86 Выпуск 2 (66). 2018

УДК 616.12-008.9:546.73

СТРУКТУРА МИОКАРДА И ЦИТОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ КРЫСВ УСЛОВИЯХ ГИСТОТОКСИЧЕСКОЙ ГИПОКСИИ

Т.П. Сатаева, И.В. Заднипряный, О.С. ТретьяковаМедицинская академия имени С.И. Георгиевского

ФГАОУ ВО «Крымский федеральный университет им. В.И. Вернадского»

Сохранение и поддержание энергетической функции сердца является одной из центральных задач современ-ной кардиологии. Исследование проводилось на 25 половозрелых самцах крыс линии Wistar массой 220–310 г. Дляполучения токсического раствора хлорид кобальта растворяли в стерильной дистиллированной воде таким образом,чтобы на единицу раствора, равную 0,2 мл, приходилось 0,8 мг кобальта (в пересчете на металл). Проведенное иссле-дование показало, что в миокарде подопытных крыс развивались изменения, которые по морфофункциональнымпроявлениям можно было отнести к разновидностям токсической кардиомиопатии. Типичные изменения миокардапосле введения хлорида кобальта проявлялись в следующем: а) прогрессивное уменьшение доли неповрежденныхкардиомиоцитов; б) лизирование митохондриальных крист и контрактурные изменения сократительного аппарата; в)нарастание стромальной пролиферации и лимфоцитарной инфильтрации, затрагивающей мышечные волокна с пос-ледующим коллагеногенезом.

Ключевые слова: гипоксия, миокард, крысы, хлорид кобальта, митохондрии, дегидрогеназы.

DOI 10.19163/1994-9480-2018-2(66)-86-91

MYOCARDIUM STRUCTURE AND CYTOCHEMICAL INDICES OF RAT BLOODIN CONDITIONS OF HYSTOTOXIC HYPOXIA

T.P. Sataieva, I.V. Zadnipryany, O.S. TretiakovaMedical Academy named after S.I. Georgievsky

of FSAEI HE «Crimean Federal University named after V.I. Vernadsky»

Preservation and maintenance of the energy function of the heart is one of the central tasks of modern cardiology. Thestudy was carried out on 25 mature male Wistar rats weighing 220–310 g. To obtain a toxic solution, the salt of cobalt chloridewas dissolved in sterile distilled water in such a way that 0,8 mg of cobalt was concentrated in 0,2 ml of solution. The studyshowed that changes in the myocardium of experimental rats developed which could be attributed to varieties of toxiccardiomyopathy according to morpho-functional manifestations. Typical changes in the myocardium after the introduction ofcobalt chloride were manifested in the following: a) a progressive decrease in the proportion of intact cardiomyocytes; b) lysisof mitochondrial cristae and contractural changes in the contractile apparatus; c) the growth of stromal proliferation andlymphocytic infiltration, affecting the muscle fibers with subsequent collagenogenesis.

Key words: hypoxia, myocardium, rats, cobalt chloride, mitochondria, dehydrogenase.

Сохранение и поддержание энергетической фун-кции сердца является одной из центральных задач со-временной кардиологии. Образование высокоэнергети-ческих соединений, необходимых для всех видов дея-тельности миокардиальной клетки происходит, восновном, за счет процессов аэробного окисления.Многие патологические процессы в сердце сопровож-даются нарушениями в обеспечении миокарда кисло-родом [1]. Понимание механизмов развития таких на-рушений, а также выбор путей и средств защиты мио-карда от гипоксии невозможны без углубленного ивсестороннего изучения соотношения физиологическойфункции органа и его энергетики. Поэтому исследова-ния данной проблемы представляют не только значи-тельный теоретический интерес, но и являются чрезвы-чайно актуальными для практической медицины.

