РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ RU (11) 2 443 415 ... · SANTEN FITOTEK KO., LTD. (CN) (54) ANTHRACENEDIONE COMPOUNDS (57) Abstract: FIELD: medicine, pharmaceutics. SUBSTANCE:

РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ

ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБАПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ

(51) МПКA61K 31/03 (2006.01)A61K 31/122 (2006.01)A61P 1/10 (2006.01)

(19) RU (11) 2 443 415(13) C2

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ

(21)(22) Заявка: 2008144132/15, 09.04.2007

(24) Дата начала отсчета срока действия патента: 09.04.2007

Приоритет(ы):(30) Конвенционный приоритет:

07.04.2006 US 60/790,340

(43) Дата публикации заявки: 20.05.2010 Бюл. № 14

(45) Опубликовано: 27.02.2012 Бюл. № 6

(56) Список документов, цитированных в отчете опоиске: RU 2215424 С2, 10.11.2003. RU 2264223

С2, 20.11.2005. RU 2200023 C1, 10.03.2003. RU2244555 C1, 20.01.2005. RU 2259839 С2,10.09.2005. US 2002/0164387 A1, 07.11.2002. US6187313 B1, 13.02.2001.

(85) Дата начала рассмотрения заявки PCT нанациональной фазе: 07.11.2008

(86) Заявка PCT:US 2007/066224 (09.04.2007)

(87) Публикация заявки РСТ:WO 2007/118226 (18.10.2007)

Адрес для переписки:129090, Москва, ул.Б.Спасская, 25, стр.3,ООО "Юридическая фирма Городисский иПартнеры", пат.пов. А.В.Мицу, рег.№ 364

(72) Автор(ы):ЧИЭНЬ Ду-Шиэн (US),ЧУ И-Вэнь (CN),ЧУАН У-Чан (CN),ЛИ Мин-Чун (CN)

(73) Патентообладатель(и):САНТЕН ФИТОТЕК КО., ЛТД. (CN)

(54) АНТРАЦЕНДИОНОВЫЕ СОЕДИНЕНИЯ(57) Реферат:

Настоящее изобретение относится кфармацевтике и медицине и касаетсякомпозиции для лечения воспалительногозаболевания кишечника или синдромараздраженной толстой кишки, включающейэффективное количество соединенияформулы (I). Изобретение обеспечивает

повышенную эффективность лечения. 11 з.п. ф-лы, 7 табл., 5 пр.

Ñòð.: 1

ru

RU

2443415

C2

2C

51

43

44

2U

R

http://www.fips.ru/cdfi/fips.dll/ru?ty=29&docid=2443415

RUSSIAN FEDERATION

FEDERAL SERVICE FOR INTELLECTUAL PROPERTY

(51) Int. Cl.A61K 31/03 (2006.01)A61K 31/122 (2006.01)A61P 1/10 (2006.01)

(19) RU (11) 2 443 415(13) C2

(12) ABSTRACT OF INVENTION

(21)(22) Application: 2008144132/15, 09.04.2007

(24) Effective date for property rights: 09.04.2007

Priority:(30) Priority:

07.04.2006 US 60/790,340

(43) Application published: 20.05.2010 Bull. 14

(45) Date of publication: 27.02.2012 Bull. 6

(85) Commencement of national phase: 07.11.2008

(86) PCT application:US 2007/066224 (09.04.2007)

(87) PCT publication:WO 2007/118226 (18.10.2007)

Mail address:129090, Moskva, ul.B.Spasskaja, 25, str.3, OOO"Juridicheskaja firma Gorodisskij i Partnery",pat.pov. A.V.Mitsu, reg.№ 364

(72) Inventor(s): ChIEhN' Du-Shiehn (US),ChU I-Vehn' (CN),ChUAN U-Chan (CN),LI Min-Chun (CN)

(73) Proprietor(s): SANTEN FITOTEK KO., LTD. (CN)

(54) ANTHRACENEDIONE COMPOUNDS(57) Abstract:

FIELD: medicine, pharmaceutics.SUBSTANCE: present invention refers to

pharmaceutics and medicine, and concerns acomposition for inflammatory bowel disease orirritable colon syndrome containing an effectiveamount of the composition of formula

.

EFFECT: invention provides higher clinicaleffectiveness.

12 cl, 5 tbl, 5 ex

Ñòð.: 2

en

RU

2443415

C2

2C

51

43

44

2U

R

http://www.fips.ru/cdfi/fips.dll/en?ty=29&docid=2443415

RU 2 443 415 C2

СВЯЗАННЫЕ ЗАЯВКИПо этой заявке испрашивается приоритет согласно предварительной заявке

США 60/790340, поданной 7 апреля 2006 г., содержание которой включено в полномобъеме посредством ссылки.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИЗапор, распространенное и неприятное состояние, наблюдается у

приблизительно 20% населения на западе. Наиболее часто это состояние можетвызвать рацион с низким содержанием клетчатки, недостаток физической активности,недостаточное потребление воды или несвоевременное посещение туалета. Стресс ипутешествия также могут приводить к возникновению запора. Другие причинывключают кишечные заболевания (например, воспалительное заболевание кишечникаи синдром раздраженной кишки), кистозный фиброз, беременность, проблемы спсихикой или прием лекарственных средств.

