11
RESEARCH ARTICLE Braz. J. Plant Physiol, 18(4):455-465, 2006 1 Depto. de Engenharia Agrícola/UFC, Campus do Pici, Bloco 804, Fortaleza, CE, Brazil, 60455-760; 2 Depto. Ciências do Solo/ UFC; 3 Lab. Fisiol. Vegetal, Depto. Bioq. e Biol. Molecular/UFC. 4 CNPAT/Embrapa Agroindústria Tropical. *Corresponding author: [email protected] Morpho-physiological responses of cowpea leaves to salt stress Claudivan F. Lacerda 1 *, José O. Assis Júnior 1 , Luiz C. A. Lemos Filho 1 , Teógenes S. de Oliveira 2 , Francisco V.A. Guimarães 2 , Enéas Gomes-Filho 3 , José T. Prisco 3 and Marlos A. Bezerra 4 Respostas morfofisiológicas de folhas de feijão-de-corda ao estresse salino: Neste trabalho estudou-se a influência do estresse salino sobre as respostas morfológicas e fisiológicas de diferentes tipos de folhas de plantas de feijão-de-corda [Vigna unguiculata (L.) Walp.], buscando-se entender o processo de aclimatação da planta ao estresse salino. Sementes selecionadas foram semeadas em vermiculita e, após 7 d as plântulas foram transferidas para bandejas de plástico contendo solução nutritiva, e mantidas em casa de vegetação. Após a emergência do primeiro trifólio, as plantas foram transferidas para vasos contendo 3 L de solução nutritiva, deixando-se apenas uma planta por vaso. Utilizou-se um tratamento-controle (sem adição de NaCl) e um salino (75 mmol L -1 de NaCl), iniciando-se a adição parcelada do NaCl (25 mmol L -1 por dia) 5 d após o transplantio para os vasos. Durante o período experimental, foram realizadas, na folha primária e nas 1 a , 2 a e 3 a folhas trifolioladas a partir da base da planta, as seguintes avaliações: área foliar, grau de suculência, massa específica, teores de íons, teor de clorofila e a taxa fotossintética líquida. No final do período experimental foram feitas as análises de crescimento da planta inteira. A salinidade não afetou a taxa fotossintética líquida, porém reduziu a produção de matéria seca e o número de ramos laterais. Os teores de Na, Cl, K e P aumentaram nas folhas de plantas estressadas, porém essas repostas foram especialmente influenciadas pelo tempo e pela idade da folha. Os maiores teores de Na e Cl nas folhas mais velhas podem contribuir para reduzir o acúmulo desses íons nas partes em crescimento, porém a tendência de acúmulo de K e P em folhas de plantas estressadas pode ser conseqüência da redução na retranslocação, não contribuindo para a aclimatação da planta ao estresse. Por outro lado, a salinidade aumentou a relação fonte/dreno, a suculência, a massa específica e o teor de clorofila por unidade de área foliar, sugerindo que essas mudanças observadas podem constituir parte de um processo integrado de aclimatação da planta ao estresse. Palavras-chave: aclimatação, fotossíntese, partição de fotoassimilados, salinidade, teores de íons The effect of salt stress of known intensity and duration on morpho-physiological changes in leaves of different ages from cowpea [Vigna unguiculata (L.) Walp.] plants was studied, aiming for a better understanding of the acclimation process of the whole-plant. Seeds were sown in vermiculite and seedlings were transferred to plastic trays containing aerated nutrient solution, and kept in a greenhouse. When the first trifoliate leaf emerged the seedlings were transplanted into 3 L plastic pots containing aerated nutrient solution. Salt additions started 5 d later, and the salt-treated plants received 25 mmol L -1 per day until reaching a final concentration of 75 mmol L -1 . During the experimental period primary leaves and the 1 st , 2 nd , and 3 rd trifoliate leaves were used for measurements of net photosynthesis, leaf area, leaf succulence, specific leaf mass, ions and chlorophyll concentrations. Growth analysis of the whole-plant was performed at the end of the experimental period. Salinity did not affect net photosynthesis, but reduced dry mass production and the number of lateral branches. Leaf concentrations of Na + , Cl - , K + and P increased in salt-stressed plants, but these responses were dependent upon stress duration and leaf age. The higher concentration of potentially toxic ions (Na + and Cl - ) in older leaves could contribute to the reduced ion accumulation in growing tissues, but the tendency of K and P accumulation in leaves appeared to be the result of reduced re- translocation, i.e., not related to plant acclimation. Salinity also increased the source/sink ratio, leaf succulence, specific leaf mass, and chlorophyll accumulation per unit of leaf area, suggesting that the observed changes could be part of an integrated mechanism of whole-plant acclimation to salt stress. Key words: ion concentration, photosynthate partitioning, photosynthesis, salinity, stress acclimation Received: 16 October 2006; Returned for revision: 21 December 2006; Accepted: 07 February 2007

Morpho-physiological responses of cowpea leaves to salt stress

  • Upload
    ufrn

  • View
    1

  • Download
    0

Embed Size (px)

Citation preview

���������������

��������������� ������������������������

�������������� �� �������� ������� ���������������������� ������ ��! ������� !����"� ##$%"�&������������'�� �����(�������&� �) *�� �������� +���� ��� ������� ���,�� �� ������-������ ������� �� �.��/��*� � �������0���� � /����� ��� 1����������� �����2��3����� 4�3��*�

��������������� ������������������� � � �������� �������

��������� ������������������ ��������������������� �� ����������������������� ����������������������! � �"�����#�����$����"����%�������������� �&����������'������� �(�������

