115
ن م ح ر ل ها ل ل ما س ب م ي ح ر ل ا

بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

الرحمن الله بسمالرحيم

Page 2: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Methods of collection of biological samples

By

DR/M.Darweesh

Clinical Toxicologist

Page 3: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

البيولوجية العينات جمع طرق

Page 4: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Definitions

Page 5: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Definition of toxicology

Toxicology can be defined as that branch of science that deals with poisons.

Poison can be defined as any substance that causes a harmful effect when administered, either by accident or by design, to a living organism.

الفرع ذلك بأنه تعريفه يمكن السموم علم. السموم مع تتعامل التي العلوم من

تسبب مادة أي بأنها تعريفها يمكن السمطريق عن إما تقدم، عندما ضار تأثير

. حي كائن العمد،الي طريق عن أو الصدفة

Page 6: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

What is toxicant?

The term “Toxicant” refers to toxic substances that are produced by or a by product of human activity

Page 7: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

What is toxin ?

The term of “toxin” refers to toxic substance that are produced naturally.

Page 8: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Dose

The amount of chemical entering the body

This is usually given as mg of chemical/kg of body weight = mg/kg

The dose is dependent upon

* The environmental concentration

* The properties of the toxicant

* The frequency of exposure

* The length of exposure

* The exposure pathway

الجسم تدخل التي الكيميائية المادة من كمية

مادة من ملغ النحو هذا على يعطى ما وعادةملغ / = / الجسم وزن من كجم كيميائية

كغ

على تعتمد الجرعة

البيئي التركيز

السمية الخصائص

التعرض تواتر

التعرض مدة

التعرض مسار

Page 9: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Lethal dose 50

Def:

the dose required to kill 50% of a population under stated conditions

vary from one organ to another as well as with age, genetics, gender, diet, physiological condition, or the health status of the organism.

    لقتل  المطلوبة العدد  50الجرعة من ٪.     الظروف نفس تحت للمادة المعرض

      تقدم مع وكذلك آخر إلى عضو من تختلف   والنظام  والجنس الوراثي العامل العمر،     الحالة أو الفسيولوجية، والحالة الغذائي،

. الحي الصحيةللكائن

Page 10: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Dose Lethal dose

Page 11: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Laboratory in toxicology

Page 12: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Laboratory in toxicology

Clinical laboratory tests that indicate the effects or presence of drugs can be useful in the emergency evaluation of the patient with an overdose.

However, the majority of toxicologic diagnoses and therapeutic decisions are made on the basis of clinical findings, even though advances in technology have provided the potential ability to measure many toxins.

Medical tests can be categorized as belonging to one of three types: monitoring, diagnostic testing, and screening.

تشير التي السريرية المخبرية الفحوصاتمفيدة تكون أن يمكن أدوية وجود أو آثار إلى

الجرعة لمريض الطوارئ حاالت تقييم فيالزائدة.

التشخيصات معظم إجراء يتم ذلك، ومعأساس على العالجية والقرارات سمية

في التقدم من الرغم على السريرية، النتائجلقياس المحتملة القدرة وفرت التكنولوجيا

. السموم من العديد

أنها على الطبية االختبارات تصنيف ويمكن : أنواع ثالثة من واحدة إلى تنتمي

العالجية الرصد) األدوية قياس ،( متابعةوالفرز ) التشخيصية، اختبار واالختبارات

(.الموظفين

Page 13: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Screening tests must have good sensitivity (finding all cases) if they are to detect the test condition in a low-prevalence situation.

Non specificity arising from the screening tests can be corrected with subsequent, more specific testing.

لديها الفحص اختبارات تكون أن يجبجميع ) على العثور جيدة حساسية

في( حالة عن للكشف كانت إذا الحاالت. االنتشار المنخفض الوضع

هذه عن الناشئة الخصوصية غيرباختبار ،� الحقا تصحيحها يمكن الفحوصات

. تحديدا أكثر

Page 14: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

TYPE OF MEDICALAPPLICATION

PURPOSE PRE SELECTION of POPULATION

PRIOR PROBABILITY OR (PREVALENCE) OF TEST CONDITION

PRIMARYATTRIBUTE REQUIRED OF TEST

TOXICOLOGIC EXAMPLE

Monitoring Measure change

Yes 85%–100% Precision TDM

Diagnostic Categorize, confirm

Yes 30%–85% Specificity* Tox “screen”

Screening Find No 0%–30% Sensitivity Employee drugtesting

Page 15: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

مثال السمة األساسية

من المطلوباالختبار

إحتماالت عن مسبقة

االختبار

الختيار من المسبق

السكان

الهدف التطبيق نوعالطبي

قياس متابعةالعالجية األدوية

الدقة 85%–100% نعم التغير قياس متابعة

السموم فحص النوعية 30%–85% نعم و التصنيفالتأكيد

تشخيص

الموظفين حساسية اختبار 0%–30% ال التفتيش و البحث ) الغربلة) فحص

Page 16: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Uses of laboratory in toxicology

TDM

Occupational tests

diagnosis of overdose

Screening tests )DOA(

post mortem work

Page 17: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

The techniques for detecting the presence of drugs include a variety of :

spectrometric techniques

immunoassays

chromatographic methods

chemical tests

Page 18: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Spectrometric assays

may require a chemical reaction (direct or enzymatic) that converts the target drug into a light-absorbing species.

These assays were commonly used in the distant past for the routine determination of barbiturates, acetaminophen, salicylates, quinidine, methaqualone, and chlordiazepoxide.

Still in use today are the spectrometric assays for carboxyhemoglobin, methemoglobin, and cyanide.

Page 19: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Immunoassays

Immunoassays are available for rapid identification of specific drugs in urine and for quantitation of drugs in serum.

Most immunoassay methods are easily adapted to automated analyzers.

Any immunoassay depend on the ability of a drug-specific antibody to bind to either labeled drug (which may be bound to a fluorescent molecule, to an enzyme, or attached to a solid matrix) or to the free drug in a sample.

Immunoassay techniques are available with a variety of analytic end points based on aggregation-light transmission, enzyme product formation, fluorescent polarization, and other principles.

The most common immunoassay techniques used for the detection of drugs are the enzyme immunoassay fluorescent polarization immunoassay, and immunoaggregation assay.

Page 20: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist
Page 21: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Chromatographic assays

Chromatographic assays are widely used in emergency toxicology because a large number of drugs can be detected on a single chromatogram.

Sensitivity is adequate for detecting the presence of many common pharmaceuticals at concentrations seen in overdose.

For most chromatographic procedures, drugs first must be extracted from serum or urine.

Page 22: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

There are three general types of chromatography used in toxicological analyses

thinlayer chromatography

gas chromatography

High-performance liquid chromatography(HPLC)

Page 23: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

In thin-layer chromatography (TLC), extracted drugs are dried onto silica gel–coated plates.

Gas chromatography (GC) requires that the extracted drug be volatile at the temperatures inside the GC column (80° C to 300° C).

High-performance liquid chromatography (HPLC) is similar in many respects to TLC.

Page 24: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

In thin-layer chromatography (TLC), extracted drugs are dried onto silica gel–coated plates.

Gas chromatography (GC) requires that the extracted drug be volatile at the temperatures inside the GC column (80° C to 300° C).

High-performance liquid chromatography (HPLC) is similar in many respects to TLC.

Page 25: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Thin-layer chromatography

Page 26: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Methods of collection of biological samples

Page 27: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

INTRODUCTION

The pre-analytical phase for samples collected for the analysis of therapeutic drugs and toxins is as critical as the analytical phase.

One of the most important aspects to this phase is the knowledge of the time at which the sample was collected and its relationship to the time of dosing or ingestion.

These pieces of information are absolutely necessary for interpretation of the results.

In addition, samples must be collected using the proper devices and processed or stored under conditions that minimize alterations to the drug concentration.

العينة تحليل ماقبل خطواتالعينة كتحليل مهمة و حرجة

بالضبط.

هي الخطوات هذة أهم من واحدةوعالقته العينة سحب وقت معرفةأجله من تسحب التي بالحدث

العينة.

لتفسير � جدا مهمة المعلومات هذة. صحيح و مناسب تفسير النتيجة

جمع يكون أن يجب لذلك باإلضافةالمعدات و باألجهزة العينةتخزن و تعالج و المناسبة

تؤثر ال التي المناسبة بالطريقة. قياسها المراد المادة نسبة على

Page 28: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

INTRODUCTION

Much focus is placed on the analytical portion of drug testing.

Unfortunately, this means that the pre-analytical phase of the process is often downplayed or even forgotten—that is, until one spends hours troubleshooting what seems to be an analytical problem only to trace the issue back to an earlier step in the process.

These problems include issues associated with the timing of sample collection, sample containers, processing, and storage.

Proper documentation of the history of the sample (origin, mode of collection, transport, storage, and the like) is essential.

على التركيز من الكثير وضع يتم. األدوية اختبار من التحليلي الجزء

ما غالبا التحليل قبل ما المرحلة أن وشأن من التقليل -هايتم نسيان حتى أو

ساعات يقضي واحد حتى هو، وهذاو وإصالحها األخطاء يتوقعاستكشاف. فقط التحليل في المشكلة أن

القضايا المشاكل هذه وتشملحاويات العينة، جمع بتوقيت المرتبطة

. وتخزينها ومعالجتها العينات

العينة لتاريخ الصحيح التوثيقوتخزين،) ونقل جمع وطريقة االمنشأ،

. ) ضروري أمر ذلك شابه وما

Page 29: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

INTRODUCTION

Whole blood, plasma (the fluid obtained on centrifugation of anticoagulated whole blood), or serum (the fluid remaining when blood has clotted) are widely used in clinical work.

This is because not only is blood relatively easy to collect, but also a quantitative analysis can often give useful information as to the magnitude of exposure and hence the severity of poisoning.

Excretions (exhaled air, urine) or secretions (saliva, bile) are often less useful as regards interpretation of quantitative data, but can be very useful in qualitative work.

