4a Jornada Científica - vhir.org · Grup de Recerca Patologia neuromuscular i mitocondrial Estudi del caràcter patogènic d’una nova mutació (m.5636T>C) en el gen mt- ... 9:51

GENESI DE NOUS TALENTS

4a Jornada CientíficaVall d’Hebron Institut de Recerca (VHIR)

2 i 3 de desembre 2010Sala d’Actes Pavelló Docent HUVH

`Vall d'HebronInstitut de Recerca

9:15 - 9:24 h 9:24 - 9:33 h 9:33 - 9:42 h 9:42 - 9:51 h 9:51 - 10:00 h 10:00 - 10:09 h 10:09 - 10:18 h 10:18 - 10:27 h

Pedro Andreu Grup de Recerca en Models animals i càncer Role Of Methylation In RAS-ERK Signal Transduction Pathway and its therapeu-tic implications Anna Barbosa Grup de Recerca en Diabetis i Metabolisme Hyperglycaemia reduces prostate tumour growth in a xenograft animal model Beatriz Bardaji Grup de Recerca CIBBIM - Nanomedicina Fisiopatologia renal Papel de la kidney androgen-regulated protein (KAP) en el desarrollo de la hipertensión y el síndrome metabólico Evelyn Cabral Grup de Recerca en Malalties infeccioses Influenza A H1N1 Infection in Pediatric Patients with Solid Organ Transplanta-tion (SOT) and Immunogenicity of Pandemic H1N1 2009 vaccine in Pediatric Patients with SOT Eva Calpe Grup de Recerca en Hematologia Experimental ZAP-70 Enhances BCR Signaling and Migration of Malignant B Lymphocytes towards CCL21 inducing CCR7 Expression via ERK1/2. Alicia Coelho Grup de Recerca en Microbiologia Caracterización de los vectores portadores del gen blaCTX-M-15 en cepas clínicas de K. pneumoniae aisladas recientemente en el área metropolitana de Barcelona Eva Colas Unitat de recerca biomèdica i oncologia translacional i pediàtrica Molecular Markers of Endometrial Carcinoma Detected in Uterine Aspirates Irene Corrales Grup de Recerca en Diagnòstic i teràpia molecular Aplicació de tecnologies optimitzades al diagnòstic molecular de la malaltia de Von Willebrand

9:00 – 9:15 h Presentació Jornada Científica

Dr. José Luis de Sancho, Gerent de l’Hospital Universitari Vall d’Hebron Dr. Joan X. Comella, Director Vall d’Hebron Institut de Recerca (VHIR) Dr. David García Dorado, President Comitè Científic Intern VHIR

Presentacions Predoctorals. Moderador: Anna Ruiz 1a part

Programa 2 de desembre de 2010

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10:27 - 10:36 h 10:36 - 10:45 h 10:45 - 11:15 h

Rosaura Esteve Grup de Recerca en Models animals i càncer Nuevo mecanismo de evasión a estrés metabólico en melanoma Nahia Ezkurdia Grup de Recerca en Malalties hepàtiques The ablation of the afferent sensitive pathway prevents sympathetic atrophy and hemodynamic alterations during portal hypertension Pausa Descans

11:15 - 11:24 h 11:24 - 11:33 h 11:33 - 11:42 h 11:42 - 11:51 h 11:51 - 12:00 h 12:00 - 12:09 h 12:09 - 12:18 h

Marta Fernández Grup de Recerca en Neuroimmunologia clínica Implicación de la vía del TLR4 y de la vía de los interferones de tipo I en la respuesta a interferon-beta en pacientes con esclerosis múltiple Alba Gómez Grup de Recerca en Teràpia Cel·lular i Gènica Caracterización fenotípica y del efecto inmunológico de las células de médula ósea murinas transducidas con un autoantígeno Alba González Grup de Recerca en Expressió gènica i càncer Study of the role of Runx1 in Glioblastoma Meritxell Guilla Grup de Recerca en Fisiologia i fisiopatologia digestiva Phosphorylation of myosin II regulatory light chain in the jejunal mucosa of diarrhea-prone irritable bowel syndrome patients Conxita Jacobs Grup de Recerca CIBBIM - Nanomedicina. Fisiopatologia renal Identificació de biomarcadors primerencs per la prevenció de la nefropatia crònica de l’empelt (chronic allograft nephropathy, CAN) amb fibrosi intersti-cial i atròfia tubular (IF/TA) Renuka Kandhaya Grup de Recerca CIBBIM - Nanomedicina. Direccionament i Alliberament Farmacològica Inflammatory cirucuit and sustained STAT1/3- IFNγ signaling acts a positive regulatory loop for mediating and maintaining TNFα induced senescence program Marta Llaurado Unitat de recerca biomèdica i oncologia translacional i pediàtrica Molecular pathways regulated by the ETV5 transcription factor in OV90 ovarian cancer cells

Presentacions Predoctorals Moderador: Joan Cordoba2a part

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12:36 - 12:45 h 12:45 - 12:54 h 12:54 - 13:03 h 13:03 - 13:12 h 13:12 - 13:21 h 13:21 - 13:30 h 13:30 - 13:39 h

Neus Marques Unitat de recerca biomèdica i oncologia translacional i pediàtrica La activación traduccional de c-Jun mediada por la proteína Prostate Tumor Overexpressed-1 (PTOV1) induce la transición epitelio-mesenquima y la invasión en cáncer de próstata Cristina Martínez Grup de Recerca en Fisiologia i fisiopatologia digestiva Mucosal mast cell-mediated tight junction impairment correlates to symp-tom severity in diarrhea-prone irritable bowel syndrome patients Anna Masià Unitat de Recerca biomèdica i oncologia translacional i pediàtrica Notch pathway inhibition significantly reduces Rhabdomyosarcoma invasive-ness and mobility in vitro Rocco Mazzolini Grup de Recerca. CIBBIM - Nanomedicina Oncologia molecular Myo1a has tumor suppressor activity in intestinal tumors Marc Oria Grup de Recerca en Malalties hepàtiques L-Ornithine phenilacetate (OP) prevents neurophysiological abnormalities and hyperammonemia in PCA rats with gastrointestinal bleeding Mireia Puig Grup de Recerca en Malalties infeccioses Diagnostic utility of plasma CMV quantitative PCR in the diagnosis of end organ CMV disease in HIV infected patients with baseline CD4+ lymphocyte counts <50 cells/µl Natalia Quintero Grup de Recerca en Microbiologia Illes de patogenicitat en soques de Escherichia Coli aïllades simultàniament d’orina i femta de dones amb infecció urinària

Presentacions Predoctorals Moderador: Diego Arango

12:18 - 12:27 h 12:27 - 12:36 h

Beatriz Lobo Grup de Recerca en Fisiologia i fisiopatologia digestiva Clinical improvement in IBS after disodium cromoglycate involves mast cell-mediated Toll-like receptor signaling downregulation.

Mª José Mansilla Grup de Recerca en Neuroimmunologia clínica Sobre-expresión de HSP-70 en pacientes con Esclerosis Múltiple remitente-recurrente

3a part

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15:30 - 15:39 h 15:39 - 15:48 h 15:48 - 15:57 h 15:57 - 16:06 h 16:06 - 16:15 h 16:15 - 16:24 h 16:24 - 16:33 h 16:33 - 16:42 h 16:42 - 16:51 h

Marina Rigau Unitat de Recerca biomèdica i oncologia translacional i pediàtrica PSGR and PCA3 as biomarkers for the detection of Prostate cancer in urine Laura Rodón Grup de Recerca en Expressió gènica i càncer PI3K facilitates the autocrine induction of TGFβ2 by TGFβ in glioblastoma Jose Antonio Sánchez Grup de Recerca en Patologia cardiocirculatòria Efectos de la substitución de conexina 43 por conexina 32 en la tolerancia a la isquemia, en la protección por precondicionamiento y en la arritmogenesis en corazones aislados de ratón Sara Sánchez Grup de Recerca en Pneumologia Mecanismos inflamatorios en el asma de origen laboral Roger Sorde Grup de Recerca en Malalties infeccioses Epidemiology and Outcome of Hospital-Acquired Catheter-Related Bacte-remia (CRB) due to Gram-Negative Bacilli (GNB) Francisco Miquel Torres Grup de Recerca en Expressió gènica i càncer Platelet derived growth factor-b and transforming growth factor-beta coop-erate in the induction of epithelial to mesenchymal transition in lung cancer cells Eva Van den Eynde Grup de Recerca en Malalties hepàtiques Efecto de los Inhibidores de la Transcriptasa Inversa del VIH sobre la activi-dad anti-VHC de la Ribavirina Maribel Velasco Grup de Recerca en Pneumologia Contenido pulmonar de amianto Ana Villar Grup de Recerca en Pneumologia Estudios de inflamación bronquial mediante métodos semi-invasivos en las neumonitis por hipersensibilidad

Presentacions Predoctorals Moderador: Josep Villanueva4a part

13:39 - 13:48 h 13:48 - 15:30 h

Jordi Riera Grup de Recerca en Sèpsia i infecció respiratòria greu Results of two years with an audio recording system for monitoring the in-hospital cardiac arrest manoeuvres in a university hospital. Improving the guidelines adherence Pausa dinar

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8:30 - 8:39 h 8:39 - 8:48 h 8:48 - 8:57 h 8:57 - 9:06 h 9:06 - 9:15 h 9:15 - 9:24 h 9:24 - 9:33 h 9:33 - 9:42 h 9:42 - 9:51 h

Andreea Ciudin Grup de Recerca en Diabetis i Metabolisme Evaluación de un método no invasivo para determinar la glucemia basado en foto-pletismografía acoplada a un sistema de redes neuronales Jaume Francisco Grup de Recerca en Patologia cardiocirculatòria Predictor role of tissue factor pathway inhibitor in the extension of myocar-dial infarction undergoing primary angioplasty Sandra Leal Grup de Recerca en Sèpsia i infecció respiratòria greu Influencia de la disfunción primaria del injerto sobre mortalidad precoz en trasplante pulmonar Ana Parra Grup de Recerca en Sèpsia i infecció respiratòria greu El recompte de CD4+ no es correlaciona amb l’evolucó del pacients amb VIH I Pneumonia Adquirida a la Comuntat (CAP) Purificación Pérez Grup de Recerca en Sèpsia i infecció respiratòria greu Altos flujos de gas en pacientes con insuficiencia cardíaca estable Anna Sabate Servei de Pediatria Estudio multicéntrico de las miocardiopatías no compactadas: característi-cas clínicas, evolutivas y pronósticas en edad pediátrica Fernando Salvador Grupo de Recerca en Malalties infeccioses Trasplante hepático de donante seropositivo para enfermedad de Chagas a receptor seronegativo Mónica Sánchez Grup de Recerca en Pneumologia Supervivència dels malalts amb Esclerosi Lateral Amiotròfica (ELA) tractats amb suport ventilatori domiciliari Albert Alonso Tello Grup de Recerca en Patologia cardiocirculatòria Myocardial area at risk quantification: comparison of coronary angiographic scores and SPECT

Presentacions Residents Moderador: Benito Almirante1a part

Programa 3 de desembre de 2010

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10:00 - 10:09 h 10:09 - 10:18 h 10:18 - 10:27 h 10:27 - 10:36 h 10:36 - 10:45 h 10:45 - 10.54 h 12:35 - 12:50 h 13:00 h

Ana González Grup de Recerca en Fisiologia i fisiopatologia digestiva Long-term crowding stress modifies intestinal lymphocyte profile and in-duces mast cell-dependent barrier dysfunction Dolores Rodríguez Grupo de Recerca en Malalties infeccioses Clostridium difficile Associated Disease (CDAD): Results from a Population-Based Surveillance in Barcelona, Spain. Nicolás Fissolo Grupo de Recerca en Neuroimmunologia clínica El tratamiento con vacunas de ADN que codifican para MOG previene y mejora la encefalomielitis autoinmune experimental Mª Mar Coll Grup de Recerca en Malalties hepàtiques. The oral administration of a norepinephrine precursor, droxidopa, greatly improves hemodynamic alterations and diuresis of portal Hypertensive rats Tomas Pinós Grup de Recerca Patologia neuromuscular i mitocondrial Estudi del caràcter patogènic d’una nova mutació (m.5636T>C) en el gen mt-tRNAAla en un pacient amb oftalmoplègia externa progressiva Judit Anido Grup de Recerca en Expressió gènica i càncer TGFβ receptor inhibitors target the CD44high/Id1high glioma-initiating cell population in human glioblastoma Lliurament de premis 4a Jornada Científica VHIR 14a Conferència Anual HUVH. Lethal reperfusion injury: from mitochon-dria to man. Prof. Michel Ovize, Director de la Unitat Cardioprotecció de l’Institut national de la santé et de la recherche médicale (INSERM)

9:51 - 10:00 h Pausa descans

Presentacions Postdoctorals Moderador: Cristina Hernández Pascual 2a part

14a Conferència Anual HUVH

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INDEX

PRESENTACIONS PREDOCTORALS 9:15 - 9:24h Pedro Andreu. Grup de Recerca en Models animals i càncer. Role Of Methylation In RAS-ERK Signal Transduction Pathway and its therapeutic implications .......................................... 9:24 - 9:33h Anna Barbosa. Grup de Recerca en Diabetis i Metabolisme. Hyperglycaemia reduces prostate tumour growth in a xenograft animal model .................................................................. 9:33 - 9:42h Beatriz Bardaji. Grup de Recerca CIBBIM - Nanomedicina Fisiopatologia renal Papel de la kidney androgen-regulated protein (KAP) en el desarrollo de la hipertensión y el síndrome metabólico ........... 9:42 - 9:51h Evelyn Cabral. Grup de Recerca en Malalties infeccioses Therapeutic Drug Monitoring (TDM) of Voriconazole (VOR) in the Treatment of Invasive Fungal Infection (IFI) .................. 9:51 - 10:00h Eva Calpe. Grup de Recerca en Hematologia Experimental ZAP-70 Enhances BCR Signaling and Migration of Malignant B Lymphocytes towards CCL21 inducing CCR7 Expression via ERK1/2 .............................................................................................................................................................................. 10:00 - 10:09h Alicia Coelho. Grup de Recerca en Microbiologia Caracterización de los vectores portadores del gen blaCTX-M-15 en cepas clínicas de K. pneumoniae aisladas reciente-mente en el área metropolitana de Barcelona ...................................................................................................................... 10:09 - 10:18h Eva Colas. Unitat de recerca biomèdica i oncologia translacional i pediàtrica Molecular Markers of Endometrial Carcinoma Detected in Uterine Aspirates ...................................................................... 10:18 - 10:27h Irene Corrales. Grup de Recerca en Diagnòstic i teràpia molecular Aplicació de tecnologies optimitzades al diagnòstic molecular de la malaltia de Von Willebrand ........................................ 10:27 - 10:36h Rosaura Esteve. Grup de Recerca en Models animals i càncer Nuevo mecanismo de evasión a estrés metabólico en melanoma ........................................................................................ 10:36 - 10:45h Nahia Ezkurdia. Grup de Recerca en Malalties hepàtiques The ablation of the afferent sensitive pathway prevents sympathetic atrophy and hemodynamic alterations during por-tal hypertension ..................................................................................................................................................................... 11:15 - 11:24h Marta Fernández. Grup de Recerca en Neuroimmunologia clínica Implicación de la vía del TLR4 y de la vía de los interferones de tipo I en la respuesta a interferon-beta en pacientes con esclerosis múltiple .................................................................................................................................................................. 11:24 - 11:33h Alba Gómez. Grup de Recerca en Teràpia Cel·lular i Gènica Caracterización fenotípica y del efecto inmunológico de las células de médula ósea murinas transducidas con un au-toantígeno .................................................................................................................................................................... 11:33 - 11:42h Alba González. Grup de Recerca en Expressió gènica i càncer Study of the role of Runx1 in Glioblastoma ........................................................................................................................... 11:42 - 11:51h Meritxell Guilla. Grup de Recerca en Fisiologia i fisiopatologia digestiva Phosphorylation of myosin II regulatory light chain in the jejunal mucosa of diarrhea-prone irritable bowel syndrome patients .................................................................................................................................................................................. 11:51 - 12:00h Conxita Jacobs. Grup de Recerca CIBBIM - Nanomedicina. Fisiopatologia renal Identificació de biomarcadors primerencs per la prevenció de la nefropatia crònica de l’empelt (chronic allograft neph-ropathy, CAN) amb fibrosi intersticial i atròfia tubular (IF/TA) .............................................................................................. 12:00 - 12:09h Renuka Kandhaya. Grup de Recerca CIBBIM - Nanomedicina. Direccionament i Alliberament Farma-cològica Inflammatory cirucuit and sustained STAT1/3- IFNγ signaling acts a positive regulatory loop for mediating and maintain-ing TNFα induced senescence program ................................................................................................................................ 12:09 - 12:18h Marta Llaurado. Unitat de recerca biomèdica i oncologia translacional i pediàtrica Molecular pathways regulated by the ETV5 transcription factor in OV90 ovarian cancer cells ............................................

12:18 - 12:27h Beatriz Lobo. Grup de Recerca en Fisiologia i fisiopatologia digestiva Clinical improvement in IBS after disodium cromoglycate involves mast cell-mediated Toll-like receptor signaling down-regulation ..............................................................................................................................................................................

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INDEX

PRESENTACIONS PREDOCTORALS 12:27 - 12:36h Mª José Mansilla. Grup de Recerca en Neuroimmunologia clínica Sobre-expresión de HSP-70 en pacientes con Esclerosis Múltiple remitente-recurrente ....................................................... 12:36 - 12:45h Neus Marques. Unitat de recerca biomèdica i oncologia translacional i pediàtrica La activación traduccional de c-Jun mediada por la proteína Prostate Tumor Overexpressed-1 (PTOV1) induce la tran-sición epitelio-mesenquima y la invasión en cáncer de próstata ........................................................................................... 12:45 - 12:54h Cristina Martínez. Grup de Recerca en Fisiologia i fisiopatologia digestiva Mucosal mast cell-mediated tight junction impairment correlates to symptom severity in diarrhea-prone irritable bowel syndrome patients ................................................................................................................................................................. 12:54 - 13:03h Anna Masià. Unitat de Recerca biomèdica i oncologia translacional i pediàtrica Notch pathway inhibition significantly reduces Rhabdomyosarcoma invasiveness and mobility in vitro .............................. 13:03 - 13:12h Rocco Mazzolini. Grup de Recerca. CIBBIM - Nanomedicina Oncologia molecular Myo1a has tumor suppressor activity in intestinal tumors .................................................................................................... 13:12 - 13:21h Marc Oria. Grup de Recerca en Malalties hepàtiques L-Ornithine phenilacetate (OP) prevents neurophysiological abnormalities and hyperammonemia in PCA rats with gas-trointestinal bleeding ............................................................................................................................................................. 13:21 - 13:30h Mireia Puig. Grup de Recerca en Malalties infeccioses IDiagnostic utility of plasma CMV quantitative PCR in the diagnosis of end organ CMV disease in HIV infected patients with baseline CD4+ lymphocyte counts < 50 cells/ul ............................................................................................................. 13:30 - 13:39h Natalia Quintero. Grup de Recerca en Microbiologia Illes de patogenicitat en soques de Escherichia Coli aïllades simultàniament d’orina i femta de dones amb infecció ur-inària ......................................................................................................................................................................................

