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Sistemas de Grupo SanguineoABO,Mtodos e Interpretacin,Discrepancias y resolucin.
Lic.TM. Efran Montes Hijar Hospital IV Essalud Hyo.
GRUPOS SANGUINEOS O-A-BLOS ANTIGENOS QUE LA SANGRE POSEE SON A-B QUE SE LES LLAMA AGLUTINOGENOS. TAMBIEN TENEMOS ANTICUERPOS QUE SON LLAMADOS AGLUTININAS,
ANTIGENOS Los antigenos A y B son
oligosacaridos complejos Un gen H codifica para una transferasa de fucosa Los del grupo A tienen una Nacetilgalactosamina Los del grupo B tinenen galactosa Los AB tienen ambas y los del grupo O ninguna.
REACCIONES ESPERADAS PARA ABOGlbulos RojosAnti-A Anti-B Anti-A,B Cels A1
GRUPOInterpretacin Grupo ABO
SueroCels A2 Cels B
0 4+ 0 4+
0 0 4+ 4+
0 4+ 4+ 4+
4+ 0 4+ 0
4+ 0 4+ 0
4+ 4+ 0 0
0 A B AB
ANTIGENOS A B HHEMATIES PLASMA LECHE ORINASECRECIONES SEROSAS MUCOSAS
GLUCOLIPIDOS GLUCOPROTEINAS
GRUPOS SANGUINEOS I Se
han descrito ms de 400 antgenos eritrocitarios Cada antgeno est definido por un anticuerpo especfico que reaccionan con l Existen antgenos de alta frecuencia, que no han sido identificado
SISTEMA ABH Antgenos ABH se encuentran en Hematies,
plasma, leche,secreciones,orina y mucosas La presencia de los antgenos A,B,O depende de genes allicos A, B, O. El gen H situado en un locus separado codifica la sustancia sobre la que actan los genes A y B. Estas son unas enzimas que actan como transferasas
SISTEMA ABO II El
gen H produce sustancia H
Estas enzimas(transferasas) transforman la
sustancia H en antgenos A y B
El
gen O es un alelo silencioso que no altera la estructura de la sustancia H
Los individuos que no tienen gen H (genotipo hh)
fenotipo Bombay
PRECURSOR DE TIPO IGal NaGl Unin 1,3 Gal
R
PRECURSOR DE TIPO IIGal NaGl Unin 1,4 Gal
R
H tipo IIgalNaGl
gal
H tipo Igal FucNaGl
Fuc gal 1,2 fucosiltransferasa
ANTIGENO A NaGl Gal Fuc ANTIGENO B Gal Gal Fuc NaGl Gal NaGl Gal
DETERMINACION GENETICAA
= B > 000
Genotipo
AA, A0 BB, B0 AB
Fenotipo
A
B
AB
O
GRUPOS SANGUNEOS, GENOTIPOS AGLUTINOGENOS Y AGLUTININAS
GENOTIPOS
GRUPOS SANGUNEOS
AGLUTINOGENOS
AGLUTININAS
OO OA o AA OB o BB AB
O A B AB
--A B AyB
Antina y anti-B Anti-B Anti-A ---
LOS RESULTADOS:
GRUPOS SANGUINEOS RECEPTORES
COMPATIBILIDAD
FENOTIPO BOMBAY
Fenotipo Bombay
SUBGRUPOS ABO Reactividad Diferencias Cuantitativas Cualitativas
a los antisueros
A1,
A2, Aint, Ax, Ael, etc. B3, Bx, Bel A1B, A2B
ANTICUERPOS ABO
ANTICUERPOS ABO
SISTEMA RHESUS Est constitudo por
40 antgenos distintos, 5 de ellos son importantes Existen 3 nomenclaturas: Fisher-Race, Wiener, Glicoprotena Fisher-Race plantea que se hereda 3 genes muy prximos D y d, C y c, E y e, cada gen codifica para un gen excepto el d La presencia o la ausencia del antgeno D determina si es Rh (+) o (-)
SISTEMA RHESUS II Wiener
plantea que se hereda gen de cada progenitor, y estos tendran una estructura de mosaico que comprendera un nmero variable de antgenos sanguneos. gen R1 codificara para C,D,e
El El
genr codificara para c y e, pero no para D,C ni E
Rhpositivo (85%)
Expresa el antgeno D en los Hemates
Rhnegativo (15%)
No expresa el antgeno D en los hemates ej:dCe / dce
Du Es
una variante dbil del antgeno D, poco frecuente entre los individuos caucasoides, comn en la raza negra( 22%) Los Du dan reacciones dbiles con el anti D, son detectados gracias a la prueba indirecta de la antiglobulina Du es un Rh positivo dbil pero POSITIVO
Anticuerpos del Sistema Rh Casi
siempre son IgG Su produccin es estimulada por transfusiones y por el embarazo No activan el complemento porque antgeno Rh no permite la formacin de dobletes de IgG necesarios Estos anticuerpos pueden causar reacciones transfusionales y enfermedad hemoltica del RN
Organizacin genmica del locus RHgen RHCE Rh(D) positivo 5 gen RHD 3
1
2 3
4 5 6 7
8 9 10
1
2 3
4 5 6 7
8 9 10
Rh(D) negativo
5
1
2 3
4 5 6 7
8 9 10
3
Cromosoma 1p34-36
Lima setiembre 2002
Rh(D) positivo
1 2
3 4 5 6 7
8 9 10
1 2 3
4 5 6 7
8 9 10
600 bp
4D1 600 bp
5D2
4D1 1200 bp
5D2
Rh(D) negativo
1 2 3
4 5 6 7
8 9 10
Mtodo de Arce para la tipificacin molecular del antgeno D
600 bp
4D1 1200 bp
5D2
Lima setiembre 2002
Mtodo de ArceDD+ D-
1200bp 600bp
Otros sistemas de grupoExisten otros sistemas de grupo sanguneo, como el sistema Duffy y el sistema Kell, cuyos polimorfismos han sido tambin caracterizados a nivel molecular. Se han desarrollado tcnicas de tipificacin molecular, basadas en estrategias de tipo PCR-ASRA o PCR-SSP, que ofrecen hoy en da una alternativa a las tcnicas de tipificacin clsicas mediante mtodos serolgicos.