������������������ ������������ ����������������������������������� ���������������������� ������������������ ������������������������������������������������������������� �� ���������� ������ ������� ��������� ��������� ����� ������������������ ��������� !������� ���������� �������������� ���������"��� ���������������������������#��������������� �������������� ������$�����������!������%� �����&��������������������� ����������� ����� ���'������������ ����"����������$�!�������� ����������� ��$�����"����(����������������� ������������������!�������������������������� �������$����������� ��)��� �����"����������$�!� ��*�� ��������������������������$�����+���,��������������������������������� �"��� ����-��������������%.��������� ����-�!�������� �������� �"��������� �� ����-��/.������������� ����.� ���������������������������$������0������������1� ���*���������!� ����������,� ��!���� ��������'����������2�!�/�� ��)�� ������������ ������������ ������� �������!���������������$���"3��4�'���������!������ �����������!������������1����!�������� �1���!������ ����������������*�����������5�����16�� ����������� �����1� ���*����������������������������'����� ������������� �����������������(������ � �����������������*�����������5�����16�� �!����5���� �,�������� �"��� �����5��������������7���� �����������������8��������� ����!�-!�9���:��������������������� ����������������� ��!����5�������������������������������������������� �������������������� � �� �������8����������������� �������-���������������$������ �������������������� �,�������7���� ������1�����������������������������!����5������� ������ ����7���� ��9���:��������� ���������������� ����� �����������6;������ ���� �"����������������"��!��������������� ����������������"��� ��������������������:���������� �!�������� � ����������������"��������< ����!������������!��������������1�������������� ���������������� � �� �� '���� �����!� ������� �� 6��� �������� ��"��� �����$� ��� �� ��� ����������� ������ �� ������������ ������� �� ��������"��� ���������������������� �������������������"��!�������1�����!������"��� ������������� ��!������ � �!�������� ��1���

=��������������������������>��?����������@��� � ������������������@���������������������$������ ��������������������?������������������������������ �������?������ �� !����������������������� ������ ����������������������������������?���������#�� ��?������?�� ���$������������ ���� �����?���� ���������� � ���������� ���@������������������� ����������������!��� �>����������������������������������������������������� ������� �����?�������������� ������)������������������������������� �������������������#���� ������������� �.� �����!��� �������������� ������������$� �/.������������� �@�������������������������������������%.����������0����������*��������������� �������@���$����� ����2��!�/��!��� �)��

������������$���?������� ������������������������������@������!���������!��������������!������������������!�������� �����@�����������������A��?�����@����������?��������?����������� ��������� ��������*��������������� ��#�����@ � ���������������������@������!������� ��� � �@��������� ��������� �����������������������������������������������������!�-�!�9��� �:��������� ��������������� ������!��������������������?���� ���� ���������������� ���������� ���������=�� ����� �������������� ��� ��������@� ��*��� ����� ���� �� �-��� ��� � ��� ��$��� ��� � ����������� ��� ��� �� ��� � ���������������������?�����������!����������� ���@����9��� �:������������������$���������� ��������������������� ��� ����������������!�����!���������� ���������������������#�����@������������� ����������<���>������!��������������!�����������������!��� ������@���������������������������������!������������������������$� ����������� ������������������������ ������������?������������������������������������������������������������!������@������������������!������@������!�������@!������������������

B����$� 4�2C�8�������/DDCE�B������ �������$�����4�/2�0��������/DDCE�(������ 4�D%�F������@�/DD%

���

��������������� ������������������������

����� ������� �� � �

)*���+,��)�*

#���������@��������� � ����������������������������� ������������������?���� �@�� ������� ��� ��������� ����������� ���?�� � �A�@�!�/DDDE�G����!�/DD/���#��������� �� ����� ����� ���?�� �� � ���� �*��������H��������������!�2II)����������������������������������$�>��?����� ������� �� ���������� ������������ ������@������ ��*����@� �� �������� ��������@� �A����?�@� �� G����!�2IJDE�H��������������!�2II.��

=������������ ���� ���� ������������������*��� ���� � ����� ���������� �� � �@��������� ����������������������?��������������������������������=�������!����>��?� ����������������������?�������� ����������� ��� � ��� ����� ���� ���� ��� �������������� ��� ��������� ����������� ���� �� �$���������������������������������@������������ B�����!� 2II/��� -�?���� ������� ����������� ��� �� �����*�����$�@� ���?�� ��� ��������� H��,�!� ���� �� ��������������� � �@������������ ��������(�������?������ ����� ��� � �� �����@� ���� �������� �(@���� �� �������! � 2III�! � ��� �@��������� �������������������� ���� ���� ��������� ��� �������$��@� ���� ����������@� �� ������ �� #���� ���������� ��� ��?������ ����� ���?�� �� ��� ���� ������� �$�� ���� @� ���������$� !� �� � ��� ��� >��?�� ���� ����� ��� �� ��@� �������������� �� � ��� ���� ������������ ��� �� ������ ��������@� �A�����F��� ��� ��!� 2IJ)E� #����� ��� ��!� /DD)������ ����������������,@����������$��@��A�����F�������!�2IJ)���� ����������*����������#����������!�/DD)���K�� �����!����������������������������������������-�����������!�/DD)���� �������@��������������������#�$������!�/DD)���

=�� ?�������� ����������� ��� ��� � ������� ������� ��� � ��� ��������� � ��������� ��� ��������� ������!�������@��������� ���$����G����!�/DD/���(���������������������������������@��������������������>�!���$���$�������$� �������������������������������!����������@�������������������������������������� !� ��������!����� �����@������ ������������?���� � �$��������#������������$����?������������������@���������� � ���������� ������� ��� ��� ��$��� ���� ����� � �����������������@���� ���������F�?���!�/DDL�!����������������������� �������!�/DD)E�#�$�������!�/DD)��!��������������� ���� ����� �������� �$�� ���� ����� ����� ��� �� =������ ������������������������ ����������������!�?����>��� �������� �� ������ ���� ��� ����������� ��� ���

�@�����@� �� � �������@� ��� ?�������� �������������=�������!� ����������$����� ����������?��� ���*���������������������������������>��?����������@��� ������������������@���������������� ��� ��$����� �������������!����������������������� ������ ������� ���������������������������?��������

'��$�)�����*+�'$�-�+

������ �������������������������=���*��������?��� ��� ���� � ��� �� ���������� ������ ��� ������������� �0�������� �� � M�����@�� ��� F�����,�� �)L.N#!)J))N��!�-���'�#����!�H��,���=�� ���������������������� �?��� ����� � 2/� !� �� � ��� �$������ �� ���*������� ���������� ���������������?���������*�����@�2DDD�� �2CDD�µ����������!���������$�@��0����������*����������� ����� ������ ���� ������������ �� � �����$�� ��� ��@���� ���������������?����/I�O�.�-��� �C)�.�O�2/�.P!��������$�@�

:���������?����������������������������������� �?���� ��������� � ��� $����������� #�$��� �@�� ����!��� ����� ?���� ���������� � ��� ������� ���@�� ���������� ���� � �2<L� ��������� �� � ������ � Q����� � ����������������� #�� ����� ?���� ���?�� ���� .� � �� ��� ������� ��������� ��� �$� ����?������������������������� ������ � ?���� ���������� � ����� )� �� ������� ��������������� ������ � Q����� � ��������� �������� �)<L��������!� �� � ���?�� �� ��� ��� ����� ��$������������ �������

F���@� ������ ?���� �$� � � ����� �?�� �6��� ���� �� ������� � ��� �?�� ����������4� ��������� ��������� ?��� D�������� ����������� �� � %.� ���� ���� ��� ��-� ������������������#������-��� ����������������������������������� �.� �������������?�������������� �������������������!������?��������������������������� ������ ���������,�� �� � ��� ����� � ���������� ���� ?��� ��������� ��� �$���������#���?��� � � � ����� ��� ��������� �����������?�����/.��������� �����������������%.��������������� � �������������� � ��������� �������� �$�� ?����������� �����������������������*��������������� �@�� ���� ����� �?����!��� ������Q�?���>�������.�.��@� ���� D�2� �� 98Q� ��� Q-�� ��������� ��������� ?��������� ��$��@�.� !�?��������������������� � ���������������������������?���������� ������������

����������������������������(��C!�2/!�2J!� �� �/L�

���������������������� ����������������@��� ����������

���

��������������� ������������������������

��������������������� ���������� ��� ������� ��� ����� ������

��$���2!�/��� �)��2��!�/�� ��� �)�����$��������������������!��������$�@�� ?���� ��$���� � �� � ��� � ��� �������� �����?����������������4���������!����������!� �@�����!��!�9!�-�!�:��� ������@� ��������������!� �� ���������@��������(�� ���� ��$���� ��� ��$��� ?���� ��>���������$���� ���� �����������������������!��� ����������� ����� �������� ?��� ����� � � ��*����� ���� ��� �����$������(�����������������������!������������-���������������K�)DDD!����-���!�������!�+#(�!������������������� �����������$���?��� �������� !��� �������@�?��� ��� � ����� ����� ����� ������������$������CD-�����%/��=���� ����?������� �������������������������������� �@��������������������� ���������������������������R� �@�����<�������� !������ �������G����$�����2III��

(�� ��� /L��� � ����� ��� ������ ��� ���� � ������� ������$����� ������ ?���� ��$���� � �� � ��� ���?����������������?������ �4�������������$�����������������!� ������� ��� ������ �������!� �@������ ��� �����!��$��� �� � �����! � �� � ���� � ���� ����� � 0�@� ��������������������?������� ���������$�������$���������?�������������� �

#� ���!�9!��� �:�?�����*������ ������2.D������� �@

�������������@�� ����2.�������2���Q-!���������������*����� ������2�!��� ���������� ��� �����������������

�G�@�,�?�������!�2IJL���=������������������������� �9

��������*������?���� �������� ��@��������������@���

��������:���������������?��� �������� ��@������������������ � �G��$���� ��� ��!� 2IJI���-��� �� �-���?��� ���

�*������ ������ �@���������������������6�������� ����� � ��� � �������������� ?��� �������� � �@� $�����

���������������@!������ �������A�������������2IJL��-����@���������������?��� �������� ������ ���

���(������2ILI������������@��������������������?���

�������� ����������������� ��������@,���KBA(���-(�/!

(0-!� Q� �� ��!� +9�!� ��� ��� ����� �@������ =���

�������������?������ �����?����2DDD���� �2/DD�!���/J� O� /S-!� �����$�� ��� ��@� ��� CD� O� 2DP!� �� � �� ������������������@�����������$�� �� ������� �T2.DD�µ�����������

��� ��� ���� ��������������������������=���*����������� ������?��� �������@� ��� ���,� !� ?��� ��$����������� ���� ��$���� ���� ����������� =�� ���� ?����������� � ��� ���@���� ��� $�������!� �� � ���������?���������� ��@�=�>�@N����������2��� �.P����������@����������������!� ����?������������ ������������������@����=����������������@����?����������� ��������������?���#(UA<+FV��B�������M7����!�/DD2��

�$ ,��

������ ���� ��������� ������������=���� 2� ��?�� �����?�������������������� ��������� ��������*���������������� ��#�����@� � ���������������������������$�������� ����� ����!� ���� �� ��� � ��� ������� ��� ������������!��������������!��� � �@��������� ������������ ����������������������=������������ �@���������?������ �?�� ����������� ��?� � ���� ������@� �� ��� � ��������� �@� ����� �@� ������ )/P� ������ LL�C� ��� )D�/� ���Q�?�$��!� ���� �� ������� ?��� ���� �6��@� ��������� ��������� ����������������������K��������������!������)JP���� �@��������?������������� ������$��!�L.P����������� � 2%P� ��� �����! � �������� L2P!� L/P!� �� � 2%P��������$�@����� ��$��!��������� ��������������������� �������(�� �� �����!� ���� ������� ���$�>� � ��� ��������� ��������2LP�������������� �@������������$��<������W������!������������������������������������<���>�������

F������ 2� ��?�� ���� ��� ������� ��� ���� ������� ��� ������?��?��� ���� �������������������������� ���������#�����@� � ���������������?�����������@���$����������

��� ��� �A��?������������������?�������������?������/L� ����������������������������������?����-���������������!D�������������%.���������������������X�������������$������������������E��H�X������������������������E�=�(�X�������������E������������������������ � �������������������G��������?� ��@������������������������� ������ ����������������@��=�>�@N������!���Y�D�D.�E���X�.

