30
55 7 ANÁLISIS Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS 7.1 Extracción y caracterización de aceite esencial de romero 7.1.1 Rendimiento obtenido en la extracción del aceite esencial de romero El procedimiento de extracción de aceite esencial de romero por el método de destilación con arrastre de vapor tuvo una duración aproximada de 2 horas, a partir de que comienza la ebullición del agua; siendo la primera hora durante la cual se extrajo la mayor parte del aceite esencial de romero (≈ 83,48% del aceite total extraído). El rendimiento logrado para el romero fue en promedio de 1,86% (v/p - muestra seca). Por lo que, se puede decir que el rendimiento de extracción obtenido es bueno, ya que autores como Farrell (1985) han reportado que la mayoría de los aceites esenciales tienen rendimientos de extracción de 0,5-2%. El rendimiento obtenido se encuentra ligeramente por arriba del rango reportado por Angioni et al. (2004), de 0,48-1,75% (v/p, volumen/peso-seco); así como por Bozin et al. (2007), de 1,18% (v/p en muestra seca). Sin embargo, es importante recordar que el rendimiento puede variar dependiendo de la región y época de cosecha del romero, así como del modo de proceso y preparación de la muestra utilizada.

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7 ANÁLISIS Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS

7.1 Extracción y caracterización de aceite esencial de romero

7.1.1 Rendimiento obtenido en la extracción del aceite esencial de romero

El procedimiento de extracción de aceite esencial de romero por el método de

destilación con arrastre de vapor tuvo una duración aproximada de 2 horas, a partir de

que comienza la ebullición del agua; siendo la primera hora durante la cual se extrajo la

mayor parte del aceite esencial de romero (≈ 83,48% del aceite total extraído).

El rendimiento logrado para el romero fue en promedio de 1,86% (v/p - muestra

seca). Por lo que, se puede decir que el rendimiento de extracción obtenido es bueno,

ya que autores como Farrell (1985) han reportado que la mayoría de los aceites

esenciales tienen rendimientos de extracción de 0,5-2%. El rendimiento obtenido se

encuentra ligeramente por arriba del rango reportado por Angioni et al. (2004), de

0,48-1,75% (v/p, volumen/peso-seco); así como por Bozin et al. (2007), de 1,18% (v/p

en muestra seca).

Sin embargo, es importante recordar que el rendimiento puede variar

dependiendo de la región y época de cosecha del romero, así como del modo de

proceso y preparación de la muestra utilizada.

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7.1.2 Índice de refracción

El índice de refracción es utilizado, tanto a nivel laboratorio como a nivel industrial,

como una prueba fisicoquímica para el control de impurezas y calidad en aceites puros

o jarabes.

El índice de refracción obtenido para el aceite esencial de romero a 20 °C fue de

1,4745 ± 0.0002, encontrándose ligeramente por arriba de lo reportado en la literatura

de 1,4682-1,4712 a la misma temperatura (Patri et al., 2002). Esta diferencia de

refracción se puede deber a la presencia de impurezas, como polvo, presentes en el

romero seco y que fueron trasladas por el vapor hasta el aceite esencial.

7.1.3 Densidad

Como se puede observar en la Tabla IX, la densidad del aceite esencial de romero (20

°C) es menor a la del agua (1,00 g/mL), como es de esperarse para la mayoría de los

aceites esenciales de plantas y especias. Así mismo, el valor promedio de densidad

obtenido es menor que el valor reportado por Patri et al. (2002). Sin embargo, la

diferencia es justificable por que las mediciones se realizaron a distintas temperaturas

en ambos casos.

Tabla IX. Comparación de valores de densidad para el aceite esencial de romero

Densidad experimental(valor promedio) Densidad literatura (Patri et al.,2002)

0,8723 ± 0,0023 g/mL 0,893-0,910 g/mL

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7.1.4 Color

En la Tabla X se muestran los parámetros de color obtenidos para el aceite esencial de

romero, en la escala de color Hunter Lab. El color que presentó el aceite esencial fue

amarillento traslúcido.

Tabla X. Color del aceite esencial de romero

L 90,75 ± 5,85

a 2,67 ± 0,63

b 0,36 ± 0,11

7.1.5 Compuestos fenólicos totales

Para determinar la cantidad de compuestos fenólicos totales se realizó una curva

estándar para el ácido gálico. La curva estándar obtenida se sujeta a la ecuación

y = 3,771 x + 0,026, con un coeficiente de correlación de 0,998. Los valores puntuales

para cada una de las concentraciones finales se muestran en el Apéndice C.

