Virologia geral - Métodos de estudo e diagnóstico viral

Métodos de estudo Métodos de estudo e e

diagnóstico viraldiagnóstico viral

Profa. Dra Wilia Diederichsen de BritoProfa. Dra Wilia Diederichsen de BritoIPTSP / UFGIPTSP / UFG

Finalidade:Finalidade:

Estabelecer o diagnóstico de uma infecçãoEstabelecer o diagnóstico de uma infecção

Vigilância epidemiológicaVigilância epidemiológica

Certificação status sanitárioCertificação status sanitário

Monitoramento de resposta vacinalMonitoramento de resposta vacinal

Pesquisa do vírusPesquisa do vírus

Pesquisa de propriedades biológicas viraisPesquisa de propriedades biológicas virais

Pesquisa de antígenos viraisPesquisa de antígenos virais

Pesquisa do ácido nucléico viralPesquisa do ácido nucléico viral

Pesquisa de anticorpos viraisPesquisa de anticorpos virais

AMOSTRA

EXAMEDIRETO

ISOLAMENTO

Pesquisa vírus

Pesquisa prop. biológicas

PesquisaAc nucléico

Animais

Ovos embrionados

Cultura celular

PesquisaAc

EXAMEINDIRETO

Pesquisa Ag

Diagnóstico Diagnóstico

viralviralPartícula

viral

adenovírus vírus ebolaherpesvírus

MICROSCOPIA ELETRONICA

Diagnóstico Diagnóstico

viralviralPartícula

viralIMUNOMICROSCOPIA

ELETRONICA

Diagnóstico Diagnóstico

viralviral

Pesquisaprop. biológicas

PROVAS SOROLÓGICAS

HA

Diagnóstico Diagnóstico

viralviral

PesquisaAg

PROVAS SOROLÓGICAS

IF

Diagnóstico Diagnóstico

viralviralPesquisa

Ag

PROVAS SOROLÓGICAS

EIE

Diagnóstico Diagnóstico

viralviralPesquisaAg PROVAS SOROLÓGICAS

IPX

BHV-1HIQ

Diagnóstico Diagnóstico

viralviral

PesquisaAc. nucléico

PROVAS MOLECULARES

EGPA

Diagnóstico Diagnóstico

viralviralPesquisa

Ácido nucleicoviral

PROVAS MOLECULARES

PCR

Diagnóstico Diagnóstico viralviral

Determina a quantidade inicial de um produto (DNA/RNA) através Determina a quantidade inicial de um produto (DNA/RNA) através do comportamento da cinética de amplificação das diferentes do comportamento da cinética de amplificação das diferentes fases ao longo dos ciclos de uma PCR, fases ao longo dos ciclos de uma PCR, ou sejaou seja, detecta e , detecta e quantifica, em tempo real, ácidos nucléicos enquanto são quantifica, em tempo real, ácidos nucléicos enquanto são amplificados, sem a necessidade de realizar purificação e amplificados, sem a necessidade de realizar purificação e análises adicionais.análises adicionais.

Pesquisa Ácido nucleico

viralPROVAS MOLECULARES

Real time-PCR

Para se detectar o aumento Para se detectar o aumento de produto de uma PCR ao de produto de uma PCR ao longo de cada ciclo, é preciso longo de cada ciclo, é preciso marcar o DNA amplificado marcar o DNA amplificado com algum tipo de molécula com algum tipo de molécula fluorescente fluorescente

SYBR TM Green - liga-se a SYBR TM Green - liga-se a DNA fita duplaDNA fita dupla

TaqMan TMTaqMan TM

http://www.genomediagnostics.co.in/real-time-pcr.htm

Diagnóstico Diagnóstico

viralviral

Hibridização “in situ”

Diagnóstico Diagnóstico

viralviral

REAAnálise restrição por

endonucleases

AMOSTRA

EXAMEDIRETO

ISOLAMENTO

Pesquisa vírus

Pesquisa prop. biológicas

PesquisaAc nucléico

Animais

Ovos embrionados

Cultura celular

PesquisaAc

EXAMEINDIRETO

Pesquisa Ag

Diagnóstico Diagnóstico

viralviral

EIEAc

IDGAAc

Diagnóstico Diagnóstico

viralviral

SNAc

Diagnóstico Diagnóstico

viralviral

FCAc

RIEAc

AMOSTRA

EXAMEDIRETO

ISOLAMENTO

Pesquisa vírus

Pesquisa prop. biológicas

PesquisaAc nucléico

Animais

Ovos embrionados

Cultura celular

PesquisaAc

EXAMEINDIRETO

Pesquisa Ag

Diagnóstico Diagnóstico

viralviralAMOSTRA ISOLAMENTO

Animais

Diagnóstico Diagnóstico

viralviralAnimais Vias de inoculação

Diagnóstico Diagnóstico

viralviralAnimais Vias de inoculação

Diagnóstico Diagnóstico

viralviralEfeitos replicação viral em animais

Diagnóstico Diagnóstico

viralviralEfeitos replicação viral em animais

Diagnóstico Diagnóstico

viralviral

ISOLAMENTO

Ovos embrionados

Diagnóstico Diagnóstico

viralviralISOLAMENTO Ovos

embrionados

Diagnóstico Diagnóstico

viralviralOvos

embrionadosefeitos

PocksMCA

Diagnóstico Diagnóstico

viralviralISOLAMENTO Cultura

celular

Diagnóstico Diagnóstico

viralviralCultura celular

ECP

Diagnóstico Diagnóstico

viralviralCultura celular

ECP

PI3

Adenovirus

Rotavírus

AMOSTRA

EXAMEDIRETO

ISOLAMENTO

Pesquisa vírus

Pesquisa prop. biológicas

PesquisaAc nucléico

Animais

Ovos embrionados

Cultura celular

PesquisaAc

EXAMEINDIRETO

Pesquisa Ag IDENTIFICAÇÃO