Сбалансированная диета, регулярные упражнения и уменьшение стресса могутпомочь в предотвращении запора. Кроме того, существует ряд слабительных средств сподтвержденной клинически эффективностью для избавления от запора. Тем не менеепри проведении новых терапий было доказано, что такие средстванеудовлетворительны. Таким образом, существует потребность в альтернативномсредстве для лечения запора.

РАСКРЫТИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯНастоящее изобретение относится к композиции и к способу лечения запора.В одном аспекте, это изобретение относится к фармацевтической композиции, как в

твердой (сухой), так и в солюбилизирированной форме, содержащей фармацевтическиприемлемый энтеросолюбильный носитель и антрацендионовое соединениеформулы (I):

,

где каждый из R1 и R2, независимо, представляет собой Н, C1-C6 алкил или C(O)Ra;каждый R3, R5, R6 и R8, независимо, представляет собой Н, C1-C6 алкил или ORb; икаждый R4 и R7, независимо, представляет собой Н, ORc, COORc, OC(O)ORd, SRd, NHRdили C1-C6 алкил, необязательно замещенный C3-C2 0 циклоалкилом, C1-C2 0гетероциклоалкилом, арилом, гетероарилом, ORс, COORd, OC(O)ORd, SRd или NHRd;где каждый из Ra и Rc представляет собой C1-C1 0 алкил; и каждый из Rb и Rd,независимо, представляет собой Н или C1-C1 0 алкил.

Соединения, описанные выше, включают их фармацевтически приемлемые соли иих комплексы с металлами. Соли могут быть образованы, например, междуотрицательно заряженным кислородом соединения и положительно заряженнымнеорганическим или органическим ионом. Комплексы с металлами могут бытьобразованы, например, когда атомы кислорода соединения образуюткоординационную связь с одним или более ионов металла.

В соответствии с формулой (I) ряд антрацендионовых соединений, описанных выше,включает таковые, где каждый из R4 и R7, независимо, представляет собой Н, C1-C6 алкил (например, CH3) или ORc (например, OCH3). В этих соединениях каждый из R1,R2, R3, R5, R6 и R8 может представлять собой H. Типичные антрацендионовые

Ñòð.: 3

DE

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

RU 2 443 415 C2

соединения включают хризофанол и фисцион:.

Термин "алкил" относится к насыщенной или ненасыщенной, линейной илиразветвленной углеводородной группе, такой как -CH3, -CH2-CH═CH2 илиразветвленному -C3H7. Термин "циклоалкил" относится к насыщенной илиненасыщенной, неароматической, циклической углеводородной группе, такой какциклогексил или циклогексен-3-ил. Термин "гетероциклоалкил" относится кнасыщенной или ненасыщенной, неароматической, циклической группе, имеющей поменьшей мере один гетероатом в кольце (например, N, O или S), такой как 4-тетрагидропиранил или 4-пиранил. Термин "арил" относится к углеводороднойгруппе, имеющей одно или более ароматических колец. Примеры арильных группвключают фенил, фенилен, нафтил, нафтилен, пиренил, антрил и фенантрил. Термин"гетероарил" относится к группе, имеющей одно или более ароматических колец,которые содержат по меньшей мере один гетероатом (например, N, O или S). Примерыгетероарильных групп включают фурил, фурилен, флуоренил, пирролил, тиенил,оксазолил, имидазолил, тиазолил, пиридил, пиримидинил, хиназолинил, хинолил,изохинолил и индолил.

Если не указано иначе, упомянутые здесь алкил, циклоалкил, гетероциклоалкил,арил и гетероарил включают как замещенные, так и незамещенные группы.Возможные заместители в циклоалкиле, гетероциклоалкиле, ариле и гетероариле безограничения включают C1-C1 0 алкил, C2-C1 0 алкенил, C2-C1 0 алкинил, C3-C8 циклоалкил, C5-C8 циклоалкенил, C3-C2 0 циклоалкил, C1-C2 0 гетероциклоалкил, C1-C1 0 алкокси, арил, арилокси, гетероарил, гетероарилокси, амино, C1-C1 0 алкиламино, C1-C2 0 диалкиламино, ариламино, диариламино, гидроксил, галоген, тио, C1-C1 0 алкилтио, арилтио, C1-C1 0 алкилсульфонил, арилсульфонил, ациламино, аминоацил,аминотиоацил, амидино, гуанидин, уреидо, циано, нитро, ацил, тиоацил, ацилокси,карбоксил и эфир карбоновой кислоты. С другой стороны, возможные заместители валкиле включают все вышеупомянутые заместители, за исключением C1-C1 0 алкила,C2-C1 0 алкенила и C2-C1 0 алкинила. Циклоалкил, гетероциклоалкил, арил и гетероарилтакже могут быть объединены друг с другом.