Para efectos de este trabajo, la concentración de compuestos fenólicos

cuantificada en el aceite esencial de romero fue de 33,24 ± 4,80 mg Ác. Gálico/100 mL

aceite. Los principales compuestos fenólicos presentes en el romero son el ácido

carnosinico, carnosol, rosmadinal y el ácido rosmarínico, entre otros (Pérez-Fons et al.,

2010).

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7.1.6 Capacidad antioxidante

Se realizó una curva estándar de Trolox para determinar la capacidad antioxidante. La

curva estándar obtenida se sujeta a la ecuación y = 386,9 x + 3,178, con un coeficiente

de correlación de 0,996. Los valores puntuales para cada una de las concentraciones

finales se muestran en el Apéndice D.

Para el aceite esencial de romero, se determinó una capacidad antioxidante de

233,93 ± 7,06 mg Trolox/100 mL aceite esencial. En la bibliografía todavía no existe

suficiente información sobre la capacidad antioxidante del aceite esencial de romero

derivada por medio del método de ABTS; sin embargo, al comparar el resultado

obtenido con la capacidad antioxidante reportada por Li et al. (2007) para el aceite

esencial de la raíz de dong quai, también llamada angélica china o gingseng hembra

(Angelicae sinensis), siendo este valor de 0,98 mg Trolox/100 mL aceite esencial, se

puede observar que la capacidad antioxidante del aceite esencial de romero es muy

superior a la del aceite esencial de dong quai. Ésta diferencia se puede adjudicar,

principalmente, a la distinta composición química entre ambos aceites esenciales.

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59

7.2 Caracterización del polvo de romero

7.2.1 Humedad

El porcentaje de humedad contenido en el polvo de romero fue de 2,91% ± 0,66. El

contenido de humead reportado por Farrell (1985), 9.3% es mayor al obtenido en el

presente trabajo; sin embargo, es posible afirmar que, dado que el contenido de

humedad obtenido para el polvo de romero es menor al 10%, el producto se puede

considerar como estable a largos periodos de almacenamiento en condiciones óptimas.

7.2.2 Tamaño de partícula

En la Figura 11 se muestra una gráfica de la distribución de la fracción másica de polvo

retenida en los tamices. Se puede observar que esta distribución tiene un

comportamiento bimodal con fracción aproximadamente del 10% en polvos finos con

diámetro menor a 200 μm.

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60

Fig. 11. Distribución de tamaño de partícula.

Por otro lado, en la Figura 12 se muestra la curva de fracción másica acumulada. A

partir de esta curva, se dedujo el diámetro mediano, d50, que se refiere al diámetro en

el cual el 50% del peso total del polvo es retenido, siendo este valor de 731,7 μm.

0,00

0,10

0,20

0,30

0,40

0,50

0,60

0,70

0,80

0,90

1,00

0 200 400 600 800 1000 1200

Fra

cció

n m

ásic

a re

ten

ida

(Xi)

Diámetro (μm)

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61

Fig. 12. Curva de fracción másica acumulada

7.2.3 Compuestos fenólicos totales

La concentración promedio de compuestos fenólicos presentes en cada extracto de

polvo de romero se muestra en la Figura 13. La mayor cantidad de compuestos

fenólicos se obtuvo con el solvente etanol al 96% - HCl (85:15 v/v) resultando en una

concentración de 2047,97 ± 110,97 mg Ác. Gálico/100 g muestra seca. En contraste, los

extractos acuosos de etanol al 96% - agua (50:50 v/v) presentaron la menor

concentración de compuestos fenólicos, siendo ésta de 1438,99 ± 259,46 mg Ác.

Gálico/100 g muestra seca. Así, al realizar el análisis estadístico (Apéndice E) de los

distintos solventes se comprobó que existe una diferencia estadísticamente

significativa, únicamente entre los extractos antes mencionados (p<0.05).

0,00

0,10

0,20

0,30

0,40

0,50

0,60

0,70

0,80

0,90

1,00

0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600

Fra

cció

n m

ásic

a ac

um

ula

da

(Xi)

Diámetro (μm)

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Fig. 13. Concentración de compuestos fenólicos totales en distintos extractos de

polvo de romero

La concentración de compuestos fenólicos totales obtenida con el extracto de

etanol al 96% - HCl (85:15 v/v) es ligeramente menor a lo reportado por Proestos et al.

