آزمايشهای انجام استاندارد روش ، هموگلوبين گيری و PCVاندازهسلولی شمارش

Measurement of BloodHemoglobin using

Hemiglobincyanide(HiCN) Method

پتاسيم سيانيد فري توسط هموگلوبين ابتداآهن) گلوبين ) همي شده اكسيده

به تبديل پتاسيم سيانيد توسط گلوبين همي سپس. ميشود سيانيد گلوبين همي

اتاق حرارت در واكنش واكنش ايجاد براي الزم كمتر 5زمان يا دقيقه

معرف

KCN 0.05g K3Fe(CN) 6 0.2g

KH2PO4(Anhydrous) 0.140g

Detergent 0.5-1ml

Reagent water(Type 1) 1000ml

معرف مشخصات

رنگ وزرد شفاف واكنش ايجاد براي الزم كمتر 5زمان يا دقيقهرا ژدتر ها پروتئين قرمزورسوب هاي گلبول ليز انها

. دهند مي افزايش از بيشتر موج طول . 480در ندارد نوری جذب نانومترpH=7-7.4. شود ريخته دور كدورت صورت در. شود تهيه تازه بصورت هرماه

Sampling

VenipunctureK2EDTA or Na2EDTA)1.5-2.2mg/ml blood(Fresh sampleSolution of sample &Reagent is stableK3EDTA

وتجهيزات وسايل مواد؛

استاندارد ها ولوله پتها پي مثل اي شيشه وسايل كليهوكاليبره

. باشند تميز شيميايي لحاظ از كاليبره اسپكتروفتومتراستانداردهموگلوبين

Reference Method Macrodilution

100 با خون معرف 25ميكروليتر ليتر ميلي4/0 با 5/0يا خون ليتر معرف 100ميلي ليتر ميلي04/0 با خون ليتر معرف 10ميلي ليتر ميلي

Routin procedure

20 + خون معرف 5ميكروليتر ليتر ميلي

آزمايش روش

نوري جذب از استفاده با نمونه هموگلوبين غلظتموج طول در با 540نمونه بالنك مقابل در نانومتر

كمك با يا استانداردو غلظت و نوري جذب كمك. ميشود محاسبه استاندارد منحني

ليتر در گرم گيري اندازه واحد

تداخالت

LipoproteinemiaLipemiaWBC>20×109/L

Plt>700×109/L

Hb S

ها خطا

گيري نمونه هاي خطا آزمايش انجام روش هاي خطا تجهيزات و مواد به مربوط هاي خطا آزمايشگر هاي خطا

Procedure For Determining Packed Cell Volume By Microhematocrit Method

.

PCV .نسبت حجم گلبولهاي قرمز به حجم خون كامل ميباشد

آزمايش اصول

مويرگي؛ وشرياني خونگيري وريديK2EDTA جهت مناسب انعقاد ضد

كاليبراسيونK3EDTA در چروكيدگي ايجاد علت به

قرمز هاي كاهش% 2را MCVگلبول.MCHCو ميدهد افزايش ميزان همين به را

آزمايش اصول

دماي نمونهنگهداري 18-26 °در اكثر حد نمونه 6آزمايش از پس ساعت

. شود انجام گيري در خطاي قبول روش قابل .ميباشد±% 1اين تايی دو بصورت آزمايش انجام

لوله مشخصات مخصوص شيشه از جنس لوله ميليمتر75 ±5/0طول جداره ميليمتر 2/0ضخامت د 55/1 ـ +0.085اخلي قطر انتها يك در آبي باند داراي

دستگاه مشخصاتميكروسانتريفوژ

از بيشتر چرخش سانتيمتر8شعاع عرض برسد 30در سرعت حداكثر به ثانيهRCF هزار 15-10حدودg بمدت محيط در

دما 5حداقل افزايش بدون 45از دقيقهدرجه

. اتوماتيك سنج زمان قابليت) داراي باحداقل ثانيه( 30تنظيم

RCF=Relative Centrifugal FieldRPM=Relative Per MinuteRCF=0.00001118 × r × N

22

آزمايش روش

ميكروليتر خونميكروليتر خون5050•طول لوله از خون پرشود.طول لوله از خون پرشود.3/2-4/33/2-4/3• ميليمتر نباشد. ميليمتر نباشد.44طول خمير مسدود كننده كمتراز طول خمير مسدود كننده كمتراز •نمونه ها بصورت مضاعف آزمايش شوند.نمونه ها بصورت مضاعف آزمايش شوند.•دقيقه خوانده شوند.دقيقه خوانده شوند.1010نتايج حداكثر پس از نتايج حداكثر پس از •..بيشتر نباشدبيشتر نباشد05/005/0تفاوت نمونه هاي مضاعف از تفاوت نمونه هاي مضاعف از •

مرجع ودامنه ميانگين

( 0.4-0.54مردان)0.47 (0.37-0.47زنان)0.42

خطا منابع

گيري نمونه خطاهايلوله اخط هاي خواندن خطاي پالسما افتادن بدام خطاي

: كاذب افزايشناترمي هيپوپالسما افتادن بدام

: كاذب كاهشاضافي انعقاد ضد

هموليزهيپرناترمي

کيفی کنترل و كاليبراسيونميکروهماتوکريت دستگاه

سرعت- 11 سرعت- بررسي بررسيسنج- 22 زمان سنج- بررسي زمان بررسيخوانش- 33 ابزار صحت خوانش- بررسي ابزار صحت بررسي

بررسی مستقيم غير روشكاليبراسيون

با خون نمونه از PCVچند حاوی 5/0کمتر وبار K2EDTAضدانعقاد ) بيست از پس را

مدت به دوتايی صورت به نمودن ، 3سروتهنتايج 11و 9، 7، 5 و کرده سانتريفوژ دقيقه

بودن مناسب صورت در که گردد مي ثبتدستگاه ) دقيقه( gتوان از حاصله به 5نتايج

بماند . باقی تغيير بدون بايست می بعد

Blood Cell Counting

Leukocyte Counting By Manual method

روش اين دقت به% 5/6عدم لكوپني موارد در كه15. ميرسد%

حاوي خون . EDTAاز ميشود استفاده استيک اسيد كننده رقيق ( 20/1رقت% ) 2مايع

. ميكند ليز را قرمز گلبولهاي رقت لكوسيتوز موارد 200/1يا 100/1در رقت لكوپني موارد 10/1در

خطا منابع

کافی ميزان به نکردن مخلوط كننده آزمايش خطاي وسايل از ناشي خطاي ديد ميدان خطاي باشد بيشتر شده شمارش سلولهاي تعداد چه هر

. ميشود كمتر خطا ميزان

Platelet counting By Manual Method

خطا منابع

نمونه آوري جمع) ( مزاحم خارجي ذرات فاقد كننده رقيق تهيه سازي رقيق تكنيك الم نبودن پاكيزه

حداقل كه وقتي روش اين دقت سلول 100عدمشود شمارش 40واگر% 11شمارش پالكت

%15شود يكديگر؛جسم به چسبيدن به پالكتها تمايل دليل به

. شد ميبا مشكل شمارش وشيشه خارجي :انعقاد ضد حاوي وريدي خون EDTAنمونه آمونيوم اگزاالت كننده رقيق آب% 1محلول با

مقطر

استفاده پالكتها شمارش انتخابي روشمي كنتراست فاز ميكروسكوپ از

باشد

شما توجه از تشکر با