المصل أو البالزما الدم،في واسع نطاق على تستخدم

. السريري العمل

سهل الدم ألن فقط ليس هذاولكن ، عيناته جمع في نسبيافي الكمي لتحليله يمكن أيضامعلومات يعطي ان الغالبالتعرض لحجم بالنسبة مفيدة

. التسمم شدة وبالتالي

) البول ) الزفير، هواء اإلفرازات ) ( وغالبا والصفراء اللعاب، أويتعلق فيما فائدة أقل تكون ماولكن الكمية، البيانات بتفسيرفي جدا مفيدة تكون أن يمكن

. النوعي العمل

Page 30: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

INTRODUCTION Postmortem specimens

Postmortem specimens are a special problem because, generally, information on the analyte concentration in blood at the time of death is required.

Postmortem blood concentrations may not accurately reflect perimortem blood concentrations for several reasons.

Haemolysis is common, for example, whilst haemostasis may lead to changes in the cellular composition of the ‘blood’ being sampled.

There is also the possibility of contamination during collection, for example, with stomach contents, and of leakage of analyte from adjacent tissues.

The leakage of intracellular potassium into plasma, which begins soon after death, is such an example.

مشكلة هي الوفاة بعد العيناتمطلوب عام، بشكل ألنها خاصة،

تركيز عن في المادةمعلومات. الوفاة وقت في الدم

بعد الدم تركيزات تعكس ال قدقبل ما الدم تركيزات بدقة الوفاة

.الوفاة أسباب لعدة

على الشائع، هو الدم انحاللالدم تخثر حين في المثال، سبيل

التركيب في تغيرات إلى يؤدي قدللدم".”الخلوي

أثناء التلوث إمكانية أيضا وهناكمع المثال، سبيل على جمع،

من والتسرب المعدة، محتويات. المجاورة األنسجة

الخاليا داخل البوتاسيوم تسربوقت في تبدأ التي البالزما، في

على مثال هو الموت، بعد قريبذلك

Page 31: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Health and safety

Always keep reagent bottles tightly capped.

Always have adequate ventilation whenever volatilization takes place, eg:Opening a bottle, heating a substance or in use of organic solvent.

الكواشف الزجاجات دائما. بإحكام تغطى

الكافية التهوية دائما يكون أنعلى مكان، التطاير يأخذ كلمازجاجة، فتح المثال سبيل

استخدام في أو مادة تسخين. العضوية المذيبات

Page 32: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Health and safety

Always label the container before filling it.

Always report defective cords ,hotplates, or other electrical equipments ,so that proper repair or replacement can be made and short circuit or fire prevented.

Always use aseptic technique and special care when handling contaminated or infectious samples.

قبل الحاويات دائما تسميةالملئ.

دائما المعيبة، األشياءتقريرالمعدات أو سخانات،

بحيث األخرى، الكهربائيةبالسليم االستبدال أو إصالح

الماس لتالفي بسرعة. النار أو الكهربائى

التعقيم تقنيات استخدام دائمامع التعامل عند خاصة والحذر

. المعدية أو الملوثة العينات

Page 33: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Health and safety

Sample handling should be performed with due attention to preventing droplets splashing into the eyes and minimizing aerosol formation (wear eye protection, perform mixing and other procedures in a fume cupboard or microbiological safety cabinet, and always use either sealable centrifuge tubes or a centrifuge with sealable rotors).

Screw-capped sample tubes are preferable to those with push-in stoppers as there is less risk of aerosol formation when opening the tube.

بإيالء العينة مع التعامل يتم أن يجبقطرات لمنع الواجب االهتمام

تكوين وتقليل العينين في الرش ( العين، حماية ارتداء الجوي الرزازاإلجراءات من وغيرها االختالط نفذالسالمة خزانة أو الدخان خزانة فياستخدام ودائما الميكروبيولوجية،محكمة المركزي الطرد أنابيبالمركزي للطرد جهاز أو الغلق

. الغلق محكم

للدوران القابل الغطاء ذات األنابيبمع التي تلك من أفضل هي

هناك أن كما في بالدفع سداداتالجوي الهباء تشكيل من أقل خطر

. األنبوب فتح عند

Page 34: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist
Page 35: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist
Page 36: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist
Page 37: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Health and safety

Biological samples may contain infective agents and must be handled with care, especially if originating from drug abusers, and must always be treated as if they are infective.

Such staff should be vaccinated against hepatitis B, polio, tuberculosis, and tetanus and possibly other diseases in specific countries.

العينات على تحتوي قدعوامل على البيولوجيةالتعامل ويجب معدية،

كان إذا خاصة بحذر، معهامتعاطي من مصدرها

أن دائما ويجب المخدرات،. عدوى كانت لو كما تعامل

هؤالء تطعيم وينبغيالتهاب ضد الموظفين

األطفال Bالكبد شلل ،واألمراض والكزاز والسلبلدان في غيرها ربما

محددة.

Page 38: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Health and safety

Labs should have procedures in place for the use and disposal of chemicals, as well as a safety plan in case of emergency (including a safety shower and eyewash station)., also emergency phone should available.

Chemical containers should be properly labeled with the correct chemical name.

Flammable liquids should always be kept in special storage containers or a storage room.

Putting these types of chemicals in a regular refrigerator can lead to an explosion.

بإجراءات المختبرات تعمل أن يجبالمواد من والتخلص الستخدام معتمدةفي السالمة خطة عن فضال الكيميائية، ( دش ذلك في بما الطوارئ حاالت ) كما ، العين غسل ومحطة السالمة

. المتاحة الطوارئ هاتف ينبغي

توضع أن ينبغي الكيميائية الحاوياتالكيميائي االسم مع صحيح بشكل

الصحيح.

القابلة السوائل تبقى أن دائما وينبغيالخاصة التخزين حاويات في لالشتعال

. التخزين غرفة أو

المواد من األنواع هذه وضع يمكنإلى تؤدي العادية الثالجة في الكيميائية

انفجار.

Page 39: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Collection

Many analytical toxicology procedures require collection of blood, urine, stomach contents, and ‘scene residues’ that is, material such tablet or bottles found at the scene of an incident.

However, such samples should be retained (4 or −20 ◦C) in case they are needed.

Addition of fluoride also helps to protect other labile drugs such as clonazepam, cocaine, and nitrazepam from degradation.

The use of disinfectant swabs containing alcohols should be avoided.

جمع السموم تحليالت من العديد تتطلب " بقايا و المعدة، ومحتويات البول، الدم،التي" األقراص و كالزجاجات المشهد

. الحادث مسرح في عليها عثر

هذه على اإلبقاء ينبغي ذلك، ومع-4العينات مئوية 20أو حالة درجة في

. إليها الحاجة

حماية على أيضا يساعد الفلورايد إضافةالكوكايين، كلونازيبام، مثل األدوية

ا من .التحللونترازيبام مطهرة مسحات استخدام تجنب وينبغي

الكحول على العينات تحتوي جمع .في

Page 40: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Sample requirements for general analytical toxicology

Sample Notes

Whole blood or 10 mL (lithium heparin or EDTA tube – use fluoride/oxalate if ethanol suspected; plastic tube if paraquat suspected; glass or plastic tube with minimal headspace if carbon monoxide or other volatiles suspected)

Plasma/serum 5mL(send whole blood if volatiles, metals and some other compounds suspected

Urine 20–50 mL plain bottle, no preservative

Gastric contents 25–50 mL plain bottle, no preservative

Scene residues As appropriate

Other samples Vitreous humour (maximum available, collect separately from both eyes), bile (2 mL) or liver (about 5 g) can substitute for urine in postmortem work. Other tissues (brain, liver, kidney, lung, subcutaneous fat – 5 g) may also be valuable, especially if organic solvents or other volatile poisons are suspected

Page 41: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Smaller volumes may often be acceptable, for example in the case of young children

In whole blood :In postmortem work collect from femoral or other peripheral vein ensuring no contamination from central or cavity blood – collect one portion into 2% (w/v) sodium fluoride and another into a plain tube

In urine sample Normally the only sample that is required for drugs of abuse screening.

Sodium fluoride (2 %, w/v) should be added if ethanol is suspected and blood is not available

In gastric content :includes vomit, gastric lavage (stomach washout, first sample), etc.

Scene residues: Tablet bottles, drinks containers, aerosol canisters, and so on – pack entirely separately from biological samples, especially if poisoning with volatiles is a possibility.

على تقبلقد األحيان، من كثير في أصغر أحجامالصغار األطفال حالة في المثال سبيل

: من جمع الوفاة بعد الدم غيرها femoralفي أومن تلوث وجود عدم ضمان الطرفية األوردة من

إلى - واحد جزء جمع تجويف أو المركزي ٪ 2الدمعادي أنبوب في وآخر الصوديوم فلوريد

لفحص المطلوبة الوحيدة العينة عادة البول فيالصوديوم ) فلوريد أن w/v٪( 2المخدرات ينبغي

متوفر غير والدم اإليثانول اشتبه إذا تضاف

: المعدة غسل القيء، وتشمل المعدة محتوى في.تنظيف) ) الخ ، األولى العينة المعدة،

: حاويات و أقراص، زجاجات المشهد بقاياالعينات من تماما منفصل بشكل توضع المشروبات،

التسمم احتمال هناك كان إذا وخاصة البيولوجية،. المتطايرة بالمواد

Page 42: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Collection Time

Time is a critical factor in both TDM and toxicology, and its importance and roles repeat throughout discussions of these services.

Most commonly, the best window of collection takes place during the 30–60 min preceding a dose when circulating concentrations necessary for the drug to be effective are lowest.

Samples collected at this time are referred to as trough samples.

When a drug is most effective over a very narrow concentration range and toxicity is a concern, monitoring may be most effective using peak concentrations when maximal concentrations are achieved.

مراقبة من كل في الحاسم العامل هو الوقتالعالجية السموم، األدوية عن الكشف و

لهذه المناقشات طوال تتكرر واألدوار وأهميتهالخدمات.