13:39 - 13:48h Jordi Riera. Grup de Recerca en Sèpsia i infecció respiratòria greu Results of two years with an audio recording system for monitoring the in-hospital cardiac arrest manoeuvres in a uni-versity hospital. Improving the guidelines adherence ...........................................................................................................

15:30 - 15:39h Marina Rigau. Unitat de Recerca biomèdica i oncologia translacional i pediàtrica PSGR and PCA3 as biomarkers for the detection of Prostate cancer in urine ........................................................................ 15:39 - 15:48h Laura Rodón. Grup de Recerca en Expressió gènica i càncer PI3K facilitates the autocrine induction of TGFβ2 by TGFβ in glioblastoma .......................................................................... 15:48 - 15:57h Jose Antonio Sánchez. Grup de Recerca en Patologia cardio-circulàtoria Efectos de la substitución de conexina 43 por conexina 32 en la tolerancia a la isquemia, en la protección por precondi-cionamiento y en la arritmogenesis en corazones aislados de ratón .................................................................................... 15:57 - 16:06h Sara Sánchez. Grup de Recerca en Pneumologia Mecanismos inflamatorios en el asma de origen laboral ...................................................................................................... 16:06 - 16:15h Roger Sorde. Grup de Recerca en Malalties infeccioses Epidemiology and Outcome of Hospital-Acquired Catheter-Related Bacte-remia (CRB) due to Gram-Negative Bacilli (GNB) ..................................................................................................................................................................................... 16:15 - 16:24h Francisco Miquel Torres. Grup de Recerca en Expressió gènica i càncer Platelet derived growth factor-b and transforming growth factor-beta cooperate in the induction of epithelial to mesen-chymal transition in lung cancer cells .................................................................................................................................... 16:24 - 16:33h Eva Van den Eynde. Grup de Recerca en Malalties hepàtiques La co-administración de Abacavir no interfiere con la actividad antiviral de la Ribavirina en un modelo de replicación in vitro del VHC ..........................................................................................................................................................................

16:33 - 16:42h Maribel Velasco. Grup de Recerca en Pneumologia Contenido pulmonar de amianto ........................................................................................................................................... 16:42 - 16:51h Ana Villar. Grup de Recerca en Pneumologia Estudios de inflamación bronquial mediante métodos semi-invasivos en las neumonitis por hipersensibilidad ...................

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PRESENTACIONS RESIDENTS 8:30 - 8:39h Andreea Ciudin. Grup de Recerca en Diabetis i Metabolisme Evaluación de un método no invasivo para determinar la glucemia basado en foto-pletismografía acoplada a un sistema de redes neuronales ............................................................................................................................................................... 8:39 - 8:48h Jaume Francisco. Grup de Recerca en Patologia cardiocirculatòria Predictor role of tissue factor pathway inhibitor in the extension of myocardial infarction undergoing primary angi-oplasty ................................................................................................................................................................................... 8:48 - 8:57h Sandra Leal. Grup de Recerca en Sèpsia i infecció respiratòria greu Influencia de la disfunción primaria del injerto sobre mortalidad precoz en trasplante pulmonar ....................................... 8:57 - 9:06h Ana Parra. Grup de Recerca en Sèpsia i infecció respiratòria greu El recompte de CD4+ no es correlaciona amb l’evolucó del pacients amb VIH I Pneumonia Adquirida a la Comuntat (CAP) 9:06 - 9:15h Purificación Pérez. Grup de Recerca en Sèpsia i infecció respiratòria greu Altos flujos de gas en pacientes con insuficiencia cardíaca estable ....................................................................................... 9:15 - 9:24h Anna Sabate. Servei de Pediatria Estudio multicéntrico de las miocardiopatías no compactadas: características clínicas, evolutivas y pronósticas en edad pediátrica ............................................................................................................................................................................... 9:24 - 9:33h Fernando Salvador. Grupo de Recerca en Malalties infeccioses Trasplante hepático de donante seropositivo para enfermedad de Chagas a receptor seronegativo ...................................

9:33 - 9:42h Mónica Sánchez. Grup de Recerca en Pneumologia Supervivència dels malalts amb Esclerosi Lateral Amiotròfica (ELA) tractats amb suport ventilatori domiciliari ................. 9:42 - 9:51h Albert Alonso Tello. Grup de Recerca en Patologia cardiocirculatòria Myocardial area at risk quantification: comparison of coronary angiographic scores and SPECT ........................................

PRESENTACIONS POSTDOCTORALS 10:00 - 10:09h Ana González. Grup de Recerca en Fisiologia i fisiopatologia digestiva Long-term crowding stress modifies intestinal lymphocyte profile and induces mast cell-dependent barrier dysfunction ... 10:09 - 10:18h Dolores Rodríguez. Grupo de Recerca en Malalties infeccioses Clostridium difficile Associated Disease (CDAD): Results from a Population-Based Surveillance in Barcelona, Spain ........... 10:18 - 10:27h Nicolás Fissolo. Grupo de Recerca en Neuroimmunologia clínica El tratamiento con vacunas de ADN que codifican para MOG previene y mejora la encefalomielitis autoinmune experi-mental .................................................................................................................................................................................... 10:27 - 10:36h Mª Mar Coll. Grup de Recerca en Malalties hepàtiques. The oral administration of a norepinephrine precursor, droxidopa, greatly improves hemodynamic alterations and diure-sis of portal Hypertensive rats ............................................................................................................................................... 10:36 - 10:45h Tomas Pinós. Grup de Recerca Patologia neuromuscular i mitocondrial Estudi del caràcter patogènic d’una nova mutació (m.5636T>C) en el gen mt-tRNAAla en un pacient amb oftalmoplègia externa progressiva ............................................................................................................................................................... 10:45 - 10:54h Judit Anido. Grup de Recerca en Expressió gènica i càncer TGFβ receptor inhibitors target the CD44high/Id1high glioma-initiating cell population in human glioblastoma ................

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ABSTRACTS

Pedro Andreu. Grup de Recerca en Models animals i càncer Role Of Methylation In RAS-ERK Signal Transduction Pathway and its therapeutic implications

9:15- 9:24h

Investigador principal: Juan A. Recio Conde Otros participantes: Carlos de Torre-Minguela, Marta López, Rosaura Esteve Background: Several genetic studies have shown that the genomic region 9p21-22 is homozygously deleted in melanoma, removing important genes as MTAP or CDKN2A. Recently it´s been reported that lost of MTAP can be by itself a risk factor in melanoma. MTAP is an enzyme that controls the levels of Methylthioadenosine (MTA) a nucle-oside that inhibits methylation reactions within the cell.

Objectives: Taking into account the newly described relevance of the lost of MTAP in melanoma, we have tried to asses the role of methylation process in the development of melanoma, and how this post-translational modification can affect to the activity of one of the main pathway implicated in melanoma tumoral growth, the RAS-ERK pathway.

Methods: We have performed a number of in vitro assays in order to underscore the role of methylation in signal transduction pathways. Using different genetics approaches we identified the kind of methylation process and where is focused within the RAS pathway. By using several molecular biology techniques we identified the target of the methylation process and how this mechanism is affecting the total activity of the pathway. Finally, to investigate the therapeutic potential of MTA we performed in vitro proliferation and viability assays using different mouse and hu-man melanoma cell lines.

Results: Our experiments have shown that there is a non-described-before methylation process focused on the RAS-ERK pathway, and we proof that this process has a key role into modulating the total activity of this MAPK signaling cascade and has deep implications on cell behavior. Our in vivo results show that MTA inhibits cell proliferation and tumoral growth.

Conclusions: We describe a new mechanism based on methylation and focused on the RAS-ERK pathway that is able to modulate its activity and therefore cellular fate, and we present a new therapeutic approach to the use of MTA, which is able to inhibit cellular proliferation and tumoral growth

Contribution to the Project and Clinical Implications When I came to the lab four years ago the project was barely started and very little work was done. The only thing clear was the fact that inhibition of methylation reactions by MTA changed ERK phosphorylation status. Since I got involved in the project, we have described the methylation mechanism in its whole extension, we have identify the methyltransferase protein and the target of the process within the RAS pathway, we have identify the residue that is methylated and we show for very first time how methylation reactions can not only modify MAPK´s activity but switch cellular fate. Importantly, we have provided a new therapeutic approach into melanoma treatment: MTA is a natural occurring nucleoside non-toxic at high rates. We have proofed that MTA inhibits cell proliferation and viability of melanoma cell lines and it barely has effects on normal cells. In our in vivo study, treatment of mice’s melanoma tumors with MTA inhibited tumoral growth in a very significant way, revealing a new potential of this natural drug for melanoma treatment.

List of Publications Derived From This Project

- Methylthioadenosine (MTA) inhibits melanoma cell proliferation and in vivo tumor growth. Andreu-Pérez P, Hernan-dez-Losa J, Moliné T, Gil R, Grueso J, Pujol A, Cortés J, Avila MA, Recio JA. BMC Cancer. 2010 Jun 8;10:265.

- Role of methylation in RAS-ERK signal transduction pathways. Andreu-Pérez P, de Torre-Minguela C, Esteve-Puig R, López-Fauqued M, Merlino G; Matias A, Recio JA. Science Signaling 2010. (Article under referees consideration)

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ABSTRACTS

Anna Barbosa. Grup de Recerca en Diabetis i Metabolisme Hyperglycaemia reduces prostate tumour growth in a xenograft animal model

9:24- 9:33h

Investigador principal: Dr. Rafael Simó Investigadors participants en el projecte: Dra. Francina Munell, Dr. David Martinez Selva, Dra. Cristina Hernández.

Objective: The aim of this study was to elucidate why diabetic patients are protected from prostate cancer by using a model of human prostate cancer xenograft (PAC120).

Material and methods: Athymic swiss mice were housed in the SPF of the Animal Facility Laboratories of the IRVH. Prostate tumours were grafted subcutaneously and tumour growth was measured once a week. Mice were divided in three groups: a) mice treated with 6 mg of Streptozotocin (STZ) intraperitoneally, one week before the tumour was grafted; b) mice treated with STZ after the tumour implantation, and c) mice treated with vehicle (control group). Tissues were collected and fixed in formalin. Immunohistochemistry was performed using an anti androgen receptor (AR) and antihuman cytokeratin (CK).

Results: STZ treated mice before and after tumour implantation showed a decrease in tumour growth compared to control group (group C), being this effect more evident in group A. Hyperglycemia caused a massive necrosis in epi-thelial cells (CK positive) of the central part of the tumor and the loss of AR staining in necrotic cells as well as some peripheral epithelial cells.

Conclusions: hyperglycaemia shows protective effect against prostate cancer growth favouring necrosis of AR positive epithelial cells and reducing the

Beatriz Bardaji. Grup de Recerca CIBBIM- Nanomedicina Fisiopatologia renal Papel de la kidney androgen-regulated protein (KAP) en el desarrollo de la hiperten-sión y el síndrome metabólico

9:33- 9:42h

Investigadora principal: Dra. Anna Meseguer Navarro Investigadores participantes en el proyecto: Dra. Anna Meseguer Navarro, Beatriz Bardají de Quixano, Antonio Cue-vas Alcalá, Conxita Jacobs Cachá, Dr. Joan Lopez Hellín, Dr. Pep Villena

El gen de la KAP está expresado y regulado por andrógenos en túbulo proximal renal. La función de la proteína es desconocida. Animales transgénicos con sobreexpresión de KAP en riñón, manifiestan alteraciones cardiovasculares como hipertensión, glomerulosclerosis, glucosuria y proteinuria.

Algunas de las características del modelo transgénico encajan con signos definidos en el síndrome cardiometabólico, cuya incidencia va en aumento.

Objetivos:

1. Implicación de KAP en el síndrome metabólico en ratones controles y transgénicos 2. Análisis de los resultados obtenidos en sistemas celulares de túbulo proximal renal murino con expresión contro-lada de KAP

3. Determinación de los efectos de KAP en sistemas celulares murinos y humanos de distinto origen

Materiales y métodos:

Se alimentan ratones controles y transgénicos con dieta control o rica en grasa (4 grupos).

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Determinación del peso semanal de los ratones y los diferentes órganos en el momento del sacrificio; presión arte-rial, tests de tolerancia a glucosa e insulina y lípidos en suero mensuales. Histopatología de hígado y riñón y análisis de la expresión de genes seleccionados en estos tejidos.

Análisis en células renales transfectadas establemente con KAP y efecto de KAP en células humanas renales y hepáti-cas.

Resultados: El transgén por sí sólo no influye en la resistencia a la insulina ni en la aparición de obesidad, sin embra-go, al introducir la dieta rica en grasa, la presencia del transgén disminuye los efectos nocivos de esta dieta.

Conclusiones: La KAP interfiere en la aparición del síndrome metabólico en nuestro modelo de ratón transgénico alimentado con dieta rica grasa.

Evelyn Cabral. Grup de Recerca en Malalties infeccioses Influenza A H1N1 Infection in Pediatric Patients with Solid Organ Transplantation (SOT) and Immunogenicity of Pandemic H1N1 2009 vaccine in Pediatric Patients with SOT

9:42- 9:51h

E. CABRAL 1, J. GAVALDÀ1, E. ALONSO 2, J. QUINTERO 1, R. VILALTA 1, O. LEN 1, M. LEGARDA 1, A. ALONSO 2, M. NAVARRO 2, M. LÓPEZ-SANTAMARÍA 2, J. NIETO 1, P. JARA 2, R. CHARCO 1, A. PAHISSA 1;

1 Hosp. Univ. Vall d´Hebron, Barcelona, Spain, 2 Hosp. Univ. La Paz, Madrid, Spain. Spanish Network of Research in Infectious Diseases (REIPI)

Background: To analyze the clinical characteristics and outcome of pediatric recipients of liver or kidney allograft with Influenza A H1N1 infection. Children who received the pandemic Influenza H1N1 2009 vaccine were recruited from Hospital Universitari Vall d´Hebron to assess its immunogenicity. Methods: The diagnosis was made by nasal swabs (RT-PCR real-time ProFlu plus (ProFlu +) (Prodesse, Waukesha, WI). Retrospective chart review of pediatric SOT recipients infected by Influenza A H1N1 virus, attended in the period June 2009 - January 2010.

Children, who received pandemic vaccine (inactivated, adjuvanted,influenza A/California/7/2009 (H1N1)- Novartis Pandemic Influenza vaccine, Focetria® ), were recruited from Hospital Universitari Vall d´Hebron during November 2009 to asses the vaccine immunogenicity. Results: 49 patients were diagnosed (32 with liver transplant, 14 renal transplantation, three hepato-renal transplan-tation). Comorbidities: 12/49 (24.5%) chronic dysfunction allograft, 13 (27.1%) DNA EBV (RT-PCR) positive more three months. Immunosuppressive therapy: Double 26 (53%) patients, triple 19 (38.7%) patients. Drugs: tacrolimus (35), cyclosporine (8), mycophenolate (25), everolimus (4), rapamycin (2). Four patients were diagnosed with pneumonia (4/49 8.2%) and 45 Upper Respiratory Infection (URI) (45/49 91.8%). Seventeen (34.7%) patients required hospitali-zation. The most frequent symptoms were fever > 38ºC (47/49, 95.9%), rhinorrhea (36/49, 73.5%), cough (32/49, 65.3%). Six patients (12%) had neutropenia (CAN <800). Three patients with pneumonia requiring mechanical ventila-tion for respiratory failure (P02 <60 mmHg). None of the patients with pneumonia died in relation to it. All episodes of URI had good clinical evolution. Graft rejection episodes have not been established during or after the episode of viral infection. Seventeen children with a median age of 8.2 years were vaccinated. Serum samples were collected from all of them. Fifteen (88.2%) of 17 children demonstrated seroconversion.

Conclusions: The outcome of infection by H1N1 influenza viruses in this patient population has usually followed a benign course. The incidence of pneumonia has been relatively low, but with a serious development. Oseltamivir treatment was well tolerated. There has been no mortality associated with influenza in this cohort.

The immunogenicity data suggest that the pandemic H1N1 2009 vaccine can induce useful protective immune re-sponses in children with SOT.

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Eva Calpe. Grup de Recerca en Hematologia Experimental ZAP-70 Enhances BCR Signaling and Migration of Malignant B Lymphocytes towards CCL21 inducing CCR7 Expression via ERK1/2

9:51- 10:00h

Investigador principal: Francesc Bosch Investigadors participants en el projecte: Eva Calpe, Carles Codony, Maria Joao Baptista, Pau Abrisqueta, Olga Sala-mero, Pere Barba, Mercedes Gironella, Marta Crespo i Francesc Bosch.

Objectives: ZAP-70 expression in Chronic Lymphocytic Leukemia (CLL) correlates with adverse prognosis and ag-gressive characteristics of the cells. To investigate the influence of ZAP-70 in the clinical outcome of CLL patients, we analyzed the functional consequences of ZAP-70 ectopic expression in B-cells.

Material and methods: B-cell lines were stably transfected with a ZAP-70 expressing vector (pEGFP-N2ZAP). Western Blot was used to analyze protein expression and phosphorylation after IgM, IgD and CCR7 stimulation. Flow cytome-try was used for BCR internalization, chemotaxis assay, receptors expression and calcium mobilization. CLL cells were obtained from blood by Ficoll gradient. ZAP-70 mobilization and BCR internalization was further analyzed by confocal microscopy. Akt and ERK1/2 were inhibited using Ly294002 and PD98059 respectively.

Results: BCR stimulation through IgM but not IgD induced ZAP-70 phosphorylation and mobilization to the mem-brane, which in turn enhanced signaling through Akt and ERK1/2 kinases. ZAP-70 delayed IgM and CD79b internaliza-tion, thus allowing a more sustained signaling. ZAP-70 upregulated CCR7 expression in an ERK1/2-dependent manner. This enhanced signaling and migration upon stimulation with CCL21 chemokine. ZAP-70 and CCR7 expression were correlated in primary CLL samples.

Conclusions: ZAP-70 expression enhanced BCR signaling and CCR7 expression via ERK1/2 giving the cells the ability to better respond and migrate towards CCL21, expressed in secondary lymphoid organs where cells receive proliferative and survival stimulus. These results give further insight into the role of ZAP-70 protein in the aggressiveness of CLL cases with an increased expression of ZAP-70.

Contribució al projecte “ZAP-70 Enhances BCR Signaling and Migration of Malignant B Lymphocytes towards CCL21 inducing CCR7 Expression via ERK1/2” de l’estudiant predoctoral Eva Calpe:

Generació de les diverses línies estables i l’estudi dels subseqüents efectes de l’expressió de ZAP-70: senyalització, internalització del BCR, mobilització de calci, expressió de receptors, migració cel·lular, inhibicions de kinases i l’estudi en pacients de Leucèmia Limfàtica Crònica (LLC). Les implicacions clíniques d’aquest estudi s’adreçarien a la utilització de teràpies dirigides contra CCR7 i ZAP-70 present a les cèl·lules de LLC.

Publicacions derivades: Articles derivats del treball d’investigació en fase d’escriptura.

Alicia Coelho. Grup de Recerca en Microbiologia Caracterización de los vectores portadores del gen blaCTX-M-15 en cepas clínicas de K.pneumoniae aisladas recientemente en el área metropolitana de Barcelona

10:00- 10:09h

Investigador principal: Prof. Guillem Prats Investigadores participantes: Juan-José González-López, María Nieves, Larrosa, Rosa Bartolomé, J. Natalia Quintero-Zarate

Resumen del proyecto: Sorprendentemente, a pesar de que la difusión de multirresistencias mediante plásmidos ha sido ampliamente estudiada, todavía no se han identificado los factores que condicionan la especificidad y estabili-dad de los plásmidos portadores de genes de resistencia en sus huéspedes bacterianos. Con respecto a las cepas de K. pneumoniae multirresistentes productoras de la β-lactamasa CTX-M-15, nuestro grupo ha caracterizado los vec-tores portadores del gene (blaCTX-M-15) que codifica esa enzima para identificar los factores que condicionan su es-tabilidad. El contexto genético de blaCTX-M-15 se ha caracterizado en 37 aislados clínicos de K.pneumoniae mediante las técnicas de PCR-based replicon typing, PFGE, Southern Blot y pruebas de estabilidad estándar para plásmidos. Los resultados han revelado que los 37 aislados pertenecen a siete diferentes genotipos (ST). En esas cepas, blaCTX-M-15 se asocia con replicones IncFII, IncFIIk e IncR, los dos últimos descritos en este trabajo por primera vez asociados a blaCTX-M-15. Además, blaCTX-M-15 se ha encontrado integrado en el cromosoma de 12 aislados del ST1.

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ABSTRACTS

Esta heterogeneidad, no encontrada en Escherichia coli, refleja una gran movilidad que podría facilitar la estabiliza-ción del gen en K. pneumoniae. Las pruebas de estabilidad de los plásmidos han revelado diferencias significativas entre E. coli y K. pneumoniae, en particular para el plásmido FIIK, inestable en E. coli pero muy estable en K. pneumo-niae. Las pruebas realizadas con los correspondientes replicones clonados han demostrado variaciones significativas en el nivel de estabilidad de los plásmidos en función del tipo de replicón y del huésped bacteriano. En conclusión, hemos hallado un contexto genético asociado a blaCTX-M-15 en K. pneumoniae diferente al descrito en E. coli. Las variaciones de estabilidad observadas en este estudio proporcionan grandes perspectivas para la comprensión de la estabilidad y posterior difusión de los plásmidos portadores de genes de resistencia a antibióticos.

Contribución e implicación clínica: En el contexto del incremento de la difusión de bacterias multirresistentes, este estudio evalúa la relación intrínseca entre un gen de resistencia, su vector genético y su huésped bacteriano. Este trabajo aporta conocimientos sobre los factores que incrementan la estabilidad entre el vector y la bacteria, así que sobre la difusión de dichos elementos, lo que es imprescindible para poder anticipar el comportamiento evolutivo de la resistencia. Por estas razones, me dediqué con gran interés a este estudio a tiempo completo.

Lista de las publicaciones derivadas de este trabajo

- Coelho A, Mirelis B, Alonso-Tarrés C et al. Detection of three stable genetic clones of CTX-M-15-producing Klebsiella pneumoniae in the Barcelona metropolitan area, Spain. J Antimicrob Chemother 2009; 64(4): 862-4.

- Coelho A, González López JJ, Miró E et al. Genetic Characterization of the CTX-M-15-encoding Gene in Klebsiella pneumoniae Strains from the Barcelona Metropolitan Area: Plasmid Diversity and Chromosomal Integration. Int J Antimicrob Agents 2010; 36: 73-8.T1.

Eva Colas. Unitat de recerca biomèdica i oncologia translacional i pediàtrica Molecular Markers of Endometrial Carcinoma Detected in Uterine Aspirates

10:09- 10:18h

Investigador principal: Dr. Jaume Reventós i Dr. Miguel Abal

Investigadors participants en el projecte: Cristina Perez, Silvia Cabrera-Diaz, Nuria Pedrola, Marta Monge, Josep Castellvi, Fernando Eyzaguirre, Jesus Gregorio, Anna Ruiz, Rafael Lopez-Lopez, Ramon Carreras, Jordi Xercavins, Alicia Ortega, Elisabet Rosell, Andreas Doll, Antonio Gil-Moreno

Objectives: Although endometrial cancer is usually detected in its initial stages, a 20% of the patients present ad-vanced disease. Diagnosis includes biopsy and trans-vaginal ultrasound, with concluding pathology examination. To date no characterized molecular marker has been validated for its diagnosis. New methods for prognosis and classifi-cation of endometrial cancer are needed to combat this deadly disease. We aimed to identify new molecular markers of endometrial carcinoma and to evaluate their validity on endometrial aspirates.

Methods: Microarray gene expression screening on 52 carcinoma samples and series of RTqPCR validation on 19 paired carcinomas and normal tissue samples, and on 50 carcinoma and non-carcinoma uterine aspirates were performed to identify and validate potential biomarkers of endometrial carcinoma. Candidate markers were further confirmed at protein level.

Results: We identified ACAA1, AP1M2, CGN, DDR1, EPS8L2, FASTKD1, GMIP, IKBKE, P2RX4, P4HB, PHKG2, PPFIBP2, PPP1R16A, RASSF7, RNF183, SIRT6, TJP3, EFEMP2, SOCS2, and DCN as differentially expressed in control samples as compared to samples from patients having endometrial cancer. Furthermore, we observed that the differential expression of these biomarkers in primary endometrial cancer tissue is correlated to their expression level in uterine fluid samples as compared to control values. Finally, these biomarkers significantly identified endometrial carcinoma with AUROC values ranging from 0.74 to 0.95 in uterine aspirates.

Conclusion. We present the discovery of molecular biomarkers of endometrial carcinoma and describe their utility in uterine aspirates. These findings represent the basis for the development of a highly sensitive and specific minimally invasive method for screening endometrial carcinomas. 0; 36: 73-8.T1.

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Irene Corrales. Grup de Recerca en Diagnòstic i teràpia molecular Aplicació de tecnologies optimitzades al diagnòstic molecular de la malaltia de von willebrandof Endometrial Carcinoma Detected in Uterine Aspirates

10:18- 10:27h

Autors: Irene Corrales1, Lorena Ramírez1, Júlia Ayats2, Carme Altisent2, Rafael Parra1,2, Francisco Vidal1.

Grup: 1 Unitat de Diagnòstic i Teràpia Molecular, Banc de Sang i Teixits, Barcelona. 2 Unitat d’Hemofília, Hospital General Vall d’Hebron, Barcelona.

Abstract: La malaltia de von Willebrand (VWD) és la coagulopatia congènita més freqüent, però les seves dificultats diagnòstiques i la complexitat del gen del Factor de von Willebrand (VWF) fan que la seqüenciació no s’hagi consid-erat el mètode de referència per al seu diagnòstic. Per facilitar l’anàlisi genètic de la VWD, s’ha dissenyat un procedi-ment simplificat, basat en la seqüenciació complerta del gen, que s’ha utilitzat per a identificar la mutació en un total de 40 famílies i demostra la seva validesa com a mètode rutinari de diagnòstic molecular. Paral·lelament, s’ha adaptat el procediment a les noves plataformes de seqüenciació massiva que permetran l’anàlisi simultània d’un gran nombre de mostres de pacients i familiars de manera més econòmica i ràpida que per seqüenciació tradicional. A més, per tal d’estudiar l’efecte de les mutacions identificades en potencials llocs d’splicing, s’han desenvolupat estudis a nivell d’RNA en limfòcits i plaquetes, el que ens ha permès observar com aquestes mutacions poden produir la pèrdua d’exons o activar llocs alternatius d’splicing. Per compilar tota aquesta informació i facilitar la seva difusió, s’ha dis-senyat una pàgina web (http://www.vwf.hemobase.com) que conté un registre de les mutacions identificades en pacients amb VWD després de la seqüenciació directa del VWF. El registre permet realitzar cerques, relacionar qual-sevol mutació amb la base de dades internacional i accedir directament a les publicacions corresponents. Es pretén que l’estudi molecular dels pacients permeti una millor comprensió dels mecanismes implicats a la fisiopatologia de la malaltia i ofereixi una visió més amplia de la epidemiologia molecular a la nostra població.

Rosaura Esteve. Grup de Recerca en Models animals i càncer Nuevo mecanismo de evasión a estrés metabólico en melanoma

10:27- 10:36h

Investigador principal: Dr. Juan Ángel Recio Conde Investigadors participants del projecte: Francesc Canals i Núria Colomé (Plataforma de Proteòmica (UCTS) El melanoma cutáneo es uno de los cánceres de piel más letal y presenta una extrema dificultad en su tratamiento. De manera que el entendimiento profundo de la biología y progresión del melanoma es sumamente relevante para el desarrollo de estrategias terapéuticas efectivas.

LKB1 es una cinasa multifuncional de residuos serina/treonina que fosforila a AMPKαT172 controlando el crecimiento celular y la apoptosis bajo estrés metabólico. Además, LKB1S428 se fosforila de manera dependiente de la vía de RAS-ERK. No obstante, se desconoce totalmente la función biológica de la conexión entre la vía de RAS y de LKB1.

El modelo murino de melanoma maligno cutáneo transgénico para el HGF e inducido por radiación ultravioleta (UV), representa una excelente oportunidad para el estudio de nuevas moléculas implicadas en el desarrollo y progresión del melanoma. De manera que analizamos la contribución de la señalización del HGF en melanocitos de lesiones neo-plásicas espontáneas inducidas por radiación UV. Identificamos LKB1 como nueva proteína directamente modificada en la señalización del HGF.

Además, descubrimos que LKB1S428 se encuentra constitutivamente fosforilada en distintas líneas celulares de melanoma mutantes en BRAFV600E, y en tumores murinos y humanos espontáneos con una elevada actividad de RAS. Además, observamos que las células de melanoma BRAFV600E muestran una limitada respuesta a estrés metabólico, y mostramos por primera vez que la activación de RAS por la mutación en BRAFV600E promueve el desacoplamiento de los complejos de LKB1-AMPKα, y por consiguiente la desconexión de los sensores de estrés energético celular LKB1-AMPK. De este modo, la inhibición de la vía de RAS en las células BRAFV600E bajo estrés en-ergético induce la formación de los complejos LKB1-AMPKα y restituye la respuesta a estrés energético aumentando la apoptosis en cooperación con las proteínas de la familia BCL-2.

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Así, mostramos que el efecto oncogénico de BRAFV600E es un importante estimulador de la actividad metabólica. De este modo, el oncogén BRAFV600E induce el desacoplamiento de los complejos LKB1-AMPKα proporcionando al mis-mo tiempo la proliferación celular y la resistencia a apoptosis en condiciones de estrés metabólico. Este mecanismo revela un nuevo nivel de intervención terapéutico relevante en tumores que presentan deregulado la vía de RAS-ERK. Rosaura Esteve Puig, ha participat en el disseny i la realització dels experiments, i amb l’anàlisi dels resultats sota la direcció del Dr. Juan Ángel Recio Conde. La identificació proteica i el seu anàlisi s’ha realitzat amb el suport de la Plataforma de Proteòmica.

Publicació derivada del treball citat anteriorment:

- Esteve-Puig R, Canals F, Colomé N, Merlino G, Recio JÁ (2009). Uncoupling of the LKB1-AMPKα Energy Sensor Path-way by Growth Factors and Oncogenic BRAFV600E. PLoS ONE 4(3): e4771.doi:10.1371/journal.pone.0004771

Nahia Ezkurdia. Grup de Recerca en Malalties hepàtiques The ablation of the afferent sensitive pathway prevents sympathetic atrophy And hemodynamic alterations during portal hypertension

10:36- 10:45h

Investigador/a principal: Joan Genescà i María Martell Investigadors participants en el projecte: Nahia Ezkurdia, Mar Coll, Imma Raurell, Silvia Cuenca, Joan Genescà i María Martell.

Objective: We investigated whether, by blocking the afferent sensitive nerves detecting pressure changes at the por-tal level, sympathetic atrophy and hemodynamic alterations of portal hypertension are avoided.

Methods: Adult portal vein ligated (PVL) or sham rats pretreated with capsaicin (neurotoxin causing selective degen-eration of afferent neurons releasing calcitonin gene related peptide, CGRP) or vehicle. Rat pups treated with cap-saicin or vehicle at 48h of life and PVL performed in adulthood. Hemodynamic measures: mean arterial (MAP) and portal pressure (PP), superior mesenteric arterial blood flow (SMABF) and resistance (SMAR). Tyrosine hydroxylase immunohistochemistry and Western blot were used to quantify sympathetic nerves. Response to capsaicin treatment was defined by the simultaneous absence of MAP decrease and SMABF increase after PVL.

Results: In adult PVL rats, capsaicin responders (45%) show almost normal hemodynamic values (except PP) and no sympathetic regression, being very similar to sham rats and significantly different from PVL vehicles (p values: 0.01 to <0.001). Capsaicin treatment in neonatal rats produced a higher response rate (70%) and differences were greater between capsaicin responder animals and vehicles (p values: 0.007 to <0.001). All capsaicin treated animals showed loss of CGRP inmunofluorescence, regardless of their degree of response, suggesting that suppression of hyperdy-namic circulation did not depend on the absence of CGRP.

Conclusion: The adrenergic system contribution on arterial vasodilation during portal hypertension is supported by the avoidance of hemodynamic alterations and the prevention of the sympathetic atrophy after sensitive afferent signal blockage. This signal could be the triggering factor of the vascular mesenteric alterations.

Marta Fernández. Grup de Recerca en Neuroimmunologia clínica Implicación de la vía del TLR4 y de la vía de los interferones de tipo I en la respuesta a interferon-beta en pacientes con esclerosis múltiple

11:15- 11:24h

Investigador principal: Manuel Comabella López Investigadores participantes en el proyecto: Jordi Río Izquierdo, Nicolás Fissolo, Carme Costa Riu, MªJosé Mansilla López, MªCarmen Edo Cobos, Xavier Montalbán Gairín.

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Objetivo Un importante porcentaje de pacientes con esclerosis múltiple (EM) no responde al tratamiento con interferon-beta (IFNβ). Dada la cercana relación entre la vía de los interferones de tipo I (IFNα y IFNβ) y la vía de los receptores de tipo Toll (TLR), el objetivo de este estudio es investigar la implicación de las dos vías de señalización en pacientes de EM según su respuesta al tratamiento.

Métodos Mediante citometría de flujo se determinó la expresión de TLR2, TLR4 e IFNAR1 (receptor 1 de IFN de tipo I) en monocitos provenientes de células mononucleares de sangre periférica congeladas de 34 controles sanos y de 77 pacientes de EM a tiempo basal y tras 12 meses de tratamiento. A su vez, mediante PCR a tiempo real, se cuantificó la expresión de genes implicados en la vía de señalización del TLR4: Myd88, TICAM1, TNFα, IL1β, CXCL10 e IFNβ.

Resultados y conclusiones La expresión de IFNAR1 en monocitos está aumentada en los pacientes con EM que no responden al tratamiento en comparación a los que responden (p<0.01) y a los controles (p<0.01). La expresión basal de TLR2 y TLR4 no se en-cuentra diferenciada en pacientes de EM según su respuesta. Sin embargo, tras 12 meses de tratamiento existe un importante incremento de estos receptores en monocitos (p<0.01). Por otro lado, la expresión génica de IFNβ e IL1β está aumentada de manera significativa en no respondedores respecto a los respondedores. Estos resultados indican una sobreactivación de la vía de los interferones de tipo I previo comienzo al tratamiento con IFNβ en pacientes que no responden al mismo.

Alba Gómez. Grup de Recerca en Teràpia Cel·lular i Gènica Caracterización fenotípica y del efecto inmunológico de las células de médula ósea murinas transducidas con un autoantígeno

11:24- 11:33h

Autors: Alba Gómez1, Herena Eixarch1, Carmen Espejo2, María José Mansilla2, Ramón Gimeno1, Jordi Barquinero1.

1 Laboratori de Teràpia Cel·lular i Gènica. Institut de Recerca Hospital Universitari Vall d’Hebron (IR-HUVH). 2 Unitat de Neuroimmunologia Clinica, IR-HUVH. Centre d’Esclerosi Múltiple de Catalunya (CEM-Cat).

Abstract: En un estudio previo demostramos que la infusión de células de médula ósea (MO) transducidas con un autoantígeno inducía tolerancia inmunitaria y mejoraba la encefalomielitis autoinmune experimental (EAE), un modelo murino de esclerosis múltiple.