(2005) de 2100 mg Ác. Gálico/100 mL muestra seca en polvo de romero, utilizando

metanol como agente extractante. Por otro lado, Shan et al. (2005) reportan una

concentración de 5070 mg Ác. Gálico/100 mL muestra seca en polvo de romero,

utilizando metanol como agente extractante. La cantidad de compuestos fenólicos

obtenidos va a depender de la naturaleza de la muestra y de su preparación, así como

el extractante utilizado y la variabilidad propia del método de determinación.

0

500

1000

1500

2000

2500

Agua Etanol Etanol-agua 50:50

Etanol-agua 70:30

Etanol-HCl

mg

AG

/100

g s

s

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63

7.2.4 Capacidad antioxidante

En la Figura 14 es posible observar el promedio de la capacidad antioxidante obtenida

con los distintos extractos de polvo de romero. La mayor capacidad antioxidante se

presentó en los extractos obtenidos con la mezcla etanol al 96% - agua (70:30 v/v), con

un valor de 3998,91 ± 797,75 mg Trolox/100 g muestra seca; mientras que el menor

valor obtenido se presentó con los extractos de etanol al 96% - HCl (85:15 v/v), siendo

éste de 2243,35 ± 10,29 mg Trolox/100 g muestra seca. La capacidad antioxidante

reportada por Shan et al. (2005), de 9460,96 mg Trolox/100 g muestra seca (extractos

de metanol), se encuentra muy por arriba del mayor valor obtenido; esto se puede

deber, como ya se ha mencionado, a la época de cosecha del romero, el método de

preparación de la muestra, el extractante obtenido y las variabilidades del método de

determinación de la capacidad antioxidante.

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Fig. 14. Capacidad antioxidante en los distintos extractos de polvo de romero

Sin embargo, al realizar el análisis estadístico de los resultados (Apéndice F), se

obtuvo que no existe diferencia estadísticamente significativa entre los extractos de

etanol al 96% - agua (50:50 v/v) y etanol al 96% - agua (70:30 v/v). Sin embargo, estos

últimos si presentan una diferencia estadística con respecto al extracto de etanol al

96% - HCl (85:15 v/v).

De acuerdo a lo reportado por Ersus y Yurdagel (2006), la actividad antioxidante

tiene una alta correlación con el contenido de compuestos fenólicos totales. Esto

concuerda muy bien con lo obtenido para los extractos etanol al 96% - agua (50:50 v/v)

y etanol al 96% - agua (70:30 v/v); no obstante, para el extracto etanol – HCl (85:15) se

puede observar que posee una baja capacidad antioxidante y una alta concentración de

compuestos fenólicos. Este fenómeno se puede atribuir a la existencia de muchos

0

1000

2000

3000

4000

5000

6000

Agua Etanol Etanol-agua 50:50

Etanol-agua 70:30

Etanol- HCl

mg

Tro

lox/

100

g ss

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polifenoles con pequeña estructura molecular, ya que de según López (2010) el tamaño

molecular define la calidad del polifenol, siendo los de mayor estructura los de mejor

calidad y considerando que la calidad se determina por la capacidad antioxidante que

presenten.

Por lo tanto, se puede decir que el mejor extractante para evaluar tanto la

concentración de compuestos fenólicos totales, como la capacidad antioxidante del

polvo de romero, es la mezcla etanol al 96% - agua (50:50 v/v).

7.3 Evaluación del queso fresco durante su almacenamiento

7.3.1 Textura

La textura representa un parámetro de calidad importante que determina la identidad

de un queso y afecta la preferencia del consumidor.

Para el presente trabajo, la textura de los quesos fue medida utilizando como

parámetro la fuerza de compresión. Inicialmente, esta fuerza en el queso preparado

con aceite esencial de romero se muestra mayor a la de las otras muestras (Figura 15);

sin embargo, la compresión se mantiene constante tanto para el queso testigo como

para el queso preparado con polvo de romero, mientras que para el queso con aceite

esencial de romero la fuerza va a aumentando conforme transcurre tiempo de

almacenamiento.

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Fig. 15. Efecto del almacenamiento en la textura de los quesos preparados con aceite

esencial de romero, polvo de romero y testigo.

De acuerdo a Osorio et al. (2004) durante la maduración de los quesos ocurre

una considerable hidrólisis de las grasas, lo cual tiene un papel importante en la

textura. Dado que el queso preparado con aceite esencial de romero posee un mayor

porcentaje de grasa, una disminución en su materia grasa y contenido de agua provoca

un endurecimiento en el queso.

Para los tres casos, después del día 15 de refrigeración se puede observar una

disminución de la fuerza de compresión en el queso. Dicha disminución puede deberse

a enzimas proteolíticas atribuibles a la microflora secundaria del queso que actúan

sobre las proteínas del queso rompiendo su estructura y provocando cambios en la

textura (Fox, 1987).

