156

Biochemoinformatics: integrative computational tools at the

Embed Size (px)

Citation preview

�

�

����������� ����������� ���������� ��� �������� ����������� ������������������� ����������

�

�

��� ���� ��� ���� �

�

��� ��!"� #$�%��&'(�)�*+,+��

�

����������������

��-�.�����/�������0�$1����� ����2�

�

�

�

���� �������� �� ���� ������ ���� ���� ������ ���� ��� ���� �������������� �������� ������ ����� ���� ������ ��� ������ ��� ���������� ��� �����������������!��������������� ����������"�����!����#�

�

��

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�������������������������������������� ������$$������ ���������������%#�#�

�

�

�

�

&�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

�

'��������������������#��

�

(�

�

� !�3����������� �

�

!����� ��� ���� &�"�� �����)"� "��� ������ �"� ���� ������� ��� ���� �"� *�#�+���� ,������-� ��� ���.�� $��� ���� "/�����0� 1��� ��� $����� ��� �1����� ��� �""� ������� .�$�����&��)���$��� �����������������������/�����"����&������-�����1���$���������.�$���#�2��������$��3��"����"������/�����������4�

*��$�.�� &�"�� ����5�� �"�� ����� � "�� ��$����� 1��� �/��� ������ ����� "������� 1��� ��� ����� $������� �1������ ����� $��� �1����� ������� "� ���"� ������� ��"�!���-������������� "�����$�����#�2���$����������������� �������������6�������"������6��������������������###� .��/������"������������-��� ���������"�� $�������""��"����-�1���$���������������#����������"������1��������������������� �(3-� 1��� ��"���� ������ �� ����7� '" ���-� '"����-� '���"-� '���-� �����-�������-�8�����-�����-�+����-�+����-������-�����-�,�������-�,����-�,���"-�,�����-�9�"��-�9:��� ���&��/�� �"� ���� $� "�� 1���� $����-� &�� (*�-�;���-�!��-�<�&###� � ������"��1����/������� "�����$��� ����#�=�$������&����������� "��&�������"0���#�%.�1����1������>"���� $�������/����&���������"�$ "-�$��3�.��1����"����������"�$�������������������������� �""�����"�#�'���&���.��������������&����&�""�1��������������"����������������"���(���������4���� .��/������������� ���?� ��$��"� �� !��&����� @������ �� �� ������ � � ������ �� ������������AB���*�&��C#�2����"����-� 6��&������1���1���������������������$������"������$�������B������"���;"&�-�1��������1������1�����������������.����������������� ��� �1����� ��� ����-� �� ���� �1�D� .�� ������ �� 1��� ��� ��� &��� $����� ������������ ����+������(3�������� "���.����"��&��#�

��� .� &�"�� �����)"� "��� ������ �� ����� "�� ����� ��� ����� ��"� "� ������-�����0����$���"��$����������$����������������$���'" ���-�+���-�+����������-����� ���-�,��-�,���-�,D���-�9��"�-������� �%���#�2���$������ ������������6�����$��3��������"��������"���-��������������������"�����������D�����������)����������-�E�������FG#�9��$�����$��� "������"���������"� ���7�"/=�����"�+�����1����HI������1����������(���6�-�����4�����"�*�#����������D������

(�

��� .��������������4�#������$��"������������ .��$�����&��-���������� �"�����D��#�

��1� �$�������"����������C���""����F�,��������-����-�����-�����-�,��-������+���$�"���&���"������D�1����/��������������������������$�������������&#������ ��0���� ���������$���������$��$����)&���1�����$������/�����/�$������� ������ "�����"����4����� �1��� 6�� �� ���1������6��$�1���###� ������ "���� "����?�������7�8�-���$�-����-�9���-�!��-�����-����$�� �9��"�#�="�$��$������1������&�����������6��.�������4�

J���D����� .���$��&�����$���������������$�"� ��������!����-�����2������-���+��������+���!�������D�#�;��1���������#�%�����$�1�����$��������������� �����$K�-���"����������1���������>����6��#�=�������&��&������$������"�$��$?���������������������L�����$��1��������������-����L����$�����������$�����"�����F���$�$L-�1�����$���1����������1���$�������$���M���L�����L�����-�&��������>��&�������������"������$��&������������$"����""�4���� .������ ��M���������1�D���"�������!�"�-�1����������1���������$����������?�� �� ��� ��� ��� �� ��� �����$�������� ������������B� $��� ������� �>������������ ���$����������"��"�#�,�"���$��������� .�$�"������� "��,��-��������1������$���&�����������"�����������4�

9��$������� ����������������������������������$����"��������1��������� ���L#� '��1��� ��� ���� ��$���� �D� 1��� ������ ���� �����"���� ���D��� �� �������� ��� $����� ����� 1��� ����� �"��� �L�� �""L� ��� "�� ���"���� �D��� �L���$������-� "�� 1��� �D� ��� $����� ���� ��� 1����������� ��� ���.� $��� �1�D� &����������� .�� �����.�� �� 1��� �"�&�� &������� ������� $���� ������ �$��������� ���&��������"��1��������������������������������$�.#�N��L������������ ��D����$������&�"&������L�F�!�������$����-�"���������������L����?"����������"������"���������1���������"�����&�������&����������"��1���������������"��������1���1����#������#�

�� $�"� ���"� ��� ��(��� "�� $������� �.�� �$������� ��� �����#� 2�"�� %���4�'1��""��>���$�������$���"��1��"������&���������� ����������(��������������$�����������($"�����"O��&�������������#�J� ��.��$����F��.-����6����$��1���

(�

��?������/=�$�������������&�� �"����.���&�������5���(D�1������������������(����1�D�@�7�*�A#�'�;�����&��4��

�

E��� ������������������ ��������������������������� ������������������

�

�

(�

Pag.

'��� ��� xvii

"������������� ����� xix

' ���%�4�%���������� 1

�� �����%-,�4�%���� ����� ���� ������������� ���������� 3

�#P#P���"�&������������� �����"������� 3

�#P#H�=����������������������������������� 5

�� �����%-*�4� �������� ���� ��� 7

�#H#P�*�������������$�� 7

�#H#H�%������������������� 10

������ �!����������� � ���� 11

����������������������������� � ���� 13

�#H#Q�*�������������� 15

�� �����%-5�4� ����������� ���� ��� 18

�#Q#P�*�������������$�� 18

�#Q#H�%������������������� 19

��"��� �#��������������������������������������� 19

��"�����$� �� �������� 23

��"���"�%���������������� 27

�#Q#Q�*�������������� 29

�� �����%-6�4� ������������ ���� ��� 33

�#R#P�*�������������$�� 33

�#R#H�%������������������� 35

�#R#Q�*�������������� 37

' ���%%�7���8�������� 41

' ���%%%�4��������� ������������ 45

' ���%9�7�'����� ����� 55

�� �����%9-,�4������ �� ���������� �������������� � �� ���������������������������� ����������������������� ������������ ���� 57

�� �����%9-*�4�(�'�������� ������� ��������������������������������������������� 69

�

�

�� �����%9-5�4��'#!�$������� ����� ��� �������� � ������� ������������������� ��� 75

�� �����%9-6�4�"�� �4� ���� ���� ������������������� � ������� 81

�� �����%9-:�4�!����� ���������������������������� � ��������������������'� � ������� 105

�� �����%9-;�4������ ��������������������� ��������� 123

' ���9�4����������� 147

' ���9%�4����������� 151

�

�

�

�����������������������

(&�

� '��� ��� �

�

�����������"���"��$��&��������������������$�������($"���������������������������""����������($����������:���"����� ���������������"���"�������$"�������� ������������ "��������� �������������� ���������������#� ��� $����"��-� ���� �$$"����� ��� �������&�� �$$������� �� ����"� �"���� ���� ����� ���&���� �� ��&��� ����6��� �$��� ��� ���� ���������� �������"�$�� ������� �"���"����������������������������$��M�������������-������������������#��

S��� ���� &���-� ���� ���� � 6��&�� ��� ���� $������� ������ ���� ������&�"�$�������������������� ���� ���"�� ����� ���� ���� ��� ���� ��&������������������&���$$������� ��� "��� �����#����������������� �����&���� �� �(�$����#� ���� ����� $���� $��&���� ��� �&��&��� ��� ������� ������� �� �������&�� �����"��������������� �����������������������������&�� �������������������� �������-� ����"�-� ���� ����"� �$��� ������� �� ���""� ��"��"��-� ���� �"���"� �$��� ������� �� $������� ��� �����$���� ��"�&���-� ���� ����$������$�"� �$���������� �����������������#�������(�� ����$����� ������������ $������ � 6��&��� $������� ���� ������ ���� ���� ����"��� � �����-����$��&�"�#��������"�������$�������$"�������(�$� "�������������&������"������������� �����-� ����������"���������&��-���������������"� "��������"�&�������������-����$��&�"�#��

�

((�

� "������������� ����� �

� �

�

• ������,-����D�)%������-�2������T-�S�� ���,-�&����������+-�������%-�,�������+7������ �� ���������� �������������� � �� ��������������� ����������������������� ������������ ���#�! ��&���'����!�����HIIU-�:7�VWQ)VVH�

�

• ���D�)%������-�;$�����:��-�,�������+7�(�'�������� ������� �������������������������������#�(���� �������HIIW-�**7�PVXH)PVXQ�

�

• ����)%������-������;-�;$������-�,�������+7��'#!�$������� ����� ��� �������� � ������� ���� ��#�(���� �������HIPI-�*;7�XYU)XYW�

��

• C��"�*-�����)%������-�,�������+7�"�� �4� ����!���� ��������%��������'� � ������#�'������'���(����HIPP-�;<*����$������

�

• ����)%������-�,�������+7�!����� ���������������������������� � ������� � ������#�)*�� ��+�����, ��'������&*�����HIPI���� �������

�

• ����)%������-�,�������+7������ ��������������������� ��������#�, ��,������&����HIPI���� �������

�

P� �

�

�

�

�

�� ' ���%�7�%����������

�

Introduction

Q� �

�� �����%-,�7�%���� ����� ���� ������������� ����������

�

%-,-,������ ������������������� ����������

�����"���������"���� �����"���������"�� ������������������"�������������������������������� ������""����� ����$������������""�"�&�"������������� ��� "�������&������������������"���������������������������"M��������#� 2���� ������ ��������� ���� �������� ��� ���� &���� ���� ����������������"�����"������&��������� ���� ��$� "������������������ �������������������$������"������������"���$��������������$���������"��������#��

*������� ��&�� �������� ���"� ��� �������$�� �$��� ��� ������$�$�"������ ���� ����-� ��������� ��������� $��� �� ������ ���� ����� ��� �����"��������� �� ������ ���������� ���� $�&���� ��$�������� ��� ������ "��:��� ���������$���� �������� ��� ��������� "�&�"�#� ���&���"�� ��������� ����� ���������"����������������������������������� ��������������� ���� ����� �����������������$�����������������������������������$�� "������������ 6��&������($�������""���$$"�������������������������������������������������#�

�������������������$���-�������"����"������1���������������#�S����������� � ���&� "�� ������� ��� ���� ������� ������ ��&���"� �$������ ������&��������"� �������������F� '��� ������ ���� ������ ��"�������� ����������� ������F� ��� ���� �$��� ������� ������ ���� ���� �"��������F� S����"���������� �"�$�������������������� �����"� �"���"� ���&���F�S����������������������������������������������""���������������������"���������������""�"����������������$"����������������������$�������F�'������������� ������� ����"�� ��"����� ���� ���� ��&�"�$����� ��� ���� ������� ��� �� ��$��� "�� ��������������� ���� ��� ���������F�9������� ������1�������� �� ����� ���������� ������ ���� ��� ����� �&�"&��� ��������� ��$"���� ���� �($�������"�$��������� ��� ����� �&��� ��������� �����"� ������� ����� ���� �"���� ����������� ���""� ��"��"��-� ����� '*9� ���� '�9� ��� ��"�$"�� $������� ����$�������-� ����� �""�� ��� ������� ���� ������-� ����� ��&���"� $������$��� �������������$�$�"�����-����������#�

Introduction

R�

S�������������� ���� �������� ����$�� "������ �� ���-� �$��� ��������� �����������$�����"�������������""�����������-� ���������$"������"������� ���� ������ ���� ������� ��� ���� ���"�� �&�"&��� ��$"��� ���� �������&���$$�������������1�����@PA#�2���������������&�������-�$������"���"�������&��������"� $���������� ����� ������"���� �� ��� ������� ������:� ����� $������������"������������������������� ������&������������� ���"��������#����������������������������"��$����� ������������������-��������"��������:���������� ����������������������������"���������������"����@HA-�������"��������"���������� �������#�

���� ���"� ������ ��� ���� "���� ������� ��������� ���� ��������� �����&�"����� �������� ��$"���� ������� ���� ����#� %������� �"���� �� ���������������"� ����� ����� �"������""��$$������� ������������"���$�������&��-� �������������������������"����������-��������� �����$$"����������������"����� ���� E���G� ����� ��"����� ��� ���������"� ���� ��$�������"� ���"�� @QA#�'������������$������"����$"����� ������� ���������-� ��������� ��� �������$���"M����� ��� ��"�&���� ������� �� �����"� ������ ���� �������������������"������$$"��������������"����@RA#���� ���������������&���$$���������������� �"�������������������$��������&�������������"�� ��������-��������$"������������������������������������"�&�"�#�8����������������������������������-�����������������"��������������-��������-�����$������"�����������������������&���������$���������"��"�&�"#��

� ��������&���������������&�������($�������"���$"���-��"����������� ���� ��&�"�$����� ��� ������� �������&�� :���"����) ����� ��$�������"��$$����������� ���� ������:�� $��� "�� ���� �"������ $������� ��� �����"������7� ���� ���� "������� ��� �� ��$�������"� ����"� ��� �� ��$"���� "&����������� ��� �""� "�&�"�� ��� �����M����� ��� ����� ���� ������� ��� ���� �����-���&��������"��������"�$����� �������� ��$���������������������$���"������$������"�����$��$����#�'�&�����������������&���"�������""�����������&�"�$����� ��� ��$"�� ����"�� ���� ������ ���� �"� ���� ����"� �����������$��������@UA� �������$�����������������������""�"����� ��������"���&�"� "����$������$�����@WA#�

�

Introduction

U� �

�%-,-*�$����������������� � ������ �����

*���� ���&��� ����� ���� ������������ ��� ���� ��"�&���� ��������� ����� �&���������� ������� �� ���� ��$� ��� ���� :���"����� ����� ��� �������������#� 8���� ��� �$$"��� $���� ��� &��-� ���� ���������� �� �"���������������� ���������������&����@VA-���$�������������1������($����������"�$"��������"�������$"���#��

'"������� ���� �M�� ��� ���� "�� ����� �������� ��� ��� �($������""�������������-�������$�������"��$������&�"� "�������������������-������������-� �������� ������"����� ������������������#� ��� ���-���"�� ���� ��������1���������� ����������������������������������$��$������-� �����������������"�����������������������������������"���������������"������������������������������#�����-���������� �����&�����"���� ������1�������������������-���������"�����"������������������&�����������������������&����� ���� ���� ��� ��� ��� ���� ����� ����� ��&�� ��� �� ��������� ��� ���� ���#�'�����"�-� ����� ���� ���� ��$�������� ����� � ������ �� ��������� ����"������($�������"� ������-� ����������� ���� �� ����� ��� ���&�� ���� "�&�"� ������������������������������������ ����������������������������$"�(����������������)������ 1�������#� ; &���"�� ���� �������� �������� ��� ���� $������ �""��������� ����"�$"�����������&��������������������$������������������#�

����������$��-���&���"����$���""���&����� ����:�����������������&�������� ��������"#�8��������""-������������� �������"M��� ���$�����������������"��� $�����"�� ��� ����� ��$��� "�#� ����� ���� �����&��� ������:�� ������� ���� ������ ������� ��� ����� ����� ��� �� ������� �� ������ ��� ���� "���"�:�� ������� ���� ����� �"������� ������ ������#� 8��""�-� ���� ���&��� �������������� ��$�������������&���"M������������������������"�&�"����"�������� �� ���"�� $��������-� ���� �$��� ��$������������ ���� ����� �$$��$�������$���������������������������������@YA#������� ��$$"�����!��������������(��$"����������"��������������$"��������������$��"M���&���"M��������"������������������������������� �"�����������$����%9-5�����������������"��#�

;��������������� ���"���������$����������������������������������������� ���� $�������� ������ ���� ��������� ������� �&�"&��-� ���� ���������

Introduction

W�

�&��� ����� ���� ����� �������� ����-� ��� �&��� �����&��� $�� "���#� %��������������� ��&�� $��$����� ����� ���� ����"�� �� ���� ���� ����� ��� �����"������� ������ ������ @XA#���� ��"&�� ����$�� "����������� ������ ������ �������������������:�������������������$�������������������������"��� �����������������������(�������#�������� �����$"����� �����������������$$"�������� ������� �����""��� &�� �"����-� ������������ ��� $����"�� ������� ��1��������� ��"�&���� ��� �������� ��"�� ����� �������� �����"�� �������� ������� �����������""�� �����M��� ���� ���"�� ������� ����"����� ���� ��&�� �"������$��&������ �������������$������������������@PIA��&��������������"�&�"�����"�����"�����"������M������$�������$�������������$������"���#�8�����������������&��� �� ���� ��"�-� ":�� �;� ������ ;���"����� @PPA-� ������ ��&�� ������ ����� ��� ���� �&������ �� ���� ������ ������ ��� ���� ����� ���� ����� �������� ��������������� ���� ������� ��� ����� ������ ��� ����� $������� �$$"������ @PHA#������� � �$$"����� 8�!� �� �� ����� �(��$"�� ��� �� ���"� �������� ��� $��&��� ���������"� "��������� ��� �""� �($�������""�� ���������� ���������� ������"����$������������!������*�������:��������$�����C#H�����������������"��#�

S�"��������"����������������������������������&��������������������� ���� ����-� ���$$�������� ���� ������ ����� �&��� �� $����� �������"��$$������� ��&�� ���� ���� � "�� ��� �� ���"����� �-� ���� ������-� ���������������� ��� ���� ������ ������ �� ���� ����� ���&���� $������ @PQA#� 2���&��-������� ������ �($��������������$����� �������������������� ��������������������� ���� ��"����-� �� ��������� ��$"�(�����)������� �� ��&��"��-� �������1������������$"�(��$$�����������������"���#�������&�"�$������������������ �������"����� ��� �&��-� ��� ����� ���-� ���� ��$�� ��� ���)���"� "��$��6������������� ���� ��������� �������:����� ":�"�� ��� �� ��&��"��������� ��������#�

9�����:) ����� �$$���������&�� �(����&�"��$��&��� ����� ��"��� ��� �������)"�&�"� ���"���� @PRA� ���-� ���� ������-� ���� ���� ��� E���""����G� ��� �"��������� @PUA� � "�� �����:�� ���� ����������� �� ���� ��$�������"� ���"���� �����""� �������� :���"����� ����� ���� ���� $��$����#� ���������-� ��������������"� ����� �(������� ���� ������� ��� ���� ����-� ����� ������ ��� �������M��� �� �"�( "�� ��� �$��� ����������� ����� ���� ����)����� ����

Introduction

V� �

�����������"���������� ���������#�

��� �������-� ��� ��"�� ������ ����� ���� ��$"�(��� ��� �� "&��� �������������� �� �($����� ��� �� ���"�� ��������������� $����"-� "����-� ���� ��"�����&���-� ��� �������&�� �$$������� ����� ��� �� ��&�"�$��� ������#� S���� ���������� ����� ��������� ������� ����� ������� ��� ���� ����� ������� ������ ������ ���-� ���� ����� ����"�� ���� �� ���������""�� ��������� ��"�� ���� �:������� ����� �""� ����� ��� �� �������"�� �������#� 8����������-� ��������������� ����� �� �($����� ��� ����� �$$������ ��� ���� �������� "�&�"-����������������"������ ��$���&��������������"�������$�������@PWA#�,�����(��$"������������"����������������$$�������� ����������������"��������������� �""� ������� ��� �����"� ������ ��� ��������� �(������ @PV)HPA#�'"�������� &��-� ���� ���� $��$���� ��� ���� ������ �� ��� ���� ���� ��� ���� $���� ������������������������ ����������$��&����������������������"���������� ������������&������������"����������"� �"����������������&���#�

Introduction

Y�

�� �����%-*�4� �������� ���� ���

�

%-*-,���������� ��������

'�� �"����� ������ ��� ��� ��� ��"��"��� ���� �($����� ��� $�$�"���� ����&��������"��$�������������� ���PIZPII�$�����������"���@HHA#�2���&��-��� �����"� �����-� ���� �"���""�� ��"�&���� ������� ��� ���� �$��� �����������������������"�����""���"��"������ �"���"�������������������������� ����"�� ����� ���� � "�� ��� ����������� ����� �"���"� �"������� ��"&��� �������#�*�������� �����$�����&�� ��������� �������� ���� ���������� ��������"��$������$������"���"� �������-��������������������&���������������� ��� ������� PIZWI���"��"��� ��������� ��"�� ���������� "���� ����� ������������ ��������� ����� ��������� @HQA#�'������"� �"����-� ���� ��� ���� �$��:/����"�)��)�&���������"� ��&�"� "���@HRA-������������������ �"���""����"�&������"��"��� �� ��&���"� ������� �����������#�'"������� ������ ���� ���� ��������"���� ���-� ���� ���"��� �� ����� ��"�� ��&���"� ���������� ��� ��"��"��� ��&�� ��������""�����:������������������ ����� ������� ������ ���""���"��"���$������� ������ �����������������������"�������������������������������@HUA#�������$���M���������������������������M�������������$������������������������$���������������"����������&������6������������"�����($"����#�

�

�������� ��$�������������� ���� ��"������$� ������� �������������������"� �$����"���� "���� ���� ���� ������� ������ ��� ����"� �$��� ����� ���� ��$��� �� ��$������ �����$�������������� �"���"���"��"��#�=(������������@HWA#�

Introduction

X� �

��������"��$�������� ��������������������������M�������������� ��������"���($"����� ����������������$$��������"�� ������&���������&��������� ��� �M�#� ��� ���� ���&���� $�����-� ���� ������-� ��"��"��� ���� ������$��������"�$��$�������������� ��"������������������������� ��������������� �$$��$����� $������ ��� ���� �$��#� ��������M����� ��� ������"��"��� �� ��������� ���$� �� ���� $�����-� ���� �� �� ���&��� �� ��$"����� ��&���"� ��$��� �������$����� ����������"��"�����������"�����$��������"���������#��

;��)��������"�����$������$������$���$��$�������������"��"���������"��&�"�����������������������"����$��� "�#�,�"��"��������-���� ��������������� �����������������$�������������")������$��������������������1��������"� "��� �"���������������$��������������������������""���� ���������"��������$��������������":��������� �&������������$��:�O����"�)��)�&�#������"�&�"�� �&�-����)��������"�����$��������� ��������������$�"�����������"��"���&��� �� ���������� �����������������������&��#�%� ����������������"�������������� �����$������"��"��� "��:������������� ����������@HVA���"�������$���) ������������������������"��"������������������������""��������$������������������������ �������������������������$����@HYA#�8��""�-������)��������"�����$������$������������"���"��"���������������� ���� ��"��&�� $������ ��� ������ ��� ��������� �� �����)��������"� �$��#�'���$���"� �"���� ���������$�������"���������$�������$�������������""������������ �����"������ ������� ����$����� ���� ����$����"��� $��$����� ��� ������"���@HXA#���

������� ������ ������"� ����$����-� ������ ��������"� �$$������� ��&�� �����������""���$$"������������$$��������������"��$��� ��"��:������������� �"������� ������ $��������� ����� ��� ��$�����#� �����&����$"�������������"����������� ���$$"������$"����"��-�":������&����""������������� ��������""� �����������"�� ����-��""� ��&��"���������� "�&�"�������������"���$"�(��-��$���������������������:�"�&�"�@QIA#����������M�������� ������ �������� ���������� �� �� ��$"�)��)��$"�(� �������� �""� �""�����������������"������������������������M��������"�""����$�����������-����&��� ��� ���� ���� ���� ������ ��� ���� ��$������ @QPA#� 8����������-� �����$$"����� ��� ��������) ����� "���������������"����� ���� ���� �������""��

Introduction

PI�

�$$"��� ��� ���� ��$$��� ��� "����� ����"� ���� ����� @QHA#� 2���&��-� �����$���M���� �&�-�����$���"��� ��������������������$�������������"�������������������� �������$����������������������&���"��������"������$$"�������"�����@QQA#�

�����������������&�� ����������""����������$�$�"��������������������������"��$������$������"� �"���"��������#�8������������������"��"���������""��$���������"&����������-���������$���������������������"�������&�������� �"���"� �������-� �����������"������� ��� ��� ��$������� ������������ ��������"� �$��M����� �� ���� ����� ���&���� $������ @QRA#� *��$��� ���������� ��� � ���� QI[� �� ���� ��� ��� ��� ������ ����� ��� ������"� $������� ��"��"� ��� $��"��"� ������� �� ���� ������ @QUA-� ����� ���� ��""� ��������������������� �� ���� ����� ���&���� $������ ���� ����� ����� ���� ":�"�� ��� ����&��"��������������&�����-�":��������"��������������"�������������"�$��������""� �� ������� @QWA� �������� ���� �$$"����� ��� ���� �$��&������� ����"����� �����"� $��������� @HWA#� ���� ������ ����$� �� ��$����� �� ���������������� �������� ��� ��� �� ���� $���������"� �������� ���� �����$����� 6��&��-��������������"�����������������������"�"�������&����$���$������#������� �������� ��&�"� ����"� ������� ���� �� ���������� ��� ������"�$��������������������"��"��#�����������������������:�����������"�����������������"���������"���������������������������$�@HXA#�

�

%-*-*���������������� ����

� ������ ���� ��������� :������� ���� ����� ������� ���������� ��"�����������������"��$����������� �&�-� ����""����������$�����������������������������"�����������������������&�� ��������������������������$��$����#�����������-�����������������������"����������������"������������ ����������$�����-� ���� ����� ��� ����� �"��� ��&�� &�"�� "�� ����� ��"����� ��� �������������� ������ ��"��"��� ���� :����� ��� ��&�� �&��� �$��� �"���"��������#� S�� �""� ���� �&�� �� ���� �&��&��� ��� ���� ���� ���� ��$��� �����$���������������"�����$������"���"��������"�&�����������$��$����-� �����������-�$"�������"�" ������������������������"�" �����#�

Introduction

PP� �

�#H#H#P������"�" ������

!"��� ����"� " ������ ���� �""������ ��� ����"�� ���� ������������������� ��"����� ��� ����� ������ $��$������ ��� ���:����� ����#� ����� �������������� �����������������������"��������������������������$���$��$����� ��� ���� ��"��"��� ����� ������ �""� ��&�� ������ ����������� �������"�""� ����� �($����� ��1��������#� �������� ����� ��� ������ �""������ ���� ����$��&�� ������� ��� ����� ���&���-� ��� ��$�������""�� ���� �� ����)":����"��"��� $��$�����-� ��� ������� $������� ������� ��������� � ���"��"��-�$������-� ��M����-� ���$������ ��� $������� "����� ��������� ����""� ����������������� �����������$��������������������@QVA#�

�������������"�" ���������� �"������������$������$��������&����"��"���������"���������������������������"���������������$��$�����-����� ������-� ��&��� ������� ���� �� $������ ������� ��� �� ���"�� ��� �������� ":��:�����������$�����)��$"��� ���$����� @QYA����$������ ���� ���) "���� ������@QXA#���������������������������"�����������������������������" ������������($"�������� ������������������"��$�������������-������������&���������������"��"��� ����� ���� ������� $��$����� ������� ����� ��� �����"� ����$�������"� :���"����� @RIA#�,����&��-� ��� ������ $���"��� ��� ��$������ �����"��� ���� $������ ��� �� $������� ���� ��� ��������� ���� $������"� ��$�� ��� �����������" �����@RPA#��

;�� ���� ������ ����-� �&����� ����"� " ������ ���� ����� ��� ���� ��$������� ��� ���� ����"� �$��� �� ������ ��� ��$������ ���� ���� ��1���������������#� ��� �� ������"� " �����-� ���� ������-� ��$������ �"�������������� ��� �� ������ �����"�� ���� ���� ������� ��� ��"����� �������"�����$�� �� ��������� $������� �� ������ ��� ��(�M�� �&������ ��"�� �&�������&���"� $��$������ ��� �������� @RHA#�'�� ���� ����"� �$��� �� ��� ����� ���� �������������($���������������-���&�������""���$�������������"�" ��������"�����:����������������������&����$��������������������������"����������������� ������ ����-� ���� ������-� ����� ��� ������"� $������� ��������� @RQA#�9���������������������������������������&���������������"� " ��������� ������&�"�$������������"�����"�������������������������������������&�������������"�@RRA-��"��������������������$�) ������������"�����@RUA#�

Introduction

PH�

�

�

%������������������������������������������"�" ����������#�=(������������@RWA#�

�

�������" ���������������������������������""���������$��������������������������""���������������""���&�����������"��$����������� ��������� ������"� �������#�'"������� ������ ���� ��M���� ��� ������"� ��$$"���� ������� " �����-� ��� ���"���� ������� ����� ���� �&��"�$� ������� ����� �� ���""-����������������������������� "������&����� ��������������������"��$���@RVA#� ����$������� ����� ������"� $��$����-� ��&���"� ����� ��"��"�����$�������� �(��� ����� ���� ������ ���#� �����"� =������ ��� ��"���"���������� ���=���� @RYA-� ��&�"�$��� �� ���� =���$��������������� ��������� ����� ����-� �� �� ����"�� �&�"� "�� �������� ��� ��"��"��� ������� ������� ���\���""O� ����"� ��$������ @RXA#�'������� ��� ������ ��$�������� �� !� �����@UIA-� �� ��$������ ��� ���� 9�2O�� ,�"��"��� � ������ ������$� �����&�-�������� ���� "����� ���� ����� ������ !� ����%� ������ ����!� �������$���������WH��""�������HW��""��� ����������������� �����#�8���������-� !� ����� $�������� �� ���� ��� ��� ��� ��������� ���� ���� �����"���������������������� ����������!� ������'����������������&�����������������"��� ������������!� ����%� ������@UPA#��

� ��� ���� �� �� ��� ����� ���&���-� ��$������ �� ������ " ������ ���� ���������� ��� ��"��� ������ ������ ���� �($����� ��1��������� ��� ��� ���� ���������$��M��������$�-�����������������&�����������������������"�����$�����������:����� ��� �� ����&�� ��� ��� ��&�� ���������'*,=�� �� ���$���-� ���� ����-����� �"��-��(������������(����$��$�������������"�� ���������$���"������������ ��� ���� $�����#� ������� ������ ���� ����� ��������� ��$�������"�

Introduction

PQ� �

�������"������&�"� "�������������������� ���������������������������������-� �������� ���������&����������� "��������������� �����&���""���������&����$������@UHA#�

�

�#H#H#H�'�������������"�" ������

������ �������$"��� ��:��� ��"�� �� ���� ������������� ���� ����"� �$������� ���� ������ �$���� �&�"&��� �� �����"� ������ ���� ����� ������ @UQA��&��� ����� ������ ��������"����������������������� ����������-� ��������������������� ��� ���� ���""���"��"��� �����������������"��"��#��������������"��������������������$����������� ���������($�������"��������� �������������������������������$������&�������������-������-��""�"�������$���$�����-������""��������������� ��������'*,=��$��$���������������$����������������������"�����#�S���""��""������������������$�����������������������"����� ���� ��$����� ���� ����"� ����� ��� �$��� ������� ����� ���� �������$�����"�&������� �����"������#���������������������""��$� "�������$������&�����6�����"������������""���������"��������� ����� ��������������������������"����������������������-���������"���������������&�"� "���������$� "#�������������-����������������������"�" ��������"�������$��������� ���� $������ �������� ����� ��� ������ ����� $"��� �� :��� ��"�� �� ������� ��������&���-��""��������������� ��������� ������"�&���������������� "����$������������#� ;��� ������ ���� �����M��-� ���� ��$������ ���� ��"�������������� ���� �� �($"����� ��� ������ ��� $����� ����� ��������"� ������������-������������������"�M������$����%9-6#�����-�����$������������:������������������"�" ����������������������""���������$���������-���������������� ��������� �����"� ������-� �&��� $"��� ��� �&����� �""������ �����$������ �&����� ����"��� �������� ���� ���"�� ���$"���� ��&��� ����#�*��� ��� ���� �&�����-� ����������� ��� �"�� ����"�� ����� ��� ���� :�������������� ������������� �&�������� ������������ ����"����� ��&�� "�����-��&��� ����� �� $���&�� $������� ������ �&������ ����#� 2���&��-� ���� "�:� �����$"����������������� "���� ����(�����&������"�-������������������������ ������$����������� ���������:��������$���������#�

Introduction

PR�

'�������������������" ��������"�������"��"����������������$�������������������������(��$"����������$�����$��":����!2'�� �@URA����-��������� ����� ����� HIII� "�����-� �� ���� ����"� ���� ���� ��� ���� ��!2'�����������������$����9����"����������*�����"������������� ����&�����������������������$���������������������$�����)��$"������$�����������������"�#�'"������� �� �$��� �$$����-� �� ���� ��������� �""� ���������� �������������� ��� �� ��"���� ���$���� ������� ���������� " ����-� ����""� �� ���������"� �����������$����%9-,#�;����������������������&�����������"�" ������":����=, "� -��������&���������=���$�������������������������=,��)=���-� ���� �� $���� ��� ���� =���$����,�"��"��� ��"���� �� �������� �=,����@UUA#�S��� ����� ����� ��"�� �� �""��� ��$�����-� ���� �� ���� ������ $� ""���&�"� "�� �������� ��� 1�������&�� ���� ���&��� ����� ��� ���� ��������� �������$������-��""�-�����������������""���"��"���������""��������������H#U��""��������������@UWA#��

������ ���� ������ ����"�� ��� ���������� " ������ ":�� ���� ��$��������� ��!*%!#����� $� "� ���� ���� �� ������� ��� ��&�"� $������&�� ��$������ �������� $������"���"� ���� �������"� ��&��� ����� �� $��&���� �������������������"������������9%�$������#� ��������� �$������� ���������� ������� ���� ����-� ����"�� ����� �������� ����� ����� �����"� ������-� ������������������"�������""��������������:��������"���������@UVA#�

���� ������������������$����� " ��������������&���$��$�����������������������-�":��S�� ���@UYA����,**��@UXA�����������������������������""����� ����� "��������#� S�� ��� �-� ���� ������-� �� $��$������� ���� ������&�"�$��� ��� %������ ,�"��"��� *��&���� ����� ��� ��� +������� HIIX� ��������"��������������������������������"�������������������"���������������$������#� '""� ����� ���������� ���� ���� �(������� ����� ����� ����� ����������������$�$����$� "������� ���� "���� ������������ ��$������&�����6�����"��������� ��"�#�������� ���-� ���� ���� ����� ���������� &�� ���)�������$��� ����� ����$���������"������������"���$��$������-�����������6������������������$��������� �������"� ����� ���� ���""� ��$������ ���� ���$��"����� �� $�&���� �����" ���������"��������$����#�

�

Introduction

PU� �

%-*-5�� � ������ ����

�����&������$"�����&��&���������������������������&���"�����"�" ��������������������������"�����������������M����������������������������������������" �������""�$������������"���������������$���������""�" ���������:���������������$�������������������������#��

8���� ��� �""-� ���� ��$����� ���������� ��� �� �$����� �� ����������������-�����"�-���"��-����-���"H-����-��������������#�'""���������������$��&�������������� ���� ����������$������� �����$�����"��"���������� ����� �����"�:�����-� ��������""����������&������������������������������#�8����������-����������"�" �������""��$��������Q*�������������������$����-�����������������""�6������"���������H*���$�"���-������$��������������������$�����������������$��������������������$���#�;�������-�����������������������&���� ���� �� ����� ��������� ���������� ��� ������ �� ���� ������� ���� �� �������������-����� ��������������$�������������������������$������������""���&��������"����-��������$���"� �"���� �����������"��������������������1����#� ;��� ��"�� ���� ����� �$��� ����$����� ":�� ���� ���� ����� �������������� ����"� " �����-� ���� ���� ���""��� ���� ����� �� $�������� ":������"��� ���� ��"�� ��1���� ���� ����� ����"-� ��"�� ������ ���� ��$�����������":����"�����"�� �����������������"�����"�" ���������������""���������$��������� �����������&��������������"�#�

'� ������ ���-� �����������"����� ����� �&�"� "�� ��� ��1��"�� �����������"� ���������� �� "����� ���� ����#������-� ��������� �$$������� ��&�� ������:��� ��� ��"&�� ���� $�� "��#� ���� ��!'�-� �����������"� ����� ��� !���� ����'$$"�����������-��������:��� �����HIII� ���HIIU���� ���� ��!'�������"���������� !��6��� ��� ���� "��� �� ��1��� "� �"-� ���� ��!'�������"� ��������-��������"�� �������)$��$�����������������������"��� ������#�������������������������$����-�����$��������������������������"M�������������������-�����&����������������������-��������������""�����������������"M��������� �� ��1��� ����-� ���� ����� ���� ��$������������ ��� ���� ��$����� ���"���""������������"����1������$����$����������#����������"���$�����������������"M��� ������ ��(���"� ������""������������������(���������� "������������������� ��"����� ���� ���� ��������-� ���� ������-� ���� ������� �������� ����

Introduction

PW�

����������"�������������������$����#�S��������������������������� ������"������� ��������"��������������������-�����������:�����������&�"�$��#�8�������� �"�"����-� ������ ������ �� ������� ���� �� HU� ��������� "�������"$�������� ���� ����� PR� ��� ���� ��������� ����"�� ����� ���� �����&������������� ��� ���� �����-� ��""����� ������&�"�� �� �� ��$���� ���� Y� ������������������"���������������������"������������������#�'��������-������"���������������������&�����������������������������"����:���������������������#�����������������������������$�����������&�����������������:����������������P#Q������&����PIX���$�����-�������������"���""��������VU����� ��������PIX���$����������@WIA#�

'��������������-���������"����������������%���������&�"�$��������� "� #������� ����������"��������-� ����������������������1����()"�&�"����� ���� ���� ��"��"�� ������ ���� "�&�"� ������� ���� �� �� )��������"����������-����������������������������������������"���1������������������ ��"��"�#� ���� ����-� ������ ���� ����� "�&�"�� ���� �������� �$������ ������� �����������������"������������������$���������������"��"�-�������� ������ �����������"�������$��������������� ������ �������$�����������"�������$���-� ���$��&�"�#����� ������-� ����������(��� "�&�"��������1�������)����������������������������"��"�����������:-������"�-�����������$"������"��"�����������-����$��&�"�#�

S����������� ������ ����� �� �"�"����� ���� �""� ������"��"��� �� ��&���"�����"�" �����-�������������������������������$�������������&������&��"��� ����� $��&���"�� �� ���� ������ ����� ���� ��������� ��$�������������� ���� ��������"� ��$�����������#� ;��� ��� ���� � "�� ��� �""�$��� �""���$������� ��� �� ��$����� ���� �� ���"�� ����"� ���$�� �����-� ���� ���:��������� ���� ���� ��������M����� ��� ���� ���������� ����� ���� ������ ���������� ��"����� ��� ���� $��������"� ���� $������"���"� ����������� �������� ��$����#� ��� ���� ���$-� ���� $���� ��� ���������� ����� ����� ������������������������ ����&�����������������������������$��� "�-������������������������� �����""����-������������ ������������������������������������$$"�����������"���� ����� ����&��������� �$��� ����� ���� �� �� � ���&��� ��� �� ������"� "�������$�������������"���$�������������������#�

Introduction

PV� �

%�&���"������������"�����������&�"� "����������"������$�����" ����������������������������������������������������"����������������������������""������������ ������#�%�������������$��������":��;$���� �"�@WPA��"����""������������ ����"�"������$��������������������$"������"�����$����#� ������� ���$��-� ��� ������� �� �"��� ���� �$��� $�"�� ��� ���� ������ �����������$���� ������'(��� @WHA-����� $��&���� �� ����� "��� ��� �����"� �$$"���� ������&�"�$������"���������������������"���������������#�

Introduction

PY�

�� �����%-5�4� ����������� ���� ����

%-5-,���������� ��������

8��� ���� ��:�� ��� ��$"��-� ��� ������ ���� �"���"� �$��� ��� ������$���������""�$�������$�������������"&�������(���������������������@WQA-����� ����� ��� �""� �$��� $��������#� ���� ������ ��� $������� �� ��� ��������$����������� �����"����������������������������������"&����������#�%������������$�������������"�������������"��������-�":�����������"���������������:�"����-���"��������������$��"M��������"�M���������������� ��������"����������"���������������"�������������������""�����M����#�'����������$����$����������"�� ���&�"&���������"������""�����"��������""��"��$�������� ���� ���"�� �"���� �����$������ $������� ���� �����"�-� �"���� ������������� :���� ��� ���$����#�'""� ������ $������� ���� ����� �������M��� �� ������������ ���� ������ ���� ��"��� �������� �""� ����""�� ����� ��� ��$��"�������""����"����#�

'������� �""� ���� ���� �"���"� �$��� ��� ������� ���� ���:� ��� ���������� "�� $������ ��� ���� �� ���� ���� ����� �""� �""��� ��� ��� "�:� �� ���� ��������"��$���������""���"��"��#�������$������-�������"�����������������"����������"�����������������"����� �������������"����������� �������������$��"M��� $�:��� ����� �� ���������������$������ �� ��"���� ��� �� Q*� ��������#����� ����"����� ��� ���� ���&��� ��� �� ������ $������ ���� ��&�� �� �������������� ��� ���� �""� ������� ���� ���� ��� �� ���&��� �� ������������"���������������������1�����������������$��������&�����#���� ��� "������������-����������������������������������������$��� "��� ��������$������������ ���� ��$�-� �"����� ��1����-� �������"-� $��"������� ����$��������"� ����� ��� ��""� ��� ����� � ���� ����� :����� ���������� ����"������ ��� ���� "����� ��"�� ������� ����� ����� ����� ���� ��������� ��� ����� ���&��#�

������ ���� ��&���"� ���"��� ��� $������� ����� ���� �"����� ���� ���� �"���"� �$��#� ���� ������ ���� ����� ��""� :����� �"����� ��� ���� ��M���������$-��������� ����"����""�����������������-���"�����������"����������

Introduction

PX� �

������"�������$����-��������������-������)$��������$"������$����������������������:������������"�����������$���������&���������������������/� �������������$����������#�S�"��������$"����������$����������������"����������������&����������������������������@WRA����������$������-�����""��������"�������� ���""� $������ ����� ���� ���� �������""�� �������M��#� ,���� ����� UIII���M����-� UIII� �����"�� ���� �����$������-� � ���� PIII� �)$������ ��$"������$���������������������"�������$�������&�� ��������"���������������"�&�"�����������M�������&���"�"���������#�

��������������������������������������"��$��-�$��������������� ���������M�����$�����������������"����������������($�������������$����������� ��� ��� ���� �� ����"�� ��� ���&�� ���� ��� ���� ��$"�(��� ��� ���� ����#�2���&��-���������($����������$�������������"������������������������$��"������� ������ �""� $�� � "�� ��&�� ��"��� ��������� �� ����� ��&���$�:���-� �����"��������� �������� ���������������������-� ������ �������"����]�����������"-���&�� �����������"�������������(����#�

�

%-5-*���������������� ����

!����������� ��������������������������� �����"������-������������� ���� �"������"� ��������� �&�"&��� �� �""� �"���"� $�������#� ��� ���������� ��� �""� ��&�� �� 1�:� �"���� ��� ���� ��������� ��$��� ��� �����������&�"� "��� ���� ��������� ����� ������� ��$�������#�'"������������&���&�������� ����� �� �������"-� ��������"� ���� $��"������-� ������ ������ �"������� ����������""����"����������������� ����������������������������������#�

�

�#Q#H#P�8������"������

���� "����"����� ��� �������M�� �� $������ �� ����� ��� ���� ������� ����&�"�$������������"���������������������������������������������������"���� ������$�������$� "����������"������������"���"��"����������-��""�$�������� ���� �""�"��� "������ @WUA#� � ����&��� ��� �������"� ���� ��������"�����-� ������� ���� �����&��� $������� ��� $������� ����� ��&�� �$��� �������

Introduction

HI�

������"�� ���$������"�� ����������������� ����$�����#��������� ���� ������� ��� $���� ��� ��������� ���� $������-� ����� ���� ��������� ���� ����� ����$�������&�"����������������PUI����������"���$������� ���""�:����������"&��@WWA#�

%�&���"�����&����"����������������������������������������������"��������������-�����������:������$���������&����"�$"��������-��������� ����"������������������������������������������@WVA#�2���&��-������$$�������"����� �� ���� ����������� ����� ���� ���������� ���� ��� ���������� �� ������������ �"�����������$�����$�-���������������������&������"���������� ��� ������������������������"����������������������������-���������������������� ��� $������� ���� �� ������� ������ �������#� *�$������ ��� �����������"������������"����������$���������� ����������������������������-����������"���������������������������������������&���"����������������������"��� @WYA#� �'�2-� ���� ������-� �� �� ��""� :����� ������� "��������� ���$������������������������������PR#UII���������&������P#PUI���1��������"��� ����$��� �� HHW� ��$�����"��� ���� �� ����"� ��� PHR� ������� �����������"����� @WXA#�S��� �� ��1����� ����� �$$����� ��� ���� ����� ����-� $8��-� �������&�� ��� ����%������ ��������-� �$����� ��� ��� ������ �"����� PH#III� ���"�������$�����"���� ����1�������"����������������"���"�����@VIA#�

����$��������������������������$����������:������������������������ ���� �� ���"�� ����� �� ���� �������"����� �������� ����� ���� ���� �������1����-�������������������������������""����"����#�8������������1�������$�������������������������������������������$����������:�����������#�'�� �$$����� ����-� ��"�� ��$"�� ��� ��� ���-� ���� ����"���� �� �� $��"�������� �����������1������"��������������� ��������������$"�(���@VPA#���������������$���$�������������� ������$$������� �������$���� �������"�Q*�$��������"����� ������� ��� ���� ������ ��1������ ���� ��&�� �"��� �&��� $"��� ��� ����"������ ��� �������"����� @VHA#� ,����&��-� ���� �� ������ ��� ��&���"�����1���������������$���������":�"��������������������������#�

Introduction

HP� �

�%�������&��&���������"�) �����$�������������$��������������#�=(������������@VQA�

�

;��� ����$���������� �������������� ��� �� ���� ��� �������-� �� ���� ��� �������M����"����������������� �����������������"�"���#������������������� ���������������&�����������:�������$������"������$������-��&���$"������ ��""� ������� ��� ���� ������������ "��������� �������#� ���� =�M����9����"������ ��������� ��&�"�$��� ���� =�M���� ��������� ��� ��� �=����� ���� @VRA-� �� ��������M��� ���� �������"� "��������� ������ ������M����� ����� ��� ���� �������� ����� ���"�M�#� '"������� =�� ��� ���� ��������������������������������������� �������$��&����M���-�=����� ������� ���� �$���� ��M����� ��� ���"�M��� �������#� ���� ������ ����� �����������M�������������"�M�������������������""����&�����������=����� ��#��$�������-�����"��������������������RPUI�����������������������$����������"���"�� �������� ���������"���M����#�

'������� ��""� :����� "��������� ������� �� ���� ���� ������� �� ������!2'�-��������""��������������"������������������"��"�!������"���#�����������������"�����������$������-��&�����"�����RII���������������������"������ ��$������ ��� ��� ������� ���� ���$��"���� ���� ����� �������""��"�������$���������� ���� ��$�� �� �� "�&�"��������������� ������"�����#�������$��������&����$��������������������������������:��������������������������"��

Introduction

HH�

��"�&���� ��������� �����:�����"�����""� ����""�����"������������������&����������-�������&����������������������""���$�������#������"� ������������"���������������������������&��������"�����$�������������:�������������PU��������������"���$�����������6�����"�!������"���"���&����@VUA#�

'�� �����������"�����������&��$����������������"����-��������""�$�����������$�����$�������������������$������������������$��$�������������"�&�"� ��� �� �������M��� ����� �""����� ��� ��� ������ ������ ��������#�2���&��-� �������� ���� "��������������&���� �$��� �� ��������������� ��������$�� ��"�� ������� ���� ���� "���� ����"��-� ��$������ ��� ���� ��� ��� ���$�������������������"������-�������������������������&����������������������������������������������������#�

�����"�-� �� ���� �$$����� ��� ���� �������"� "��������� ��� $������� ���������;�������;���"����������������$��-� ���������������������������������������������"������M���������-�������������������������"��������� �"���"� $�������-� ��"��"��� �������� ���� �""�"��� ��$������� ���� "�:�����������$����������������:���������#�S��������(����&������������$��������1������($����������-�����������������������������"�����$�������������� ����������� ���� ���� ������ ����� ������ ���� ���� ����� ���� �������"������������ ���� ������ ���� $������� @VWA� �"������� ��������� ���� ��$"�(����""�"������������������@VVA#��

�

Introduction

HQ� �

�

2������"�����������:)��$���������"��������������$������#�=(������������@VYA�

�

'""��������������"�������&��������������&���"��������"�"���������������� ���� ���� ������M��� �� �� � ��$�������� ":�� !��� �!���������������� ��������� @VXA� ��� T=��� �T����� =��"�$���� ��� ������ �������������@YIA#��

�

�#Q#H#H�%�������"������

� ����$��$�����������$������������������������� "�����$���������$������� ��� Q*� ��������� ����"���� ����� ���� $�������� ���� ��"���� ��� ��� �$��������������1����#����$��$"������$��� "��������������:���������������

Introduction

HR�

����� ���� �� $������ ��� ����"�� �� � "�� ��� :���� ���� $�������$����"�$�������������"������������������������"�������������"��"��:�":�#�2���&��-�������$"�(������������������������"��������������"������)��������"����$���������$��������:�������� 6��&��&��������"��������&���������������������������"��� �������"����� ��� ��&�� ��������-� ":�� *9'� ����� ��$����&������"��� ��� ����� ��� ����� ��"�� ��������� @VYA� �"��� �""��� ����"��������"��#� ;����� ���$"���� ���$������� �������"����� ���� ���� $������� ���$������������������&�� ������$������ ������&�� "����������� "�&�"�� �������$������� ����1���� ���� �� ����� ������� @YPA#� 2���&��-� ���� ����� ��� ��"��� ����($�������""�� ���������� ���������� �� ���&��� "�� ������� ����� ��-� ������������ ��&�� ����� ���� �""� �(����� $������-� ��� ����� ��� ��"&�� ��� ����� �����&��������$��� "������������� ��� "���������"������������������@YHA#�

'���""�-� �� ���� ���� � ���&��� ����� �"������� ���� ��� ��� ��� ��������1������ ���� �� �"����� �����-� ���� ��� ��� ��� ��������� Q*� ��"����� �����������������PI#III-���&������������������������$��������&������6����������1��������"���������� �������&�� ���� ��$��������&��� @YQA#�8��� ������-� ������"�������HUI�$����������� �"������ ��� ����:���������$� ��&��"��� ����� ���������� ��� ����� ���� Q*� ���������� ������ �"������ :����� ��"����� @YRA#�8����������-���&����������������������)��������"��������������$������������&��� $"��� ��� ���� ��&�"�$����� ��� ��������� ��$�������"� �������"������$� "�� ��� ����"��� ���� ������� "�� ������ ���� ����� ��� "������ ����$�������&���������"�������@YUA#�

�

Introduction

HU� �

�Q*���"���������������������""����"���$���������������"�����������&��$�:���#�=(�������

�����@YWA�

�

�������"���������-����������� ��������($������"������������������ ������ ���������� ����"��� ���� ��� ���� ��&����� �� ��������� ����1���� ���� $������������������"�������"�������""������<)���������""����$��-�9,���$������$������"���"���"�����������$�#�<)���������""����$����������������&�"�$������������ ����� ������-� ���� �""� ���$�� ��&�� ���&��� �� ���� "�&�"� ��� �����������(�$�������$�������($����������������""M����������������� ����������������� �$"���������� ��� ���� ���"�� ���� $�����"�� @YVA#� ������ �$��&����������������� �� "��� ��� ���������� ���� ������ ���� ����� ��� $��$��"�� ������� ���������M��� �""� ���� ���� ����� �� �� ��������M��� ���� ���"�� ���� "�� ������������������������ 6��&������������&�"�$������������!*�-�����$����������� ��:-��������&�������������:��&���9�����"��� ��������#�

'"������� ���� !*�� �������� ��� �� "����� $��6��� ���� �($����� �� ���������

Introduction

HW�

�������� �� ���� ���"�� VI�� @YYA-� ���� �($������"� ������� ��� ���� ��� ��� �������������������YI�������������������&�����������������������$�&�������������������-���&����������&���������$��������������@YXA#�S��������������(����������������������������+�������HIPI�����������������&��������������������� ��$������ ���� ����-� �"����� *9'-� �9'-� $������� ���� �(�����$"�(��-� ���� �� ���� ��������� ��$������� ���� $������ ���������#�������� �������������-����������������!*���"����������&�� ��������������������������$����������� ��� ���� :��� ��� ����-� ���� �������� ������� �"��� ����"-� �"���"����� "����$��"���"��������������#�

'������� ����� ���� ����� �� ��� ���� ����� ���� ��"��� ���� �����"��������������"���($��������&���������"M�����$���������������������������$���������"�������$��������":��!*���"������������������&��� ������"������� ���"��#�����$�$�"�������� ���������� �� ������"�� ����� �������� ������������"����"� :����� �����$���� ��������-� ����"�� ��M����� �"����� :������ ����$��������-�����������������������������&�������"���������������"�&�������"���":�� ���� �������������� ��"���� ���$����-� �����$������-� �����"�� ����)$��������$"��� ���$����#������� � �$$"����� 8�!� $��������� �� ���� ������ �� �� ���"�������������������"���������������������� ����������"&���������������������������� ������� ���"��-� �"����� ���$�� ���� ������ ����� ��� ���� �&���������� ��� ��� ���� ��������� ����$�� ��� $������� ��� �""� "�&�"�#� ���� ����������$$����� ��� 8�!� �� ����� �� ���� �����M����� ��� ���� $������� �� �������"������"������ �������� �� ������ ��� ���"�M�� ���� ��� ��� ���� ���� ����� ��� ���������������������"�&�"#������""� ����������������"�����$����%9-*#�

'�������� ����"������-�����"������������� �������������� ������������� �����������"����� ���� ��� �&��� ��$��� ������ ��� ���� �"���"� �$��� @XIA#�2���&��-����� ������������������"��&�������������������������$�����$��������� �������� �������� ��"�� ���� ��� ��� ��� ���� ����$�� �������M��� �������"����� �($������""�-�������� ����� �&�������� ���������� ���� ���� ��"&��� ����$��&���"����$�������$�-���������� ��������"�������������������������"��������""�:����� �����������������������������""M��@XPA#�

�

Introduction

HV� �

�#Q#H#Q�!��"������������

��������&�"��&�������������&�����$���-�$���������"�������$�$�"���������������������������$����������������"������������������$�������#�������������-� ����� �&��� $"��� ��� $���"������ $������-� ������� �� �� ��$"����� ��� �������"������������������������� �����$��������"���� �����$�������:��$�� ���$�������������"�����������������&����� ������"��������������������#������������������-������"�����������������$�������������������������������$������� ��� ���� ������ �������� �&�"&�� ���$������"�� ��� ���&��� $������#�������� ���� ���� ��� ���� :���"����� �� ���� ��$$��� ��� ���� ������� ���� �������&�������������:�����������@XHA-� ����$��"���������"������$�� �������$��������������� ����������1���������"������$����&������"���������������� ��������"� ���� �������"� ��"����� ���������-� �&��� ����� ��������� ��"���������$������� ���-� ��������� ��"��� ����� ��1�����-� �����)��������"� ��"�����������&��������""� �������� ��@XQA#�8����������-���������� �����$��"���������&�� $��&��� ��� �� &���� �����"� ������ ���������� ���� ����� �����&��� ����������� ��1������ @XRA� ��� ������ �� ��� �(���� ������ ���� ������ ���-� ���� ������ ���� ���� ��$������ ��� ��"����� ����� ��� $������� ����� ���������$��������-������������ "�������������"�����������������������M�������$��@XUA������""����������&�"�$����������&���"��&�"�����������"�����������"�����@XW-XV-XQA#�

'��������"� ����&����������"���� �����������M�������� ����������:����� ���&��� �� ,������ ��� �"#� �� HIIH� @XYA#� T������ ���� �$��"M�����M����� ����� ������ ���� ���&��� ��� ������ ��M����� �� ������ ���$���$���"����� �������� ���������$������"� ����������� �������� �� �����"������� ���� ���� ���� ��� �����"�� ����"���� ������ �����$����""�� ��"�&����$������� �&�"&��� �� ���"� �""�"��� $�������#� ' ���� UII� :����� ������:�����������"������������X�������"���������$���������M��� ���������������������������$������#�

�

Introduction

HY�

���$������������������������:����#�=(������������@XYA�

�

;����������������������������:����������"���������������$����-��������� "���� ��� ������$����"� ����"������ �� ����"�� ���� ���� "��"����������������������&�"&�����������������$����"���"�$���������������*9'� ������$���� "�&�"#� '� ������"� �������"� "��������� ��� ���� ����$� ���$����������"���$�������������$����$��������������*9') �����$��$���������� ���������� $���������� @XXA#� �������� ��� ����� �$$����-� �� P#XXX� ����9�"�������$�����9����"��������������� ���� "����� �� ��$"����� ��� ����RY� :����� ������ ��"���� ���$����� @PIIA� "�������� ����� �������""�� ����1���������"����������&��������� ���"��#�

��������������"�����$��"����������������-���*�����������&����� ������&������ �����"������ %���*���� ����� ��� ���� "��� �� "���������������������� ����������$����$�������:�����������������$�����"���������

Introduction

HX� �

����� ������#� *������ �� �&�� "�&�"�� "��������� �������-� ���� ������� �����"�������������$��&���"�����������������M����-� �������������������������������������������������$���� ����������������"��������������$���������� ��� ���� �����$������� ���� ���� $��"������� ��"������ ����� ��&�� @PIPA#��������"�� ���� ���� ���� ������� QIII� $������ ��1������ �&���� ���� UUI��������������$�������������"����������$���"�������""�$���@PIHA#�

'�����������-������������M������������$��"������������� ��������������$����""����"�&����$���������"������� ����"������������:�����$�����������$�����������������������������������������"��$������-� ������������-��""��������������&���������������������$��������������$���������������� �� ���������� ��� ��&�� �� ��$"���� ���� ��$������&�� �&��&��� ��� ���� �"���"��$��#�

�

%-5-5�� � ������ ����

���� :��� ����� ��� ���� $���� �� "�:��� ���� ���������� ����� ��������������������������������������������������������� �"���"��$����������������&������$"����&���������$��$������������������#�������������������6� ������������� ������������ ����������� �������� ���� ����� �� "��������� ���� �� �������������"�������������������������������������$�������������$����$������#�,����&��-� ������ ���� �(������ ��� ���� �&��� &����� ����"���� ���� $�����������"�����-� �������� ��������� ��� ���� $������� �������� ����"����� �����-����� ����� ����� ��� ���&��� ��� ����$������� �������������� ���� ��"�� �� $��������� ��&�� �$� ��� ������ ��������� ������ ��� �"��� �� ���"�� ����� ��� ������ ������������$������� ������� �$������ ����������� �$���� @PIQA#�;�� ��$���� ����-�����������������$�� "���������������������������-�������������������:������� &�������� ��� ���� ����� ���"� $������ ���� ���� ��� ������� ��"����� $��������������$���#�

���������"��������������������$������������ ��-�����������&��� �����������������"�� ����������������������"�������($������� ����&���������������� ������� ����� �� �� �������""�� ������ �������� �����#�9�&�����"���-� �������� ��&�"�$����� ���� �$��M����� ��� ���� �������$��� �������"����� ����

Introduction

QI�

�������"��������������$������-����������"���&��������������������� �������� ��������� "�� ���:� ���� ��� �� ����"�� ��� ����� ������ ���� ���� �� $��"�������� ��������"����������������&����������"��"�������������������&���������$"�������"�������������������������$�������������������� ��#������������� ��������� ���:� ��� �����"������ ���"����&�� ���� ��"������ ���������� �������� �� �����$$"�������������(�������"�����������"������������������������M���������@PIRA#��

�� '�����������������&����������"����������&����"�!�����������������!����� $��6��-� ��� ������� ����� ����$�� ��� ���� =���$���� �������������������� �=���-� ���� %���� ��������� ��� ����������� �%���� ���� ���� !��������������������������!����������������������&�"�$������������������ $������ :���"����� ���� ���� ���� ���������� ���� ��������M��� �����������"����� ������1��� ������������� ��&���"�$������#�%�� "�����������""����������������"������������������������ ���($���������������$����-����������������"���&�"� "����������� �����������&������$"����������������$"������� �����"�� �������#� ����������� ��� ������ ���� $�������� ��� ����������$���� �"����� ������ ��:������ ��$"���� $��������-� ":�� ���� �����-� ���������&�������"�������������"�������������$���������������1����-�"������������"���$���������������������"���������������@PIUA#��

�!���"�����������&������������#�=(������������@PIWA�

Introduction

QP� �

;����������� "�� ��� ������������"��$�������������$�����������������&���&�"� "����"������������������������:�������������������������������-���� ��� ������ ����� ���� ��������� ���� ����� ���� ���������� ��������� ������������ �""� ��"����� ���������#� !���"���-� "�:��� ��!���� ������� ����&�"�� "���������������������������XI� �"���"����� ���������&�����������-��� �������� ����&�� ��� ���� !������ ����������� �������� ����$� ���� ���������������(��$"����������$$�����@PIWA#�

S��� �$������� �$"������ �� ���� ����� ���&���� $�����-� ������ ��������� ��������"� �������������� �������"�����-� �""���� ���������������������������������������&�������������������������������"���$���������� $������� ��� �������-� ����� ��� "��� ���� ����"��� ��� ����� $��� "����������������"������@PIVA#��

�

Outline of the homology modeling process and its applications in drug discovery. Extracted from [108]

�

8����������-� $��"������� ����� ����� ��1����� ����"���� ���"���� ������� �����:��$����������� ���� ����������$������� ����� ������ ��������������@PIXA������"��������$�������������������1������������&���$��������������������:�������������������"���������������������$�������������"���"���� ��� ���� ���������M��� $������ @PPI-� PPP-� PPHA#� 2���&��-� ���$��� �""�

Introduction

QH�

������ �������-� ������ ���� ���� ����� $�� "���� ��� ��"&�� �� ���� ��"�� ���� ������������$�����������������1�������"�������&�� ������������&��������������"��������������������������������������$���������������������&�� ��������������� �������"����������������������@PPQA��������������������1�������"�������&�� �������������$������$��������������������Q*���"�����@PPRA#��

�

�

%�"���Q*��������������������&�"������(������������������1�������"����#�=(������������@PPRA�

�

'""� �������������� ����:��������������"�&�"� ���$$"�����������������"��������� �������� ��� ������ ���� ������ $��$������ ���� ����������� ���$�������������������"�&�"�������$���������"��#������"������������������&������ ��������� �$$����� �� ��������� ��� ��&�� ��������M��� ���������� ���������"�����"� �����M������ ���� �� ��������� ���� ��$"���� &��� ��� ���� �"���"��$�������������������������������$���#��

Introduction

QQ� �

�� �����%-6�4� ������������ ���� ���

�

%-6-,���������� ��������

���� ����� $������$�� ������� ��� ���� � ���&� "�� $��������"� ��� �"���"� ����������� ��� ��� �������#� 8��� ���� ��:�� ��� ��$"��-������""������� ���� $������$� �$��� ��� ���� ��$����� ��� ���� ��������� &�������������� ��&���"��$������� �� �����"����������� ���������"�$������$�#� ��� ������$�� ��� �������:���� ������� ���� ���� ��� &�������� ����� ���� ��������� �� �����"��������������������"������������$�����������������"��"������������ ����������� �����-� ������� �� ���� ������� ��� ��$������ ����� ���� :����� �������������������� ���&�������$����������$������#�

S���������"���������$$����������������� �����"�����������������������$������� ���� �� �������� ��� �� ������-� ������ ���� ����������� ���� ��� �������������� ���� ���� ��� ��&������ ���������� $�������� ��� ���� �����"� �����#�2���&��-������������$�� "���������������������������������$�����������������&������� �"��������""�� ������������������������$�����-�������$������&���������($�������� ����������(�@PPU-PPWA-��&���$"����������������������� ������������ ������ ��������� �"������������� ���� �""��� ��&���������� ����������� ����������#� ���� ���������� ���� ���� "���� E��(� ������G� ��� ����"�� ��� �����""���� ���$������ ��� ������ ���� ����� ����� ������ �� ��� ��$������� ��� ��������������� ��� ���� ��$����� ���� ����� ���� ������� ���� $������"���""���������� �� $������� ���� ��"����� ���� ���� ������ ������#� 8����������-� �������� ���������� ��� ������ ���� ������� �� ����� ����� ��� ���� �$$���� ��� �&����$������ ��� ����� ���� ��"����� ��� ������ ��:� ������� ":�� ���-�������-���"�)����������������-� �������� �������-� ����� ���� ������ ���������� ���� ������$������:���� ������� @PPVA#� *��$��� ���� ���� ����� ��� ����� �� ����� ��� ���������-��������������������$�����������������&�� ����"����""����"�����������&������������������":����� ���-������������$�����@PPYA#��

��� �� ����� �����-� ���� ������� $������� �� ������ ���� ��$"�(�$��������"���"�� ���&�������������� ������ �����������&�����������������#����� � �&����������� $�"�$������"���� �� ���� ��� ����� ��� ����������� �"���

Introduction

QR�

�����������)��������������-�$���������������������������$�����:�:�����$�� "����@PPXA#��������������������������(������ ������$�������������������������"������""�����������������6���-��������"��"�����������������@PHIA#�'��"�������"��$������$����$�������������� ����������������������������$�����(��-���� ����������������������(�������� ����������������"� ����(����� �������� ��� ���� "&��� @PHPA-� ��� &�����"��� ���������� ����$"���� ������ @PHHA#�'�&����� �������� ��"��������� �"���������:����� ��������������H#V���"�������PXXY� ���HIIU����������� ��8*'�����"� ��$����� @PHQA����� ���� ���� ���� ������ ���� ���:��� ����� ��������"� @PHRA� ����� ���� ����������������"���"�&�������������$�������&������$���������"��������#��

����� ������������&����$������ ��� "���-���$"�(������($���&�-� ������������������������"�����$��� "����������"��������� ����������������������� ����� ��� $������ �������� ���� ����� �������� ����� ��������� �$$������� �����($"����� ���� ����� ��� ���� ������#� ���� ��� �� ��������� ��� ����� "�&�"� ��"��:��� ���� ��$���&�� ���������� ������ ���� ����"�� ��� ��������� �"���� ��������� :����� ��� ��&�� ��������� ��(��� @PHUA� ��� ���� $��� "��� ��� �&�"���� �����@PHW-�PHVA#������������-�������&�"���$$�����������"������������������������������ ��(���$��$������� �������� ������������&������� �"�$��������@PHYA-� ���� �����"�-� �"��� ������$����� ���� ���� �"���� ����� ������#�������-� �� �����"�� �������� ��"�� �""��� ��(�$�������� ��� ��$�������"���(�"���� ���� ��� ���� �"������� ��� ��(��� ��������� ���� ������ ��"����������� �� ���� �$"���������� ��� 1�������&�� $�������� �����"����� @PHXA-������� ����� �$$������� @PQIA-� ������ �$��� ��(��� ������� @PQPA� ������������� ��$�������"� �������"����� @PQH-� PQQA� ���� ���� ��� $����� �������"����� ��(��� ���� ��&����� �������#�'�� ��� �(��$"�� ��� ���-� ���������"��������� ��� ���"�M�� ���� ������� ��������� ����� $������ �������� ��&������������������������&�"�$��������������$��������������B�����������������"������$����%9-:#�

�������"�����������������$��������"����������������"���������������� ��""� �$� "���-� ���� ������ ���� ��&����� ����� �������� ��"���� ��� ����������������($�������""������������-���������-��� �������#�8����������-�������������� ���� �� $��������� �� ������ �$���� ����� ������ ���� ����� ����� ��

Introduction

QU� �

�(���$�"����� ��� ���� ���"� ������������ ���������-� �������� ��&�� ��� ���"��������������������������-��� ����]������)����������"�������� ����$"���"����"��-�������������������"����������"�����&�� �������&����������������������� �����������������#�8��� ������-� ���������� ��������$�������$�����"�� �����������"������������$�����&����(����($������������ ����$��������� �� ��� � ���� WI[� ���� �� RI[� ����� ��� ��"��� $���&��-� ��� ���� ������ ���� ����$������"��� ��������������"��������$���� ��� �������������������� �������� �-�����������($����-����������������������������������@PQRA#���

�

%-6-*���������������� ����

� '�������&��6����������-���&���"���(�����������������"������"���������"� �����-� �""�"��� ������-� ��������� ������� ���� ������ �($�������"�$��������-� ���� ���� ���� �����"� ������� ��� $��"��"� ��(�"���"� ����� ������������ ��"��#� ;�� ���� ������ ����-� ����"� ��$����� ������ &���� �������������������-� ���� ���� ������� �������� ������ ���� $�$�"���������� ���� ����� ���"���������:�������������������#�2���&��-� ���������������������&�����������$����-���������������������"������������������������������������������������������� �� ������ ������� "�&�"�-������ ���� "�� ��� ���� $��$����#�'���-� �����$"���������� ��� ���� ��$�������"� �������"����� ���� ���� ���������� ������������ ��$"���� ��&�� ���� ��1����� ���� ����� ����� UI� ��$�������� ��&���$$�������������������:�������"� ���������(�"���"������@PQU-PQWA#�;�����������������������$�����������*��� �������*�-���&�"�$������������&���������%���$������������� 6��&�����������������������������"����������������������"����� ���� ���� ���� "��"-� ���� �"� ���� ����� ����� ���� �"����� ��������������������$�������@PQVA#����������������-���������-���������������"�:������������������������ ������������(��$"���������������&���$$����#�

� %����� "��������-� �� ����&��� ���� ��� ���� ���� ��������� ��� �������"����� ��(��-� ���� ����������� ���� ������ ��� ���� ��"����� ��� ������ $������������$����������#���������:���$����������$���������"�:���"����������������� ���� �"���������� � �����"� ������� �� ������ �� ������� ��� ���������� �� ���� ����� ���$� �������� ���� �������� ��� ����� ��&����� ��� ���� �������

Introduction

QW�

�����#����������������������&������������-�����:���������������&�����"�����������$"���� ��������� ���� ���� ����"������ ���� "���"��� ���&����"������������� ������� ��$"�� ������� ���������� ���� ������� �������� �($�������� �&����������� ��$��"��"�������#�*��$���������"�������-�����"�&��������&����������"����2%*�-� ���� 2�M������� %� ������� *���� ���:� ����� ���� 9�����"� � ����� ���,�����@PQYA-����������&������������������"��������������""���������"���������� ���� ��:�� ��������M�� �� �� ��� �������������� ���#� ��� ���� ���-� ������������������&����� ���($����������$������������$� "������� ������������� ��$����� ��� �� �������� ��� ���� ��"����� "��"� ���� ��(�"���"����������#� 8���� ���� $���� ��� &��� ��� ���� ������ ��� ���� �$��� ��� ������&����������������� ��������������������������������$�����$������$�����-�!�����T�� "�:�� ���������� �������� ������ �� ��&����� "��������� ��� �� ��������������������� �"�$������������������������������:�������������@PQX�

���� ���������� ������ ��� ���������� �� ������ �� ����� "���"���� ���� ������"�� �&�"� "�� �� ����������� � ��$�������� �����""� ��� �� ����������������O��� ����#����� ����-� �� �$$������ ��� ���� $��&���-� �� ��� �&����$����������� �������$��� "����&��������������������������� ����"���������������$����#�������$$���� ��������$��������������&��������������$�� "�����������"������������ �� �&��� ����� �� ������ ��� ������� ������� ���� ���� ���� $������ ���� ������$���#����������"���������"���"�����"�����$������������������������������������ �������:���������&���������""��(����������"���"��������"������#��

%������� ��������� ��"�&���� ��$�������� ��� $�:���� ������-� ������ ����������������O��� ����-�����*�"�����@PRIA�����,��"��$"���@PRPA� �������������9�����"�� ��������,����#�������������������������������������M������������������ "���� ����� ���������������������-�������������$$����-��"����� �"��� ������ ���"��� ��$�� �����""� �������"� ���� "��"� ���������#�;������� ���$��������":��,����$��@PRHA����*����#���@PRQA��&����&�������&�� ��� ���� �$��� $� "� ��� ���� ���� ��� �����$���� ������ ��� �"��� ���������������� ��� ����� $����$���� ���� ����$��� "�� ��������� ������� ��������������������������������"���������"���"���#�

S��:�����������������"-����$""�������"#��""������������"��&������������� ������� ��� �"����� XII� ������ ���� ����� ���� ���������� ��� $����� ����

Introduction

QV� �

������ ���� ���������� ��� ������ ��$������ ���� �������� ����� ���� ���� ����������� ������@PRRA#�,����"���&���������������������:���������:����������������������"����"���������$���������������������������������������������������"������������ ��������������������������� �����������$$������������ ������ ����������&����������������� ���������������������� ������ ���������� �������� ���������� �� �����&����$����������� �� ����$�:���� ������#��������"� ��$"�������� ����������$���"��� �� ����"���&�"� "����� ����%�*=���� �����@PRUA#�

�

%-6-5�� � ������ ����

�����"� ���������� ����� ����� ���� ��������� �������������� ������������� ��� �� ��������� �����:�� �� ���$� ���"���� ��� ���� ��"�� ��� ����� �� ���� ������$������������������������������"�:���"�������"��������������$����������$������#���

�

��(�"���"�������"���������"�������$"�������������#�=(������������@PQHA�

�

Introduction

QY�

8���� ���� $������� $���� ��� &��-� ������� ��� "��������� ��"�&��������������������������������"-��������"�����$������"���"������������������:� �������� ���$"����� �� �� $������ �(��$"�� ��� ���� �������� �($����� ������������������������������������$$����#�'������(��$"��������-�������^�,��������""�������"��������������������������������&���"�����"������������������"��������-������$$"�����������������$$����-������������ "�����"�:������ ���� �� ���� ��� �"����� RU#III� ��$�����#� 8������� �($"������� ��� ����$������"���"� $���"�� ��� ������ "������ "���� ��� ���� ���������� ��� ��������������������� �������$������� ����� �(������� ����$��&���"������ ��� �"���"��$��������������������&���"���������������������"�����������������)��������@PRWA#�

;�� ���� ������ ����-� ����� ����������� ���� ��� ��������� ����� �����������������-� ������������"���� ����#����� ����� � &���� ���:� �� ��"���������"�:��� ���� ��$������ �����:����� ������ ���� ����� ����������� ������ ������������������"���������� ����������-���������������$�� "��������������������������� ��� ���� ��&����� ����� �&����� ����� ������ ��� ���� ����� $������$�&������� ��������������������&����������������"������#��

%�&���"� ��������� ��� ���� ��"�� ��&�� ����� ��� ��:"�� ������ ������ �"�������� ���� ���������� ��� ��������� ����� ���� �����"M��� ���� ���� ����������#�*��� ��:������������������$������������������"���������������@PRVA�6���������"-� $������"���"� ���� $���������"� ����� ���� � ���� R#UII� �������"����� ������� �����������������$��������1����-� ������������� �&�"&���$�������#� ������ ���� ����� ����� ��$"����� ���� ����-� �� "��� ��� ��������� ���� ����� ������ �� �&��� ���� ���� ����#�'� ��������� �(����&�� "��� �� �&�"� "�� ��!����*�-��������� ����&�� ����� ������� ���� ������ "��������� ��"����������-��������������������� ���������������������$�������������:�@PRYA#��

;��������������:��������$������$����$���������������������������$����-� ����� ��������� ���� �����"�����"� &�������� ���� ���� ��������������&����� ������"&�����������1��������#��&��������������������"�&�� �"���� �� �� 6��� ��� ����$�������-� �� �� ��$"�(� ��� "�:� ��"����� ������ ������ �������� ����� �"���� ������� ��� ���� $����"� ��������#�������� ��� �����$"�������� ���� �����-� ���� ������ ,���"� ��������� %������ ��,�%��

Introduction

QX� �

��&�"�$��� �� ����9�����"�� ����� ���,����-� �� ��������� ����� �������� ��� �����"��������"�����"�����������"���#�������������� �������"���������������-� �������� ��������"� ���"�� ���� ����1���� ���� �(������� ���������"�"�������������������""���������������������������������������������"���������������� ��"���������������� ����������$������@PRXA#�,����&��-� ��������������� "�(�"� ��"������ ������ ������ ������ ���� ������� ���� ���� ��� ��� ��������������������������"�#�

8���� �������� $���� ��� &��-� ����"� ������ ��� �� �������""�������M������������������� ���������������������"�&�"������$����#������������ 6��&���������,���"�%� 6���2������� �,�%2�� ����&�-��"�����&�"�$������������9�,-���������� "��������������������"����������":��E'������G����E,����"���������G���������������M�����"����������������� �"�&�"���$��������������� ���� &���� �$��� @PUIA#�'"���������������� �������&�-� ���� �$$�����"�:�� ����� ���� ��$"�������� ���� �(�����&��� ��� ���� $��&���"�� ���� �,�%�������-���������""�����"������������������ �����"���������������$��������&�#�

'���������������������-�����������&���$$���������������� 6���-�������� ��$$��� ���� &���� ������� ��� ������ ��� ���� �,�%� �������������� ��� �����������"�,�%2�������-������&��$"��������$������"��������M������������$������$� �$��� ����� ��� ���� ��"������ ������� ���� ��$����� ������#�8����������-� �� ���� �$$����� �� ��:��� ��� ����������� ��� "�:��� ������ ����������� ������ �� ������ �$���-� ":�� $������� ��� �����-� ������ ���������� �""���������������� ��������������������������������������������$����������������"�#�

RI�

RP��� �

�

�

�

� ' ���%%�7���8��������

�

Objectives

RQ��� �

����"�������������� 6��&���$����������������������7�

P# ���� ���� "������� ��� �� $�����"� ��� �(����-� �����"M�� ���� �����������"�$"�� ��$����������"-� �"���"-�����$������$�"�������&�"� "�������&������$� "���������#�

H# �����($"�������������������������������&�"�$��������"����) ����������������"���������������$������"���#�

Q# ���� ���������� ��� ��� ���������� ���� ���������� ��$������� ��� ��&�����������������������������������$�������������������#�

R# ���� ��&�"�$����� ��� ���� �������&�� ������������� ���"�� ���� �������"��������&���"M��������$������"���"�����#�

���������� 6��&���������$"����� ������ ����� ��� �������������������������������"�" �����������������"�������$������������ �����%9-,�����������$"��������������������������$�����"��������������������������������"��������� ���� ������ $� ""�� �&�"� "�� ���������� ����"� " ������ ����� �����"�����"�� ����� ��� ������ ���� ���1���� ��� ���� ������ ���� 1��"����� ���""���"��"��� �������"�$�� ��� ���� �"���"� �������� ������� ����� %9-;�#��������������������������"� ������������$���������� "����)������� ����������������:"���������1������ 6��&�������&�"�$�����&�"�"����) ������$$������������������� ������� $���"��� ������� ����� %9-6�#� ���� ����� � 6��&�� ���� �������������������$�����������������������������M������������������"&����������������������&�"&�������������������������������������������� �������������������� $��&���� ���� ���� ��� $�������� ���"���� ������� ����� %9-:�#� 8��""�-� ����������� � 6��&�� ���� ���$"����� ���� ���� ��&�"�$����� ��� ���� �� � ��������"�-����� ���������� ���� �������"��&��������� ����$�������� ������������������������������ �����&�������� "����)������� ����������������������"���������$� "����������������� ������%9-*�����%9-5�#��

�

�

RU� �

�

�' ���%%%�7��������� ��

����������

�

Results and discussion

RV� �

���� ������ �� �������� ��� ���� ������ ��� ����� ��� ���� ����� ��"�&�����"������-� ����� ������� ���� ��$�������"� �������"����� ������"�� ����� �� �����"� �����-� ������� ��� ������ ����� "���"�� ��"����� ���� ������$�������"� �$$������� ��� ����"� �"���� ���� ����� ���&���#�������������������� �-� ���� ����-� ���� ����� ��$������ ����� ����������� ���� ���:-� ��� ����"����� ���� ������� ��� ���� ������� ������� �� ������ ��"��� ���� �� ���� ���� ���������� :���"����) ����� �����"����� ��� �� ��&�"�$��� �� ���� ������#� ����-��"����������������������������&�"&��������������-��""�������������������"��������� ���"�� ��&�"�$��� �������&�� ���"�� ��&�� �&��� ���� ��� ��� �$������� ����)����"M����������������������"��#�

%��""� ��"��"��� ���� ���� ��� �"������ �� ���� ����� ���&���� $�����-� ����������������������� ������$���������"�����������������������������&�"&�� ���� ��$������ ����� $������ "����� ��"�� �����"� ������� ��� ��������$������#� ���� ������ ���� ���"���� $��������� ���� �&�"&��� ����� ������($�������"� ���������������$������������$�������"���������������"������""� "�&�"����� ����$�����#�,����&��-� ������&�"�����������)�������$���E���G���&����������������������� "���������������������""�:���-��"�����"��������"��"���" �������������������������&��������������#��������$�������������������&��������$�������&��������� "��$�������������-�����������-���"�������:��� ��� �$��� ����$���� ��������� ������� "����)������� �������������"��������"�������������������������$$"�����#�2���&��-���������"����������� ������ ����� ��� ���� ���������� �� �$����� ������ ���"��� $� "����� �� $������&�����6�����"��������"����������#�'������(��$"�������������&��������������-���$��������&���:����� ��������������&�����"�������$�����������""����� ���� ���������� ���� ��� ���������� ����"� " ����#� ���� �������� ���������� ������� ���� �� �������"� "��������� ���� ���������� ��� ���� $�&"���������"� ���������� ����� �$���$����������$������ ��&��"��#����� " ��������� "����� ������ ��� �� :���"����) ����� ���������� ����� �""���� ��������������� $� "� ��$�������� ��� ����)������� ���$����� ����� ���� �����M��� $�������$������������������"�"���������#���������"������������������ ��������������������� ����������������:�����&����"�$���"����������"����-��""�������� ��� &�"����� ���� �� ������ ��� ������ ���)��������"� ����$����� �������

Results and discussion

RY�

����� ���� "� �������� ��� �� �����"� &����"� $���"����������"���#�'����� �����-�%2=*�����8!*� �"��������������"���������)$�����"��"�������$����������������&��� ����� ���� ������ ��� ����)�������� �������� $���� �(������� ����� ������$�"���������"��"��-���������!2�'������$������$���) ���������$�������&��� ����� �� ����� ������������� ��� ���� ��"��"��� ���$�� ���� �&��"�$$������������������(���"�����#��

������� ���-� ���� ������ ��� ���� ������� $���"��� ��� ��$������ �� �������� ���-� �"����� ����� ����� QIII� �����-� ��� "��� ���� �������� ��� $����&������"� $�� ��� �"���� ���� ���� $��$���"� ��� �� $�"�$������"���) ��������������� ��� ���� ����#� S�"�� ���� "���� ���� ��� �� ����"� $�� ����$����������$���������������������������"��&����������$����������$�����-�����$��$���"�����������������$���������$"�������������"��������������������������������"�$"��$�� ��#�����������$�� ������� �������"����������������$������ �������� �� ��������(����� �"���"� �������-� �� ���� �"���"�������:���������&���"��������������� ������:��������������$����������&���""��"����������� ����������#�8��""�-���&���"M����������������""���!���������������������$"��������������� ��������$���������������������������"�������"�� ��� ��� "�� �� ���� "�&�"� �&��&��� ��� ����� $������� �� ���������� ����"�" �����#� ���� ������� �����M��� ���� "������ ���� $������� �� �������"�"����������������� "��������������$"�(�1�������������������"�����������$��$����������������������"�&�"�������������������������������������������&���$���"��������$�����#�

;����������������-��������������������������� "��$�������������������������������������������������� �����"��������&�������"��������������� �����������������"��&�"&���������""��""�"���$�������#���������������"������������� �$����������������$�������&��������������&���� ����������������� ��� ����&�����$����������� �$��� �������� ���� ��� ���&�� ����� ���������������&��������"�����������$� "�����������������������������$������$�:��#� ���� �������� ��� $����&�� $������� ����� ������ ��1������ ���� ����$�������� ���� �$������� ��� ��������� ���� ������� ��"�� ���� ����� ����� ���� �������� ��� "� ��������� �""� ������� �������"�#� �������� ����-� ��������1������ ���� �������� ��������� �""� ����� ���� ��������""�� ��"�����

Results and discussion

RX� �

$������#� 8����������-� $������� ���� ��"��� �����)��������"� ��"����� ������&�� ������""� ����� ��� �� �&�"&��� �� ��"����� ��&���#�2���-� ���� ������ ���$������ $��"�����-� ���� �������� ���� ��"&��� ���� ���������M��� ���������� �������� �$"���������� ��� �������"� ���������� ������-� ���� �($����� ������������""�� �$��&�� ���� ����"��� �� �""� ������ ��"��� ���� ���� ���� ��� ��&�"������"����� ��&�"�$��� ������ ���� ��1����� ���"���-� ��������� ��"&��� ��������"��� ��� �������"� "��������#� ��� ��"��������� ���-� ������ � ���"� 8�!����� �������� ���� �$"�������� ���� ���� ���"���� ��� ���� ���� ����� ��� ��"&���$������ ���������� ������ ���� ����� ��"�&���� $������ ���"��-� ��� "��� ����$������&�� �&��&������ ���� ������� ������� ����������"� �&�"����� ��� ������"�#��������"����&�����-�������������� �� �����������������&���"��������"�"���������� �"����� ������� ���� :�����-� ��"���� ���$����� ����� $�����)��$"��� ���$����� ������ ������#� ������� ���-� ���� ����� ��� �"��� ������ �������� �������������$�������&����������������""M���"������$�����������"&���$���������������#��

*��$��� �����$�������""� �������������&���$$������-� �����"��������������� �� ��$"�(� ������� ��� ���� ������ ���� ������ �� �($����� ��� �� ������������$"������������"�������������:���"����#�'��������"��������-�������������������������������$�����-���&���"��������������������-�������"�������������"���(�������������"������""�����-������$$��������������� ���������������� �"����� ���-� ������-� ����� ����$� ���� ������ ��&���"� �$������":��������&�������#���������&�����������&�������������""������������������������:����������������"������������������$����������$���������"��������#�2���-� ������&�"�$����� ��� �����������"����� ��� ������ ������� ����������������$��� "����&������������� �� �������"������������ ������������&����$������������"�&����������� �����"������#�'���� �������������&�"�$�������������������"����-������� ������"��������:��������������� ����� ��$���������� ����������� �""����� ���� ���"�M��#��������� ���� "�:������� ����� ���� �������� ���� ���������� ����"� " ����� $��&���"�� ���������-���� ��"�� ������ ������"������ ������� ���� ������� $���"��� ��� ������ ������ ���� ���� ���� ������� �����$�����#� '� ������:� ����� �$$����� ������� ���� ��$������ ���������� �����"�����&�����������������������������&����������&�����"���������������������

Results and discussion

UI�

�����������������$����&��$�"�$������"������$��"��"�����������������������&����$��������"�� ��������������"�����&��������������#�

%�-� ���� ��� �""� ���� :���"����� �$��&�� ���� ������ ������ �� ��������&���F�����"���������$���"��-���������������$�������$������"� �����������������&�����"��"���������������������������$��-�������:���$����������""� ���� �������������� ��"��� ���� �""��� ��� $������ ��������� ��&����#�'$$"��� ��� ���� ���"� ���$�� ��� ����� ��&�"�$����-� ������ ��$�������"��������"����� ��� "�� ����������� ��� ������ ���� ����"� �$��� �� ������ �����$������ � "�� ��� ��� ���� ������� $������ $���"�#� ,���� &����"� $���"������������� ���� ����""�� ����� �������"�� ������� ����� �($�������"� ����� ��-� ������������$��&��������-������&������������&�"� "������������������"�M������ "�������� �� ��"�� $������#�'�� ����� ��� ��� ��� ���-� ��� �""� ���� ����� �������"�������$��������""� �� ����� �������&���""�"�:�����������$"�������#�

�&��� ����� ���� ��$����� ���� �� ���"�� ��&�� �&��� ���� ��� ��&���"��$��� $������� ���� ���� �"��� $������� ������"� �������� ���� ������ ����������������-� �� �� ���"� ��� ��&�� ���"�� $�$�"����� "����� ����� $���"��� �������������� ���� ��������� ����� �������"� ���������#� 2���&��-� �� �������������� ���� ���-� ���� �������� �� ����� UH[� ��� ���� ��$������ ��"�� ��&������������ ��"����� ���� P� ������-� RP[����� H� ��� U� �������-� W[����� W� ��� PU���������������"��P#U[�����������&��:��������������&�"������������������PU��������#�,����&��-��������������������"�� ���������������&�����������-�������&������������������""����$��������"��������#�������$�� "���������������"������������� �� ����������������� ���� ������������ ��������$��������� "���������� ������������������"������������-��&��������"���"����"���������$�#�8��""�-����$"����������"����������������$$"� "������������"����) �����&����"� $���"��� �������"����� ����� ��� ��"�� �� ����� ��� ��$������ ��""�������� $��)���� "����� ��"����� ������� ��� ���� ��������� ��$�����#� ������������� ����� ������ �� �� ����� ��� �&��� ���� $������ ��� ���� ����"� �$��� ��������������������������$��������������������$��������&��"���������$��� "�#�

8��������$�������&����������$���������������������&������"��#�=&���������������&��������� ������"���������������������������������������� �������������PRQ-�$�������������&�� ����"����""�����������������������������

Results and discussion

UP� �

���&���� ��&�� �&�"� "�� ����� ���� ���������� ��� ��$��������"�� UX[� ��� ���������� �������� ��&�� :����� ��������� &�"���� ���� U� "������ ��� "���#�'���-� ���������� ����� ���� ����� ��� ���� �������� �� �""� �� &���� ����"�� ��� ��&�� �� �������$����������� ��� ���� ����"� �$��� $�$�"����� �� ��$������ ���� ���� ����� �������-� ��� ���� �1������ ��� ��� ������� ������������� ��� ���������������� ������ "������ ����"�� $������� �""� �� ������ ���� ������#�'������""�-� ��� ���"���� ��� ���� ��������� ����� ��� �������� ���� :����� ��������������&����������"������������������&���������� ����������$���������&�� ���� �($"����� ���� ����� ���� ��� ��� ��������� �($������""�� ����� ������� �������&�"&����������������#������ ������������)$������"���"�����-���"�����$����������������$��������������"��� ������� ��������������������� ����� ����� ��� "�����-� �� �"��� ����6��� � ���"�� ���� ���� ������ ��� ������������������#� ��� ���� �������-� �� ������"�� ����������""��$����� ����$��� "�����)������������������� ��� �������������������-���������"���������������� ���� ����� ������ $�����#� ��� �&������ ���� �������� ��� ����� ��� ��$����"������ ���$������"�� ���������� ��� ���� �������� ��� �������� ��"����� ����� ��"����) �������"�����������������������������������"�����������������#��

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

channelsreceptors

mixedenzimes0

100

200

300

400

500

600

700

800

900

1000

nu

mb

er o

f tar

get

co

mb

inat

ion

s

number of targets

�9�� ������������������������ �����������:�����������������������������������"��������$���������������� �������������#�*��:��� ����"������������������� ������"����������

���������������� ���������������������#�

Results and discussion

UH�

'����� ��� ���-� ����� $������ ���"��� ������ ��������� ������� ��������� ������������������-��"�������������"�����$��������������� �������"��������������������$#�'�����-� ������� ������ �������� ����� �������������� ���"������� ����� ���� ���� ����� "������ �� ���""� �� ��� ������� ����� ���� ����������������������������������� ������$��� "���� ������-�������������"�����������������$������������&������"��������������""���������������$��������&����������������#�

������ ���"����� �������� ����� ������� �������� ����"�� �� ������� ��� ���������������� ��� ����� �������� ��� ��$������ ���� ������ �M��� :�������&��� $���"��� �&��� �(��� ����� ��� �������� �������� ��$��������&��� ������������ ���"��#� S��� ���-� ��� ��"�� $��&��� ��$"���� ����� $���"����&����� ���� ����� �������� ���� �� ����� ���� ��� ��$�����-� ���&��� ���� ��� ����$��� "�� ��"������ ��� ���� ��$"�������� ����7� ���� �"� ���������� ��$"���������������� ������ �""� ��������� &�"���� ������� ���� ������ ����� ��� "������ ������������ �� :����#� ������ ��$"���� ������� ��"�� ����� �� ����� ��� ������ ���� �����$���"�����������$�����$�����-�������)$������"�������"������������ ������:�� ���� &����"� $���"����������"����#�S���� ���� ������ $��6��-�������"�M��� ������$����������""�������������"�� �"�� �� �����������)$������"���� �����������(������� �����$� "�����-��������� ����� ����������(� �M��� ������ ���� �� "����� ��� ��� ��� ��$��������&��� ���-� �� �&�����-���&��"�������$"��������"�&�"�#�'�$��������"���������������"�����$��������� ������������� ��������� ����� ��������� �($�������"� ������� �� ���� ����������"����$$��������������$����������������������������$�� "��#�

�

Results and discussion

UQ� �

0

100

200

300

400

500

600

700

number of targets

1

501

10000

number of ligands

�*��� �����������������$���������������� ������"����������������������������#��

*��:����"�����������������$"�������������������������������#��

;�� ���� ������ ����-� �� ������ ��� �(����� ��(���� :���"����� ����� �����&�"� "������-���������������������� ������"����)��"����� ������$$������#�'�� ��� ���� �����-� ���� ������ ����� �������"����-� ���� ��������� ��������"�������������������$������ �����"��������&�����������������������$������������ ��������������-�����������"������������������������$��� "����$"������#�8������������"�������������������$$���������&����"�$���"������:�"��� ��� ����� ��� ����������� ���� ���� ���� ��"�&���� ��&����� ����������"�����������������������������������"�� ���� ����������$���"���������������� ��� ��$$���� ���� ������������ ��� ���� ��� ����� �������� $������� �� ���� �������$���"�� ��� ���� ��� ������ ������ ��� ���� �����#�'"������� �������������� ��&�� ��"�� ���� �������""�� ������� ���� ��$������ ����� $������ ���"��� ���� ����

Results and discussion

UR�

:���������)$������"���-�":���)$��������$"������$����-������� ��������������� �$$����� ��������� ����� �� ���� ��&�� �� ���� ����� �$$"����� ��$�#�2���&��-��������������������������������"���&�"� "��������&���"���������������""� :����� ������ �$"��� ����� ��� ����� ��� ������� �""� �&�"� "�� :���"����� ������������($��������������$��� "�������$$"� "�����������������$$����#��

�������������������&������"�-������&�����������������$��&��������������������:���"��������""� ��������$"���� ���($�������������������������������������������������������������������"�����������&��:���"����� ����� ������#� 9��� �������� �($"������ ���� �� �&������ ��� �����������1�������� ���� �($����� ��� ������� ����� �&�"&��� �������&�� �$$������� ��� �����������������"��������������M���������""�����������-�������"�����$������������"���������&���"M��������"��������� ����&�"�$��#�����"�������$-������ ������ ������������������ "�&�"����� ����-��""���� "�� ����������� ����(����������"� :���"����� ���� ���� �������� ��� ���� ��"�&���� ����������� ��� ������&���"��"������������ ������$$��������"�����������������"�&�"#�

UU� �

�

� ' ���%9�7�'����� �����

�

UV� �

�� �����%9-,��

����� �� ���������� �������������� � �� ��������������� ����������������������� ������������ ����

��

������,-����D�)%������-�2������T-�S�� ���,-�&����������+-�������%-�,�������+�

�

! ��&���'����!�����HIIU-�:7�VWQ)VVH�

�

��

� �

U48820
Cuadro de texto
Cases M, García-Serna R, Hettne K, Weeber M, van der Lei J, Boyer S, et al. Chemical and biological profiling of an annotated compound library directed to the nuclear receptor family. Curr Top Med Chem. 2005; 5(8): 763-72.

WX� �

�� �����%9-*�

�

(�'�������� ������� �������������������������������#�

�

���D�)%������-�;$�����:��-�,�������+�

�

(���� �������HIIW-�**7�PVXH)PVXQ

U48820
Cuadro de texto
García-Serna R, Opatowski L, Mestres J. FCP: functional coverage of the proteome by structures. Bioinformatics. 2006; 22(14): 1792-3.

VQ� �

�� ������ ����������(�'����������������+,4/ �4+=� ��+,4.��4,+���

��

9�� ������&����$�������������$������

,���������QUI���1�����������&��&������������-��������� ������������"����������������������������&����(����������$�����&�����������"#������������������&��������9�&�� �������PW�������HY#�

��

�9�� ������&����$����������������$�����

�C���������������PRW�������QY�����������������#�'���������PI������

��$������ ����������� ����%$��-�==��-� ���"���-�8����-� ����-��������-� ���"�-��T-� !������"� ���� *�����:#� ��� ��� "��:� ��� �������� �� ���� ��� �""� ��������"���-�*� "�-�%���8�����-�����-�,��������������"������������������PI�&���� ���#� 8��""�-� ������ ���� ���� ��$����� ��� �������� ����$�� ���$��� "�� ����������������&���7�

��

=���� C���QHQPHP

��������""����*� "�� RQQPPWPRPR

*�����������:������������������������� PPYUU

��������,��$�"��/��&�����?�, �����&�������!��$���8� ���

=�"��9����"��%�$�����������������&��������"�%�����#��/'����M��

!��������������������������"������&�����������"����������8������

8������&�����������"��;�������"� ���������"�����&�������/'������

�

VU� �

�� �����%9-5�

�

�'#!�$������� ����� ��� �������� � ������� ���� ��#�

�

����)%������-������;-�;$������-�,�������+�

�

(���� �������HIPIB�*;7�XYU)XYW�

�

�

�

�

U48820
Cuadro de texto
García-Serna R, Ursu O, Oprea TI, Mestres J. iPHACE: integrative navigation in pharmacological space. Bioinformatics. 2010; 26(7): 985-6.

VX� �

�� ������ �����������'� ������������������+,4. � ��4,+� ��+,4.��4,+���

�9�� ������&����$�������������$�����

�'"����� ����� �������� ��1��� ������ ��&�� &����� ���� ���-� ���� ���� ����

�����������������VUI�����������&����������������$�����&�����������"#������������������&��������8� ����������PV�������RQ#�

�

�9�� ������&����$����������������$�����

�C���������������PRW�������QQ�����������������#�'���������PI������

��$������ �������� ��� ���� %$��-� ==��-� �������-� �T-� ���"�-� 9�����"����-���"���-�*�����:-������"�����8����#�������"��:������������ ����������""���������"���-� '" �1���1��-� ,����-� =�� ����-� ;��-� *�������-� !������ ������$����������������� ����� PI� &���� ���#� 8��""�-� ������ ���� ���� ��$����� ���������������$�����$��� "������������������&���7�

�=����� C����

��&�������!��$���8� ���� PHI���������,��$�"��O��&�����?�, ���� PPY�

��&���������9���,�(��2��"���������������� RR�=�� �������&������� PY�

*�����9�����:�����������������=�������� PW�;���������������� PU�' ������ ���������� PH�

����2� ������&���������+�����"���� PP���&��������"�%������!������� PI�

��&��������������"����� PI�2����������������#�� X�

!�M����#�� V�

�

YP� �

�� �����%9-6�

�

"�� �4� ����!���� ��������%��������'� � ������#�

�

C��"�*-�����)%������-�,�������+�

�

'������'���(����HIPP-�;<*����$������

U48820
Cuadro de texto
Vidal D, García-Serna R, Mestres J. Ligand-based approaches to in silico pharmacology. Dins de: Bajorath J (ed.). Chemoinformatics and Computational Chemical Biology. New York: Springer: Humana Press, 2011. (Methods in molecular biology; 672). p. 489-502.

PIU�

�� �����%9-:�

�

!����� ���������������������������� � ������� � �������

�

����)%������-�,�������+�

�

)*�� ��+�����, ��'������&*�����HIPI���� ������

�

Anticipating drug side effects by

comparative pharmacology �

��������������� �������������������

�Chemogenomics Laboratory, Research Program on Biomedical Informatics (GRIB), Institut Municipal d’Investigació

Mèdica and Universitat Pompeu Fabra, 08003 Barcelona, Catalonia, Spain

�

�

�

Drugs having similar side-effect profiles were successfully shown recently to

have also affinity for a common target. Going one step further, this review

highlights the fact that drugs connected by side-effect similarity have also

similar affinity profiles over multiple targets. Given the current low levels of

completeness of drug-target interaction data, one may expect that the number

of common targets for which drug neighbours in a side-effect network have

some level of affinity is likely to increase in the near future. This observation

suggests that preclinical comparative pharmacology, based on in vitro data but

supported strongly by modern in silico methods for drug metabolite prediction

and affinity profiling, represents an attractive strategy to anticipate clinical drug

side effects.