Hipotetizamos que la responsable de este efecto es una subpoblación de células transducidas que se genera durante la transducción. Con el objetivo de identificar y caracterizar dicha subpoblación celular hemos analizado el fenotipo de la MO sometida a transducción retrovírica. A día +5 de cultivo, la mayoría de las células transducidas tienen un fenotipo mieloide (CD11b+ Gr-1low: 31,9+10,2%, o bien CD11b+ Gr-1+: 26+3,3%), dos subpoblaciones que se cor-responden con los dos subtipos descritos de células mieloides supresoras (MDSC). Hemos analizado si estas células suprimen la respuesta proliferativa de esplenocitos de ratones con EAE enfrentadas al autoantígeno (MOG40-55). Los resultados muestran que, in vitro, la subpoblación Gr-1-/low (de morfología monocítica) tiene una mayor capacidad supresora que la Gr-1high (de morfología granulocítica), tanto si ha sido transducida con el autoantígeno como con el vector control, si bien el antígeno-específico es significativamente mayor, lo que sugiere que ambos mecanismos (antígeno-específico e inespecífico) participan en la supresión. Además, la población Gr-1low presenta mayor activi-dad arginasa-1 y NO sintetasa.

Estos resultados demuestran que, en los protocolos de transducción de células hematopoyéticas se generan MDSC con un efecto supresor antígeno-específico e inespecífico. Además, sugieren la participación de MDSC antígeno-espe-cíficas en el beneficio terapéutico observado en nuestro modelo de EAE y apuntan hacia una nueva vía terapéutica en enfermedades autoinmunes.

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Alba González. Grup de Recerca en Expressió gènica i càncer Study of the role of Runx1 in Glioblastoma

11:33- 11:42h

Group leader: Joan Seoane Researchers collaborationg on this project: Alba Gonzàlez Juncà, Isabel Cuartas

Background and objectives: Glioblastoma (GBM) is the most common tumor of the adult brain, and it is one of the deadliest tumors, with a me-dian survival of 15 months. Our group has demonstrated the importance of the cytokine TGF-beta in glioma progres-sion, showing that patients with an increased TGF-beta pathway activity have worse prognosis. We have demonstrat-ed that the induction of LIF by TGF-beta is crucial for the Glioma Initiating Cells (GICs) self–renewal, increasing tumor formation and recurrence. Our objective is to study the molecular mechanism of LIF induction by TGF-beta.

Material and methods: We studied the LIF promoter and we found a putative Runx1 binding site. We decided to study the role of Runx1 transcription factor in LIF induction by TGF-beta. We performed site directed mutagenesis of the Runx1 binding site in the LIF promoter region, knock-down and over-expression of this transcription factor.

Results: The reporter assay with the mutant promoter demonstrated that Runx1 is necessary for LIF induction in response to TGF-beta. Knocking-down this gene in cell lines, decreases the levels of LIF, as the over-expression increases the LIF expression.

Conclusions: We postulate that Runx1 is necessary for LIF induction in response to TGF-beta, so it is crucial for GICs self-renewal capacity. We are studying the role of Runx1 in glioma. Our hope is that, the knowledge about the molecular mecha-nisms that are involved in the gliomagenesis, will lead us to develop better therapies against this disease.

Contribution to the project: I performed all the experiments, cloned the constructs and made stable cell lines. I also participated in the isolation of GICs derived from GBM patients from Vall d’Hebron Hospital.

Clinical implications: We found that Runx1 is over-expressed in GBM compared to low grade glioma and it is a poor prognosis factor. The study of the Runx1- expressing cells will lead us to develop new treatments for this almost incurable disease.

Meritxell Guilla. Grup de Recerca en Fisiologia i fisiopatologia digestiva Phosphorylation of myosin II regulatory light chain in the jejunal mucosa of di-arrhea-prone irritable bowel syndrome patients

11:42- 11:51h

Authors: 1Guilà M, 1Martinez C, 1Vicario M, 1Lobo B, 1Ramos L, 1Gonzalez-Castro AM, 1Alonso C, 2Guilarte M, 1Pigrau M, 3De Torres I, 1Azpiroz F, 1Santos J.

1 Neuro-immune-gastroenterology Laboratory, Digestive Diseases Research Unit, Department of Gastroenterology, 2 Allergy Unit, 3 Pathology Department, Institut de Recerca Hospital Universitari Vall d’Hebron, Universitat Autònoma de Barcelona, Department of Medicine, CIBEREHD. Barcelona, Spain.

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Background & Aims: Increased intestinal epithelial permeability may be a central event in IBS pathophysiology. However, the involvement of cytoskeleton modulation, and particularly the role of myosin light chain kinase (MLCK)-dependent pathway, a key route for the maintenance of tight junction integrity, has not been well established in these patients. Methods: We obtained jejunal biopsies from healthy volunteers (n=12, 4 men) and age-matched (range: 21-59 years) non-aller-gic, non-celiac, naïve participants meeting diarrhea-IBS (d-IBS) Rome II criteria (n=17, 4 men). MLC phosphorylation status, MLCK and calmodulin 1 (CALM1) were evaluated by real-time PCR, western blot and confocal microscopy. Results: mRNA expression of CALM1 was decreased in d-IBS as compared to healthy participants (p<0.01) although protein expression did not change. MLCK mRNA levels remained unchanged, but, interestingly, protein expression of this kinase was significantly increased in d-IBS. Consistent with these results, d-IBS patients showed increased MLC phos-phorylation at Ser19, which leads to contraction of the acto-myosin belt and disassembly of tight junctions. Moreo-ver, MLC phosphorylation at Thr18/Ser19, which triggers de novo assembly of the junctional complex, was reduced in d-IBS patients compared to healthy volunteers. Conclusion: Regulation of myosin II regulatory light chain (MLC) phosphorylation is altered in the jejunal mucosa of d-IBS patients

Conxita Jacobs. Grup de Recerca CIBBIM-Nanomedicina. Fisiopatologia renal Identificació de biomarcadors primerencs per la prevenció de la nefropatia crònica de l’empelt (chronic allograft nephropathy, CAN) amb fibrosi intersticial i atròfia tubular (IF/TA).

11:51- 12:00h

Investigador responsable: Anna Meseguer Navarro Investigadors participants en el projecte: Conxita Jacobs, Eduard Sarró, Joan López Hellín, Carme Cantarell, Sonia Caparrós, Francesc Moreso, Daniel Serón i Anna Meseguer

Objectiu: Els mètodes de mesura de la funció renal tradicionals com ara els nivells de creatinina en sèrum i la taxa de filtració glomerular, no permeten fer un diagnòstic de disfunció renal a l’inici per tal d’evitar el desenvolupament la nefropatia crònica de l’empelt (CAN) en pacients trasplantats renals sotmesos a un regim immunosupressor. Per aquest motiu l’objectiu d’aquest treball és:

- Identificar proteïnes diferencialment secretades per cèl·lules tubulars humanes, HK-2, sotmeses a diferents noxes (Ciclosporina A, FK506, Rapamicina, Gentamicina, hipòxia i hipòxia/reoxigenació) que puguin ser potencials biomar-cadors primerencs de CAN amb IF/TA.

Material i mètode: S’han determinat les dosis/temps tòxics i pretòxics de cada noxe mitjançant assaig LDH, en cèl·lules HK-2. Posteri-orment s’han escollit les dosis pretòxiques fent un anàlisi estadístic ANOVA unifactorial i escollint la primera dosi/temps que és significativament diferent (p<0,05) a la primera dosi tòxica. S’han identificat proteïnes diferencialment secretades mitjançant proteòmica d’alta resolució a partir de medis de cèl·lules HK-2, tractades amb les dosis/temps pretòxics prèviament determinades.

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Resultats i conclusions: S’han obtingut mapes proteòmics de les proteïnes secretades (Secretomes) en cada condició pretòxica i hem de-terminat els spots diferencials, en cada cas. Aquests spots diferencials un cop identificats per espectrometria de masses podrien ser potencials biomarcadors no invasius, donat que serien detectables en orina o sang de pacients trasplantats. Aquestes proteïnes podrien ser útils per tal de prevenir CAN amb IF/TA. Aquests biomarcadors permetr-ien, a més de predir-ne l’aparició, determinar quin és el factor (immunològic o no immunològic, com ara els fàrmacs anticalcineurínics o la isquèmia/reperfusió pròpies del procés quirúrgic) causant de la malaltia en cada pacient.

Renuka Kandhaya. Grup de Recerca CIBBIM - Nanomedicina. Fisiopatologia renal Inflammatory cirucuit and sustained STAT1/3- IFNγ signaling acts a positive regula-tory loop for mediating and maintaining TNFα induced senescence program

12:00- 12:09h

Renuka Kandhaya-Pillai , Francesc Miro-Mur,Jaume Alijotas-Reig , Simo Schwartz Jr

Summary Cellular senescence is a complex process involving multiple cascades of regulatory events. Inflammatory cytokines mediated inflammatory signals are sought to play a significant role in stress induced premature senescence (SIPS). Persistent presence of circulating cytokines leads to chronic activation of the immune system and are known to be involved in various age-related pathologies and immunosenescence. To acquire a comprehensive overview of gene expressional changes during chronic inflammatory condition, we performed genome-wide screening comparing con-trol cells with cells chronically treated with proinflammatory cytokine TNF-α. Remarkably, gene expression analysis revealed that TNF-α induced cellular senescence is regulated by diverse signaling pathway including NF-kappaB, TLRs and MAPK. To further explore the functional modules and genome wide interactions in differentially expressed genes, we generated networks and canonical pathways using IPA. IPA analysis generated a complex network of in-terconnected inflammatory circuit combining gene clusters including cytokines, chemokines and receptors. Of note, interferon signature identified as most striking molecular pathway with dominant number of gene cluster. To further understand the precise signaling mechanism involved in TNF mediated interferon signaling, we continue to analyse the long term kinetics of JAK/STAT pathway. Surprisingly, we found prolonged and sustained expression of STAT1/3 and IL-6, IFNγ following TNF stimulation. These results signifies persistent and sustained activation of STAT1/3-IFNγ apparently initiates positive feedback mechanism for continual presence of circulating cytokines and acts as self regu-latory loop for retaining the senescence program. Contribution I had great opportunity to initiate my thesis right from the beginning of this project, which constantly encouraged me to gain valuable technical insights in the above field. In vitro experimental work for genome wide expression studies Pathway analysis and functional interaction of the array data Basic functional assays. (WB,IF,FACS,ELISA,RT-PCR)

Clinical Implication Ageing process is complex and mainly associated to many chronic inflammatory diseases including cancer. Under-standing molecular events is important to unreveal the putative regulatory targets.

- Our study will continue to identify novel regulatory elements that could be markers of endothelial senescence induced by chronic inflammation and as targets for immunotherapies directed against inflammatory diseases.

- In future, this study will provide tools for research in nanomedicine intended to develop specific therapies for in-flammatory diseases that could prevent progress of ageing-associated diseases such as cancer.

Publication Inflammatory cirucuit and sustained STAT1/3- IFNγ signaling acts a positive regulatory loop for mediating and main-taining TNFα induced senescence program. (Manuscript to be submitted)

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Marta Llaurado. Unitat de recerca biomèdica i oncologia translacional i pediàtrica Molecular pathways regulated by the ETV5 transcription factor in OV90 ovarian cancer cells

12:09- 12:18h

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Investigadors principals: Dr. Jaume Reventós Puigjaner i Dra. Anna Ruiz Nel·lo

Objectives: To examine the role of the ETV5 transcription factor in ovarian cancer we have inhibited ETV5 in the OV90 ovarian cancer cell line. We have demonstrated that ETV5 has a role in cell proliferation, EMT, cell adhesion and cell survival. To identify the molecular mechanisms regulated by ETV5 we have performed a differential gene expression analysis comparing OV90 cells and OV90 cells with ETV5 inhibition. Material and methods: The OV90i4 cell line was established transducing a shRNA lentiviral construct to reduce ETV5 expression in OV90 cells. Inhibition of ETV5 was confirmed by flow cytometry, WB and RTqPCR. We determined the global gene expres-sion of OV90i4 cells by microarray analysis (Affymetrix) and compared it to OV90 parental cells. We selected genes with unadjusted p–value <0.01 to perform an analysis of Biological Significance using the Gene Ontology database. The most differentially expressed genes (log FC<- 1.6; >1.6) have been also analysed using the IPA software. Results: Around 8500 genes were included in the analysis after non-specific filtering to remove low signal and low variability genes. The gene enrichment analysis performed has detected a certain number of enriched GO categories. IPA analy-sis has revealed a number of netwoks and signalling pathways modified by ETV5 downregulation. Among them the regulation of genes involved in oxidative stress, the G2/M cell cycle checkpoint and the EMT process. Conclusions: Gene expression analysis of OV90 ovarian cancer cells with inhibition of ETV5 suggest ETV5 involvement in the regu-lation of oxidative stress, G2/M cell cycle checkpoint and EMT.

Beatriz Lobo. Grup de Recerca en Fisiologia i fisiopatologia digestiva Clinical improvement in IBS after disodium cromoglycate involves mast cell-mediat-ed Toll-like receptor signaling downregulation.

12:18- 12:27h

Authors: Lobo, Beatriz1; Vicario, Maria1; Martinez, Cristina1; Gonzalez-Castro, Ana M; Ramos, Laura1; Alonso, Car-men1; Guilá, Meritxell1; Pigrau, Marc1; Guilarte, Mar2; de Torres, Ines3; Saperas, Esteban1; Azpiroz Fernando1; Santos, Javier1.

1 Neuro-immune-gastroenterology lab, Digestive Disease Research Unit. 2 Allergy Unit. 3 Departament of Pathology. Institut de Recerca Hospital Universitari Vall d’Hebron. Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Hepáticas y Digestivas, CIBERehd, Barcelona, Spain. Background: Intestinal mucosal micro-inflammation and mast cell activation are linked to gut disturbances in irritable bowel syndrome (IBS) patients. Previous clinical improvement in diarrhea-prone IBS (IBS-D) patients after disodium cromo-glycate (DSCG) administration associates the down-regulation of mast cell and TLR2&4 gene expressions. However, specific innate immune signaling pathways are still unknown. We aimed to characterize TLR regulation in IBS and its modulation after mast cell stabilization. Methods: Non-allergic/celiac participants: healthy volunteers (H, n=7) and IBS-D patients fulfilling Rome II (n=16) were includ-ed. A jejunal biopsy was obtained by Watson’s capsule 6 months after random allocation to untreated IBS (n=8) or oral cromoglycate, 200 mg/8h, (IBS-DSCG, n=8). Tryptase and TLR signaling-related molecules were analyzed by real-time PCR. Mucosal mast cells and TLR2&4 positive cells were studied by immunofluorescence. Symptoms were

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were monitored.

Results: Tryptase expression was increased in IBS (p<0.01) and restored to H values after DSCG treatment (p<0.01). Expression of TLR2&4 was increased in IBS and decreased to H values after DSCG treatment (p<0.02). Interestingly, expression of TLR-interacting molecules HSP27&70, A20, and PPARg followed similar patterns to those described for TLRs. Innate immunity-related genes positively correlated with tryptase expression. Tryptase+ cells in IBS disclosed low co-expres-sion only of TLR2. Density of TLR2+ cells was increased in IBS regarding H, with distribution restricted to the lamina propria and in close interaction with mast cells. Furthermore, down-regulation of innate immunity genes paralleled clinical improvement (p<0.01).

Conclusion: Mast cell stabilization restores expression of genes governing innate immune responses in the intestinal mucosa. Reduced local innate immunity activation may underlie clinical improvement in IBS-D.

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Mª José Mansilla. Grup de Recerca en Neuroimmunologia clínica Sobre-expresión de HSP-70 en pacientes con Esclerosis Múltiple remitente-recur-rente

12:27- 12:36h

El objetivo del trabajo es estudiar la función de la proteína de choque térmico-70 (HSP70) en la esclerosis múltiple (EM). Para ello, se analizó la expresión génica de HSP70 mediante PCR a tiempo real en células mononucleares de sangre periférica de 30 pacientes con EM remitente-recurrente (EMRR) y 30 controles sanos (CS) y se estudió la función de HSP70 in vivo en el modelo animal de EM, la encefalomielitis autoinmune experimental (EAE), utilizando ratones deficientes en HSP70 (HSP70KO).

Los resultados obtenidos mostraron un aumento significativo de la expresión de HSP70 en pacientes con EMRR comparado con los CS (fold change= 2.5; p= 0.036). Los experimentos con el modelo de EAE en ratones HSP70KO no mostraron diferencias clínicas ni histopatológicas respecto a los ratones wild-type. Sin embargo, la respuesta prolif-erativa de células T antígeno específica estaba aumentada significativamente en los ratones HSP70KO respecto del grupo control (14.3±0.8 vs 8.6±0.7; p=0.0017).

Los resultados sugieren que la HSP70 podría estar implicada en la desregulación de la respuesta (auto)inmune que acontece en la EM.

Neus Marques. Unitat de recerca biomèdica i oncologia translacional i pediàtrica La activación traduccional de c-Jun mediada por la proteína Prostate Tumor OVerex-pressed-1 (PTOV1) induce la transición epitelio-mesenquima y la invasión en cáncer de próstata

12:36- 12:45h

Neus Marqués1, Lide Alaña1, Gardenia Vargas1, Inés de Torres2, Marta Sesé1, Anna Ezquerra1, Francesc Canals3, Santiago Ramon y Cajal2, y Rosanna Paciucci1.

1 Unitat de Recerca Biomèdica y Oncologia Traslacional, VHIR; 2 Departament Anatomia Patològica, Hospital Vall d’Hebron; 3 Unitat de Proteomica, VHIO.

La proteína PTOV1, sobreexpresada en cáncer de próstata, se asocia con proliferación e invasión tumoral. Para conocer la función de PTOV1 hemos buscado interacciones con otras proteínas mediante la técnica de doble-híbrido en levadura. RACK1 (Receptor for Activated C Kinase 1) el receptor de la PKC activa, recientemente identificado como componente de la subunidad 40S del ribosoma, interacciona con PTOV1. Confirmamos la interacción por ensayos de co-inmunoprecipitación / pull-down, y mediante ensayos de gradientes de sacarosa demostramos que PTOV1 se asocia a la proteína ribosomal S6, las subunidades 40S 60S y los polysomas. Para estudiar el papel de PTOV1 sobre la

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traducción de proteínas, modulamos su expresión mediante sobreexpresión y knockdown utilizando RNAs de inter-ferencia. Su sobreexpresión aumenta los niveles de traducción global de proteína, y significativamente de c-Jun, de manera independiente de mTOR. Por el contrario, la depleción de PTOV1 disminuye la traducción global de proteínas y de c-Jun. La sobreexpresión de PTOV1 induce la migración-invasión in Vitro y se asocia a un perfil transcripcional característico de transición epitelio-mesenquima (EMT). La co-transfección del dominante negativo de c-Jun TAM67 en células con sobreexpresión de PTOV1, revierte este perfil de expresión asociado a la EMT. En tumores humanos hay una asociación entre la expresión de PTOV1 y la activación (fosforilación) de c-Jun. Estos resultados sugieren que en cáncer PTOV1 promueve la migración e invasión celular, de manera dependiente de c-Jun e independiente de mTOR, mediante su interacción con RACK1 y rpS6 promoviendo la traducción de proteínas necesarias para la movili-dad e invasión.