0

0,5

1

1,5

2

2,5

3

3,5

4

4,5

5

Día 0 Día 5 Día 10 Día 15 Día 20

N

Testigo Queso con polvo Queso con aceite esencial

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7.3.2 Color

Para poder observar el efecto del almacenamiento en el color de los distintos quesos,

se calculó el cambio de color (ΔE) para cada uno (Figura 8).

Fig. 16. Cambio de color en los quesos preparados con aceite esencial de romero,

polvo de romero y testigo

Los tres tipos de queso, evaluados en este trabajo, presentaron la misma

tendencia creciente en el cambio de color. Sin embargo, esta tendencia es más

pronunciada para el caso del queso preparado con aceite esencial de romero, seguido

por el queso preparado con polvo de romero y, finalmente, el queso testigo.

El cambio de color puede deberse principalmente a la disminución en el valor de

luminosidad de los quesos.

0

1

2

3

4

5

6

7

Día 0 Día 5 Día 10 Día 15 Día 20

ΔE

Testigo Queso con polvo Queso con aceite esencial

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68

7.3.3 Humedad

Se puede observar en la Figura 17 que la humedad de los quesos preparados con aceite

esencial y polvo de romero, así como la del queso testigo es relativamente estable

durante su almacenamiento. Sin embargo, para el caso del queso testigo se advierte

una ligera disminución inicial en el contenido de humedad. Este fenómeno puede ser

atribuido a la variabilidad inherente entre distintos sistemas alimenticios, aun cuando

pertenezcan a un mismo tipo.

Fig. 17. Efecto del almacenamiento en la humedad de los quesos preparados con polvo de romero, aceite esencial de romero y testigo.

El agua en el queso se encuentra de tres formas diferentes: 1) agua ligada a la

estructura de algunos componentes de la cuajada, sobre todo las proteínas; 2) el agua

retenida por fuerzas de atracción a las partículas de la cuajada y grasa; y 3) el agua libre

que contiene las sustancias solubles (García, 1998). Considerando lo anterior, el queso

40

45

50

55

60

65

70

Día 0 Día 5 Día 10 Día 15 Día 20

Hu

med

ad (%

b.h

.)

Testigo Queso con polvo Queso con aceite esencial

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69

con aceite esencial posee una humedad promedio menor a la del queso testigo y del

queso preparado con polvo de romero (Tabla XI) ya que su contenido lipídico retiene

más agua entre las partículas de grasa.

Tabla XI. Humedad promedio de almacenamiento para los quesos.

Queso Humedad promedio

Testigo 54,36 ± 3,49 %

Con polvo de romero 52,19 ± 1,35 %

Con aceite esencial 50,12 ± 2,22 %

7.3.4 Compuestos fenólicos totales

La concentración de compuestos fenólicos totales en el queso testigo se muestra en la

Figura 18. En la grafica es posible observar que el mejor extractante para dichos

compuestos en el queso fresco fue la mezcla etanol al 96% - HCl (85:15 v/v). Esta

mezcla resultó tener una diferencia estadística en comparación con los demás

extractos; mientras que los demás extractos no presentaron diferencia

estadísticamente significativa entre sí.

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70

Fig. 18. Evaluación de la concentración de compuestos fenólicos totales en el queso

fresco testigo durante su almacenamiento

Al igual que para el queso testigo, los compuestos fenólicos del queso

preparado con polvo fueron extraídos en mayor cantidad por la mezcla etanol al 96% -

HCl (85:15 v/v) (Figura 19). El análisis estadístico realizado sobre los resultados arrojó

que existe una diferencia estadísticamente significativa (p<0,05) entre el solvente

etanol al 96% - HCl (85:15 v/v) en comparación a los demás solventes. Así mismo, los

solventes etanol al 96% - agua (0:50 v/v) y etanol al 96% - agua (70:30 v/v) también

presentaron diferencia estadística al ser comparados.

0

20

40

60

80

100

120

Día 0 Día 5 Día 10 Día 15 Día 20

mg

Ác.

Gál

ico

/100

g m

ue

stra

fre

sca

Agua Etanol Etanol-agua 50:50 Etanol-agua 70:30 Etanol-HCl

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71

Fig. 19. Evaluación de la concentración de compuestos fenólicos totales en el queso

fresco preparado con polvo de romero, durante su almacenamiento.

