
- Spuit- Tabung sentrifuge
- Kapas alkohol
- Stiweng
- Rak tabung- LidiBahan
- Darah
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 19/78
Prosedur Kerja Siapkan tabung centrifuge bergaris yang telah diberi lidi dengan uju
sedikit dipatahkan
Ambil darah sebanyak 5 cc, kemudian masukkan kedalam tabung c
Biarkan pada suhu kamar selama 2 jam atau semalam dalam lemari Pembacaan :
Tarik lidi secara perlahan. Bekuan darah terikat pada lidi, untuk dinkonsistensinya apakah lembek atau kenyal
Perhitungkan berapa jumlah cairan yang telah diperas keluar dalam
Contoh : Serum yang tertinggal dalam tabung : 2 ml
2 / 5 x 100 % = 40 %
Sifat dan konsistensi bekuan juga perlu dilaporkan. Pada keadaan ndan kenyal
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 20/78
Harga Normal
Volume serum yang dikeluarkan secara spontan dari bekuan m
ukuran bagi retraksi bekuan yang terjadi.Normal : 40 – 60 %
Patologis : Kurang dari 40 %
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 21/78
VOLUME CAIRAN BEKUAN
TujuanUntuk mengetahui jumlah sebenarnya serum yang abekuan.
PrinsipMengukur dalam persentase jumlah serum yang masih ketinggabekuan darah setelah waktu tertentu.
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 22/78
Cara Kerja
Lakukan test retraksi bekuan
Menentukan nilai hematokrit dari darah yang diperiksa
Isi tabung kapiler dengan darah sebanyak ± 2/3 – 3/4 panjang tabulalu sumbat dengan malem
Dicentrifuge dengan mikrocentrifuge dengan kecepatan 15.000 rpmselama 3 menit.
Baca hasilnya pada skala
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 23/78
Nilai Normal
Normal : 0 - 20 %
Patologis : Lebih dari 20 %
Cara Pembacaan hasil
Volume bekuan darah dikurangi nilai hematokrit
Contoh :Hasil test retraksi bekuan : 2 ml serum diperaskeluar = 40 % Volume bekuan : 5 – 2 = 3 ml atau 60 %Hasil test hematokrit : 25 %
Hasil test cairan tertinggal : 60 % - 25 % = 35 %
MENCAIRNYA BEKUAN ( CLOT LYSIS )
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 24/78
MENCAIRNYA BEKUAN ( CLOT LYSIS ) Tujuan
Untuk mengetahui fungsi trombosit
Prinsip
Hasil dari retraksi bekuan di inkubasi pada waktu tertentu dan dicatat waktu yang di
Alat dan Bahan
Alat
- Tabung reaksi
- Kapas
Bahan
- Darah hasil dari retraksi bekuan
Prosedur Kerja Bekuan yang telah diangkat dengan lidi dipindahkan ke dalam tabung yang steril
Catat waktu yang diperlukan hingga darah tersebut lisis
Harga Normal
Darah lisis lewat dari 72 jam ( 3 hari 3 malam )
Prosedur Kerja
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 25/78
.Prosedur Kerja
A. Pembuatan Plasma miskin Trombosit
1) Masukkan 0,3 ml larutan Na. Citrat 3,8 % kedalam tabung
2) Lakukan fungsi vena dan masukkan kedalam tabung yang telah berisi Na. Citrat
perbandingan 1 bagian Na.Citrat : 9 Bagian darah, campur dengan baik.
3) Pusingkan dengan centrifuge selama 20 menit dengan kecepatan 1000 rpm terle
dinaikkan menjadi 2000 baru kemudian 3000 rpm, dan pisahkan plasma dari seB. Penetapan Masa Rekalsifikasi
1. Siapkan tabung yang masing-masing berisi :
a) Plasma penderita yang miskin trombosit
b) Plasma control yang miskin trombosit
c) CaCl 0,025 M
d) NaCl 0,05 %
2. Masing-masing diinkubasi pada suhu 37°C selama 2-3 menit
3. Dengan dispenser masukkan 0,1 ml (100 µ), larutan NaCl 0,85% dan 0,1 ml plas
dicampur dan biarkan dalam waterbath
4. Tambahkan 0,1 ml larutan CaCl2 0,025 M, campur dan pada saat yang bersama
stopwatch
5. Catat waktu sampai terjadinya bekuan, hentikan stopwatch
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 26/78
Harga Normal
Harga Normal : 90 – 150 detik
Prosedur Tahap Tunggal menurut Quick
A. Membuat plasma
1) Masukkan 0,5 ml larutan Natrium Sitrat 3,8 %Ke dalam tabung sentrifuge yang bergaris.
2) Lakukan fungsi vena dan masukkan ke dalam tabung sentrifuge tadi 4,5 ml darah itu.
3) Pusingkan selama 20 menit dengan kecepatan 3000 rpm, pisahkanlah plasma dari sel-sel dar
4) Bila plasma itu tidak segera diperiksa, simpanlah dalam lemari es, tapi meskipun disimpan padpemeriksaan harus dilakukan dalam waktu 2 jam setelah darah diambil.