Антрацендионовые соединения, описанные выше, могут применяться для лечениязапора, то есть для улучшения перистальтики кишечника при поддержаниинормальной кишечной функции. Усиление перистальтики кишечника сокращаетпродолжительность прохождения пищей кишечного тракта. В результате кишечныйтракт адсорбирует меньше пищи, которая часто включает углеводы, жиры,холестерин, липопротеины низкой плотности или триглицериды. Соответственно,антрацендионовые соединения позволяют уменьшить поглощение в теле индивидуумаэтих нутриентов и, таким образом, (i) снизить уровни холестерина или триглицеридовили (ii) уменьшить или поддержать вес тела. Таким образом, это изобретение такжеотносится к способу использования этих композиций для улучшения перистальтикикишечника и обеспечения нормальной функции кишечника, снижения уровнейхолестерина, липопротеинов низкой плотности или триглицеридов и уменьшения илиподдержания веса тела.

Ñòð.: 4

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

RU 2 443 415 C2

В другом аспекте это изобретение относится к способу лечения воспалительногозаболевания кишечника или синдрома раздраженной кишки вышеупомянутымиантрацендионовыми соединениями.

Также в объем этого изобретения включены (1) применение антрацендионовыхсоединений, описанных выше, для лечения запора, воспалительного заболеваниякишечника или синдрома раздраженной кишки, улучшения перистальтики кишечникаи поддержания нормальной функции кишечника, снижения уровней холестерина,липопротеинов низкой плотности или триглицеридов, или уменьшения илиподдержания веса тела; и (2) применение антрацендионовых соединений дляпроизводства лекарственного средства или диетической добавки для указанных вышеслучаев.

Подробное описание одного или более вариантов выполнения изобретенияраскрываются ниже в описании. Другие признаки, объекты и результаты изобретениябудут ясны из описания и формулы изобретения.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯЭто изобретение основано, по меньшей мере частично, на неожиданном

установлении того, что два антрацендионовых соединения, хризофанол и фисцион,обнаружены в китайском растении Rheum palmatum Linne, каждое из которыхэффективно при лечении запора. Они не вызывают побочных эффектов, частонаблюдаемых при приеме растительных экстрактов из Rheum palmatum Linne,например спазмов, вздутия, газообразования и диареи. Кроме того, каждое соединениеобладает очень низкой адсорбцией в кишечнике и поэтому оказывает минимальныепобочные эффекты по всему телу.

Соответственно, в объем настоящего изобретения включена композиция, котораясодержит энтеросолюбильный носитель и одно или больше антрацендионовыхсоединений, описанных в разделе «раскрытие изобретения» выше.Энтеросолюбильный носитель выбирается таким образом, чтобы минимизироватьбыстрое высвобождение лекарственного средства при пероральном введении, до техпор, пока лекарственное средство не достигнет кишечника. См., например, патентыСША 5188836 и 6306434.

Композиция может представлять собой фармацевтическую композицию, котораясодержит фармацевтически приемлемый носитель или диетическую композицию,которая содержит приемлемый пищевой носитель. Предпочтительно,антрацендионовое соединение добавляют в композицию в чистом виде или посуществу чистом виде. Антрацендионовые соединения для применения в этомизобретении могут быть химически синтезированы или выделены из растений.Например, фисцион и хризофанол могут быть выделены из растений, указанных нижев таблицах А и B соответственно.

Ñòð.: 5

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

RU 2 443 415 C2

Ñòð.: 6

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

RU 2 443 415 C2

Примеры композиции по настоящему изобретению без ограничения включаютпищевые продукты, пищевые добавки, нутрицевтические добавки и фармацевтическиепрепараты. Композиция может быть представлена в виде таблеток, суспензий,имплантов, растворов, эмульсий, капсул, порошков, сиропов, жидких композиций,мазей, лосьонов, кремов, паст, гелей или т.п.

Диетическая композиция по настоящему изобретению как в сухой, так и всолюбилизированной форме содержит одно или более антрацендионовых соединенийи пищевой носитель. Могут быть добавлены дополнительные нутриенты, такие какминералы или аминокислоты. Диетическая композиция также может представлятьсобой питьевой или пищевой продукт. Примеры питьевых продуктов без ограничениявключают напитки на основе чая, сок, кофе и молоко. Примеры пищевого продуктавключают желе, печенье, продукты из хлебных злаков, конфеты, батончики,

Ñòð.: 7

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

RU 2 443 415 C2

экстракты растений, молочные продукты (например, мороженое и йогурт), соевыепродукты (например, тофу) и рисовые продукты.

Фармацевтическая композиция для перорального введения может представлятьсобой любую дозированную форму для перорального приема, включая капсулы,таблетки, эмульсии и водные суспензии, дисперсии и растворы. В случае таблеток,обычно используемые носители включают лактозу и кукурузный крахмал. Такжеобычно добавляют смазывающие компоненты, такие как стеарат магния. Дляперорального введения в виде капсулы используемые разбавители включают лактозуи сухой кукурузный крахмал. При пероральном введении водных суспензий илиэмульсий активный ингредиент может быть суспендирован или растворен в маслянойфазе, объединенной с эмульгирующими или суспендирующими компонентами. Прижелании могут быть добавлены некоторые подслащивающие, вкусовые илиокрашивающие добавки.

Композиция по настоящему изобретению включает носитель. В зависимости отвида композиции носитель может быть соответствующим диетическим носителем илифармацевтически приемлемым носителем. Примеры фармацевтически приемлемогоносителя без ограничения включают биологически совместимые носители,адъювантны, добавки и разбавители для придания композиции соответствующейдозированной формы.