خالل يحدث لجمع إطار وأفضل شيوعا، األكثردوران 30-60 حيث الجرعة تسبق دقيقة

هي و فعالة تكون للدواء الالزمة التركيزاتاألدنى.

هذا في جمعها تم التي العينات إلى ويشار.trough samplesالوقت

نطاق على فعالية األكثر الدواء يكون عندماقد قلق، مصدر وسميته جدا ضيق وتركيزتركيزات باستخدام فعالية األكثر الرصد يكون

. القصوى تركيزات تحقيق يتم عندما الذروة

Page 43: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Collection Time

This type of collection is difficult to control as the time at which peak concentrations are achieved vary with the individual for each drug collected in this manner and may even vary with the formula, dosing route, and co-ingestion of food.

Samples are also collected at other points in the dosing cycle, for example, as with the once-daily dosing protocols used for aminoglycoside or vancomycin administration.

In these protocols, samples are collected at defined points within the dosing cycle. Some laboratories call these “random” samples because they are neither peak nor trough and the time of collection may vary, but this is an inaccurate use of the term because for the result to be useful, the collection time must be controlled and known—not random.

على فيه التحكم الصعب من جمع من النوع هذاالذروة تركيزات تحقيق يتم الذي الوقت مثلبهذه جمعها تم دواء كل عن الفرد مع تختلفالجرعات الصيغة، مع تختلف وربما بل الطريقة،

. الشخص قبل من المتناول الطعام الطريق،و

دورة في أخرى نقاط في أيضا عينات جمع يتممع الحال هو كما المثال، سبيل على الجرعات،تستخدم يوميا واحدة مرة الجرعات بروتوكوالت

. فانكومايسين أو ألمينوغليكوزيد

نقاط في العينات جمع يتم البروتوكوالت، هذه في . المختبرات بعض الجرعات دورة وضمن محددة " " وال الذروة ال ألنهم عشوائية العينات هذه تدعو

trough هذا ولكن يختلف، قد الجمع ووقتبالنسبة ألنه المصطلح لهذا الدقيق غير االستخداموليس الوقت لتجيل وتخضع مفيدة، تكون للنتيجة

عشوائي.

Page 44: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Documentation

Information recorded on the sample container at the time the sample is collected should include the names (first and family or last name), patient/subject/animal number, the date and time of collection, collection site, and the sample type (including a note of any preservative), and any other appropriate information.

The date and time of receipt of all specimens by the laboratory should be recorded and a unique identifying number assigned in each case.

عينة الحاوية على المسجلة المعلوماتاألسم تتضمن أن يجب العينة جمع وقت ) (، األخير االسم أو العائلة واسم األول / / ووقت وتاريخ ، الرقم المادة المريض ( في بما العينة ونوع الجمع، موقع جمع، ) معلومات وأية ، حافظة مواد أي ذلك

. مناسبة أخرى

جميع استالم ووقت تاريخ تسجيل ينبغيتعريفي ورقم المختبر قبل من العينات

. حالة كل في يعين

Page 45: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Documentation

Name, address and telephone number of clinician/pathologist and/or Coroner’s officer, and address to which the report and invoice are to be sent.

A postmortem (reference) number may also be appropriate.

Circumstances of incident (including copy of sudden death report if available).

Past medical history, including current or recent prescription medication, and details of whether the patient suffered from any serious potentially infectious disease such as hepatitis, tuberculosis, or HIV.

Information on the likely cause, and estimated time, of ingestion/death, and the nature and quantity of any substance(s) implicated.

/ الطبيب الطبيب هاتف ورقم وعنوان اسمسيرسل الذي والعنوان لها التابع الجهه و الشرعي

. التقرير اليه

) ( المناسب من المرجع رقم الوفاة بعد يكون قدأيضا.

( تقرير من نسخة ذلك في بما الحادث ظروف.) وجد إن المفاجئة الوفاة

اخر أو الحالي ذلك في بما الماضي، الطبي التاريخيعاني المريض كان إذا ما وتفاصيل دواء، وصفةالتهاب مثل خطير أو معدي يكون قد مرض أي منالمناعة نقص وفيروس والسل الوبائي الكبد

البشرية

،المقدر والوقت المحتمل، السبب عن معلومات / المادة وكمية وطبيعة الموت، التعاطي من

. بها التسمم المحتمل

Page 46: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Documentation

If the patient has been treated in hospital, a summary of the relevant hospital notes should be supplied to include details of emergency treatment and drugs given, including drugs given incidentally during investigative procedures

Note of occupation/hobbies.

A copy of any preliminary pathology report, if available.

Biological specimens should be stored at 4 ◦C before transport to the laboratory in general.

Exceptions to this include hair and nail, which are stable at room temperature.

Each specimen bottle should be securely sealed to prevent leakage, and individually packaged in separate plastic bags.

تقديم ينبغي المستشفى، في المريض عالج تم إذاالمستشفى في الصلة ذات المالحظات من ملخصالطوارئ حاالت في العالج عن تفاصيل لتشملأثناء أعطيت التي األدوية ذلك في بما واألدوية،

التحقيق إجراءات

. هواياته و شغلها التي الوظائف تدوين

كان ان و وجدت إن تشريح، تقرير أي من نسخةاولي.

في البيولوجية العينات تخزين يتم أن C◦ 4يجب. عام بشكل المختبر إلى نقلها قبل

هي والتي واألظافر، الشعر تشمل لهذه استثناءات. الغرفة حرارة درجة في مستقرة

اإلغالق محكمة العينات زجاجات كل تكون أن يجبمنفصل بشكل وتعبئتها التسرب، لمنع آمن بشكل

. بالستيكية أكياس في � تماما

Page 47: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Post mortem collection

In order to maximize the reliability of measurements performed on postmortem blood, it is recommended that

The interval between death and the postmortem examination is minimized.

The body/samples are stored at 4◦C before the examination/after collection.

Blood is collected from two distinct peripheral sites, preferably the femoral veins, after tying off the vein proximally to the site of sampling.

Preservative [about 2% (w/v) fluoride is added to a portion of the blood sample/the sample from one vein, and to urine.

The exact site of blood sampling should be recorded, as should the time of sampling and (approximate) time of death if known.

على االعتماد من قدر أقصى تحقيق أجل منالوفاة، بعد الدم على تجرى التي القياسات

أن المستحسن فمن

الموت بين الفاصلة الفترة من التقليل يتم. الوفاة بعد والفحص

/ في العينات الجسم تخزين قبل C◦4يتم. جمع / بعد الفحص

الطرفية موقعين من الدم جمع يتمويفضل بعد femoral veinsمتميزة، ،

. العينات أخذ موقع من قريب الوريد ريط

[ حوالي )2حافظة ٪w/v )يضاف فلوريد / وريد من العينة الدم عينة من جزء إلى

. والبول واحد،

الخذ الدقيق الموقع في تسجل أن يجبوقت أخذ ينبغي كما الدم، من عينات ) ( كان إن الوفاة وقت تقريبا و العينات

معروفا.

Page 48: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

CONTAINERS

Continuing in the pre-analytical phases of TDM and toxicology, it is important to think about the sample type needed and collection container.

Most laboratories have also transitioned from glass tubes to plastic for safety reasons.

In postmortem work, the use of disposable hard plastic (polystyrene) Sterilin tubes is recommended.

مراقبة في التحليلية قبل ما المراحل فيالعالجية السموم، األدوية عن الكشف و

العينة نوع في نفكر أن المهم فمنلجمع الخاصة والحاويات المطلوبة

العينات.

من أيضا المختبرات معظم انتقلت وقدتتعلق ألسباب للبالستيك الزجاج أنابيب

بالسالمة.

المستحسن من الوفاة، بعد تحليالت فيالقابل الصلب البالستيك استخدام

. ) أنابيب ) البوليسترين للتصرف

Page 49: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

CONTAINERS

All organ and tissue samples, and any tablet bottles or scene residues, should be placed in separate containers to avoid any chance of cross contamination.

If blood has been collected into a syringe, it is essential that the syringe needle is removed and the blood allowed to flow gently into the collection tube in order to prevent haemolysis.

وأي والعينات، واألنسجة األعضاء كلأن يجب المشهد، بقايا أو أقراص زجاجات

أي لتجنب منفصلة حاويات في توضع. المتبادل التلوث من فرصة

الضروري فمن حقنة، في الدم جمع تم إذابتدفق ويسمح حقنة إبرة إزالة يتم أن

منع أجل من الجمع أنبوب في برفق الدم. الدم انحالل

Page 50: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

CONTAINERS

Some laboratories prefer to collect blood for these in gel-barrier tubes

Gel-barrier and other materials used in these tubes were found to adsorb many commonly monitored drugs in an unpredictable manner.

Investigators found the degree of adsorption varied with the amount of drug present, the amount of blood in the tube, the environmental temperature, and the duration of exposure.

Because of these observations and studies, most TDM laboratories adopted the use of plain evacuated tubes containing no additives.

جل الدم لجمع تفضل المختبرات بعضgel-barrier tubes

gel-barrier التي المواد من غيرها وقد انها وجد األنابيب هذة في تستخدم

المراد األدوية بعض سطحها على تمتصقياسها .

بالدراسات و مع جد تختلف االمتصاص درجةفي الدم وكمية الموجودة، الدواء كميةومدة البيئية، الحرارة ودرجة األنبوب،

التعرض.

،والدراسات المالحظات هذه بسبباألدوية مراقبة المختبرات معظم اعتمدتاستخدام السموم عن الكشف و العالجية

على التحتوي التي العادية المفرغة األنابيب. إضافات أي

Page 51: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

CONTAINERS

It may seem to be a fairly obvious statement, but lithium heparin should not be used to collect samples for lithium determinations.

Heparin too has been known to interfere in drug analysis

For example tricyclic antidepressants and paraquat, and aluminium bind to glass.