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Cristina Martínez. Grup de Recerca en Fisiologia i fisiopatologia digestiva Mucosal mast cell-mediated tight junction impairment correlates to symptom sever-ity in diarrhea-prone irritable bowel syndrome patients

12:45- 12:54h

Martínez C, Vicario M, Lobo B, Ramos L, Alonso C, Guilarte M, Guilà M, González-Castro AM, Pigrau M, de Torres I, Azpiroz F, Santos J.

1 Neuro-immune-gastroenterology Laboratory, Digestive Diseases Research Unit, Department of Gastroenterology, 2 Allergy Unit, 3 Pathology Department, Institut de Recerca Vall d’Hebron & Hospital Universitari Vall d’Hebron, Univer-sitat Autònoma de Barcelona, Department of Medicine, CIBEREHD. Barcelona, Spain.

Background & Aims: Intestinal barrier dysfunction and mast cell biology have been implicated as key determinants in irritable bowel syndrome (IBS) pathophysiology. However, the expression of structural tight junction (TJ) proteins and its relation to mast cell activation and the clinical course of IBS have not been properly addressed.

Methods: Jejunal biopsies were obtained from healthy subjects (n=12) and age-matched, non-allergic, non-celiac, naïve par-ticipants meeting diarrhea-IBS Rome II criteria (IBS-D, n=17) Mucosal mast cell counts were assessed by immunohis-tochemistry with anti-human CD117. Gene and protein expression related to mast cells and to TJ were evaluated by real-time PCR and western blot. TJ proteins localization was evaluated by confocal microscopy and TJ ultrastructure was assessed by transmission electron microscopy (TEM). Frequency of abdominal pain and stool consistency were scored during the 10 days prior to biopsy.

Results: The expression, both at mRNA and protein levels, of TJ proteins claudins (CLDN1, CLDN2 and CLDN4) and the scaf-folding proteins zonula occludens (ZO1 and ZO3) was significantly decreased in IBS-D, as compared to healthy partici-pants (p<0.05 for all). Confocal microscopy showed ZO1 located at the apical membrane of the enterocytes in healthy subjects. However, in IBS-D patients the staining was less intense and scattered through the cytoplasm. Moreover, widening of TJ, and peri-junctional cytoskeletal condensation was frequently observed by TEM in enterocytes from IBS-D. Interestingly, IBS-D transcriptional profile significantly correlated with clinical manifestations and mast cell activation.

Conclusion: TJ integrity is disrupted in the jejunal mucosa of IBS-D patients. The clinical outcome of IBS-D may rely on distinctive mast cell-related changes of jejunal TJ biology.

Anna Masià. Unitat de recerca biomèdica i oncologia trnaslacional i pediàtrica Notch pathway inhibition significantly reduces Rhabdomyosarcoma invasiveness and mobility in vitro

12:54- 13:03h

Josep Roma1*, Anna Masià1*, Jaume Reventós1, Josep Sánchez de Toledo2, Soledad Gallego1,2.

1 Biomedical Research Unit and 2 Pediatric Oncology and Hematology Department, Hospital Universitari Vall d’Hebron, Barcelona, Spain.

*These authors contributed equally to this work.

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Abstract: Rhabdomyosarcoma (RMS) is the most common type of soft tissue sarcoma in children and can be divided into two main subtypes: embryonal and alveolar RMS. Patients with metastatic disease continue to have very poor prognosis although aggressive therapies and recurrences are common in advanced localized disease. The oncogenic potential of the Notch pathway has been established in some cancers of the adult and in some pediatric malignancies.

A real-time PCR assay was used to ascertain the expression of several Notch pathway components in a wide panel of RMS and cell lines. Four γ-secretase inhibitors (GSIs) were tested for pathway inhibition and the degree of inhibition was assessed by analysis of Hes1 and Hey1 expression. The putative effects of Notch pathway inhibition were evalu-ated by wound-healing, matrigel/transwell invasion, cell-cycle and apoptosis assays. The Notch pathway was widely expressed and activated in RMS and underwent substantial inhibition when treated with GSIs or transfected with a dominant negative form of MAML1. RMS cells showed a significant decrease in its mobility and invasiveness when the Notch pathway was properly inhibited; conversely, its inhibition had no noticeable effect on cell cycle or apopto-sis. Pharmacological or genetic blockage of the pathway significantly reduced invasiveness of RMS cell lines, thereby suggesting a possible role of the Notch pathway in the regulation of the metastatic process in RMS.

Rocco Mazzolini. Grup de Recerca CIBBIM - Nanomedicina. Oncologia molecular Myo1a has tumor suppressor activity in intestinal tumors

13:03- 13:12h

Name of the IP: Diego Arango del Corro

Researcher partecipants in the project: Rocco Mazzolini1,2, Higinio Dopeso1,2*, Silvia Mateo-Lozano1,2*, Wakam Chang3, Paulo Rodrigues1,2, Stefania Landolfi4, Javier Hernandez-Losa4, Pia Alhopuro5, Eloy Espín6, Manel Armen-gol6, Josep Tabernero7, Santiago Ramón y Cajal4, John Mariadason8, Lauri A. Aaltonen5, Mark S. Mooseker3, Simo Schwartz Jr2,9, Diego Arango1,2.

1Group of Molecular Oncology, CIBBIM-Nanomedicine, Vall d’Hebron University Hospital, Research Institute (VHIR), Universitat Autònoma de Barcelona, Passeig Vall d’Hebron, 119-129, 08035 Barcelona, Spain; 2CIBER de Bioingeni-ería, Biomateriales y Nanomedicina (CIBER-BBN);Spain; 3Department of Molecular, Cellular and Developmental Biol-ogy, Yale University, New Haven, Connecticut; 4Department of Pathology, Vall d’Hebron Hospital, Barcelona, Spain; 5Department of Medical Genetics, Genome-Scale Biology Research Program, Biomedicum Helsinki, University of Helsinki, Helsinki, Finland. 6Department of Surgery, Vall d’Hebron Hospital, Barcelona, Spain; 7Department of Medi-cal Oncology, Vall d’Hebron Hospital, Barcelona, Spain; 8Ludwig Institute for Cancer Research, Melbourne Centre for Clinical Sciences, Austin Health, Heidelberg, Victoria, Australia; 9Group of Drug Delivery and Targeting, CIBBIM-Nano-medicine, Vall d’Hebron University Hospital, Research Institute (VHIR), Universitat Autònoma de Barcelona, Passeig Vall d’Hebron, 119-129, 08035 Barcelona, Spain.

*these authors contributed equally to this work.

Intestinal epithelial cells display an apical array of microvilli known as “brush border” and this structure is reduced or lost during tumor progression. The main goal of this project was to study the role of Myosin Ia (MYO1A), a structural cytoskeletal protein of the brush border, in intestinal tumor progression.

The following techniques were used for this work. In vitro: MYO1A sequencing in colorectal cancer cell lines and primary tumors; up- or down-regulation in cell lines; FACS analysis; Western blotting; soft agar assays, wound healing assays, enzymatic assays; immunocitochemistry; confocal and optical microscope imaging. In vivo: mouse genotyp-ing via PCR; euthanasia and obtaining of the samples; tissue processing and paraffin inclusion; histological analysis (immunohistochemistry and other non-immuno stainings). Xenografts models: subcutaneous injection of tumor cells and measurement of the tumor growing.

We found frequent frameshift mutations in microsatellite instable colorectal primary tumors (37/116, 32%) and MSI colorectal cell lines (17/36, 47%). The mutation interferes with MYO1A subcellular localization and cause de-differ-entiation and loss of polarity of colon cancer cells. MYO1A inactivation accelerates intestinal tumorigenesis in mouse models, and in human low MYO1A levels correlate with poor prognosis of colorectal cancer patients.

Our results identified a new gene with tumor suppressor activities in colorectal tumors and demonstrate that struc-tural proteins of the epithelial brush border previously believed to be passive differentiation markers can actively

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contribute to tumor progression.

My contribution to the project: - In vitro assays: • DNA sequencing • Creation of the experimental models (lentiviral infection of the cell lines, sorting, FACS analysis and Western Blot-ting) • Proliferation assay • Migration assay • Enzymatic activity assays • Soft agar assays • Immunocitochemistry • Confocal and optical microscope imaging - Xenografts assays: • Subcutaneous injection of tumor cells and measurement of the tumor growing - In vivo assays: • Mouse genotyping and formation of the experimental groups of animals • Euthanasia and obtaining of the samples • Tissue processing and paraffin inclusion • Histological analysis (immunohistochemistry and other non-immuno stainings) Clinical implication Our results demonstrate that MYO1A levels correlate with survival of colorectal cancer patients, both disease-free survival and overall survival. These findings make this protein a potentially useful marker of prognosis in the clinic.

Further investigation about the underlying molecular mechanisms of the tumor suppressor activity of MYO1A could be a first step in the process of developing clinically relevant application for a personalized treatment.

Marc Oria. Gup de Recerca en Malalties hepàtiques L-ornithine phenilacetate (OP) prevents neurophysiological abnormalities and hy-perammonemia in PCA rats with gastrointestinal bleeding

13:12- 13:21h

Principal Ivestigator: Juan Córdoba. Co-authors: Jordi Romero Giménez, Núria Raguer, Encarnació Riudor, José Antonio Arranz. Introduction: Gastrointestinal Bleeding (GIB) in portocaval anastomosis rats (PCA) induces hyperammonemia and motor tract dys-function, a correlate of experimental HE.

Aim: Study the efficacy of ornithine-phenylacetate (OP), a drug that has been shown to decrease blood ammonia and pre-vent brain edema, in preventing experimental HE precipitated by GIB.

Material and methods: PCA rats were pretreated with OP (0.6 gr/kg/dia) or saline intraperitoneally (n=8 per group) prior to GIB.

Results: GIB in PCA induced impairment in amplitude and latency of MEP and an increase in plasma ammonia. Pretreatment with OP attenuated MEP abnormalities and decreased the rise in plasma ammonia.

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*p<0.05

Conclusions: L-Ornithine phenylacetate prevents the rise in plasma ammonia induced by gastrointestinal bleeding and the neuro-physiological correlate of hepatic encephalopathy. Thus, ornithine phenylacetate may be a good treatment to pre-vent HE precipitated by ammonia.

Mireia Puig. Gup de Recerca en Malalties infeccioses Diagnostic utility of plasma CMV quantitative PCR in the diagnosis of end organ CMV disease in HIV infected patients with baseline CD4+ lymphocyte counts < 50 cells/ μL

13:21- 13:30h

Investigador principal: V. Falcó I A. Pahissa Investigadors participants en el projecte: M. Puig, V. Falcó, M.T. Tórtola, M. Lowak, , M. Crespo, A. Imaz, A. Curran, O. Len, R. Sordé, E. Caballero, E. Ribera, A. Pahissa

Background: Detection of CMV replication in HIV infected patients has been associated to a higher risk of CMV end organ disease (EOD) and death. The aim of our study was to estimate the prevalence of CMV viremia in a cohort of HIV infected patients with CD4+ lymphocyte count < 50 cells/ μL and to assess the utility of CMV real-time quantitative PCR for the early diagnosis of CMV EOD.

Methods: From January 2006 to December 2008 all adult patients with HIV infection and a CD4+ cell count < 50 cell/ μL were selected from the Infectious Disease Department database. In 68 subjects the CMV quantitative PCR on plasma was performed. Sensitivity, specificity, positive and negative predictive values for detection of CMV EOD were calculated for different CMV viral load cut-offs.

Results: At baseline CMV viremia was detected in 17 (25%) patients. Seven of 17 subjects (41%) with positive CMV PCR had CMV EOD. By setting 10000 copies /mL as a CMV PCR viral load cut-off, we achieved a sensitivity of 71.4%, a positive predictive value (PPV) and specificity of 100% and a negative predictive value of 83.3% for the diagnosis of CMV EOD. At one year of follow-up, a similar rate of patients had HIV viral load < 50 copies/mL (72.7% of negative PCR patients and 76.9% of positive CMV PCR patients).

Conclusions: CMV quantitative PCR in plasma may help us to identify those HIV infected patients who are at high risk of develop-ing CMV EOD. Patients with CMV PCR levels > than 10000 copies/mL should be screened for CMV EOD in order to detect early CMV disease.

saline OP

Time postGIB Latency (%) Amplitude (%) Ammonia (mM) Latency (%) Amplitude (%) Ammonia (mM)

2 hours 104± 3 90±3 176±46 100±4 103±8* 109±41*4 hours 109±5 83±6 244±120 102±4* 101±7* 174±72*6 hours 112±7 79±10 287±88 103±6* 99±9* 162±84*8 hours 112±8 91±10 273±93 101±6* 104±10* 158±79*

24 hours 104±4 106±7 171±82 97±4* 118±10* 118±44

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Natalia Quintero. Gup de Recerca en Microbiologia Illes de patogenicitat en soques de escherichia coli aïllades simultàniament de orina i femta de dones amb infecció urinària

13:30- 13:39h

Investigador principal: Dr. Guillem Prats Pastor Investigadors participants: Juan José González López, Alicia Coelho, Rosa Maria Bartolomé, Xavier Martínez i Antònia Andreu.

RESUM DEL PROJECTE Objectiu: Comparar la presència de 8 Illes genòmiques de Patogenicitat (PAI) entre soques de E. coli aïllades de persones amb Infecció Urinària (IU) de orina i la femta, amb relació als grups filogenètics (GF).

Materials i Mètodes: Es van estudiar 42 dones amb IU per E. coli. La determinació de les PAI i dels GF s’ha fet per tècniques de PCR. Les comparacions estadístiques s’han fet segons el test de Mann-Whitney i Fisher.

Resultats: En les 42 dones amb IU es van aïllar 42 soques urinàries i 69 digestives (femta). La mostra intestinal es va obtindré en el mateix moment que la urinària. Dels 111 clons totals analitzats, 103 portaven PAI. El numero mitjà de PAI ( PAI) en els clons de femta i orina va ser de 2 i 4, respectivament. Per els GF A i B1 en associació, la PAI va ser 2 (femta) vs 3 (orina) i per els GF B2 i D associats va ser de 2 vs 4 respectivament. Independentment del GF, les soques urinàries tenien una probabilitat del 8.55, de tenir 4 o més PAI respecte a les fecals. En 28 dones, el clon urinari es va comparar simultàniament amb el clon(s) intestinal(s), amb una PAI de 4 vs 3 respectivament. En el 51.5% de les diverses soques les PAI s’agrupen d’una manera numèricament progressiva i qualitativament ordenada Conclusions: Les soques de E. coli aïllades de l’orina, contenen més PAI que les soques comensals aïllades simultàniament en el mateix hoste. Addicionalment per als GF A i B1, el clon urinari i comensal té un nombre similar de PAI. Per altre ban-da, en els GF B2 i D, la soca urinària té més PAI que la soca comensal. Finalment, les combinacions de PAI trobades suggereixen que l’adquisició de les PAI, no es produeix de manera aleatòria, sinó d’una manera seqüencial. CONTRIBUCIÓ I IMPLICACIÓ CLÍNICA En el context de les infeccions urinàries tant d’origen comunitari com nosocomial, E. coli és el principal agent causal. Tenint en compte que E. coli és el component majoritari del tub digestiu, el coneixement precís de la importància que les PAI i els diferents factors de virulència, tenen en el procés d’infecció extra-intestinal Podria aportar noves dades útils, per al disseny de mesures terapèutiques específiques contra soques virulentes. Com per exemple: la utilització de vacunes fetes a partir d’un determinant factor de virulència, que permetin prevenir aquestes infeccions. És per aquest motiu que em vaig implicar a temps complet al desenvolupament d’aquest tema que encaixa adequadament amb una de les línia de investigació del nostre grup:“Escherichia coli. Infecció extra-intestinal, derives poblacionals i factors de virulència.”

PUBLICACIONS

Quintero-Zarate, J.N, J.J González-López, RM Bartolomé, X Martínez, A. Andreu. Pathogenicity Islands in Escherichia coli Strains Isolated Concurrently from the Urine and Feces from Women with Urinary Tract Infection. En prensa.

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Jordi Riera. Gup de Recerca en Sèpsia i infecció respiratòria greu Results of two years with an audio recording system for monitoring the in-hospital cardiac arrest manoeuvres in a university hospital. Improving the guidelines adher-ence.

13:39- 13:48h

Investigadores participantes: Francesc Xavier Nuvials Casals, Juan Carlos Ruiz Rodriguez, Nuria Duran Mateo. Objectives: To evaluate the consequences of the introduction of an audio recording system in the cardiac arrest team inventory, emphasizing the monitoring of time intervals and the Utstein style (US) data collection.

Materials and methods: We introduced an audio recording device in the CA team inventory from January 2008 to December 2009. When the bleeper was activated, the system was started. It recorded all the actions that happened during the resuscitation. Recorded data were analyzed and all the available items recommended by the US were completed. Our CA team members received feedback training after analyzing data.

Results: 118 CA team activations took place. The recording system was activated in 63 cases (53%). Feedback lessons of real CA cases started in year 2008. The rate of activation of the device increased each year (2008: 33%; 2009: 76%). Significant difference was found between the mean of the number of US recommended collected items per patient of the recorded and not recorded cases [R: 34,31 (±7,37); NR: 30,93 (±8,75); P = 0,033]. There was a significant dif-ference between the mean of the number of US recommended collected items per patient between the two years [2008: 27,47 (±10,43); 2009: 35,26 (±6,47); P < 0.0001]. Median time of arrival was 55 s (46-96). Mean time to intu-bation was 583 s (±277). Mean time to first adrenaline was 196 s (±108).

Conclusions: An audio recording system is a useful device for collecting all the data recommended by the US and it’s a good method of feedback education. Feedback sessions helped to increase its use.

