162112_AULA 10 Antibiograma

5/20/2018 162112_AULA 10 Antibiograma

1/27

Testes de Sensibilidade

aos Antimicrobianos


2/27

Indicaes do Antibiograma Quando o perfil de susceptibilidade no

previsvel Estudos de epidemiologia de resistncia

Estudos de novos agentesantimicrobianos

No recomendado em microrganismos damicrobiota normal

Ex: Staphylococcuscoagulase negativo desecreo nasal


3/27

Seleo dos antimicrobianos Responsabilidade do laboratrio testar os

antimicrobianos mais apropriados para o microrganismoisolado e stio da infeco

Os antimicrobianos testados devem ser apropriadospara o tipo de hospital ou instituio

As orientaes sobre os antimicrobianos mais

adequados para cada grupo de microrganismos sopublicadas e atualizadas anualmente pelo NCCLS(National Committee for Clinical Laboratory Standards)


4/27

Principais Classes de AntimicrobianosClasses Subclasses Exemplos

Penicilinas(Betalactmicos)

Penicilinas naturais Penicilina G

Penicilinas resistentes abetalactamases

Oxacilina, meticilina e cloxacina

Aminopenicilinas Ampicilina e amoxicilina

Carboxipenicilinas Carbenicilina e ticarcilina

Ureidopenicilinas Piperacilina, mezlocilina e azocilinaBetalactmicos +inibidores debetalactamases

Amoxicilina + cido clavulnico

Ampicilina + Sulbactam

Tirarcilina + cido clavulnico

Piperacilina + TazobactamCefens(Betalactmicos)

Cefalosporinas de 1 Gerao Cefalotina, cefazolina, cefalexina

Cefamicinas (2 Gerao) Cefoxitina, cefotetan, cefmetazol

Cefalosporinas de 2 Gerao Cefuroxima sdica, cefamandol,cefonicidaCefalosporinas de 3 Gerao Cefoperazona, cefotaxima, ceftriaxona

Cefalosporinas de 4 Gerao Cefepima

Carbapenens(Betalactmico)

Imipenem, meropenem, ertapenem

Aminoglicosdeos Amicacina, gentamicina, netilmicina,neomicina

Quinolonas cido nalidxico, cido pipemdico


5/27

Principais Classes de AntimicrobianosClasses Subclasses Exemplos

Fluoroquinolonas Ciprofloxacina, norfloxacina,levofloxacinaLincosamidas Clindamicina, lincomicina

Ansamicinas Rifampicina

Macroldeos Eritromicina, azitromicina

Glicopeptdeos Vancomicina, teicoplaninaTetraciclina Tetraciclina

Nitromidazol Metronidazol

Oxazolidinona Linezolida

Inibidores do cidoflico Sulfametoxazol / trimetoprima,sulfonamidas, trimetoprima


6/27

Mtodos de avaliao Mtodos convencionais:

Microdiluio ou macrodiluio Difuso dos discos (Kirby-Bauer)

Mtodos no convenionais: E-test Testes especiais

Resistncia a Meticilina (MRSA) Resistncia a Vancomicina (VISA) Deteco de betalactamases

Automatizado


7/27

Mtodo da microdiluio oumacrodiluio

Diluio do antibitico

Em caldo Concentrao Inibitria Mnima (CIM) Macromtodo Micromtodo

Em gar CIM


8/27

Mtodo de Difuso Tcnica qualitativa

Meio de cultura: gar Meller-Hinton Transparncia e reprodutibilidade

Baixos teores de inibidores Crescimento satisfatrio

Vantagens

Fcil execuo Grande utilizao Escolha flexvel dos antibiticos

Custo operacional menor


9/27

Mtodo de DifusoPrincpio do mtodo da difuso de discos


10/27

Mtodo de Difuso

Padronizao de Kirby e Bauer

Preparo do inculo

Turbidimetria

Meio de escolha

Semeadura

Uso de discos

Incubao e leitura


11/27

Preparao do inculo

bacteriano Padro de turvao para o preparo do

inculo: Escala de McFarland 0,5

0,5ml de BaCl2 99,5ml de H2SO4 108 UFC/ml

Carto para ajuste do inculo


12/27

Preparao do inculo

bacteriano Mtodo do crescimento

Selecionar 3-4 colnias com a mesma morfologia Inocular em 3ml de caldo TSB ou Mueller-Hinton Incubar 33-35oC at atingir turvao 0,5 McFarland Se ultrapassar a turbidez ajustar com caldo TSB, Mueller-

Hinton ou soluo salina estril

Mtodo da suspenso direta de colnias Suspenso direta em meio lquido ou salina de colnias

crescidas por 16-24 horas Ajuste at atingir turvao 0,5 McFarland


13/27

Distenso do inculo Dentro de 15 minutos aps

ajuste do inculo Introduzir swab estril nasuspenso ajustada

Comprimir o swab naparede interna do tubo pararetirar o excesso do inculo

Semear na superfcie do

meio em 3 direes, semdeixar nenhuma rea semsemear

Deixar secar com astampas semi-abertas


14/27

Inculo Inadequado Inculo Adequado

Distenso do inculo


15/27

Seleo dos Antibiticos a

Testar Microrganismo isolado

Local da infeco Origem do paciente externo ambulatrio

interno hospital

Paciente dependente da via de administrao Idade do paciente quinolonas e tetraciclinas no soindicadas em pacientes peditricos

Disponibilidade no mercado local / nacional


16/27

Aplicao dos Discos Colocar no mximo 12 discos em placas de 150mm

e no mais que 5 discos em placas de 90mm Distncia entre discos e entre borda da placa de2,5-3cm

Colocar o disco e pressionar levemente com auxliode uma pina Uma vez colocado o disco, no mais remover do

lugar pois a difuso da droga imediata


17/27

Aplicao dos Discos


18/27

Medida do Halo de Inibio O dimetro do halo de inibio lido com auxlio de uma

rgua sobre o fundo da placa

Em placas de MH com sangue deve-se ter cuidado para ler azona de inibio e no a zona de hemlise

Amostras de Proteus spp. podem apresentar pequeno vudentro do halo de inibio ignorar o vu e ler do ponto ondese inicia o crescimento

Colnias pequenas dentro do halo de inibio devem serverificadas se so clones resistentes ou eventualcontaminao

Halos de inibio devem ser interpretados nas categorias

sensvel, intermedirio ou resistente, de acordo com critriosestabelecidos elo NCCLS


19/27

Medida do Halo de Inibio

Halo deleituraem mm


20/27

Medida do Halo de Inibio

Paqumetro Rgua milimetrada


21/27

Sinergismo

AntagonismoAutonomia

Sinergismo

Associaes

de Antibiticos


22/27

Mtodo do E-test Combina os princpios da difuso do

disco e da diluio

Consiste de uma fita plstico inerte,medindo 5,5mm de largura por60mm de comprimento

De um lado da fita est impressauma escala de CIM (g/ml) com umgradiente de concentrao que varia

de 0,016 a 256 g/ml ou 0,002 a 32g/ml, a depender do antimicrobiano

Pode ser utilizado para uma grande

variedade de microrganismos


23/27

Deteco de ESBL Beta-lactmico associado ao inibidor de

beta-lactamase E. colie K. pneumoniae Mtodos:

Disco aproximao Disco combinado E-test

Aumento do halo ou zonas fantasmas Reportar resistncia todas as

cefalosporinas, penicilinas e aztreonam


24/27

Deteco de ESBLDisco aproximao

3

3mm3mm

AZT

CAZ

CROCTX AMO/AC

AZT = AztreonamCRO = CeftriaxonaCAZ = CeftazidimaCTX = CefotaximaAMO/AC = Amoxicilina +cido clavulnico


25/27

Deteco de ESBL


26/27

Interpretao do AntibiogramaGnero ou espcie Resistncia a

Citrobacter amalonaticus Ampicilina

Citrobacter freundii Ampicilina, cefalotina, cefazolina

Citrobacter diversus Ampicilina

Edwardsiella tarda Colistina

Enterobacter sp. Ampicilina, cefalotina, cefazolina, betalactamicos cominibidores de betalactamases

Hafnia alvei Ampicilina, cefalotina

Klebsiella pneumonia Ampicilina

Proteus mirabilis Polimixinas, tetraciclina, nitrofurantona

Proteus vulgaris Polimixinas, ampilcilina, nitrofurantona, tetraciclina

Morganella morganii Polimixinas, ampilcilina, nitrofurantona, cefalotina

Providencia rettgeri Polimixinas, ampilcilina, nitrofurantona, tetraciclina

Providencia sp. No-

rettgeri

Polimixinas, ampilcilina, nitrofurantona,

Serratia marcescens Polimixinas, ampilcilina, nitrofurantona, cefalotina

Resistncia intrnseca apresentada por algumas espcies bacterianas


27/27

Interpretao do Antibiograma

Antimicrobianos Microrganismos

Cefalosporinas de 1 e 2 geraese aminoglicosdeos

Salmonellae Shigellaisoladas de fezes

Betalactmicos e carbapenens Staphylococcusspp. resistentes

oxacilinaCefalosporinas, aminoglicosdeos,clindamicina esulfametoxazol/trimetoprima

Enterococcusspp.

Cefalosporinas Listeriaspp.

Resultados que no devem ser liberados mesmo que a leitura noantibiograma apresente sensibilidade

Documents

162112_AULA 10 Antibiograma