"Фармацевтически приемлемый носитель" относится к такому носителю что, послевведения или применения на индивидууме, он не вызывает нежелательныхфизиологических эффектов. Носитель в фармацевтической композиции должен быть"приемлем" также в том смысле, что он совместим с активным ингредиентом и,предпочтительно, стабилизирует его. Один или более солюбилизирующихкомпонентов могут использоваться в качестве фармацевтических носителей длядоставки активного антрацендионового соединения. Примеры других носителейвключают коллоидный оксид кремния, стеарат магния, целлюлозу, лаурилсульфатнатрия и D&C Yellow # 10.

Вышеописанная композиция, в любой из форм описанных выше, можетприменяться для лечения запора. Действительно, как показано в примерах ниже,композиция увеличила выработку кала и содержание воды в кале у индивидуума, невызывая побочные эффекты, такие как диарея. Также она была эффективна всокращении или поддержании веса тела индивидуума.

Термин "лечение" относится к введению эффективного количестваантрацендионового соединения индивидууму, имеющему заболевание, напримерзапор, воспалительное заболевание кишечника или синдром раздраженной кишки, илиимеющему симптомы такого заболевания, или имеющему предрасположение к такомузаболеванию, с целью вылечить, излечить, облегчить, уменьшить, изменить,вылечивать, улучшить, оздоровить или воздействовать на заболевание, симптомызаболевания или предрасположение к заболеванию. Термин "введение" охватываетпероральную доставку композиции по изобретению индивидууму в любомсоответствующем виде, например пищевом продукте, напитке, таблетке, капсуле,суспензии и растворе. "Эффективное количество" относится к дозе композиции,которая является достаточной для обеспечения физического эффекта (например,увеличение выработки кала и снижение веса тела) или терапевтического эффекта(например, снижение уровней холестерина). Для определения оптимальных путейвведения и доз могут быть выполнены как in vivo, так и in vitro исследования.Увеличение выработки кала означает увеличение массы влажного кала,

Ñòð.: 8

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

RU 2 443 415 C2

производимого индивидуумом, на 15% или больше, спустя день после полученияиндивидуумом активной композиции, как определено в методике, описанной впримере 3 ниже, или в любой аналогичной методике.

Композиция по настоящему изобретению может быть использована отдельно или вкомбинации с другими биологически активными ингредиентами. Она может бытьвведена индивидууму в одной дозе или в нескольких дозах в течение периода времени,в общем случае перорально. Различные схемы введения очевидны для специалистов вданной области. Диапазоны доз для введения композиции должны находиться в такихпределах, чтобы обеспечить требуемый эффект. Доза не должна вызывать какие-либонеблагоприятные побочные эффекты, такие как нежелательные перекрестные реакциии т.п. В общем случае доза зависит от возраста, веса, пола, состояния и степенисостояния индивидуума и поставленной цели. Доза может быть определенаспециалистом в данной области без проведения чрезмерного количестваэкспериментов. Доза может быть скорректирована при возникновениипротивопоказаний, толерантности или подобных состояний. Специалисты в даннойобласти легко могут оценить такие факторы и, основываясь на такой информации,могут определить конкретную эффективную концентрацию композиции понастоящему изобретению для применения по соответствующему назначению.

Конкретные примеры, приведенные ниже, следует рассматривать какиллюстративные, а не ограничивающие раскрытие изобретения. Специалист в даннойобласти без проведения дополнительных экспериментов, основываясь на описании,может использовать настоящее изобретение в наиболее полной степени. При указанииссылок на документы, их содержание включается полностью.

Пример 1Алоэ-эмодин, реин, эмодин, хризофанол и фисцион выделяли из экстракта STD-05

из Rheum palmatum Linne. Для получения STD05 3,2 кг Rheum palmatum дваждыэкстрагировали 12 л этилацетата в течение 18 часов. Полученный растворфильтровали через фильтр 200 меш. Фильтрат концентрировали под вакуумом,растворяли в 2 л 95% этанола и осаждали в 6 л воды. Затем преципитат растворялив 95% этаноле и снова осаждали водой, получая преципитат "Fr-I". Супернатантфракционировали на колонке Dianon HP-20 и элюировали 30% этанолом, а затем 95%этанолом и этилацетатом. Элюаты, фракционированные 95% этанолом (Fr-D) иэтилацетатом (Fr-E), объединяли с Fr-I, получая STD05. Двадцать граммов STD05растворяли в этилацетате и смешивали с небольшим количеством силикагеля. Затемудаляли этилацетат под вакуумом, получая смесь. Смесь очищали элюированием наколонке с силикагелем от 0% до 5% этилацетата в гексане. Полученные таким образомфракции анализировали ВЭЖХ. ВЭЖХ были идентифицированы пять соединений.Фракции каждого соединения объединяли соответственно. Растворитель из каждогообъединенного раствора удаляли под вакуумом, получая пять твердых продуктов.Твердые продукты перекристаллизовывали из ацетона, получая 220 мг алоэ-эмодина,290 мг реина, 1270 мг эмодина, 2220 мг хризофанола и 790 мг фисциона. Результатыпоказаны в таблице 1 ниже.