CONTRIBUCIÓN E IMPLICACIÓN CLÍNICA:

Contribución en el desarrollo del proyecto, en la elaboración de base de datos y registros y en el análisis de los datos. El estudio evidencia la utilidad de un aparato de registro que mejora el ajuste de la metodología habitual a las reco-mendaciones internacionales.

Marina Rigau. Unitat de recerca biomèdica i oncologia translacional i pediàtrica PSGRr and PCA3 as biomarkers for the detection of Prostate cancer in urine

15:30- 15:39h

Investigador principal: Dr. Jaume Reventos, Dr. Andreas Doll i Dr. Joan Morote Altres Investigadors participants en el projecte: MªCarme Mir, Carlos Ballesteros Background: Several studies have demonstrated the usefulness of monitoring an RNA transcript in urine, such as PCA3, for pros-tate cancer (PCa) diagnosis. PCa screening would benefit from additional biomarkers of higher specificity and could be used in conjunction with prostate- -specific antigen (PSA) testing, in order to better determine biopsy candidates.

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Methods: We used urine sediments after prostate massage (PM) from 215 consecutive patients, who presented for prostate bi-opsy. We tested whether prostate- -specific- -G- -protein coupled receptor (PSGR), a biomarker previously described to be over- -expressed in PCa tissue, could also be detected by quantitative real- -time PCR in post- -PM urine sediment. We combined these findings with prostate cancer gene 3 (PCA3), the current gold standard for PCa diagnosis in urine, to test if a combination of both biomarkers could improve the sensitivity of PCA3 alone.

Results: By univariate análisis we found that PSGR and PCA3 were significant predictors of PCa. Receiver operator character-istic curve analysis and its multivariate extension, multivariate ROC (MultiROC), were used to assess the outcome predictive values of the individual and the paired biomarkers. We obtained the following area under the curve values: PSA (0.602), PSGR (0.681), PCA3 (0.656), and PSGRvPCA3 (0.729). Then, we tested whether a combination of PSGR and PCA3 could improve specificity by fixing the sensitivity at 95%.

We obtained specificities of 15% (PSGR), 17% (PCA3), and 34% (PSGRvPCA3).

Conclusions: A multiplexed model including PSGR and PCA3 improves the specificity for the detection of PCa, especially in the area of high sensitivity. This could be clinically useful for determining which patients should undergo biopsy.

Laura Rodón. Grup de Recerca en Expressió gènica i càncer PI3K facilitates the autocrine induction of TGFβ2 by TGFβ in glioblastoma

15:39- 15:48h

Human glioblastoma (GBM) is one of the most aggressive and recalcitrant human tumors and is virtually incurable. GBM presents a high TGFβ-Smad activity that confers poor prognosis. In many cases, the increased TGFβ-Smad activity is due to high expression of TGFβ2 ligand. In this work, we observed that TGFβ induces its own expression generating a malignant autocrine loop. This phenomenon explained the increased secretion of TGFβ2 and hence the hyperactivity of the TGFβ pathway present in high grade gliomas. Using GBM cell lines and GBM patient samples, we identified a new crosstalk between the PI3K and TGFβ signaling pathway at the level of TGFβ2 secretion. We dem-onstrated that hyperactivation of PI3K signaling increased TGFβ mediated expression of TGFβ2. We showed that PI3K activated CREB transcription factor and that CREB activity was necessary for TGFβ2 expression. Furthermore, CREB formed an activating transcriptional complex along with Smad2 in the TGFβ2 promoter. These results were confirmed in human GBM biopsies. This work provides new molecular targets in order to restore normal TGFβ function as well as new therapeutic strategies against this disease.

Contribution to the project and clinical implication: This project has been entirely conducted by myself under the supervision of Dr.Joan Seoane. Currently in our hospital there is a PI3K and a TGFβ inhibitor undergoing glioblastoma phase 1 clinical trials. This work explains part of the ef-ficacy of PI3K inhibitors in clinic as they would be decreasing TGFβ signaling. Furthermore, it suggests that, in gliob-lastoma, combining PI3K and TGFβ inhibitors would lead to a better antitumoral outcome than single drug treatment.

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Jose Antonio Sanchez. Grup de Recerca en Patología cardiocirculatòria Efectos de la substitución de conexina 43 por conexina 32 en la tolerancia a la isquemia, en la protección por precondicionamiento y en la arritmogenesis en cora-zones aislados de ratón

15:48- 15:57h

Investigador principal: David García-Dorado García, Antonio Rodríguez Sinovas Investigadores participantes en el proyecto: Jose Antonio Sánchez García, Antonio Rodríguez Sinovas, Alejandra González-Loyola, Ignasi Barba, Esperanza Agulló, Elisabet Miró-Casas, Marisol Ruiz-Meana y David García-Dorado. La conexina 43 (Cx43) es la proteína que forma parte de los canales intercelulares tipo gap junction, esenciales para la propagación del impulso eléctrico. Nuestro grupo ha descrito su importancia en la fisiopatología de la isquemia/reperfusión (IR), en la señalización de la protección cardíaca y, recientemente, que se localiza en la membrana mito-condrial interna de los miocitos, donde modula la respiración por complejo I. Para investigar si estas funciones están relacionados con las propiedades específicas de esta isoforma, se utilizó un modelo transgénico de ratón en el cual la Cx43 se reemplazó por la Cx32, sin alteraciones de la función ventricular (ecocardiografía).

Los corazones de ratones se extrajeron rápidamente y se perfundieron en un sistema Langendorff. Mediante espe-ctroscopía de RMN se detectó una disminución del contenido de ATP y un aumento del lactato en ratones homo-cigotos Cx43KI32 (p<0,05). Sin embargo, estos mostraron un menor tamaño de infarto tras la IR comparado con los animales heterocigotos y de genotipo salvaje (WT) (13 y 31 % de reducción respectivamente, p<0,05). Asimismo, el precondicionamiento isquémico y farmacológico redujo el tamaño de infarto en los ratones WT (un 24,84 y 26,63 % respectivamente, p<0,05), pero las dos estrategias fueron ineficaces en los corazones homocigotos que, por otro lado, tuvieron una mayor incidencia de arritmias ventriculares durante la IR.

Estos resultados demuestran un efecto modulador de la Cx43 en el metabolismo energético, en la tolerancia a la isquemia, en la arritmogenesis y en la protección por precondicionamiento, previamente desconocido, mediante mecanismos específicos de esta isoforma.

Sara Sánchez. Grup de Recerca en Pneumologia Mecanismos inflamatorios en el asma de origen laboral

15:57- 16:06h

Investigador principal: Dr. Xavier Muñoz Gall Investigadores participantes en el proyecto: MªDolores Untoria, Dra. MªJesús Cruz, Dr. Ferran Morell

Objetivo: Existen múltiples agentes causantes de asma ocupacional (AO). Los mecanismos fisiopatológicos que causan esta patología no están bien establecidos. El objetivo del estudio fue investigar los mecanismos inflamatorios implicados en el asma de origen laboral.

Material y métodos: Se han desarrollado dos líneas de trabajo: a) estudio de inflamación en pacientes con sospecha de AO mediante el análisis de muestras de esputo inducido (EI) y condensado de aire exhalado (CAE), tras la exposición al agente causal; b) desarrollo de un modelo murino que presenta síntomas de AO frente a agentes de bajo peso molecular (BPM).

Resultados: En los pacientes expuestos a agentes de BPM se observó una respuesta inflamatoria neutrofílica (44%), mientras que en los expuestos a agentes de alto peso molecular (APM) la inflamación es principalmente eosinofílica (43%). Esta inflamación se traduce en un descenso del pH del CAE en un 15% de pacientes expuestos a agentes de BPM y en un 42% de los expuestos a agentes de APM. El modelo murino de AO frente a agentes de BPM produce igualmente una inflamación neutrofílica y un incremento de los niveles de IgE total, así como de linfocitos T y B.

Conclusión: El mecanismo por el cual se produce el AO parece ser diferente en función del agente al que los pacientes se expo-nen. El conocimiento del perfil inflamatorio puede permitir el desarrollo de una estrategia terapéutica individual y eficaz.

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Roger Sorde. Grup de Recerca en Malalties infeccioses Epidemiology and Outcome of Hospital-Acquired Catheter-Related Bacteremia (CRB) due to Gram-Negative Bacilli (GNB)

16:06- 16:15h

Investigador principal: Dr. Benito Almirante i Dr. Albert Pahissa Investigadors participants en el projecte: R. SORDE, B. ALMIRANTE, A. M. PLANES, N. FERNANDEZ-HIDALGO, M. PALOMAR, D. RODRÍGUEZ, C. PIGRAU, E. CABRAL, A. PAHISSA.

Background: There is little information on CRB caused by GNB. We describe epidemiology, therapy, and outcome of this infection in hospitalized adult patients. Methods: Continuous, laboratory-based, prospective bacteremia surveillance is ongoing in our hospital. CRB was defined by conventional criteria. All cases were evaluated by infectious diseases specialists. Univariate binary logistic regression analysis was performed to identify prognostic variables. Results: Between January 2007 and December 2009, 107 (20.4%) of 525 CRB cases were caused by GNB. Etiology: Pseu-domonas spp. (24.8%), Klebsiella spp. (24.8%), Enterobacter spp, (23%), and other species (27.4%). Multidrug-resistant organisms (MDRO) were detected in 30 episodes (28%). Catheter type: 84 (78.5%) central venous catheters (CVC), 13 (12.1%) peripherally-inserted CVC, and 10 (9.3%) peripheral venous catheters. Incidence rate: 1.2 episodes per 10,000 patient-days (0.6 in medical wards, 0.8 in surgical wards, and 8.3 in critical care units). Appropriate em-piric antimicrobial therapy was administered in 67 episodes (62.6%). Catheter removal within 72 hours of CRB onset was performed in 102 episodes (95.3%). Healing was achieved in 75 cases (70.1%), relapse in 2 (1.9%), and reinfec-tion in 13 (12.1%). Overall mortality was 15.9%, and early deaths (within 7 days after bacteremia) occurred in 11 cases (10.3%). Variables associated with early mortality: CRB due to MDRO (OR 8.97; 95% CI 2.19-36.72; p=0.002) and catheter retention (OR 6.89; 95% CI 1.01-46.78; p=0.04). Conclusions: CRB due to GNB is an important issue in our setting. Associated early and overall mortality are not negligible. CRB due to MDRO and catheter retention were associated with mortality. * Contribució al projecte de l’investigador predoctoral: Planificació del protocol de recollida de dades, recollida de dades, creació de la base de dades, anàlisi estadística, redacció inicial de resum i pòster per a la seva presentació. * Implicació clínica del projecte: Els resultats ajuden al clínic a conèixer les característiques d’aquesta infecció i els factors que es relacionen amb el seu mal pronòstic amb una implicació pràctica clara (importància de la retirada del catèter).

Francisco Miquel Torres. Grup de Recerca en Expressió gènica i càncer Platelet derived growth factor-b and transforming growth factor-beta cooperate in the induction of epithelial to mesenchymal transition in lung cancer cells

16:15- 16:24h

Investigador Principal: Joan Seoane Altres participants: Ludmila Prudkin, Isabel Cuartas, Sandra Arias

Objectives: TGF-beta is a cytokine with a well known role in the control of epithelial tissue homeostasis. However, TGF-beta, promote tumor progression in certain cancers. One of the effectors of the TGF-beta protumorogenic role is PDGF-B; a cytokine involved in angiogenesis and cell proliferation.

Epithelial to Mesenchymal Transition (EMT) is a process where epithelial cells are transformed into a mesenchy-mal phenotype, related with the acquisition of protumourogenic traits. Here, we study the role of the induction of PDGF-B by TGF-beta in EMT, in lung cancer cells. And we dissect the molecular regulation of PDGF-B and TGF-beta cooperation.

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Methods: We studied the regulation of PDGF-B expression in lung cancer cells and we assessed the effect of PDGF-B on TGF-beta-induced EMT.

Results: We observed that not only TGF-beta induces PDGF-B expression, but the presence of PDGF-B cooperates with TGF-beta to induce its own expression in an autocrine loop.

In addition, we found that PDGF-B and TGF-beta cooperate in the induction of EMT through Snail and Slug, two well known inducers of EMT. Blockade of PDGF-B signal inhibit EMT progression.

We also found that PDGF-B effect in both, generation of the autocrine loop and EMT induction, is mediated by the MAPK/MEK/ERK pathway.

Conclusions: In lung cancer cells, TGF-beta induces PDGF-B and PDGF-B itself facilitates its own expression generating an autocrine loop. PDGF-B promotes TGF-beta induced EMT being a crucial factor in the TGF-beta oncogenic effect.

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Eva Van den Eynde. Grup de Recerca en Malalties hepàtiques Efecto de los Inhibidores de la Transcriptasa Inversa del VIH sobre la actividad anti-VHC de la Ribavirina

16:24- 16:33h

Investigador Principal: Josep Quer Sibila Altres participants: Eva Van den Eynde, Josep Quer, Maria Cubero, Adrià Curran, Maria Homs, Vincenç Falco, Esteban Ribera, Juan I. Esteban, Albert Pahissa, Manuel Crespo

Objetivos: Algunos estudios sugieren que la eficacia del tratamiento anti-VHC es menor en los pacientes co-infectados por VIH que reciben abacavir; se ha postulado que interfiere en la fosforilación de la ribavirina disminuyendo la con-centración de su forma activa. El objetivo es estudiar in vitro el efecto del abacavir sobre la actividad antiviral de la ribavirina. Métodos: Sobre un modelo de cultivo celular (HuH-7clon 9B) transfectado con un replicón subgenómico del VHC se añadió RBV sola o combinada con abacavir, lamivudina o tenofovir. Tras 24 horas de exposición, se extrajo el ARN viral y se cuan-tificó mediante PCR a tiempo real. Los resultados se expresan como media±SD de la cantidad de VHC-ARN producido por célula (log10 UI/célula). Se compararon las medias mediante el test T-student. Resultados: La administración de ribavirina produjo un efecto dosis-respuesta sobre la expresión del ARN viral. La co-exposición con Abacavir no modificó la actividad anti-VHC de la ribavirina (tabla 1). Tampoco se afectó el efecto inhibidor de la ribavirina cuando se co-administró con lamivudina o tenofovir. Conclusiones: En un modelo celular de replicación del VHC, el efecto inhibidor de la ribavirina sobre la expresión del ARN viral no se modificó por la co-administración de abacavir, lamivudina o tenofovir. Tabla 1. Actividad antiviral de la RBV sola y combinada con ABV *

Ribavirina (µM) Abacavir (µM)

0 10 50

0 1.37±0.05

10 1.20±0.08 1.18±0.13 (p=0.840)a 1.20±0.035 (p=0.942)a

50 1.07±0.14 1.15±0.04 (p=0.419)b 0.98±0.21 (p=0.595)b

* Media ± SD de la cantidad de VHC-ARN producido por célula (log10 UI/célula). a En comparación a RBV 10 µM. b En comparación a RBV 50 µM.

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Maribel Valesco. Grup de Recerca en Pneumologia Contenido pulmonar de amianto en España

16:33- 16:42h

Investigador principal: Jaume Ferrer Sancho Investigadores participantes: Mª Dolores Untoria, Mª Angeles Montero y Mª Jesús Cruz Carmona.

Objetivos: La relevancia del amianto como factor de riesgo de cáncer de pulmón ha sido poco estudiada en nuestro medio. El objetivo del presente estudio fue conocer el depósito y tipo de amianto en el pulmón valorado mediante microscopia óptica (MO) y electrónica (ME).

Material y métodos: Población de estudio: 35 autopsias de individuos de población urbana de Barcelona, 89 pacientes con cáncer de pulmón, y 29 autopsias de individuos trabajadores de los astilleros del Ferrol.

Se realizó un cuestionario específico de exposición a amianto y se recogieron muestras de tejido pulmonar de 2 cm3. El recuento de cuerpos de amianto (CA) se realizó mediante MO y el de fibras de amianto mediante un ME de rast-reo. La identificación del tipo de amianto se realizó por análisis de la energía dispersiva de rayos X (EDXA).

Resultados: Los valores de referencia en población no expuesta de Barcelona se han establecido como <133±200 CA/g tejido seco. Se obtuvieron niveles de CA superiores a 1000 CA/g tejido seco en el 3% de las autopsias urbanas, el 15% de los cánceres de pulmón y el 86% de los astilleros. El tipo de fibras halladas en el pulmón correspondía a crocidolita, antofilita y tremolita. El 35% de los pacientes con cáncer de pulmón refirieron exposición laboral a amianto mediante cuestionario.

Conclusiones: Un porcentaje considerable de pacientes con cáncer pulmonar presentan valores elevados de amianto en pulmón. La determinación del amianto en pulmón tiene utilidad para establecer la etiología y las consecuencias medico-legales de la enfermedad.

Ana Villar. Grup de Recerca en Pneumologia Estudios de inflamación bronquial mediante métodos semi-invasivos en las neumo-nitis por hipersensibilidad

16:42- 16:51h

Investigador Principal: Dr. Xavier muñoz Gall Investigadores participantes: Dr. Ferrán Morell, Dra. Mª Jesús Cruz, Dra. Susana Gomez-Olles, Sara Sanchez-Vidaurre, Mª Dolores Untoria.

Introducción: El diagnóstico de las neumonitis por hipersensibilidad (NH) requiere en ocasiones de técnicas diagnósticas invasivas, a veces impracticables debido al deterioro de la capacidad funcional del paciente. Estudiamos la utilidad del empleo de técnicas semi-invasivas de estudio de la inflamación pulmonar en su diagnóstico.

Material y métodos: Se estudian 35 pacientes diagnosticados de NH durante los años 2004-2009 y en los que durante el proceso diagnóstico se practicó una prueba de metacolina en el contexto de una prueba de provocación bronquial específica (PPBE). En 23 pacientes además se realizó estudio de esputo inducido (EI) 24h pre y/o post PPBE.

Resultados: La prueba de metacolina fue positiva en un 34% de los pacientes. Se observaron diferencias significativas en los pacientes con prueba positiva en el grado de hiperrespuesta en relación al agente causal, con una PC20 significativa-mente inferior (p= 0.013) en las NH producidas por hongos.

El recuento celular del EI mostró una inflamación neutrofílica en la mayoría de los pacientes. Tras la PPBE observa-mos un incremento en las cifras de neutrófilos en EI, especialmente en las NH por hongos (p= 0.025). No encontra-mos correlación entre los datos del EI y el resto de exploraciones.