Finalmente, para el queso preparado con aceite esencial de romero se ve

marcadamente que el mejor extractante para los compuestos fenólicos fue la mezcla

etanol al 96% - HCl (85:15 v/v) (Figura 20). El extracto antes mencionado presentó una

diferencia estadística en comparación a todos los demás extracto; mientras que los

demás extractos no presentan diferencia estadísticamente significativa entre sí. Esta

distinción notoria de compuestos fenólicos en el extracto etanol al 96% - HCl (85:15

v/v) pudiera atribuirse a la acción del ácido clorhídrico sobre la estructura de los

fenóles, ocasionando su rompimiento y aumentando su cantidad, de esta manera.

El análisis estadístico para la concentración de compuestos fenólicos totales de

de los tres tipos de queso en contraste con los solventes utilizados, se muestra en el

Apéndice G.

0

20

40

60

80

100

120

Día 0 Día 5 Día 10 Día 15 Día 20

mg

Ác.

Gál

ico

/100

g m

ue

stra

fre

sca

Agua Etanol Etanol-agua 50:50 Etanol-agua 70:30 Etanol-HCl

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72

Fig. 20. Evaluación de la concentración de compuestos fenólicos totales en el queso

fresco preparado con aceite esencial de romero, durante su almacenamiento

En las tres muestras de queso se exhibe una tendencia en aumento de la

concentración de compuestos fenólicos a lo largo del almacenamiento en refrigeración,

lo cual puede se explicado en base a que los ácidos orgánicos presentes en el queso

decrecen mediante la interconversión con algunos carbohidratos, generando

esqueletos de carbono que facilitan la síntesis de polifenoles. Este fenómeno ya había

sido observado por Wilhelmina et al. (1999) en fresas y frambuesas.

Por otro lado, para el caso del extracto etanol al 96% - HCl (85:15 v/v), la

concentración de compuestos fenólicos más alta se obtuvo en el día 20 de

almacenamiento para el queso testigo (101,13 ± 10,41 mg Ác. Gálico/100 g muestra),

seguido del día 10 para el queso preparado con aceite esencial de romero (95,66 ±

0

20

40

60

80

100

120

Día 0 Día 5 Día 10 Día 15 Día 20

mg

Ác.

lico

/10

0 g

mu

est

ra fe

sca

Agua Etanol Etanol-agua 50:50 Etanol-agua 70:30 Etanol-HCl

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73

12,16 mg Ác. Gálico/100 g muestra) y por último, el día 15 para el queso preparado con

polvo de romero (89,39 ± 15,84 mg Ác. Gálico/100 g muestra).

Sin embargo, para el mismo extracto, fue en el queso fresco preparado con

aceite esencial de romero donde se presentó el mayor promedio de compuestos

fenólicos obtenidos durante el almacenamiento, siendo éste de 85,07 ± 14,94 mg Ác.

Gálico/100 g muestra; seguido por el promedio del queso fresco preparado con polvo

de romero con un valor de 66,11 ± 20,47 mg Ác. Gálico/100 g muestra; y por último el

promedio para el queso testigo de 61,38 ± 30,92 mg Ác. Gálico/100 g muestra.

La concentración de compuestos fenólicos en jugo de arándano comercial es

aproximadamente de 170 mg Ác. Gálico/100 mL jugo, mientras que para té verde

helado es de 80 mg Ác. Gálico/100 mL jugo (Seeram et al., 2008); por lo que,

suponiendo que 100 g de queso y 100 mL de jugo representan porciones equivalentes,

es posible afirmar que la concentración presente en los quesos se encuentra no muy

por debajo de dichos productos, considerados como bebidas ricas en polifenoles.

7.3.5 Capacidad antioxidante

En la Figura 21 se muestra la capacidad antioxidante para el queso fresco testigo,

obtenida durante su almacenamiento. En la grafica, se observa que, en su mayoría, el

extracto etanol al 96% - agua (70:30 v/v) fue el que presentó la mayor capacidad

antioxidante en comparación a los demás solventes. Sin embargo, los extractos de

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74

etanol, etanol al 96% - agua (50:50 v/v) y etanol al 96% - agua (70:30 v/v) no

presentaron diferencia estadísticamente significativa al ser comparados entre sí;

mientras que el extracto de agua solamente mostró diferencia estadística con el

extracto etanol al 96% - agua (70:30 v/v).

Fig. 21. Evaluación de la capacidad antioxidante del queso fresco testigo durante su

almacenamiento en refrigeración

Para el queso preparado con polvo de romero (Figura 22), también se observa

que el extracto que presentó la mayor capacidad antioxidante fue la mezcla etanol al

96% - agua (70:30 v/v). Este extracto no presentó diferencia estadísticamente

significativa con los demás extractos, a excepción del extracto de agua.

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

Día 0 Día 5 Día 10 Día 15 Día 20

mg

Tro

lox/

100

g m

ues

tra

fre

sca

Agua Etanol Etanol-agua 50:50 Etanol-agua 70:30

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75

Fig. 22. Evaluación de la capacidad antioxidante del queso fresco preparado con polvo

de romero, durante su almacenamiento en refrigeración

La mayor capacidad antioxidante presentada para el queso fresco preparado

con aceite esencial de romero se obtuvo con el extracto de etanol al 96% - agua (70:30

v/v), al igual que para las demás muestras de queso (Figura 23). El análisis estadístico

efectuado sobre los distintos extractos, mostró que el extracto etanol al 96% - agua

(70:30 v/v) presenta diferencia estadísticamente significativa únicamente para el

extracto de agua.

El análisis estadístico para la capacidad antioxidante de los tres tipos de queso

en contraste con los solventes utilizados, se muestra en el Apéndice H.

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

Día 0 Día 5 Día 10 Día 15 Día 20

mg

Tro

lox/

100

g m

ue

stra

fre

sca

Agua Etanol Etanol-agua 50:50 Etanol-agua 70:30

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Fig. 23. Evaluación de la capacidad antioxidante del queso fresco preparado con

aceite esencial de romero, durante su almacenamiento en refrigeración

Los extractos de etanol al 96% - HCl, para los tres tipos de queso evaluados, no

presentaron capacidad antioxidante manifiesta, lo que puede ser asociado al

rompimiento de los compuestos fenólicos presentes debido a la acción del ácido

clorhídrico. Este resultado contrasta con el hecho de que la mayor concentración de

compuestos fenólicos fue obtenida con el extracto etanol al 96% - HCl; sin embargo,

como ya se había mencionado, la capacidad antioxidante está relacionada con el

tamaño de los compuesto fenólicos presentes. Por lo que se puede concluir que la casi

nula capacidad antioxidante presentada en este extracto es consecuencia de la

existencia de polifenoles de pequeña estructura molecular, así como del rompimiento

de polifenoles de mayor estructura molecular.

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

Día 0 Día 5 Día 10 Día 15 Día 20

mg

Tro

lox/

100

g m

ue

stra

fre

sca

Agua Etanol Etanol-agua 50:50 Etanol-agua 70:30

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77

Por otro lado, en los tres casos se pudo observar una tendencia general al

aumentar en la capacidad antioxidante conforme transcurren los días en

almacenamiento, lo que puede ser relacionado a la síntesis de nuevos compuestos

fenólicos.

La mayor capacidad antioxidante obtenida con el extracto etanol al 96% - agua

(70:30 v/v) en los tres tipos de queso, se presentó en el día 15 de almacenamiento del

queso preparado con aceite esencial de romero (80,89 ± 3,62 mg Trolox/100 g

muestra), seguido por el día 15 del queso preparado con aceite esencial de romero

(70,91 ± 9,45 mg Trolox/100 g muestra) y por último, el día 10 del queso testigo (65,47

± 7,32 mg Trolox/100 g muestra).

Por otro lado, para el extracto etanol al 96% - agua (70:30 v/v), la capacidad

antioxidante promedio del almacenamiento fue mayor en el caso del queso preparado

con polvo de romero, siendo de 61,69 ± 19,17 mg Trolox/100 g muestra; seguido por el

promedio del queso testigo, con un valor de 55,03 ± 12,57 mg Trolox/100 g muestra; y

por último, el la capacidad antioxidante promedio del queso preparado con aceite

esencial de romero de 46,50 ± 21,19 mg Trolox/100 g muestra.

Es así que el mejor extractante recomendado para evaluar tanto la capacidad

antioxidante, como el contenido de compuestos fenólicos totales en el queso fresco es

la mezcla extracto etanol al 96% - agua (70:30 v/v).

Al comparar los resultados obtenidos para la capacidad antioxidante de los

quesos con jugo de arando y té verde helado comercial, los cuales poseen valores de

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78

capacidad antioxidante de 646 y 459 mg Trolox/100 mL jugo (Seeram et al., 2005),

respectivamente, se puede observar que dichos valores son muy superiores a los

obtenidos para el queso (se consideran 100 g de queso y 100 mL de jugo como

porciones equivalentes). Esta superioridad se puede atribuir a que, aun cuando el

romero posee una actividad antioxidante manifiesta, las porciones incluidas en el

queso son muy pequeñas para causar un efecto antioxidante notorio.

7.3.6 Contenido microbiano

El efecto del aceite esencial y del polvo de romero sobre el contenido bacteriano del

queso fresco de vaca se observa claramente en la Figura 24. Después del día 5 de

almacenamiento se manifiesta una diferencia entre el contenido bacteriano en el

queso testigo y los quesos preparados con aceite esencial y polvo de romero, teniendo

el primero una mayor población bacteriana. A partir del día 11 de almacenamiento, la

acción antibacteriana del aceite esencial de romero sobrepasa aquella del polvo de

romero, manteniendo al queso con una población relativamente constante hasta el día

15 de almacenamiento, aproximadamente.

Ya en estudios anteriores realizados por Bozin y colaboradores (2005), se ha

demostrado la actividad antibacteriana del aceite esencial de romero expresada sobre

Escherichia coli, Salmonella typhi, S. enteriditis, Staphylococcus aureus y Shigella sonei.

Para el queso fresco, la eliminación de bacterias (como Escherichia coli, Staphylococcus

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79

aureus y Salmonella) es importante para lograr un alimento seguro para el consumidor,

ya que este tipo de bacterias son de especial cuidado dentro de la industria quesera.

En el Apéndice J se muestran los valores puntuales del contenido de bacterias y

mohos en los quesos durante su almacenamiento.

Fig. 24. Efecto antimicrobiano del aceite esencial y polvo de romero sobre el queso

fresco de vaca.

De igual forma, se evaluó el efecto antifúngico del aceite esencial y polvo de

romero en el queso fresco y se observó que en el queso preparado con polvo de

romero no hubo crecimiento de mohos a lo largo de los 20 días de almacenamiento

(Figura 25); en tanto que para el queso fresco preparado con aceite esencial de romero

se observó actividad antifúngica notoria en comparación con el queso testigo.

0,00E+00

1,00E+08

2,00E+08

3,00E+08

4,00E+08

5,00E+08

6,00E+08

Día 0 Día 5 Día 10 Día 15 Día 20

UFC

/g m

ues

tra

Testigo Queso con polvo Queso con aceite esencial

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80

Fig. 25. Efecto antifúngico, en mohos, del aceite esencial y polvo de romero sobre el

queso fresco de vaca.

Para el caso de levaduras (Figura 26), el queso preparado con aceite esencial de

romero es el que muestra menor actividad fúngica, seguido por el queso preparado con

polvo de romero y muy por arriba se encuentra el queso testigo. Sin embargo, después

del día 5 de almacenamiento el queso testigo rebasa el límite máximo para hongos

establecido por la NOM-121-SSA1-1994 (Secretaría de Economía, 1994) de 500 UFC/g.

Este hecho no se presenta en el queso preparado con polvo de romero hasta después

del día 10 y para el queso preparado con aceite esencial de romero, hasta el día 15. La

actividad antifúngica del aceite esencial de romero ya había sido reportada por autores

como Bozin y colaboradores (2005) en 6 hongos evaluados, que incluyen Candida

albicans y 5 dermatomicetos.

0

10

20

30

40

50

60

70

Día 0 Día 5 Día 10 Día 15 Día 20

UFC

/g m

ue

stra

Testigo Queso con polvo Queso con aceite esencial

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81

Fig. 26. Efecto antifúngico, en levaduras, del aceite esencial y polvo de romero sobre

el queso fresco de vaca.

Por otro lado, el queso testigo presentó hinchamiento en la bolsa a partir del día

10 de almacenamiento, mientras que los quesos preparados con aceite esencial y polvo

de romero no presentaron inflamiento sino hasta el día 15 de almacenamiento.

7.3.7 Evaluación sensorial

Los promedios generales de las calificaciones obtenidas para los tres tipos de queso en

la evaluación sensorial se pueden observar en la Tabla XII. En general, se lograron

mejores calificaciones para el queso testigo, seguido por el queso preparado con polvo

de romero y por último, el queso preparado con aceite esencial de romero. Sin

0,00E+00

5,00E+03

1,00E+04

1,50E+04

2,00E+04

2,50E+04

3,00E+04

3,50E+04

Día 0 Día 5 Día 10 Día 15 Día 20

UFC

/g m

ue

stra

Testigo Queso con polvo Queso con aceite esencial

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82

embargo, los resultados para todos los quesos pueden considerarse como aceptables,

ya que al trasladar dichas calificaciones a escala hedónica, ninguna es menor al

resultado “Ni gusta ni disgusta” y la mayoría se encuentra entre “Gusta mucho” y

“Gusta ligeramente”.

Tabla XII. Resultados promedio de la evaluación sensorial para los tres tipos de queso

Queso

testigo

Queso con polvo de

romero

Queso con aceite esencial

de romero

Apariencia 8,0 ± 0,9a 7,4 ± 1,6a 7,6 ± 1,2a

Color 8,2 ± 0,7b 7,7 ± 1,2b 7,8 ± 1,0b

Textura 7,9 ± 0,9c 7,5 ± 1,0c 7,3 ± 1,6c

Olor 7,5 ± 1,1d 7,6 ± 1,2d 7,3 ± 1,6d

Textura al degustar 7,7 ± 1,0e 7,2 ± 1,6eg 6,5 ± 1,7fg

Sabor 7,8 ± 1,3h 6,7 ± 1,8h 5,2 ± 2,4i

Aceptación textura en

general 7,8 ± 1,1j 6,9 ± 1,4jl 6,4 ± 1,8kl

Aceptación general 7,7 ± 1,1m 6,7 ± 1,7n 5,9 ± 2,0n

Para los atributos de apariencia, color, textura y olor no se encontró diferencia

estadísticamente significativa (p>0,05) entre los tres tipos de queso; no obstante, para

los demás atributos si se presentó diferencia estadística (Apéndice J). La aceptación

general del queso preparado con polvo de romero y del queso preparado con aceite

esencial de romero no presentaron diferencia estadísticamente significativa, pero si

fueron, estos dos, diferentes estadísticamente al queso testigo.

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83

Por otro lado, los tres tipos de queso no presentaron diferencia

estadísticamente significativa al comparar las evaluaciones de los días 0, 10 y 20 de

almacenamiento entre sí (Tabla XIII, XIV y XV), con excepción de la textura del queso

preparado con polvo de romero que reportó una diferencia estadística entre las

calificaciones de los días 10 y 20 (Apéndice K). Las evaluaciones sensoriales para los

atributos de textura al degustar, sabor, aceptación textura en general y aceptación en

general no fueron evaluados al día 20 de almacenamiento, ya que las bolsas de los

quesos presentaban hinchamiento.

Tabla XIII. Evaluación sensorial para el queso testigo.

Día 0 Día 10 Día 20

Apariencia 8,2 ± 0,7 7,9 ± 0,9 8,0 ± 0,7

Color 8,4 ± 0,5 8,1 ± 0,7 7,8 ± 0,8

Textura 7,7 ± 1,1 7,9 ± 0,8 8,2 ± 0,8

Olor 7,2 ± 1,3 7,7 ± 0,9 7,8 ± 1,3

Textura al degustar 7,4 ± 1,3 7,9 ± 0,8 ---

Sabor 7,3 ± 1,5 8,1 ± 1,0 ---

Aceptación textura en general 7,5 ± 1,5 8,1 ± 0,7 ---

Aceptación general 7,4 ± 1,3 7,9 ± 0,9 ---

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84

Tabla XIII. Evaluación sensorial para el queso preparado con polvo de romero.

Día 0 Día 10 Día 20

Apariencia 7,2 ± 2,0 7,5 ± 1,4 8,2 ± 0,8

Color 7,7 ± 1,5 7,6 ± 1,2 8,4 ± 0,5

Textura 7,8 ± 1,1 7,2 ± 0,9 8,4 ± 0,5

Olor 7,3 ± 1,3 7,7 ± 1,3 7,6 ± 0,9

Textura al degustar 7,5 ± 1,4 6,9 ± 1,7 ---

Sabor 6,7 ± 2,0 6,7 ± 1,8 ---

Aceptación textura en general 7,1 ± 1,8 6,9 ± 1,2 ---

Aceptación general 6,7 ± 1,8 6,7 ± 1,6 ---

Tabla IV. Evaluación sensorial para el queso preparado con polvo de romero.

Día 0 Día 10 Día 20

Apariencia 7,5 ± 1,5 7,5 ± 1,0 8,2 ± 0,8

Color 8,0 ± 1,1 7,6 ± 1,0 8,0 ± 0,7

Textura 7,4 ± 1,8 7,1 ± 1,5 8,2 ± 0,8

Olor 6,7 ± 1,5 7,4 ± 1,6 8,4 ± 0,5

Textura al degustar 6,5 ± 2,3 6,6 ± 1,3 ---

Sabor 5,2 ± 2,6 5,2 ± 2,3 ---

Aceptación textura en general 6,4 ± 2,0 6,4 ± 1,6 ---

Aceptación general 5,8 ± 2,0 6,0 ± 2,1 ---

.