هيبارين الليثيوم تستخدم أن ينبغي ال. الليثيوم لقرارات عينات لجمع

في للتدخل معروفا كان أيضا الهيبارينالمخدرات تحليل

االكتئاب مضادات المثال سبيل على وربط يجب والباراكوات، الحلقات ثالثية

. الزجاج على األلومنيوم

Page 52: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

CONTAINERS

Plastic tubes are thus preferred and are also less likely to shatter than glass, especially if frozen.

On the other hand, if volatile solvents or anaesthetic gases, for example, are to be analyzed then glass is preferred if available.

This should be followed by gentle mixing to ensure contact with the anticoagulant if one is being used.

أقل و وأيضا البالستيكية األنابيب يفضلإذا وخاصة الزجاج، من للكسر عرضة

. ستجمد كانت

أو الطيارة المذيبات إذا أخرى، ناحية منهي المثال، سبيل على التخدير، غازاتإذا الزجاجية يفضل تحليلها سيتم التي

. متوفرة كانت

لضمان لطيف خلط طريق يتبع أن وينبغيحالة في التخثر مضادات مع اتصال

. واحد استخدام

Page 53: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

PROCESSING AND STORAGE

Serum, plasma, and whole blood are complex matrices.

We tend to forget that after collection and subsequent processing, the samples are far from static.

As the samples are allowed to sit, carbon dioxide is lost and the pH changes.

Enzymes present may lose activity or gain activity.

Chemical interactions between various endogenous and exogenous chemicals occur between and amongst each other.

Recognizing the potential for these and understanding how they impact the stability of a given drug is important.

والدم والبالزما .عبنات المصل ما حد الى معقدة

بنسى الحقة، غالبا ومعالجة جمع بعد أنه. الثبات عن البعد كل بعيدة هي والعينات

ثاني فقدان يتم للجلوس، للعينات يسمح كما. الهيدروجيني الرقم والتغييرات الكربون أكسيد

اكتساب أو النشاط تفقد قد الموجودة اإلنزيماتالنشاط.

الكيميائية المواد بين الكيميائية التفاعالتبعضها بين تحدث والخارجية الداخلية المختلفة

البعض.

الثبات بيئة توفير كيفية ادراك و فهم المهم من. قياسه المراد للدواء

Page 54: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

PROCESSING AND STORAGE

Biological specimens should be stored at 4 ◦C before transport to the laboratory in general.

Any residual specimen should be kept at −20◦C or below until investigation of the incident has been concluded.

Exceptions to this include hair and nail, which are stable at room temperature.

العينات تخزين يتم أن يجب عام بشكلفي إلى C◦ 4البيولوجية نقلها قبل

المختبر.

ف متبقية عينة أية تبقى أن C◦20ي −يجبفي التحقيق من االنتهاء يتم حتى أقل أو

الحادث.

،واألظافر الشعر تشمل لهذه االستثناءاتحرارة درجة في مستقرة هي والتي

الغرفة.

Page 55: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

PROCESSING AND STORAGE

One of the best examples comes from toxicology when cocaine needs to be measured in blood.

The metabolism of this drug by circulating cholinesterases continues unless fluoride is used to inhibit the process.

Solid sodium fluoride (2 %, w/v) may be added to inhibit microbial and some other degradative enzymes.

Similarly, interactions between two drugs administered may continue after sample collection.

تحليالت في األمثلة أفضل من واحديتم التي الكوكايين يحتاج عندما السموم

. الدم في قياسها

الدواء لهذا الغذائي التمثيل عملية يواصلخالل يتم cholinesterasesمن لم ما

. العملية هذه لمنع الفلورايد استخدام

( الصوديوم لمنع( w/v %, 2فلوريد يضافاالنزيمات وبعض تساعد الجراثيم التي

التحلل .على قد عقارين توبالمثل، بين التفاعالت ستمر

العينات جمع .بعد

Page 56: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

PROCESSING AND STORAGE

With regard to drugs, some compounds such as clonazepam, cocaine, nifedipine, nitrazepam, thiol drugs, and many phenothiazines and their metabolites are unstable in biological samples at room temperature.

Exposure to sunlight can cause up to 99% loss of clonazepam in serum after 1 h at room temperature.

Covering the outside of the sample tube in aluminum foil is a simple precaution in such cases.

المركبات وبعض بالمخدرات، يتعلق فيمانيفيديبين، الكوكايين، كلونازيبام، مثل

ونواتج الفينوثيازين من والعديد نترازيبام،العينات في مستقرة غير تفاعالتها. الغرفة حرارة درجة في البيولوجية

يسبب أن يمكن الشمس ألشعة التعرضالى يصل في 99ما كلونازيبام خسارة ٪

بعد الدم حرارة 1مصل درجة في ساعةالغرفة.

ألنبوب ةتغطي الخارجي عينة الالسطحالوقائي ب التصرف هو األلومنيوم رقائق

. الحاالت هذه مثل في البسيط

Page 57: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

PROCESSING AND STORAGE

Guidance on freezer storage of samples

Do not freeze whole blood if plasma or serum is to be analyzed

Ensure that labelling is waterproof

Ensure tubes are tightly sealed and well filled, but do not overfill tubes, especially glass tubes

Keep a record of freezer contents

Keep a continuous record of freezer temperature.

Fit an alarm in case of freezer failure

المجمد التخزين بشأن عيناتللتوجيهات

تجمد البالزما كان إذا whole blood التحليلها الأو سيتم مصل

 للماء مقاومة العالمات وضع ضمان

 بإحكام مغلقة هي و األنابيب ضمانبافراطا، مليئة ليست ولكن جيدا، ومليئة

زجاجية األنابيب وخاصة

 الثالجة لمحتويات بسجل االحتفاظ

 حرارة لدرجة المستمر بسجل االحتفاظ. المستمر التسجيل مع الثالجة

 الفريزر توقف حال في إنذار تجهيز

Page 58: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample types

Clinical samples can be divided into:

blood and related fluids

body fluids other than blood

excretory fluids/residues

other clinical specimens

: إلى السريرية العينات تقسيم ويمكن

الصلة ذات وسوائل الدم

الدم غير األخرى الجسم سوائل

/ البقايا السائلة االفرازات

األخرى السريرية العينات

Page 59: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample types

When death has occurred in hospital and poisoning is suspected, any residual antemortem specimens should be obtained as a matter of urgency from the hospital pathology laboratory (not only chemical pathology and haematology, but also immunology, transfusion medicine, and virology departments may be a source of such specimens) and submitted for toxicological analysis in addition to postmortem specimens.

Note that the availability of ante- or peri-mortem specimens does not negate the need to collect postmortem specimens

المستشفى في الموت حدوث عندماأي على الحصول ينبغي التسمم، ويشتبه

الوفاة فبل ما كمسألة عينات المتبقيةفي األمراض علم مختبر من مهمة

الباثولوجيا ) فقط وليس المستشفىعلم أيضا ولكن الدم، وأمراض الكيميائية

أن ويمكن الدم، نقل والطب المناعةهذه مصدر الفيروسات علم أقسام تكونباإلضافة( السموم لتحاليل وتقدم العينات

. الوفاة بعد ما عينات إلى

ال الوفاة قبل العينات توافر أن الحظبعد العينات لجمع الحاجة تماما ينفي

الوفاة.

Page 60: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample types

1. Blood and related fluids Arterial blood

Venous blood

Serum

Plasma Blood cells

Page 61: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample typesBlood and related fluids

In analytical toxicology, plasma or serum is normally used for quantitative assays.

However, some poisons such as carbon monoxide, cyanide and many other volatile organic compounds, lead and other heavy metals, and some drugs, such as chlortalidone, are found primarily in or associated with erythrocytes and thus haemolyzed whole blood should be used for such measurements.

The space above the blood in the tube (‘headspace’) should be minimized if carbon monoxide, solvents, or other volatiles are suspected.

استخدام يتم التحليلي، السموم علم في. الكمية الفحوصات عادة مصل أو البالزما

أكسيد أول مثل السموم بعض ذلك، ومعالمركبات من والعديد والسيانيد الكربون

والرصاص األخرى المتطايرة العضويةمثل األدوية، وبعض األخرى، الثقيلة والمعادن

chlortalidone المقام في عليها العثور يتم ،وبالتالي الحمراء، الدم كريات في األول

haemolyzed whole blood أن ينبغيالقياسات . هذه لمثل تستخدم

في الدم فوق المساحة من التقليل وينبغي )' أكسيد )' أول اشتبه إذا الرأس فراغ األنبوب

المتطايرة المواد أو والمذيبات، الكربون،األخرى.

Page 62: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample typesBlood and related fluids

The immunosuppressives ciclosporin, sirolimus, and tacrolimus are special cases because redistribution between plasma and erythrocytes begins once the sample has been collected and so the use of haemolyzed whole blood is indicated for the measurement of these compounds.

المناعة سيكلوسبورين، مثبطاتsirolimus خاصة حاالت وتاكروليموس و،

الدم وكرات البالزما بين توزيعها إلعادةيشار وذلك العينة جمع تم بعد يبدأ الحمراء

haemolyzed whole bloodاستخدام . المركبات هذه لقياس

Page 63: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample typesBlood and related fluids

Post mortem blood sample

In order to maximize the reliability of measurements performed on postmortem blood, it is recommended that:

The interval between death and the postmortem examination is minimized.

The body/samples are stored at 4 ◦C before the examination/after collection.

Blood is collected from two distinct peripheral sites, preferably the femoral veins, after tying off the vein proximally to the site of sampling.

Preservative [about 2% (w/v) fluoride is added to a portion of the blood sample/the sample from one vein, and to urine.

The exact site of blood sampling should be recorded, as should the time of sampling and (approximate) time of death if known.

على االعتماد من قدر أقصى تحقيق أجل منالوفاة، بعد الدم على تجرى التي القياسات

أن المستحسن :فمن بين الفاصلة الفترة من التقليل يتم

. الوفاة بعد والفحص الموت

في العينات تخزين قبل C◦ 4يتم. جمع / بعد الفحص

،طرفيين موقعين من الدم جمع يتمريط femoral veinsويفضل بعد ،

. العينات أخذ موقع من قريب الوريد

[ حوالي يضاف فلوريد( w/v٪ )2للحفظوريد / من العينة الدم عينة من جزء إلى

. والبول واحد،

الخذ الدقيق الموقع تسجل أن يجبينبغي كما الدم، من وقت تسجبل عينات

) ( إن الوفاة وقت تقريبا و العينات أخذ. معروفا كان

Page 64: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample typesBlood and related fluids

If sufficient sample is obtained, this should be divided between unpreserved and preserved (fluoride) tubes, otherwise the entire sample should be preserved unless there is a possibility of poisoning with fluoride or compounds giving rise to fluoride in vivo, such as fluoroacetate.

If only heart or cavity blood is available this should be clearly stated.

The value of giving as full a clinical, occupational, or circumstantial history as possible, together with a copy of the postmortem report, if available, when submitting samples for analysis cannot be overemphasized.

،كافية عينة الحصول تم إذابين مقسمة تكون أن ينبغي

) الفلورايد ) محفوظةبال أنابيببدون، أنابيب و

هو إذا المتاح أو كان القلبيكون دمويتجويف أن ينبغيومثبت مدون واضحا .و

القصة كامل على الحصولالظروف و والمهنية، السريريةمن نسخة مع ممكن، المحيطة

وجدت، إن الوفاة، بعد ما تقريرتقديم مهم العند للتحليل عينات

.� جدا

Page 65: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample typesBlood and related fluids

Not only might this help target the analysis to likely poisons, but also the interpretation of any analytical results may be greatly simplified.

Postmortem blood (about 20 mL) for qualitative analysis only should be taken from the heart (preferably right atrium), inferior vena cava, or another convenient large vessel. The precise sampling site must be recorded on the sample tube.

The blood should be free-flowing.

التحليل هذا يساعد قد فقط ليسالمرجح السموم أيضا ةالستهداف ولكن ،

تبسيطها يمكن التحليل نتائج أي تفسير. كبير حد إلى

( حوالي الوفاة بعد ( 20الدم للتحليل ملالقلب من تؤخذ أن ينبغي فقط النوعي ) األجوف) الوريد ، ويفضل األيمن األذين

. أن يجب أخرى كبيرة اورده أو السفلي،العينات أخذ موقع أنبوب بتسجل على دقة

العينة.

ح الدم يكون أن التدفق .ر يجب

Page 66: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample typesAnticoagulants for in vitro use

Anticoagulant Concentration (mL−1 blood)

Comment

Lithium heparin 10–20 units General biochemistry

Sodium heparin 10–20 units General biochemistry

Sodium fluoride (with either EDTA or oxalate)

1–2 mg

6–10 mg

Glucose (inhibits glycolysis)

General anticoagulant

Sodium citrate 3 mg Clotting studies – not recommended for other purposes as the aqueous solution dilutes the specimen

EDTA 2 mg Haematology (stabilizes readilyoxidized compounds)

Page 67: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist
Page 68: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist
Page 69: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample types

Serum

When whole blood is allowed to stand (15 min, room temperature) in a plain tube (no anticoagulant) a clot forms that will retract sufficiently to allow serum to be collected.

For many analyses serum is preferred to plasma because it produces less precipitate (of fibrin) on freezing and thawing.

ي أن للدم يسمح دقيقة، 15 )تركعندما ( ) ال عادي أنبوب في الغرفة حرارة درجة

أن( شأنها من جلطة وأشكال للتخثرالمصل للسماح الكفاية فيه بما يتراجع

. جمعها يتعين التي

يفضلوا المخبريين من للكثيرين بالنسبةراسب أقل تنتج ألنها البالزما على المصل

(fibrin. والذوبان( التجميد عند

Page 70: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample types

Plasma

The use of such tubes will invalidate many trace element analyses and may impair analyses for solvents and other volatiles

Blood cells

To collect erythrocytes, heparinized blood should be centrifuged (2000 g, 10 min), the plasma, buffy coat and top 10% of erythrocytes (mainly reticulocytes) removed, and the remaining erythrocytes carefully washed with isotonic, buffered saline to remove trapped plasma.

بالزما

األنابيب هذه مثل بالبالزما استخدام الخاصةالنزرة العناصر من العديد يبطل سوفالمذيبات تحليالت يضعف وربما ويحلل

األخرى المتطايرة والمواد

الدم خاليا

طرد وينبغي الحمراء، الدم كريات لجمعheparinizedالدم ، والبالزما، 10 دقيقة،

buffy coat الكريات 10وأعلى من ٪( mainly reticulocytesالحمراء )

المتبقية الحمراء الدم وكريات إزالتها،مخزنة التوتر، متساوي مع بعناية غسلها

. المحاصرين البالزما إلزالة المالحة

Page 71: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample types

Page 72: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample types

2. Urine Urine is useful for ‘poisons screening’

as it is often available in large volumes and may contain higher concentrations of drugs or other poisons, or metabolites, than blood.

The presence of metabolites may sometimes assist identification of a poison if chromatographic techniques are used

A 50mL specimen from an adult, collected in a sealed, sterile container, is sufficient for most purposes.

' الفحصية السموم للتحاليل مفيد البولاألحيان" من كثير في الحال هو كما

على هتوفرل تحتوي وربما كبيرة بكمياتغيرها أو المخدرات من أعلى تركيزاتمن اكثر الغذائي تمثيل أو السموم، من

الدم.

األيض نواتج (وجود ( الغذائي قد التمثيلإذا السم تحديد األحيان بعض في يساعد

اسÍÍÍÍÍÍÍÍÍÍÍتخدام chromatographicتمtechniques

50 ا من حاوية لبالغينمل في جمعها يتم ،التسريب، لمنع الغلق محكمة و معقمة

. األغراض لمعظم بالنسبة كافية هي

Page 73: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample typesurine

No preservative should be added.

The sample should be obtained as soon as poisoning is suspected, ideally before any drug therapy has been initiated.

However, some drugs, such as the tricyclic antidepressants (amitriptyline, imipramine, etc.), cause urinary retention, and a very early specimen may contain insignificant amounts of drug.

. حافظة مواد أي إضافة يجب ال

بمجرد عينة على الحصول يجب � مثاليابأي البدء تم قبل ذلك و بالتسمم، االشتباه

. دوائي عالج

مضادات مثل األدوية، بعض ذلك، ومع ( أميتريبتيلين، الحلقات ثالثية االكتئاب

) احتباس يسبب ، ذلك إلى وما إيميبرامين،جدا مبكرة على تحتوي أن ويمكن البول،

. المخدرات من ضئيلة كميات عينة

Page 74: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample typesurine

Different urine specimens, for example random, early morning, end-of-shift, 24 hour, may be collected in the course of metabolic or other studies.

in metabolic studies, it is important to note the time of the beginning and the end of the collection period so that the rate of urine production can be calculated.

A random urine sample is a midstream specimen.

المثال سبيل على مختلفة، البول عيناتالتحول، نهاية الباكر، الصباح في عشوائي،

التمثيل 24 سياق في جمعها يمكن ساعة،. أخرى دراسات أو الغذائي

،الغذائي بالتمثيل الخاصة الدراسات فيونهاية بداية وقت نالحظ أن المهم منمعدل حساب ايضا و ذلك الجمع فترة

. البول إنتاج

البول العينة العينة هي من عشوائيةعمليÍÍÍة )منتصÍÍÍف midstreamالتبÍÍÍول

specimen).

Page 75: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample typesurine

Fresh urine is yellow/yellow-green in colour, but on storage in acidic solution the colour changes to yellow/brown and even to dark brown due to oxidation of urobilinogen to urobilin.

Crystals, particularly of uric acid and calcium oxalate, may form causing turbidity.

Strong smelling poisons such as camphor, ethchlorvynol, and methylsalicylate can sometimes be recognized in urine because they are excreted, in part, unchanged.

/ األصفر األصفر هو األصل في البولالتخزين عند ولكن اللون، في واألخضر

إلى لون يتغير الحمضية المحاليل فيالداكن / البني وحتى البني اللون األصفر

إلى يوروبيلينوجين أكسدة بسبباليوربلين.

اليوريك حمض وخاصة البلورات،. عكارة يسبب قد أوكساالت، والكالسيوم

قوية السموم األحيان بعض في يمكنإيثكلورفاينول، مثل الرائحة

عليها methylsalicylateو االتعرف يتمتفرز، ألنها الرائحة خالل من البول في

. تغيير بدون هي، كما

Page 76: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample typesurine

Characteristic colorless crystals of calcium oxalate may form at neutral pH after ingestion of ethylene glycol, oxalic acid, or water-soluble oxalates.

The concentrations of many drugs and metabolites, and of some endogenous constituents, will remain the same in acidified urine for over a week at room temperature, and for up to a month at 2–8 ◦C.

For long-term storage acidified urine can be frozen (−20 ◦C), but it may be necessary to centrifuge the sample to remove any precipitate formed during storage prior to any analysis.

أكساالت من مميزة اللون عديمة بلوراتالرقم في محايدة تشكل قد الكالسيوم

حمض اإلثيلين، جاليكول تناول بعد الهيدروجينيالماء في الذائبة االوكساالت أو .األكساليك،

وبعض واأليض، األدوية من العديد تركيزاتفي حاله على سيبقى الداخلية، المكوناتدرجة عند أسبوع من ألكثر الحمضي البول

في شهر الى تصل ولمدة الغرفة، 8-2حرارة. مئوية درجة

الحمضي البول تخزين الطويل المدى علىتجميد قد( 20في )-هيمكن ولكن مئوية درجة

الضروري من ا يكون ز اجهفي لعينة تدويررواسب أي إلزالة ا المركزي شكلت تالطرد

التخزين .وذلك أثناء تحليل أي قبل

Page 77: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample typesurine

Postmortem considerations

For postmortemwork, if possible, 2×25 mL urine samples should be collected in sterile plastic containers, one with preservative (2 %, w/v fluoride).

f only a small amount of urine is available, all should be preserved with fluoride (but see note on fluoride poisoning) in a plain 5 mL plastic or glass tube.

Urine specimens collected postmortem are valuable in screening for drugs or poisons, particularly illicit drugs, and are often used for quantitative ethanol analysis to corroborate the results of a blood analysis.

الوفاة بعد العينة

الوفاة بعد ما ينبغي لعينة ممكنا، ذلك كان إذا ،حاويات 25 × 2جمع في مل البول عينة

اليها ) مضاف واحدة معقمة، %, 2بالستيكيةw/v.) الفلوريد

،متاح هو البول من صغيرة كمية فقط وولكن ) الفلوريد كل مع عليها الحفاظ وينبغي ) بالفلورايد التسمم يكون اال المالحظة انظر

الزجاج .5في أو البالستيك من مل

قيمة هي الوفاة بعد جمعت التي البول عيناتالسموم أو األدوية عن الكشف في

ما وغالبا ، المشروعة غير والمخدراتالكمي للتحليل نتائج لتستخدم لتأكيد إليثانول

. الدم تحليل

Page 78: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample types

3. Stomach contents

This specimen encompasses:

Vomit

Gastric aspirate

Gastric lavage fluid

The contents of the stomach at postmortem

Stomach wash-out (gastric lavage) is rarely performed nowadays in treating acute poisoning.

المعدة محتويات

: على تشتمل ان الممكن من عينة هذه

قيء

المعدة من شفط

المعدة غسيل عند السائل

الجثة تشريح في المعدة محتويات

في المعدة غسيل تنفيذ يتم ما قليال. الحاد التسمم عالج في الحاضر الوقت

Page 79: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample typesStomach contents

However, if a sample of stomach contents is obtained soon after a poisoning episode, large amounts of poison may be present while metabolites are usually absent.

When investigating possible poisoning, it is important to obtain the first sample of any lavage fluid because later samples may be very dilute.

A representative portion (about 50 mL) without preservative should be taken for analysis.

However, all stomach contents should be retained and the volume noted.

من عينة على الحصول تم إذا ذلك، ومعحلقة من قصير وقت بعد المعدة محتويات

يكون قد السم من كبيرة كمية التسمم،لم يكون ما عادة األيض حين في موجودا

. بعد يحدث

من تسمم، حدوث احتمال في التحقيق عندمن األولى العينة على الحصول المهمتكون قد الالحقة العينات ألن الغسيل

. جدا مخففة

( حوالي نموذجي جزء اتخاذ ( 50وينبغي مل . للتحليل حافظة مواد دون من

جميع على اإلبقاء ينبغي ذلك، ومع. كميتها تسجيل و المعدة محتويات

Page 80: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample typesStomach contents

If the blood concentration is difficult to interpret, most notably in postmortem work, it can be helpful to measure the amount of poison present in the stomach.

The nature of this sample can be very variable and additional procedures such as homogenization followed by filtration and/or centrifugation may be required to produce a liquid amenable to analysis.

Stomach contents are especially useful if poison(s) which are not easy to measure reliably in blood, such as cyanide, have been taken orally.

،تفسيره الصعب من الدم تركيز كان إذاال في األخص الوفاة، تحليلوعلى بعد

من كمية لقياس مفيدة تكون أن يمكن. المعدة في الموجود السم

تكون أن يمكن العينة هذه مختلفة طبيعةتليها التجانس مثل لها إضافي وتحضير / تكون قد المركزي الطرد أو و الترشيح

. للتحليل قابل السائل إلنتاج حاجة هناك

خاص بشكل مفيدة هي المعدة محتوياتمن ليست السموم او السم كان إذامثل الدم، في درجتها قياس السهل

. بالفم اتخذت السيانيد،

Page 81: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample typesStomach contents

However, great care is needed if cyanide salts or phosphides, for example aluminium phosphide, are thought to have been ingested, particularly on an empty stomach, because highly toxic hydrogen cyanide or phosphine gas may be released due to reaction with stomach acid.

Additionally, the presence of these and other volatile materials can lead to cross contamination of other biological specimens unless due precautions are taken.

Examination using a polarizing microscope may reveal the presence of tablet or capsule debris.

إذا شديد حذر إلى حاجة هناك ذلك، ومععلى الفوسفيدات، أو السيانيد أمالحويعتقد األلمنيوم، فوسفيد المثال سبيلألن الريق، على وخاصة تناولها، تم قد أنهغاز أو جدا سام الهيدروجين سيانيدمع التفاعل بسبب ينتج قد الفوسفين

. المعدة حامض

المواد هذه وجود فإن ذلك، إلى باإلضافةيؤدي أن ويمكن أخرى مواد و المتطايرةالبيولوجية العينات عبر التلوث إلى

. الواجبة االحتياطات تتخذ لم ما األخرى

عن تكشف قد المجهر باستخدام الفحص. بقاياها او كبسوالت أو أقراص وجود

Page 82: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample typesStomach contents

if distinct tablets or capsules are observed, these should be placed in individual containers (e.g. Sterilin tubes).

Such items and any plant remains or specimens of plants thought to have been ingested, should be examined separately.

The local poisons information service or pharmacy will normally have access to publications or other aids to the identification of legitimate and sometimes illicit tablets/capsules by weight, markings, colour, shape, and possibly other physical characteristics. Identification of such material by reference to a computerized product database may be possible.

،متميزة كبسوالت أو أقراص لوحظ إذافردية حاويات في هذه توضع أن ينبغي

أنابيب) .Sterilinمثل نبات أي بواقي و البنود هذه فحص يجب

تم قد أنه يعتقد النباتات من عينات أو. منفصل بشكل تناولها

السموم معلومات خدمة مع التواصلاألقراص / لتحديد الصيدلية أو المحلية

وعالمات الوزن، حيث من كبسوالتالفيزيائية والخصائص والشكل، واللون . بالرجوع المواد هذه تحديد غيرها ربما

. ممكنا يكون قد بيانات قاعدة إلى

Page 83: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample typesStomach contents

Sterilin tubes

Page 84: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Smells associated with particular poisons in stomachSmell Possible Cause

Almonds Cyanide

Fruity Alcohols (including ethanol), esters

Garlic Arsenic, phosphine

Mothballs Camphor or naphthalene

Nail-polish remover Acetone, butanone

Pears Chloral

Sweet Chloroform and other halogenated

Shoe polish Nitrobenzene

Phenolic (carbolic soap) Disinfectants, cresols, phenols

Cloves Oil of cloves

Page 85: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample types

4. Saliva/oral fluids

Whilst not normally considered in emergency clinical or postmortem work, there is much interest in the collection of saliva or oral fluid from live individuals because collection is non-invasive and reflects current drug or alcohol usage.

Some drugs, medical conditions, or anxiety, for example, can inhibit saliva secretion and so the specimen may not be available from all individuals at all times.

Because saliva is a viscous fluid it is less easily poured or pipetted than plasma or urine – routine dilution with aqueous collection buffer is advocated by some authors to minimize this problem (Cozart collector).

Saliva/oral fluids

بعد تحليلها عتبر يال أو السريري العمل في عادةمن الكثير وهناك الطوارئ، حاالت في الوفاة

الفموي السائل أو اللعاب جمع في االهتمامالمخدرات استخدام يعكس حيث فردي بشكل

. الحالي الكحول أو

و األدوية، طبية بعض على ما ظروف القلق، أو ،وربما اللعاب إفراز تمنع أن يمكن المثال، سبيلجميع في األفراد جميع من متاحة العينة تكون ال

األوقات.

سحبة أو فسكبة لزج سائل هو اللعاب ألنالبول أو البالزما من سهولة أقل العادية بالطرق

    مع الروتيني بالتخفيف ينصح للحد  bufferو. المشكلة  هذه من

Page 86: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample types Saliva/oral fluids

If dilution with buffer is performed the dilution must be factored into any quantitative report.

In healthy subjects, gingival crevicular fluid may constitute up to 0.5% of the volume of mixed saliva: this proportion may be markedly increased in patients with gingivitis.

Plasma exudate from minor mouth abrasions may also contribute.

Therefore, subjects should not brush their teeth or practice other methods of oral hygiene for several hours before saliva is collected.

مع التخفيف إجراء تم أن buffer إذا يجبدرجة أي إلى التخفيف اإلعتبار في تؤخذ

. معامل في الناتج بضرب ذلك بعد ويحسب

سائل يشكل قد االصحاء، االشخاص فيإلى يصل ما اللثة حجم 0.5عنقي من ٪

: بشكل ترتفع النسبة هذه المختلط اللعابمن يعانون الذين المرضى في ملحوظ

. اللثة التهاب

في طفيفة سحجات من البالزما افرازات. أيضا تساهم الفم

أسنانه ينظف ال ان للمريض يجب ولذلك،لنظافة أخرى أساليب ممارسة أو بالفرشاة. اللعاب جمع يتم أن قبل ساعات لعدة الفم

Page 87: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample types Saliva/oral fluids

Collection devices for saliva/oral fluids

In the Salivette (Sarstedt) a dental-cotton (polyester) roll is chewed for 30–45 s with or without further stimulation.

The device is available with or without citrate.

The saliva-soaked roll is placed in a container and closed with a plastic stopper.

The container is centrifuged (3 min, 1000 g) inside a polystyrene tube.

During centrifugation the saliva passes from the dental-cotton roll into the lower part of the tube from whence it is collected.

Cellular and other debris are retained at the bottom of the tube in a small sink.

الفموية / السوائل اللعاب جمع طريقة

فيSalivette (SARSTEDT) على ويمضغ ) ل ) البوليستر القطن من مع 45-30األسنان ثانية

. التحفيز من مزيد بدون أو

. سترات بدون أو مع الجهاز يتوفر

في باللعاب المتشبعة القطن قطعة وضع يتم. بالستيكية سدادة مع وأغلق األنبوبة

( الحاوية طرد أنبوب( 1000gدقائق، 3يتم داخلالبوليسترين.

الى من القطنة اللعاب يمر المركزي الطرد أثناء. جمعها يتم ثم من األنبوب من السفلي الجزء

السفلي الجزء من وغيرها بالبقايا االحتفاظ يتمصغيرة جفنة في األنبوب في

Page 88: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample types Saliva/oral fluids

Page 89: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample types Saliva/oral fluids

Page 90: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample types Saliva/oral fluids

Page 91: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample types

5. Exhaled air

Measurement of concentrations of volatile substances in exhaled (expired) air by infrared or other devices is of course essential in roadside testing for ethanol and valuable in assessing exposure to poisons such as carbon monoxide.

The use of these techniques is limited by the need to take breath directly from live subjects or patients.

Similarly, collection of exhaled air into either an impervious plastic (Tedlar or Polytetrafluoroethylene (PTFE)bag, or via a special device can facilitate the analysis of a number of volatiles and metabolites via subsequent GC or GC-MS analysis.

الزفير هواء

عن الزفير في الطيارة المواد تركيزات قياسغيرها أو الحمراء تحت األشعة أجهزة طريق

على تتم التي االختبار في أساسي بالطبع هوفي وكذلك اإليثانول إلختبار الطريق جانب

أكسيد أول مثل للسموم التعرض تقييمالكربون.

بسبب محدودة تزال ال التقنيات هذه استخداماالحياء من مباشرة التنفس اتخاذ إلى الحاجة

إما إلى الزفير هواء جمع يمكن وبالمثل،كحقيبة الغرض لهذا المعالج القوي البالستيك

Tedlar )يسهل خاص جهاز طريق عن أو ،عبر واأليض المتطايرة المواد من عدد تحليل

GC تحليل أو .GC-MSالحقة

Page 92: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample types Exhaled air

Page 93: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

special device can facilitate the analysis of a number of volatiles and metabolites via subsequent GC or GC-MS analysis

Page 94: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample types

6. Cerebrospinal fluid

Cerebrospinal fluid (CSF) collected via needle aspiration is sometimes used to assess exposure to centrally acting drugs.

As with vitreous humour and synovial fluid, CSF is normally within a relatively protected environment, and thus may also provide a valuable sample for corroborative ethanol measurement, for example, in the event that other samples are not available.

Cerebrospinal fluid

( النخاعي السائل يتم ( CSFيستخدم التيلتقييم أحيانا إبرة طريق عن جمعه

تعمل الي لألدوية الجهاز التعرض علال مركزي.العصبي

مع الحال هو vitreous humourكماعادة النخاعي السائل الزليلي، والسائلقد وبالتالي نسبيا، محمية بيئة في يكون

لقياس لدعم قيمة عينة أيضا توفرأن حالة في المثال، سبيل على اإليثانول،

. متوفرة غير أخرى عينات

Page 95: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample types

7. Vitreous humour

Samples should be collected from each eye separately, and sodium fluoride preservative (2 %, w/v) added.

Care must be taken during sampling because use of excessive suction can cause a significant change in the concentration of several analytes.

Vitreous samples may be replaced with isotonic sodium chloride for cosmetic reasons.

8. Synovial fluid

Synovial fluid collected via needle aspiration has been used.

As with CSF and vitreous humour, collection of synovial fluid may also be helpful in the event of traumatic death or extensive decomposition as it is a relatively protected environment.

Vitreous humour

والمواد حدة، على عين كل من عينات جمع يجبالصوديوم ) فلوريد ٪.2الحافظة

الشفط الستخدام العينات أخذ أثناء الحذر توخي يجبالعديد تركيز في كبيرا تغييرا يسبب أن يمكن المفرط

. التحاليل من

عينات استبدال بكلوريد Vitreous humourيمكن. تجميلية ألسباب متساوي بحجم الصوديوم

الزليلي السائل

طريق األبرةلجمع ستخدمت عن الزليلي السائل. باإلبرة الرشف

و النخاعي السائل مع الحال هو Vitreousكماhumour أيضا مفيد يكون قد الزليلي السائل جمع

الواسع التحلل أو المشوهه الحوادث وفيات حالة في.انهكما نسبيا محمية بيئة

Page 96: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist
Page 97: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample types

9.Liver Liver is easily collected

postmortem and readily homogenized.

It may contain large amounts of drugs and metabolites, and may be the primary specimen submitted for analysis if blood is not available.

A portion (10–20 g) of unfixed (unpreserved) wet tissue should be collected.

Liver

الوفاة بعد بسهولة جمعها يتم الكبد عينات. بطبيعتها متجانسة وهي

األدوية من كبيرة كميات على تحتوي قداألولية العينة تكون أن ويمكن واأليض،

. يتوفر لم إذا الدم لتحليل المقدمة

( جزء جمع ( 20-10وينبغي غير من جرام. معالجة او مادةحافظة

Page 98: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample typesLiver

The sample should be taken from the right lobe if possible to reduce the risk of contamination with bile and because diffusion of poison from the stomach is less likely than in the left lobe.

An analysis may, in some cases, help to establish whether acute or chronic exposure has occurred, but sometimes the analysis can do little more than establish exposure in the absence of reliable information to aid in the interpretation of quantitative results.

إذا األيمن الفص من عينة تؤخذ أن ينبغيالتلوث مخاطر من للحد ممكنا ذلك كان

من العينة وتلوث الصفراوية بالعصارةمن احتماال أقل ذلك في هو و المعدة

. األيسر الفص

على يساعد الحاالت، بعض في التحليل،أو الحاد التعرض حدث إذا ما تحديد

التحليل األحيان بعض في ولكن المزمن،لكن أن و مجرد يكونيمكن من أكثر

غياب في عدمه من التعرض تحديدفي للمساعدة الموثوقة المعلومات

. الكمية النتائج تفسير

Page 99: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample types

10. Keratinaceous tissues (hair and nail)

Many metal ions, drugs and their metabolites are sequestered in hair and nail as they are formed, and are not metabolized further.

These samples may be useful if chronic exposure is suspected, for example in deaths related to drug abuse (particularly opiates and methadone) where establishing recent drug use is very important, and for poisons that may have been eliminated from other commonly sampled fluids and tissues before sample collection.

واألظافر الشعر

األدوية المعادن، ايونات من العديدفي تترسب و تفاعالتهاتعزل ونواتج

تمثيلها يتم وال ، هي كما واألظافر الشعرأ .كثرالغذائي ذلك من

يشتبه إذا مفيدا العينات هذه تكون قدفي المثال سبيل على المزمن، التعرض

المخدرات بتعاطي المرتبطة الوفيات ) (، والميثادون األفيونية المواد وخاصة

من عليها القضاء تم قد التي والسمومعادة عينات األخرى واألنسجة السوائل

. العينات جمع قبل

Page 100: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Clinical sample types hair and nail

Hair may also survive longer after burial than other tissues.

Head hair (a bunch of hairs the thickness of a pencil, about 100–200 hairs) should be either plucked or tied at the root end with cotton thread and then cut approximately 2 mm from the scalp at the vertex posterior (crown) of the head.

Make sure the scissors are level with the scalp and not at an angle.

Tying with thread helps preserve the alignment necessary for segmental analysis.

و الدفن بعد أطول فترة الشعر يبقى وقد. األخرى األنسجة من التحلل

( قلم سماكة الشعر من حفنة الرأس شعرحوالي ( 200-100رصاص، إما ينبغي الشعر

خيط مع الجذر نهاية في تربطه أو التقطهمن يقرب ما قطع ثم القطن من 2من ملم

) من ) تاج الرأس مؤخرة في الرأس فروةرأس.

الرأس فروة مع يتساوى المقص تأكد. زاوية في وليس

على الحفاظ على يساعد الحبل مع الربطاو تحليلها المراد للحزمة الالزمة المحاذاة

قطعها.

Page 101: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

The sample should be laid aligned in aluminium foil, with the proximal end clearly identified.

Pubic or axilliary hair may be substituted if no head hair remains, or if the head hair has been excessively bleached or permed.

Nail clippings may be used to monitor uptake of antifungal drugs such as itraconazole.

In postmortem work, whole nails should be lifted from the fingers or toes.

رقائق على بمحازاة العينة وضع ينبغيمحددة القريبة نهاية مع األلومنيوم،

بوضوح.

االبط أو العانة لم شعر إذا بديال يكون قدشعر كان إذا أو الرأس، شعر هناك يعد

مفرط . بشكل تبييضها يتم قد الرأس

األظافر قصاصات استخدام ويمكنالمضادة األدوية امتصاص لمراقبة

. االيتراكونازول مثل للفطريات

رفع ينبغي الوفاة، بعد ما تحليالت فيأو اليدين أصابع من كلها األظافر

القدمين.

Page 102: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

This provides an even longer potential window for detecting exposure than hair.

However, relatively little is known about the mechanisms of uptake and retention or drugs and metabolites in nail.

In addition, the slower growth rate of nail, especially toe nail, as compared to hair makes segmental analysis, and hence interpretation, more difficult.

أطول عن حتى يعبروهذا الشعر فترة منا التعرض في عن .للمادةلكشف

معروف هو نسبيا القليل فإن ذلك، ومعأو بها واالحتفاظ االمتصاص آليات عن

لألدوية الغذائي .التمثيل األظافر في

البطيئ المعدل فإن ذلك، إلى وباإلضافةاصبع األظافر وخصوصا األظافر، لنمو

التحليل يجعل الشعر مع بالمقارنة القدم،. صعوبة أكثر التفسير، وبالتالي دقة، اقل

Page 103: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Protocol for collection of head hair for testing for illicit drugs

The ideal sample is collected from the vertex (the crown) of the head by cutting approximately 2 mm from the scalp.