Таблица 1 Выделение соединений

Соединения Элюент Гексан:Этилацетат Масса (мг)

Выход (%)

Из экстракта Из растения

Алоэ-эмодин 20:1 220 1,10 0,012

Реин 20:1 290 1,45 0,016

Эмодин 40:1 1270 6,35 0,071

Ñòð.: 9

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

RU 2 443 415 C2

Хризофанол 180:1 2220 11,10 0,125

Фисцион 160:1 790 3,95 0,044

Каждое из выделенных соединений кристаллизовывали и исследовали подмикроскопом.

Пример 2Исследовали слабительное действие экстрактов Rheum palmatum Linne.

Неочищенный экстракт Rheum palmatum Linne и STD05 получали от SunTen PhytotechCo., Ltd. (Jhonghe City, Taiwan). Коммерческие доступные слабительные -Through® (Chung Mei Pharmaceutical Co., Ltd.; активный ингредиент: Сеннозиды 20 мг,Сеннозиды A+B 12 мг, Партия 009А 051) и Dulcolax ® (Boehringer Ingelheim, Taiwan, Ltd.;

активный ингредиент: Бисакодил; Партия 4804942) были закуплены в аптеке.Сорок два здоровых самцов крыс S.D. (8 недель; National Laboratory Animal Center,

Taiwan) делили на семь групп (по шесть в каждой) и использовали для исследованияслабительной активности экстрактов из Rheum palmatum Linne. Одна группа крыс неполучала экстракты и лекарственные средства и ее использовали в качествеотрицательного контроля. Крысы во второй и третьей группе получалиСеннозиды (3,55 мг/кг) и Бисакодил (1,75 мг/кг) соответственно, и их использовали вкачестве положительного контроля. Крысы в других четырех группах получалинеочищенный экстракт из Rheum palmatum Linne (500 мг/кг), отфильтрованныйнеочищенный экстракт STD03 (180 мг/кг) и STD05 (STD05-1: 12 мг/кг и STD05-2: 24мг/кг) соответственно. Все вещества вводили перорально каждый день в течение трехнедель.

Эксперименты выполняли в условиях контроля температуры, влажности иосвещения. Каждой крысе был доступен ad libitum стандартный корм для крыс и вода,в помещении с 12-часовым циклом освещения/темноты. Крыс разделяли на семь группв соответствии с массой.

В первой части эксперимента исследовали влияние вышеупомянутых экстрактов навыработку фекалий. В течение трехнедельного периода крысу, у которой наблюдалипризнаки гибели, подвергали эвтаназии, проводили вскрытие и исследовали напредмет болезни или повреждений. При любых осложнениях или болезни проводилианализ H&E окрашиванием для определения причины смерти и переоценки доз длябудущих экспериментов.

В этот период проводили взвешивание крыс и регистрировали массу тела. Три разаза этот период исследовали фекалии каждой крысы на предмет любых необычныхпризнаков. Более конкретно, фекалии взвешивали на 11, 15, 18 и 21 день. Во времянаблюдения каждую крысу помещали в метаболическую клетку. Фекалии собираликаждые двадцать четыре часа. Подсчитывали количество собранных пеллет фекалий иоценивали форму и цвет пеллет. После взвешивания влажных фекалий их высушивалив печи при 100°C в течение двадцати четырех часов. Содержание воды в калерассчитывали по следующей формуле:

Процент содержания воды = [(влажный вес - сухой вес)/влажный вес] × 100%. (I)Полученные результаты представлены таблице 2 ниже.

Таблица 2 Действие экстрактов Rheum palmatum Linne на выработку фекалий

Контроль Rheum palmatum Бисакодил Сеннозиды STD03 STD05-1 STD05-2

День 11

Влажный вес (г) 21,66 39,46 33,84 29,21 27,60 22,79 22,59

Сухой вес 87 178 116 121 126 105 116

Содержание воды (%) 48,82 56,92 64,45 52,70 53,35 50,19 42,07

Ñòð.: 10

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

RU 2 443 415 C2

День 15

Влажный вес (г) 16,86 28,50 41,64 30,95 36,86 27,34 29,09

Сухой вес 84 139 110 119 153 130 124

Содержание воды (%) 42,89 49,53 68,34 60,40 57,19 47,57 48,83

День 18

Влажный вес (г) 22,14 24,98 30,14 23,90 25,01 24,51 29,48

Сухой вес 90 126 81 106 124 114 123

Содержание воды (%) 43,83 48,36 66,65 47,30 49,40 47,63 50,19

День 21

Влажный вес (г) 22,79 36,52 40,13 27,80 24,18 24,51 27,17

Сухой вес 91 105,6 108 123 97 108 108

Содержание воды (%) 47,85 63,89 68,02 44,73 47,56 51,10 43,54

После вышеуказанных исследований фекалий проводили исследованиеперистальтики кишечника. Перед экспериментом крысы не получали пищи поменьшей мере шестнадцать часов. Затем крысы получали вышеуказанныелекарственные средства или экстракты. Через 3 часа каждая крыса получала 3 мл/кграствора 0,5% метилцеллюлозы - 0,5% красителя Evans blue. Каждую крысуумерщвляли через 30 минут и вскрывали брюшную полость. Весь тонкий кишечникизвлекали и тщательно выпрямляли. Длину тонкой кишки измеряли как расстояниемежду пилорусом и слепой кишкой. Также измеряли расстояние, пройденное покишечному тракту красителем Evans blue. Во время проведения исследования любыенеобычные наблюдения регистрировали и фотографировали. Функция перистальтикикишечника рассчитывали по следующей формуле:

Перистальтика кишечника = (длина, окрашенная Evans blue/длина тонкой кишки)× 100%. (II)

Полученные результаты представлены в Таблице 3 ниже.