Сердце чрезвычайно чувствительно к кислород-ной недостаточности. Воздействие гипоксии на сердцеснижает его сократительную функцию. Известно, чтоконтрактильная активность – энергозависимый процесс,

тесно связанный с окислительным метаболизмом сер-дца, поэтому нарушение сократительной способностимиокарда при гипоксии является, прежде всего, резуль-татом нарушения последнего. Показано, что потеряспособности сердца при кислородной недостаточностиподдерживать нормальную силу сокращений и восста-навливать ее в процессе реоксигенации связана с ис-тощением энергетических субстратов и уменьшениемскорости их утилизации [2]. Однако при ряде форм кар-диомиопатий в результате гипоксических воздействийтакже происходит нарушение синтеза и экспрессиинекоторых белков, как в саркоплазме кардиомиоцита,так и в интерстиции, что приводит к функциональнойнесостоятельности миокарда [1, 2].

Одна из частых форм гипоксии – тканевая (гисто-токсическая) гипоксия, которая развивается при неспо-собности клеток утилизировать кислород в результатепоражения ферментов тканевого дыхания или мембранклеток [3]. В патогенезе данного вида гипоксии ведущуюроль играют повышенная проницаемость клеточных

87Выпуск 2 (66). 2018

мембран и инактивация дыхательных ферментов, чтоможет наблюдаться при отравлении химическими ве-ществами, такими как соли тяжелых металлов [4].

Широко распространенный промышленный экзо-токсикант хлорид кобальта (CoCl2) в токсических до-зах способен более прочно связываться с гемом, чемжелезо, и оказывать действие, аналогичное гистоток-сической гипоксии, что позволяет применять его длямоделирования гипоксических состояний в экспери-менте [4]. Обладая высокой сенсибилизирующей ак-тивностью, кобальт при его хроническом поступлении ворганизм производит полиморфное поражение сердеч-но-сосудистой, дыхательной и кроветворной систем, чтопозволило отнести кобальт к веществам I класса опас-ности [5]. Кардиотоксическое действие кобальта обус-ловлено его способностью приводить к развитию дила-тационной кардиомиопатии, нарушению сократительнойфункции миокарда [4, 5]. Накапливаясь в миокарде,кобальт блокирует ферментную систему дегидрогеназ.Нарушение этих процессов, являющихся основнымипоставщиками энергии для миокарда, способствуетразвитию нарушений метаболических процессов в сер-дечной мышце [6].

ЦЕЛЬ РАБОТЫИзучить морфологические особенности структуры

миокарда и цитохимические показатели крови половоз-релых крыс в условиях гистотоксической гипоксии.

МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯИсследование проводилось на 25 половозрелых

самцах крыс линии Wistar массой 220–310 г. Конт-рольная группа была представлена 5 интактными жи-вотными. Для получения токсического раствора хло-рид кобальта растворяли в стерильной дистиллирован-ной воде таким образом, что на единицу раствора,равную 0,2 мл, приходилось 0,8 мг кобальта (в пере-счете на металл) [7]. На каждые 100 г веса крысы вво-дили 0,1 мл токсического раствора. Раствор хлоридакобальта вводили через атравматичный зонд в желу-док в дозировке 4 мг/кг, ежедневно 1 раз в сутки втечение 30 дней.

Животные содержались в виварии, уход за нимиосуществлялся в соответствии с нормами и правиламиобращения с лабораторными животными (ЗападнюкИ.П., 1983). Крысы выводились из эксперимента путемдекапитации под наркозом (эфир с хлороформом) всоответствии с «Международными рекомендациями(этический кодекс) по проведению медико-биологичес-ких исследований с использованием животных» (1985)и правилами лабораторной практики в Российской Фе-дерации (приказ МЗ РФ от 19.06.2003 № 267).

После проведения торако- и перикардиотомии подэфирным наркозом сердце извлекалось и сразу же пос-ле взвешивания помещалось в кардиоплегический ра-створ (0,9%-й КСl при температуре 0 оС), чем достига-лась остановка сердца в диастолу.