����� ������ ����� ������ ������ ����� ������ ������ �����

!��" ������ ���� ����� ����� ���� ����� ����� ������

#�"��$"� %&��������������%� �������������#&'����������������������������������������$��

(� �$�����)�

!�"$� *���� &"�+"� #���

&"�,-���"$��.�������/� �$���

���

��������������� ������������������������

����� ������� �� � �

��@�?�������� @���@��*��� � �?��������������?��������� �� #�����@� �� ��� � ���� �*�������� ��� ��� �����!����� ��� ���� �������������$����������������*���������������� ��=����������?����*�������� ���������� �������������!�?��� �$���� ����������������������������������������������� ������ �%.��������������-��K����������� ���� )!� ������@!� ��� � ������ ��� ���������� ����*�������!����� ��@� ���������������� ����������?���

� ��� ���� ���� ������� � K�� ������ ! � ���������������������?���� ������� ��@� ���� ���������� �� � ����������?��� ���� ���������������������������� ������@���F������� /� �� � )��� K�� ������� �����!� �� �� � - �

��������������� ��� �� �@���� ��� ��$��� � � ���� $��@�����������@� ����� ��� �*���������� ����� � �F������ /��

Q�?�$��!����������������������������� ������������@���

���@���������$���?������������*���������������K�������

��!����������������������� �� �-����������������?���

��������� ����������@���������$���

-���������9��������������� ����������*���������

����� �?����������� ��@��������!���������������!��� ����

�������������� ��� ��� ��������� �������� �F������ )��� K�

���������$���9������������������ � ���� ������������

����*��������������� !���������������� �����@������

����������E������� �������������� ����C!�2/��� �2J� ������

���@��������������!���������$�@����� �����$����������@

�� � ���������� 2�!� ������� ����� ���� ����������� /�!� ��

@����������������������)���8������������ !������$�����

���������� � ������ 9� �������������� � � ���� ������ ��

���#�� ������=��� ���������������� ��������������#���*�=�����������������#���*��������������������������*�=�������������#���*������*�=���

���)2.�.ZZ����������2IJ�%ZZ��������������%J)�IZZ��������������.�ICZZ��������������������LD�.ZZ����������������������2/C�%ZZ��������������������������/�/Z

V��������F�=���

!��"��� ��������������������@������#���� �����������2��$�!�/��%�!��� �)��&�������?�������������?����������������������������������?����-���������������!�D��������%.�������� ������!���� ������������������������*��������������� ���Z#���������@���������������[�D�D.�E�ZZ #���������@����������������[�D�D2�E���X�.�

0.00

0.01

0.02

0.03

0.04

0 6 12 18 24 30

Leaf

Are

a(m

2)

A

= 0.0095

= 0.0099

y

y

0.00

0.01

0.02

0.03

0.04

0 6 12 18 24 30

Leaf

Are

a(m

2)

= 0.016

B

= 0.019y

y

0.00

0.01

0.02

0.03

0.04

0 6 12 18 24 30

Time (days after treatment)

Leaf

Are

a(m

2)

? = 0.0209 + 0.00027**x (r 2 = 0.67*)

? = 0.0083 + 0.0013**x - 0.000040*x2

(r 2 = 0.67*)

C

0.00

0.01

0.02

0.03

0.04

0 6 12 18 24 30

Time (days after treatment)

Leaf

Are

a(m

2)

? = 0.0123 + 0.0048**x - 0.00012**x2

(r 2 = 0.85**)

? = 0.0216 + 0.0055**x - 0.000150*x2

(r 2 = 0.93**)

D

ŷ = 0.0209 + 0.00027**x ( = 0.67*)r2

ŷ = 0.0083 + 0.0013**x - 0.000040*x( = 0.67*)

2

2r

ŷ = 0.0123 + 0.0048**x -0.00012**x ( = 0.85**)

2 2r

ŷ = 0.0216 + 0.0055**x -

0.000150*x ( = 0.93**)2 2

r

��0

��������������� ������������������������

��������������������� ���������� ��� ������� ��� ����� ������

������@��� ���������������2��� �/����$��!�������� � ������������ ��� ��� @������� ���� ��� ��� ����� ��� �������������� �� 0����������� ��� ���� 9� ��������������� ?������� ������������ ���� ����?���������������������� ����������� �������������������������4�������C� �������������!� 9 ��������������� ��� ����������� 2!� /� �� � )�?�������������������������������� ������!�������������������������?��� �����$� � ������ /L� � ����� �����$������� ������ �������

����� ��������� �������������� ����� ������� ����� � ����� �����������������@���������� ����������@��������$��!� �� � ����� ��� �*���������� ����� � �F������ )��Q�?�$��!�����:�������������������������������� �������������� ������@������ ����� �����*��������������� �(�����/L� ������������������������!�:��������������������

���������� � ��$��� ?���� ����� ����� ����� ��������$���� =�� ��������� ��� :� �������������� ?��� �������� ����@� ����� ��� �� �������� )! � ?��� ������ � � �� �$�������� ������ ��� ������ � � ����� �*���� � ��� %.�������������-������������������������

� �������� �� ������� ������ ������������������������������� � ��� ���������� ��$���/� �� �)���� ������� �����!�������@����?����C��� �2J� ���������������������������!�� �?���>���������$�@�����������������������*���������������� � ��� �������� ��$��� �F������L���Q�?�$��!����������� � ��$��� ��?� � ���������$�� ���������� ������������?���������������*�������������!��� �������2J � ��� ������� ����� $����� ?���� ����� ���� ��� ������������� =�� ������ �� � ��� �?���� $����� ��� ���

�������������������#�� �=����������������������������������#���*�=������������#���*����������������������*�=������������#���*������*�=���

���� )I/�DZZ .2�%ZZ ).�DZZ �.%�/ZZ 22�L)ZZ �)�/.ZZ )�IJZZ

���- )JJJ�DZZ 22D�2ZZ 2.�LZZ �22J�DZZ 2.�JZZ �/�%Z /�DZ

K��� V��������F�=���

0

100

200

300

400

500

600

700

800

900

1000

0 6 12 18 24 30

Na

+(m

mo

lkg

-1D

M)

= 74.4

= 37.7

= 69.8

= 119.6

A

y

y

y

y

0

100

200

300

400

500

600

700

800

900

1000

0 6 12 18 24 30

Na

+(m

mo

lkg

-1D

M)

? = -24.78 + 9.98**x (r2

= 0.62**)

? = 65.2 + 12.27**x (r2

= 0.52*)

? = 259.1 - 25.89**x + 1.602**x2

(r2

= 0.81**)

? = 1115.9 + 0.385**x + 0.799**x2

(r2

= 0.86**)

B

0

200

400

600

800

1000

0 6 12 18 24 30

Time (days after treatment)

Cl-

(mm

olk

g-1

DM

)

= 156.0

= 45.1

= 58.1

= 58.3

C

y

y

y

y

0

100

200

300

400

500

600

700

800

900

1000

0 6 12 18 24 30

Time (days after treatment)

Cl-

(mm

olk

g-1

DM

)

? = 279.7 + 19.40**x (r2

= 0.81**)

? = 211.7 + 30.54**x ( r2

= 0.78**)

? = 416.4 + 20.99**x (r2

= 0.68**)

? = 193.65 + 29.14**x (r2

= 0.94**)

D

ŷ = 1115.9 + 0.385**x + 0.799**x (r = 0.86**)2 2

ŷ = 259.1 - 25.89**x + 1.602**x (r = 0.81**)2 2

ŷ = 65.2 + 12.27**x (r = 0.52*)2

ŷ = -24.78 + 9.98**x (r = 0.62**)2

ŷ = 193.65 + 29.14**x (r = 0.94**)2

ŷ = 416.4 + 20.99**x (r = 0.68**)2

ŷ = 211.7 + 30.54**x (r = 0.78**)2

ŷ = 279.7 + 19.40**x (r = 0.81**)2

!��"��' ��#� ������ ����� ��������������������������@������������� �����������2��♦�!�/�������!��� �)��\���������?������������?�����������������������������������?����-���������������!�D��#(%�����%.����������$(&�!���� �����������������������*��������������� ��Z#���������@����������������[�D�D.�E�ZZ #���������@����������������[�D�D2�E���X�L�

���

��������������� ������������������������

����� ������� �� � �

�������������������#�� �=����������������������������������#���*�=������������#���*����������������������*�=������������#���*������*�=���

����9 ��/.�)ZZ 2/�LZZ JD�JZZ �2I�IZZ I�)ZZ �.�CZZ D�%���

�����: �L/2�LZZ //�2ZZ %�)ZZ /)�IZZ 2�)�� �/�2Z 2�)���

K��� V��������F�=���

!��"��)��:����������� ����������������������������������@������������� �����������2������!�/��������!��� �)��\����������?������������?�����������������������������������?����-���������������!�D��#!%�����%.����������$!&�!���� �����������������������*��������������� �����!��������������������Y�D�D.�E�Z#���������@�����������������[�D�D.�E�ZZ�#���������@�������

����������[ D�D2�E���X�L�

���

���������� ?���� �����$� � ��� � ��� �������@�� �� � ��

@������� ����������� )�� ��$��!� ��������$�@��=�� �����$�

����������������������������������������������������������

?������������@��������������� �����$���

#�������� ���� ����� � � ���� ��?� ��� ����������� ��

���������� ��� ���@� ��� ������� ��� ���� ������� � �����!

����� ������ ���$������������ ����?����C��� �/L� ������

���������� ����������� �=���� /��� Q�?�$��!� ����� ?���

�������������������������������������������������������������

���������������������@�����������������$���2!�/!��� �)!���

�����$������������ ��������������������$� ����������

������ �=���� /���8�� ��� ����� �� !� �� ������ ����������

���?������������������������ ���������?����������� �

��������� ���� ������������� ������������ ���������

�����@������������������������������������ � ����� �����

���?������������� ������������ ��������������2/��� �/L�

�������������������������� ��������=����)���#�����@� � ����

������� �����@� ������������������ ��� ����������� ���� ��

��$����������@��� �����������2����� �@�2/!����� � ���������������

@���������$��������������/��� �)���Q�?�$��!��@������ ������

�*������������� �@�/L�� ��������@���������������� ����

�@���������$������������������� �������?���������������

��$�����������������������������(���� ���@����� ���������

�����@��������������!������ �������?������*������ ���

������������������!���������@��������������� �@�2/����/L������

��������������������?����������� �

0

200

400

600

800

1000

1200

1400

1600

0 6 12 18 24 30

Time (days after treatment)

K+

(mm

olk

g-1

DM

)

? = 566.7 + 57.72*x - 2.263*x2

(r2

= 0.55*)

? = 921.7 + 41.07**x - 2.005**x2

(r2

= 0.83**)

? = 1427.6 - 23.3*x (r2

= 0.53*)

? = 1364.7 -16.85**x (r2

= 0.72**)

A

0

200

400

600

800

1000

1200

1400

1600

0 6 12 18 24 30

Time (days after treatment)

K+

(mm

olk

g-1

DM

)

= 1088.3

= 1098.8

= 1360.8

? = 392.4 + 54.59**x - 1.332*x2

(r2

= 0.71**)

B

y

y

y

0

100

200

300

400

500

600

0 6 12 18 24 30

Time (days after treatment)

P(m

mo

lkg

-1D

M)

= 216.7

= 234.0

= 228.1

= 208.9

C

y

y

y

y

0

100

200

300

400

500

600

0 6 12 18 24 30

Time (days after treatment)

P(m

mo

lkg

-1D

M)

? = 156.6 + 13.79*x (r2

= 0.58*)

? = 297.1 + 7.281**x (r2

= 0.95**)

? = 303.5 + 6.46**x (r2

= 0.78**)

? = 262.56 + 5.51**x (r2

= 0.76**)

D

ŷ = 1364.7 -16.85**x (r = 0.72**)2

ŷ = 1427.6 - 23.3*x (r = 0.53*)2

ŷ = 566.7 + 57.72*x - 2.263*x (r = 0.55*)2 2

ŷ = 921.7 + 41.07**x - 2.005**x (r = 0.83**)2 2

ŷ = 156.6 + 13.79*x (r = 0.58*)2

ŷ = 297.1 + 7.281**x (r = 0.95**)2

ŷ = 303.5 + 6.46**x (r = 0.78**)2

ŷ = 262.56 + 5.51**x (r = 0.76**)2

���

��������������� ������������������������

��������������������� ���������� ��� ������� ��� ����� ������

���#�� ������=��� ���������������� ��������������#���*�=�����������������#���*��������������������������*�=�������������#���*������*�=���

���2L%�)ZZ����������IJ�/ZZ��������������/DI�IZZ��������������).�LZZ���������������������.�.ZZ����������������������������%�CZZ��������������������������D�%Z

V��������F�=���

!��"��* �������������������������@������������� �����������2��♦�!�/������!��� �)��\���������?�������������?����������������������������������?����-���������������!�D��#�����%.����������$�!���� ������������������������*��������������� ���!��������������������Y�D�D.�E�Z#���������@����������������[�D�D.�E�ZZ #���������@����������������[�D�D2�E���X�.�

��� ��' �#����������������!����������� �������������������������������� !������?�������������?����������������������������������?����-���������������!�D�������������%.������������������=�����������$���2!�/��� �)�������������$�@���2��!�/�� �� �)�����$����������������������G��������?� ��@������������������������!��������������@��!� ������ ����������������@��=�>�@N������!���Y�D�D.�E���X�.

���$�� ����� ������ ������ ����� �����

!��" ������ �0���� ������ ������

#��,����"�� ����� ����� ����� ����� ���0�

!��" ������ ������ �0���� ������

#��,����"�� ����� �0��� ���0� ����� �����

!��" ������ ������ ������ �0����

#��,����"�� ����� ����� ����� ����� �����

!��" ������ ������ ���0�� ������

��# 1"��,��"�, ���������������������#�"��$"� #��������������������0G�����

�����������/���������������������������������/������������������������������/�������������������������/

F������ .� ��?�� ��� ����� ��� ���� �����@��������������� ��� �*���������� ����� �� #�����@� � � ��������������������������@������������� ����������@��������$����=����?�������� ���@!������$� ����������������� � ���������� � �����!� ���� ���������� �����@����������������� �@�%��������� ��������*��������!��������@���� �����$����K������������/�����������������@������� � ���� ������ ���?���� ��� ������ �%� �� �� � ����� � �2L� �������������!� ���� ������� � ��� ������ LDP� ���� ���

��������������������������$�������������� ����/2� ������

���������������������

+) �, )�*

#�����@������������������� �$���������� �������

�*���������=����2!�F������2���������������$� ���������

��������������H��������������!�2II)E������ �������!�/DD)��

K�� � ������ ��� �� ������ ������ ������ ���������!� ����

0

50

100

150

200

250

300

350

0 6 12 18 24 30

Time (Days after treatment)

Le

afsu

ccu

len

ce

(gH

2O

m-2

)

= 262.0

= 213.0

? = 155.2 + 6.87**x - 0.174*x2

(r2

= 0.48*)

? = 116.6 + 7.03*x - 0.165*x2

(r2

= 0.63*)

A

y

y

0

50

100

150

200

250

300

350

0 6 12 18 24 30

Time (days after treatment)

Le

afS

uccu

len

ce

(gH

2O

m-2

)

? = 246.7 + 1.81**x (r2

= 0.96**)

? = 182.8 + 3.72**x (r2

= 0.77**)

? = 119.4 + 12.92** - 0.258*x2

(r2

= 0.82**)

? = 127.86 + 5.48**x (r2

= 0.92**)

B

ŷ = 246.7 + 1.81**x (r = 0.96**)2

ŷ = 182.8 + 3.72**x (r = 0.77**)2

ŷ = 119.4 + 12.92** - 0.258*x (r = 0.82**)2 2

ŷ = 127.86 + 5.48**x (r = 0.92**)2

ŷ = 116.6 + 7.03*x - 0.165*x (r = 0.63*)2 2

ŷ = 155.2 + 6.87**x - 0.174*x (r = 0.48*)2 2

���

��������������� ������������������������

����� ������� �� � �

��� ��) �����������@��������������������?������������?�� ��� ��������� ��������� ����������� �?�� ��-��������������!�D�������������%.���������������������$��?���� ���@,� � ��� 2/� �� � /L� � ������ ���� ���������������������G��������?� ��@��������������������?�!�������������@����� ����������������*��������������@�������������!� ������ ������ �����������@� �=�>�@N�� ����!��Y�D�D.�E���X�.

����������������������������������/

���$�� ����� ����� ���0�� ������

#��,����"�� ����� ����� ����� ��0��

#��,����"�� ����� ��0�� ���� �����

#��,����"�� ����� ����� ���� �����

�������������������������������������������������������/

���$�� ����� ��0�� ���� �����

#��,����"�� ����� ����� ���� �����

#��,����"�� ����� ����� ���� �0���

#��,����"�� ����� ��0�� ���� �����

�����1� �2�2"������

# 1"��,� "�,���������������������������� ���!��" ������ ���!��"

)�3)���45 )�$��

!��"��+ ����������@������������$��������?������������?�� ��� ��������� ��������� ����������� �?�� ��-��������������!�D��#�����%.����������$�!���� ������������������� ��� �*���������� ����� �� ��!� ���� �������������� Y� D�D.�E� Z#���������@� ������������ ��� [� D�D.�E� ZZ#���������@����������������[�D�D2�E���X�.��H�������������#U�

V��������F�=���

���!��������#�$"���������&"�,������!���6�����!���6�����&"�,�6�����!���6

���������������77��������77�����0�������������������077�������77

�������������������������������������������#�$"�������"�,�������#�$"������&"�,�6������������������������������������������������������������������������������������#�$"������� � ������ ��� ��� � �����������@� ����� ��$��

���� ������ �� � �����!� �� �������� ��� ��������� ��� ������<���>��������=��� ������������������������������������������ �������������� ������������������������������������!��������@�������������������������� �������� ��������� ����� ���� ����� ��� � ���� ������� ������������� =���������� ��� ������<���>� ������ ���� ���� ����������� ������������� ��� ��������� ������������ ����!� ?��� ������ � ������������������������������ ���������G����!/DD/��

#����������������� ��������?�!�?�������*����������������@� ��$���� #��� ��� ���������� ?��� ����� � �� �$���������������!������@���������$�����?� ������� ������� ��� ����� ����� ��,�� �F������ 2��� =���� �������$� ����� �� ���������@� ��� ���� �*�������� ��� ���� ������!?��� ��� ����� ����@� ��������� � ?��� ��� ��������������������������������G����!�/DD/���=�������������)!?��� �$���� ������������������������!���?� ������� ��@� ��� ���������� �F������ 2�!� ?��� � � ���� �������� @� �����$� � ���� ��?���� ��� ����� �#����� ��� ��!/DD)���� ������������������������#�$�������!�/DD)����=��

��@������������������?����������������������������

�� ������� ��� ������� ��� ��$��� ��� ��� ����� ����!� ���

���

����

����

��

�µ�

� �

������

���

����

����

��

�µ�

� �

�����

����� ��������������� ��������������������������������=����2���=���������������������@�����������������������������������������������!����������� ��������������������������?������$�������=��,��� �]�����!�/DD/��+����������@!�������� ������������������ ��������������������������� ����$������������ ���������@�� �

=�� �������� ��� ���� ���?�� ������ ���� ���� ����������� �?��� �������� �� � ��*��� �������� ��� ���� �������G����!�/DD/�!��� ��������������������� @�������� ����� ������ ��� ��������� ��� �������� �������� ������ ��������� ����� ��� ���� ���?��� =��� ?�������� �$� ���� ������������)!�?�����?� ����?������������?��������?���� �������� � ��� ���� ������� �F������ 2�!� �� �?��� ��

���

��������������� ������������������������

��������������������� ���������� ��� ������� ��� ����� ������

��������@� ��*��� ���������������!��������@���!�?�������$�@������F������/��

=�� �� ������� ��� 9� �������������� ��� �� ��������������� �����$� � ��� ������ �������� � ��� ��-� ������!�� � �� � ������� � ��� ��� ����� � ��� ��� ��������������������������?����9��� ��������������������� �������� ����������� �������� �G�������!� 2II.��� Q�?�$��!����������� ������� �$�� ����� ��� ��� !� $��@���� ���������� ��� �9������������������!�#�$�������!�/DD)������� ���������������9 �������������������!�(,�$� �������� � =�����!� /DDDE� ����� �� ��� ��!� /DD)���=�� ���������������� �������������������������������������� ������������ � ���� ���� ��� ���� ��������� ������� �� �����������������F������)���F����*����!��������������� ������C� ������������� ����� ��� ����������9����������������� �� �����6������ ��� ��-� ������!� ?��� ��� ����������������� ?��� ���� � ��� ��� �� � ��� �*���������� K�� ������������ ��� ����� ���� ����� ����������� ��� 9

�������������� ���� ��� ����� � ��� ����������� ��� 9 ���������������!�?������ ����������������������$������������ �����! � �������@� �� � ��� ����� ����� � ������$������� =�������! � ���� ��������� ��� ���� � ������6������ ��� ��� � ������� ��� ����� ���?�� �� ��������@�������� �����������������

=�� ��������� ��� ���� :� �������������� ��������� ����

���� ������� ��� ����������� ?��� ���$����� ������� ������� ?���������� �� � ��������� ��?���� ��$��� �#�$�� ��� ��!

/DD)���� K�� ����!� ������@� �>�@� �������� :� �����������B������� ��� ��!� 2IJLE�G�������!� 2II.E���$����� ��� ��!

/DD2���Q�?�$��!� ��*��� ����:������������������������������ � ������� ��� ������ ���?�� ��� ������ ��$���������

���������� �-��>!�2I%CE�A��������� �G���!�2IJLE�A�������� �A���$�!�2III���8������������ !�:���������������

����������� ������� ��� ���� �� �����6��������� �� ��� ������������� ��������� � ?��� �� ������� � ���� � ������?��

=�� ��������� ��� ���� ���������� �F������L����� �������� ��� ���������������������@��������������������� ��� � ��� ����� ����������� ��� ���� ������� �@������������ ������������������@���*�������!���������!�� ������ ����� ������$�� �������� �������!� /DDD��� =�������� ��?� � ���������� ��� ���� ���������� �F������ L��� ��������������������=����/�������$������?���� ������������������ ������$������� @� �$���� ������������������������!� ���� ��@� ���� ����������?��� �������� � ������������������� ����������?��!��������@����� �!

��� �������� � �@� ������ �����!� #�������$!� 2ICLE� ]�>��!2II2���=�������������������������������������@��*��� � ������� ��$��� �������� ���� ���� ��������� ��� � �� �����@���������� �?��������������������@����>����!������������������������� �������@������ ����������������?���� ��������� ����?�����>�������������������!�2I%.E�#�����������!�2IILE�-����������!�/DD)��

����� �����@� ������������ ���� ����� ���� ����� ������������� ��������=����)����� ������������$� ������� ����������� �����@� ���>����� ��������� � ?������������������������������ ��������������������K���������!������@�������������������������������� ������������ � ������$� ����������������������������������!��������@����?�������������?���������������������������!�:�������� �8N����@!�2I%/E������ �������!�/DD)���K��������������� @!������@���������������������������������� ������� ������ ��� ������� ���� ��� ����������� ������ ����� ��� �*���������� =��� ��������� ��� � ������������ ?��� ��� ��������� ��� ������<���>� ������ ��� ����������� � ������ �=���� 2�!� ?��� ��� � �� ���� ��������,�������������������������!����9��F������)�!��� !�����6����@!��� �����������������@�������������������

G����������� ��� �����@������� ����� ��� ����������� ������ ��� ����������� ��� �������� �F������ .�!� ����������$����� �����$������� ���� �����@������� ����� ��� ����������$�� ��� ���� ������� ���� �������?�� �H�,�������� ��!/DD)���=���������������������������6�����������$����������@��������� ���������� ����������� ��� ���

���������!� ��������� ���� ?����!� �� � ���� �����@�����������������������������������!�?���������@��� ���

��� �����������������������������������������������>������@������� � K�� � �� ���! � ������� ��� ����

�������@!�������� �������������������������=����2�!��� � ������� ���� �$�������@� ���� ���������� ��$��� �� �������� ���� ����� � ��������� ��� ��� ?����� �$����� ���������������������$������

=�� �������� ������� �� ������ ���� ������@� ������ ����������@��� ��@�����@������?���������!��� �������������������� ���� �������������� ���������� ���������K�����������������*� ������� �����*� ���������?���������$� �����������������������������!�?������ ��� ������������������������������������� ������������������� ������� ������������� !���������������@!�?��� ��������������� �� � ���������������� ������ �� =�� �����������������������������@� ��*��� ����� ���� �� �-��� ��� �����$������ ����������������� �������������������

���

��������������� ������������������������

����� ������� �� � �

�$�$�$*�$

(�����0K� �2ILI��-������ ��,@��� ��� ������ � ����������:�@�����*� ������� ��!��������:����:@�����/L42�2.�

(@���� B#!��������0�� �2III��(� 6��� � �� �� '���� ��������������+F:H!�-�������A��� ��

(,�$� �������(0!�=������M���/DDD��U�����������������&������ �� ���4� :����� KK � � 0��������"��� ����������������������^����������������"3��������� ���B�$��H�����U����(��1���(��������L42C.�2%2�

H��������� �!� #�>��9!� �_����(� �2II)�� A��?�� �� �$�������� ��� ������� ��$��� �� ��� ��� ������� ����-���������:�����2I24L))�L)I�

H��������� �!� #�>��9!� �_����(� �2II.�� A��?�� �� �$�������� ��� ������� ��$��� �� ��� ��� ������� ����-�������4�����������������������������������������?�������������:�����2IC4CII�%D.�

H�,�����G(!�8�$�����B(!������ ��-F!�:������M=!�A�����F���U��/DD)��F�����1������ ��������� ������������������������������ ����������������������:�����K���������#����=�����Q�����L%42LI�2./�

-�����:Q(!�#�$��MV!�H�,�����G(!�U�5���F���M!�:�����M=!� A�����F��� U� �/DD)�� -����������� �� �1$���� �����������&�������������&�������������$����� ������������������������ ���`������ � ���B�$��H�����H���/C4/JI�/I%�

F�?����=M��/DDL��K����$�����������������������M��U*��H����..4)D%�)2I�

A������=:!� :��>���GH!�A�����AM� �2IJL��(������� �������������������� ������������ ��������������@�� �������������(������M��%C4)%2�)%L�

A�@��QM��/DDD��:�������� ������� � ���������������������� ��K�4�8�$�����=#!�(�����M���B�!�B������BU!�#�$��MB-��� ��!(���������!�#���������� � ������#����a�� �!����)/I�)LC�#���� � ��H��������� ��-�������� ��#��!�V�"����

A�����F���U!�:������M=!�-������F(:!�U�5���F��� M�2IJ)��U������������-�������@����!�!���� ����!����������������������$��@�����������������������@� ��� �������������������:@�����:�����.I42J)�2JJ�

A�������#B!�G����UV��2IJL��K��������$�������������������@��� �����������������������@������(������M��%C4CCJ�C%C�

A������!�#B!�A���$��-G��2III��#�����@�����������������������������������������������#����Q�����%J4�2/%�2.%�

A����?�@�Q!�G�����B��2IJD��G���������������������������������@�����(�����B�$��:����:@�����)242LI�2ID�

����� ��-F!�-��������M!�-����G(8!�B��,�Q(!�:������M=�/DD)�� #����� ������������ �� � ������������ ������������ ����� �$������������?��������������@����� ���������������U�$������U*���H����LI42D%�2/D�

��������� �/DDD��U������������V������� B����(����� �=�*���!�#���-�����

G��$����U!�V�����A-!�8�$�����(#��2IJI��($���"��� �U��� ������������� ���:�����4�:����1�������(����"3���(������"���H��������������:��6����� ��:��������� �F������!�:����������

G����$����(��2III��(����� ���������$���������������6���������������H��,��(����H����=������L/4I�2L�

G��������Q��2II.��G�������������������Q�����:�����(�� �����:����!���� ���

G�@�,�?��G!�:�$���G(!�H���GFG��2IJL��($���"��� ��5�� ������������� ��������������*���"��� ����������������� ��� ����������-������-����)C42I.)�2I.J�

G�����B��/DD/��-��������$���@�����@���������� �?������������:����-��U�$������/.4/)I�/.D�

��$����� MG!�H�����G(!�-�� ��(!�G������,�V� �/DD2�

:�������� ����>�� �� � ������������� ��� �����������

������������M��:����:@�����2.J4)%.�)J2�

�������BQ!�-��>�B(��2I%C��K��������$�������������������@

�� � ��������� ���������� ��� ��� ������� �����

�@�����,�����������$����:����:@�����.%42.%�2C2�

�����-�!�B������GU��2II/��(����������������������

�@���������������������������$�������������������

����������:����#���2LC4II�2D%�:������M=!�8N����@�M���2I%/��U����������������������������

������������@���-�������@��:@�����:�����/%4I.�2DD�B�������M7�����MK��/DD2��(�'�����U����1����������#(UA�

U ������+FV!�V�"����B�������M9G!����>���-#!�H������(A!�M�� ��,>@�8!�������

BQ��2IJL��#�����������������������������>��������,������ ����� ��� ���� �@� ��:� ���������������� ����������:����:@�����%.4IL%�I.D�

#�$��MV!������ ��-F!�(,�$� �������(0!�-�����:Q(!�:�����M=!�U�5���F���M!�A�����F���U��/DD)���-����������������������"������ �������������� ������������������������� ���������������������-������(������))42/.�2)2�

#�$��MV!������ ��-F!�-�����:Q(!�U�5���F���M!�A�����F���U!:������M=��/DD)���:@������������������������-�������� ��?�������������?�������������������������������� �?��-�-

���H��,��M��:����:@�����2.4II�2D.�

������?�����������!������������ ����9��� �:��������������� ��$��� ������� � ��� ��� �����6������ ��� �� ��� ��������������� ������ ���� ��������� � ?��� ����������������8������������ !�������@� � ������������������<���>������!��������������!������������������!��� �����@� ������������ ���� ����� ���� ����!� �� � �������������� ��� ��������� ��� ��� ��������� ���������� ��?���������������������������������

#�,��� ���������=�� ������� ���� ���>��� ���-�:6�� �F+�-(:����������������������

���

��������������� ������������������������

��������������������� ���������� ��� ������� ��� ����� ������

#�����GF!�-������F(:!�:������M=!�U�5���F���M!�A�����F���U��/DD)��A��?���� ����������������������?������ ������������� ����������@��H����:�����L%4)L2�)LC�

#�������$�H:��2ICL��:@����������������������������������������:�����������#����������=����������!�M��������

=��,� �!� ]������ U� �/DD/�� :���� :@�����@�� #������(���������!�G������������

���������9!�M��������0Q!�Q�� �@�MF��2I%.��=������������ ������@� ��� ���?�� ������� ���� !�������� ��� K�(�������������������������������������������(����H���)I42D/I�2D)J�

]�>���G��2II2��U������������-�������?���� ��@�����@����������������� �-����������� �������� ������#���Q�����L%4)D.�)2.