Таблица 3 Действие экстрактов Rheum palmatum Linne на перистальтику кишечника

STD03 STD05-1 STD05-2

Длинатонкогокишечника(см)

Окрашеннаядлина (см)

Перистальтикакишечника (%)







105 83,5 79,5 101 77,5 76,7 117 83,5 71,4

118,5 75 63,3 102,5 72,5 70,7 114 89 78,1

111 80,5 72,5 113,5 105 92,5 112 99,5 88,8

110 79 71,8 107 70 65,4 107 89 83,2

120 87 72,5 110 86 78,2 101 86 85,1

108 77,5 71,8 118,5 81 68,4

Среднее 71,9 Среднее 75,9 Среднее 79,2

SD 5,8 SD 9,3 SD 8,1

Данные по перистальтике кишечника выражали как среднее значение ± SD(стандартное отклонение). Данные анализировали однофакторным ANOVA(дисперсионный анализ). Для сравнения в пределах группы использовалиапостериорное сравнение. В обоих исследованиях по выработке фекалий иперистальтике кишечника, при p<0,05 были показаны значительные различия. Приисследовании по выработке фекалий данные для каждой группы и в каждый моментвремени представлены в виде влажного веса или количества пеллет у шести крыс вгруппе.

Пример 3Исследовали слабительную активность вышеуказанных STD05 и соединений. Для

этого исследования здоровых самцов крыс S.D. (BioLASCO Taiwan Co. Ltd.) делили натри группы (а именно, Группы 1-3).

Ñòð.: 11

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

RU 2 443 415 C2

В группе I, 6 крыс, как отрицательный контроль, не получали никакого лечения; 6крыс, как положительный контроль, получали 3,35 мг/кг/день сеннозидов (Through®,Chung Mei Pharmaceutical Co., Ltd; активный ингредиент: сеннозиды 20 мг, каксеннозид A+B 12 мг, партия. 012F 006); 6 крыс получали STD05 (8 мг/кг/день); 6 крысполучали фракцию экстракта, содержащую алоэ-эмодин, реин и эмодин ("ARE", 8мг/кг/день); 6 крыс получали алоэ-эмодин (4 мг/кг/день); и 6 крыс получали реин (4мг/кг/день).

В группе II, 6 крыс, как отрицательный контроль, не получали никого лечения; 6крыс, как положительный контроль, получали 3,35 мг/кг/день сеннозидов; 6 крысполучали STD05 (24 мг/кг/день); 6 крыс получали фракцию экстракта,содержащую ARE (24 мг/кг/день); 6 крыс получали хризофанол (4 мг/кг/день); и 6крыс получали эмодин (4 мг/кг/день).

В группе III, 6 крыс, как отрицательный контроль, не получали никакого лечения; 6крыс получали фисцион (4 мг/кг/день); и 6 крыс получали смесь хризофанола ифисциона (8 мг/кг/день, "CP").

Эксперименты выполняли в условиях контроля температуры, влажности иосвещения. Каждой крысе была доступна ad libitum стандартный корм для крыс ивода, в помещении с 12-часовым циклом освещения/темноты. Для статистическогосравнения крыс разделили на шесть групп в соответствии с массой.

В первой части эксперимента изучали влияние исследуемых веществ на выработкуфекалий. В течение 10-дневного периода крыс взвешивали каждый день ирегистрировали массу тела. В течение 10-дневного периода фекалии крыс такжеисследовали три раза, как описано выше, на предмет наличия каких-либо необычныхнаблюдений. Во время 10-дневного периода крысу, у которой наблюдали признакигибели, подвергали эвтаназии, проводили вскрытие и исследовали на предмет болезниили повреждений. При любых осложнениях или болезни проводили анализ H&Eокрашиванием для определения причины смерти и переоценки доз для будущихэкспериментов. Данные, демонстрирующие влияние соединений, смесей илиэкстрактов на массу тела крыс, показаны в таблице 4.