Lima setiembre 2002
Aplicaciones prcticas de la tipificacin molecular de los antgenos eritrocitarios1.- La aplicacin de las tcnicas de Biologa Molecular en la enfermedad hemoltica del recin nacido (EHRN), permite determinar precozmente el genotipo Rh(D) fetal a partir de una muestra delquido amniticoo incluso a partir de clulas fetales presentes en la sangre perifrica materna haciendo posible el planteamiento , de una estrategia profilctica ms racional.Lima setiembre 2002
Aplicaciones prcticas de la tipificacin molecular de los antgenos eritrocitarios2.- Cuando el fenotipo resulta difcilmente interpretable, como sucede con los pacientes recientemente transfundidos, o cuando tcnicamente resulta imposible, como en el caso de los pacientes con anemia hemoltica autoinmune en los que no es factible la tipificacin serolgica.
Lima setiembre 2002
Aplicaciones prcticas de la tipificacin molecular de los antgenos eritrocitarios3.- En el estudio de individuos con fenotipo nulo para
ciertos sistemas de grupo sanguneo as como en el estudio de variantes poco frecuentes.
4.- En el seguimiento del quimerismo post-transplante de clulas precursoras hematopoyticas.
Lima setiembre 2002
El futuroLa posibilidad de generar hemates para deteccin de anticuerpos eritrocitarios utilizando antgenos recombinantes Aplicacin del conocimiento de los polimorfismos y su relacin con determinadas enfermedades Las tcnicas de microseries de DNA permitiran definir el fenotipo completo de un individuo a partir de una pequea muestra de DNALima setiembre 2002
DISCREPANCIAS DE GRUPO SANGUINEODISCREPANCIA DEL GRUPO ABO La interpretacin de las pruebas de determinacin del grupo hemtico no concuerda con las pruebas sericas.
D IS C R E P A N C IA S
DEL
S IS T E M A
A
N
P r u e b a C e l u l a ur e b a S e r i c a Po o I sn ivb el ar u s a s P oe ss iob l ue cs i o n d e l P Pr C es a R A n t i A An t iA- Bn t i - H eB m H- Ae 1m H- B m AO. C G r u p o A e 1 0 0 0 0 0 0 0 2 3 4 5 4+ 4+ 3+ 0 0 4+ 4+ 0 4+ 4+ 4+ 0 1 2 1 4 + + + + 4+ 0 2+ 2+ 0 0 4+ 4+ 4+ 4+ 4+ 0 0 0 0 2+ 0 0 0 0 0
6 0 0 2+ 7 4+ 2+ 4+ 8 1+ 1+ 1+
2+ 0 4+
DISCREPANCIAS ABO Si
Pba Globular y Serica: No Concuerdan Debe Investigarse Unidad de Sangre : No Transfundir Revisar: Historia clnica, Diagnostico, antecedentes, etc. Son Arbitrariamente clasificadas
CLASIFICACION Error
Tcnico Inherente a la clulas Inherente al suero
Grupo
I: Acs Grupo II: Ags Grupo III: Protenas Grupo IV: Mixtos
ERRORES TECNICOS Material
Sucio Contaminacin Suspensiones inadecuado rotulo y/o identificacin Hemlisis Centrifugacin
rG lme ia e ni na
Jos
PROBLEMAS : CELULAS Suspensin
G. Rojos Exceso protenas Post Transfusin Sub. grupos de A, B Expresin dbil Ags Infeccin Gram. (-) Poli aglutinacin Coombs directo
PROBLEMAS SUERO Anti-H,
Anti-A1 Acs irregulares fros Autoacs : anti-I Protenas anormales Rouleaux Expansores plasmticos Ausencia de Acs
Rouleaux.Es la alteracin y la disposicin que va adoptar los glbulos rojos en forma de moneda o en fila. A veces, es fcilmente reconocible pero en otras ocasiones los agregados son irregulables
Anormalidades en el suero que causa discrepancia