B. Penetapan masa protrombin
1) Masukkanlah tabung serologi ; 13 x 10 mm ke dalam air bersuhu 37°C
2) Masukkanlah 0,1 ml plasma ke dalam tabung dan tunggulah beberapa lama hingga plasma ber
3) Tambahkan 0,1 ml tromboplastin, kemudian campur.4) Lalu kepada campuran itu diberi 0,1 ml larutan CaCl2 0,22 % ( 0,02 M) jalankan stopwatch tep
Calciumchlorida itu dimasukkan. campur baik-baik
5) Biarkan selama 10 detik, kemudian dicoba apakah sudah ada fibrin dengan berkali-kali memankaitan logam dalam campuran tadi.
6) Hentikan stopwcth pada saat adanya fibrin ; lamanya yang ditunjukkan ialah masa protrombin
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 27/78
MASA REKALSIFIKASI PLASMA
Tujuan
Untuk mencari adanya kekurangan faktor-faktor pembekuan d jalur intrinsic yaitu faktor pembekuan V, VIII, IX, X, XI, XII, prdan fibrinogen.
Prinsip
Plasma citrate yang miskin trombosit dicampur dengan Calsiudalam jumlah tertentu sehingga daya anticoagulansia dinetralpembekuan yang terjadi, dicatat.
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 28/78
Alat, Reagensia dan Bahan
Alat
Tabung serologi Waterbath
Stopwatch
Dispenser
Spuit
Centrifuge Tissue
Pipet tetes
Kapas alkohol
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 29/78
Reagensia
Calcium Chlorida 0,025 M
CaCl2 1,38 gram
Aquadest 500 ml Larutan NaCl 0,85 %
Bahan
Calcium Citrat miskin trombosit
Harga Normal
Harga Normal : 90 – 150 detik
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 30/78
Prosedur Kerja
A. Pembuatan Plasma miskin Trombosit
Masukkan 0,3 ml larutan Na. Citrat 3,8 % kedalam tabung Lakukan fungsi vena dan masukkan kedalam tabung yang telah
Citrat dengan perbandingan 1 bagian Na.Citrat : 9 Bagian darahdengan baik.
Pusingkan dengan centrifuge selama 20 menit dengan kecepatarpm terlebih dahulu, lalu dinaikkan menjadi 2000 baru kemudrpm, dan pisahkan plasma dari sel-sel darah.
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 31/78
B. Penetapan Masa Rekalsifikasi
Siapkan tabung yang masing-masing berisi :
- Plasma penderita yang miskin trombosit
- Plasma control yang miskin trombosit- CaCl 0,025 M
- NaCl 0,05 %
Masing-masing diinkubasi pada suhu 37°C selama 2-3 menit
Dengan dispenser masukkan 0,1 ml (100 µ), larutan NaCl 0,85%
plasma penderita, dicampur dan biarkan dalam waterbath Tambahkan 0,1 ml larutan CaCl2 0,025 M, campur dan pada saa
bersamaan jalankan stopwatch
Catat waktu sampai terjadinya bekuan, hentikan stopwatch
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 32/78
Perhitungan Jumlah Trombosit
Tujuan pemeriksaan
Untuk menghitung jumlah trombosit dalam darah
Metode 1. Direct
Prinsip : Darah diencerkan dalam pipet thomakemudian dimasukkan ke dalam kamar hitung . Jumlah
dihitung dalam volume tertentu, dengan menggunakkonversi jumlah trombosit per l darah dapat diperhitungk
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 33/78
2. Indirect (tidak langsung)/ metode fonio
Prinsip
Darah ditambahkan larutan MgSO4 14 % kemudian dibu
lalu dicat dengan Wright atau Giemsa. Periksa di bawah mperbesaran 40x, jumlah trombosit dihitung per jumlah eritdalam 1000 eritrosit.
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 34/78
Alat dan Reagensia
1. Metode Direct
- AlatPipet thoma eritrosit
Kamar hitung improved
naubauer
Mikroskop
- ReagensiaLarutan Rees –Ecker
Darah vena
EDTA
Kapas + alkohol
2 Metode Indirect
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 35/78
2. Metode Indirect
Alat
1) Objek gelas
2) Mikroskop3) Lampu bunsen
4) Bak pewarna
Reagensia
1) Cat Wright/ Cat Giemsa
2) Darah vena/ kapiler
3) MgSO4 14%4) EDTA
5) Metanol
6) Larutan penyangga pH 6,4
7) Aquadest
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 36/78
Cara Kerja
1. Metode Direct
a) Isaplah darah EDTA sampai pada garis tanda 0,5 tepat.
b) Hapuslah kelebihan darah yang melekat pada ujung pipet.c) Masukkan ujung pipet dalam larutan Rees-Ecker sambil menaha
pada garis tanda tadi jangan sampai keluar. Pipet dipegang dengderajat dan larutan Rees-Ecker diisap perlahan-lahan sampai tan Jangan sampai ada gelembung udara.
d) Angkatlah pipet dari dalam cairan, tutup dengan ujung jari, lalu
karet penghisap.
e) Kocoklah pipet itu selama 15-30 detik. Jika tidak segera dihitung dalam sikap horizontal.