Таблица 4 Действие соединений и экстрактов из Rheum palmatum Linne

Группа I Группа II Группа III

Контроль Контроль Контроль

Начало День 1 Конец День 10 Разница Начало День 1 Конец День 10 Разница Начало День 1 Конец День 10 Разница

280 335 55 355 400 45 415 450 35

285 345 60 365 405 40 430 460 30

290 355 65 365 410 45 435 470 35

275 330 55 345 385 40 405 440 35

285 345 60 360 410 50 425 460 35

295 355 60 380 435 55 450 475 25

Среднее 285 344 59 362 408 46 427 459 33

SD 7 10 4 12 16 6 16 13 4

Сеннозиды Сеннозиды


280 325 45 340 370 30

285 330 45 350 395 45

290 350 60 365 405 40

275 310 35 325 360 35

285 350 65 370 410 40

295 365 70 390 445 55

Среднее 285 338 53 357 398 41

Ñòð.: 12

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

RU 2 443 415 C2

SD 8 20 14 23 30 9

STD05 (8 мг/кг) STD05 (24 мг/кг)


275 330 55 345 380 35

285 345 60 355 385 30

290 350 55 360 395 35

275 335 60

285 345 60

295 355 65 375 395 20

Среднее 285 343 59 359 389 30

SD 7 15 4 13 8 7

ARE (8 мг/кг) ARE (24 мг/кг)


270 325 55 335 370 35

285 345 60 360 405 45

295 350 55 370 405 35

280 325 45 335 370 35

285 345 60 355 395 40

290 365 75 375 435 60

Среднее 284 343 58 355 397 42

SD 9 15 10 17 25 10

Aloe-emodin (4 мг/кг) Chrysophanol (4 мг/кг) Physcion (4 мг/кг)


270 315 45 330 370 40 385 410 25

285 335 50 350 370 20 400 430 30

295 345 50 355 385 30 405 450 45

275 315 40 325 350 25 365 385 20

285 325 40 340 370 30 385 415 30

290 345 55 360 410 50 430 460 30

Среднее 283 330 58 343 376 33 395 425 30

SD 9 14 10 14 20 11 22 28 8

Rhein (4 мг/кг) Emodin (4 мг/кг) CP (8 мг/кг)


275 330 55 340 370 30 390 415 25

280 330 50 345 380 35 395 420 25

285 340 55 360 405 45 430 455 25

275 310 35 330 340 10 360 385 25

280 335 55 350 385 35 405 435 30

285 340 55 360 395 35 405 440 35

Среднее 280 331 51 348 379 32 398 425 28

SD 4 11 8 12 23 12 23 24 4

Как показано в таблице 4, STD05 и соединения эффективны для поддержания весатела. Неожиданно было установлено, что соединения в чистом виде такжеэффективны.

Во время эксперимента фекалии крыс изучали в 1, 5 и 10 дни, как описано выше.Было установлено, что STD05 стимулировал выработку кала. В 10-дневный период открыс, получающих STD05, было получено больше кала (влажный вес) по сравнению скрысами в группе контроля примерно до 32%. Кроме того, количество пеллет у крыс,получавших STD05, было больше чем у крыс контроля примерно до 20%. Кроме того,при STD05 увеличилось содержание воды в кале примерно до 18%. Те же самыеэксперименты проводили на крысах, получающих фисцион, алоэ-эмодин, хризофанол,реин, эмодин, CP и ARE. Результаты показаны в таблице 5 ниже.

Таблица 5

Ñòð.: 13

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

RU 2 443 415 C2

Влияние соединений и экстрактов на выработку кала

Группа I Контроль Сеннозиды (3,35мг/кг)

STD05 (8мг/кг)

ARE (8 мг/кг) Алоэ-эмодин (4мг/кг)

Реин (4 мг/кг)

День 1

Влажный вес (г) 13,42 18,72 14,06 9,43 17,00 17,57

Количество пеллет 85 101 79 63 98 102

Содержаниеводы (%)

32,59 45,69 39,73 32,54 42,48 42,58

День 5

Влажный вес (г) 18,48 26,16 27,76 18,53 20,21 16,88



39,83 48,68 48,44 47,35 41,98 44,55

День 10

Влажный вес (г) 24,15 36,38 33,83 19,87 28,86 23,52



49,11 57,4 54,55 48,36 50,48 46,53

Группа II Контроль Сеннозиды (3,35мг/кг)

STD05 (24мг/кг)

ARE (24мг/кг)

Хризофанол (24мг/кг)

Эмодин (4мг/кг)

День 1

Влажный вес (г) 24,15 36,19 37,27 17,62 28,86 16,86



51,11 61,09 60,65 50,21 50,82 42,38

День 5

Влажный вес (г) 22,85 36,42 27,28 18,60 26,48 25,51



49,70 61,53 55,47 50,73 51,22 51,00

День 10

Влажный вес (г) 25,29 36,21 31,07 25,66 28,83 26,21



48,64 53,99 62,19 53,35 56,52 53,64

Группа III Контроль Фисцион (4 мг/кг) СР (8 мг/кг)

День 1

Влажный вес (г) 18,32 35,38 28,74

Количество пеллет 65 134 115


49,51 55,73 52,82

День 5

Влажный вес (г) 22,41 35,17 31,26



50,93 53,80 56,36

День 10

Влажный вес (г) 22,37 29,43 26,37


Содержаниеводы (%) 47,09 47,66 50,93

Как показано в таблице 5, в течение 10-дневного периода все соединения,кроме ARE, стимулировали выработку кала в следующем порядке фисцион>CP>алоэ-эмодин>хризофанол>реин>эмодин (от наиболее сильного к наименее сильному).Например, фисцион, CP, алоэ-эмодин, хризофанол, реин и эмодин усилили количествокала (влажный вес) в День 1 на 93%, 57%, 27%, 19%, 31% и 30% соответственно; вДень 5 на 57%, 39%, 9%, 16%, 9% и 12% соответственно; и в День 10 на 32%, 18%, 20%,14%, 1% и 4% соответственно. Средние значения составляют 61%, 38%, 19%, 16%, 7%и 5% соответственно.