Для гистологического исследования были отобра-ны образцы миокарда левого и правого желудочков.Кусочки миокарда фиксировали в 10%-м забуферен-ном формалине в течение 5 суток, затем промывалив проточной воде, проводили через спирты, возраста-ющей концентрации и заливали в воск-парафин. Гис-тологические срезы толщиной 5–6 мкм, окрашивалигематоксилином и эозином, а также по Маллори длявыявления маркеров фиброгенеза [8]. Микропрепара-ты срезов миокарда, окрашенные гематоксилином-эозином, изучали с использованием микроскопаOlympus CX-3 (Япония).

Для гистохимического исследования липидовматериал фиксировали в 10%-м растворе забуфе-ренного формалина с последующим приготовлени-ем парафиновых блоков. С каждого блока после за-морозки криоспреем были сделаны серийные сре-зы толщиной 5–10 мкм, которые окрашивалисуданом III [8].

В настоящей работе был использован метод элек-тронно-микроскопического исследования. Образцы ми-окарда левого желудочка фиксировали в 2,5%-м ра-створе глутарового альдегида на 0,2 М какодилатномбуфере с pH = 7,2 при температуре +4 оС и постфиксиро-вали в 1%-м растворе OsO4 на холоде в течение 4 ч [9].В дальнейшем дегидратировали биоптаты в этанолевосходящей концентрации, заливали в смесь epon-araldit. Ультратонкие срезы (50–80 нм) монтировали насетки и контрастировали уранилацетатом (5%-й рас-твор в метиловом спирте) и цитратом свинца (ReynoldsE.S., 1963). Полутонкие и ультратонкие срезы готови-ли на ультратоме УМТП-7 (Украина). Препараты изуча-ли на электронном микроскопе Selmi-125 при ускоря-ющем напряжении 125 kV.

Для определения цитохимических индикаторовгипоксического повреждения проводилось изучениеактивности дегидрогеназ лимфоцитов – ферментовцикла Кребса: сукцинатдегидрогеназы (СДГ) и лак-татдегидрогеназы (ЛДГ), значения которых рассмат-ривались как неспецифический показатель повреж-дения клеток [10], а также для оценки баланса глико-лиза и дыхания в митохондриях лимфоцитов, чтоможет отражать их взаимосвязь с энергетическимобменом в кардиомиоцитах.

Активность ферментов определяли цитобиохими-ческим (ЦБХ) методом определения активности фер-ментов в лимфоцитах на мазке крови по методике [10].Cвежепpиготовленные мазки кpови фикcиpовали в те-чение 30 c 60%-м ацетоном, забуфеpенным 10 мМНEPES, пpи комнатной темпеpатуpе, pН 5,2–5,4.Активноcть феpментов измеpяли по воccтановлениюнитpоcинего тетpазолия в cвежепpиготовленном мазкекpови, инкубированной в cpеде, cодеpжащей 125 мМКCl (Sigma, CША), 10 мМ HEPES (Sigma, CША),1,22 мМ нитpоcинего тетpазолия xлоpида (DudleyChemical Corporation) c добавками 5 мМ янтаpнойкиcлоты для выявления СДГ или смеси лактат (5 мМ) +

88 Выпуск 2 (66). 2018

малонат (5 мМ) + НАД (0,5 мМ) для выявления ЛДГв течение 1 ч пpи 37 оC, pН 7,20 [9].

Для оценки активности ферментов в клетках кро-ви вычисляли средний цитохимический показатель(СЦП) по формуле Kaplow:

СЦП = N1 + N2х2 + N3х3 + N4x4 ,100

где N – количество клеток из 100 просмотренныхнейтрофилов в одном мазке с определенной степеньюактивности фермента; 1, 2, 3, 4 – степень активности;100 – число просмотренных нейтрофилов в одном маз-ке. При этом выделяли четыре степени активности(4-я ст. – нейтрофил полностью покрыт гранулами фор-мазана; 3-я ст. – 3/4 активности; 2-я ст. – 1/2 активностии 1-я ст. – 1/4 активности).

Все измерения и исследования производилис использованием средств измерительной техники,прошедших метрологическую поверку, и вспомога-тельного оборудования, прошедшего аттестацию набазе отдела морфологии с электронной микроскопи-ей Центральной научно-исследовательской лабора-тории Медицинской академии имени С.И. Георгиевс-кого Крымского федерального университета имениВ.И. Вернадского.

Статистическую обработку данных осуществля-ли с помощью лицензионного программного обеспече-ния Microsoft Office Exсel-2007 и Statistica 10.0. Данныепредставляли как M ± m. Отличия между группами оце-нивали по t-критерию Стьюдента, различия между ве-личинами считали достоверными при p < 0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯИ ИХ ОБСУЖДЕНИЕВ ходе проведенных исследований выявлено, что

в обеих опытных группах происходит достоверное сни-жение массы тела животных по сравнению с контро-лем на (25,61 ± 1,3) % (p < 0,05), а абсолютной массысердца – на (18,73 ± 1,5) % (p < 0,05). При этом данныепоказатели значимо не отличались друг от друга у жи-вотных разных опытных групп. Само снижение массысердца связано, по-видимому, с тем, что при гипоксиив миокарде происходит уменьшение поглощения кис-лорода, следовательно, имеет место снижение окисли-тельных процессов; уменьшение фосфорилирования,т.е. снижается активность синтеза макроэргическихпродуктов; нет систематического распада АТФ и креа-тинфосфата, и это приводит к уменьшению стимуляциигенетического аппарата и, как следствие, к угнетениюсинтеза белка.

Гистологический анализ светооптических препа-ратов выявил, что в строме миокарда подопытныхживотных развивается отек, который распространяетсяпочти на весь миокард. В цитоплазме кардиомиоцитовнаблюдаются дистрофические изменения, в интерсти-ции появляются очаги миоцитолиза и наблюдается лим-фоцитарная инфильтрация (рис. 1).

Рис. 1. Морфологические изменения миокардасамцов крыс в условиях гистотоксической гипоксии:

признаки дистрофии и отека миокарда, исчезновениепоперечной исчерченности миофибрилл,

их волнообразная структура.Окрашивание гематоксилином-эозином. Ув. х 400

Окрашивание по Маллори выявило избыточноеколичество коллагеновых волокон в интерстиции, а так-же в периваскулярном пространстве, что, по-видимо-му, дополнительно затрудняло транспорт субстратови кислорода из кровеносного русла к рабочим клеткамв условиях гипоксии (рис. 2). Помимо этого, повсеме-стно выявлялись признаки нарушения гемодинамики,неравномерного капиллярного и венозного полнокро-вия, запустевания и спазма ряда сосудов гемомикро-циркуляторного русла за счет развития периваскуляр-ного отека.

Рис. 2. Фибриллогенез в периваскулярном пространстве,местами разволокненные саркомеры миокарда.

Окрашивание по Маллори. Ув. х 400

По данным гистохимического исследованияв ряде кардиомицитов отмечалась жировая дистрофия,которая, очевидно, развивалась за счет декомпозициижиро-белковых комплексов мембран внутриклеточныхструктур, а также в результате инфильтрации кардио-миоцитов липидами. В большинстве кардиомиоцитов

89Выпуск 2 (66). 2018

выявлялись мелкие включения жира (пылевидное ожи-рение), которые сливались в капли (мелкокапельноеожирение), заполняющие у некоторых клеток всю сар-коплазму (рис. 3).

Рис. 3. Жировая дистрофия миокарда. Кардиомиоцитыс пылевидными и каплевидными диффузными

жировыми включениями.Окрашивание Суданом III. Ув. х 400

В ответ на гипоксическое воздействие у животныхразвивались характерные морфологические изменения вмиокарде. Сарколемма отдельных кардиомиоцитов выг-лядела размытой, неоднородной по электронной плотно-сти. Отмечался более электронноплотный матрикс орга-нелл, в частности митохондрий и эндоплазматическойсети. Часто встречались кардиомиоциты с крупными,вытянутыми ядрами, в некоторых случаях ядерные обо-лочки образовывали складки, инвагинации, выпячивания.Количество гетерохроматина существенно увеличивалось,и его скопления концентрировались по периферии ядра.В ряде кардиомиоцитов обнаруживался довольно выра-женный внутриклеточный отек, чаще наблюдавшийсяв субсарколеммальном пространстве (рис. 4).

Рис. 4. Фрагмент кардиомиоцита. Инвагинаты ядра (Я).В митохондриях (М) – деструкция крист и диффузнаягомогенизация матрикса, разрушение саколеммы

(стрелки). Дезорганизованные коллагеновые волокнав интерстиции (стрелки). (ТЭМ, х 15000)

Заметные изменения претерпевал и энергетичес-кий аппарат клеток. Форма органелл обычно не изме-нялась. Митохондрии выглядели круглыми, овальны-ми или вытянутыми, но их матрикс был конденсирован-ным. Во многих митохондриях кристы были лизированы,что свидетельствует о значительном угнетении энерге-тических процессов в клетках. В зоне деструкции кристобнаруживались точечные зоны просветления (рис. 4).Иногда встречались гигантские митохондрии с разру-шенными кристами и просветленным матриксом.

Миофибриллярный аппарат кардиомиоцитов так-же характеризовался большой гетерогенностью. В боль-шей части клеток он имел нормальную структуру.В некоторых кардиомиоцитах миофибриллы находилисьв состоянии расслабления. Однако наиболее характер-ной особенностью миокарда крыс, подвергнутых гис-тотоксической гипоксии, было наличие участков «пере-сокращения» мышечных волокон (рис. 5), т.е. такоесокращение саркомеров, при котором практически ис-чезает Н-полоса, а ширина I-дисков сильно уменьше-на. В разных кардиомиоцитах эти участки имели раз-личную величину. Так, в одних клетках «пересокращен-ными» выглядели только отдельные пучки миофибрилл,а в других почти все миофибриллы. Выявлялся значи-тельный интерстициальный отек, наблюдалось увели-ченное содержание коллагеновых волокон и соедини-тельнотканных клеток, что может свидетельствовать оремоделировании интерстициальной ткани миокарда,обусловленном, возможно, замещением некротизиро-ванных кардиомиоцитов.

Рис. 5. Некроз сократительного кардиомиоцита.Миофибриллы в состоянии контрактуры II степени.

Конденсация матрикса митохондрий. (ТЭМ, х 16000)

Таким образом, к характерным изменениям струк-туры миокарда, вызванных хлоридом кобальта, можноотнести комплекс реактивно-дистрофических измененийв миокарде, проявляющийся в нарушении ультраструк-туры ядер, деструкции сарколеммы по типу некроза имембран органелл, в частности митохондрий, лизисамиофибриллярного аппарата, усиления фиброгенеза,главным образом, в периваскулярных зонах.

90 Выпуск 2 (66). 2018

Анализ цитохимических показателей в нейтрофи-лах периферической крови у крыс без коррекции пока-зал, что на момент исследования наблюдались их су-щественные отклонения от нормы. На момент обследо-вания наблюдалось статистически значимое (р < 0,05)снижение аэробного окисления и рост анаэробного гли-колиза, так, активность сукцинатдегидрогеназы (СДГ)снижалась по сравнению с контролем на 33,5 %, а ак-тивность лактатдегидрогеназы (ЛДГ) возрастала на 19,9%(р < 0,05) соответственно (рис. 6). Это свидетельствову-ет о компенсаторном преобладании анаэробного глико-лиза на фоне резкого угнетения работы митохондрий.

Общеизвестно, что сукцинатдегидрогеназа и лак-татдегидрогеназа относятся к числу важнейших клеточ-ных ферментов, участвующих в процессе гликолиза [11].Сукцинатдегидрогеназа прочно связана с внутреннеймитохондриальной мембраной клеток и катализируетреакцию, при которой янтарная кислота (сукцинат) де-гидратируется в фумаровую кислоту (фумарат). Лактат-дегидрогеназа находится в цитозоле клетки и в анаэроб-ных условиях катализирует обратимую реакцию восста-новления пировиноградной кислоты (пируват) в молочную(лактат), являющейся конечным продуктом гликолиза.

Рис. 6. Выявление гранул диформазана в лимфоцитахпериферической крови с докрашиванием ядер

нейтральным красным: A – ингибирование активностьСДГ в лимфоците. Ув. х 1000;

В – высокая активность ЛДГ. Ув. х 1000

ЗАКЛЮЧЕНИЕПроведенное исследование показало, что в мио-

карде подопытных крыс развивались изменения, кото-рые по морфофункциональным проявлениям можнобыло отнести к разновидностям токсической кардиоми-опатии. Типичные изменения миокарда после введенияхлорида кобальта проявлялись в следующем:

а) прогрессивное уменьшение доли неповрежден-ных кардиомиоцитов;

б) лизирование митохондриальных крист и кон-трактурные изменения сократительного аппарата;

в) нарастание стромальной пролиферации и лим-фоцитарной инфильтрации, затрагивающей мышечныеволокна с последующим коллагеногенезом.

Комплексное исследование цитохимической ак-тивности нейтрофилов периферической крови у самцовкрыс на фоне введения хлорида кобальта позволило

прийти к заключению, что кобальт-индуцированная ги-поксия сопровождается резким снижением аэробногоокисления и ростом анаэробного гликолиза.

ЛИТЕРАТУРА1. Брин В.Б., Митциев А.К., Кабисов О.Т., Митциев К.Г.

Способ моделирования хронической токсической ар-териальной гипертонии и кардиопатии у эксперимен-тальных животных. Патент на изобретение. RUS2462762. 08.07.2011.

2. Меркулов Г.А. Курс патолого-гистологической тех-ники. – Л.: Медицина, 1969. – 423 c.

3. Bruick R.K. Oxygen sensing in the hypoxic responsepathway: regulation of the hypoxia-inducible transcriptionfactor // Genes Dev. – 2003. – Vol. 17. – P. 2614–2623.

4. Clyne N., Hofman-Bang C., Haga Y., Hatori N., Mark-lund S.L., Pehrsson S.K. et al. Chronic cobalt exposure affectsantioxidants and ATP production in rat myocardium // Scand.J. Clin. Lab. Invest. – 2001. – Vol. 61. – P. 609–614.

5. Fedotcheva N.I., Litvinova E.G., Zakharchenko M.V.,Khunderyakova N.V., Fadeev R.S. et al. Substrate-specificreduction of tetrazolium salts by isolated mitochondria,tissues, and leukocytes // Biochemistry (Moscow). – 2017. –Vol. 82 (2). – P. 192–204.

6. Hatori N., Pehrsson S.K., Clyne N. et al. Acute cobaltexposure and oxygen radical scavengers in the ratmyocardium // Biochimica et Biophysica Acta. – 1993. –Vol. 1181. – P. 257–260.

7. Kuo J. Electron microscopy: methods and protocols. –New Jersey: Humana Press. Inc., 2007. – P. 608.

8. Luo C., Wong X., Long J., Liu J. Andehydrogenase inmitochondria NADH tetrazolium coupled sensitive assayfor malate and crude tissue homogenates // J. Biochem.Biophys. Methods. – 2006. – Vol. 68. – P. 101–111.

9. Wiberg G.S., Munro I.C., Morrison A.B. Effect of cobaltions on myocardial metabolism // Can. J. Biochem. – 1997. –Vol. 45. – P. 1219–1223.

10. Zadnipryanyi I.V., Tretyakova O.S., Sataieva T.P.Investigation of the antioxidant activity and cardioprotectiveeffect of reamberin and cytoflavin in newborn rats exposedto chronic hemic hypoxia // Arkhiv patologii. – 2015. – Vol. 77(6). – P. 39–44.

11. Zadnipryany I.V., Sataieva T.P., Tretiakova O.S.,Kubyshkin A.V., Zukow W. Grape polyphenols concentratedemonstrates cardioprotection in terms of hypoxicmyocardial injury // Russian Open Medical Journal. – 2017. –Vol. 6. – P. 404.

REFRENCES1. Brin V.B., Mitciev A.K., Kabisov O.T., Mitciev K.G. Sposob

modelirovanija hronicheskoj toksicheskoj arterial’nojgipertonii i kardiopatii u jeksperimental’nyh zhivotnyh[Method of modelling of chronic toxic arterial hypertensiaand cardiopathy in the experimental animals]. Patent naizobretenie. RUS 2462762. 08.07.2011.

2. Merkulov G.A. Kurs patologo-gistologicheskoj tehniki[Manual of pathanatomy staining methods]. – Leningrad:Medicina, 1969. 423 p.

3. Bruick R.K. Oxygen sensing in the hypoxic responsepathway: regulation of the hypoxia-inducible transcriptionfactor. Genes Dev., 2003. Vol. 17, pp. 2614–2623.

91Выпуск 2 (66). 2018

4. Clyne N., Hofman-Bang C., Haga Y., Hatori N., MarklundS.L., Pehrsson S.K. et al. Chronic cobalt exposure affectsantioxidants and ATP production in rat myocardium. Scand.J. Clin. Lab. Invest., 2001. Vol. 61, pp. 609–614.

5. Fedotcheva N.I., Litvinova E.G., Zakharchenko M.V.,Khunderyakova N.V., Fadeev R.S. et al. Substrate-specificreduction of tetrazolium salts by isolated mitochondria,tissues, and leukocytes. Biochemistry (Moscow), 2017.Vol. 82, no. 2, pp. 192–204.

6. Hatori N., Pehrsson S.K., Clyne N. et al. Acute cobaltexposure and oxygen radical scavengers in the rat myocardium.Biochimica et Biophysica Acta, 1993. Vol. 1181, pp. 257–260.

7. Kuo J. Electron microscopy: methods and protocols.New Jersey: Humana Press. Inc., 2007. P. 608.

8. Luo C., Wong X., Long J., Liu J. Andehydrogenase inmitochondria NADH tetrazolium coupled sensitive assay

for malate and crude tissue homogenates. J. Biochem.Biophys. Methods, 2006. Vol. 68, pp.101–111.

9. Wiberg G.S., Munro I.C., Morrison A.B. Effect of cobaltions on myocardial metabolism. Can. J. Biochem., 1997.Vol. 45, pp. 1219–1223.

10. Zadnipryanyi I.V, Tretyakova O.S, Sataieva T.P.Investigation of the antioxidant activity and cardioprotectiveeffect of reamberin and cytoflavin in newborn rats exposedto chronic hemic hypoxia. Arkhiv patologii, 2015. Vol. 77,no. 6, pp. 39–44.

11. Zadnipryany I.V., Sataieva T.P., Tretiakova O.S.,Kubyshkin A.V., Zukow W. Grape polyphenols concentratedemonstrates cardioprotection in terms of hypoxicmyocardial injury. Russian Open Medical Journal, 2017.Vol. 6, p. 404.

Контактная информация

Заднипряный Игорь Владимирович – д. м. н., проф., зав. каф. топографической анатомии и оперативнойхирургии Медицинской академии имени С.И. Георгиевского ФГАОУВО «КФУ имени В.И. Вернадского»; e-mail:zadnipryany@gmail.com