2.4 Inokulasi & Isolasi.ppt

5/19/2018 2.4 Inokulasi & Isolasi.ppt

1/24

Teknologi Dan Rekayasa

Kompetensi Keahlian

Analisis Kimia


2/24

Analisis DasarMikrobiologi

By :Aam Siti Nur Rochmah,ST

SMK Negeri 13 Bandung


3/24

Analisis Dasar Mikrobiologi

Teknologi dan Rekayasa


4/24

S!"AS MKR!BA



5/24

TEORI DASAR Populasi mikroba tidak terpisah sendiri menurut jenisnya, tetapi terdiri dari

campuran berbagai macam sel

Populasi bakteri dapat diisolasi menjadi kultur murni yang terdiri dari satu jenis yangdapat dipelajari morfologi, sifat dan kemampuan biokimiawinya.

Isolasi adalah proses pengambilan/pemisahan mikroba dari suatusumber(populasi)/Sampel

Sumber ikroba ! tanah,air dan udara

etoda sampling tergantung dari tujuan analisis

Suatu lingkungan tercemar jika terkandung "akteri indikator pencemar

"akteri indikator pencemaran adalah ! E. coli, Streptococcus faecal dan Clostridiumperfringens


6/24

Syarat bakteri Indikator :

Bakteri terdapat dalam usus manusia danhe#an $erdarah panas

%apat hidup le$ih lama dari pada $akteripatogen enterik lainnya

Ke$eradaannya dapat menun&ukkantingkat polusi


7/24

Alat dan Bahan

Agar kaldu 'Nutrien agar( didalamca#an )etri

TSA dalam ca#an )etri

Agar diri*lurus dari nutrient agar Agar miring dari nutrient agar*TSA TSB dalam ta$ung Biakan murni

+arum ose mata,lengkung*sudut danose lurus Rak ta$ung "ampu spirtus atau Bunsen


8/24

Langkah Kerja ISOLASI

#. $I% Sampling air tergantung dari sumbernya, dilakukan secaraaseptis

&ntuk melakukan isolasi mikroba, #ml sampel air dituangkankedalam cawan petri kemudian ditambahkan media umum dandibiarkan padat

'i inkubasi selama *+ jam pada suhu -. 0anah

Sampling dilakukan tergantung tujuan

Sampel ditimbang # gram dilarutkan dalam 1 ml a2uades steril

'ipipet # ml dan dimasukkan kedalam cawan petri

'itambahkan media umum dan dibiarkan padat. 'i inkubasi selama *+ jam pada suhu -

.&dara

Sampling dilakukan menggunakan media yang sesuai dengantujuan analisis,di inkubasi selama *+ jam pada suhu -


9/24

N!K"AS MKR!BA



10/24

Inokulasi Mikroba

N!K"AS adalah Proses pemindahan biakan murnisecara aseptik.jika tekniknya benar maka yang tumbuh pada hasilpemindahan hanyalah organisme yang diinginkan saja dengan kata lain tidaktercemar.

Biakan murni adalah biakan yang terdiri dari satuspecies saja.Tu&uan nokulasi : 1. Untuk pembenihan atau regenerasi mikroorganisme.

2. Untuk isolasi dengan maksud memperoleh biakan murni.

3. Untuk menyimpan guna keperluan sehari-hari atau dalam waktu lama 4. Untuk mempelajari sifat-sifat pertumbuhan suatu mikroba.

TE!" #$%$!


11/24

TEORI DASAR

3arum 4se merupakan alatbantu utama pada prosesInokulasi yaitu suatujarum yang panjangnya

#5 cm pada bag &jungnyaberbentuk lingkaran mmdan terbuat dari kawat 6ihrome.

$da bentuk jarum oseyaitu bermata, lurus, sikudan kotak

7ambar jarum 4Se


12/24

Metode Inokulasi

&ada 'awan &etri (

#engan )oresan *etode garis lurus+

,ig,ag pada metoda %ektor#engan )oresan metoda "solasi

#engan apusan %putel #igalsky#engan metode 'awan Tuang

Pada edia $gar iring !#engan )oresan ig,ag

#engan )oresan ig,ag tusuk

Pada media air.


13/24

Tahaan ersiaan Media

-ara menuangkan Media pada ca#an )etri


14/24

I!OK"LASI #ADA $A%A! #ETRI

.oresan se&a&ar 'metode sektor(se dibakar sampai steril/

dinginkan.

#engan ose steril diambil biakan

bakteri/ dipulaskan pada salah

satu sisi+tepi media/ janganmenyentuh dinding &etri dish.

#engan ose steril yang lain/

pulasan itu digoreskan sejajar

sampai memenuhi permukaan

media+ menurut sektornya


15/24

)oresan sejajar melingkar0*etode isolasi

se dibakar sampai steril/dinginkan.

#engan ose steril/ biakan bakteridipulaskan pada satu sisi dari mediaseara berulang/ jangan sampaimenyentuh dinding awan.

#engan ose yang sama/ ujungpulasan tadi digoreskan sejajar padasisi yang lain setelah medianya

diputar 5.

)oresan di ulang pada tiap sisinyasampai memenuhi permukaan media/penggoresan dilakukan setelah medianyadiputar 5.



16/24

etoda sebar!%ample air atau kulturbakteri didalam mediaair diambil dengan pipetsteril sebanyak /1 ml

dimasukan padapermukaan media platetepat ditengah-tengahnya.

#engan menggunakanspatel terbuat darikaa+kawat yang sudahsteril dan dingin/ tetesanitu diratakan ke seluruh

permukaan media plate.



17/24


Metoda -a#an Tuang:%uspensi bakteri+sample diteteskan

kedalam awan petri steril

sebanyak /1 atau 1 ml seara

aseptis.

Tuangkan media padat steril yang

telah diairkan sampai menutupi

semua permukaan dasar awan

petri .

'ampur dengan memutar awan 36

kekiri 36 kekanan tunggu sampai

agarnya membeku.

&osisi awan dibalik/ inkubasi pada

suhu 375' selama 48 jam.


18/24

I!OK"LASI #ADA

MEDIA A&AR MIRI!&

Tu&uan :

Untuk memperbanyak koloni bakteriUntuk keperluan sehari-hari

Untuk menyimpan bakteri dalam waktu lama



19/24

I!OK"LASI #ADA

MEDIA A&AR MIRI!&

A. Goresan zigzag#. 'engan ose yang sudah steril

dan dingin, diambil kolonibakteri.

. 0utup tabung media dibukadengan menjepit menggunakanjari kelingking kanan, mulut

tabung dibakar dengan nyalaapi tidak berjelaga.

. 4se yang sudah berisi kolonibakteri digoreskan 8ig8ag padapermukaan media, ditengah.

. ulut tabung dibakar lagi,segera ditutup dengantutupnya.

9. 4se dibakar lagi sampai steril

B. Goresan zigzag danditusuk :

Pelaksanaan penanamannyaseperti bagian $ denganperbedaan sebagai berikut !

&rutan setelah digoreskan8ig8ag kemudian ditusukkanditengah*tengahnya # kali

ontoh !

Inokulasi pada media 0ripelSugar Iron $gar.



20/24

I!OK"LASI #ADA MEDIA

SEMI SOLID

Tu&uan:untuk identifikasi gerak bakteri

untuk menyimpan bakteri

"angkah ker&a :

!se &arum disterilkan /dinginkan0

%engan ose itu diam$ilkoloni $akteri secara aseptis

Mulut ta$ung dile#atkan

pada api, ose &arum yangada koloni $akterinyaditusukkan tegak lurus pada$agian tengah sampai dasarta$ung0

"akukan secara aseptis



21/24

I!OK"LASI

#ADA MEDIA $AIR

Tu&uan :untuk memperbanyak bakteri

untuk identifikasi

"angkah Ker&a :

4se dibakar sampai steril,dinginkan.

'engan ose yang sudah steril,diambil koloni bakteri secaraaseptis.

4se yang sudah berisi koloni

bakteri digoreskan pada dindingtabung bagian dalam sebelahatas posisi media dimiringkan.

edia ditegakkan, goresanbakteri akan teremdam cairanmedia.

:akukan secara aseptis



22/24

)engamatan:

&ada 'awan &etri9oloni bakteri diamati berdasarkan halsbb(

: ukuran ( diukurdiameternyadgn satuan mm

: ;arna ( putih/ kuning/ hijau/merah dsb.

: bentuk ( bulat/ serabut/ ry,oiddsb.

: permukaan ( datar/embung/ekung/ kasar/ halus

: sifatnya ( keruh/jernih/ kering/berlendir/ menjalar/

haemolyti/ anhaemolyti

"nokulasi dengan tujuan


23/24

Su'ber Belajar

Bi$iana 0 "ay, 124,Analisis Mikrobiologi diLaboratorium, +akarta : )0T0 Ra&a .ra5indo )ersada

)elc6ar / -han, 124,Dasar-Dasar Mikrobiologi,+akarta : )ress0

Ratna Siri 7, 123, Mikrobiologi dalam Praktek, Bogor :8akultas M)A )B0

nus Suria#iria01290Pengantar Mikrobiologi Umum0Bandung : Angkasa0

Modul Analisis Mikro$iologi Secara Mikroskopis

+o$sheet Analisis Mikro$iologi Secara Mikroskopis



24/24

Sekian

%ampai jumpa pada materi lain


Documents

2.4 Inokulasi & Isolasi.ppt