После исследования кала проводили исследование перистальтики кишечника, какописано выше. Во время проведения исследования зарегистрировали ифотографировали любые необычные наблюдения. Для сравнения в пределах группыиспользовали апостериорное сравнение, при p<0,05 со значительными различиями.Было показано, что у крыс, получающих STD05 (содержащий фисцион и хризофанол)и сеннозиды, наблюдали большую перистальтику кишечника (69,3% и 67,9%), чем у

Ñòð.: 14

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

RU 2 443 415 C2

крыс контроля (61,1%).Пример 4Для STD05 проводили тест при увеличении стимуляции электрическим током тканей

подвздошной кишки морских свинок при тестовых концентрациях от 10 нм до 10мкМ MDS Pharma Services. Исследование проводили по методике, описаннойв Moritoki, et al., "Effects of methylxanthines and imidazole on the contraction of guinea pigileum induced by transmural simulation" Eur. J. Pharmacol. 35, 185-198.

Результаты показывают, что STD05 увеличил нейрогенное сокращение мышцна 36% при концентрациях 0,03 и 0,3 мкМ и вызвал уменьшение базальногосокращения мышц после введения на 24% при концентрации 10 мкМ.

Пример 5STD05 исследовали на возможную гипохолестеринемическую активность у

хомячков, получавших высокохолестериновую диету. STD05 30 и 100 мг/кг вводилиперорально один раз в день каждый день в течение 14 дней. Кровь отбирали ухомячка, не получавшего еду с предыдущего вечера, в 1 день (перед введением), в 8день (7 после введения) и в 15 день (14 после введения) для измерения в сывороткесодержания общего холестерина, липопротеинов высокой плотности, липопротеиновнизкой плотности и триглицеридов. Значения после введения на 8 день и 15 деньвыражали как процент от соответствующих значений перед введением (день), чтобыоценить липид-понижающее действие исследуемой композиции. Уменьшение на 20%или больше общего холестерина или липопротеинов низкой плотности или увеличениена 20% или больше липопротеинов высокой плотности, а также уменьшение на 40%или больше триглицеридов по сравнению с группой носителя считали значительным.Для статистического сравнения между группой носителя и обрабатываемой группойиспользовали однофакторный ANOVA (дисперсионный анализ) с последующимтестом Даннета.

Результаты показывают, что STD05 в концентрации 100 мг/кг показал значительноеснижение липопротеинов с низкой плотностью. Действие стало выраженным послевведения в течение двух недель.

ДРУГИЕ ВАРИАНТЫ ВЫПОЛНЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯВсе признаки, раскрытые в этом описании, могут быть объединены в любой

комбинации. Каждый признак, раскрытый в этом описании, может быть замененальтернативным признаком, служащим для той же самой, эквивалентной илиподобной цели. Таким образом, если не указано иначе, каждый раскрытый признакявляется только примером ряда эквивалентных или подобных признаков.

Из вышеизложенного описания специалист в данной области легко можетустановить основные характеристики настоящего изобретения и, не отступая отсущности и объема, может выполнить различные изменения и модификацииизобретения для возможности использования для различных целей и условий. Такимобразом, другие варианты выполнения изобретения также включены в объемнижеследующей формулы изобретения.

Формула изобретения1. Композиция для лечения воспалительного заболевания кишечника или синдрома

раздраженной кишки у индивидуума, включающая эффективное количествоочищенного соединения формулы (I):

Ñòð.: 15

CL

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

RU 2 443 415 C2

где каждый из R1-R6 и R8 независимо представляет собой Н или C1-C6 алкил; и R7 представляет собой Н или О(C1-С1 0)алкил.2. Композиция по п.1 для лечения воспалительного заболевания кишечника.3. Композиция по п.1 для лечения синдрома раздраженной кишки.4. Композиция по п.1, где каждый из R1, R2, R3, R5, R6 и R8 представляет собой Н.5. Композиция по п.4, где R4 представляет собой C1-C6 алкил.6. Композиция по п.5, где соединение представляет собой хризофанол.7. Композиция по п.4, где R7 представляет собой O(C1-С1 0)алкил.8. Композиция по п.7, где соединение представляет собой фисцион.9. Композиция по п.1, представляющая собой фармацевтическую композицию.10. Композиция по п.9, дополнительно включающая фармацевтически приемлемый

носитель.11. Композиция по п.10, где фармацевтически приемлемый носитель представляет

собой энтеросолюбильный носитель.12. Композиция по п.1, представляющая собой диетическую композицию.

Ñòð.: 16

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

Documents

РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ RU (11) 2 443 415 ... · SANTEN FITOTEK KO., LTD. (CN) (54) ANTHRACENEDIONE COMPOUNDS (57) Abstract: FIELD: medicine, pharmaceutics. SUBSTANCE: