4
製品ラインナップ NEXT ඇ༁ RNA ώετϯम০ H3K9me3 H3K4me3 H3K27me3 H3K27Ac H3K36me3 DNA ϝνϧԽ R A A NA イメージング から はじめる エピジェネティクス解析 イメージング から はじめる エピジェネティクス解析 ώετϯम০ղੳΩοτ ຊΩοτͷಛ ຊΩοτͷಛ ຊɺΤϐδΣωςΟΫεղੳͷதͰಛʹΛΊΔώετϯम০Λ؆ศબతʹݕग़ͰΔΩοτʢ5 छʣͰɻೋ߅ମΛΘͳ ܬඪҰ߅ମΛ༻ɺ໔Ӹછ৭ͷόοΫάϥϯυʹݮՌͷߴϒϩοΩϯάΛಉΔΊɺΊͷͰʹධՁͰ·ɻ ΦʔϧΠϯϫϯͳͷͰʹධՁͰ·ɻ ඞཁͳༀηοτʹ ܬඪҰ߅ମΛ༻γϯϓϧͳ๔ͷݻఆԽͱບաॲཧޙɺ ༀͷఴՃͱચড়Ͱછ৭Ͱ·ɻ ܬ৭ૉ ܬඪҰ߅ʢϚε༝དྷʣ Green ๔ͷݻఆԽΑͼ ບաॲཧ ϒϩοΩϯά ܬඪҰ߅ମΛఴՃ ղੳ ηοτ༰ ϒϩοΩϯάώετϯम০ΛղੳΔཧ༝ ώετϯम০ΛղੳΔཧ༝ ΤϐήϊϜʹ DNA ϝνϧԽɺώετϯम০ɺඇ༁ RNAɺΫ ϩϚνϯߏஙҼΓ·ɻΫϩϚνϯͷجຊ୯ҐͰΔψ ΫϨΦιʔϜΛߏΔίΞώετϯɺ༁ޙम০ΛडΔ ͱΒΕΓɺಛʹɺώετϯ H3 ͷϦδϯجͷЏ₉Ξ ϛϊجͷΞηνϧԽ⁷ϝνϧԽ⁷ϢϏΩνϯԽҨݱ ʹޚओཁͳΛՌ·ɻ খͰɺಛʹҨݱͷଅਐɾʹΘΔ 5 छͷम০ ώετϯΛݕग़ΔΊͷΩοτΛ༻ҙ·ɻ ຊʹ·ΕΔܬඪम০ώετϯ߅ମɺϞϊΫϩʔφ ϧ߅ڀݚॴͷ߅ମΛ༻·ɻ Ұ๔ϨϕϧͰղੳՄ ʻݧʼ ܧഓཆ 3 ճ· 18 ճ܁Γฦ WI-38 ๔ΛݻఆԽޙɺບաॲཧΛߦɺຊΩο τΛ༻ H3K9me3 Λݕग़ɺΒʹ DAPI ʹΑΓછ৭Λߦ·ɻ ʻݕग़ʼ H3K9me3 ɿEx. 488 nm Em. 500-550 nm DAPI ɿEx. 405 nm Em. 410-450 nm ܧͷҟͳΔ WI-38 ๔Λ༻ɺຊΩοτ (H3K9me3) ٴͼ DAPI ʹછ৭ɻΠϝʔδ ϯάʹΑΔղੳͷՌɺ ܧͷଟ WI-38 ๔ʹɺ H3K9me3 ͷࡏہมԽΔ ՌಘΒΕ·ɻ H3K9me3 DAPI Merge Passage 18 Passage 3 ΠϝʔδϯάʹΑΓώετϯम০ͷมԽΛҰ๔ϨϕϧͰղੳͰ·ɻ Anti H3Kx antibody - Green (x = 9me3, 4me3, 27me3, 27Ac, 36me3) 検索 ヒストン 同仁 ώετϯ H3 ςʔϧ

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製品ラインナップNEXT

非翻訳 RNA

H3

ヒストン修飾H3K9me3H3K4me3H3K27me3H3K27AcH3K36me3

DNAメチル化

R AANA

イメージングからはじめる

エピジェネティクス解析

イメージングからはじめる

エピジェネティクス解析ヒストン修飾解析キット

本キットの特長本キットの特長

本製品は、エピジェネティクス解析の中で特に注目を集めているヒストン修飾を簡便かつ選択的に検出できるキット(5種)です。二次抗体を使わない蛍光標識一次抗体を採用し、免疫染色時のバックグラウンド低減に効果の高いブロッキング剤を同梱しているため、はじめての方でも直ぐに評価できます。

オールインワンなのですぐに評価できます。

必要な試薬がセットに 蛍光標識一次抗体を使用したシンプルな操作細胞の固定化と膜透過処理後、試薬の添加と洗浄操作だけで染色できます。

蛍光色素

蛍光標識一次抗体(マウス由来)

Green

細胞の固定化および膜透過処理

ブロッキング 蛍光標識一次抗体を添加

解析

セット内容

ブロッキング剤

ヒストン修飾を解析する理由ヒストン修飾を解析する理由エピゲノムには DNAメチル化、ヒストン修飾、非翻訳 RNA、クロマチン構築因子があります。クロマチンの基本単位であるヌクレオソームを構成するコアヒストンは、翻訳後修飾を受けることが知られており、特に、ヒストン H3のリジン残基のεーアミノ基のアセチル化、メチル化、ユビキチン化は遺伝子発現制御において主要な役割を果たしています。

小社では、特に遺伝子発現の促進・抑制に関わる 5 種の修飾ヒストンを検出するためのキットをご用意しました。本製品に含まれる蛍光標識修飾ヒストン抗体は、モノクローナル抗体研究所製の抗体を使用しています。

一細胞レベルで解析が可能

<実験条件>継代培養 3回または 18回繰り返したWI-38細胞を固定化後、膜透過処理を行い、本キットを用い H3K9me3を検出、さらに DAPIにより核染色を行いました。

<検出条件>H3K9me3 :Ex. 488 nm Em. 500-550 nmDAPI :Ex. 405 nm Em. 410-450 nm

継代数の異なるWI-38細胞を用い、本キット (H3K9me3)及び DAPIにて染色。イメージングによる解析の結果、継代数の多いWI-38細胞において、H3K9me3の局在が変化する結果が得られました。

H3K9me3 DAPI Merge

Pass

age

18Pa

ssag

e 3

イメージングによりヒストン修飾の変化を一細胞レベルで解析できます。

Anti H3Kx antibody - Green (x = 9me3, 4me3, 27me3, 27Ac, 36me3)

検索ヒストン 同仁

ヒストン H3テール

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http://www.dojindo.co.jpURL E-mail [email protected]

H3K9me3 H3K27me3 H3K27Ac DAPI Merge

DNAメチル化やヒストン修飾は重要なエピジェネティクスであり、遺伝子発現を制御することにより細胞の分化や老化、がん化などの細胞の状態をコントロールしています。そのため-細胞レベルで複数のエピジェネティクスを同時に解析することが重要となります。小社では、複数のエピジェネティクスを同時に解析するツールとして蛍光標識修飾ヒストン抗体(Red, Deep Red)や蛍光標識 -5-メチルシトシン(m5c)抗体を開発しています。ご興味やご要望がありましたら、ぜひお問合せください。

老化細胞で複数のヒストン修飾を同時解析

開発中 ご要望をお聞かせください。

継代数の異なるWI-38細胞を用いて、複数のヒストン修飾変化 (H3K9me3, H3K27me3, H3K27Ac)を解析しました。結果、継代数の多いWI-38細胞では、H3K9me3の局在が変化し、H3K4me3の蛍光強度が上昇、H3K427Acの蛍光強度が低下しました。

Pas

sage

20

Pas

sage

4

DNAメチル化及びヒストン修飾の変化を同時解析HeLa細胞にヒストン脱アセチル化酵素 HDACの阻害剤である Trichostatin A(TSA)および DNAメチル化酵素阻害剤である 5-aza-2-deoxycytidine(aza-dC)

を添加し、ヒストン修飾 (H3K27me3, H3K27Ac) の変化及び DNAメチル化 (5-methylcytosine ; m5C)の変化を同時に解析しました。

TSAおよび aza-dCの添加によって、下記のような蛍光強度の変化が見られました。

H3K27me3

cont

rol

TSA

aza-

dC

m5CH3K27Ac

H3K27me3 H3K27Ac m5C

TSA添加 低下 上昇 僅かに低下

aza - dC添加 変化なし 変化なし 低下

ヒストン修飾検出キット ラインナップ

Anti H3K9me3 antibody - Green

Anti H3K4me3 antibody - Green

Anti H3K27me3 antibody - Green

Anti H3K27Ac antibody - Green

Anti H3K36me3 antibody - Green

製品コード和光コード希望納入価格容 量品 名

¥ 42,000

¥ 42,000

¥ 42,000

¥ 42,000

¥ 42,000

344-09451

341-09461

348-09471

345-09481

342-09491

H419

H420

H421

H422

H423

1 set

1 set

1 set

1 set

1 set

検索問合せ 同仁

Anti H3Kx antibody - Green(x = 9me3, 4me3, 27me3, 27Ac, 36me3)Anti H3Kx antibody - Green(x = 9me3, 4me3, 27me3, 27Ac, 36me3)ヒストン修飾解析キット

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細胞内代謝測定キットNEXT

Cellular Senescence Detection Kit - SPiDER-βGalCellular Senescence Detection Kit - SPiDER-βGal老化細胞を簡便に定量できるキット

老化細胞を 様々な指標で見る老化細胞を 様々な指標で見る

製品コード和光コード希望納入価格容 量品 名

細胞の生存および死をコントロールするために備わったアポトーシスやネクロ―シス、オートファジー、細胞老化は、細胞内機能を理解するうえで非常に重要です。その中でも細胞老化は、近年ガン化因子として知られる SASPの発見や、Stem cell分野での老化現象の発見が認められるなど、各分野で重要視されてきています。小社では、細胞老化の評価方法および評価目的に応じて選択できるよう 4種類のキットおよび試薬をご用意しました。

製品ラインナップ製品ラインナップ

老化細胞検出キット・試薬老化細胞検出キット・試薬

蛍光顕微鏡、FCM※による高感度解析

蛍光イメージング(多重染色 ) フローサイトメトリー定量解析

緑色:本キットによる SA-β-gal染色赤色: γH2AX染色青色:DAPIによる核染色

WI-38細胞(継代数 10)WI-38細胞(継代数 10)

Cellular Senescence Detection Kit - SPiDER-βGal

Fluorescece intensity

Num

ber o

f Cel

ls

継代数 1 継代数 12(老化細胞 )

WI-38細胞WI-38細胞

老化細胞のモデルとして継代培養を繰り返したWI-38細胞を用い解析。※ FCM:フローサイトメトリー

・ X-galでは困難だった定量解析が容易に・生細胞、固定化細胞の SA-β-gal活性を検出

プレートリーダーによる簡便な検出

試薬添加後30分反応

細胞を洗浄し細胞溶解

反応停止後に蛍光測定

プレートリーダープレートリーダー

プレートリーダー解析

継代数

3

継代数

190

400

800

1200

1600

継代数の異なるWI-38細胞を用い SA-β-gal活性を数値化。

Cellular Senescence Plate Assay Kit - SPiDER-βGal

Fluo

resc

ence

Inte

nsity

・簡便な操作で SA-β-gal活性を数値化・マイクロプレートによる多検体処理

測定操作

DNAダメージの変化を老化細胞で解析DNA Damage Detection Kit - γH2AX

・γH2AXを指標に DNAダメージを評価・蛍光波長の異なる 3色をラインナップ

Doxorubicin処理した細胞の評価

DNA Damage Detection Kit - γH2AXGreen Red Deep Red

検出方法

Doxorubicin添加により、DNAダメージを受けた細胞を解析

H2AXを指標に DNA3色

蛍光検出

ダメージを受けた DNA

継代数が少ない細胞に比べ、継代数の多い細胞では核小体が肥大化あるいは一つに凝集しているものを多く観察。

Nucleolus Bright Green Nucleolus Bright Red

核小体の変化を老化細胞で解析Nucleolus Bright Green/ Nucleolus Bright Red

・ RNA選択的な色素で核小体を可視化・固定化細胞への添加で多重染色できる

Pass

age

18Pa

ssag

e 3

WI-38細胞

青色:DAPI 矢印:核小体

Cellular Senescence Detection Kit - SPiDER-βGal

Cellular Senescence Plate Assay Kit - SPiDER-βGal

DNA Damage Detection Kit - γH2AX - Green

DNA Damage Detection Kit - γH2AX - Red

DNA Damage Detection Kit - γH2AX - Deep Red

Nucleolus Bright Red

Nucleolus Bright Green

10 assay

20 tests100 tests

1 set

1 set

1 set

60 nmol

60 nmol

¥ 38,000

¥ 11,000¥ 32,000

¥34,000

¥34,000

¥34,000

¥28,000

¥28,000

347-09181

345-09501341-09503

343-09421

340-09431

347-09441

341-09341

348-09351

SG03

SG05

G265

G266

G267

N511

N512

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Tel:03-3578-9651(代表)

:0120 - 052-099:ffwk.fujifilm.co.jp

FreeDialURL

FreeFax:0120 - 052-806

:096-286-1515(代表)

:www.dojindo.co.jpTelURL

:0120 - 489-548:[email protected]

FreeDialE-mail

製造元・国内問合せ先

発売元 取扱店

Ⓒ Dojindo Laboratories. All Right Reserved.

キット

これからはじめる

細胞内代謝測定

これからはじめる

細胞内代謝測定

ラインナップラインナップ

ヒストン修飾解析キットヒストン修飾解析キットグルコース、乳酸、NAD/NADH、NADP/NADPH測定キットグルコース、乳酸、NAD/NADH、NADP/NADPH測定キット

1)記載価格は本体価格のみで、消費税等は含まれておりません。2)記載価格はこのパンフレット編集時(2018年 11月)における希望納入価格です。予告なしに変更する場合がございますのでご注意ください。3)試験・研究用のみに使用するものです。医療用その他の目的には使用できません。

細胞内の代謝システムである、解糖系や TCA 回路、ペントース -リン酸経路の解析は、細胞状態を理解する上で重要であり、グルコースや乳酸、 NAD(P)+/NAD(P)H などのエネルギーおよび代謝産物を指標に評価されています。

小社では、はじめての方でも簡便にお使い頂けるよう、測定操作および前処理に必要なコンポーネントを最適化しキットとしてご用意しました。また代謝に関する理解を深めるため、代謝マップや測定意義、引用文献を小社 HPに掲載しています。

TCA 回路

解糖系

Glucose Assay Kit-WST製品コード:G264

Lactate Assay Kit-WST製品コード:L256

NADP/NADPH Assay Kit-WST製品コード:N510

NAD/NADH Assay Kit-WST製品コード:N509

NAD+

NADH

ピルビン

G6P

乳酸

Ribose-5P

NAD+ NADH

NADP+ NADPHグルコース

製品コード希望納入価格容 量品 名

50 tests200 tests

50 tests200 tests

100 tests

100 tests

342-09413346-09411

343-09281349-09283

347-09321

344-09331

¥18,000¥38,000

¥29,000¥68,000

¥54,000

¥54,000

G264

L256

N509

N510

Glucose Assay Kit-WST

Lactate Assay Kit-WST

NAD/NADH Assay Kit-WST

NADP/NADPH Assay Kit-WST

和光コード

検索代謝マップ 同仁

181120-1(S)