Take a sample of hair about the thickness of a pencil (100–200 hairs)

Pinch the hair tightly with the fingers and tie with cotton thread at the root end before cutting.

المخدرات على لالختبار الرأس شعر جمع

الرأس قمة من مثالية عينة جمع يتم ) خفض) طريق عن الرأس من التاج

.2حوالي الرأس فروة من مم

قلم سمك عن الشعر من عينة أخذ(200-100رصاص ) الشعر

وربطة األصابع مع بإحكام الشعر قرصةقبل الجذر نهاية في القطن خيط مع عنق

القطع.

Page 104: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Cut the sample as close as possible to the scalp, making sure the scissors are level with the scalp.

Still holding the sample tightly, align the cut root ends of the sample and carefully place flat on a piece of aluminium foil with the cut root ends projecting about 15 mm beyond the end of the foil.

Mark the root end of the foil and fold the foil around the hair and pinch tightly to keep in place.

لفروة ممكن وقت أقرب العينة قطعمع يتساوى مقص من والتأكد الرأس،

. الرأس فروة

محاذاة بإحكام، العينة مسك في تستمروبعناية العينة من الجذر قطع نهايات

من قطعة على مسطح مكان في تضعهايبرز المقطوع الجذر مع األلومنيوم رقائق

رقائق 15حوالي نهاية بعد ما إلى ملماأللمونيوم.

ولف األلمونيوم رقائق الجذر نهاية تحديدوقرصة الشعر حول األلمونيوم رقائق

. مكانه في عليه للحفاظ بإحكام

Page 105: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Fold the foil again in half lengthwise.

Place the sample in a tamper-proof envelope.

Complete and sign the request form, make insure that the donor also signs if necessary.

f there are special instructions that do not appear on the form, but are felt relevant, make a note on a separate sheet and enclose with the sample.

في أخرى مرة األلمونيوم رقائق طوى. بالطول النصف

. للتزوير قابل غير ظرف في العينة وضع

التأكد و طلب، نموذج وتوقيع أن تعبئة. األمر لزم إذا وقع قد المتبرع

    ال التي خاصة تعليمات هناك كانت إذا       ذات  شعرت ولكنك النموذج، في تظهر

    منفصلة ورقة على المالحظة دون الصلة،. العينة  مع وأرفقها

Page 106: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist
Page 107: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

11.Bone and bone marrow

Bone marrow may be useful in poison identification in exhumations where all soft tissue has degenerated.

Bone itself may be useful if chronic poisoning by arsenic or lead, for example, is suspected.

Bone and bone marrow

يكون في عينة قد مفيدة العظام نخاعالسم إعادة تحديد الجثث عند استخراج

. الرخوة األنسجة جميع تحللت حيث

كان إذا مفيدا يكون قد نفسها العظامأو بالزرنيخ المزمن التسمم في � مشتبها

. المثال سبيل وعلى الرصاص،

Page 108: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

12.Tissues

Histology specimens are usually collected into a preservative such as formalin (aqueous formaldehyde solution).

Such pretreatment must be borne in mind if toxicological analyses are requested subsequently.

Samples of tissue obtained postmortem are normally kept at 4◦C prior to analysis.

Brain, subcutaneous fat, lung (apex), spleen, and kidney are the most useful; 10–20 g wet weight of unfixed tissue should be collected into separate containers.

األنسجة

مواد على األنسجة عينات تجمع ما وعادةمحلول ) الفورمالين مثل حافظة

.) المائي الفورمالديهايد

إذا االعتبار في المعالجة هذه تؤخذ أن يجب. الحق وقت في السمية تحاليل طلب

تم التي األنسجة من عينات االحتفاظ يتمفي عادة الوفاة بعد عليها قبل C◦4الحصول

التحليل.

) القمة ) الرئة الجلد، تحت الدهون الدماغ، . وينبغي فائدة األكثر هي والكلى والطحال،

أنسجة 20-10جمع الصافي الوزن من غرام. منفصلة حاويات في

Page 109: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

The specimen should be placed in a specimen jar or nylon bag (volatile substance abuse- or anaesthetic-related deaths) and deep-frozen prior to transport to the laboratory, taking care not to overfill sample containers (overfilled tubes may break when frozen).

Spleen is rich in erythrocytes and hence may provide a valuable alternative specimen in which to measure carboxyhaemoglobin saturation if blood is not available.

أو العينة وعاء في العينة توضع أن يجبالمتعلقة ) الوفاة حاالت النايلون من كيس

المخدر ( باستخدام متطايرة - مواد أومع المختبر، إلى نقلها قبل مجمدة وتحفظ

اخرها الى العينات حاويات ملئ عدمعنددرجة) تكسر قد مملوء أنابيب

التجمد (.

،الحمراء الدم كريات في غني هو الطحالالقيمة بديلة عينة توفر أن يمكن وبالتالي

تشبع لقياس التيcarboxyhaemoglobin غير الدم إذا

متوفر.

Page 110: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Integrity Sample

Precautions to ensure sample integrity include:

Proper sample labeling.

Use of tamper-proof containers.

Collection of samples such as hair, nail, and femoral blood before opening the body.

Proper accompanying documentation.

Samples collected for clinical purposes (or even for the coroner) are often not of ‘evidential’ quality, but such samples may be all that is available.

DNA testing may be used to establish the origin of samples where there has been concern over sample integrity.

: يلي ما تشمل عينة سالمة لضمان الالزمة االحتياطات

. للعينة المناسبة العالمات وضع

. للتزوير قابلة غير حاويات استخدام

الفخذ والدم واألظافر، الشعر، مثل العينات جمع. الجسم فتح قبل

. الخطوات لكل المناسب المصاحب التدوين

( أو السريرية ألغراض جمعها تم التي العينات( لحتى من ليست تكون ما وغالبا الشرعي لطبيب

" كل " العينات هذه تكون قد ولكن ، الثبوتية نوعية. متاح هو ما

لتحديد النووي الحمض اختبار استخدام ويمكنسالمة على قلق هناك كان لو العينات مصدر

العينة.

Page 111: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Adulterants of DOA

The three means used by substance abusers in attempting to avoid giving a positive urine test are dilution, adulteration, and substitution.

Chemicals may be added to urine in an attempt to mask a test result, or to destroy the analyte.

The chief objective of adulteration is to produce a negative result, but even an invalid test may lead to a second collection, thereby ‘buying time’ for drug and/or metabolites to be eliminated before the second test.

There is a large ‘underground’ sale of adulterants.

مدمني قبل من المستخدمة الثالثة وسائلاختبار اعطاء لتجنب محاولة في المخدرات

و والغش، التخفيف، هو إيجابي تبديل.الالبول

البول إلى الكيميائية المواد إضافة ويمكنلتدمير أو االختبار، نتيجة إلخفاء محاولة في

تحليلها.

على الحصول هو الغش من الرئيسي الهدفقد صالح غير اختبار حتى ولكن سلبية، نتيجةشراء " وبالتالي الثانية، المجموعة إلى يؤدياأليض” / أو و المخدرات من للتخلص الوقت

. الثاني االختبار قبل الجاهزية ليتم

. المواد لهذه كبير بيع هناك

Page 112: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Commonly used compounds include household products, such as bleach, vinegar and ammonia, and chemicals that are commercially available via the Internet.

Soap and bleach disrupt the screening process and are easily detectable.

Nitrite is used to conceal THC metabolites, primarily in GC-MS confirmatory tests, although at low pH values it may also reduce the concentration to below cut-off values in screening tests.

Another oxidizing agent, pyridinium chlorochromate, which can be detected by the presence of chromium or pyridine, has been shown to interfere with EMIT assays and in some case.

المنتجات عادة تستخدم التي المركبات وتشملواألمونيا، والخل المبيضات مثل المنزلية،

عبر تجاريا المتوفرة الكيميائية والمواداإلنترنت.

التحليل عملية تعطيل التبييض ومواد الصابون. بسهولة للكشف وقابلة

األيض إلخفاء النتريت استخدام في THCيتم ،الرقم انخفاض من الرغم على األول المقام

إلى تركيز من تقلل قد التي القيم الهيدروجيني. الفحص اختبارات في الحدية القيم من أقل

،مؤكسد آخر pyridiniumعاملchlorochromate عن الكشف يمكن والتي ،

يتداخل أن تبين وقد البيريدين، أو الكروم وجود. الحاالت بعض في التحاليل مع ويتعارض

Page 113: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

mixture of peroxidase and peroxide, has been shown to reduce the concentrations of morphine and codeine in some.

It is good practice to check routinely for evasive measures.

There are test strips are available that will measure creatinine, nitrite, glutaraldehyde, pH, RD and two oxidants, including bleach and pyridinium chlorochromate, simultaneously.

من peroxidase andخليطperoxide من يحد لنه تبين وقد ،

بعض في والكوديين المورفين تركيزاتالحال

بشكل للتحقق الجيدة الممارسات ومنالعينات في الغش لكشف روتيني

من التي المتاحة االختبار شرائط وهناكوالنتريت، الكرياتينين، قياس شأنها

الحموضة، ودرجة RDغلوتارالدهيد،مواد ذلك في بما األكسدة، من واثنين

و pyridiniumالتبييضchlorochromate. واحد وقت في ،

Page 114: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Greater supervision (i.e. invasion of privacy) during sample collection may overcome some of these measures, but it is difficult to see how one can defeat those prepared to use a catheter to inject drug-free urine into their bladders prior to testing.

( على التعدي أي اللصيق اإلشرافيتغلب( قد العينات جمع أثناء الخصوصية

من ولكن اإلجراءات، هذه بعض علىأن للمرء يمكن كيف نرى أن الصعب

لحقن القسطرة باستخدام هؤالء هزيمةمن المثانة إلى المخدرات من خال البول

. االختبار قبل

Page 115: بسم الله الرحمن الرحيم. Methods of collection of biological samples By DR/M.Darweesh Clinical Toxicologist

Thank you