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 37/78
f.) Letakkanlah kamar hitung yang bersih benar dengan kacpenutupnya terpasang mendatar di atas kamar hitung.
g.) Buang cairan yang ada dalam pipet 3-4 tetes dan segeralah
sentuhkan ujung pipet itu dengan sudut 30 derajat padapermukaan kamar hitung dengan menyinggung pinggir kpenutup.
h.) Periksa di bawah mikroskop dengan pembesaran 40 x.
i.) Aturlah fokus mikroskop, hitunglah semua trombosit yan
terdapat dapat 25 bidang sedang yang tersusun dari 16 bidkecil.
2 Metode Indirect
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 38/78
2. Metode Indirect
a. Pulasan Wright
1) Teteskan darah yang sudah dicampur denga(perbandingan darah: MgSO4 = 1:4) di atas objek ge
hingga kering.2) Letakan sediaan yang akan dipulas di atas rak tempa
dengan lapisan darahnya ke atas.
3) Teteskan ke atas sediaan itu 20 tetes larutan Wrig
sediaan di atas kaca penutup 5 tetes). Biarkan selamaagar sediaan direkat dalam waktu itu.
) T t k k di b k l t
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 39/78
4) Teteskan kemudian sama banyaknya larutpenyanggah pH 6,4 ke atas sediaan itu dan biarkaselama 5 12 menit.
5) Siramlah sediaan itu dengan air suling, mula-mu
perlahan-lahan (untuk membuang zat warna yanteraoung di atas) kemudian keras-keras untumembersihkan sediaan itu dari kotoran.
6) Taruhlah sediaan itu dalam sikap vertical agmengering pada udara.
b P l Gi
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 40/78
b. Pulasan Giemsa
1) Teteskan darah yang sudah dicampur dengan MgSO4 (per
darah: MgSO4 = 1:4) di atas objek gelas, tunggu hingga k
2) letakan sediaan yang akan dipulas di atas rak tempatdengan lapisan darah ke atas.
3) Teteskan sekian banyak metilaolkohol ke atas sediaan itu
bagian yang terlapis darah tertutup seluruhnya. Biarkan
menit atau lebih lama.
4) Tuanglah kelebihan metilalkohol dari kaca.
5) Liputilah sediaan itu dengan Giemsa yang telah diencerklarutan penyanggah dan biarkan selama 20 menit.
6) letakan sedian dalam sikap vertical dan biarkan menge
udara.
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 41/78
Rumus Perhitungan
1. Metode Direct
Kamar Hitung Improved Naubauer Perbesaran 40 x.
Perhitungan Jumlah TrombositLuas : 5 x 5 (1/5 x 1/5) mm2 Tinggi : 0,1 mm Volume : 0,1 mm3
Pengenceran : 200x Jumlah trombosit
= (1/0,1) x P x N
= (1/0,1) x 200 x N
= 2000N / µl darah
M t d I di t
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 42/78
2. Metode IndirectPerbesaran 100x dengan oil immersiDidapatkan jumlah trombosit = ....
∑ trombosit = n x= ...../ µl darah
Nilai Normal Trombosit
150.000 –
450.000 / ul darah
Cara Penghitungan Jumlah Trombosit Metode Apusan Dara
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 43/78
Lp 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
5 6 4 6 8 9 7 8 9 5 8 9 6 7 8 6 9 8 9 7
N = 5+6+4+6+8+9+7+8+9+5+8+9+6+7+8+6+9+8+9+7 = 144
Jumlah Trombosit = 144 x 1000 = 144.000/mmk
MASA PROTROMBIN (MP) PLASMA PROTROMBINE TIME (PPT)
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 44/78
MASA PROTROMBIN (MP) atau PLASMA PROTROMBINE TIME (PPT)
A. Definisi
Pemeriksaan faktor koagulasi untuk mengukur kemampuan faktor koagulasi ekstrinsik dan b
dalam plasma untuk membentuk koagulasi fibrin.
Cara ini digunakan untuk menguji adanya gangguan faktor pembekuan darah pada jalur e
kekurangan faktor pembekuan VII, X, protrombin dan fibrinogen. Jika dianggap bahwa fak
dalam prose itu normal, maka masa protrombin ini menjadi ukuran untuk aktivitas protro
Dasar percobaan plasma diberi sejumlah tromboplastin dan ion calcium yang optimal dan
untuk menyusun fibrin diukur.
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 45/78
B. Indikasi
Definisi faktor koagulasi jalur ekstrinsik
Bersama APTT mendeteksi aktivitas faktor koagulasi bersama
Inhibitor terhadap faktor ekstrinsik
Monitor terapi antikoagulan oral
Penyakit hati
DIC
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 46/78
C. Prinsip
Ion Ca2+ dalam darah diikat oleh antikoagulan untuk mengham
pembekuan.Plasma yang mengandung semua faktor koagulasi
kecuali Ca2+ ditambah dengan tromboplastin akan membentu
Proses pembentukan jendalan dideteksi secara optikal (clop de
oleh fotodetektor.
Waktu yang diperlukan untuk pembentukan jendalan dinyatak
plasma prothrombine time ( PPT )
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 47/78
D. Prosedur Tahap Tunggal menurut Quick
1. Membuat plasma
Masukkan 0,5 ml larutan Natrium Sitrat 3,8 %Ke dalam tabung sentr
bergaris.
Lakukan fungsi vena dan masukkan ke dalam tabung sentrifuge tadi
darah itu.
Pusingkan selama 20 menit dengan kecepatan 3000 rpm, pisahkanla
dari sel-sel darah. Bila plasma itu tidak segera diperiksa, simpanlah dalam lemari es, tap
disimpan pada suhu rndah, pemeriksaan harus dilakukan dalam wak
setelah darah diambil.
2. Penetapan masa protrombin
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 48/78
Masukkanlah tabung serologi ; 13 x 10 mm ke dalam air bersuhu 37°C
Masukkanlah 0,1 ml plasma ke dalam tabung dan tunggulah beberap
hingga plasma bersuhu 37°C pula.
Tambahkan 0,1 ml tromboplastin, kemudian campur.
Lalu kepada campuran itu diberi 0,1 ml larutan CaCl2 0,22 % ( 0,02 M
stopwatch tepat pada saat larutan Calciumchlorida itu dimasukkan.
baik-baik
Biarkan selama 10 detik, kemudian dicoba apakah sudah ada fibrin d
berkali-kali memancing memakai kaitan logam dalam campuran tad
Hentikan stopwcth pada saat adanya fibrin ; lamanya yang ditunjukk
masa protrombin plasma.
E. Catatan
k b k k f d l k b h l k
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 49/78
Pemeriksaan ini bukan satu penetapan kuantitatif, dalam arti kata sebenarnya; hasil iku
oleh kualitas tromboplastin yang dipakai dan oleh tekhnik pengerjaannya. Oleh karena i
ini selalu harus dilakukan in duplo dan harus juga disertai control dengan plasma norm
Normal antara 11-15 detik. Bila control lebih lama dari 16 detik, percobaan batal karena m
tromboplastin telah menjadi kurang aktif. Tromboplastin dapat dibeli atau boleh juga dibuat sendiri dari otak kelinci; dianjurkan u
yang diperdagangkan saja, karena sering tromboplastin buatan sendiri kurang aktif. Jika
tromboplastin belian, ikutilah instruksi cara melakukan tes masa protrombin dengan se
itu menyertai tiap batch tromboplastin. Larutan tromboplastin tidak tahan lama, harus d
lemari es dan aktivitasnya harus tiap kali diuji dengan plasma normal.
Larutan Calciumchlorida 0,22% juga tidak tahan lama, oleh karena itu sebaiknya membupokok 2,22% ( 0,2M ).
Laporan masa protrombin selalu harus menyebut masa protrombin control jug
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 50/78
duanya disebut dengan detik. Cara yang lebih bagus menyebut aktivitas protro
% ( dari normal ). Cara itu menghendaki agar terlebih dahulu dibuat grafik akt
memakai campuran dari tromboplastin yang dipakai dan plasma normal, camp
diencerkan berderet dengan plasma lain yang tidak mengandung protrombin.
aktivitas protrombin memperlibatkan garis lengkung.
Alat-alat yang khusus dibuat untuk penetapan masa protrombin dan untuk tes
yang berakhir dengan terjadi bekuan dalam plasma memberi hasil penetapan y
reproducible sampai 1/10 detik ketelitian.
Dalam keadaan darurat masa protrombin dapat dilakukan dengan darah kapile
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 51/78
Dalam keadaan darurat masa protrombin dapat dilakukan dengan darah kapile
objek sebagai berikut :
Letakkan setetes tromboplastin diatas objek glass yang kering dan bersih.
Tusukkan kulit untuk mendapat darah kapiler yang leluasa keluar, jalankan stosaat darah mulai keluar dari luka
Segeralah campur darah dengan tromboplastin dengan menggunakan lidi atau
Biarkan sampai detik ke 10 pada stopwatch
Periksalah tiap detik dengan ujung jarum apakah telah terjadi fibrindalam cam
Catatan : Cara kasar ini memerlukan dilakukannya control dengan darah norm
dijalankan beberapa kali berturut-turut pada setiap pasien. Sadarilah bahwa ca
merupakan cara darurat saja dan tidak dianjurkan dipakai sebagai pemeriksaan
MASA TROMBOPLASTIN PARSIAL TERAKTIVASI (MTP
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 52/78
(
ACTIVED PARTIALTHROMBOPLASTINE TIME (APTT)
Definisi
APTT adalah pemeriksaan laboratorium unutk mengukur kem
faktor koagulasi jalur intristik dan bersama yang ada dalam p
untuk membentuk koagulasi fibrin.
APTT adalah test penyaring koagulasi yang sederhana, cepa
reproducible, menyerupai test masa rekalsifikasi dengan tam
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 53/78
Adanya kontak permukaan yang aktif
Fosfolipid (PF3)
Kedua-duanya dipengaruhi oleh tambahan activator kuat terhadap faktor , yaitcelite, ellagic acid, dan silica
Tujuan
Defesiensi faktor koogulasi jalur intrinsik
Bersama PT (Protrombin Time) mendeteksi aktivitas faktor koagulasi bersa
Inhibitor terhadap faktor intrinsik
Monitor terapi antikoagulan
Penyakit hati
DIC
Prinsip Pemeriksaan
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 54/78
Prinsip Pemeriksaan
Ion Ca++ dalam darah diikat oleh anti koagulen untuk menghambat pembek
yang mengandung semua faktor koagulasi intrinsic kecuali Ca++ dan trombos
dengan Ca++ dan fosfolipid dan membentuk jendalan. Waktu yang diperlukan
pembentukan jendalan dinyatakan sebagai Actinated Partial Tromboplastin Tim
Alat, Bahan dan Reagensia
Alat :
Waterbath - Stopwatch
Cetrifuge - Pipet tetes
Tabung serologi trank - Spuit Tabung reaksi - Kapas kering
Dispenser dan yellow tipe - Tissue
Bahan pemeriksaaan
Plasma control miskin trombosit
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 55/78
Plasma control miskin trombosit
Plasma penderita miskin trombosit
Reagensia
Natrium citrate 3,8 %
CaCl2 0,025 M Tromboplastin
Kaolin
Alkohol 70 %
Prosedur Kerja
A. Pembuatan plasma miskin trombosit
1) Masukan 0,3 ml larutan Na citrate 3,8 % ke dalam tabung reaksi. Lakukan fungsi vena d
dalam tabung yang berisi Na citrate 2,7 ml darah (1 bagian Na citrate : 9 bagian darah)
2) Campur sampai homogen kemudian di centrifuge selama 20 menuit dengan kecepatan
menyebabkan plasma hanya mengandung sedikit trombosit (plasma rendah trombosit)
3) Masukkan plasma ke dalam tabung reaksi, kemudian inkubasi pada waterbath 37oC
Penetapan Activated Partial Protrombin Time (APTT)
1) Tromboplastin dicampur dengan kaolin, hal ini dimaksudkan untuk membuat reagen partial tro
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 56/78
2) Inkubasi semua reagen dan alat yang akan digunakan pada waterbath suhu 37oC selama 5 m
3) Pipet 0,2 ml (200 l) plasma kontrol (atau plasma penderita) dan letakan pada waterbath selam
4) Tambah 0,2 ml (200 l) reagen partial tromboplastin (yang mengandung activator) ke dalam ta
mengandung control (atau plasma pasien) dan inkubasi selama 2 menit
5) Setelah tepat 2 menit, pipet 0,2 ml CaCl2 yang telah dihangatkan ke dalam tabung dan nyalak
bersamaan
6) Campurkan tabung segera setelah ditambahkan CaCl2. Biarkan tabung uji tetap di dalam wat
menggoyang tabung perlahan setiap 5 detik
7) Setelah 20 detik, keluarkan tabung uji dari waterbath. Bersihkan bagian luar tabung uji. Goya
perlahan hingga munculnya bekuan dan pada saat yang sama perhitungan waktu dihentikan
8) Sebaiknya test dilakukan in duplo dan dilaporkan hasil rata-rata. Laporkan juga hasil test con
Harga Normal
Normal : 35 – 45 detik
Meragukan : 45 – 50 detik
Abnormal : diatas 50 detik
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 57/78
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 58/78
Masa Protrombin Serum SPT)
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 59/78
Prinsip
Bila serum (+) fibrinogen (absorbed plasma), suspensi tromboplastin
maka akan terbentuk bekuan. Waktu bekuan yang memanjang menaadanya sisa protrombin dalam serum yang sdikit, sebaliknya bila terj
pemendekan terbentuknya bekuan menandakan adanya gangguan p
protrombin activator.
Defisiensi faktor XII, IX, X, XI, VIII, dan V
Nilai normal : > 30 detik (diatas 30 detik)
Patologi : < 30 detik (kurang dari 30 detik)
Alat dan Reagensia B. Reagensia :
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 60/78
g
A. Alat-alat :
1) Waterbath
2) Stopwatch3) Tabung Serologi
4) Tabung Centrifuge
5) Pipet 1 ml
6) Centrifuge
g
1)Calcium chloride 0.025
2)Barium Sulfat 0.2 M
3)Tromboplastin
Prosedur Kerja :
A Persiapan Pemeriksaan :
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 61/78
A. Persiapan Pemeriksaan :
1) Siapkan serum penderita dan serum control
2) Ambil darah penderita dan serum control
3) biarkan membeku pada suhu 37˚C sehingga keluar serumnya
4) Kemudian pusingkan dan pisahkan serumnya5) Buat larutan fibrinogen
6) Buatlah plasma seperti pemeriksaan PPT pada orang sehat
7) Tambahkan kurang lebih 10 ml larutan BaSO4 ke dalam tabung centrifuge dansupernatan jernih
8) supernatann dibuang, kemudian ke dalam tabung ini dimasukkan 2 ml plasm
tercampur benar dan tunggu 10 menit, kemudian putar sampai supernatannn9) supernatan dipisahkan ke dalam tabung lain
10) supernatan ini disebut absorbed plasma dan merupakan fibrinogen
11) Semua alat dan reagensia diinkubasi pada suhu 37˚C di waterbath
B. Kerja :
S b l ik di l i l dil k k ik t h
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 62/78
Sebelum pemeriksaan dimulai perlu dilakukan pemeriksaan terhaabsorbed plasma, apakah boleh digunakan atau tidak caranya yaitberikut :
1) Masukkan ke dalam tabung 0,1 ml absorbed plasma
2) Kemudian 0,1 tromboplastin, kemudian 0,1 ml CaCl sambil stopdijalankan
3) catat waktunya, bila lebih dari 1 menit maka absorbed plasma bdigunakan.
4) Kemudian dikerjakan pemeriksaan SPT sebagai berikut : Ke da
masukkan masing-masing 0,1 ml serum penderita, 0,1 ml absor0,1 ml tromboplastin, 0,1 ml CaCl. Pada waktu penambahan Cstopwatch dijalankan Waktu pembekuan dicatat, kerjakan pulacontrol
Nilai Normal
Waktu Trombin (TT)
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 63/78
Prinsip :
Pemeriksaan ini berdasarkan kenyataan bahwa trombin bisa menggunpalkan fibrinoge
yang telah diketahui ditambahkan pada plasma, waktu yang dibutuhkan untuk terjadin
pada jumlah dan kualitas fibrinogen.
Alat dan Reagensia
1) Trombin
2) Saline
3) Plasma control
4) Tabung
5) Pipet 1 ml6) Antikoagulen, Na citrate
Nilai normal :
Bila terjadi waktu pembekuan : 8-14 detik
Prosedur Kerja :
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 64/78
Prosedur Kerja :
1) Plasma penderita, plasma control dan trombin diinkubasi pada waterbath 37
2) Tempatkan untuk tabung pada waterbath 37oC dan isi masing-masing dengasaline
3) Tabung diisi dengan 0,1 ml plasma degiadasi produk (F.D.P)4) Masing-masing tabung diisi dengan plasma degradasi produk dengan suatu
5) Masukan 0,1 ml larutan trombin yang terdapat dalam serum
6) Kemudian jalankan stopwatch’Waktu terjadinya bekuan dicatat
7) Ulangi prosedur tersebut untuk tabung 2 plasma
8) Kerjakan juga untuk plasma pengontrol
9) Hasil control dan penderita kemudian dibandingkan
PEMERIKSAAN AGREGASI TROMBOSIT
Spesimen
B h ik b L d h di kk d l b i l h b
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 65/78
Bahan pemeriksaan berupa 9 mL darah yang dimasukkan dalam tabung sitrat yang telah ber
3,2% berasal dari subyek yang melakukan pemeriksaan kesehatan. Darah sitrat disentrifus un
platelet rich plasma (PRP) dan platelet poor plasma (PPP). Dan Reagen yang digunakan yaitu
(Adenosine Diphosphat).
Nilai Rujukan
Dewasa: agregasi dalam waktu 3 sampai 5 menit
Persiapan Sampel
Pasien dipuasakan 8-10 jam
Pasien sebaiknya tidak mengkonsumsi obat-obatan yang dapat mempengaruhi tes, sepert
kortikosteroid, aspirin, antihistamin, penisilin, dll sekurang-kurangnya 10 hari sebelum te
Metode Pemeriksaan
Metoda Turbidimetri
Alat dan Bahan
) Al t di k d l h t t Ch L t di i d i t d l
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 66/78
1) Alat yang digunakan adalah 1 set agregometer Chrono-Log yang terdiri dari agregometer model recorder model 707, komputer Windows-based PC with Pentium/compatible processor.
2) Kuvet Cat. No. P/N 312.
3) Stir Bar Cat. No. P/N 313.
4) Tabung sitrat vakum yang berisi 1 mL Na-sitrat 3,2%(Vaquette) digunakan untuk pemeriksaan
agregasi trombosit5) Tabung clot activator 7 mL (Vaquette) yang dipakai untuk pemeriksaan kimia klinik
6) Tabung K3EDTA (Vaquette) yang digunakan untuk pemeriksaan hematologi rutin
7) Sentrifus swing rotor untuk mendapatkan PRP dan PPP.
8) Pipet volumetrik 5 mL untuk melarutkan ADP.
9) Cup Eppendorf 500 μL untuk menyimpan larutan ADP.
10) Pipet otomatik 500 μL untuk memindahkan PRP dan PPP.
11) Pipet semiotomatik variable 10-100 μL untuk pengenceran reagen ADP.12) Stopwatch.
Prinsip Pemeriksaan
Trombosit mengalami aktivasi segera setelah penambahan agonis kemudian beridengan fibrinogen dan mengalami agregasi Absorban cahaya sampel yang terbac
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 67/78
dengan fibrinogen dan mengalami agregasi. Absorban cahaya sampel yang terbacberbanding lurus dengan agregasi trombosit. Jumlah dan rata-rata tergantung patrombosit terhadap penambahan agonist seperti ADP, yang dipengaruhi oleh banseperti suhu, jumlah trombosit, dan kecepatan pencampuran sampel dan reagenabsorban akan dimonitor dan digambarkan dalam bentuk grafik.
Cara Kerja
A. Pembuatan platelet rich plasma (PRP) dan platelet poor plasma (PPP).
1) Platelet Rich Plasma (PRP) yaitu Darah pasien sebanyak 9,0 mL dimasukan d vakum sitrat vaquette yang telah berisi 1 mL Na sitrat 3,2%. Darah tersebut d1000 rpm selama 15 menit atau 100 g selama 15 menit.
2) Plasma yang diperoleh adalah PRP, kemudian dipindahkan ke dalam penamp
Jumlah trombosit PRP harus 200.000-300.000/uL. Jika jumlah trombosit <10untuk melakukan setting optical baseline.
3) Platelet poor plasma (PPP)Sisa darah dalam tabung sitrat yang telah dipisahkdisentrifus lagi 3500 rpm selama 15 menit atau 2400 g selama 20 menit. Plasmdiperoleh adalah PPP, kemudian dimasukkan 500 μL ke dalam kuvet pemeriuntuk PPP adalah plasma dari pasien yang sama dengan PRP.
B. Pedoman pemeriksaan
1) Nyalakan alat, tunggu sampai suhu incubation wells pada alat mencapai suhu 37°C
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 68/78
1) Nyalakan alat, tunggu sampai suhu incubation wells pada alat mencapai suhu 37 C
dan PPP. Masukkan lima kuvet ke dalam lubang incubation wells, 4 kuvet diisi den
sebanyak 500 μL dan 1 kuvet sebagai blanko diisi dengan PPP sebanyak 500 μL.
2) Empat kuvet yang telah berisi 500 μL PRP dimasukkan sebutir magnet yang berfun
sebagai pengaduk.3) Kelima kuvet tersebut diinkubasi selama 3 menit pada suhu 37°C dalam incubation
kuvet yang telah berisi PPP dan stir bar dipindahkan ke lubang optical chamber, k
set switc ditekan ke angka 1. Setelah itu 4 kuvet yang berisi PRP secara berurutan d
lubang optical chamber PRP kemudian tombol stirrer dijalankan, inkubasi kelima
selama 3 menit.
4) Penetapan setting optical baseline, untuk menentukan batas atas transmisi 100 % dan batas bawah transmisi 0 % dengan PRP. Masukkan reagen ADP kedalam kuve
berisi PRP. Pada Layar Komputer akan tampak grafik dari keempat hasil agregasi t
dengan warna yang berbeda.
PEMERIKSAAN D-DIMER
Persyaratan & Jenis Sampel : 1.0 mLPlasma sitrat
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 69/78
y J p
Stabilitas Sampel : < 24 jam 2-8 °C , 4 minggu -20 °C
Metode : Immunometric Flow Through
Nilai Rujukan :
Hasil normal = negatif atau < 0.3 mg/L
Catatan :
Kriteria penolakan sampel : Beku ulang : mutlak.Pemisahan Plasma selama 15
4000 RPM.Plasma beku diencerkan dalam waterbath pada 37 °C selama 15 men
PROSEDUR
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 70/78
A. Metode
Pengukuran D-dimer dapat dilakukan dengan cara aglutinasi atau imunometrik meng
antibodi monoklonal spesifik terhadap D-dimer. Pada cara aglutinasi, plasma penderita ya
mengandung D-dimer direaksikan dengan partikel latex yang dilapisi antibodi monoklon
terhadap D-dimer membentuk gumpalan. Penentuan titer D-dimer dilakukan dengan me
plasma dengan buffer lalu mencampurnya dengan partikel latex. Titer D-dimer adalah pen
plasma tertinggi yang masih menunjukkan gumpalan.
Pengukuran secara imunometrik, plasma penderita yang mengandung D-dimer ditete
membran yang dilapisi antibodi monoklonal D-dimer dan kemudian ditambah konjugat y
mengandung partikel berwarna. Penentuan kadar D-dimer dilakukan dengan mengukur i
yang dihasilkan.
B. Spesimen
Spesimen yang diperlukan untuk pengukuran D-dimer adalah plasma citrat 9:1. Kump
vena dalm tabung bertutup biru (citrat). Cegah jangan sampai hemolisis; campur spesim
lembut dengan membolak-balikkan tabung secara perlahan, tabung jangan dikocok. Spe
dipusingkan selama 15 menit pada 4000 rpm. Pisahkan plasmanya.
PEMERIKSAAN TIMER FIBRINOGEN
Prinsip :
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 71/78
Pada plasma citrate dilakukan pengenceran secara dauble dilutiontiap pengenceran ditambahkan larutan trombin pengenceran tertmana masih terjadi bekuan dicatat.
Alat dan Reagen : 1) Waterbath
2) Trombin (merupakan ampul trombin dalam 0,5 ml salin)
3) Saline
4)Plasma control
5) Tabung serologi 10 x 75 mm, berlapis silicon
6)Pipet ukur 1 ml
7) Centrifuge
Bahan pemeriksaan : Plasma citrate
Cara Kerja:
1) Tempatkan 2 deret tabung masing-masing terdirir dari 10 buah dalam
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 72/78
2) Masing-masing tabung diisi dengan 0,5 ml plasma penderita pada tab
3) Campur dan pindahkan ke tabung 2 sebanyak 0,5 ml campur.
4)Begitu seterusnya sehingga sisa 0,5 ml dibuang.
5) Maka pengencerannya sebagai berikut :
1/1,1/2,1/4,1/8,1/16,1/32,1/64,1/128,1/256,1/512
6) Lakukan juga untuk plasma control
7) Semua tabung ditambahkan 0,1 ml larutan trombin sambil stopwatch
8) Diamkan dalam waterbath selama 15 menit
9) Dilihat pengenceran tertinggi yang masih terjadi bekuan dicatat.
Harga Normal :
Normal titer antara : 1/64 – 1/128
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 73/78
FIBRINOGEN DEGRADATION PRODUCT FDP)
Prinsip
Permukaan sel Staphylococcus aureus mengandung suatu clumping factor (suatumenggumpalkan). Bila dalam serum ditambahkan suspensi Staphylococcus auredapat dari darah dicampur dengan trombin, maka tampak gumpalan dari kumandengan jelas.
Alat dan Reagen :
1) Tabung reaksi
2) Pipet ukur 1 ml
3) Tris buffer
4) Larutan Fibrinogen
5) Staphylococcus reagen
6) Bahan pemeriksaan : Serum
Cara Kerja:
A Membuat larutan fibrinogen standard:
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 74/78
A. Membuat larutan fibrinogen standard:
1) Untuk pemakaian larutan stock standard direncanakan dengan perbandingan 1 : 100 (konsen
2) Tris buffer. Untuk pemakaian larutan tris buffer stock diencerkan dengan aquadest perbandin
mol/l, pH = 7,4)
3) Sediakan tabung 8 buah dan diisi sebagai berikut : (dalam ml)
4) Lakukan seperti no 1 dan 2 tetapi serum diganti dengan larutan fibrinogen standard, sehingg
kosentrasi fibrinogen sebagai berikut: 16,8,4,2,1,1/2,1/4.
5) Pada tabung 1 dan 2 tambahkan 0,05 ml Staphylococcus6) Goyangkan campuran ini 5 – 10 menit, setelah 30 menit lihat pengenceran tertinggi yang ma
gumpalan.
NO Blanko I II III IV V VI VII
1. Tris
buffer
0,1 - 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1
2. Serum - 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,10,1 dibuang
3. Pengence
r
- 1/1 ½ ¼ 1/8 1/16 1/32 1/64
Perhitungan:
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 75/78
Konsentrasi FDP = S X F
Keterangan:
S = Pengenceran tertinggi yang masih terjadi gumpalan pad
F = Pengenceran tertinggi yang masih terjadi gumpalan pad
fibrinogen
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 76/78
Cara Kerja:
1) Darah sitrat diputar pada 3000 rpm selama 10 menit
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 77/78
2) Encerkan 0,5 ml dengan 9 ml aquadest
3) Tambahkan 0,5 ml acetic acid 1%
4) Simpan pada suhu 4oC selama 30 menit supaya terjadi presifitasi dari fraksi Euglobu
5) Presifitas euglobulin dipisahkan dengan memutar 3000 rpm selama 5 menit6) Supernatan dibuang sampai habis, tabung dibalik pada kertas saring untuk menghil
cairan.
7) Tambahkan 0,5 ml larutan borate salin buffer
8) Letakkan pada waterbath 37oC, aduk dengan pengaduk pelan-pelan 5 – 10 menit
9) Tambahkan 0,5 ml CaCl dan stopwatch dijalankan
10) Waktu terjadinya bekuan dicatat11) Bekuan diperiksa apakah ada tanda-tanda lisis dan waktu yang diperlukan untuk lisi
12) Pemeriksaan ini selalu disertai control.
Harga Normal : Lisis total akan terjadi dalam waktu 2 jam.
Mohon maaf jika
8/10/2019 PEMERIKSAAN HEMOSTASIS klp 3.pptx
http://slidepdf.com/reader/full/pemeriksaan-hemostasis-klp-3pptx 78/78
ada kata – kata yang tidak berkena
hati anda
sekian wassalamualaikum Wr . W
Recommended