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Conclusiones: Un 34% de los pacientes con NH pueden tener HRB y ésta parece ser más grave en aquellos pacientes cuyo agente causal son los hongos. Además, en las NH causadas por hongos, existe una inflamación neutrofílica basal en el EI, que se incrementa de forma significativa tras la exposición al agente causal en el contexto de una PPBE.

Andreea Ciudin. Grup de Recerca en Diabetis i Metabolisme Evaluación de un método no invasivo para determinar la glucemia basado en foto-pletis-mografía acoplada a un sistema de redes neuronales

8:30- 8:39h

Investigador Principal: R. Simó Investigadores participantes en el proyecto: A. Ciudin, C. Hernández, R. Simó Objetivos: Evaluar si un método no invasivo para determinar la glucemia tiene la misma fiabilidad que los glucómetros actual-mente utilizados para el autoanálisis de la glucemia. Material y métodos: Se han incluido de forma prospectiva 253 pacientes diabéticos a los que se les ha comparado la glucemia estimada con el método no invasivo a estudio (dispositivo digital a modo de pinza, similar a un pulsioxímetro) con la obtenida simultáneamente en sangre venosa mediante el método de referencia de la glucosa-oxidasa (gold standard). Para inferir los niveles de glucosa en sangre mediante redes neuronales se han incluido en el modelo de predicción las siguientes variables: edad, sexo, altura, peso, presión arterial, frecuencia cardiaca, saturación de oxígeno. Los datos se han analizado mediante análisis multivariante y se representan en el diagrama de dispersión de Clarke.

Resultados: El 95.5% de los valores de glucemia estimados por el método no invasivo se situaron en zonas de alto rendimiento diagnóstico (A y B de los diagramas de Clarke). Únicamente en pacientes con obesidad mórbida e hipertensos el rendimiento diagnóstico desciende a niveles escasamente aceptables en la práctica clínica. Conclusiones: El método no invasivo testado es fiable para inferir los valores de glucemia y puede sustituir a los actuales glucómet-ros, con la consiguiente mejoría de la calidad de vida de los pacientes diabéticos. Además, ello supondría un gran impacto en los recursos sanitarios ya que reduciría de forma significativa el uso de tiras reactivas.

Jaume Francisco. Grup de Recerca en Patologia cardiocirculatòria Predictor role of tissue factor pathway inhibitor in the extension of myocardial infarction undergoing primary angioplasty

8:39- 8:48h

J Francisco, A Sambola, J Figueras, B García Del Blanco, G Martí, JA Barrabés , J Cortadellas, E Domingo, J Candell, I Roca, X Millán, D Quiroga, RM Lidón, D García-Dorado

Tissue factor contributes to thrombosis following plaque disruption in acute coronary syndromes. This study was designed to assess: 1) the role of circulating tissue factor activity (TF a), tissue factor antigen (Ag TF) and tissue factor pathway inhibitor antigen (Ag TFPI) levels in myocardial damage in patients with a first ST-elevated myocardial infarc-tion (STEMI) receiving a primary percutaneous coronary intervention (PCI).

Methods and results: The plasma TFa, Ag TF and Ag TFPI levels were determined in plasma samples taken from 95 patients (77 m/ 18 f; age 61.2±12.8 years) with a first STEMI with TIMI 0, before to open the culprit artery, at discharge, one month and at 6 months after discharge. Mean of clinical follow-up was 1.5±1 years. Those markers were also determined in 95 healthy donors matched by sex and age free from cardiovascular factors risk. Patients with STEMI showed a higher circulating Ag TF and Ag TFPI levels and lower TFa than healthy donors. At admission, TFa was lower and Ag TFPI higher than those determinations at discharge, 1 and 6 months. However, Ag TF levels were similar at discharge and decreased significantly at 1 and 6 months (Table 1). There was a good correlation between TFa, AgTF and AgTFPI. AgTFPI ≥50th percentile (≥343.15 ng/ml) plasma levels at admission were associated with a significant higher levels of CKMB mass (p=0.04) and troponin (p=0.01).

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Conclusions: Our results demonstrated that plasma TFa levels are low and AgTFPI elevated in patients with STEMI before to open the culprit artery. Patients with STEMI and heightened AgTFPI levels are at risk for an increased myocardial damage.

Admission Discharge 1-month 6 months

TFa (pM) 18.9±11.4 33.9±12.9* 28.6±20.6* 29.0±21.2*

AgTF (pg/ml) 21.8±21.2 21.0±25.0 18.4±15.4* 16.8±13.7*

AgTFPI (ng/ml) 506.6±415.3 189.3±93.4* 170.1±88.6* 173.5±91.2*

(*) denotes: p<0.01. Values are referred to differences between plasma admission levels.

Sandra Leal. Grup de Recerca en Sèpsia i infecció respiratòria greu Influencia de la disfunción primaria del injerto sobre mortalidad precoz en trasplante pul-monar

8:48- 8:57h

Investigador Principal: Judit Sacanell; Joan Ramon Masclans Co-investigadores: Oriol Roca

La disfunción primaria del injerto (DPI) es una de las principales complicaciones inmediatas de los pacientes trasplan-tados pulmonares (TxP).

Objetivos: Estudiar la incidencia de DPI en los pacientes TxP de nuestro Centro y su relación pronóstica.

Metodología: Se han registrado de forma consecutiva a lo largo de 16 meses los TxP ingresados en cuidados intensivos. Se han analizado las variables relativas a los receptores relacionadas con el desarrollo de DPI severa y con la mortalidad pre-coz a 28 días post-trasplante a través de estudio estadístico mediante el paquete estadístico SPSS 18.

Resultados: Se han podido estudiar 62 pacientes TxP (53.2% H, 47.45±12.32 años). La DPI severa es una entidad frecuente (34.5%), relacionándose con hipertensión pulmonar previa al trasplante, la utilización de circulación extracorpórea (CEC), tiempo de isquemia prolongado y ser receptor de un trasplante bipulmonar. La mortalidad global a los 28 días de los pacientes TxP es del 11.3%, siendo del 15.6% en los que presentan DPI severa vs del 4.2% en aquellos que pre-sentan DPI leve; relacionándose con la presencia de DPI a las 48h, hipertensión pulmonar pre-trasplante, la utiliza-ción de CEC, una relación PaO2/FiO2 baja intraquirófano y la persistencia de la utilización de óxido nítrico inhalado a las 48 h del postoperatorio.

Conclusiones: La DPI es una complicación que afecta a un tercio de los TxP, cuya presentación se relaciona con un peor pronóstico.

Ana Parra. Grup de Recerca en Sèpsia i infecció respiratòria greu El recompte de CD4+ no es correlaciona amb l’ evolucó del pacients amb VIH I Pneumonia Adquirida a la Comuntat (CAP)

8:57- 9:06h

Objectius: Establir una possible correlació entre el recompte de CD4+, la càrrega viral i el tractament antiretroviral (HAART) i l’ evolució dels pacients VIH hospitalitzats diagnòsticats de CAP.

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Methods: Estudi retrospectiu. Pacients adults hospitalitzats, inclosos a l’ estudi CAPO (CAP Organization). Examinant-se el temps transcorregut fins a l’ estabilitat clínica (TCS, time to clinical stability), número de dies d’ ingrés (LOS, Length of stay ), i possibles causes de mortalitat. Els mètodes estadístics utilitzats són el models de regressió logística, l’ ànálisis multivariable de Cox, i análisis de regressió de Cox. Results: Del total de 127 pacients inclosos, la mortalitat als 28 dies, va ser de 28 pacients. La mitjana del recompte de CD4+ en el moment diagnóstic dels supervivents va ser de 230.1 + 207.6, i dels no supervivents de 239.6 + 286.4 (p = 0.315). La carrega viral mitjana era de 159.420 cp/ml i de 173.438 cp/ml (p=0.84), respectivament. El risc de mortali-tat ajustat per recompte de CD4 + va ser no significatiu (p =0.053), d’ igual manera que la càrrega viral ( p=0.893). No es va demostrar una diferencia estadísticament significativa en ajustar els LOS i TCS en funció del recompte de CD4+ i càrrega viral (p= 0.156). Conclusions: El recompte de CD4+ en pacients VIH hopsitalitzats amb diagnóstic de CAP, després de ser ajustat pels possibles fac-tors de confusió, no es predictiu de l’ evolució.

Purificación Pérez. Grup de Recerca en Sèpsia i infecció respiratòria greu Altos flujos de gas en pacientes con insuficiencia cardíaca estable

9:06- 9:15h

Investigador Principal: Oriol Roca1. Director del Proyecto: Joan Ramón Masclans1. Investigadores participantes: Lourdes Pérez1, José Francisco Rodríguez2.

1 Servicio de Medicina Intensiva del H. Universitario Vall d’Hebron. 2Servicio de Cardiología del H. Universitario Vall d’Hebron. Gabinete de ecocardiografía.

Hipotesis: La oxigenoterapia de alto flujo mediante cánula nasal (CNAF) podría producir efectos hemodinámicos beneficiosos en pacientes con insuficiencia cardiaca (IC) estable, disminuyendo el retorno venoso (RV) sin provocar alteraciones en el gasto cardíaco (GC).

Objetivos: Analizar los cambios ecocardiográficos producidos por la administración de CNAF en pacientes con IC estable, medi-ante ecocardiografía transtorácica.

Material y métodos: Estudio intervencional, donde se analizaron los cambios hemodinámicos provocados por la utilización de CNAF en la IC estable. Realización de cuatro ecocardiografías (basal (respirando aire ambiente), CNAF 20 lpm, CNAF 40 lpm y post-CNAF) donde se midieron diferentes parámetros hemodinámicos. El estudio se consideró con respuesta positiva si la disminución del colapso inspiratorio de la vena cava inferior (VCI) es > 20%.

Resultados: n=5. Edad media 57 años. 3H. 4 cardiopatía dilatada. Se observó una disminución del colapso de la VCI con la admin-istración de CNAF que ha pasado de 35 a 18 (20lpm) y 11% (40lpm) (p<0,05), volviendo al basal al retirar la CNAF. No evidenciamos diferencias significativas en el resto de parámetros hemodinámicos.

Conclusiones: El tratamiento con CNAF en pacientes con IC podría generar cambios hemodinámicos beneficiosos, mediante una disminución de la precarga, sin producir una disminución del GC.

Contribución al proyecto: Inclusión de pacientes, recogida de datos, aplicación del tratamiento y monitorización, y análisis de resultados.

Implicación clínica: La CNAF podría ser útil en la insuficiencia respiratoria por edema pulmonar cardiogénico, no sólo por la mejoría en la oxigenación, sino también gracias a los posibles cambios hemodinámicos.

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Anna Sabate. Servei de Pediatria Altos flujos de gas en pacientes con insuficiencia cardíaca estable

9:15- 9:24h

Investigador/a principal: DC Albert Brotons Investigadors participants en el projecte: P Betrián Blasco, J Girona Comas, VM Huertas Quiñones, M Rissech Payret, L Jimenez Montañés, S Uriel Prat, JM Carretero Bellón, F Prada Martínez, Rosa Collell

Contribució en el projecte de la Resident Anna Sabaté Rotés: La participació en el projecte ha estat completa des del començament. Un cop decidit l’objectiu principal i les vari-ables a estudiar d’acord amb l’investigador principal, la principal tasca ha estat la de coordinar els diferents partici-pants, elaborar i completar la fulla de recollida de dades i, posteriorment, fer l’anàlisi estadístic.

Publicacions: El present treball no ha estat encara publicat. S’ha presentat com a comunicació oral al “VIII Congreso Nacional de Cardiología Pediátrica y Cardiopatías Congénitas”, 2010.

Resum: Estudio multicéntrico de las miocardiopatías no compactadas: características clínicas, evolutivas y pronósticas en edad pediátrica.

Introducción: La Miocardiopatía no compactada (MNC) es una enfermedad congénita infrecuente pero su diagnóstico se está incre-mentando en los últimos años coincidiendo con un mejor conocimiento de la entidad.

Métodos: Estudio multicéntrico que incluye pacientes pediátricos diagnosticados de MNC según los criterios ecocardiográficos de Chin. Se ha revisado las características clínicas, ecocardiográficas, RNM, complicaciones y tratamientos recibidos.

Resultados: De un total de 22 pacientes, 13 niñas y 9 niños, con una edad media al diagnóstico de 5 años y 9 meses (rango desde el nacimiento hasta los 16 años), 14 (64%) se diagnosticaron de forma casual, 5 (23%) por insuficiencia cardiaca, 2 (9%) por arritmias y 1 a raíz de un accidente vascular cerebral. En cuatro se detectó una anomalía cardiaca in-traútero y tres tienen antecedentes familiares. La localización de las trabéculas ha sido predominantemente en ápex, afectando también en 7 casos la pared libre del VI y en 2 el VD. Los hallazgos en la RNM han sido congruentes. Buena evolución en 40% de los pacientes (sin complicaciones y estado funcional I NYHA), en 2 se colocó un desfibrilador automático implantable (DAI), 12 han presentado insuficiencia cardiaca congestiva (ICC), 1 presentó un accidente vas-cular cerebral y dos fallecieron. El tratamiento actual que reciben consiste en una combinación de carvedilol, IECA’s y AAS, variable en cada paciente.

Conclusiones: La MNC es una entidad de diagnóstico en la infancia que podría detectarse intraútero. La evolución es variable según las complicaciones que presentan aunque parece mejor que lo descrito inicialmente en la literatura.

Fernando Salvador. Grup de Recerca en Malalties infeccioses Trasplante hepático de donante seropositivo para enfermedad de Chagas a receptor seronegativo

9:24- 9:33h

Investigador principal: Óscar Len Abad. Investigadores participantes: Israel Molina, Silvia Sauleda, Elena Sulleiro, Itxarone Bilbao, Lluis Castells, Teresa Pont, Joan Gavaldà, Albert Pahissa.

Objetivos: La escasez de órganos para trasplante ha estimulado el uso de injertos de donantes con infecciones latentes poten-cialmente transmisibles al receptor. Presentamos la experiencia de nuestro centro en relación a la enfermedad de Chagas en el donante y sugerimos una aproximación respecto a la profilaxis y el seguimiento del receptor.

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Material y métodos: Descripción de dos casos de trasplante hepático de donante seropositivo para enfermedad de Chagas a receptor seronegativo. Revisión de la literatura mediante búsqueda en MEDLINE de 1984 a 2009 con los criterios: “Chagas disease”, “Liver transplantation”. Resultados: Caso 1. Mujer de 62 años trasplantada por cirrosis hepática alcohólica e infección por VHC y hepatocarcinoma. Inició inmunosupresión con micofenolato, tacrolimus y corticoides. La donante era natural de Bolivia. Se inició profilaxis con benznidazol 100mg/8 horas v.o. durante 60 días. El seguimiento se practicó mediante control serológico (IFI y EIA) y detección de DNA por PCR los días 1, 7, 14, 30, 60 y 180 postrasplante. Todas las determinaciones fueron nega-tivas a excepción de las dos primeras por EIA . La paciente falleció a los 8 meses por recidiva de hepatocarcinoma. La necropsia no mostró evidencia de infección por Trypanosoma cruzi.

Caso 2. Varón de 63 años trasplantado por cirrosis alcohólica. El donante era natural de Paraguay. Inició inmunosu-presión con micofenolato, tacrolimus y corticoides y profilaxis con benznidazol 100 mg/8 horas v.o durante 60 días. Se realizó control serológico por EIA y detección de DNA por PCR los días 1, 7, 14, 30, 45, 60, 90, 120, 180 y 270; las serologías se han mantenido positivas, mientras que todas las PCR han resultado negativas. El paciente no ha presen-tado ninguna complicación derivada del trasplante.

Revisión de la literatura (tabla). Bajo profilaxis con benznidazol no se ha demostrado transmisión de la enfermedad.

Conclusiones: 1.- Se debe realizar cribado de la enfermedad de Chagas a todo donante procedente de área endémica.

2.- La seropositividad para la enfermedad de Chagas no es un criterio de exclusión para la donación hepática.

3.- La profilaxis con benznidazol en pauta de 100 mg/8 horas v.o. durante 60 días y el seguimiento postrasplante me-diante PCR y serologías seriadas son efectivos y seguros en la prevención de la transmisión de la enfermedad.

Edad Sexo Enfermedad hepática

Profilaxi (Benzonida-

zol)

Prueba diag-nóstica

Detección de Chagas

Seguimiento (meses)

Evolución

32 Mujer - NO Hemocultivo SI 4 Fallecida por sepsis

33 Mujer Autoinmune NO IFI, EIA, parasitemia

(Strout)

SI 18 Fallecida por sepsis

- - - NO IFI y PCR NO 18 Vivo

46 Varón Infección VHC SI Hemagluti-nación y EIA

NO 17 Vivo

54 Varón Infección VHC SI TESE-blot NO 59 Vivo

39 Varón Colangitis esclerosante

primaria

SI TESE-blot NO 23 Vivo

47 Mujer Cirrosis biliar primaria

SI TESE-blot NO 79 Viva

42 Mujer Alcohol SI Parasitemia NO 3 Fallecida por sepsis

47 Mujer Déficit de alfa-1 anti-

tripsina

SI Parasitemia NO 4 Fallecida por TBC pulmonar

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Mónica Sánchez. Grup de Recerca en Pneumologia Supervivència dels malalts amb Esclerosi Lateral Amiotròfica (ELA) tractats amb suport ven-tilatori domiciliari

9:33- 9:42h

Investigador principal: Dr. Jaume Ferrer Investigadors participants: Dr. Sergi Martí, Dra. Ángela Pinazo, Dra. Mercedes Pallero, Dra. Esther Rodríguez, Dr. Xavier Muñoz, Sra. Mª Antònia Ramon, Dr. Josep Gámez.

Objectiu: Analitzar la influència de les variables clíniques en la supervivència dels malalts amb ELA tractats amb ventilació mecànica domiciliària (VMD). Material i mètodes: Es van incloure tots els malalts amb ELA sotmesos a VMD a l’Hospital Vall d’Hebron entre 1997 i 2009. Els malalts van ser seguits periòdicament i les variables clíniques a principi de tractament van ser enregistrades. Es va analitzar la supervivència mitjançant el mètode de Kaplan-Meier tenint en compte el compliment terapèutic i l’accès de la ventilació. Resultats: Es van incloure 59 malalts, 26 homes, amb una edat mitjana de 61.4 ± 10 anys i una FVC% 35.9 ±13. La presentació clínica va ser espinal (73%), bulbar (17%) i respiratòria (10%). La VMD es va instaurar per hipercàpnia aïllada (5%), símptomes (30%) o totes dues alteracions (65%). L’accés a la via aèria va ser per traqueotomia en 7 pacients. Els malalts estables a l’inici de la VMD van complir més el tractament (p 0.035). Al final del seguiment havien mort 51 malalts (86%). La supervivència mitjana va ser de 1.6 mesos (IC 95%: 0-7.5) pel grup menys complidor de VMD (< 4 hores/dia) i de 15.9 mesos (IC 95%: 14.3-17.5) pel grup complidor (p< 0.001). Els malalts ventilats per traqueotomia van viure 38.2 mesos (IC 95%: 26.9-49.5), un temps superior als ventilats per via no invasiva (p=0.001). Conclusions: El suport ventilatori aconsegueix millorar la supervivència dels malalts amb ELA que pateixen insuficiència venti-latòria.

Albert Alonso Tello. Grup de Recerca en Patologia cardio-circulatòria Myocardial area at risk quantification: comparison of coronary angiographic scores and SPECT

9:42- 9:51h

Authors: Albert Alonso Tello, José F Rodríguez Palomares, Gerard Martí Aguasca, Santiago Aguadé Bruix, V Aliaga, P Mahía, Teresa González Alujas, Jaume Candell, Arturo Evangelista, David García Dorado.

Background: Nuclear perfusion imaging with a technetium tracer injection (SPECT) before reperfusion has been the most widely practiced technique for assessing the area at risk (AAR) and has been successfully used to compare the efficacy of various reperfusion strategies in patients with an acute myocardial infarction (AMI). The BARI and APPROACH scores are angiographic methods widely used to provide a quick estimation of the AAR, but they have not been directly validated.

Purpose: To compare the AAR determined by SPECT and the two angiographic scores: BARI and APPROACH in the setting of patients with an AMI.

Methods: In a prospective study, 30 patients with a first successfully reperfused ST-segment elevation AMI were included. The 99mTc-labelled compound was injected before the inflation of the balloon during percutaneous coronary angioplasty in patients with TIMI grade flow 0. Maximal contour of regions of hypoperfusion corresponding to each coronary artery occlusion were delineated over the polar map of 17 segments, and compared with the estimated AAR de-termined by two experienced hemodinamists using both angiographic scores (BARI and APPROACH). The collateral blood supply was measured using the Rentrop scale.

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Results: The mean percentage AAR in SPECT was 40% (SD: 11%). The Rentrop scale was ≤ 1 in 90% of the patients. There was an excellent interobserver agreement between the 2 hemodinamists for the estimation of the angiographic scores (BARI: 0,8 p<0,001 and APPROACH: 0,9 p<0,001). There was a strong correlation between the BARI and APPROACH scores (r = 0,9; p<0,001). There was also a good correlation between BARI vs SPECT and APPROACH vs SPECT to estimate the AAR (r =0,8; p<0,001 and r= 0,7; p<0,001 respectively). Better correlations were observed for anterior AMI (r=0,9 p<0,001 with BARI, r=0,8 p=0,001 with APPROACH) rather than other locations (r=0,8 p=0,001 with BARI, r=0,6 p=0,05 with APPROACH).

Conclusions: The BARI and APPROACH angiographic scores constitute excellent methods for the estimation of the AAR in current clinical practice with more accurate results when used in anterior infarctions.

Ana González. Grup de Recerca en Fisiologia i fisiopatologia digestiva Long-term crowding stress modifies intestinal lymphocyte profile and induces mast cell-dependent barrier dysfunction

10:00- 10:09h

1Ana M. González-Castro, 1María Vicario, 1Carmen Alonso, 2Mar Guilarte, 1Cristina Martínez, 1Beatriz Lobo, 1Mer-itxell Guilà, 1Marc Pigrau, 1Fernando Azpiroz, 1Javier Santos.

1Neuro-immune-gastroenterology Laboratory, Digestive Diseases Research Unit, Department of Gastroenterology, 2Allergy Unit. Institut de Reçerca Hospital Universitari Vall d’Hebron. Universitat Autònoma de Barcelona, Depart-ment of Medicine, CIBEREHD. Barcelona, Spain.

Background & aims: Life stress and mucosal inflammation may influence symptom onset and severity in irritable bowel syndrome (IBS), presumably in connection with dysregulated intestinal barrier. Crowding is a validated animal model of psychosocial stress, whose consequences on gut physiology remain unexplored. We studied intestinal functional disturbances and immune components of the intestinal barrier after long-term crowding stress. Methods: WKY rats were submitted to crowding stress (CS-8rats/cage) or sham-crowding stress (SC-2rats/cage) for 15 days. At the end of the stress or sham protocols, plasma corticosterone was measured and jejunal and colonic intraepithelial and Peyer’s patches leukocytes were isolated and phenotypically characterized by flow cytometry. Mast cells were identified by immunohistochemistry. Furthermore, macromolecular permeability was evaluated in jejunal transmural segments after mast cell stabilization with ketotifen or treatment with ML-7, a myosin light chain kinase inhibitor. Results: Crowding stress markedly reduced body weight gain and increased plasma corticosterone in the intestinal mucosa. The percentage of intraepithelial CD45+CD3+ was significantly reduced by stress in both, the jejunum (CS:43.3 ±1.6%;SC:48.2±1.7%;P<0.05) and the colon (CS:37.8±2.7%;SC:44,7±1.4%;P<0.05). Peyer’s patches’ CD4+CD25+ population was significantly increased (CS:11.9±2.5%;SC:6.5±0.7%;P<0.05). Mast cell hyperplasia developed only in the colonic mucosa (CS:62.8±10.7;SC:32.9±4.56 cells/mm2;P<0.05). Intestinal barrier disruption was evidenced in the CS group (CS:17.9±2.2;SC:5.1±2.8 pmol/cm2/h;P<0.05) and was reduced by pretreatment with ketotifen (12.2±1.5;P<0.05) and ML-7 (10.5±2.6;P<0.05). Conclusions: Chronic psychosocial stress acts as a triggering factor for the development of mucosal low-grade inflammation, mast cell hyperplasia and activation, and barrier dysfunction. Unbalanced lymphocyte profile at inductive and effector sites of the gut immune system may compromise local immune responses in patients suffering from persistent psychoso-cial stress, such as IBS.

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Dolores Rodríguez. Grup de Recerca en Malalties infeccioses Clostridium difficile Associated Disease (CDAD): Results from a Population-Based Surveil-lance in Barcelona, Spain

10:09- 10:18h

Investigador principal: Dr A. Pahissa Investigadors participants: D. Rodríguez, B. Almirante, R. Bartolomé, V. Pomar, B. Mirelis, A. Soriano, L. Sorlí, J. Martínez-Montauti, J. Vila, M. Lung, A. Pahissa and the Barcelona Clostridium difficile Project Study Group. Barce-lona, Spain. Objective: A population-based active prospective surveillance for CDAD was conducted in Barcelona to determine its incidence, epidemiology and predictors of unfavourable outcome.

Methods: All patients with CDAD in 2009 in Barcelona (1,621,537 population) were included. Case: a surveillance area resident with diarrhea or toxic megacolon diagnosed by conventional methodology. MICs were determined by E-test method. Predictors of unfavorable outcome (relapses, colectomy requirement and death within 30 days after diagnosis) were determined.

Results: 365 episodes of CDAD in 361 pts were detected, for an annual incidence of 22.5 cases/105 person-y, 1.2 cases/103 hospital-discharges and 2 cases/104 pt-d. Mean incidences varied widely among pt age group (67 cases/105 in >65 y, 12.3/105 among 15-65 y and 8.1/105 in < 15 y.). 73% of the cases were healthcare facility (HCF)-onset, 15% community-onset, 9% HCF-associated onset and 3% indeterminate. All the 170 toxigenic strains analyzed were fully–susceptible to amoxcicillin-clav., metronidazole, vancomycin and tigecycline. Resistance to erythromycin, clindamycin, rifampin, ciprofloxacin and moxifloxacin was found in 39%, 57%, 27%, 99%, and 39% of the isolates, respectively. Only1 strain toxin A, B and binary positive with a deletion in tcdC was isolated. Outcome: 66% pts were cured, 18% relapsed, 15% died and 1% needed colectomy. In multivariable analysis, predictors of unfavorable outcome were leucocytosis >15X103 cells/ml (OR:1.95;IC95%:1.14-3.33;p=0.01), previous proton pump inhibitors (PPI) use (OR: 1.93;IC95%:1.06-3.50;p=0.032) and age >65 y (OR:1.91;IC95%:1.15-3.18; p=0.012).

Conclusions: Overall annual incidence of CDAD in Barcelona was 22.5 cases/105 person-y and varied widely among pts age group. Predictors of unfavourable outcome were leucocytosis >15X103 cells/ml, prior PPI use and age > 65 y.

Contribució al projecte de l’investigador postdoctoral: Com a investigador post-doctoral he participat en el disseny de l’estudi i elaboració de la base de dades. Recollida de les dades clíniques i anàlisis de les mateixes amb l’elaboració final de l’abstrac presentat Implicació clínica del projecte: Enfront l’augment de la incidència d’episodis de diarrea associada a Clostridium difficile (DACD) detectat durant els últims anys a Nord Amèrica i Europa, la nostra línea de recerca té l’objectiu de conèixer la situació d ‘aquesta malaltia al nostre entorn i establir les taxes d’incidència de la malaltia a nivell poblacional i hospitalari. Descriure la seva epi-demiologia i determinar el patró microbiològic dels aïllats de C. difficile a la ciutat de Barcelona. Finalment pretenem establir els factors predictius de mala evolució amb d’intenció de poder incidir sobre aquells que siguin modificables i millorar d’aquesta manera el pronòstic de la malaltia

Nicolás Fissolo. Grup de Recerca en Neuroimmunologia clínica El tratamiento con vacunas de ADN que codifican para MOG previene y mejora la encefalo-mielitis autoinmune experimental

10:18- 10:27h

Investigador Principal: Manuel Comabella Investigadores Participantes: Carme Costa, María José Mansilla, Xavier Montalbán

Objetivos: Ensayos clínicos recientes con vacunas de ADN en esclerosis múltiple (EM) han mostrado resultados prometedores, mejorando la actividad de la enfermedad. Nuestro objetivo fue evaluar la eficacia de vacunas de ADN que codifican para diferentes autoantígenos de la mielina como tratamiento profiláctico y terapéutico de la encefalomielitis autoin-mune experimental (EAE).

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Métodos: La EAE se indujo en ratones mediante la inmunización con MOG35-55. Para el tratamiento profiláctico, se adminis-traron 100μg de plásmido que codifica para MOG, PLP, o MBP, los días 28 y 14 previos a la inducción de la EAE. En el tratamiento terapéutico, la vacunación se realizó tras la aparición de los signos clínicos (día 9 postinmunización) y se administró una segunda dosis pasadas 2 semanas. La progresión de la enfermedad se evaluó diariamente mediante la asignación de puntuaciones de acuerdo a los signos clínicos objetivados en los animales.

Resultados y conclusiones: En comparación con los ratones del grupo control, únicamente la vacunación con MOG demostró eficacia significa-tiva en la reducción de los signos clínicos de la enfermedad, tanto cuando se administró de manera profiláctica como terapéutica. El tratamiento profiláctico con MOG retrasó el inicio de la enfermedad (p = 0,006) y disminuyó la grave-dad de la misma (p = 0,002). Además, el tratamiento terapéutico con MOG mejoró los signos clínicos de la EAE (p = 0,031). Estos resultados podrían ser el punto de partida para el diseño de nuevos tratamientos en pacientes con EM basados en vacunas con MOG.

Mª Mar Coll. Grup de Recerca en Malalties hepàtiques The oral administration of a norepinephrine precursor, droxidopa, Greatly improves hemo-dynamic alterations and diuresis of portal Hypertensive rats

10:27- 10:36h

Mar Coll, Imma Raurell, Nahia Ezkurdia, Sílvia Cuenca, María Martell and Joan Genescà Droxidopa is a synthetic aminoacid that is converted to norepinephrine (NE) by dopa decarboxylase (DDC) and has been useful in autonomic disorders with orthostatic hypotension. We have evaluated whether the oral administration of droxidopa improves the hemodynamic alterations of portal hypertensive rats in PVL (portal vein ligation) and BDL (bile duct ligation) rats. Methods: Droxidopa (25 mg/Kg) or vehicle were orally given to PVL (n=7; n=9) and BDL rats (n=6, n=6). Sham rats also received droxidopa (50mg/Kg; n=5) and vehicle (n=5). Carbidopa (peripheral DDC inhibitor, 30mg/Kg,i.p) was given 30 min be-fore droxidopa to 4 PVL rats. Hemodynamic parameters and diuresis were registered for 2 hours and NE plasma levels measured 40 min after treatment.

Results: In PVL rats, droxidopa produced a significant and maintained increase in mean arterial pressure and mesenteric resistance, a decrease in mesenteric blood flow and nonsignificant changes in portal pressure compared to vehicle. Administration of Droxidopa in BDL rats caused the same beneficial hemodynamic effects observed in PVL, accom-panied by a significant decrease in portal blood flow and an increase in intrahepatic vascular resistance. Droxidopa significantly increased 2-hour diuresis in both PVL and BDL rats and produced a slight non-significant changes in renal artery blood flow. Mean NE plasma levels increased 10 times after droxidopa therapy compared to vehicle. Carbidopa blunted the hemodynamic response to droxidopa and the increase of NE.

Conclusion: The acute oral administration of droxidopa markedly improves the hemodynamic alterations and diuresis in portal hypertensive rats. Droxidopa is a promising new therapy for the hemodynamic and renal alterations of cirrhosis.

Tomàs Pinós. Grup de Recerca en Patologia neuromuscular i mitocondrial Estudi del caràcter patogènic d’una nova mutació (m.5636T>C) en el gen mt-tRNAAla en un pacient amb oftalmoplègia externa progressiva.

10:36- 10:45h

Investigador principal: Antoni L. Andreu Altres investigadors participants: Mario Marotta, Eduard Gallardo, Isabel Illa, Jorge Díaz-Manera, Emiliano Gonzalez-Vioque, Elena García-Arumí, Ramon Martí.

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Introducció: L’oftalmoplègia externa progressiva (PEO) és sovint deguda a una disfunció mitocondrial, i s’ha associat principal-ment a grans reordenaments en el DNA mitocondrial (mtDNA), com ara delecions simples o múltiples. Existeixen casos de PEO esporàdics, així com d’herència autosòmica dominant o recessiva, tot i que també s’han observat casos d’herència materna, en aquest cas deguts a mutacions puntuals en el mtDNA. En aquest treball hem estudiat una mutació nova en el gen tRNAAla del mtDNA (m.5636T>C), present en un pacient amb PEO, per tal de demostrar el seu caràcter patogènic.

Mètodes: Mitjançant microdissecció làser hem obtingut mostres de fibres musculars citocrom c oxidasa (COX) positives i nega-tives, i hem mesurat la càrrega mutacional diferencial del canvi m.5636T>C mitjançant PCR-RFLP. A més, hem fet un estudi in silico de conservació i conseqüències de la mutació sobre les estructures secundària i terciària del tRNAAla.

Resultats: La càrrega mutacional de m.5636T>C és clarament superior en fibres musculars COX negatives a la de les fibres COX positives. Aquest fet, sumat a les potencials conseqüències deletèries de la mutació sobre l’estructura ter-ciària canònica del tRNAAla, i l’alt grau de conservació de la base afectada, confirma el caràcter patogènic del canvi m.5636T>C.

Judit Anido. Grup de Recerca en Expressió gènica i càncer Estudi del caràcter patogènic d’una nova mutació (m.5636T>C) en el gen mt-tRNAAla en un pacient amb oftalmoplègia externa progressiva.

10:45- 10:54h

Principal Investigator: Joan Seoane Other researchers in the project: Andrea Sáez-Borderías, Alba Gonzàlez-Juncà, Laura Rodón, Gerard Folch, Maria A. Carmona, Rosa M. Prieto-Sánchez, Ignasi Barba, Elena Martínez-Sáez, Isabel Cuartas, Carolina Raventós.

Objectives: GBM is one of the most aggressive and recalcitrant tumors. Glioma-initiating cells (GICs), also called glioma stem cells, are responsible for tumor initiation, relapse and therapeutic resistance. GICs are then critical therapeutic targets. Our objective consisted in understanding the biology of GICs. We assessed the effect of TGFβ on GICs and evaluated how TGFβ inhibitors, currently under clinical development in our Hospital, target the GIC compartment in human glioblastoma (GBM) patients.

Material and Methods: Patient-derived tumor specimens were used to determine the gene responses to TGFβ inhibition by microarray analysis, which include Id1 and Id3 transcription factors. Patient-derived GBM neurosphere cultures, enriched for GICs, were developed to analyze the role of Id1 and Id3 in vitro. A glioma mouse model was generated by the inocu-lation of GBM neuroespheres in the brain of immunocompromised mice and effects of the TGFß pathway inhibition on tumor development were determined. Finally, we characterized the expression of Id1, Id3 and CD44 in patients by immunofluorescence of paraffin-embeded glioma patient samples.

Results: We have determined the gene responses to TGFβ inhibition using a highly selective compound that acts as a TβRI inhibitor, LY2109761, which include Id1 and Id3 transcription factors. We have identified a cell population enriched for GICs that is characterized by the expression of high levels of CD44 and Id1 and tend to be located in a perivascu-lar niche. The depletion of the CD44high/Id1high GIC population by TGFβ inhibitors prevents tumor initiation and recurrence in a glioma mouse model. Furthermore, high CD44 and Id1 levels correlate with poor prognosis in GBM patients.

Conclusions: Our work shows that CD44 and Id1 are markers for GICs, that Id1 and Id3 are therapeutic targets against GICs and GBM, and that combined CD44 and Id1 expression confers poor prognosis in patients. Furthermore, our results have clear implications on the clinical development of TGFβ inhibitors as compounds targeting GICs.

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4a Jornada Científica - vhir.org · Grup de Recerca Patologia neuromuscular i mitocondrial Estudi del caràcter patogènic d’una nova mutació (m.5636T>C) en el gen mt- ... 9:51