�������� �������� ����� ������� ��� ���� ���� ���������� ������� ������� �������� ��������� ��������� �����

������������������ ���������������� ��

� �

1. Introduction

!�� ���"������ ����� ����� ����� � ����������� �������� ��� ������� �� �� �������� ������������

�������� ���� ����� �� ���� ����� ���#� ��� �������� ����� �������� ���� ��� � ������� �

���������������� ����������� $%&'� ( "� ���� ����� �������� ����� ���� � ��� �������� ���

� ������ ��������� �������������� ��� ������� �� ��� ��������������� ��������������������

������� � �����"������"���������������������������#���$ &'�)���� ��"������ �� ��� �������

����� �������� ����� �������� ���������� �� � �� ����� ������ ��������� ������� � ������� ��

����� ������ ������� ������ ���� ���� ������������ ��������� � �� ��� ������ $*&'� )����������

� �������� �� ���� ��#���� ����������� �������� ��� ������ ��� � � ������� ��� #��� ������� ��� � �

����� ��������������������������� ���� �����#��� �'��

( ����� ������� � ��������� ��� ���� ��� �� �� ����� �������� ���� � ��� ��������� � ��� ����

����� ��� � � �������#��� $+&'� )��� ����������� �������� ������ ��� ����������� �� ����� ��� � ��

������������� ������� ��������������#������������������������������������������ ��,-.��/�� �

����� ��������������� �������������������� ������ ��������� �������0����������� ����������

��������� �� $1&'� - �� -.�� � ����������� ������� ������ ��� ��������� ��� �� ����� ����

���� ������������������������������������ ������������� ��������� �������������� �$2&'�! �

������������������� ������ ������������������������� �������������������� ��������� �������� �

"������������������������������������������ �"�������� ���������������������������� ����

-.���� ������������#��� ��������$3&'�

! ����� ����������������������������������� #�����"�� ������ �������� �"�����������������

������� � �� ���� ��������� �� ��� �� ������ �-.���������������� ���� ����������� ����� �� ���

������ �������������������������������������������� ������������������������ �����������

������� $4%5&'�6����0�����������#������� �����7��������������� �������������� � ���

8)� � ������� ����� ����� � $%%&� ��� ��� ���� ���� ���� ������ � � 19) :� ��������� ����

��� ������ � ��� �������������������� ��������������������������� $% &'��� ������������ ��

���"�� � �� ���� �������� � �� ���������-.��� ����� ��� � ���������������� � �� ����� ������

�� ���� ���� ������ ����� ������� ������������� ������ �� ���"�� � 15� � �� %55� �������� ����

;����� ����� � �"�����'� 9�"������ ���� ����� �� �������� # �"������ � � ����� �������

������ ����������$%*&�� �������������� �������� ��$%+%2&���#��������#����������� �������

���� ������ ��� ��� ������� ���� ������ �� ����� ��� � ����� �0�� ����� ��� ������ ������� �������

"������������� ����������������� ���'��

<� ����� ���� �������� �� ��� ������ ������� ������� �� ��� �� ������ ��� ������ ��� �����

������������������� ������������������������������ ���0���������0�� ������ �������������

���� ������ ��� �������� ��������� ����������������������������� ��������� ���� �"���������

� *�

������������0���� ��������������������������# �" ���������������$%3 5&'�! ���������"���

���� �������" ������������������� ������������������������������������� ����������������

��������$ %&�� ������������������������"������������������ ����������������������������������

�� �����������������������������$ � *&'�)�������������� ���������������������������������

���� ��������� ���� ���� �������� ��� ���������������� � �� ������� �� ��� ���� ��� ���� ��� ������

���� ���� ��������� ��� # �" � ������ ���� ������ ������� ��� �������� ���� ��#���� �����������

������������������ ��������$ +&'�-������ ����������������������� �������� �����������������

������������ ���������������� #�����"�� ��������� ����������������������� �����������������

�������������������������� ���� �� �� �����������������������������������������������������

���� ����������������������������� ����������������������������� ����������� ��� ���������

��� ���� �������������� '�

�

2. Relating drugs by side-effect similarity

)�������������������� ���������������������������������$ %� &���;��������������������� ��

� ���������������0��������������������"��#�� ����������� ����������'�6������ ������������

��� ��� #��� ��� ������ �� ����������� ����� ������ ����� �������� �� � ��� �������� ������� ���

����� ������ �0���� �� ����� �������'� �����;�� ����� ����� ����������� ����� ������ "���� ���

����������� ������ ����������������������������������������������������������'�6� ������

��������� � ��� ���� ����� ����������� ��������� �0�������� "���� ��� �� �� ��� ��� �� ��� ��

�������������� ��������������������'�)��������������������� ����� �����������������������

"����� ���� �������������� ��������������������������������������������������'�

)��� �������� ��� ����� ���� � �� �������� ���� ����� �������� ������� ��� ������ ��������� � �

�������������������"������������������������������ �� ��� � ���������������� ���������

����������� ����� ������ � �� ���� �������� ���� ��� ���� ����������� ���������� $ 1&'� ! � �����

���������:� ���������'�$ *&�����������0����������-.������� ����������� ��� �����=�����

.���� ! ��0� $ 2&'� ! � �� ������� �����<��������� ��� ��'� $ %&� � ��6����� ��� ��'� $ &� ����� ����

�� ������ ��� ���� <��� �� �������� ���� )��������� ��� -������� ������� � )�����

,<>�)-�)/�� "����� ���� ����� ��� ���� ( ������ �������� ?� ������ ������� ,(�?�/�

�������������� $ 3&'� -���� ��������� "�� �������� ��� ���� ���� �������� ���@���� 9���� ��

,���9/������ �������"��������� �������������������������"������ �� �(�?����������

������������� � �������� ��������� $ 4&'� 9�"������ ����� �� ���� �"�� ����� �������� ��� ���

�����������"��������������9������������ �������� �����(�?��� ��������������������������

�������'�-������ ��������������������������"���������������������������9�������������

�0���� ����� � � (�?�� �0�� ���� ��� ���� ���� �������� (�?�� �� � ���'� 6��� �0������� ����

� +�

���9������A���� ���������� �����B�"����������������������������� �� ���0����(�?��

����� ���� ����� ��� ���� ���� �� � ����� ����� ��� A���� ��� �������� �����B�� A6�������C��

�������B��� ��A�����C��������B����� ��������'�! ������ ���� ���������������������������

������ ���� ��������� ��� �� ����� ��� � �;��� ���9� ����������� ������ �� #��� ��� ��

�������� ��������������������� ���������������(�?���� � �����������������'�

.���� ���� ����� ����� �������� ���� ���������� ����� �������� ������� ��������� �������

.�������� $ D&��.���� ! �������� �> �� �� $*5&������� �E���� $*%&����������� $* &�� � ��

)�0F��� $**&�� ��� ���� @���� �� ��"'�( ����� ������������ ����� ������ ��� ��� ��� ���������

��� �������� ��������� ���������������������������������������� �������� ���������������

��� ����������������������� ������ ����� �������������� ���������������������� ������

������������� �������� '�6����0����������������A��������G���B��� ������� ��� �������� ��

�����������A��������G��������������� ������� ���������B��A��������G����������� B��A�������B��

���A������������B����� ��������'�-������ ������������;������������� � ��������������������

� �������� ��������������� ����������������� ����� ������������������ �������������������

����"�������������� �������������������� ��� ��������������������������� �;��������� ����'�

)�� ����������������� ����������������������������������0�������������-.���������������

����������������������������������� ���������������������'��

6� ������������� ��������������� �������������������������� ��������������������������

����� �0�������� ����� ���� �������� � ��� �� ������������� ������� ����� � ��� ���� ��� �������

�����������������'�(���������������������������� �������� ������� � ������� ������ ������ ��

���������� �������������%������ �������� ���������������������� �����������������������"����

���� ����� � �� �� ������ ��� 5� �����"���'� )�� �� 6����� ��� ��'� $ &� �������� ���� �0������ ��

������������� �������� �� ������� ��� ������ ������ ���� �� �������� ����������� ��������� � ��

�������� ���� ����������� ���"�� � ������� ��� �� �����;�����7������� � ����� ���'� 6�������

���� ��� ����� ����� ��������������#� ��� ����� ��������� ��������������������������������

� ���� �� ���� ������� ������������������������� ���� �� ���������������'�6����0�������

������� �������� ����� ���� � ������������ ���� ��� �� ��������� ����� � ����� �������� � ��

�� �� ������ ����� �� ������ ���� ����� �� #��� ��� ������ �'� ! � ������ ��� �������� ���� ������

���������� ���<��������������'�$ %&�"���������������������������� ����� ����� ������������

������������������"�� �����������������������������"���������������� �����������������

����"���������������������������������������'�! ������������ ����� ��"������� ���������

����� ����������� �� �� ���� ��� ������ ���� �� �� � � ���� ������� �� ���;�� ��� ��� �� ����

������� ��������������'�6����0������������������������������������ �������������������������

������ $ D**&�"���� ��� ����� ��� �� �� ���� ��� ������ ��� %'5��"������� � ������ ����� �����

� 1�

���������� ����� ��� ���� �� �������������������"����������� ������������������� ���� ���

������ ��� 5' '�)�� �� ����������� ����������� ���"�� � �� ���������� �� ���� ���������� ��� ����

������������������� ����� ��� ����������������� ����9������������� ����������������'��

)��� ������� ��� ���� ����� �������� ��� �� ����� ��� ������� ����� �������� ���� ����������� ��������

��������������"�� ������������������������'�-��������������� ���� ������� ��"��#�����������

���������� � �� � ������ ���� ������0���� ��� ����� �� ����� �� ������ �� ����� �����������

�������������� ����������� ������������ ���$ %&'�-��� ���������������0�������6������%�

���"����������� ��"��#������ ���"���������" �������� ����� ��� �"��������� ���������

�� #���������� ����� ����� ��"��#�"������������������������������������� ����'�! ��������

���� ��"��#� �� ��� �� �3**� � �;��� ����� � �������� ������ �� %�D +� ���9� �������

������� �� ��+�14D�(�?�������'�)���� ���� � �6������%������������������������� ��"��#�

�����������������%+��������4����"�����"�������������������������� ��� �� ��������������

"��#����<��������������'�$ %&'�!�����"������������ ������������������������������� ����� ��

��������������������� �������������� �������������'�( ��������- �������)�����������

<�������� ,-)</� ������������� � $*+&�� � �� �� � �� �� ����� � ���������� ��� ,F52-H�

�� ����0� ��������G��� ��� ���G��� ��������0��� ���� ������0��� �/���"��� �������������

,F51-H�G�������� ��� ����������� �/���"��� ������ ����,F52.H��� ���G���� ������� �/��

�"�� � ��������� ��� ���� ��������� ���� ,�52-H� ������G� �� � �� ����������G� �/�� � ��

� ������������,F5*-H������� �� /��� ����� ������ �����������,F51<H�G������ /��� ��� ��

������ ��������� ��,F5+:H����������/'�-�������� ������%*��� ����� ���� �������������

������ ������ �� ����� � ������������ � ������� � ��� ��� ���� ������� ������ ��� ����-)<� ����'�

)�����������������"������� ��#� ���� ���������"��#���� ������ ���� �"����� ���������"� ��

��������� ������������� #�����"�� ������������� ������������������"��������� ����'�

�

3. Similar side-effect profiles reveal common targets

<� ���� �� ������ ��� ����������� ����������� "��� ���� ���� ����� � ��� ��� � � �����������

��������� ��� �������� ����� �������� ���� ������ ���� �� ����� ��������� � �� ��;�� ���

������������� $ %&'�9�"������ � � ������ ��� ��� ����� ��� � ������ ���� �0�� �� ���"����� ��������

����������� ������������� � ������� ����� � �������� ���� ������� � �� ����� ��� �0������ � ��

��������������������� ���� ��������������������������� �� ���������� �������������� ���������

��������<�7�:?���$*1&��E.�E�$*2&��:� �� �.:�$*3&��� ��!(E9-����$*4&'�-��� ����

�����;���������������� ������������������������� ������������������������������ �������� ������

������� ���� ���������� ����� ����"�� ���� �������� �� ���� ������� ������ ��� �� � � ���� ��������

�������� ��� �� ������� ������ ���� ������������ �� � �;��� ��������� ������� $*D&'� ! � ���� �" �

� 2�

������� ����� ������������#�$%2&���������������������"������������������������������������

�� ������ ��� 3�D3D� � �������� �� "���� ��� �� ���"�� � %�%1*� ������ � �� %�423� ��������� ���

"�����1�*%2��� ������ �����������A������B�,�-��������I�2/'�F������������������� ���������

����������� � �������� �� ����"����� �0������ ���� ���� ���� ��� ��������� # �" � �� ���������

� ��� ����5'*3J��������������������� ������ � � ������������������������ � �������� ������0�

,%�%1*� 0� %�423/� � �� ����� ����������� ���� ����� ����� ����� ���� ���������� �����������

� �������� ���������������������� �����������$%+�%1&'�

6����� �� � � ���� ��������� ��"��#� ����� ���������� ����������� �� ��� � �� %+� ������

�� ������ ��� ����������� ������������ � �� ����� ����� ����� ����� ����� �� #�� ����� "����

��� ��������������������������������������������� ����������������������� 1J�� �������������

����������� E� ������ ����"� 5'%� ,������� � � �������� � � 6������ %/� $ %&'� 6���� ��� ����� "����

�� ������������ ������������# �" ����������������������������������������� #����"�� �

G������ �� �������G��� ��"������ ����������� ������������� �������� ������� �������������

���# �" ����������� ���������������������$ %&'�! ���������������������������������"���� �

����"��#����<��������������'�$ %&��� ������������������ ���� ������ ���������������������

���� ���������������� ���������������������������'�)����"������ �������������������������

�����G��� ���������������� ��9%����������,�K��L�D'%/��G������ �"����������� �������������

� �� ��"� ����������� ���� ���� "��� � ����� ��� �� ,�K�� L� +'2/'� - ������ ��� ���� �� #��

��� �������� ������"��#�"������"�� ��� ���G���� ���� ����0� ����"��������� ������������

� � ���� ��"��#� ����'� ! � ����� ������ ���� �������� ������� ��� �� ����0� �� ��� ���� ������

���� �� �� ������ � � ��� �������� ,�K�� L� 3'+/� � �� ����� �� ��� �� ���G��� � � ����� �������

�� ���������"����� �����������,�K��L�1'%/'��

6������ ��0������������"�������������������� ������ ���������������������"�� ������

�������� ������������������������������������������������������������������������ ��"��#�

����'� F���G��� �� ��� � � � ���������� �� ���� �� ���������� ��� �� ���� �� � ���� ���� ��� ����

������ � ����������19) -�,�K��L�4'%/�� ��������������0������������� ��������� �������������

������� ��� ���� ����� ���������'� ! � ���� ��"��#� ����� ,6������ %/�� ���G��� �� ��� �� #��� ���

�����0��� ��"����� � ����� ���"�� ��"������������ ���� ���� ���� 19) -� ,�K��L� +'D/'� ! �

��� �� �����0��� �� ��� ����� � � � ���������� �� "����� ���������� ����� ,�K�� L� 4'+/� � � ����

���������� �� �� ������ � � ��� �������� ,�7�)/'�( ���� ����� ��� ������ �� ���������� ����

����� ���������������0������������������������ ���������7�)'�( ����� �������������� �

�������������������� �������� �������"��������� ����� ������������������������ ���G��� ��

���"�������������������� ���������7�)�,�K��L�2'3/'�6����"� ��� �����������������������

���������������� ��E��#� �� ����������������������������� ��.*����������,�K��L�4'+/�� ��

� 3�

��������������� ���������������������� ���������� �������������������'������� ������� �����

"����������� ������������������������ ����������0��� ������������������ ��������.*��� ������

� ����������0������ �������� �������� �������� �����������"��#����<��������������'�,�K��

L� 1'3/� $ %&'� >�������� ����� ����� � ������� ������������ ������ ���� ���� ��� �� �������� �������

��� ������ ����������������� ���������� ������������"�� ��������� ��������������������

�����������"���� �������������������������������'�

��� ���������� ����# �" ���������������������������$%2&��� ��������������������

������ ����� �������� ���� ��� ������ �� ��� �� �� ���� ������� ���"�� � ���������� � � ���� ����

������� ��"��#����� ������������������� ����������������'�-����� ����������������$ %&�������

�������� ������� ������ � ���� �� ���� � �� ������� �� ����� �������� ���� ��� ������� ��������

���� ������� ����� �������� ����� ��� ����� '� ! � ����� ��������� � � � ������� ��� ���� ���������

�������������� ��������������������%+�������� ����� ��"��#������� �����������������������

����������������������������������� �� ��������'�! ��������������������������������� �������

�������������������������� ����,M15�μ�/����������15J������������������ �������������� ��

9%� ��������� ,%5/�� ������ � � ��������� 19) -� ,D/�� ������ � � ��� �������� ,D/�� ������ � �

��������� 19)%-� ,4/�� � �� ���� ������ ��������� α%-� ,4/'� -�# �"����� �� ����� ���������

���������� ����� � � ����������� � �������� �� ���� ���� ����� ���������� � ������ �0����� �����

�� �� ����� ����� � � �������� �� ���"�� � ������ ����� ������ ���� ���� ��� ��� ��� �������

$%+�%1&'�

)�� ����� �� �������� ��� ����� ��������� �� 6������ *� ����"�� ���� ������� �� ���� ���� ����

���������� �������������� �������������������������������������� ����� �6������ ��� ����� ��

�����������������;�� ������������ ��� ����������������� ����"����� �������� ����������

�������������� ������������� � ����������19) <������ ���������������α -�������� ��.*�

���������� � �� ���� ������ �� ,.-)/� � �� ���� ����� �� ,F7)/� ��� ���������� ���� "�����

������� � �������� � ����� � � ������ ����� ������ "��� ���������'� ! ������� ����� ����� ��� ����

��������� �����������, �������19)%-��19) -��.-)��F7)��� ���7�)/������������������

��������� � ��� ���� �� �������0��� � �� ������� ���������� � ���;�� ������������ ��� $+5&'�

-�� �� � ��� ���������� ���� ������ ����� ������������� ������� � �������� �� ,�-�������� I� 1'5/�

"���� �� �� �������� ������ ��� � ���� ����������� �������� �������� ,����� ����/'� F���� ������

��� �� ���� ������� �� ���� ���� ���������� �� ��"� ����������� � �������� �� ����� � � # �" �

,���#��� "���� � � ����"� � � 6������ */�� ������� ���G��� �� � �� �����0��� �� "���� ����

������ ��.*������������ ������������"�������������� ������� ����������� ���������.-)��

F7)��� ���7�)'��� ���������@���������������������� �������� ����������������������������

� 4�

��� �����������"�� ��������� #������������������������������ ������� ��������������������

���������� ��� �������� ��������#������������ ��������0������ ����������������� ��� �����

����������'�)��������������������� ������� ��� ������ ��������������"�� ������ ����������

� � �� ����������� ��"��#� ������ ������� �� � � ����������� �������� �� ��� ����������

������������������������������������������ ��������������������'�

�

4. Expert opinion and conclusions

)��� ���������� � ����� ������ �� ������ ��� ����������� ����������� ������ ���� ������ ����

��������������������������� �� ������� ����������������������������������������������

��� ����� ������ ���� �� �������� ����������� ��������� � �� ����� ����� ���������� �� �� �� #�

���"�� � ������ ����� � �� ��� ����� ����� ������ �������� $ % *�+5&'� )����� ���� ��"�����

�������� ��������� �� ��� ���� ����� �� ����������� ��� ������� �� ���� ����������� ���"�� � �����

���������������������� �� ���� ���� ������ ��������������� ������������� ������������������

����������������� �������� �������������������'�

=���� �������� ��� ������� �� ���� ����������� ���"�� � ����� ����������� ���������� ���� ���

�������� "����� ���� ��� ��#�� � ��� �� ��������� � ����� � � ���� ��������� ���#� ,�� �� ����

��������� ��� ����� ���� ��� ������/�� ����� �� �� ������ � ,���� ����� �������� ���� �������� ���

�������������������� ��������/��� ���������������� ���� ���,��� �;�������������������

������������� ���������"������������������� ��� ������� �� ����������� ���� �� ����������

����������� ��� �������������/'�<��������� �� ������������������ ����� ����������������� ����

��� ������������������� �'�! ����������������������� ������������ �������������������������

����� �������� ����� ����� �������� � �� ������ ���;�� ��� � � ����� ��� ��������� ��� ��������

������� �������������"����� �������������� �$+%&'�! �������� �������������� ������ ����������

���� �� ��� �������� �� ���� �;���� ���� ����� �� � �� ��� ������� ��� ������� �������� �������

������� �� ��� ������ ���� ����� �0������� �����#�� ���������� � � ���� ������� ����� � ��������

����������� ��������������� ��������-.���$3&'� ! ���������� ������������� ����� ������� ����

������ ����������� ����������� ���� �������� ��� � � � ������� �� ��������� ��� �������� �����

�������� ������������������ �� ���� ������������������� ������������������� �����������

�����������$ %&'�

=���������������������� ��������������������"�� ����� ������������������ ���������� ��

��"������������������� ��������0������ ���������$%+�%1&������ ����� �������������� ��

������������������ ���������������������������������������� ���������������������"�������

#������������������$+ �+*&'�E������ ��� ���������� ��������������������� �����������������

��������������������������������� ������� ������ ������������������;�� ������-.���

� D�

� � ��������� ��������� �� $ +�++&'� 6��� �0������� � � ������ ��������� � ������������

������ ������������"��� ��� ������ ����������� ��"��������������������������������� �

������ �� ������ ���������� ��������� ��������������������� �����������������������������

�������� ���� ��� ���� ������ ��� ����������� ����� "����� �����"���� ��� �� �������� ����������

������ �� �������������������'�! ���������������� ����������������#��� ����� ��������� �

����� � � ���������������������������� �� ���� ����������� �������� ����� ������ ���� ���� �����

������������������ ��������������������� �����������������������������������������������'�

)������������� ���� ����������� ���� ������������� ��� �� ������� �� ����������������� ����

����19) :�����������������F����������������������� ���� ������� ��������� ����������

�0�������������������������� �������� �����$+1&'�-������ ���������� �������� ������������

��������� � � �� ��� ��������� � ���� � �������� ��� ����� ���� � � ���� �� ������ $+2&� � �

�� ����� �"����������������E+15�� G������������������� ������������ ��������-.���

$+3&'�

:����������������������� ��� ���������������$+4&'�-������ ������������������ ������� ��

"���� � �� �� ���� ������� ������ ��� ��� ���� ����� ������� �� ��������� ��� ����� ������������

���������� ��� ���� ������� ���� �� �� ������ "���� ��� ����� ����� ���� ���� ����������� �

� ��������'�)�������� ������������� �������"���������������������������#� �����������������

���� ����������� �������� ����� �������'�)��� ������� ��� ������������������������� �������� ���

������������������������� ����� �� �������������������������������� ������� �����������

����� ������� �'� -�� ����� ��� "�� �� � �� #� �� ������ � ������ � ��� � �������� �� ��� ���� ��#����

� ���� ��� ��� ����� ����� �������� � � �� ����������� ������ ������ � ��� ���� ����� �� ��������� '�

9�"������ ����� ������ ����� ������������ �� �"��� ��� ����#���;������ ���� ���"����� ������

����� ����� ��� ���� � �������� ���� ����� ������� ��� � ���� ����� ��� ������ � ������ �� ���

� �������� �'� )�� �������� ����� ;������ �� � ��"���� ���� ��� � �������� ��������� ������������

������� ���� ������� ����������� ����"����� � �� � ��������� �� ����� ����� � ��� �� ��������

��������� ��� ����� ����� � $+D�15&'� 7������� � � ����� �������� � ������ ����� ���� "��� ����

� �������� ������������������������������ �������������$1%&'�

�

Acknowledgments. )���� ��������� "��� ���������� ��� ���� ��� ���� ! �������� ��� ������

<������ !!!� � �� ���� �� �������� ��� <�� ���� �� ! �����N � ,���@���� :!> 5545 * D/'�

6� �� �� "��� ��������� ����� ���� 7������ � <���� ���C�� 3��� 6����"��#� E���������

,6E3O 553 5%*/�� � ���� ��� �� ������� �� �'� %14+3� ,7(-.�� ���@���/�� � �� ����

! �������������� ���! ����������� ������� ��������� �� �'�%%155 �,�)>P����@���/'

�

� %5�

��� ����������

%' 7.=-�.�� !���-�>F�>F� �KH�-������� ����� ������� �H� ���� ���� ��� ���� ������ � ���� ����� �'�

� �����, 555/����H% 11% 1D'�

' !-<>�!F!�K���K�-(��� ���� �>.7F�.�� ��� �H�=�� � ����� ������ ��� ���'�� ����� , 553/�

���HD31D33'�

*' -�9:(�F�))��)9>��K:H�.���� ��������� � �H� ��� ����� �� � ���������� �� �"������ ���� �0���� ��

�����'�� ��������������������, 55+/��H23*24*'�

+' 9-(:7F� ��� :-)7� -H� .������ � �������� �������� ���� ���� �������� � ��� �������� ��� ��� � � ����

���#��� ������'���������������� ��, 55D/���H*+**13'�

1' 9Q��-�K�?��R-F��>>)977�)�-<H�E������������� ��H���������� ���� ����������� ��� � ��

�������������������'���������������� �� ����, 554/���H3+*31 '�

2' -�-S!� 6>�� �(F� 9�� E7��S� �H� -������� ����� ������� �H� �� �����"� ��� ������ �� �������'� ��� �����

�� �� ����, 555/���H%5D*%%5%'�

3' )�!6!�T���E-�!7F)7�-��<>?>�-�E����� �H�.������ � ��� �������� ���������������������������

������� ����������� �� ��������������� ��H�"�������� �������� ����U��� �� ������������������ ��

, 55D/���H%%32%%4+'�

4' K�7��-�<���9>�R-)9�.���>-?�K!��?���� �H�E������� ��-.�7������������� ��������������H�

����:��E�� ����������'�������!�����������������������, 55*/��H+35+45'�

D' �>)9�:?���9766?7��.���K�>7V7�=KH������������� ����������������������H������������� �

������������������������������������ ������G����� ��'�� ��������������������, 55+/��H*1**1D'�

%5' =9!)7:�7-.����9-�>F����:>�-F!<�.��(�:-F�?H�! ���������������������������������� �H�� �

���� ��������������������������������������� �'���������������� ��, 551/���H%+ %%+**'�

%%' �-F(!F7))!��<�� )�!�)-F!6!�>(V!��H� �7�� ���������� ��� ��� � �� �������� ����������'�

� �����, 552/����H+2*+2D'�

% ' �>)9�:?H�.������ ������������������������'������������"����, 553/����H2D'�

%*' <-�7������7�)�7�� �H� -� ������� ����� ��������� ��� ����� ���������H� ������ � � ���������������

��������'���������������� ��, 55D/���H+3D+41'�

%+' �7�)�7�� ��� �7>�!E(!�-FW� 7�� R-?R7�.7� ��� �>?W� �RH� .���� �������� ���H� ����

-��������������������������� ��"��#�'�� ���#����������, 554/���HD4*D4+'�

%1' �7�)�7�� ����7>�!E(!�-FW�7��R-?R7�.7���� �>?W��RH� )��� ��������� ��� �����������

� �������� �H�������������� �� ���� ������������������ �����������������'�"���#�������, 55D/��H%51%

%513'�

%2' R>)�!���7�)�7���H�.���������� ��"��#�'�"���$� ��, 5%5/���H%5%+'�

%3' K7!�7�� ���� �>)9� :?�� -��:�(�)7�� :F� ��� �H� ������ �� ������ � ������������� ��� ���� ��

���������'�� ���#����������, 553/���H%D3 52'�

%4' �7>�!E(!�-FW�7���7�)�7���H�?��� ��������������������� � ������������� �����������

��������'����%��������&�����������������������, 554/���H22D232'�

%D' <-�E!??>�� ��� K(9F� ��� -R!F� -<� ��� �H� .���� ������� ��� ��������� � ��� �� �����������

����������'���������, 554/����H 2* 22'�

� %%�

5' K7!�7�� ���� �7)>?-� R�� !�=!F� ��� ��� �H� E������� �� �"� ���������� �������� ���� # �" � �����'�

� �����, 55D/����H%31%4 '�

%' <-�E!??>�����K(9F����-R!F�-<���7F�7F�?���:>�K�EH�.�������������� ��������� ���� ��

���������������������'���������, 554/����H 2* 22'�

' 6?!�!� -6�� ?>!F� =)�� )9-.7!>� E6�� R>?K�-FF� �-H� - ������� ��� ����� ������ �������

������ ������� #������������ ������������������������ ��'�� ���������#����, 551/��H*4D*D3'�

*' :7F.7��-���<97!:7�����?!<K��������'H�- ����������������������������� ��������������� ����

�������������������� ��� �������������������������������������������'�����"�������, 553/��H42%

43*'�

+' R!.-?�.���7�)�7�� �H� ! � ������� ������������ ������� �� ��� � ������������ �����'�"��� $� �� , 5%5/�

���������'�

1' 97F7-��<��:>(�8(7)�<��?!??>?7�?>(X)�-��.7>(?7)�E���-(?7F)��<H�:����� ��

� � � ������� ��� �������� ����� ������� �� ���� ���������� ��� ��� �� ������ � � � �������������� ��'�

��������#����"����, 552/���H3+4323'�

2' =����� .���� ! ��0H� ����HOO������ �������'���O��������Y��������O���� ��O���� ��Y��������O�

GO"����Y����Y� ��0�

3' :>.7F�7!.7�� >H� )��� ( ������ �������� ?� ������ ������� ,(�?�/H� � ������� �� �����������

����� �����'��������'��������, 55+/���H. 23. 35'�����HOO"""' ��' ��'���O��������O����O�

4' ���9H�����HOO"""' ���' ��' ��'���O�����

D' .�������H�����HOO��������' ��' ��'����

*5' .����! �������� �> �� �H�����HOO"""'�����'����

*%' ����� �E���H�����HOO����� �����'����

* ' ��������H�����HOO"""'��������'����

**' )�0F��H�����HOO��0 ��' ��' ��'����

*+' =9>�<���������� ��<� ��������.���������������������������������� �������-)<�������������� �� ��

...������ �� ��� 5%5'�>����� 55D'�����HOO"""'"����' ��

*1' <�7�:?����������,����HOO"""'���'��'�#O��������/�

*2' E������������.��������� � ��E������H�����HOO����'���'� �'����

*3' ?!(�)��?!F�S��=7F�P���>��!�7F��F��!?�>F��KH�:� �� �.:H���"�������������������������

�0������ ������ ������� ��� ������ ���� �� �� �� �� ���� �����'� ������� '���� ���� , 553/� ��H.%D4

. 5%'�

*4' 9-��-��-���9!??���-���>��7��7�������'H�!(E9-�.:H�����!(E9-���������������������

������������������� ���� ���� ���'��������'��������, 55D/���H.245.241'�

*D' -�<!-�7�F-� ��� (��(� >�� >E�7-� )!�� �7�)�7�� �H� �E9-<7H� � ���������� �������� � � �

���������������������'�#���� ��� ����, 5%5/���HD41D42'�

+5' 6?!�!�-6��?>!F�=)��R>?K�-FF��-H�.���������������"������������� ������ ������� �

��"��#������������'����"����������, 55D/���H45*445+2'�

+%' K(9F����<-�E!??>�����?7)(F!<�!���7F�7F�?���:>�K�EH�-���������������������������������

��� �����������������������'�"��������#����, 5%5/��H*+*'�

� % �

+ ' 7K!F������7�)�7�����)7�)-�:H�! ���������������������������������������H���������������������

���� ������� � ��� ��������� �'�#�������� �� ����, 553/����HD 5'�

+*' �>F-F� .H� ��������������� ����������� ��� ������� ����� �� � �� ���� �� ������� �'�"��� $� �� , 5%5/�

��H%32%43'�

++' S-F�?��?(>�9��<97F����P!F�8��97�?H���E���-H��� ������� ���� ������������� ������������� ��

������������ ��� �������� ������������� ������� �� ������� �� �� ������������������� �� �������������� �

� ���������'������'��������, 55D/���H=+52=+% '�

+1' �7)>?-�R���>)9�:?H������ � ������������������������������������������������� ��������������

� ������������������H�������� �Z�� ��� C'��(�����!����������"�� %����(�����, 551/��H*33*43'�

+2' -F-�!� ���� :-!??!7� )-H� :����� �� ����� ��������� ����������� ��������� � � �� �� ���� �����

������������'���������������� ��, 551/���H3%%3%3'�

+3' E!��>9-�7.����E-�K�:KH�<����������E+15�� G������������������� ���������������

������� �'���(�������, 55*/����H ** '�

+4' K!)-F>�9H�-������� �������������������������������� �������������� '�� ��������������������

, 553/��H 5 %5'�

+D' �<97!:7�����<97F�:���!?!K������ �H��� � �� � ������ � ��������������������������������������

�� ��������"���� �� �������� ����� �������� ��������� �������� � ������'� ��� ������ $� �� "����� , 55D/�

��H*54*%3'�

15' )-)>F7))!�FE��?!(�)��-?)�-F��:H�E������� ����������������������������������������������'�

)������#����, 55D/���H *4'�

1%' !F�:(�����=!??-�.�96H�� ������ ������� ���G��������� �H���� ����� ��� ������������ �'�

�� �������, 55D/����H 33 43'�

�

�

������� ��!�

��������������� �[�E�.����������������\�E�.�[�<���� ����������

<�������������?��E����������<��������'����N�4��5455*�:������ ���<����� �������� �

�\�-������������������ �� ���

<������ ������?�������������������� E������� � �:���������� ! ���������� ,�!:/�� ! ��������� �������

�C! ���������N��]������ ��( ����������E������6������.������-��������44��5455*�:������ ���<����� ����

���� �

)��H�^*+�D*�*%251+5_�6�0H�^*+�D*�*%25115�

7����H�@�������`����'���

�

� %*�

"#$%&'�(�)*#+,-�

�

Figure 1. Network of drugs connected by side-effect similarity, with focus on a particular

network path composed of 14 drugs (left). For five drug-pair connections, the probability of

sharing a target higher than 25% and side effect similarity P value below 0.1, as reported in

reference [21], is also shown (values in italics).

Figure 2. The process of transferring the primary target of a drug to its side-effect neighbours in

the network path.

Figure 3. The bioactivity profiles over ten targets of four drugs connected by side-effect

similarity (see Figure 2). The dashed line indicates the activity level of 10 μM. Arrows mark

current missing data for which low micromolar affinity is predicted.

�

� %+�

FIGURE 1

0.30

0.32

0.40

0.570.54

� %1�

FIGURE 2

nefazodone5-HT2A=8.1SERT=6.7

fluvoxamineSERT=8.45-HT2A=4.9

D3=?

pergolideD3=8.4

SERT=?

fluoxetineSERT=8.2

D3=5.7 (from ref. [21])

SERT

5-HT2A

D3

SERT

SERT

D3

CF3

N

O

O

CF3

O NH

N

NH

S

N N

NO

O

N

N

Cl

� %2�

FIGURE 3

4,0

5,0

6,0

7,0

8,0

9,0

pA

ctiv

ity

5-HT1A 5-HT2A 5-HT2C a1A a2A D3 H1 DAT NET SERT

Targets

4,0

5,0

6,0

7,0

8,0

9,0

pA

ctiv

ity

5-HT1A 5-HT2A 5-HT2C a1A a2A D3 H1 DAT NET SERT

Targets

4,0

5,0

6,0

7,0

8,0

9,0

pA

ctiv

ity

5-HT1A 5-HT2A 5-HT2C a1A a2A D3 H1 DAT NET SERT

Targets

4,0

5,0

6,0

7,0

8,0

9,0

pA

ctiv

ity

5-HT1A 5-HT2A 5-HT2C a1A a2A D3 H1 DAT NET SERT

Targets

nefazodone fluvoxamine

pergolide fluoxetine

PHQ�

�� �����%9-;�

�

����� ��������������������� ���������

�

����)%������-�,�������+�

�

, ��,������&����HIPI���� ������

� �

����� ��������������������� ���������

��� ���� ��� 4��� � ��.�����/������∗∗∗∗��!����������� .�� �� ��� /���� ��� % � ��� �� (��������� ��� �������

01/�(2�� �������� '�������� �3������������� '4����� ���� 5���� ������ %����

#�� ��� %� �� ��� /��� ��� (��4������ ,�� � ������ � 66�� 7677"� (� �������

!���������$�����

�

!���� ���

'������ ��� ���� "������ �������� �� ���� �� ���� 9�2�,�"��"��� � ������

%���������������9�����:-�����$�������� ��������������������"�$�� ��

����"����&�-������������-����������� �"���PII��,���������$����������������-�

��� ���� ������ ����-� ��� "����� PI)��"�� ��"��&��� ������� ��"����� �������#� =&���

������� ���� ���� � 6��&�� ��� ����"� �"���� ����&��� ���� ���� ��� ��"&���

"��""�� �����"� ��$�����-� �� �� ���"�� �($����� ����� ���� ����"� $�� ���

���� �������� ���� ����� �$������ �� ������� ��� �����"���� ��� ��������

���&��������������$����#�2���&��-�������"������"���������������&��"�������

��"�� PR#R[� ��� ����� ���"�� ����""�� 1��"��� ��� ����"� $�� ��#� ,����

���������"�-����������������������$�����������������������1��"����������"�

$�� ��� �� ��&���"�� ������� ��� ����� ���������� ��� ���� ������� $���"�� �&���

��"�$"�������������&�"� "�#�����������"������������� �����������������

���"���� �� ����� ����� ���� ������� ������ ��� ����� �� �&��"��:��� �����

��$������ ���� $������"� �����$���� �������#� ���� ������ ����� $�� ��� ��

���"�� �"���"� ������� ��� $�� ��� ��� ������""�� �� ���� �"���"� �������

�������������������������������������������������! ������������ 8�,������-�+#��6�������_��#����

�

�������1������6�����������������������������������"��&�������1��"�����

���""���"��"����������"�$�� ��#�

�

� �

������� ������ ��������

���� ������������� �� ���"")��"��"������"����� ���� ���� ��&���"� �������

��� �""� ������ $������� ���� ���� $��$����� ��� ���� ��� ���� ������ ��""������ ����

����"� �"�����������������������@PA#�%�������� ��������"������"�� ��

���&��� �������� "����)��"�� ���������� ����&��� �&�"&��� ����"� ����

������������������ ����"�������"� "�&�"#������"�-� ������� �����PH���������

��&�� ������� ��� 6��� �������� �� ����� "��� ���=���$���� �������������� ���;$���

%������� !"�������� ���� �����"���"���� �=�);$��������� ����� �� ������"��

��"����� �������� ��� $��$�������� $����� �HIIX)HIPP�� @HA#� ��� �� ���� �����

��&����������-� �����%�9�����"��������������2��"����9�2��6������$"���������

$"���$������HIIR)HIIY��������,�"��"���� ������������������,��������&��

��$����� ���� ���)�������$��� �������� �2�%�� ������� :����� ��� ����

,�"��"���� ������%���������������9�����:��,�%�9��@Q-RA#�S���� ������

�&�� �����-� ��,�"��"��� � ������ %��""�,�"��"�� ��$������� �,�%,��� ����

������� ���� �������� ������� ��� �$����&�� ����"� ��� ��� ��� WXP� ������-�

�&����� PVP� �������� ���� HX� $������$� ������� @UA#�'""� ���� ��������� �����

����������""���"��"������� �����"������������������������ ����$�����

���� ������$���������������$� ""������ "����!� �����@WA#�

����������������������"� �"��������&����������������������$�� ��

��"��"������ ��������� �������������� �"���"��������#�����������$��-�����

�������� ������� ��� ���� ,�%�9� ��&�� �""��&�"�� ��������� �"������ WR�

���&�����""���"��"����������"�$�� ��-���������������������������

��� �������������������������� ����$���"���������"������������������

���&�����($�����@UA#�2���&��-���:�������������������(������������&�"����

���� ����$��������"�����$������"���"�$��$������ ����������""���"��"��

����"����&����� ������������������"������������"����$�� �� �"����������"��

���-�����1����"�-������������������&�"&���������""���&�������"�������������#�

'������ ��� ���� "������ �������� �� ���� �� ���� ,�%�9-� ��$������ ��� ��

�

��������� ��� ����"� $�� ��� ����"�� ��$"�� ���� ���� ��""����� �����7�

������� �"���PII�,��$'������`�V#I�� ���� ����$������ �������������� "�����PI)

��"�� ��"��&��� �$%�"��&��� `� P#I�� ������� ��"����� �������� @UA#� ������ $������

������"��&������������������ "�������$���"������ �����������:�������� "�����

������ "�&�"� ��� �������� ����� ���� �"���"� ���$����� � ���&��� �$��� �����

����������"�$�� �����������������������������������������$�������������

������� ����� �������"-� ������ �����$����-� ���������� ���� ��"�$"�� ������

$�������@VA#�

=&��� ������� ���� ��� ��� ����"� �"���� ����&��� �� ���� ��� ��"&���

"��""�� �����"� ��$�����-� �� �� ���"�� �($����� ����� ���� ����"� $�� ���

���� �������� ���� ����� �$������ �� ������� ��� �����"���� ��� ��������

���&����� ���� �����$����� @QA#� S��� ������ �($�������� �� ���-� �� ��

�$������� ��������������� �����������������&���������� �����$����������

�� ������ �������� &�� ����"����� ��� ��"�$"�� $������� ������� ����� ��������

��"��&�� ��������� ���� �� ���"�� ������� @Y)PHA#� ���������-� �� ���� ����(�� ���

����� ���&���-� ������� $������ ���� ��"��&��� ������ ���� ���� ��������� ���

����"�$�� ������������ ��� �� ��������������"�� ��� ������� ����� ��$������

�����������$���"������$������"������$���������������������&��"��:��#��

�

���������>� ����� ������� ��������?�

*������������������$�&"�����������$�������������"��$������������ ����

���������""�� �$������ ��� ������ �����$���� ������ ���� ����-� ����� ��� ��

��������������������$��������&������������""���"��"��������������������"�

$����� ����� ��� �� $������ ������� �� ���� ����(�� ��� �� �"���"� ������#�

'�����"�-������"�� ����������������($"������������(�����������"��:�����

��������"�"��������$������������"��&�����������������"�$�� ��#��

��� �&�������� ���� ��$��-� �� ���� ��� H-URY� ������ ���� ��$"��� ����� �����

��6���$� "���������-�����"�-���=,��� �@PQA-�!*%!�@PRA-������*��@PUA-�

� �

���� ��!2'�� � @PWA-� ����� ���� PX-HUI� ����)������� ���������� �&�����

P-HRQ� ��&���"� �������� ����� �(������#� ��� �� ������ ��������� ����� ������

��$�����������������"������)��������������������������""����������������

"����� &������ ��� "� ��������� ����� �"�����"�� ��$������ ����� �� ��"�$"��

"����$�� ������� ���� ����-� ������������� ���� ��������� ��� ���������

����� �� ��� ����#� ��� ���� ���$��-� �� �� ����� ���� ��������� &�"���� ��� ���� �����

��������� ��$�������(��"�� ��������� ������� ��������������������� ���������

���� ����������������� �����-�����&���������������&�"��������������#�8����

��������� ��$��� ����� ��������-� ����"�-� $T-� $T�-� $��UI-� ���� $=�UI#�'�

��������� ���"���� ��� ���� &�������� ������ �� ��$������ ���� ��"�$"��

��������� ����� ��� ���� ����� ��$�� ���� ���� ����� ������� ��&��"��� ��� �&������

��������� ��&����� ��� �#� I#U� "��� ����-� ����$��&�� ��� ���� &�"��� �����#� ��� ����

���-� �� ����"���� Q-WPY������ ����������� ��������� �������������� �&��� �������

��"�$"�� ������������� ��$"��-� ��$����� P-WQQ� ����������� ��������� $T�

����-�P-WIX�����$��UI�����-�QQP�����$T������-�����RU�����$=�UI�����-�����

�������&�������$��� "������ ������$��������� ������������������������������

����������������������#�

'����� ���� Q-WPY� ������-� P-QWU� �����$������ ��� ����� ������� ����� YXI�

�������QR#X[������������"�� ���������������������� ��$����������"�� �������

���� �&�"� "�� ���� ����� ��"��&��� ������ ��"�� ���� �� �$$"��� ��� ����#�

���������-� ����� ���� �&��� ��� ���� �������� H-HUQ� ����� ������� ����� P-WUY�

������ �������� ���&���� ������"�$"�� ������������� �&�"� "�� �� ���� $� "�

�����#�8������������������$��$���$��&�-�������"����PIYQ��RY#P[�-�PIQI�

�RU#V[�-�PHW��U#W[�-�����PR��I#W[�����������$�����������������$T-�$��UI-�

$T�-� ���� $=�UI� ����-� ���$��&�"�B� ����� �� ������� �&������ $���$��&�-� �����

������ UVH� �HU#R[�-� YUW� �QY#I[�-� ���� YHU� �QW#W[�� ������� ���� ���������

������������������H-�Q����U-���������������U��������-����$��&�"�#��

���� ��(�� ���$� ���� ��� �"���� ���� �""� ����� ������� ���� ��&��� ������ �����

����������������&�"������$'������`�V��������"���������������#�'�����"����P-HXQ�

�

����� ������� �����XVI������� �������-����� �"����� UU[���� ����� �VIW�� ����

��$����������"�����$T�����#�S������$��������$"�������-������������HVQ�

�HP#P[�-�RRI��QR#I[�-�����UYI��RR#X[������������������������������������

����H-�Q����U-���������������U��������-����$��&�"�#�8��""�-��$$"���������"�������

$%�"��&��� `� P� ������� ����� $������ ������� ���� ���� ������ ������� ���� ����

�����������������&�"� "�-�������"��������RPR���������������$��������&�����

QWY� �����-� ���� �&��� UV[� ��� ����� �HQV�� �������� $T� ����� ��"�#� 8���� ��

��$"�������� $���$��&�-� ����� ������ PUQ� �QV#I[�-� PUW� �QV#V[�-� ���� PIU�

�HU#R[���������������������� ������������������H-�Q� ���U-���������� �����U�

�������-����$��&�"�#��

��� �������-� �������� ���� �� ����"� ��� ��� ��� H-URY� ������ ���� ����

��������� ��������� �&�"� "�� ����� $� "� ������-� ��"�� PWUY� ������ �WU#P[��

������������� ��������� ��������� ������-��������XVI��������QY#P[�� ��"�""���

������� $������ ������ ���� QWY� �PR#R[�� ��$"��� ���� ���� $������ ����

��"��&�����������������"�$�� ��#�,�������������"�-����������������������

$�����������������������1��"����������"�$�� �������&���"�����������������

����������������������������&�"� "�#�'����� ��� ���&�����8�����P-�HW#V[�

��� ������ ���� :����� ������� ���� H� �������� ���"�� �� ��������� ��� ����"�

$�� ��-�������������$���������������������6����PH#V[��������������:�����

���������������������U��������#����������-��$�������&���$'������`�V�����

���"��������������-�UW#I[��������������:����������������H������������"�������

1��"����������"�$�� ��-�������������&�"�����������""������������PY#P[�

��������������:��������������������������U��������#�����������"�����$������

���� ��"�&���� ��� ����� ��$"�������� ���� ����-� ���� ����� ��� $������� �(����&��

��������������"�$"������������������"�$�� �����������@VA#�

'� ����"��� ���"���� ��� ���� QWY� ������ ��"�""��� ���� ������� ����"� $�� ��

������ ����$���������� ��"��&��� ��&��"��� ����� ����� ��� �� "������� �� ����

��������� "�����#� ���� "������� "���� �� ��$����� ��� HRY� ������ ����� ����

����������� �� ��&��� $'������ a� V� ���� ���� ������� ������ ����� ���� $������

� �

������#�=���"�$����������$��������&���(��$"����� ����"����������������"�

$�� ��#� '�� ""��������� �� 8����� H-� ���� �����$�������� ���� �� ������� �������

�$TbY#VY�� ���� ���������)��$���������������� �����$������ �%=��������������

������"��&����&��� ���� �������� �������� �������� �������������� ���&�"� "�-�

���� "������� ������� ������ ������ �$TbU#XP� ���� ���� ������� ����"��"���

���$����,P�� ����"���"�� �"����������$��������������������"�$�� ��#��

��� ������-� �� ���� ��� PHI� ������ ���������� �������� "���� ����� ������ ����

$��$����� ��� ��&��� $'������ `� V� ���� ���� ��� ����� ��������� �������#�

9����$��"���������$��������&���(��$"���������������"����������������"�

$�� ��#� '�� ��� �� � ���&��� �� 8����� H-� ���� �����)���������� ���"�

�����$�������� $�������� ������� ������� �$TbY#YU�� ���� ���� �����)��$�������

����$��$����������$�������9=����������$�����������&���PI)��"����"��&���

������� ���� �������� �������� �������� �������������� ���&�"� "�-� ������������

����%=����$TbV#VP�-�������������$����U)2�H'��$TbV#UX�-�������������2P�

���$���� �$TbV#HH�� ���� ��""� � �&�� ���� ������� �������"�� ������� ������"�� ���

����"�$�� �� �����#����� �(��$"�����"����� ���� ���� ����� ������$������

���� ��"��&��� �����-� ���� ���� ����� ��� ������ �������"� ������ ���� ����

��(���������������������������������-�����������(������� �"���"�������-�

������ �������� ��� �� ���"�� ��"�&���� ���� �"�����"�� ��"����� ���� �"���"�

���$������ ���&��#�

�������� ������������RPR�������������1��"�����������"�$�� ���������

�$���������� ���������$������������"��&�����������$�����������8�����

Q#� =��� �"�� ��$�������� �� ����� ������ ���� &��������� �M�� ���� �"��7� �M�� ��

��"���������������������������������&�"� "��������������������-��������""-�

�����-�����"������"������:������������������������������������������

����H� �������-�Q� ���U-���������� �����U� �������-� ���$��&�"�B��"��� �����������

���� ���� ��6��� $������ ���"��� ��� �����$���� ��"�&���-� ���� ���-� "��-� ����

��""������������������������������������$��������������������M���-�����

$�����)��$"������$������!���-�������������� ���#������������"�����$�������

�

���� ���� ��������� "������ ��� ����� ����"� $�� ��� ������� � �&�-� ������ ����

�"��� ���� "��� �����$������ ��� ���� PHR� ����� ������� ����� PHI� ������ ����-�

���$�����$"��������������"��&��������-���&��$'������`�V�������$������

���������������$������������#��

S��� ���$��� ��� ���� ������� ��� ���������� �&�"� "�-� �� �� � ���&��� ����-�

��"��VI#U[��������"������"�������"������������������������"���$%�"��&���

&�"���� �������P#I�����H#I-�YQ#P[���������"���� �&����$%�"��&���&�"������

H#I� �����$���� ��� ���"")� ���� �����)�M��� �"��#� ������ ����"��� ��$������

����� ����� ����� ��$"�������� ���� ����� ��"��&��� ���� �������� ��"����#�S���

���$��� ��� $������ ���"��-� �"����� ��"�� ��� ���� ����� ����"� $�� ��� �RR#V[��

��&�� ��� $������ ������� �� �!��� $�����#� 2���&��-� ��� ���� ����� ������ ����

������)��"��&���$"���������������""�������$����"��������#�S�������������

������������$"���������$����-� ������������������������"���&�"� "�������

$� "��������������"����"���� ����� ��������� ����������� �����������M�����

�����������"��&�����������������������!�������$���������������������"���

��������������$$"�������(��$"��������"��&�����������������������������"���

��� �������#��

�

������������� �������� �����

���� �$$"����� ��� ���� ������� $������ ���� ��"��&��� ������ ���� ���������

����"�$�� ����������������������""���"��"��������������������������

������� ���� "���� ��"��&��� �&��� ���� ������ $�����#�'�����"�-� ���� ������)

�����������"�$�� ����""� ����������������������������������� �������(�P�#�

'����������� �&�-� ��������������"���&�"� "��$� "��������������-�������"�

���QWY���������� ��1��"����������"��$�� ��-���$�����������"��PR#R[��������

����"� ��� ��� ��� ������ ��������� �� ���� �����#� �"���� ��$����� ��� ����

��������YU#W[���&��"��������YXI��������QR#X[����&��:�������������������

�����������������"�-�WUQ��������HU#W[����&����������������������������������

� �

������� ������������$'������`�V-�QYU��������PU#P[����&��������������������

��������������������-�$'������`�V��������"���������������-� �����"���������������

��"��&��������-����������"��������HUH��������X#X[����&��������������������

����� ����� ���� ������-� $'������ `� V� ��������� ����� ���� ������� �����""-� ��� ����

����� ���� ��"��&��������������������� ���� �������� ��������$'������`�V-�

�����������������"��&���������������������������������������#�����"������

��������������""� �������������������������� �������(�P�#�

'�� �(��$"�� ��� ����"�$"�� $�� �� ����� �� ���"�$����M��#�'�� ""��������� ��

8�����R-� �������$������������ �������������� �$TbY#WY�� ���� ������$�����

*H� ���$���#� 8��� ���"�$����M��� ��� 1��"��� ��� �� ���"�� $�� �-� ���� ���������

�������������������������"�� ��"���������V#WY���������"���#�2���&��-���������

�"�������$������ �$TbY#R�� ���� ���� ��������� ���$����U)2�H'� �2��H'����""�

�����������"��&�����������������-���������������������������"��������������

$�� ��� �� ��������#�'�� ���������-� ���� ���"�$����M��� ���1��"����������"�$"��

$�� �-�����������������������������������������"�� ��"���������V#R���������

"���#�������-������������������"���������������:��������$������-����������

$������������������� ������� �� �"�������� �������"���$TbV#HY����� ������������

2P����$���-�2�2P�#����������-����"�$����M������"�� �����""��������������

�� ��"�$"�� $�� �� ��� ���� $�� ��� $���"�� ������� �� ���� �������� 2��H'� ����

2�2P#� %��� ���� ��� ��� ��� $�� ��� �������� ���"�� �� ���-� ���"�$����M���

���"�� ���������������������"�$"��$�� �����"�&�"�H#�

=(������� ���� ���"���� ������ �����-� ���� �������� ������� ����� ����

��������� �""� ����"� $�� ��� $������� �� ���� �������6��� $� "� ��������� ���

�������������� @PQ)PWA-������������ ���������� ������������&���������$�� ���

$���"��#��������"-�QR-RWI����""���"��"���1��"�����������"�$�� ��-��������

HV-RUX��������"��$�� �������UHV�������������V-IIP�������"�$"��$�� �������XUX�

������ ������� $���"��#� ���� ���� ����� ��� ���� ��� ��� ��� ������� $���"���

������"���&������������$�� ��"�&�"���""�����������8�����U#�����������������

�($����� �� ������"� �($"����� ��� $��� "�� $���"��� �$��� �������� ����

�

��� �������������-���������&���������$�� ���$���"��������������$�"���������

$�� ���"�&�"��������#�����-���"����"�$"��$�� �������RQX�$�� ���$���"������

H�����������"�� ���������-���"��WP�$�� ���$���"������U�������������������"��

�&����#� ���� ���� ��$������ ���� ��������"� ����� ��������

���������]�""����� ���"�� $������ ���� ��"��&�� ��$������ ������� �����

$"��$��������$�������&����� ������������"�$"���������#��

���������-�$�� ���$���"���������������������6���$���������"����������

�����������������������������#������������������""�$�� �����������������M�����

����!���-�����$�� ���$���"�����������������M���������!���-����$��&�"�#�

'""�������$�� ���$���"���������$�� ���������������� �"������������������������

��6��������$�������"�����#�#-���������"�������"�������$���������������$"��

���� �������������#�'����� ��� ���&��-���M����$�� ���$���"����$$�������

�������$�$�"�����������!�������������$�� ���$���"������$�� ��"�&�"�������P�

���U-���������$�� ���$���"������������� ������������������ �"���������

��������� ���"��� ����� ��� �� ���� ����� ������ �$���� ���� $�� ��� $���"���

��$����� ��� ����� ����� U� �������#�'���-� �� ����"�� �� ��������� ����� ���� ����

������� ��� ���$"�������� ��� $� "� ��������� ����� @VA� ��&��� ��� ��:�� ����

$���������"���������������-�����$��&����������$"������������$�������

��������""���"��"����������"�$�� ��� �����"����1��"���������#�

�

�� ���� ����������������������

�������"����$���������� �&�������������&���������$�� ���$���"���$��������

���� ���� ����-� ������ ����"� $�� ��� ��"��&�� ���� ���"�� �������-� ���""�

��"��"����(��� �����$�� ����"�$"�� �������� ���� ��"��&����������&��� ���� �����

��������-�$�&��������������������������������$�� ������ �"���"������������

����������"�&�"#���������������������������������""�������� �������&�"��

���������� ���������������&�����$"����$�� ������������������ �"���"�

�������-� ���� ��� �""� ��� ���� ��� �� $������ ���"�� ��� �""� $������� ��� ��

� �

�����"�$������#�'�����""������&���(��$"�-�8�����W�������������������

$�� ����������������������������$�������"�#��

2������� ���$����� ���� �� "���� ��� �!���� ��$����� ��� ����� ��� ���-�

����"�-�2P-�2H-�2Q-� ����2R� @PVA#�'������� ���� �""� $��� "�� �� ������-�

��$"���� $�� ��� ��� ���� ������ "���� ���"�� ��1���� ���� ���������� ��� PR�

����"�$�� ��7�R����"��$�� ��-���&�������������������������������&���"�

��� ���� ���� ��"��&��� �&��� ���� ����-� ���� PI� ��"�$"�� $�� ��-� �&����� �""�

$�� ���$���"����������� ����������������������������&���"����$�������������#�

����($"����� ����������� ��������������������� ������6���$� "� ��$��������

����������������-����""���"��"����&�����PI������������PR�$�� ���$���"���

��"�� �� �������-� U� ������ ���� ������ ����#� ���� ���������� ���� �������

$���"��� ��� ������ ��"��"��� ���� �""����� �� 8����� W#� ��� ���� ��������� ��$�

$��&���-� ���� ���� �����$����� ��� �� ��������� �� ������ ��� $�� ��� ��������

���� ���� $������ ��� ���""���"��"��� ���� ���� ���$���� �� ���"����� �� �� �"���

��������-� "�:� �������"��$�����-�"��������� �������:"��$�����-����������

��������������������������������������������������"���&�"� "��������

$� "������#��

��� �""� ����� �������� �� ��$��������&�� ��$����� �� $��&���-� �����������

�&���$������������������""���"��"����������"���������$������������"��&���

������ ���� $�� ��� �� �&��� $���"�#� '����� ����-� �$����$�����-� ������-�

$��"����-� ����������������� ��"����� ��� ���� ���"��$�� �� ��$��������&������

����2P-�2H-�2Q-�����2R�$�� ���$���"��-����$��&�"�#����������-��$�������

���� ������ ��� ��� ���� $������ ���� ��"��&��� ������ �����"�$"�� $�� �� ���� ����

$�� ���$���"��������� ������2H-�2Q-�����2R����$����#������������� �����������

������""���"��"�����"������������"�$�� ������ �������$��&�� �������$���"���

�������������������� ���������������������������������������$����#�%����

������������������������&����$������������������������""���������$����������

���$�� ���P-�H-�����R����� ����������������2H-�2R-�����2R-����$��&�"�������

������� ���� ��&�� �������� �"��� ���� �������"� $������� ������ ����� ��������

�

���$����#� ���� ���� $��$���� ��� ���� ������� ��"����� �� ��� ""�������� ����� �� ��

���$���""�� $��� "�� ��� ��������� �� ��$"���� ���� ��� ���""���"��"��� ����� ���

������ �����������"����������������$��������������$��������$�����������""��

$�� ����$����"���

������������� �"���"�������#�������������"������������������$$"�����������

������ �������������������������������"�" ������""��������� ���������

��&�"�����������������""��������� �����������������������$�������"��@PYA#����

���� ���$��-� ���� ��&�"�$����� ��� ��&�"� �������"����� ���� ���� ��� ������ �������

�������������"��"���@PX)HPA����($����������&�������������$�����������

����� "�������$"����$�� ���������#��

�

����������

��"���"��������������$"�"���� ����������"��&�"��������������$����"���

��������������� �� ��������� �������������������"�������� ��������������

������������@HHA#�������-��������&���������������������������������������

��� ���� ������ �������� ����"����� ��� ��"�$"�� �������� ������� ����� ��"��&��

�����������������"�� ������#����������-���������$������������"������$������

��� �� "���� �$��������$������ ������ $������ ���� ��"��&��-� ������������

$������:��������$������������$��$�����-������$��&��#�'�������"�

$���� "���� ��&����� �� ���� $������ �""� ����� "���� �$���"� $������ ����

��"��&��� �����#�'�����"�-� �� ��"�� PR#R[� ��� ������ 1��"��� ��� ����"�

$�� ��-�������"�����$������������($�������������������������"�$��������

��������&����$��6���#����������-� �����������������������"��1�������������

��"�&���� ��� ���� ��������� ����"� $�� ��� ��� �������� $����� ���� �����

���&���� ��-�������$������"�-���$�����������������������������"����"�� ��

�� "���$������������ ������� ������ ��$���������� �����$����$������"� �����

������&���������������������������$����#�

S�"�� �� ��������������������&��������������""�� ������������ ����� ����

� �

��������"�c�����$������$������-�����"� �"���������� ��� ����""�&����

���� �������� �� �#� ,���� �����$����""�� �����"� ����"� $�� ��� ��"�� ��

������������$��������$�"�$������"�������������1����"�����������������

1��"�������������������""���"��"�����"�����$�� �� �"���"��������#��

�

!�3�����������

������������������$$������ ������%$�����������������%�"������"���������������

,���������������������&�?���$��6�����;HIIY)IHQHX�#�

�

����������

�

P %��� ��-� %#� �#� �HIIU�� %��""� ��"��"��7� ���� ������ "�:� �� ���� �����"������#�9����!�����(����P-�WR)WW#�

H 2 ���-� ,#� 8#� �HIIX�� 8����]=���$���� ������ ��$����� " ���������&�#�, ��,������&����PR-�VHQ)VHU#�

Q '����-��#�!#�������� �HIIR��9�2���"��"��� " ������ ����&�#�$�������QIW-�PPQY)PPQX#�

R T����-�+#��HIIY����������")���"���������������������� �"���#�$�������QHP-�VWR)VWW#�

U ;$���-��#��#���������HIIX��'�������������&�"�������������9�2�����"�$�� ��#�9����!�����(����U-�RRP)RRV#�

W S���-�d#� ��� ���� �HIPI��'�� �&��&��� ��� ���� !� �������'����� �������#�9����������/����QY-�*HUU)*HWW#�

V ,������-�+#���������HIIY��*������$"�������7�����'�""������"��������)�������������:�#�9����(���������HW-�XYQ)XYR#�

Y ����-��#��#�������� �HIIR��,������������&���������� �""���7� ��"��&�"�����)��"��&�������� ������������������������M�$�����#�9����/����, ��,������Q-�QUQ)QUX#�

X ,��$��-��#�������� �HIIR��8�������� �""���� �������������"�$"�� "�����#�, ��,������&����X-�WRP)WUP#�

PI 2�$:��-�'#��#�������� �HIIW���������������""��������$��������������F�! ��+�����$� ����(����PW-�PHV)PQW#�

PP ��&�""-� '#� ��� ���� �HIIY�� ,�"�)������)������� "������ ��� �� �����������������&���������#�:��'����!�����UP-�QRV)QVH#�

PH 2�$:��-�'#��#� �HIIY��9�����:�$������"���7� ������(�� $������� ����������&���#�9����!�����(����R-�WYH)WXI#�

PQ ��=,������� ���#����$7]]���#� #�#�:]��� "� #�

�

PR +�����-�9#�2#� ��������-��#��#� �HIIY��,���&�"�� $���""�"� �������� ��� �������$������#� !���� !����� ;���� &� ����� $� ����� PP-� RHI)RHV#�!������&��*����%�������!������#����$7]]$��$#���#��#���#�

PU ��-� �#� ��� ���� �HIIV�� �����*�7� �� �� )���� "�� ���� ���� ����($�������""�� ���������� $�����)"����� ����� �������#�9������������/����QU-�*PXY)*HIP#����$7]]���# ����� #���#�

PW 2�����-� '#� +#� ��� �"#� �HIIX�� ��!2'�)*�7� ���� ��!2'�� ���� ���� ��� ��$�����)��$"��� ���$����� ���� ��� �����"�#�9������������/���� QV-�*WYI)*WYU#����$7]]���#�$���)� #���#�

PV 2""-� %#� +#� ��� �"#� �PXXV�� �����������"� ����� ��� !������"���#� <���#��"�����������������������$����#�%�� ������/����RX-�HUQ)HVY#�

PY '����-� 8#� ,#� ��� �"#� �HIPI�� ��� �"�� ������� ����"� $�� ��� ��� ����������������$�������"�#�(� ���'����!�����PY-�QIRQ)QIUH#�

PX =:��-�%#�����"#��HIIV������"��$������"����������������&���7�������������&����"�"�����������������$���"��#�( ��:��%�� ������PUH-�X)HI#�

HI ��6�����-� +#� �HIIY�� ���$�������"� ���"���� ��� "����� ��"������$�� ���������������"��#�! ��+�����!�����(����PH-�QUH)QUY#�

HP ������-�*#��HIPI��%�������) ������$$������� ��� �����������������"�����$���"��#�'��������HX-�PVW)PYV#�

HH T����-� 2#� �HIIV��'� �� �������) ����� �$$����� ��� �������)�������� ����������#�9����/����, ��,������W-�HIH)HPI#�

�

� �

�

��@�,-�����������

�

����� �� �����-� '� ���""� ��"��"�� ���� ���� � "��� ��� $����� � ���� ���

��"�$"�� ��$���������� ��$������ ��������&��� ���� ��� �� ��1��� �"���"�

���$����#� ������ �� �������� $���$��&�-� $�"�$������"���� �"����� ����

��"�&�������$������������"��&���������������������������""���"��"��

1��"���� ��� �� ����"� $�� �#� ��� ���� ���$��-� ��"�$"�� $������"���"�

$���"������� ����""�� ��&����� ���� ���� ����� �"���"� ���$����� ���� �����

��������� �""� �� ��������� ���������� ����"� $�� ��B� �� �������-� ��"���

$������"���"� $���"��� ���� ��������� ��"��&�� �������� ���� ����"�� ��

�������""�������� �"���"����$�����#�

�

�����������-�'����""���"��"��������������� �`��� ���� ���$������ �������

������"��&����� �)�����`�����������������$��������<� -��������""�����< �e��#�

'�������������"�������������������� ������,�%�9-���b�V�������b�P�@UA#�

�

/�������� �����-�'� ���""���"��"������ ������� ��=�>� `� �� ���� �� ���� ��� =�>�

��������������"��&��������=�>��)�����`�����������������$��������<�=�>-�����

���""�� ���<=�>� e� �#� ��� �� ��������� ���� ���� ������� �������� ��� �� ���"��

$�� �-�����&�"�����������$���������������"�����b�V�������b�P#�

�

�

�

�

�

�

0.0

10.0

20.0

30.0

40.0

50.0

60.0

% C

hem

ical

pro

bes

2 3-5 >5

No. Targets

N>1N>1 & pAct>7

��

(������,-�!�� � "���������������1��"����������"�$�� �����$�������������������:������ ����������������$���"���������

� �

���������������������������������

(������*-�=���"�$�������$�����������$��"���� ������-������(��$"������������������������"�$�� ������

3.0

4.0

5.0

6.0

7.0

8.0

9.0

NET SERT HTR2A HRH1 DAT ADRB1

Target

pA

ctiv

ity

(pK

i)

3.0

4.0

5.0

6.0

7.0

8.0

9.0

SERT CHRM1 HRH1 HTR2C ADRA1A NET DAT

Target

pA

ctiv

ity

(pK

i)

NH

O

N

F

N

�

����������������������

(������ 5-� *��� ����� ��� ����"� $�� ��� �� ���� �$��� ������� ��������� $������ ���� ��"��&��� �����#� %M�� ��� �"��� ������� ������� ������������� �&�"� "�#� ��"��� ��� �"��� ��"����� ��� ���� ��6��� $������ ���"�������������������$������������#������������"�����$���������������"�������������"�$�� ����������(����������"��#���

1.0

1.5

2.0

2.5

3.0

3.5

4.0

4.5

5.0

7.0 7.5 8.0 8.5 9.0 9.5 10.0 10.5 11.0

Maximum pActivity

pS

elec

tivi

ty

2 targets

3-5 targets

>5 targets

2 targets

3-5 targets

>5 targets

Enzymes

GPCRs

Other

Enzymes

GPCRs

Other

� �

��������������������(������6-����"�$����M��-�����(��$"������������������������"�$"��$�� �#�

���

3.0

4.0

5.0

6.0

7.0

8.0

9.0

DRD2 HTR2A HRH1 DRD1 SIGMAR1 MDR1 TPR

Target

pA

ctiv

ity

(pK

i)

S

N CF3

N

�

�����

0

100

200

300

400

500

600

No

. Pro

file

s

1 2 3 4 5 >5

Probe level

OtherGREC

��

(������:-���������$���"���&������ ������"�$�� ��#�!�� ��"�&�"��������������� ���������������&�"&���������$�� ���$���"���I��

� �

�����������������������������

(������;-����������������������������$"��������"�$�� �������������"����������������$�����

N

N

NNH2

S

N

O

N

O

O

N

O

N

N

Cl

1: cyproheptadine

3

4

5

NH

NNH2

2

S

N N N

NSN

HNH

NN

6: tiotidine

N NH

N

NH

NH2

S

N NH

7: impromidine

N NH

8: cipralisant

NH

NNH2

9: histamine

N

O

N

10

PRV� �

�

�

� ' ���9�4�����������

PRY�

P# ���� ���� ����� ��� ���� ���������� ��� ��� ���������� ��$�����" ����� ������� ��� ���� ���"�� ��� ��"���� ���$����� ���� ������������������������"�"�������������������� ����"���������� �������� "��� ��� ���� ���������� ��� ���"�� $��������������"��� ���� ��&��� �&��� �$��� ����$�� ��� ������ $������#������������"�����"�� �������������� ������������������������������$�����" ���������$�� ����$������"�������$����#�

H# ������"�������$��������"�" ���������������$� "���$�����������"����)�����������������������&�� ����$�������������������������������� ���� ���� ������"�� �������� YHR#III� ���������&�"���� ������� HRI#III� ��1��� "������ ���� ����� ����� R#III�$������ �������#����� ���� ���� ���� ���� ����� ��� ���� ���� ���� �������"�����������$�"�$������"�����������������������&�"�$��������"����) ���������������������������������$���"��#�

Q# '�����"�������������"����)�����������������������&��"�������������$"�������� ����� �� �� :��� "������� �� ��$�������"� ��������&���#�'� ��������� ����&������ ����$�� "������� ����$���������������������$"�������������������������$� "������������ ���� �(������� ��� �� ����� ��� ������:� ����� ���� ��� ������ �������$���"����������"����#�

R# '�� ���"���� ��� ���� ������"�� :����� $�"�$������"���� ��� ��������$���M��������"���������PU[�������������"������""��1��"����������"� $�� ��� ������ ���� ������� ������ ���� $������ ������"��&��#��������"�$�� ���������� ������������������$�����������������&����$������ ��������������$��$�������� ����&���#�

U# ������ ���)��������"� ����$����-� ����"�-� %2=*-� 8!*-� ����!2�'�-���&�� �����������""���� ������������"����� ������$$����� ��� ��� ������ ������� $���"��� ����� �($"���� ���� "����)$������ ��������� ����� �������� �� ���� ���������� ���� ���#��������$$"����������������$$�������������������$������"������&�� $��&���� ��$"�� �&����� ��� ���� :��� �$��� ����� ������

Conclussions

PRX� �

��$�������"��������� ���� ��&��� �� ���� ����"� �"���� ������������&���#�

W# ���� ��&�"�$����� ��� 8�!����� ���&��� ��� ���� ) ����� ���"� ������"����� ���� ���$��"� ���� 1�������&�� ���"���� ��� ���� �������������������������������������"��&���������� ������������"&���������������$������ �� ����!������*�������:-� ����:�������������� �� ������"� �������� ����� �� �� ��� ��� ��� ����������� �� ����"� �������� �� ��&�"�$��� ���� ������� "��������� ������� ����$������� �"���������������������"��#�

V# ���� ��&�"�$����� ��� !2'�=����� �������� ��� $��&��� �� ���$���������������� ��� ���� $�"�$������"���� ��� ������ ���� ���� ����)$������"��������������-�����������&�����������"�������������������"�" �����������������"����������������������������������� ������������$��$���"����������&���"M�������������:���������������� �""� ����"� ���� �"���"� ����� �� �� ��$"�� �����������������#�

Y# ���� ������� ��� �� ������:� "�:��� ������ ��$������ ��� ������������� ���� ������� $���"�-� ���� ��� ���������� ���� �������������� �������� �� ���� $��&���"�� ���������� "����)���������������� ���� ���-� ����� "���� ���� ���� ��"������ ������� �������&����� ������� $���"��� ���� ����� �����$������ ������� $���"��#��������������������������������������������������:�������������� ��&�� ��"��� ������� $���"��� ��������� ����� $��"��"���$����&�� $������"�������� ��$������� ��� ���������� ����������������$������������&������������#��

PUP�

�

� ' ���9%�4�����������

References

PUH�

P# 2���:� T����7� ������� ���������!� ������ ��������-� �������HIIH-�*=:7PWWH)R�

�

H# =��=#�%�����f����g�����f�+���g����!�� ��������������������� ��� �� ���� ���� ������ ���� ��� ���� ��� ������� ��� ������� ��� ����� ���� ��� ��� ����#� ������� HIIX-�,5;7HUXcHWX��

�

Q# ��������d��7� �� �������� ��� ����������������#���""�����������������$�����HIIR-�6+�H�7PWV)PYR�

�

R# 9#� ,#� ����� �-� *#� ����� ���-� ,#� �������� A� �� ���������� ����?�!� '�������� ��������� �� ��������� ��� ����(����#�,�������������,���HIIP-�6+7QRWcUY�

�

U# S���������� 2C-� T�"��:�� '-� �������� �-� S":����� %+-�����������8+-�T�� �T-�&���%��$$���+2-�2�����2-���::����,-�,��.�,+-��� �:�&��T9-�=6:���,-�&�����������2+-�%���$�+�#7�������� �������� ��� ���� ����� �� �������� ��� ����� ��� �������������������������#�+#�,���#���"#�HIIX-�:B7VcQR�

�

W# !����� C#� ��&����-� !�"$� S#� 8��"��7� /�������� �������� �������@����� � ������ �� ��������C�� �����������#� +#� �#� %�#����������HIIU-�*7HWVcHYI�

�

V# %���"��*�#7�� � � ����� ����� �� ������� ���� ����� ���������#�9�����&�*����*��&#�HIIU-�6�P�7RU)UY#��

�

Y# 9"�����"�� ���-�%�L����;O*��������9���%���"��-�'"�(��������������-�,�������'�2 �-�2���:�T����-�;"&���T��" ����-�2�:��9�������-���������%������-�*�������� ����^�'���)�"�������&�7�9��� ��D ������������� � �������������������#�9����������������$$"������HIPI-�<�Q�BUW)WX�

References

PUQ�

�

X# ����"�� �� "�-� �� ���� %��&���7� �� ��� ��� ���� ���� �� � � ������ ���� ���� ������� ����#� +�����"� ��� ������"�����������HIIY-�6,7WYVcWXQ�

�

PI# %��$����!#�������7����������� ���� ����� � ������ ���#�*����*��&����������HIIU-�,+�PR�7PIIP)PIIV�

�

PP# ,���"� '�� �����-� ��������� '#� ��"-� +����� '#� �"�:�-� *�&���������-� 2������� ���"��-� +#� ,���"� ������-'""��� !#� *�&�-T����*�"��:-� %�"��� %#� *����-� +����� �#� =$$�-� ,���� '#� 2����-�*�&�� !#� 2""-� ������ ����")���&��-� '������ T�����:�-� %�M���������-� +���� �#� ,�����-� +��"� =#� ��������-� ,����� �����"�-�����"��,#��� ��^���&��%���"�:7�������������������������������� ��������������#�9�������������HIII-�*:7HUcX#�

�

PH# *���"� �#� �� �-� 9���� 2#� %���� ���� 9���"��� 8#� 9��7�������� �� ����������� � ������ �� �����������#� �������� �� ����������HIIV-�=�P�7VU)XI�

�

PQ# ,"��-��#,7�'� � ������ ���������������7��������� ������������� � ����#�'���#���$#�,��#�����#�HIIQ-�5B7QYQcQXW�

�

PR# ����d����T�-�2�����:�T�-�%����d�$����7�� � ������ ���� �� ������ ��� �������� �� �����3�#� �������� ;$���� ���������"����HIPI-�*,7VYcYR�

�

PU# �#�%"����-��#�������-�=#�2����7�������� � ������ ���#�*����*��&����������HIIY-�,5�PQ�7UYR)UYX�

�

PW# C�"����%�:�-��"����,���������������M��7�'���������� ��� ���� ������#������� ��!��������������������������(���#�������� E����� )�'$$"������ ���� ���������� �������#� ���#� +#� ,�"#�%#�HIIX-�,+7PPWP)PPXH�

References

PUR�

�

PV# ������� ����-� !����� �#,���&��-� 2���M���� 2����-� ������2#S�7� '������ ������� ����� %�� ���������� ���� ����%���� ���� �� ! ������ ��� /�������� #���4 ����������F����G�� � #�'�&����� �������������HIPI-� �*�RHQUYX-�PX�$�����

�

PY# %�����"� ���-� %��������d��-�d������� T�-� *������ 2����7�(��� ���������� ��� ��� ������� ��������� ����� ���� �������������������������������� � � ���������3������#��,����$�����HIIY-�6,�Q�7PYR)PXQ�

�

PX# '���"�� 9�MM�P-� '" ����� �&�-� ������ ��""�MM7� '��������� ������������ � ������ ���� ���@���� ������������ ����4�������� �����������#��,�������������HIIX-�,+�PH�7%U�

�

HI# %������� ����-� '���� ���"�-� ������M�� ����-� '��"� 8��:���-������"�T���-�d�������,����-�'�����%�� �7�������� ��� � �%���� ���� 7� � ������� ���� ������� ������ '������������� ������#� ����� !��� �===� =��� ,��� ��"� %�#� HIIX-�*++=7RWUR)RWUV#�

�

HP# ,#� =��"����� �B� 8#� �����"�� �B� �#� ������ �B%#� T�����7�%���� ���� � �3������ 3�������� ���� ������� � � � �������� ����������� ��@�������� �����#� %'�� ���� J%'�� ��=�&��������"���������HIPI-�*,7HPcQU�

�

HH# S#� !���:� S�"����-� ,������� �#� %���"� ���� ,��:� '#� ,��:�7�9���� �� �������� 4� � ��������#� *���� *��&���� ������ PXXY-�5�R�7PWI)PVY��

�

HQ# �����:-� �#� %#-� ,,����-� �#� ^� ����-�S#� �#7� ��� ��� ���� ������ ��� ���������4� ���� ����� ������� � ������ ���������������������#�,��#����#���&#�PXXW-�,;7QcUI#�

References

PUU�

�

HR# �$��:� �'-� ��� ����� 8-� *����� �S-� 8������ !+#7�$@������ �� �� ����� ��� �� ���� ����� ��� ���� �������������� ������ ������������������������ �������������������#�'�&�*����*�"&���&#�HIIP-�6;�P)Q�7Q)HW#�

�

HU# %������ ����� d������ ;:���-� ,������� 2�����-� ��:��:�9���:�-� ,����� T������7� "%�!E��� � � � ��� ��� ����� ���������� ���� ���������������� ��� ��� ��#�9�"��'�����������HIIH-�5+�P�7RIH)RIR��

�

HW# ������$�����$��:�^�'������2�$:��7�E ��� ��������� ���� ��������������� ��������#�9������HIIR-�65*�VIPX�7YUU)WP#�

�

HV# ����d-�+�����-���:���#7�!� @�������������������4� ���� �������� ���� �� ������ �� ���������� ����4��3���������#������������HIIY-�*6�PQ�7QWW)VR#�

�

HY# S""���� !#� ��7� ���� ����4� ���� ����� �� �������� ����� *������������#�*����*��&�������HIIW-�,,�HQ)HR�7PIRW)UQ�

�

HX# *#� ������7� ���������� ���� ����� ��� � ��� �� ����������#�+�!������"#�HIIV-,:*�P�7�QYcUH��

�

QI# ������S-�,��:��,'#7� �����������������3��������-� ,-�/������ ���� ����3�#�+�,�������#�PXXW-�5=�PU�7HYYV)XQ#�

�

QP# ,�����'#�T��-�'������%�����������-�,���"�%��:-�%������S��M�"-� ,���� �����"��-� '"�(� ;�������-� !����� =��"-� 2�� ����S�"�����7� �� ����� �������� ���� ����� �� ����� �� �� ���� !��������� �� �� ������ ���� ��� ��� �� ��������� 0���E'2#� !9'%�HIIU-�,+*�RY�7PVHVHcPVHVV��

�

References

PUW�

QH# �h:���'#7� �� ��� ����������������������� ����� � ����������� @��� ���� �������������� �� ��������� ������������#�+����������,���"#�HIIY-�6B�PP�7HIXV)PIV#�

�

QQ# �� ���� !#� %������-� %���� T#� T����"��7�A��� ��� ��� ���� ��� �� ����� �� ���� ����� �� ���� ������?� *���� *��&����������HIIH-�<�PV�7�XIQ)PP�

�

QR# ��+S-�C�������+�-����������������� �� ��� ������������������ ��� ���� ���������������?�%����HIIX-�5*:�UXQV�7PWP)U#�

�

QU# '"��� �#� 2��&��7� E ��� �� ��������� �� ����� ���������#� *����*��&����������HIIY-�,5�PX]HI�7YXR)XIP�

�

QW# T��������� ���:-�T��")2��M���������� -��� ����%������7��� ������ ���������� ��� ��� �� ���������� ����� ���� �������� ���� ������ ��������#�9��#�!���#���$#�HIIY-�*:7YXHcXIR�

�

QV# ������� %��-� !�"$$�� �������-� +��.� ���� ,����)8����-�����"�#� ,#� ,������7� " ���� ������� � � � ���� �������������4!�������� ��� ��������� �������� �� ����� ���������#�,�)��&������,����"����������HIIV-�<7YUP)YWI�

�

QY# �������������T-�'�:������,-���i�������2-�2�������%-�S�"����%-� �������� �!#7����������� ��� ����������� ����������� ��� �4������������������������#�+#�,��#�����#�HIIR-�6<7YYYcYXX�

�

QX# %��$���� '� 2���:7� �����7�� �� � ������ ���� �������������� ����� ���� �E�4� ������� ������� ���� ��� �����#���������;$�����������"���"����HIIY-�,*7QPYcQHQ�

�

RI# =#�+�� �-�'#�,�MM���""7�������������� ����������$@� ������ ��� ������ ����� �� �� ��#� �������� ,����"� ���������

References

PUV�

HIIX-�,;7RQVR)RQYP��

RP# ="�� ���������)!��6��.-�+����,������7���&������ ���� ��������� �� ���� ��� �����#� �������� ;$���� �� �����"� ��"����HIIY-�,*7QUXcQWU�

�

RH# ������$��,#�2���7�������������� ��������#�*����*��&����������HIIW-�,,�PU]PW�7VWQ)VWV�

�

RQ# +����� �#� %���7� E ��� ���� ��������� ����������� �� ���� �������������� ������� � ����� � ����4� �� ���������4����������������#�9��#�!���#���$#�HIIX-�*;7PPcHW�

�

RR# C�"����+��""��7�9������������������� ��������� �� �����#���������;$�����������"���"����HIIY-�,*7QVHcQVY�

�

RU# ,��""�� T���-� ��""����� ����-� *���� ������7�!�������� ������ ���������������������������"��� ����#�+#�����#����#�,���"#�HIIW-�6;7UPH)UHR�

�

RW# ������ +#� %$���"-� '������� ������ -� *�&�� �#� %$���7����������4�������� ��������H� � �������� ��� ���� ����� ���������#�;��#�����"#�����#�HIIY-�;7PPRXcPPUY�

�

RV# 9#� �����-� �#� ��:��-� �#� ��������-� �#� ����-� 9#� 8�"�$$�-� '#�!�����-�'#�+�����-�%#������"��-�,#�!������-�!#��������-�*#�,��"��-����� �#� =#� 2� ���� C����"�7� ����4��3�� !�� ���� �������� ��� ! ������ ��� � *54��������� ����� �� � � � ��� �� ����� *-<� /������ �������#� +#� ����#� ���#� ���$��#� %#�HIIR-�66��H�7WRQcWUP�

�

RY# �� ���7����$7]]���#� #�#�:]�� ]�

�

References

PUY�

RX# !��"�� ��� ,����-� �����"� '"L�����-� '������ *�::��-� ,�����=���-� +����� 2������-T������� 2���-� �����"���� %$���-� %��&��������-� ������$�� %��� �:7� ����� �� $������� ��� �������� ��%�������� ���� ��#�9�"��'�����������HIPI-�5B�*��� ���������7HRX)HUR�

�

UI# �� ���7����$7]]$� ���#� #�"�#��#��&]�

�

UP# S���� d-� <��� +-� %�M�:� �;-� g����� +-� S���� +-� ������� %2#7�'������� � ������� ���� ���� ������ ���� ��D������ �������������� �����������#�9�"��'������#�HIIX-�,7QV�

�

UH# T���������C#���"�:�-�'"�(������C#�T�M����&-�'"�(�%#�T��"��&����� 9:�"��� !#� %�&��:7� � ��� �� ������ !���� ����� �������� �� "��� ����� ���� #��� %������� ���#� �������� *����*��&���������"�����HIIW-�57RX)WU�

�

UQ# 9:�"��� !� %�&��:j-� T��������� C� ��"�:�-� � %������ =��:����:�7� $@������� ���� ���������� 3�������� �� �������� �� ��������� ������ ����#���������;$�����������"���"����HIIR-�B7RPHcRPV�

�

UR# 2������ '+-� 2""�� �'-� ������� =,-� +����� ,-� �������� ;!-�*�� ��� *�-� ������""� %*-� 2�"�� C'-� %������� +�-� ������� ��-��������""� S'-� *�&��$���� '!-� *�"�������� !-� *�""���� ��-� 8�����%,-���������'-��������C-�9�� ����-�;�"�����=2-�;"�����S-�!������ +-� !�� +!-� �����"�� ��-� %���"�� *�-� S����� ,S� ����%$������ ,#7� %&'#!�4���� ���� %&'#!�� � � � ��� ��� ��������4�������� ���������� �� ��� �� ���#� 9�"#�'��� ���#�HIIX-�5<�*��� ���������7WYI)WYU��

�

UU# �� ���7����$7]]���#�� "#����

�

UW# �� ���7����$7]]���#� #�#�:]��� "]�

References

PUX�

�

UV# �� ���7����$7]]$��$#���#��#���]���(�#���"�

�

UY# ;"���,-�,����,-�;���$�&��-������-������'-�2��������9-�;"��� �-� ������ ,-� %���� g-� ;$���� ��7�A�/�! �� ������ ��������� �� ��� �������#� �������������� �� *���� *��&���#�=����� ��S"��)C�2B�HIIR7HHQ)HQX#�

�

UX# �� ���7����$7]]���#$����#��]$�����]�"�����]����#���"�

�

WI# �� ���7����$7]]���#�$�#���]��]�

�

WP# �� ���7����$7]]�$�� � �"#�����

�

WH# �� ���7����$7]]���#����(��#��]�

�

WQ# ��&���,#7�9���������������������������#�!���9��"�'���%���%�'#�HIIX-�,+;�HV�7PPIVX)YR�

�

WR# ���� ��!���� ���������7� ��� &����� �� '������ ���������0&�'���2#� 9�"�� '��� �������� HIIX-� 5<�*��� ���������7*PWXc*PVR�

�

WU# !��"�*#�*� ���-�d�)*������-����6����+#�%��$"�������'������+#� *��7� '��������� ��� '������ (������ �� ���� !������ ���������� �� ��>����� ���� ����#� *�$�������� ��� ��������,����"����������HIIR-�,,7HPQU)HPRH�

�

WW# �����""� �#�,������-� +����'#��#� �����-�'������ %""���-� ;"&����������-� ����� d����-� ,���"� ,� ���-� *�&�� ���-� %�����'����-� �� ��""�� '#� ���&��-� ������� +#� *�""���-� �������� '#�;�����7� $@�������� ������� ���������� � � � ��� �@������ ����

References

PWI�

��������� ��� ������� ������� �� �������� �� �����@���#� !�"#������#��#�%�#���HIIW-�5;,7RHUcRRI�

�

WV# '$� �-� ������ +-� �������� %'7� �� �� ���� ����� �� ��� � �I� ��� ����� �� �� ��3 ������� ��������#� +� ,�"� ��"#�HIIP-�5,+�H�7QPP)HU�

�

WY# ��������'#�;�����-� +�����,#���������7�'������ � ������ �������� ���������� � �������� �������������#�'���#���&#������#�HIIU-�<67YWVcXII�

�

WX# ������-�#2#-� ����-�#=#-� '����-%#-� ����-'#-� *�""���-�#-�* "��-,#-��������-;#-�!���"-8#-�9�� ����-�#-����-'#-�%""���-�#-�d����-�#-� ��������-+#,#-� ;�����-�#'#7� ��� �! #� �� ������������� � � ����������������� ���� ������ ���������������� � ���� ������������ ��������� ���� �@������� ��������#�9�"��'�����������HIIV-�5:7HXP)HXV�

�

VI# �#*#�8��-�+#�,����-�+#�����-�!#�����""-�'#�2����-�+#=#�!�""�����-�;#�#���&�-�!#�������:����-��#����-�T#�8���"���-��#�2�"�-�=#�#�%���������-�%#�#�=���-�'#��������7� ���'� ��������� ������� � � ��#�9�"��'�����������HIPI��*��� ����������5B7*HPP)HHH�

�

VP# %"�������*-�S�"���!#7�!���������������������������������������������#�'���,�� �"#�HIPI-�,=*�Q�7PUP)U�

�

VH# +�����*�S�����-� ������'� ���:���:� ���� +�����,���������7�'�����������������������������>����� ���������� ��� � #���������;$������%�������"���"����HIIU-�,:7HVUcHYR�

�

VQ# ����*#� %"�����-� !��"�S�"��7�!� ��������� ��� �� ������� �����������������������#�'���,�� �"�HIPI-�,=*7UPcPUU�

References

PWP�

�

VR# $D��� E���� ����� ,==*� @'����� !����-� %��� *���-���"�����-� �%�9� I)PH)HHVPWR)U� ����� �:�-� I)PH)HHVPWU)Q��$�$�� �:�A� ���� %�$$"������ P� �PXXQ�-� %�$$"������ H� �PXXR�-�%�$$"������Q��PXXU�-�%�$$"������R��PXXV������%�$$"������U����=��#�+#������#-�PXXRB�**57P)UB�=��#�+#������#-�PXXUB�*5*7P)WB�=��#�+#������#-�PXXW7�*5<7P)UB�=��#�+#������#-�PXXVB�*:+7P)W-�����=��#�+#������#-�PXXXB�*;67WPI)WUIB����$��&�"���

�

VU# '����������$"����"���������$7]]���#�$���#���]��$���j���#���"�

�

VW# !��"� *� ������-� 2����� ,-� %�M����� ����7� �������� �� ����� ����� ������ ������� ��� �������� �� ������#���������;$�����������"���"����HIIV-�,,7RcPP�

�

VV# ,-�2#d#� ��� �"#7�!�������� ��� ����4������������ ��������� ������ ����������������� ��� �� ����#�����������#�HIIQ-�,57HPPYcHPHY�

�

VY# %#�#=#� �������-� %#� ��$$�7� " ���4�� ��� '��������� ��� '���������������� ��(������������>����#���������!���������"�*�����HIIW-�,*7HIWV)HIYW�

�

VX# S���2-�2�����2-�'����:��-�������)'"&����+-������d-�2��gg-����"����%-������T�-�,�����2S-�;�������-�%�M�:��=-��������'-� C����:�� ��-� d��� �%-� g����� +-� ���:��� S�#7� ��� '������%��� ���� ���������� � ����� ���� ������� ��������� ��������� �� �� ���� ��� �������#� 9�"�� '��� ���#� HIIH-�5+�P�7QU)V#��

�

YI# T������� ,#7� ��� J$��� � � � ��#� 9�&����� 8����� %��$#�HIIH-�*6<7XP)PIP��

�

References

PWH�

YP# '����� T��������&��-� � T�M��M���� 8��"�7� '������ �������������������� �� ����� >� ����� �������#� *���� *��&����������HIIX-�,6�V)Y�7QYW)XQ�

�

YH# d����g����7�'������ ������������������������� ��� ���������?���������;$������%�������"���"����HIIX-�,=7PRUcPUU�

�

YQ# =������ C#� T����-� d��� �#� S�"�� ^� ������� !#� T���&7� ������������� ��� ���� ������� �������� �� ����� ��������#�9�����#�HIIH-�6*+�WXPH�7HPY)HQ#�

�

YR# +����M���:��-���g-�T������%%-���:�"�����-�S��"���+-�*�����',-�S"�����'-����M:�'-��$@���� ���������� ���������������������������������#�!��%���"#�HIIX-�<�X�7�PIIIHIU�

�

YU# ,�������+#� 7��������� ����������� ������ ������ ������'������� � � � 3�� �� ��� ���� � ���4��������� ���������4� ���� ��������������#�*����*��&�������HIIU-�,+�HQ)HR�7PWHX)QV��

�

YW# ,�"����'#�'����-�,���"�*#��#�%���-�+���g����-�g�������+�7� '������ ��������� ���� ���������7������� ��DD����$@��������� �� ���������4� ���� ������ �� �� ���� ������������� ���������#�!��������HIIV-�<7HXHIcHXQH�

�

YV# �� �� '#� ,��6������-� '������ !#� ���� �""-� %������� !��6:��-�T�������k����-�,��:��#������7�!��� ���������������� ������� �����>���� ��� ������ ��� ������� ����� ����� ���� ������������ ��������#�!��������HIIY-�B7WPHcWHU�

�

YY# ���������8#�#-�T���M"���#8#-�S""�����#+#�#-�,�����=#8#-�����,#*#-� �������� +#�#-� T������� ;#-� %�������� �-� ������ ,7�'������ � � � � 3� 4� �������4� ���� ����� �� ����� ���� ��������� ������������#�+�����"����,�"��"�����"����PXVV-�,,*�Q�7UQU)URH��

References

PWQ�

�

YX# 2�"��� ,#� ������-� +���� S��� ���:-� g�:���� 8���-� ������"""���-��#�9#�����-�2�"���S����-��"���9#�%�����"�&-�!�"$�=#�������7� ���'������� � �� 3#�9�"��'�����������HIII-�*B7PHQU)HRH�

�

XI# ,�����������������C���������M�&7������ ���D���/��� ��'�������&����"�������/����� ���#�9���!����#�HIIX-�6�U�7VIWcVQP�

�

XP# ������� !=-� '""������� �T-� T�� �� S-� �� S-� %�����"�&� �9-����M:�'-�8��� ���� �-�����-�S"��*-�2�����%-�����������g-������ �-� S��� ���:� +-�� ��� �� ���� ��� �������� �� �������������������������� ����������������� ������ ������������#�!��%��$�����$���HIIR-�QVU)YW#�

�

XH# ������ �"�?�7�" ���4�� ��� ���������������������� �3����������������?����������"����HIIY-�=7HQU�

�

XQ# *�&��=��� ���-�=������,#�,������-��������<�������^������;#� d�����7� '������ ������� �� ���� ����4������ �� #� 9������HIII-�6+:�WVYY�7YHQ)W#�

�

XR# ��������-����:�',#7� ������ ������������������������������>����� ���������������������#�=� ��+�PXYW-�:7YHQ)W#�

�

XU# ������ �#� ������&-� =������ C#� T����-� *�&�� +#� �$���7� !������� '����������� �� '������ ( �����#� %���� PXXV-�*<B�UQQY�7WQP)V�

�

XW# ="6����� ����-�+����=���"�-�*���S����-�g����������)%��"���7�/������>�� ������� ��>����� �� ���������� � � � ������������ ��� �����#��,�������������HIIW-�<7QYH�

�

References

PWR�

XV# �������� 8�:���-� +��� d�:�����-� ����� 9�:�����-� ��)+�� %���-���:���� ���-� �������� ;��-� ':��� T����-� �����:� T�����-�,�����:�,�:7�/������ ����������� �������������� ���������������� ��� 0!��2� ����� �� ������#� �,�� !"���� ��"����HIIU-�:7W�

�

XY# �#� ,�����-� *#�#� S����-� �#� ,�����M-� �#� 2�����-� %#�%���������7� ��� '������ J� ��� �������� ��� ���� #� �����#�%����HIIH-�*=B7PXPH)PXQR�

�

XX# 9�&�� 9-� 2��M�"� �#7� E���� �� ����������� ��������� ���� ������ ���#� ����� *���� �������� ���"���� '""����#� HIIR-�5�R�7QQU)RW#��

�

PII# 9�"���� ���$����� 9����"������ ��������7� !� ����������� ����� ������ ���� ���� ���� �� ��������� ������ ���#���""#�PXXX-�=<�H�7PWP)Q#��

�

PIP# %���� ,2-� ����� �C-� ���� ���� �*7� ����� ���� � ���������� ������ ���� � � � ��� ���� ��� �� �� ������ ������� ������ ������ ���#�9�"��'������#�HIIW-�56�*��� ���������7PYP)W�

�

PIH# %���� ,2� +�-� d��� ,�-� 9���� T-� ������� *�-� =":��� �#7� ��� � ���������� ������ ����� � � ���������� �� ���#�9�"��'������#�HIIX-�5<�*��� ���������7HVR)Y�

�

PIQ# C�"����!""��-�,���g������-�'"�(������T#�%����"�-�'���)����C������-�+������!����:7��'����� ����� � � ��������������@� ���� ��� ���� �� ������� ��#� ����������� HIIU-�*,7PVRQ)PVRR#��

�

PIR# +�������� ��""-� �� ���� ,���������-� ������� ,#� ���:�-� %����%�� �"-� *���:� ,#� 2��:��-� d����� %� �����-� %������

References

PWU�

%��&����&�-�%����*��:�-���������%�����7� ���'������E ���&�������� � ������ � � � ��� ���� ������� ���� ����#� 9�"��'�����������HIPI-�5B�*��� ���������7*QQW)X�

�

PIU# ��� &�'���� ���������� ��� &����� �� '������ ���������0&�'���2� �� *+,+#� 9�"�� '��� �������� HIPI-� 5B�*��� ���������7PRH)Y�

�

PIW# ������ 2#� S�-� 2���M���� 2����-� ��)%�� �#� d��-� S����� �#����:��7�'������� ������ ������ ���� �������� �� �� ���#����$�������"���"�����������������HIIQ-�*<7QV)RV�

�

PIV# ,�������'#������7�'����������������'��������������������4� ���� "�� �� ������ �� 9���� �� �������#� ��� ������"����������^�2����������$���%������-�HIIX-�,*�PI�7XRI)WI#�

�

PIY# ��&������� �9-� !����:� %%7� #������� ������� �� ���������������� ������� ������ �� ����� ����#� *���� *��&����������HIIX-�,6�PQ)PR�7WVW)YQ�

�

PIX# d��&� ����������-� *������ �������-� ;"&��� �� �������-�+�����S�����-�*���6�8������-�,��"����"-���������;�����-�+����� ��������-� ���� '���� ����������7� '������ ������� �� ���� ��� �������4� ���� �������#� ���������"#� HIIX-�,+�H�7�HIV#�

�

PPI# %������ =*-� ������� !=7� !����� ���� ��� ������� ���������� ������� ��� ���� ���� ������ / �3��� ����� ���������� �����������������������#��,�������������HIIW-�<7RPI#�

�

PPP# *�� ��:����+�#7���>�������� ����� ����������������������������#������;$��%�������"#�HIIW-�,;�Q�7QVR)YR#�

�

PPH# T��������� !+-� �����:� ,8-� '"�(�&� =7� #������4� ����

References

PWW�

����������5����������������������4������������@�������� ��������������������>�������������#�����+���"�,�����"#�HIIY-�65�H�7PXY)HIY#�

�

PPQ# ,���%�����:-�*���+���7� �����>����7������������� �������� �� ������� ������� ���������#� �������� ;$���� �� %�������"���"����HIIX-�,=7QUVcQWH�

�

PPR# '���M�6� +�����:7� #���4����������� ����� ����� ���� ������������ ��������#���������;$������%�������"���"����HIIX-�,=7UVQ)UYR�

�

PPU# T���"� 'MM���-� +�1���� 2����-� �������� 8�""��-� %��&���S��� ����-� =����� +�� �-�'������� ������-� +������ �#� +��:��-����M"���� ����/�������'����������� ������ ��������� �����'� � �������'��������� � #� ����,�������HIIV-�*�W�7YVR)YYI�

�

PPW# ,������� +-� ������)!��6��.� =-� C�"&����� %-� %�".� �C#7� ������������ ��� ����4� ����� ���� ����� �����3��� ����������������� �� ����� ����������� �� � ����� � �����#� ,�"�������#�HIIX-�:�X�7PIUP)V#��

�

PPV# g����� !���$�:-� ,�������� �#� 8�M"�""��-� � 8������� 8�����7�&����� ����!������� ����� �� ������ �� �����!����������'��������I��� ������ �� �� ����!������#�������!�������������"��������^�'""�����*����*��&����HIIY-�*7HR)RW�

�

PPY# =�����#�*�&��-�������$���8#������-�*�&���#�,������-�,����,������7�!�������������� ������ ��#����� ����!�E �� �����������#���������*����%������HIIV-�*7VX)YV�

�

PPX# �� "���*�-����������8!#7�$����� ������� �����������4���������@�����#�9�����&�*����*��&#�HIIU-�6�U�7RPI)HI#��

References

PWV�

�

PHI# ��������� 8!-� ,�*���"�� +%#7� !������� ��� ���� �������� �� ��@������ ��� �������� ����� � ����#� ����� ���� ��(�"#�HIIV-�*+�Q�7QRR)WX��

�

PHP# =�� '#�#� �"����-� d� d���-� +������� 8#� S����7� &��� �����@���������� ��� ������ �� ��� ���� ��� ����4���������� ����@������ ������ ����� ���������� �� ���������#���(�"������������HIIX-�,B;7HHcQP�

�

PHH# 8;�'6��-�2�%�������+�!����7�!�������������� ������� ���������������� ��� �����#�+#��"�#�!������"#�HIIIB�6+7PIXQ)PIP�

�

PHQ# �������+#�,����-�'�B�,���"��#������-��!�-�,%-�%*B������*#�8�� ���-�,*7���������!������������$���������������������(���� �� �����!������ ���#� PXXY)HIIU#�'��� ������� ,��#�HIIV-�,;<�PW�7PVUH)PVUX�

�

PHR# %������-�*#-��������-��#-�������-��#7�A���������� ��K �������������������������������� ���������#�����#�!����#�*��#�HIIU-�,,7QURUcQUUX�

�

PHU# %�� ��� +-� +��:��� +�-� %�:���� %�-� ������� '-� ,:��"�&� *-�,":�,-�'MM����T-�S��� �����%-�2�����+-��� ����-��":�,-�*�&��� +S#7� / ����� ������� ����� �� ������ �� ����� ���� ��#�+�,�������#�HIIX-�:*�X�7QPIQ)V#�

�

PHW# ������,#���!��������'�������!#�*���$��7�'������!������(�� ���� �� � /������ �� /��� ��� �� E������@�����#���(�"���"�������HIIU-�B;�H�-�HPRcHHU#�

�

PHV# %�������g���-�!�#*#�����="�����-�!�#*#7��������� ���� ���I���� ���� ������ ��� � ����� �������� �� ��@������ ����� ��#�*����,��� �"�����&����HIIU-�,7RPcHPQ#�

References

PWY�

�

PHY# 2�������+����:������,�����������6�7�%�� ������ ����� ����/��� ���� ��� !��� �����4%������ "����� ����� �� ��#���(�"���"�������HIIW-�B=�P�7QPcRP#�

�

PHX# d���� ���-� �:�� *#� 2�""���-� �)����� d�7� L� ��� ��������������� ���� ����� ��@�����#� ����� 8���� ������ !������#�HIIX-�B�H�7PUY)WW�

�

PQI# 8�������^�J��)d��2�7������� ����������� ���� ���������������������@������ �� �������������� �����#�=($����;$��*����,��� ���(�"#�HIIX-�:�P�7HX)QV�

�

PQP# �#� '"�(� ,���:� ���� 8���:� '#� S�M����7� ��� ����� �����@������������� �� �������� ��� � ��������� ��@�����#� =<%#�HIIX-�XX7QWVcRII#�

�

PQH# 8"����� 9���-� 9+� ,�(�"��� ,��"���-� +���� �;� ,���""-�*������� g�����&��7� ����� ��� �� ��@��������� ���������� ��� ���� �������� ��� � � � �� ��� �������� ������#�=($����;$�#�*����,��� #���(�"#�HIIX-�:�P�7P)PR�

�

PQQ# S�"������ ,�����-� '"�(������ ������ ��-� 2�"���� 8����-�%��$���� T�����-� ���M� ,k""��-� '(�"� !l�"���� ����� ��� ����@�������� �� ����� ���������#� *���� *��&���� ������ HIIY-�,5�V]Y�7mQIQ)PI�

�

PQR# ������� 2������7� �@�������� ���� ���� �����4������ ������#�9�����#�HIIX-��6;+�VHUH�7HIY)PH�

�

PQU# �����#�C�"����+�-��%����������@������������������ � ������ ���������#���(�"���� ����'$$"���!������"����HIIX-�*6,7QUWcQVI�

References

PWX�

�

PQW# ����"��� +#�,�����"�7������ �� � � � ���� ���� ������� ���� ���� ������� ������ ���#���(�"������������HIIX-�,B;7WHcWU�

�

PQV# g��� 8-� 2��� ��-� !��:�6� T����-� ��� <2-� ,�� <2-� S�� <9-�2������-�����d8-�2����d-�g������+-������dg#7�&�� ������ ��� ��� ������� ����� � � � ��#� 9�"�� '��� ���#� HIPI-�5B�*��� ���������7VYV)XP�

�

PQY# 8������ ��7�# D ������ ����� ���� � � � � 3� 0#���2� �� �������� ��� ������� �� � ��� ���� ���� �� ����� ��#���(�"����PXXU-�,+5�H�7PQV)RU#��

�

PQX# %���:��"� T-� ���"�� *%-�'"����� ��-� T"��� �=#7�'� ��J��������� ���� ��������������� ������� ���������� �� ��#�*����,��� ���&#�HIIY-�6+�R�7UQX)UP#�

�

PRI# �� ���7����$7]]��"����#�"�#��#��&]��"����]� ���#���

�

PRP# �� ���7����$7]]���#�"�#��#��&]���"��$"��]�

�

PRH# �� ���7����$7]]���#�����$�#��]�

�

PRQ# �� ���7����$7]]���#�����#��]�

�

PRR# �k������ %-� T���� ,-� *��:�"� ,-� ���$""��� ,-� %������ �-�!����"�:� =-� '����� +-� ����"��� =�-� ������� '-� +������ �+-�%��������-�%:� "���-������""���-��������!=-����:�!-�!���������#7������ ����� ��/ � ����� ���������� ���� �@������� ����4� ����� ��� ��������#� 9�"�� '��� ���#� HIIY-� 5;�*��� ���������7XPX)HH#��

�

References

PVI�

PRU# ,���"� T���-� ,���� ���$""��-� �&�� �����-� ����� +��"�+�����-�!�������:7�!�������������������������� ��������������������������������#�,�"��"���%���������"����HIPI-�;7QRQ�

�

PRW# ,���������������-�+����,������7�!����������� ���� ����������� ����������� ������ �� � ����� ���� �� ���� ���#� *����*��&����������HIIX-�,6�X)PI�7RVX)YU�

�

PRV# S������*%-�T��(��-�����'�-�������*-�%��&����&��%-��M���*-�������� �-� 2������"� ,#7� ����� 3�� � 3�������� ��� ���������I������ ������ �������� �����#�9�"��'������#�HIIY-�5;�*��� ��������7XIP)W��

�

PRY# �� �� *�-� ������ �8-� T"��� �=-� '"����� ��#7� !� �� ������ �� ���� ��� ��� �� ��� ���� ������� �� ����� ����� ������ � ���������� 3�������#� +�'��,��� �������'���#� HIIU-�,*�H�7PHP)X#�

�

PRX# ����� 2#� ,���""7� ����$��� �� ������ �� ���� &/"��/�� ���� ����#� +�����"� ��� ������"� *��&���� ������""� �������HIIX-�67V�

�

PUI# �� ���7����$7]]���#�"�#��#��&]����]

�

